乳与乳制品微生物检验菌落总数的检测
牛奶中菌落总数的测定
牛奶中菌落总数的测定一般样品到达检验中心的话，由微生物检测中心先领取样品，因为其他科室不能保证无菌取样，会影响微生物检验的结果。
要求生鲜乳必须在采后四小时内进行检测。
取样：量取10 mL置盛有90 mL 磷酸盐缓冲液或生理盐水的无菌均质袋中，用拍击式均质器拍打1 min～2 min，制成1:10 的样品匀液。
配制浓度梯度：（1）用1 mL 无菌吸管或移液枪吸取1:10 样品匀液1 mL，沿管壁缓慢注于盛有9 mL 稀释液的无菌试管中（注意吸管或吸头尖端不要触及稀释液面），用漩涡震荡器混合均匀，制成10﹣²的样品匀液。
（2）按上述操作程序，制备10﹣³、10-4系列稀释样品匀液。
每递增稀释一次，换用1 次1 mL 无菌吸管或吸头。
倒平板：吸取1 mL 样品匀液于无菌平皿内，每个稀释度做两个平皿。
注意，要分别吸取1 mL 空白稀释液加入两个无菌平皿内作空白对照。
及时将 15 mL～20 mL 冷却至 46 ℃的平板计数琼脂培养基（可放置于 46 ℃±1 ℃恒温水浴箱中保温，温度过高可能会杀死细菌，一般以不烫手为宜）倾注平皿，并转动平皿使其混合均匀（不均的话，会使菌落连成片，无法计数）。
培养：待琼脂凝固后，将平板翻转，36 ℃±1 ℃培养48 h±2 h。
菌落计数:可用肉眼观察，必要时用放大镜或菌落计数器，记录稀释倍数和相应的菌落数量。
菌落计数以菌落形成单位（colony-forming units，CFU）表示。
若所有平板上为蔓延菌落而无法计数，则报告菌落蔓延。
若空白对照上有菌落生长，则此次检测结果无效。
1、固体和半固体样品：称取25 g 样品置盛有225 mL 磷酸盐缓冲液或生理盐水的无菌均质杯内，8000 r/min～10000 r/min 均质1 min～2 min，或放入盛有225mL 稀释液的无菌均质袋中，用拍击式均质器拍打1 min～2 min，制成1:10 的样品匀液。
乳中菌落总数的测定(精)
• 表1稀释度选择及菌落数报告方式
• 五、菌落计数的报告
• (1)平板菌落数的选择 • 选取菌落数在30～300之间的平板作为菌落总数测定标准。一 个稀释度使用两个平板，应采用两个平板平均数，其中一个平 板有较大片状菌落生长时，则不宜采用，而应以无片状菌落生
长的平板作为该稀释度的菌落数，若片状菌落不到平板的一半
，而其余一半中菌落分布又很均匀，即可计算半个平板后乘以 2代表全皿菌落数。平皿内如有链状菌落生长时(菌落之间无明 显界线)若仅有一条链，可视为一个菌落，如果有不同来源的 几条链，则应将每条链作为一个菌落计。
• (5)稀释液移入平皿后，应及时将凉至4612营养琼脂培养基(可放置于(46士 1)℃水浴保温)注入平皿约15mL，并转动平皿使混合均匀。同时将营养琼脂 培养基倾入加有lmL稀释液(不含样品)的灭菌平皿内作空白对照。 • (6)待琼脂凝固后，翻转平板，置(36士1)℃温箱内培养(48士2)h取出，计 算平皿内菌落数目，乘以稀释倍数，即得每克(或每毫升)样品所含菌落总 数。 • 四、菌落计数方法 • 作平板菌落计数时，可用肉眼观察，必要时用放大镜检查，以防遗漏。在 记下各平板的菌落数后，求出同稀释度的各平板平均菌落数。
• (2)稀释度的选择 • ①应选择平均菌落数在30～300之间的稀释度，乘以稀释倍数报告结果( 如表1例1)； • ②若有两个稀释度，其生长的菌落数均在30～300之间，则视两者之比如 何来决定。若其比值小于或等于2，应报告其平均数I若大于2．则报告其 中较小的数字(如表1例2及例3) • ③若所有稀释度的平均菌落数均大于300．则应按稀释度最高的平均菌落
生牛奶中的主要微生物检测方法及其控制
生牛奶中的主要微生物检测方法及其控制生牛奶是一种营养丰富的食品，但同时也是微生物生长的理想环境。
为了保证牛奶的安全性和质量，需要对其进行微生物检测和控制。
本文将介绍生牛奶中的主要微生物检测方法及其控制措施。
1. 菌落总数菌落总数是衡量生牛奶卫生状况的重要指标之一。
它反映了牛奶中的微生物总数，包括细菌、霉菌、酵母等。
菌落总数过高会导致牛奶变质，影响其口感和营养价值。
2. 大肠杆菌大肠杆菌是一种常见的致病菌，其存在表明牛奶可能被粪便污染。
大肠杆菌污染的牛奶会对人体健康造成严重威胁，引起肠胃炎、腹泻等疾病。
3. 乳酸菌乳酸菌是一种益生菌，它能够促进牛奶的发酵和保鲜，对人体有益。
如果乳酸菌数量过高，就会导致牛奶酸败。
1. 菌落总数检测方法菌落总数的检测方法主要采用平板计数法。
将生牛奶样品分别定量地接种在富营养培养基上，培养一定时间后，根据细菌、霉菌、酵母等生长形态的不同，进行计数。
根据不同国家和地区的标准，菌落总数的允许值有所不同。
2. 大肠杆菌检测方法大肠杆菌的检测方法主要采用MPN法和PCR法。
MPN法是通过将样品接种在大肠杆菌培养基中，根据菌落的数量进行估算。
PCR法则是利用多聚酶链反应技术，通过扩增大肠杆菌的DNA片段来检测其存在。
1. 规范生产环节生产环节是影响生牛奶微生物质量的重要因素。
需要在奶源管理、生产操作、设备清洁等方面严格按照规范操作，确保牛奶不受外界污染。
2. 严格控制储存条件牛奶的存储条件对微生物的生长有直接影响。
需要严格控制牛奶的温度、湿度等条件，防止微生物的滋生。
及时冷藏和避光是减少微生物污染的有效措施。
3. 采用适当的加工技术适当的加工技术能够有效地控制牛奶中微生物的数量。
过高温短时加热和超高温灭菌能够有效地杀灭绝大部分微生物。
也可以采用膜分离、超声波杀菌等新技术来控制微生物的数量。
4. 进行定期的微生物检测定期的微生物检测是保障生牛奶质量的重要手段。
通过检测菌落总数、大肠杆菌、乳酸菌等指标，能够及时了解牛奶中微生物的状况，从而及时采取控制措施，确保牛奶的质量和安全性。
生牛奶中的主要微生物检测方法及其控制
生牛奶中的主要微生物检测方法及其控制生牛奶是一种非常重要的食品，由于其营养丰富、易为人体消化吸收，因此广受人们喜爱。
但是，牛奶中可能含有多种微生物，包括细菌、真菌和病毒等，它们可能会对人体造成危害，因此生牛奶的微生物检测和控制显得相当重要。
本文将介绍生牛奶中的主要微生物检测方法以及其控制措施。
（一）细菌1、菌落计数方法：菌落计数是一种通过计算奶样中的微生物数量来判断其质量状况的方法。
这个方法能够检测出微生物的总数，包括有益菌和有害菌。
2、大肠菌群计数方法：大肠菌群计数是用来检测牛奶中大肠杆菌的数量的一种方法。
这种细菌是肠道中的微生物，如果过多存在于牛奶中，可能会对人体造成危害。
3、耐热菌计数方法：耐热菌是能够在高温条件下生存和繁殖的一种细菌，它们的存在表明牛奶可能在生产过程中没有得到很好的加热处理。
（二）真菌2、霉菌计数方法：霉菌可以导致牛奶变质和产生有毒物质。
检测霉菌数量的方法可以帮助鉴定牛奶是否存在霉菌。
（三）病毒1、脂质包裹病毒计数方法：这个方法主要用于检测牛奶中的乳病毒（BLV）和牛乳腺瘤病毒（BMTV）等脂质包裹病毒。
这些病毒在牛奶中的浓度非常低，需要通过高灵敏度的检测方法才能检测出来。
为了控制生牛奶中的微生物，可以采取以下措施：1、在初始阶段对牛奶进行检测：在牛奶生成过程中，对其进行检测并及时排除有害微生物，对于控制后续污染是十分必要的。
2、制定卫生措施：加强动物的身体卫生，改善其环境卫生和营养结构，以减少动物身上和生产环境中的病原体数量。
3、正确处理生产过程中的污染源：从奶罐到机器设备，需要严格地控制生产过程中的污染源，比如定期清洗、消毒，增加过滤层等。
4、保证加热处理：在制作过程中对牛奶进行加热处理，既可以减少胃肠道病原菌的数量，也有助于阻断乳类嗜酸性细菌的生长。
综上所述，生牛奶中的微生物检测和控制对于防止食品安全问题具有非常重要的意义。
通过对牛奶中不同微生物的检测和控制措施的选择，可以确保生产出营养均衡、卫生安全的优质牛奶，保障人民的身体健康。
牛奶微生物检测标准我国乳制品的标准
牛奶微生物检测标准我国乳制品的标准
在中国，牛奶微生物检测的标准主要参考国家标准《食品安全国家标准牛奶及乳制品微生物检验方法》（GB 4789.5-2013）以及国家标准《食品安全国家标准牛奶及乳制品微生物限量》（GB 2715-2016）。
《食品安全国家标准牛奶及乳制品微生物检验方法》（GB 4789.5-2013）规定了牛奶及乳制品微生物检验的方法和程序，包括菌落总数、大肠菌群、金黄色葡萄球菌、沙门氏菌、霉菌和酵母菌等指标的检测方法。
《食品安全国家标准牛奶及乳制品微生物限量》（GB 2715-2016）规定了牛奶及乳制品中各种微生物的限量要求，以确保产品的卫生安全。
根据该标准，牛奶及乳制品中的各种微生物的限量要求如下：
1. 菌落总数：不超过1×10^5个/ml（牛奶），不超过1×10^6个/g（乳制品）；
2. 大肠菌群：不得检出；
3. 金黄色葡萄球菌：不得检出；
4. 沙门氏菌：不得检出；
5. 霉菌和酵母菌：不超过1×10^3个/ml（牛奶），不超过1×10^4个/g（乳制品）。
需要注意的是，这些标准只是基本要求，实际生产过程中，企业可以根据自身情况制定更为严格的内部标准，以确保产品质量和安全。
同时，不同地区和不同产品可能还有其他特定的标准和要求，所以在具体情况下，还需要参考相关地方性和行业性标准。
乳与乳制品微生物检验方法
乳与乳制品微生物检验方法1.菌群总数测定方法：菌群总数测定方法是衡量乳制品中微生物质量的基础方法之一、目前常用的菌群总数测定方法有总计数平板法、液体培养法和荧光素酶法。
总计数平板法是将样品分别接种在琼脂平板上，通过平板上菌落的形成来计数。
液体培养法是将样品接种在适当的培养基中，通过测量培养液的浑浊度或菌液悬浮液中的细菌数量来计数。
荧光素酶法是通过加入荧光素酶底物，菌落会释放出荧光，通过测量荧光强度来计数。
这些方法可以快速、准确地测定样品中菌落总数，从而确定乳制品的微生物质量。
2.根据德国奶酪乳制品行业协会VDF指南的要求，共有500多种病原菌可以检测，包括沙门氏菌、大肠杆菌、金黄色葡萄球菌以及其他致病菌。
这些方法多是PCR技术、荧光定量PCR技术等。
以沙门氏菌检测为例，主要有传统培养法、分子生物学培养法、酶免的葡萄糖酸盐液体培养基、黄金标准法等多种方法。
其中，PCR技术可以通过扩增沙门氏菌的DNA序列，快速、准确地检测样品中的沙门氏菌。
3.酸奶产品中乳酸菌数量的测定：乳酸菌是酸奶中的一类重要菌群，其数量多少直接影响酸奶的质量。
常用的测定乳酸菌数量的方法有直接显微法、涂布法、测定菌落数量法等。
直接显微法是将样品显微镜下直接观察和计数乳酸菌的数量。
涂布法是将样品涂于适当的培养基上，通过菌落的形成来计数。
菌落数量法是将样品稀释后均匀涂布在琼脂平板上，通过菌落的形成来计数。
这些方法可以可靠地测定乳酸菌的数量，从而评估酸奶的质量。
4.冷藏和储存条件检验方法：乳制品的储存条件对其微生物质量有着至关重要的影响。
常用的储存条件检验方法包括温度检测、湿度检测、pH值检测等。
温度检测可以通过温度计或温度记录器来测量乳制品的储存温度，确保其符合相关标准。
湿度、pH值等的检测可以通过仪器设备进行测量和监控。
这些方法能够及时发现和纠正乳制品储存条件的问题，保证乳制品的微生物质量稳定。
总结起来，乳与乳制品微生物检验方法包括菌群总数测定方法、病原菌检测方法、乳酸菌数量测定方法和储存条件检验方法等。
关于乳与乳制品中细菌总数的检测技术研究
关于乳与乳制品中细菌总数的检测技术研究作者：张娜，任丹，李玉静来源：《现代食品》 2018年第13期摘要：本文分析了如何对乳与乳制品中的细菌进行检测，并分析检测技术的原理、方法以及优缺点。
关键词：乳；乳制品；细菌总数；检测技术中图分类号：TS252.1乳与乳制品含有丰富的营养物质，能为人体的成长发育提供相应的营养物质，但是其在生产、制备、加工、运输等过程中可能会被细菌等微生物污染，从而导致其带有一定的危害性，对人体造成伤害，所以对乳与乳制品中的细菌进行检测是很有必要的。
1 培养法1.1 标准平板计数法一般来说，细菌总数检测最广泛的方法是标准平板计数法或需氧菌计数法，该方法不仅操作简单，而且检测效果准确。
在操作的过程中，首先需要制备相应的培养基，并在培养皿中加入相应的乳与乳制品的样品，并加入适量的培养液，等待样品与培养液凝固之后再涂抹一定量的样品，保证样品量充足。
整个操作过程需要在固定的温度下进行，并且对其进行45 h左右的培养，然后即可进行菌落的计数操作。
Robert 在19 世纪末期提出了琼脂平板培养法，主要是用来检测微生物的数量，直到现在仍然作为细菌数量检测的标准方法，而且有很多快速的检测技术也是基于这一技术进行创新的。
标准平板计数法是我国检测细菌总数的国家标准，该法的缺点是操作时间较长，需要消耗大量的人力、材料，而且检测结果中的细菌并不能保证所有细菌都是活性细菌，其检测结果的准确性还有待提高[1]。
1.2 培养法的改进为了保证细菌总数检测的准确性，并提高其检测的效率，需要对原有的培养方法进行改进，其改进的方法和内容包括：①疏水网格滤膜法。
疏水网格滤膜法是滤膜法中最常见的方法之一，该方法在应用的时候需要使用到滤膜，一张滤膜会有1 600 个网格，而疏水格是对菌落进行约束，避免菌落发生扩散。
在实际操作的过程中需要将疏水物质刻印到滤膜上，然后将滤膜上的细菌放置到培养基上培养，最后即可进行人工技术或者自动菌落技术操作。
菌落总数
6ml(加24m1L灭菌水) 120 6g(加24mL灭菌水) 30g 30g 30g 150 150 150 150 150
鲜蛋、糟蛋、皮蛋 30g
注：煌绿应在临用时加入肉汤中,煌绿浓度系以检样和肉汤的总量计算。
13
(4)水产食品检验：
鱼类：采取检样的部位为背肌。先用流水将鱼体体表冲净,去鳞,再用 75%酒精棉球擦净鱼背,待干后用灭菌刀在鱼背部沿脊椎切开5cm,再切 开两端使两块背肌分别向两侧翻开,然后用无菌剪子剪取肉25g,放入灭 菌乳钵内，用灭菌剪子剪碎，加灭菌海砂或玻璃砂研磨(有条件情况下 可用均质器),检样磨碎后加入225mL灭菌生理盐水,混匀成稀释液。 注:剪取肉样时,勿触破及沾上鱼皮。鱼糜制品和熟制品应放乳钵内 进一步捣碎后，再加生理盐水混匀成稀释液。 虾类：采取检样的部位为腹节内的肌肉。将虾体在流水下冲净,摘去头 胸节，用灭菌剪子剪除腹节与头胸节连接处的肌肉,然后挤出腹节内的 肌肉，称取25g放入灭菌乳钵内，以后操作同鱼类检样处理。 蟹类：采取检样的部位为胸部肌肉.将蟹体在流水下冲净,剥去壳盖和 腹脐,再去除鳃条,复臵流水下冲净。用75%酒精棉球擦拭前后外壁,臵 灭菌搪瓷盘上待干.然后用灭菌剪子剪开成左右两片,再用双手将一片 蟹体的胸部肌肉挤出(用手指从足根一端向剪开的一端挤压),称取25g, 臵灭菌乳钵内。以下操作同鱼类检样处理。 贝壳类：采样部位为贝壳内容物。先用流水刷洗贝壳,刷净后放在铺有 灭菌毛巾的清洁的搪瓷盘或工作台上,采样者将双手洗净并用75%酒精 棉球涂擦消毒后，用灭菌小钝刀从贝壳的张口处隙缝中徐徐切入,撬开 壳盖,再用灭菌镊子取出整个内容物,称取25g臵灭菌乳钵内,以下操作 同鱼类检样处理。
每皿内加入适量营养琼脂
菌落计数
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乳与乳制品微生物检验菌落总数的检测
YLNB 3.1 方法一：
1. 引用依据：GB/T4789.2-2003
2. 术语和定义
菌落总数是指食品检样经处理后，在一定条件下培养后（如营养成分、培养温度和时间、pH、需氧性质等），所得1ml（g）检样中所生长的细菌菌落的总数。
本方法规定的培养条件下所得结果，只包括一群在营养琼脂上生长发育的嗜中温性需氧的菌落总数。
所以厌氧或微需氧菌、有特殊营养要求的以及非嗜中温的细菌，由于现有的生长条件不能满足其生理要求，故难以生长。
因此菌落总数并不能区分其中细菌的种类，所以有时被称为杂菌数，需氧菌数。
菌落总数主要作为判定食品被污染程度的标志，也可以应用这一方法观察细菌在食品中的繁殖动态，以便对被检样品进行卫生学评价时提供依据。
3. 仪器及器材
3.1 恒温培养箱：36±1℃；
3.2 冰箱：0～4℃；
3.3 恒温水浴锅：46±1℃；
3.4 天平；
3.5 电炉；
3.6 灭菌吸管；
3.7 灭菌广口瓶或三角瓶：容量为500ml；3.8 玻璃珠：直径5mm；
3.9 灭菌平皿：直径约90mm；
3.10 灭菌试管；
3.11 放大镜；
3.12 菌落计数器；
3.13 酒精灯；
3.14 均质器或乳钵；
3.15 试管架；
3.16 灭菌刀或剪子；
3.17 灭菌镊子。
4. 培养基和试剂
4.1 营养琼脂培养基；
4.2 生理盐水；
4.3 75%乙醇溶液。
5. 检验程序
菌落总数的检验程序如下：检样
做成几个适当倍数的稀释液
选择2-3个适宜稀释度各以1ml分别加入灭菌平皿中
每个皿内加入适量营养琼脂
菌落计数
36±1℃ 48±2h
6. 方法
6.1 检样稀释及培养
6.1.1 以无菌操作将检样25g（或ml）剪碎放于装有225ml 灭菌生理盐水或其他稀释液的灭菌玻璃瓶内，（瓶内预置适当数量的玻璃珠）或灭菌乳钵内，经充分振摇或研磨做成1：10的均匀稀释液。
固体检样在加入稀释液后，最好置均质器中以8000～10000r/min的速度处理1min，做成1：10的均匀稀释液。
6.1.2 用1ml灭菌吸管吸取1：10稀释液1ml，沿管壁徐徐注入含有9ml灭菌生理盐水或其他稀释液的试管内（注意吸管尖端不要触及管内稀释液）振摇试管，混合均匀，做成1：100的稀释液。
6.1.3 另取1ml灭菌吸管，按上述操作顺序，做10倍递增稀释液，如此每递增稀释一次，即换用一支1ml灭菌吸管。
6.1.4 根据食品卫生标准要求或对标本污染情况的估计，选择2～3个适宜稀释度，分别在做10倍递增稀释的同时，即以吸取该稀释度的吸管移1ml稀释液于灭菌平皿内。
6.1.5 稀释液移入平皿后，应及时将凉至46℃的营养琼脂培养基（可放置于46±1℃水浴中保温）注入平皿约15ml，并转动平皿使混合均匀。
同时将营养琼脂培养基倾入加有1ml 稀释液的灭菌平皿内做空白对照。
6.1.6 待琼脂凝固后，翻转平板，置36±1℃培养箱内培养48±2h。
注：如果怀疑样品中含有在琼脂培养基表面蔓延生长的菌落之，琼脂凝固后，可在表面覆盖一薄层琼脂培养基（约4mL），并在报告上记录该操作。
6.2 菌落计数方法
做平板菌落计数时，可用肉眼观察，必要时用放大镜，以防遗漏。
在记下各平板的菌落数后，求出同稀释度的各平板平均菌落总数。
6.3 菌落计数的报告
6.3.1 平板菌落数的选择
选取菌落数在30～300之间的平板作为菌落总数的测定标准，一个稀释度选用两个平板，应采用两个平板平均数，其中一个平板有较大片状菌落生长时，则不宜采用，而应以无片状菌落生长的平板作为该稀释度的菌落数，若片状菌落
不到平板的一半，而另一半菌落分布又很均匀，可计算半个平板后乘2代表全皿菌落数。
平板内有链状菌落生长时（菌落之间无明显界限），若仅有一条链，可视为一个菌落；如果有不同来源的几条链，则应将每条链作为一个菌落计。
6.3.2 稀释度的选择
6.3.2.1 应选择平均菌落数在30～300之间的稀释度，乘以稀释倍数报告之（见表中例1）。
6.3.2.2 若有两个稀释度，其生长的菌落数均在30～300之间，则视两者的比值来确定。
若其比值小于或等于2，应报告其平均数；若大于2则报告其中较小的数字，（见表中例2及3）。
6.3.2.3 若所有稀释度的平均菌落数均大于300，则应按稀释度最高的平均菌落数乘以稀释倍数报告（见表中例4）。
6.3.2.4若所有稀释度的平均菌落数均小于30，则应按稀释度最低的平均菌落数乘以稀释倍数报告（见表中例5）。
6.3.2.5 若所有稀释度均无菌落生长，则以小于1乘以最低稀释倍数报告（见表中例6）。
6.3.2.6 若所有稀释度的平均菌落数均不在30～300之间，其中一部分大于300或小于30时，则以最接近30或300的平均菌落数乘以稀释倍数报告（见表中例7）。
6.3.3 菌落数的报告
菌落数在100以内时，按其实有数报告，大于100时，
采用二位有效数字，在二位有效数字后面得数值，以四舍五入方法计算。
为了缩短数字后面的零数，也可用10的指数来表示（见表1）。
表 1 稀释度选择及菌落数报告方式
例次
稀释液及菌落数两稀
释
液之
比
菌落总
数
cfu/g
或ml
报告方式
cfu/g或ml 10-1 10-2 10-3
1 多不可
计164 20 —16400
16000或1.6
×104
2 多不可
计295 46 1.6 37750
38000或3.8
×104
3 多不可
计271 60 2.2 27100
27000或2.7
×104
4 多不可
计
多不可
计313 —313000
310000或3.1
×105
5 27 11 5 —270 270或2.7×
102
6 0 0 0 —＜1×10 ＜10
7 多不可
计305 12 —30500
31000或3.1
×104
7. 注意事项
7.1 培养基温度应在46±1℃，温度过高会影响细菌生长，过低琼脂易于凝固而不能与菌液充分混合，琼脂应放在水浴锅内，温度为46±1℃。
7.2 尽量使菌细胞分散开，使每个菌细胞生成一个菌落，否则将会导致重大的技术误差。
7.3 检样稀释后，应尽快接种，倾到培养基。
一般从检样稀释开始到倾到培养基，应在15min内操作完毕。
注意抑菌现象。
由于防腐剂未被中和，往往使平板计数结果受影响，如低稀释时菌落少而高稀释度使菌落反而增大。
7.4 对照试验。
为了避免微小颗粒与细菌菌落发生混淆，可作一个检样稀释液与琼脂混合的平板，不经培养放到4℃环境中，以便计数菌落时用作对照。
7.5 培养湿度。
培养箱应保持一定的湿度，琼脂平板培养48h 后，培养基失重不应超过15%。
8. 菌落计数及报告注意事项
8.1 若所有平板上为蔓延菌落而无法计数，则报告菌落蔓延。
8.2 若空白对照上有菌落生长，则此次检测结果无效。
8.3 如果稀释度大的平板上菌落数反比稀释度小的平板上菌落数高，有两种可能性：一是检验工作中发生差错；二是
受防腐剂影响。
这二种情况均不可用作检样计数报告的依据。
8.4 如果平板上出现链状菌落，菌落之间没有明显的界限，这是在琼脂与检样混合时，一个细胞块被分散所造成。
一条链作为一个菌落计，如有来源不同的几条链，每条链应作为一个菌落计，不要把链上生长的各个菌落分开来数。
此外，如皿内琼脂凝固后未及时进行培养而遭受昆虫侵入，在昆虫爬过的地方也会出现链状菌落，也不应分开来数。
8.5 如果所有平板上都菌落密布，不要用多不可计报告，而应在稀释最大的平板上，任意数其中两个平方厘米中的菌落数，除以2求出lcm2内平均菌落数，乘以皿底面积63.6cm2，再乘以其稀释倍数，以此结果作报告，例如：10-1～10-3稀释度的所有平板上均菌落密布，而在10-3稀释度的平板上任意数两个平方厘米内的菌落数是60个，皿底直径为9cm，则该检样每克（或ml）中“估计”菌落数为：
60÷2×63.6×1000＝1.9×106。
63.6是按皿底直径为9cm 时计算而得的面积，如所用平皿底直径不是9cm，应另求面积。
、
8.6 称重取样以cfu/g为单位报告，按体积取样的以cfu/ml 为单位报告，表面取样则以cfu/cm2报告。
二、方法2：3M 纸片法
请按照3M Petrifilm PCA菌落总数测试片的说明书进行操作。