二十二碳六烯酸(DHA)研究进展
二十二碳六烯酸乙酯对脑的营养与保护作用的开题报告

优秀毕业论文开题报告二十二碳六烯酸乙酯对脑的营养与保护作用的开题报告一、研究背景随着人们对健康意识的增强和生活水平的提高,脑保健已成为人们关注的重要问题。
二十二碳六烯酸(DHA)是人体必需的多不饱和脂肪酸之一,具有重要的营养和保护作用。
DHA在人体中主要存在于脑和视网膜中,是脑细胞膜的重要组成部分。
DHA的不足会导致脑发育不良、认知能力下降、抑郁等问题。
而DHA的补充则有助于改善脑功能、预防老年痴呆症等疾病。
因此,研究DHA对脑的营养和保护作用具有重要意义。
二、研究目的本研究旨在探讨二十二碳六烯酸乙酯(DHA-E)对脑的营养和保护作用,包括以下几个方面:1.探究DHA-E对脑细胞膜的影响,包括膜结构、脂质代谢等方面。
2.研究DHA-E对脑认知功能的影响,包括记忆、学习、注意力等方面。
3.探讨DHA-E在脑损伤和疾病中的保护作用,包括防止脑缺氧、减轻脑损伤、预防老年痴呆症等方面。
三、研究方法本研究将采用实验室动物模型和临床试验相结合的方法,具体包括以下几个方面:1.动物实验:选取小鼠为实验对象,将其随机分为对照组和实验组。
对实验组小鼠进行DHA-E补充,观察其脑细胞膜结构、脂质代谢等方面的变化,以及对认知功能的影响。
2.临床试验:选取老年人和脑损伤患者为实验对象,将其随机分为对照组和实验组。
对实验组进行DHA-E补充,观察其对脑功能的保护作用,包括防止脑缺氧、减轻脑损伤、预防老年痴呆症等方面。
3.数据分析:采用统计学方法对实验结果进行分析和比较,揭示DHA-E对脑的营养和保护作用的机制和效果。
四、研究意义本研究的结果有望为DHA-E在脑保健领域的应用提供科学依据,为改善人们的脑健康和预防脑疾病提供新的思路和方法。
同时,本研究也有助于深入探究脑细胞膜的结构和功能,揭示多不饱和脂肪酸在脑营养和保护中的作用机制,对脑科学领域的研究具有重要意义。
二十二碳六烯酸对大鼠心室肌及冠状动脉平滑肌的细胞电生理研究的开题报告

二十二碳六烯酸对大鼠心室肌及冠状动脉平滑肌的细胞电
生理研究的开题报告
一、研究背景和意义
心血管疾病是当前全球死亡率最高的疾病之一。
二十二碳六烯酸(docosahexaenoic acid, DHA)是一种多不饱和脂肪酸,具有保护心脏、降低血脂和
预防心血管疾病等多种生理功能。
近年来,DHA对心血管电生理的影响受到越来越多
的关注。
研究表明,DHA能够影响心肌细胞及冠脉平滑肌细胞的膜通透性和电位,进
而影响心血管系统的电生理功能。
二、研究目的
本研究旨在探究DHA对大鼠心室肌和冠状动脉平滑肌的细胞电生理特性的影响,以期为深入了解其作用机制及在心血管疾病预防和治疗中的应用提供理论依据。
三、研究内容和方法
1. 大鼠离体心脏灌注实验:
通过离体心脏灌注实验,记录大鼠心室肌细胞的动作电位,探究DHA对其电生
理活动的影响。
2. 大鼠冠状动脉平滑肌钙离子通道活性实验:
通过测量大鼠冠状动脉平滑肌的电位,记录其钙离子通道活性,研究DHA对其
的调控作用。
3. 钙离子成像实验:
通过活细胞荧光钙离子成像技术,观察DHA对心室肌和冠状动脉平滑肌细胞内
钙离子动态的影响。
四、研究预期结果
本研究预期结果为:DHA能显著影响大鼠心室肌和冠状动脉平滑肌的细胞膜通透性和电位,调控钙离子通道的活性,进而影响心血管系统的电生理功能。
五、研究意义
本研究将深入了解DHA对心血管电生理的影响机制,为进一步开发DHA在心血管疾病预防和治疗中的应用提供理论依据,有望为心血管疾病的防治提供新的治疗策略。
二十二碳六烯酸对脑梗死脑保护作用的研究进展

二十二碳六烯酸对脑梗死脑保护作用的研究进展李 萍 张 兵中图分类号:R743.32 文献标识码:A 文章编号:1006-351X(2019)03-0197-03二十二碳六烯酸(docosahexaenoic acid,DHA ;22:6n-3)是长链ω-3多不饱和脂肪酸的一种,广泛存在于海藻和深海鱼类中[1]。
Takata 等[2]通过有效的食物频度调查问卷,对134296例中国男性和女性(1997年1月-2009年1月)的鱼类摄入量与总死亡率和特定原因死亡率之间的风险进行了两项前瞻性队列研究,发现鱼的摄入量与脑梗死(cerebral infarction,CI)这一特定原因死亡率呈负相关,最高五分位数摄入量与最低五分位数的相对危险比为0.63[95%CI :0.41,0.94]。
进一步分析表明,CI 的死亡率与食用含有丰富DHA 的深海鱼和长链ω-3多不饱和脂肪酸呈负相关。
因此,其对CI 的防治具有一定的应用前景,现对其产生的脑保护作用作如下综述。
一、DHA 概述 DHA 是长链ω-3多不饱和脂肪酸的一种,广泛存在于海藻和深海鱼类中[1],在人脑内神经细胞膜磷脂中浓度较高,然而脑内从头合成的DHA 含量很低,早期通过妊娠期胎盘转移和婴儿期母乳喂养获得稳定水平浓度的DHA 满足神经发育的需求[3],被认为是维持脑发育和认知、情感、行为发育所必要的,可通过调节脑内神经元、神经胶质和脑血管内皮细胞的结构和功能[4],包括膜流动性、信号转导、神经炎症,神经细胞的分化和生长等,影响细胞的特性和生理过程发挥神经保护作用[1],因此后天可通过鱼油和藻类油来补充DHA,达到和保持理想的脑DHA 浓度,维持相关的神经功能。
二、DHA 的神经保护作用DHA 的神经保护作用在多种神经损伤的模型中被证实,如脑缺血再灌注损伤[5]、神经退行性疾病[6]。
研究证实,大脑中动脉栓塞(middle cerebral artery occlusion,MCAO)之前,饮食中补充鱼油的大鼠具有明显减小的CI 面积,并且表明用慢性鱼油处理产生的神经保护作用可通过诱导抗氧化酶的活性来介导,增强了抗氧化防御能力[7]。
鱼油中二十碳五烯酸和二十二碳六稀酸提取分离研究现状和进展

鱼油中二十碳五烯酸和二十二碳六稀酸提取分离研究现状和进展鱼油中二十碳五烯酸(EPA)和二十二碳六烯酸(DHA)是两种重要的多不饱和脂肪酸,具有广泛的生理活性,在保护心血管系统健康、改善神经系统功能等方面发挥重要作用。
因此,提取和分离 EPA 和 DHA 的方法受到广泛关注。
近年来,研究人员采用多种方法对 EPA 和 DHA 进行提取和分离。
其中包括生物酶法、化学萃取法、冷冻干燥法、冷冻溶解法、超声法、膜分离法和气相色谱法等。
生物酶法是一种常用的 EPA 和 DHA 提取方法,该方法利用酶将 EPA 和 DHA 从鱼油中分离出来。
优点是操作简单、成本低廉、提取率高,缺点是受到温度、pH 值、酶活性和待处理油脂种类的影响。
化学萃取法是另一种常用的 EPA 和 DHA 提取方法,该方法利用有机溶剂将 EPA 和 DHA 从鱼油中分离出来。
优点是操作简单、成本低廉,缺点是提取率较低,且有机溶剂的残留会对产品质量产生影响。
冷冻干燥法和冷冻溶解法是另外两种常用的 EPA 和 DDHA 提取方法。
冷冻干燥法利用冰箱冷冻干燥的方式将 EPA 和 DHA从鱼油中分离出来。
优点是提取率高,缺点是操作复杂,成本较高。
冷冻溶解法利用低温溶解的方式将 EPA 和 DHA 从鱼油中分离出来。
优点是操作简单,缺点是提取率较低。
超声法是一种新兴的 EPA 和 DHA 提取方法,该方法利用超声波将 EPA 和 DHA 从鱼油中分离出来。
优点是操作简单、成本低廉、提取率高,缺点是受到温度、pH 值、超声强度和待处理油脂种类的影响。
膜分离法是另一种常用的 EPA 和 DHA 提取方法,该方法利用膜过滤的方式将 EPA 和 DHA 从鱼油中分离出来。
优点是操作简单、成本低廉、提取率高,缺点是受到温度、pH 值和待处理油脂种类的影响。
气相色谱法是最近几年发展较快的 EPA 和 DHA 提取方法,该方法利用气相色谱仪将 EPA 和 DHA 从鱼油中分离出来。
人体二十二碳六烯酸检测方法的研究进展

㊃综述㊃D O I:10.3969/j.i s s n.1672-9455.2024.08.031人体二十二碳六烯酸检测方法的研究进展*陆佳露1,周春艳2综述,余晓丹1ә审校上海交通大学医学院附属上海儿童医学中心:1.发育行为儿科;2.转化所,上海200127摘要:二十二碳六烯酸(D H A)作为人体必需的长链多不饱和脂肪酸之一,对儿童尤其是婴幼儿大脑发育㊁成人脑功能维持及心血管疾病预防等均有重要作用㊂D H A的人体来源主要依靠膳食补充,其缺乏人群较为普遍㊂因此,监测人体内D H A水平是预防因D HA不足或缺乏引起疾病的关键㊂目前人体D H A水平检测方法较多,但标准化的检测方法尚少见文献报道㊂该文通过综述近几年已发表的人体D H A水平评估或检测方法,主要包括膳食调查法㊁色谱法㊁核磁共振技术和近红外光谱技术,并对各种方法的优势和局限性进行分析总结,以期为人体D H A水平检测提供新思路及科学指导,并助力健康人群D H A水平参考区间的建立㊂关键词:二十二碳六烯酸;长链多不饱和脂肪酸;膳食调查法;色谱法;核磁共振技术;近红外光谱技术中图法分类号:R591.3文献标志码:A文章编号:1672-9455(2024)08-1171-05A d v a n c e s i n t h e d e t e c t i o n m e t h o d s o f d o c o s a h e x a e n o i c a c i d i n h u m a n s*L U J i a l u1,Z H O U C h u n y a n2,Y U X i a o d a n1ә1.D e p a r t m e n t o f D e v e l o p m e n t a l B e h a v i o r a l P e d i a t r i c s;2.D e p a r t m e n t o f T r a n s f o r m a t i o n,S h a n g h a iC h i l d r e n's M e d i c a l C e n t e r,S h a n g h a i J i a o T o n g U n i v e r s i t y S c h o o l o f M e d i c i n e,S h a n g h a i200127,C h i n aA b s t r a c t: A s o n e o f t h e e s s e n t i a l l o n g-c h a i n p o l y u n s a t u r a t e d f a t t y a c i d s,d o c o s a h e x a e n o i c a c i d(D H A) p l a y s a n i m p o r t a n t r o l e i n t h e b r a i n d e v e l o p m e n t o f c h i l d r e n,e s p e c i a l l y i n f a n t s a n d y o u n g c h i l d r e n,t h e m a i n t e-n a n c e o f b r a i n f u n c t i o n i n a d u l t s a n d t h e p r e v e n t i o n o f c a r d i o v a s c u l a r d i s e a s e s.T h e h u m a n s o u r c e o f D H A m a i n l y d e p e n d s o n d i e t a r y s u p p l e m e n t a t i o n,a n d i t s d e f i c i e n c y i s c o mm o n.T h e r e f o r e,m o n i t o r i n g D HA l e v e l s i n h u m a n s i s k e y t o p r e v e n t i n g d i s e a s e s c a u s e d b y i n s u f f i c i e n t o r d e f i c i e n t D H A.A t p r e s e n t,t h e r e a r e m a n y m e t h o d s t o d e t e c t h u m a n D H A l e v e l s,b u t s t a n d a r d i z e d m e t h o d s a r e r a r e l y r e p o r t e d i n t h e l i t e r a t u r e.T h i s a r t i-c l e r e v i e w s t h e m e t h od s f o r a s se s s i n g o r d e t e c t i n g D H A l e v e l s i n h u m a n b o d y p u b l i s h e d i n r e c e n t y e a r s,i n c l u-d i n g d ie t a r y s u r v e y,c h r o m a t o g r a p h y,n u c l e a r m a g n e t i c r e s o n a n c e t e c h n o l o g y a n d n e a r-i nf r a r e d s p e c t r o s c o p y, a n a l y z e s a n d s u mm a r i z e s t h e a d v a n t ag e s a n d l i m i t a t i o n s o f e a ch m e t h o d,i n o r d e r t o p r o v i d e n e w i d e a s a n d s c i-e n t i f i c g u i d a n c e f o r t h e d e t e c t i o n o f D H A l e v e l s i n h u m a n b o d y.T o h e l p h e a l t h y p e o p l e D H A l e v e l r e f e r e n c e i n t e r v a l e s t a b l i s h m e n t.K e y w o r d s:d o c o s a h e x a e n o i c a c i d;l o n g-c h a i n p o l y u n s a t u r a t e d f a t t y a c i d; d i e t a r y s u r v e y m e t h o d;c h r o m a t o g r a p h y;n u c l e a r m a g n e t i c r e s o n a n c e t e c h n o l o g y;n e a r i n f r a r ed s pe c t r o s c o p y二十二碳六烯酸即D H A(C22:6n-3),是一种n-3多不饱和脂肪酸(P U F A s)㊂n-3P U F A s为一种碳原子数为18~22个并含有2个及以上双键的P U F A s,因第1个双键出现在碳链甲基端的第3位,所以称为n-3P U F A s,也叫ω-3P U F A s㊂D H A为人体内占比最高的n-3P U F A s,不仅与婴儿大脑生长和功能发育相关,在维持成人脑功能方面也有重要作用㊂因此, D H A素有 脑黄金 之称㊂目前已报道与D H A缺乏相关的疾病包括儿童注意缺陷多动障碍㊁抑郁症㊁精神分裂症㊁孤独症等[1-2]㊂此外,D H A还具有预防心血管疾病㊁抗炎㊁抗癌及免疫调节等功能[3-4]㊂由此可见,保证人体充足的D H A对于维持其健康至关重要,尤其是在生命的早期阶段㊂人体D H A主要来源于膳食,如摄入的鱼油㊁海藻等[5]㊂另外,人体也可以通过α-亚麻酸(A L A,C18:3n-3)合成D H A㊂A L A也属于n-3P U F A s,其作为人体必需的脂肪酸之一同样仅能从食物中获得,但其大部分被氧化用以提供能量,仅有极少部分转化成D H A,可见人体内合成的D H A并不能满足日常生长㊁发育所需㊂因此,保证膳食中充分的D H A摄入是预防或改善因D H A不足或缺乏导致相关疾病的最有效方法㊂事实上,人体不同部位D HA水平不同,用于人体D H A水平检测的方法也㊃1711㊃检验医学与临床2024年4月第21卷第8期 L a b M e d C l i n,A p r i l2024,V o l.21,N o.8*基金项目:国家重点研发计划项目(2022Y F C2705203)㊂ә通信作者,E-m a i l:x d y u1108@163.c o m㊂网络首发h t t p://k n s.c n k i.n e t/k c m s/d e t a i l/50.1167.r.20240318.1006.002.h t m l(2024-03-18)多种多样㊂如何选取最佳的生物标本及合适的检测方法对监测人体D H A水平至关重要㊂本文对近几年发表的人体内D H A检测方法的文章进行综述,为准确评估人体D HA水平提供依据㊂1人体D H A分布D H A广泛分布于人体所有器官,其中神经组织大脑和视网膜部位的D H A水平最高[6]㊂有研究表明,D H A在大脑脂肪酸中的水平为12%~15%[7]㊂D H A还可酯化成甘油三酯储藏在脂肪组织中,但水平极低㊂相对于神经组织,D H A在血液中的水平同样较低㊂血液中的D H A主要分布在血浆中,以及单核细胞㊁红细胞和血小板等细胞上,其中血浆中的D H A主要酯化成磷脂酰胆碱㊁磷脂酰乙醇胺㊁胆固醇和甘油三酯等,并且与蛋白结合形成脂蛋白㊂红细胞主要为磷脂形式的D H A㊂除神经组织㊁血液和脂肪组织外,D H A还广泛分布在精子㊁肝脏㊁脾脏和心脏等部位,因取样困难,一般不作为常规生物标本用于人体D H A水平检测㊂中枢神经系统部位的D H A水平最受关注,但因取样困难,极少检测该部位的D H A水平㊂脂肪组织中D H A周转率较低且不受急性疾病的影响,被视为研究D H A摄入与人体D H A水平变化的最佳选择㊂相对于脂肪组织,D H A在血浆或红细胞膜中的周转率较快,血浆中为几天或几十天,红细胞膜中为几个月[5]㊂因此,对短期D H A摄入后人体D H A水平变化的研究,血液标本则应用更广㊂同时,血液标本还具有取样容易,标本预处理简单等优势㊂另外,血浆和红细胞中的D H A还是大脑㊁视网膜㊁肝脏和其他器官D H A的主要来源㊂因此,血浆和红细胞磷脂D H A 成为研究和分析人体D HA水平的常规生物材料[8]㊂2 D H A检测方法最初,研究者们采用膳食调查法,如食物频率问卷法(F F Q)㊁24h膳食回顾法(24H R s)等对个体膳食中摄入的脂肪酸水平进行分析以了解人体血液D H A 水平,但该方法存在回忆偏倚等不足,且无法准确反映人体D H A水平㊂目前主要采用色谱法,如薄层色谱法(T L C)㊁气相色谱法(G C)㊁液相色谱法(L C)等对取自人体的生物材料进行脂肪酸水平检测㊂色谱法涉及固定相和流动相,当流动相流过加有标本的固定相时,基于待分析物在2个相之间的水平比例不同最终以不同速度移动而互相分离开来㊂此外,核磁共振技术(NM R)㊁近红外光谱技术(N I R)等也被用于脂肪酸的检测中㊂本研究对以上几种方法的原理㊁优势和局限性进行汇总,见表1㊂表14种D HA检测方法的原理、优势和局限性方法原理优势局限性膳食调查法F F Q通过问卷调查人群在过去限定的某段时间内某些食物的摄入频率或食用量实现对能量或各种营养素摄入量的计算简单易行㊁可操作性强,费用低存在回忆偏倚24H R s通过询问调查对象过去24h实际的膳食摄入情况,计算和评价食物和营养素摄入量调查对象负担小,方法成熟,易于实施,适用范围广存在回忆偏倚,需要培训成熟的调查员㊁营养素计算误差色谱法T L C基于待分析物在流动相和固定相(常为硅胶)中存在极性差异,实现对待检测标本分离㊁鉴定和定量的一种层析分离技术操作简便㊁标本前处理简单㊁价格便宜㊁通量高㊁可分离复杂混合物薄层色谱板易被氧化,精密度和重现性差,分离性能有限G C利用物质在相对运动的2个相(流动相为气体)中具有不同的分配系数实现对物质的分离和检测灵敏度高㊁分离性能高㊁分析速度快㊁适用范围广脂肪酸标本前处理复杂L C利用不同组分性质的差别,在相对运动㊁不相混溶的2个相(流动相为液体)中多次交换,放大差异最终分离高效㊁快速㊁灵敏,可分离不可挥发或受热后不稳定物质需前处理,耗时较久,较T L C成本高,较G C溶剂消耗量大㊁选择性较低NM R应用于结构解析或物质定量的分析技术,利用原子核的磁矩,在恒定磁场和高频电磁波共同作用下满足一定条件时,发生共振吸收某一定频率的射频辐射的物理过程重复性高㊁轻松辨别分子结构㊁仪器稳定性好㊁提供分子动力学信息㊁直接获取定量数据㊁不会破坏标本设备昂贵,结果解读要求高,灵敏度相对低,信号重叠㊁分离能力差N I R利用近红外谱区(650~1100n m)包含的光谱信息对有机物质水平及结构进行分析的技术,信息源主要是物质内部原子间振动的倍频与组合频快速㊁无损㊁高效㊁低成本㊁采样重现性好㊁测量方便㊁操作性强设备昂贵,结果解读要求高,D H A水平低,误差大2.1膳食调查法膳食调查法是调查人群在一定时间内所摄入的能量和各种营养素的数量和质量,以判㊃2711㊃检验医学与临床2024年4月第21卷第8期 L a b M e d C l i n,A p r i l2024,V o l.21,N o.8断个体正常营养需要是否得到满足的方法㊂目前应用于脂肪酸摄入量评价的有F F Q㊁24H R s等[9]㊂2.1.1 F F Q F F Q是通过问卷调查人群在过去限定的某段时间内某些食物的摄入频率或食用量实现对能量或各种营养素摄入量进行计算,分为定性和定量两类㊂定性F F Q是指某种食物特定时期内所食用的次数,不包括食物量和份额大小;定量F F Q是指某种食物在特定的时期内食用的平均估量,包括食物名称㊁摄入频率和摄入量信息㊂F F Q已广泛用于调查饮食和疾病之间联系的流行病学研究中㊂赵芮等[10]利用F F Q分析了上海市居民n-3P U F A s膳食摄入情况,提出上海市18岁以下㊁18~25岁㊁>25~60岁㊁>60岁4个年龄段人群预防心血管疾病的n-3P U-F A s推荐摄入量分别为1032~2569㊁759~3170㊁419~3569㊁209~3729m g/d㊂S A L A-V I L A等[11]通过F F Q对D H A摄入水平与携带阿尔兹海默病易感基因的中年人发生阿尔兹海默病的比率进行分析发现,在认知功能未受损的载脂蛋白E-ε4纯合子中,较高的D H A摄入量与较轻的阿尔兹海默症相关的病理改变相关㊂F F Q虽存在回忆偏倚,但其简单易行㊁可操作性强且费用较低,适用于评估人群中期或长期膳食摄入情况㊂2.1.224H R s24H R s通过询问调查对象过去24h 实际的膳食摄入情况,对其食物和营养素摄入量进行计算和评价㊂24H R s成熟㊁目的明确㊁易于实施㊁适用范围广,是目前人群营养调查使用最普遍的膳食调查方法[12]㊂Z HA N G等[13]调取中国健康与营养调查报告中的中国9个省份的15100名成年人(ȡ20岁)3d 24h膳食报告数据中鱼类或海洋类食物中n-3P U-F A s摄入量,分析与2型糖尿病(T2D M)发生风险的关系,结果显示,当前膳食海洋类来源的n-3P U F A s 摄入量太低(250m g/d),95%的受试者并不能降低发生T2D M的风险㊂Z H A N G等[13]利用同一批数据,分析n-6/n-3P U F A s摄入比例与病死率的关系,结果显示,n-6/n-3P U F A s摄入比例在6~10时可降低病死率[14]㊂24H R s优点是调查对象负担较小㊁配合度较高,但同时也存在相应要求,如需要对调查人员进行培训,营养素需要精细计算等㊂24H R s局限性同样为存在回忆偏倚㊁不适合记忆不清的老人或儿童㊁食物份额的重量很难被准确评估,比较适合用于家庭中个体食物消耗状况的调查㊂在实际运用中,24H R s常与称重法㊁F F Q等方法相结合以获取更全面的信息㊂2.2色谱法色谱法检测主要分为3个基本步骤: (1)提取标本中的脂肪酸;(2)待分析物的分离并将目标脂肪酸进行硅烷衍生化或甲酯化;(3)待分析物的鉴定和量化㊂其中步骤(1)为关键步骤,因生物组织中的脂质通常与蛋白质相互作用形成脂蛋白,脂质提取的成功往往决定了后续分析㊁鉴定和定量的准确程度㊂2.2.1 T L C T L C是基于待分析物在流动相和固定相(常为硅胶)中存在极性差异,实现对待检测标本分离㊁鉴定和定量的一种层析分离技术,是最早用于脂质分析的色谱方法㊂方景泉等[15]采用高效T L C-G C-四极杆质谱联合应用的方法对母乳中的各类脂肪酸水平进行检测,其中D H A水平检出限为2.3m g/L㊂G U O等[16]采用T L C-G C研究摄入相应n-3P U F A s 制剂后人体血液(红细胞和血浆)中的二十碳五烯酸㊁二十二碳五烯酸和D H A的代谢差异㊂有研究采用T L C-G C研究男性弱精子和正常精子中的P U F A s水平,结果显示弱精子D H A水平明显下降[17]㊂T L C操作简便㊁快速㊁价格便宜㊁通量高㊁标本前处理简单,而流动相的多样性可使复杂混合物得到有效分离㊂但薄层色谱板表面暴露于环境中在短时间内易被氧化而影响使用,精密度和重现性差,分离性能有限㊂目前T L C主要用于脂质分析前的标本制备并结合L C㊁G C或质谱技术(M S)等进行标本分析㊂2.2.2 G C G C的流动相为气体,其原理同样是利用物质在相对运动的2个相中具有不同的分配系数实现对物质的分离和检测㊂目前用于生物标本中各类脂肪酸检测方法主要包括与M S联合G C(G C-M S)和G C-以火焰离子化检测器(G C-F I D)[18]㊂B R O S-K O N O P I E L K O等[19]采用G C-F I D检测孕妇及其孩子血清标本中的n-3P U F A s和n-6P U F A s水平,比较了不同膳食补充剂的有效性㊂血浆中各类脂肪酸水平可用于监测糖尿病和糖尿病肾病患者疾病的发展进程,也可用于各种风险评估,如Z H A N G等[20]研究妊娠期孕妇脂肪酸水平与妊娠期糖尿病亚型的关系时,采用G C定量分析血清脂肪酸发现,妊娠早期A L A和D H A水平升高明显增加妊娠期空腹血糖升高女性发生妊娠期糖尿病的风险;汪洁云等[21]使用G C检测肥胖儿童与健康儿童多不饱和脂肪酸水平时发现,肥胖儿童血清ω-3P U F A s水平为(6.75ʃ2.27)%,健康儿童为(10.35ʃ3.30)%㊂G C有效率高㊁选择性强㊁分析过程耗时短和标本量需求少等优点,目前为生物标本中各类脂肪酸检测和定量的首选方法㊂G C-M S不仅可以提供更多的结构信息,同时因为M S完善的脂肪酸数据库,该方法的有效性和选择性也更高[18]㊂2.2.3 L C目前普遍采用的是高效L C(H P L C),该方法基于待分析物在高压下被固定相分离,随后被相应的溶剂洗脱后实现对物质的检测㊂检测器主要包括紫外/可见光检测器㊁荧光检测器㊁电化学检测器和质谱检测器等㊂S U N等[22]采用L C-M S/M S对精神分裂症患者血浆中未酯化的D H A进行检测,利培酮单药治疗患者血浆D H A水平为(6.40ʃ2.74)μg/m L,氯氮平单药治疗患者血浆D H A水平为(6.67ʃ2.77)μg/m L,氯氮平和利培酮联合治疗患者血浆D H A水平为(5.93ʃ2.75)μg/m L,对照健康人群血浆D H A水平为(12.31ʃ4.89)μg/m L㊂目前, L C或H P L C检测人体血液或组织中包括D H A在内㊃3711㊃检验医学与临床2024年4月第21卷第8期 L a b M e d C l i n,A p r i l2024,V o l.21,N o.8的多不饱和脂肪酸通常需要对标本进行前处理,如甲基酯衍生化等,以提高检测的灵敏度,因而会导致耗时较长㊂此外,相对于T L C,L C成本更高,与G C相比则存在溶剂消耗量较大和选择性较低等缺点[18]㊂2.3 NMR NM R是一种用于结构解析或物质定量的分析技术,其原理是利用原子核的磁矩,在恒定磁场和高频电磁波共同作用下且满足一定条件时,发生共振吸收某一定频率的射频辐射的物理过程㊂其中1H和31P由于高度灵敏是NMR光谱进行脂肪酸定量分析的主要自旋原子核[23],13C由于灵敏度较低,13C在NM R中的应用相对较少㊂如T H E S I N G 等[24]采用NM R对2724例来自荷兰抑郁和焦虑研究的受试者血浆D H A水平进行检测,结果显示,中位D H A水平为0.13m m o l/L㊂B A R R I L E R O等[25]开发出一款针对1H N M R检测人体血浆脂肪酸并进行定量的生物信息学工具(L i p S p i n),其定量的D H A结果与质谱结果呈明显正相关(r=0.96,P=4.9ˑ10-26)㊂目前,因NM R设备昂贵且结果需要专业人士解读,采用该设备分析人体脂肪酸水平并不普遍㊂此外,与M S定量脂肪酸比较,NM R存在灵敏度低㊁信号重叠㊁信号分离能力差等问题,其中31P NM R只能用于含P的脂肪酸或D H A分析[23]㊂但NM R的优势在于重复性好㊁轻松辨别分子结构㊁仪器稳定性好㊁提供分子动力学信息和直接获取定量数据,同时进行分析时不会破坏标本等㊂2.4 N I R N I R是一种利用近红外谱区(650~1100 n m)包含的光谱信息对有机物质水平及结构进行分析的技术,信息源主要是物质内部原子间振动的倍频与组合频㊂由于N I R在采样技术上独有的快速㊁无损㊁高效㊁低成本㊁采样重现性好㊁测量方便㊁操作性强等优点,被广泛用于农业㊁工业㊁医学等多个领域㊂目前,N I R在医学方面的应用主要集中在对大脑功能的分析[26]㊁血液中各成分,如血糖㊁总胆固醇㊁甘油三酯㊁转移酶和尿酸等的检测及体液中的一些蛋白检测,对D H A水平分析的研究较少见㊂已报道的主要针对三文鱼㊁猪㊁牛㊁羊等动物肉或鱼油㊁藻油中D H A水平检测[27-28]㊂目前,还没有基于近红外的人体血液D H A水平检测的报道,仅有部分采用傅里叶变换红外光谱技术检测人体口腔黏膜和人乳多不饱和脂肪酸水平的研究[29]㊂目前,N I R检测D H A技术有限,且因D H A水平较低,采用N I R检测误差通常相对于其他脂肪酸偏大㊂N I R也存在设备昂贵及结果解读要求专业人士等不足㊂另外,N I R获得的数据尚缺乏标准化的分析方法及无法进行绝对定量㊂3小结与展望D H A作为人类必需的长链多不饱和脂肪酸之一,在人体无法自主合成㊂因此,准确检测人体D H A 水平成为预防因D H A不足或缺乏引起的疾病的关键㊂目前,D H A尚无标准化检测方法,而已有的检测方法多种多样,这导致人体D H A水平检测结果参差不齐,无法对D H A水平与疾病状态相关性进行有效评估,更无法提出一个合理的健康人群D H A水平参考区间㊂为此,本研究对当前广泛使用的人体D H A 水平检测方法进行综述㊂3.1优化色谱技术目前,广泛用于人体D H A水平评估和检测的方法包括膳食调查法㊁色谱法及近几年逐渐开始使用的NM R和N I R㊂其中膳食调查法虽然能够对膳食摄入脂肪酸水平与疾病之间相关性进行评价,但膳食摄入量不能替代人体内实际的脂肪酸或D H A水平㊂而NM R和N I R设备昂贵,无法普遍使用㊂因此,当前最理想的可实现D H A水平标准化检测的是色谱法,尤其是广泛使用的G C㊂近年来,G C 的检测灵敏度㊁特异度或检测下限因需要偶联各种质谱仪[23],如三重四极杆质谱㊁时间飞行质谱或离子阱质谱等有了明显改善㊂当下,色谱技术仍存在标本前处理时间久和脂肪酸内标缺乏导致脂肪酸定量不精准等问题㊂因此,色谱法D HA检测方法仍需继续优化以期更加简洁㊁直接㊁精准㊂3.2完善标本收取㊁保存和结果解读的科学性人体D H A水平的准确测量还存在其他干扰因素,如生物标本的保存方式㊂目前最常用于检测D H A的生物标本为血浆和红细胞㊂将红细胞冻存于-20ħ条件下数日,D HA水平明显下降;当置于室温或零度以上的冰箱,红细胞中D H A水平则较为稳定;将标本冻存在-80ħ条件下,红细胞中的D H A水平可以稳定保持数年[30]㊂此外,尽管血浆或红细胞中的D H A水平被广泛用于人体D HA水平评估,然而因人群年龄㊁疾病状态等差异,通过膳食摄入的D H A或使用D H A 制剂补充的D H A与人体D H A水平的变化并非始终有相关性[31]㊂因此,根据实验目的选择合适的生物标本㊁注意标本保存方式并基于人群特点对检测结果进行科学评估和分析,对准确获取人体D H A水平并进行合理补充至关重要㊂3.3提出健康人群D H A水平参考区间目前国内外均少见推荐人体D H A水平正常参考区间的报道㊂今后有望在比较现有检测方法优缺点的基础上,国内各大医院检验科能共同制订1项D H A检测标准化指南,就检测标本类别㊁标本检测相关设备及检测结果的科学解读等达成共识,并将该指南广泛推广应用,将为未来预防和治疗D H A缺乏提供重要指导㊂参考文献[1]D O A E I S,B O U R B O U R F,T E Y M O O R I Z,e t a l.T h e e f f e c to f o m e g a-3f a t t y a c i d s s u p p l e m e n t a t i o n o n s o c i a l a n d b e h a v-i o r a l d i s o r d e r s o f c h i l d r e n w i t h a u t i s m:a r a n d o m i z e d c l i n i-c a l t r i a l[J].P ed i a t r E n d o c r i n o l D i a be t e s M e t a b,2021,27(1):12-18.[2]齐可民,樊超男.n-3多不饱和脂肪酸与儿童生长发育和健康[J].中华实用儿科临床杂志,2016,31(23):1761-1765.㊃4711㊃检验医学与临床2024年4月第21卷第8期 L a b M e d C l i n,A p r i l2024,V o l.21,N o.8[3]V O N S C HA C K Y C.O m e g a-3i n d e x i n2018/19[J].P r o cN u t r S o c,2020,11:1-7.[4]S HA H I D I F,AM B I G A I P A L A N P.O m e g a-3p o l y u n s a t u-r a t e d f a t t y a c i d s a n d t h e i r h e a l t h b e n e f i t s[J].A n n u R e vF o o d S c i T e c h n o l,2018,9:345-381.[5]C HO L E W S K I M,T OM C Z Y K OWA M,T OM C Z Y K M.A c o m p r e h e n s i v e r e v i e w o f c h e m i s t r y,s o u r c e s a n d b i o-a v a i l ab i l i t y o f o m e g a-3f a t t y ac id s[J].N u t r ie n t s,2018,10(11):1662.[6]M A L L I C K R,B A S A K S,D U T T A R O Y A K.D o c o s a h e x a e-n o i c a c i d,22:6n-3:I t s r o l e s i n t h e s t r u c t u r e a n d f u n c t i o n o f t h e b r a i n[J].I n t J D e v N e u r o s c i,2019,79:21-31.[7]C A R D O S O C,A F O N S O C,B A N D A R R A N M.D i e t a r yD HA,b i o a c c e s s i b i l i t y,a n d n e u r o b e h a v i o r a l d e v e l o p m e n t i n c h i l d r e n[J].C r i t R e v F o o d S c i N u t r,2018,58(15): 2617-2631.[8]L Y R,MA C I N T Y R E B C,P H I L I P S S M,e t a l.L i p i d o m i c s t u d i e s r e v e a l t w o s p e c i f i c c i r c u l a t i n g p h o s p h a t i d y l c h o-l i n e s a s s u r r o g a t e b i o m a r k e r s o f t h e o m e g a-3i n d e x[J].J L i p i d R e s,2023,64(11):100445.[9]穆凯丽.新疆特色膳食半定量食物频率问卷的信效度分析[D].乌鲁木齐:新疆医科大学,2023.[10]赵芮,刘少东,范俊,等.上海市居民n-3多不饱和脂肪酸膳食调查及预防心血管疾病的推荐摄入量[J].营养学报,2023,68(6):1-9.[11]S A L A-V I L A A,A R E N A Z A-U R Q U I J O E M,S A N C H E Z-B E N A V I D E S G,e t a l.D H A i n t a k e r e l a t e s t o b e t t e r c e r e b r o-v a s c u l a r a n d n e u r o d e g e n e r a t i o n n e u r o i m a g i n g p h e n o t y p e s i n m i d d l e-a g e d a d u l t s a t i n c r e a s e d g e n e t i c r i s k o f a l z h e i m e r d i s-e a s e[J].A m J C l i n N u t r,2021,113(6):1627-1635.[12]邵烨林,应晓玲,吴飞妍,等.24h膳食回顾法:方法㊁应用与发展[J].中国食物与营养,2005,11(4):1-5.[13]Z HA N G Y,Z HU A N G P,MA O L,e t a l.C u r r e n t l e v e l o ff i s h a n d o m eg a-3f a t t y a c i d i n t a k e s a n d r i s k o f T y p e2d i a-b e t e s i n C h i n a[J].J N u t r B i oc h e m,2019,74:108249.[14]Z HU A N G P,WA N G W,WA N G J,e t a l.P o l y u n s a t u r a t e df a t t y a c i d s i n t a k e,o m eg a-6/o m e g a-3r a t i o a n d m o r t a l i t y:F i n d i n g s f r o m t w o i n d e p e n d e n t n a t i o n w i d e c o h o r t s[J].C l i n N u t r,2019,38(2):848-855.[15]方景泉,迟涛,孙广梅,等.高效薄层色谱-气相色谱-四级杆质谱法检测母乳中脂肪酸分布[J].中国乳品工业, 2018,46(6):36-40.[16]G U O X F,T O N G W F,R U A N Y,e t a l.D i f f e r e n t m e t a b-o l i s m o f E P A,D P A a n d D HA i n h u m a n s:a d o u b l e-b l i n d c r o s s-o v e r s t u d y[J].P r o s t a g l a n d i n s L e u k o t E s s e n t F a t t yA c i d s,2020,158:102033.[17]Y U A N C,WA N G J,L U W.R e g u l a t i o n o f s e m e n q u a l i t yb y f a t t y ac id s i n d ie t s,e x t e n d e r,a n d s e m e n[J].F r o n t V e tS c i,2023,10:1119153.[18]C H I U H H,K U O C H.G a s c h r o m a t o g r a p h y-m a s s s p e c-t r o m e t r y-b a s e d a n a l y t i c a l s t r a t e g i e s f o r f a t t y a c i d a n a l y s i s i n b i o l o g i c a l s a m p l e s[J].J F o o d D r u g A n a l,2020,28(1):60-73.[19]B R O S-K O N O P I E L K O M,B I A L E K A,J OHN E M,e t a l.I n c r e a s e d L C P U F A l e v e l s i n t h e s e r u m o f p r e g n a n tw o m e n a n d t h e i r c h i l d r e n a s a r e s u l t o f d i e t a r y s u p p l e-m e n t a t i o n w i t h o m e g a f a t t y a c i d s[J].N u t r i e n t s,2023,15(1):231.[20]Z HA N G T,J I A N G W R,X I A Y Y,e t a l.C o m p l e x p a t-t e r n s o f c i r c u l a t i n g f a t t y a c i d l e v e l s i n g e s t a t i o n a l d i a b e t e s m e l l i t u s s u b c l a s s e s a c r o s s p r e g n a n c y[J].C l i n N u t r,2021, 40(6):4140-4148.[21]汪洁云,吴芳,朱琼.肥胖儿童血清ω-3多不饱和脂肪酸水平及其与胰岛素抵抗的相关性[J].中国妇幼保健, 2023,38(7):1246-1249.[22]S U N Y,L I U W,Q I U Y,e t a l.D e t e r m i n i n g n o n e s t e r i f i e da n d t o t a l d o c o s a h e x a e n o i c a c i d a n d e i c o s a p e n a e n o i c a c i dc o n c e n t r a t i o n s b y L C-M S/M S i n t h e p l a s m a o f p a t i e n t sw i t h s c h i z o p h r e n i a[J].B i o a n a l y s i s,2022,14(8):467-477.[23]K HO U R Y S,C A N L E T C,L A C R O I X M Z,e t a l.Q u a n t i-f i c a t i o n o f l i p i d s:m o d e l,r e a l i t y,a n d c o m p r o m i s e[J].B i o-m o l e c u l e s,2018,8(4):174.[24]T H E S I N G C S,B O T M,M I L A N E S C H I Y,e t a l.O m e g a-3p o l y u n s a t u r a t e d f a t t y a c i d l e v e l s a n d d y s r e g u l a t i o n s i nb i o l o g ic a l s t r e s s s y s t e m s[J].P s y c h o n e u r o e nd o c r i n o l o g y, 2018,97:206-215.[25]B A R R I L E R O R,G I L M,AM I G O N,e t a l.L i p S p i n:a n e wb i o i n f o r m a t ic s t o o L f o r q u a n t i t a t i v e1H NM R l i p id p r o f i-l i n g[J].A n a l C he m,2018,90(3):2031-2040. [26]全琰,罗荔,陈玲,等.发育迟缓儿童的功能性近红外光谱研究[J].中国儿童保健杂志,2021,29(7):772-774.[27]L I N T V E D T T A,A N D E R S E N P V,A F S E T H N K,e ta l.R a m a n s p e c t r o s c o p y a n d N I R h y p e r s p e c t r a l i m a g i n g f o r i n-l i n e e s t i m a t i o n o f f a t t y a c i d f e a t u r e s i n s a l m o n f i l-l e t s[J].T a l a n t a,2023,254:124113.[28]王楠,于宏威,李军国,等.利用近红外光谱技术快速测定鱼油中E P A和D HA含量的方法研究[J].中国油脂, 2017,42(10):138-142.[29]A K H G A R C K,N U R N B E R G E R V,N A D V O R N I K M,e ta l.F a t t y a c i d d e t e r m i n a t i o n i n h u m a n m i l k u s i n g a t t e n u a-t e d t o t a l r e f l e c t i o n i n f r a r e d s p e c t r o s c o p y a n d s o l v e n t-f r e e l i p i d s e p a r a t i o n[J].A p p l S p e c t r o s c,2022,76(6):730-736.[30]V O N S C HA C K Y C.I m p o r t a n c e o f E P A a n d D HA b l o o d l e v e l s i n b r a i n s t r u c t u r e a n d f u n c t i o n[J].N u t r i e n t s,2021, 13(4):1074.[31]L E L L I D,I N C A L Z I R A,F E R R U C C I L,e t a l.A s s o c i a-t i o n b e t w e e n P U F A i n t a k e a n d s e r u m c o n c e n t r a t i o n a n d m o r t a l i t y i n o l d e r a d u l t s:a c o h o r t s t u d y[J].C l i n N u t r, 2020,39(2):510-515.(收稿日期:2023-08-16修回日期:2023-12-26)㊃5711㊃检验医学与临床2024年4月第21卷第8期 L a b M e d C l i n,A p r i l2024,V o l.21,N o.8。
二十二碳六烯酸对斑马鱼肝脏细胞蛋白代谢脂代谢和能量代谢的影响

二十二碳六烯酸对斑马鱼肝脏细胞蛋白代谢脂代谢和能量代谢的影响1. 引言1.1 研究背景二十二碳六烯酸(DHA)是一种重要的多不饱和脂肪酸,被广泛认为对身体健康有益。
它在人体内的作用机制已经得到深入研究,包括对脑神经系统的保护作用、心血管系统的调节作用等。
目前对DHA对斑马鱼肝脏细胞代谢的影响研究相对较少。
本研究旨在探讨二十二碳六烯酸对斑马鱼肝脏细胞代谢的影响,以期为深化对DHA的生物学效应理解提供实验依据,为进一步研究DHA的药理作用和临床应用奠定基础。
1.2 研究目的本研究的目的是探讨二十二碳六烯酸对斑马鱼肝脏细胞的蛋白代谢、脂代谢和能量代谢的影响。
通过深入研究二十二碳六烯酸在肝脏细胞中的作用机制,我们旨在探索其对斑马鱼肝脏细胞代谢过程的调控作用,为研究脂肪代谢疾病和慢性代谢性疾病的治疗和防治提供新的理论依据和实验数据。
我们将通过这项研究探讨二十二碳六烯酸在生物体内的生物功能及其潜在的临床应用价值,为相关领域的研究提供参考和借鉴。
通过系统分析二十二碳六烯酸在蛋白、脂和能量代谢中的调节作用,我们希望能够深入了解其在斑马鱼肝脏细胞中的作用机制,为未来相关研究提供新的思路和方法。
2. 正文2.1 二十二碳六烯酸的作用机制二十二碳六烯酸(DHA)是一种重要的不饱和脂肪酸,对机体的健康发育和生理功能有着重要的作用。
DHA主要存在于鱼类油中,是人体不能合成的必需脂肪酸之一。
其作用机制主要包括以下几个方面:DHA是细胞膜的主要结构脂质之一,可以调节细胞膜的流动性和通透性,影响细胞内外物质的交换和传递。
DHA还可以与细胞膜上的蛋白质结合,调节其活性和功能,影响细胞的信号传导过程。
DHA是纤维蛋白的重要组成部分,可以影响纤维蛋白的稳定性和功能。
DHA还可以作为信号分子参与调节细胞的代谢过程,影响蛋白合成和降解的平衡,影响细胞对营养物质的利用和能量产生。
DHA还可以通过调节基因的表达水平,影响细胞的生长和分化,调节细胞的凋亡和增殖过程。
DHA和EPA的研究

DHA和EPA的研究DHA(二十二碳六烯酸)和EPA(二十碳五烯酸)是两种常见的Omega-3脂肪酸。
它们是一类长链不饱和脂肪酸,主要存在于鱼油和一些特定的海藻中。
这两种脂肪酸在我们的身体中起着许多重要的生理功能,例如维持心血管健康,支持大脑和神经系统发育,以及调节炎症反应等。
大量研究已经证明了DHA和EPA的益处。
例如,一项发表在《新英格兰医学杂志》的研究发现,每周摄入一次鱼或摄入足够的鱼油可以显著降低冠心病发作的风险。
研究还发现,补充DHA和EPA可以降低高血压的风险,并且对降低三酰甘油和低密度脂蛋白胆固醇(坏胆固醇)有显著效果,从而帮助维持血脂水平正常。
此外,对大脑和神经系统的研究表明,DHA和EPA对大脑发育和功能非常重要。
一个系统回顾性的文献综述发表在《心血管研究》上,指出DHA和EPA的补充可以降低认知衰退和老年痴呆症风险。
这是因为这两种脂肪酸对神经细胞的结构和功能具有关键影响,可以提高神经细胞的可塑性和神经递质的合成。
此外,DHA和EPA还具有抗炎作用。
由于它们是脂肪酸级联的前体,可以合成抗炎细素,并且还可以抑制炎症介质的产生。
一项发表在《美国心脏学杂志》上的研究发现,补充DHA和EPA可以改善炎症性肠病患者的症状,这表明其对炎症性疾病具有潜在治疗价值。
然而,一些研究结果并不一致。
例如,一项发表在《柳叶刀》上的研究指出,DHA和EPA并不能显著降低心脏病和中风的风险。
这可能是因为研究对象的样本容量较小,或者使用的剂量不够高。
此外,另一项发表在《新英格兰医学杂志》上的研究发现,补充DHA和EPA对减少癌症风险并没有明显效果。
这表明DHA和EPA对于不同疾病的作用可能不完全相同。
总体而言,大量的研究证据表明,DHA和EPA对心血管健康、大脑发育和功能以及炎症反应调节等方面非常重要。
然而,仍然需要更多的研究来进一步明确其具体的作用机制和剂量效应。
此外,个体差异也可能在DHA和EPA的吸收和代谢中起到重要作用,所以人们在使用补充剂时需要根据自身情况调整剂量。
二十二碳六烯酸(DHA)研究进展

03081004 黄逸凡 03081025 殷乃宁 03081085 王炜臻
一、DHA的动物和微生物来源
目前添加于食品和直接用做营养补充剂的DHA主 要来源于鱼油和微藻油。鱼油主要是从含脂肪较 高的海鱼中提取所得,微藻油则首先要通过生物 工程的方法进行微藻纯种培养,然后经过抽提和 精炼得到。鱼油因其含有DHA,并且价格便宜, 在食品工业中已广泛的用做食品原料和营养添加 剂,并用作婴幼儿和孕妇食品中强化DHA 的来 源。可是英国科学家Jacobs在美国《环境科学 技术》杂志和德国科学家Vetter等在《欧洲食品 科学技术》杂志)中均指出,鱼油中所含有的持 续性有机污染物POPs及其危害多年来一直被人 们所忽视。在海洋环境中,持续性有机污染物可 通过理作用:
DHA在大脑中主要存在于灰质部分,是人脑神经细胞 膜中主要的脂质成分,也是大脑细胞优先吸收利用的脂肪 酸成分。是婴幼儿神经细胞发育过程中重要的营养成分, 与其成长过程中的反应灵敏程度有很大关系。如果日常饮 食中缺少DHA,会导致儿童尤其是婴幼儿的学习能力下降, 同时患神经系统疾病如神经官能症的机率也较高。妇女在 怀孕期间,如果饮食中缺少DHA,也会影响胎儿大脑及神 经系统的正常发育,以及其后天的智商指数临床实验也证 实,处于怀孕及哺乳期的妇女,如果提高DHA 的摄取量, 可降低产后抑郁症的发生。对成年人来讲,DHA也是维持 大脑机能正常发挥不可缺少的物质。低.DHA 含量饮食会 加快人体的老化速度,并且容易导致患老年痴呆症。日本 科学家还指出,补充DHA可以充分改善中风后的老年痴呆 症状。
与动物油生产相比,微生物油脂的生产有 很多优点。比如: ①生产周期短; ②微生物 方法生产不受场地、气候、季节的影响. 美国Market 公司已利用微藻 Crypthecodiniumcohnii 大规模生产富含 脂肪酸的油脂,它只形成DHA ,不形成EPA , 从微藻提取的油脂含量达40 %以上。孟 山都公司选用另一种微藻Schlzochytyiu 来生产富含DHA 的油脂.
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性,平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益,请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间:9:00-18:30)。
当DHA 和EPA 作为预防疾病的药物被广泛 应用,而且将成为神经系统和血液系统方面功 能食品时,鱼油的年产量将很难满足市场需求, 所以从自然界中寻找、培养能产生高含量的 DHA 和EPA 的微生物,以及利用生物技术生 产DHA 和EPA 亦将是今后研究的主要内容 之一。美国、日本以及我国一些单位已成功 进行了微藻培养生产的研究,通过这些前期的 研究工作,有望近期内在我国实现工业化生产。 无疑,DHA的应用前景很好。
二十二碳六烯酸(DHA) 研究进展
03081004 黄逸凡 03081025 殷乃宁 03081085 王炜臻
一、DHA的动物和微生物来源
目前添加于食品和直接用做营养补充剂的DHA主 要来源于鱼油和微藻油。鱼油主要是从含脂肪较 高的海鱼中提取所得,微藻油则首先要通过生物 工程的方法进行微藻纯种培养,然后经过抽提和 精炼得到。鱼油因其含有DHA,并且价格便宜, 在食品工业中已广泛的用做食品原料和营养添加 剂,并用作婴幼儿和孕妇食品中强化DHA 的来 源。可是英国科学家Jacobs在美国《环境科学 技术》杂志和德国科学家Vetter等在《欧洲食品 科学技术》杂志)中均指出,鱼油中所含有的持 续性有机污染物POPs及其危害多年来一直被人 们所忽视。在海洋环境中,持续性有机污染物可 通过食物链在不同级别的生物中行累积。
与动物油生产相比,微生物油脂的生产有 很多优点。比如: ①生产周期短; ②微生物 方法生产不受场地、气候、季节的影响. 美国Market 公司已利用微藻 Crypthecodiniumcohnii 大规模生产富含 脂肪酸的油脂,它只形成DHA ,不形成EPA , 从微藻提取的油脂含量达40 %以上。孟 山都公司选用另一种微藻Schlzochytyiu 来生产富含DHA 的油脂.
因鱼在海洋食物链中占有较高的地位,其体内可 累积不同种类的持续性有机污染物.近几年,由 于欧、美、加拿大及日本等国的海鱼捕捉业发展 迅速,所捕获的海鱼脂肪组织中累积有大量的持 续性有机污染物POPs,由于这些污染物为脂溶 性物质,在所提取的鱼油中不可避免含有一定量 的POPs. 目前在发达国家,孕妇、哺乳期妇女和儿童食品中的DHA 主要来源于微藻油。微藻是一类通常含有叶绿素的植物性水生 微生物,例如螺旋藻便是其中一种。其中很多品种可以在海洋 的环境下分离获得。这些纯种微藻可以通过生物工程的方法进 一步筛选,驯化成为富含DHA并不含EPA 的藻种。并通过添加 可食用不含污染物的营养物进行规模化培养生产微藻生物量, 然后在低温无菌环境下抽提和精炼微藻油。
在萃取前先将鱼油用AgNO3 进行预处理, 用这种方法得到DHA 的产率为95 % , 纯 度大于90 %。用中空纤维膜从低级脂肪 酸甲酯中能很好地分离EPA、DHA 甲酯。 Rakshit 等用荧光假单胞脂肪酶I 水解金枪 鱼油后,获得了超过80 %的游离EPA 、 DHA。用固定化荧光假单胞脂肪酶进行酯 基转移,合成程度为60 %后,在甘油酯混合 物中富集得到74 %的PUFA(EPA + DHA) 。
四、生理作用:
DHA在大脑中主要存在于灰质部分,是人脑神经细胞 膜中主要的脂质成分,也是大脑细胞优先吸收利用的脂肪 酸成分。是婴幼儿神经细胞发育过程中重要的营养成分, 与其成长过程中的反应灵敏程度有很大关系。如果日常饮 食中缺少DHA,会导致儿童尤其是婴幼儿的学习能力下降, 同时患神经系统疾病如神经官能症的机率也较高。妇女在 怀孕期间,如果饮食中缺少DHA,也会影响胎儿大脑及神 经系统的正常发育,以及其后天的智商指数临床实验也证 实,处于怀孕及哺乳期的妇女,如果提高DHA 的摄取量, 可降低产后抑郁症的发生。对成年人来讲,DHA也是维持 大脑机能正常发挥不可缺少的物质。低.DHA 含量饮食会 加快人体的老化速度,并且容易导致患老年痴呆症。日本 科学家还指出,补充DHA可以充分改善中风后的老年痴呆 症状。
DHA在视神经细胞及视网膜组织中的含量高达 40%~47%,如果食物中缺乏DHA,可使视网膜组织中 DHA含量下降,从而导致视力下降。2002年美国《临床营 养学杂志》报道,食品中补充DHA的婴儿在进食52个星期 后,视觉明显比同组中未进食DHA的健康婴儿灵敏。在早 产儿的体内DHA的浓度偏低,需要特别补充,才可使其体 内DHA浓度回升到正常水平。 除以上的生理功能外,还可预防心血管疾病发生。在过去的十几年, 人们普遍认为另一个多不饱和脂肪酸EPA对防心脑血管疾病非常有效。可是, 1999年,澳大利亚西澳大学科学家在美国的《高血压杂志》上发表论文指出, DHA比DPA更为重要,DHA可以起到降血压的功能,并且可以调节人体内血 脂和脂蛋白的正常代谢,降低血液粘稠度和血液中胆固醇水平,增加高密度脂 蛋白含量。在此之前,日本的科学家也在《血栓形成研究》杂志中指出, DHA可有效抑制血栓的形成,起到防止心血管疾病发生的作用。另外, 2000年在《高血压杂志》,加拿大蒙特利尔大学科学家报道,DHA可以通过 影响血管结构从而产生降低血压的作用。刊登在1995年著名的《美国医学会 杂志》中的研究报告还指出,临床实验证明,心脏病患者每日进食DHA可以 有效降低心脏猝死的几率。此外,在1999年美国油料化学会年会中,有研究 还证明,DHA可以促进骨骼生长,预防骨质疏松。
参考资料:
DHA的来源和合理应用 贵州工业大学发酵工 程与生物制药省重点实验室 张义明 多不饱和脂肪酸的研究进展 华中农业大学食品 科学系 阮 征,吴谋成,胡筱波,薛照辉 微生物发酵生产DHA研究概况 浙江大学生物系 统工程与食品科学学院 焦迎春,郑晓冬 鱼油制品中EPA/DHA检测方法的研究 吉林出入 境检验检疫局 牟峻 曲忠文 利用微生物生产多不饱和脂肪酸的研究进展 郑 州工程学院生物工程系 魏 明,曹 健
三、分析方法:
分析PUFA 通常的方法是将它们衍生为易挥发的 甲酯,经气相色谱( GC) 分离。但在衍生的过程中 可能会生成不完全甲酯衍生物以及异构化、氧化 或者水解等反应。使用高效液相色谱法(HPLC) 较气相色谱法的优点在于HPLC 条件温和,适于 极性的、低挥发性及对热敏感的化合物, 可以避 免衍生过程的异构化。目前,分离EPA 和DHA 的 有效方法是HPLC。所用固定相主要是反相Cl8 键合硅胶。李润等用二乙烯苯交联的聚甲基丙烯 酸甲酯( PMDVB) 树脂微球作为HPLC 固定相,选 择适当的流动相,从鱼油中分离EPA、DHA ,得到 较好的分离效果。近来,配备有火焰离子化检测 器或紫外检测器的毛细管超临界色谱(SFC) 已被 用来分析PUFA。
五、应用现状与开发前景
可以预料,随着我国人们生活水平的提高和对健康、保健的日益重 视,特别是社会各界对儿童健康发育的关注,以微藻DHA,尤其是 以不含EPA 的DHA微藻油为原料的产品,其市场将会迅速扩大。 在孕妇、哺乳期妇女、婴儿和儿童食品和保健品中,可以开发应用 的产品很多。目前添加有DHA的产品有婴儿奶粉、鱼类罐头、乳酸 饮料、乳饮料及清凉饮料日本市场上还推出含有DHA 的鱼肉香肠、 火腿肠、汉堡包、即食酱菜、调料、豆腐、蛋黄酱、面包、糖果、 香口胶等DHA 强化食品。1994 年,日本销售的EPA 和DHA 营养保 健食品就有三十多种。1995 年DHA 的用量达700 t ,健康食品销售 值高达130 亿日元。而EPA 的价格更高,每公斤原料(约含DHA 27 %) 高达3~5 万日元,1993 年主要以保健药品销售的EPA 营业值达 到230 亿日元。目前,DHA 和EPA 的惟一商业来源是海鱼,据报道, 全世界每年的鱼油产量为100 万t ,其中包含10~25 万t 的DHA 和 EPA 。
二、分离提取方法:
分子蒸馏法根据不同脂肪酸在真空条件下沸点不 同(即操作温度的差异) 来分离提取EPA 和DHA。 它在高真空条件下蒸馏操作,工艺步骤简单,不用 有机溶剂等,工艺成本较低,因此,分子蒸馏法是制 取EPA、DHA 的理想方法。Michihata T 等用 SC2CO2 从经冷冻的鱿鱼调味品废料中萃取油 脂,得率22 %。所得的油脂含几种不饱和脂肪酸, 主要为DHA ( 22. 7 %) 和EPA(8. 94 %) ,脂肪酸 的萃取总量高于用三氯甲烷—甲醇抽提所得的。 分离经尿素处理过的鱼油乙酯, 二十碳脂肪酸馏 分中EPA 浓度达51. 9 % ,二十二碳脂肪酸馏分 中DHA 浓度达59. 5 %。