食品中二十碳五烯酸和二十二碳六烯酸的测定
人体二十二碳六烯酸检测方法的研究进展
人体二十二碳六烯酸检测方法的研究进展
陆佳露;周春艳(综述);余晓丹(审校)
【期刊名称】《检验医学与临床》
【年(卷),期】2024(21)8
【摘要】二十二碳六烯酸(DHA)作为人体必需的长链多不饱和脂肪酸之一,对儿童尤其是婴幼儿大脑发育、成人脑功能维持及心血管疾病预防等均有重要作用。
DHA的人体来源主要依靠膳食补充,其缺乏人群较为普遍。
因此,监测人体内DHA 水平是预防因DHA不足或缺乏引起疾病的关键。
目前人体DHA水平检测方法较多,但标准化的检测方法尚少见文献报道。
该文通过综述近几年已发表的人体DHA 水平评估或检测方法,主要包括膳食调查法、色谱法、核磁共振技术和近红外光谱技术,并对各种方法的优势和局限性进行分析总结,以期为人体DHA水平检测提供新思路及科学指导,并助力健康人群DHA水平参考区间的建立。
【总页数】5页(P1171-1175)
【作者】陆佳露;周春艳(综述);余晓丹(审校)
【作者单位】上海交通大学医学院附属上海儿童医学中心发育行为儿科;上海交通大学医学院附属上海儿童医学中心转化所
【正文语种】中文
【中图分类】R591.3
【相关文献】
1.α-亚麻酸体内转化为二十碳五烯酸和二十二碳六烯酸的研究进展
2.二十碳五烯酸和二十二碳六烯酸的生物合成途径研究进展
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4.气相色谱法多重检验海豹油中二十碳五烯酸、二十二碳五烯酸和二十二碳六烯酸方法研究
5.气相色谱法测定鱼油中的二十碳五烯酸、二十二碳六烯酸和二十二碳五烯酸
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鱼油中二十碳五烯酸和二十二碳六稀酸提取分离研究现状和进展
鱼油中二十碳五烯酸和二十二碳六稀酸提取分离研究现状和进展鱼油中二十碳五烯酸（EPA）和二十二碳六烯酸（DHA）是两种重要的多不饱和脂肪酸，具有广泛的生理活性，在保护心血管系统健康、改善神经系统功能等方面发挥重要作用。
因此，提取和分离 EPA 和 DHA 的方法受到广泛关注。
近年来，研究人员采用多种方法对 EPA 和 DHA 进行提取和分离。
其中包括生物酶法、化学萃取法、冷冻干燥法、冷冻溶解法、超声法、膜分离法和气相色谱法等。
生物酶法是一种常用的 EPA 和 DHA 提取方法，该方法利用酶将 EPA 和 DHA 从鱼油中分离出来。
优点是操作简单、成本低廉、提取率高，缺点是受到温度、pH 值、酶活性和待处理油脂种类的影响。
化学萃取法是另一种常用的 EPA 和 DHA 提取方法，该方法利用有机溶剂将 EPA 和 DHA 从鱼油中分离出来。
优点是操作简单、成本低廉，缺点是提取率较低，且有机溶剂的残留会对产品质量产生影响。
冷冻干燥法和冷冻溶解法是另外两种常用的 EPA 和 DDHA 提取方法。
冷冻干燥法利用冰箱冷冻干燥的方式将 EPA 和 DHA从鱼油中分离出来。
优点是提取率高，缺点是操作复杂，成本较高。
冷冻溶解法利用低温溶解的方式将 EPA 和 DHA 从鱼油中分离出来。
优点是操作简单，缺点是提取率较低。
超声法是一种新兴的 EPA 和 DHA 提取方法，该方法利用超声波将 EPA 和 DHA 从鱼油中分离出来。
优点是操作简单、成本低廉、提取率高，缺点是受到温度、pH 值、超声强度和待处理油脂种类的影响。
膜分离法是另一种常用的 EPA 和 DHA 提取方法，该方法利用膜过滤的方式将 EPA 和 DHA 从鱼油中分离出来。
优点是操作简单、成本低廉、提取率高，缺点是受到温度、pH 值和待处理油脂种类的影响。
气相色谱法是最近几年发展较快的 EPA 和 DHA 提取方法，该方法利用气相色谱仪将 EPA 和 DHA 从鱼油中分离出来。
HPLC法测定魟鱼鱼油中二十碳五烯酸_二十二碳六烯酸的含量
表 2 卡托普利片中主药含量测定结果 Tab 2 Content determination of the main component of
Captopril tablets
批号
20080504 20080703 20080903
衍生紫外法
标示量/％ RSD％
99.35
0.23
99.64
0.41
101.10
2 方法与结果
2.1 色谱条件 色谱柱为 Diamonsil C1（8 200 mm×4.6 mm，5 μm）；流动相
为乙腈- 水（95 ∶ 5）；检测波长为 220 nm；流速为 1.0 mL·min－1； 柱温为 25 ℃；进样量：10 μL。理论塔板数按 EPA 甲酯、DHA 甲酯计应≥5 000。取流动相、溶剂（正己烷）及“2.2”项下 EPA 甲酯对照品、DHA 甲酯对照品溶液和“2.3”项下供试品溶液进 样分析，色谱详见图 1。 2.2 对照品溶液的制备
0.56
《中国药典》方法
标示量/％
RSD％
91.73
0.48
92.40
1.95
95.51
0.83
《中国药典》中[6]采用碘酸钾法测定卡托普利片剂主药含 量时，由于其辅料大部分都是淀粉，过滤时不能全部过滤干净 或淀粉部分溶于水中使滴定终点提前到达，因此使测定结果 很不准确。经验证，采用 DNFB 作为衍生化试剂与卡托普利反 应，使吸收峰波长增至 342 nm，且形成的衍生产物很稳定，能 更方便地测定卡托普利片剂中主药的含量。本试验结果表 明，本方法稳定、可靠，且操作简便、快速，适用于卡托普利片 剂中主药的含量测定。
ABSTRACT OBJECTIVE：To establish a method for the determination of EPA and DHA in ray oil. METHODS：The determination was carried out on Diamonsil C18 column. The mobile phase consisted of acetonitrile- water（95 ∶ 5）with flow rate of 1.0 mL· min－1 and detection wavelength set at 220 nm. The column temperature was set at 25 ℃. RESULTS：The linear ranges were 1～4 μg for EPA（r＝0.999 1）and 2～8 μg for DHA（r＝0.999 4）. The average recoveries were 99.23％ for EPA（RSD＝0.49％）and 99.30％ for DHA（RSD＝0.27％）. CONCLUSION：The method is simple，rapid，accurate and reproducible for the detection of EPA and DHA in ray oil. KEY WORDS Ray；EPA；DHA；HPLC method；Content determination
二十二碳六烯酸(DHA, C226)检测
二十二碳六烯酸（DHA, C22:6）检测
二十二碳六烯酸（DHA，C22:6），一种含有22个碳原子和6个双键的直链脂肪酸，只有其n-3家族的22 :6Δ4c，7c，10c，13c，16c，19c异构体以天然形式大量存在于鱼油中。
DHA是人体所必需的一种多不饱和脂肪酸，具有辅助脑细胞发育、抗衰老、改善血液循环及降血脂等多种生理功能。
迪信泰检测平台采用高效液相色谱(HPLC)、液质联用(LC-MS)、气质联用(GC-MS)和生化法，可高效、精准的检测二十二碳六烯酸的含量变化。
此外，我们还提供其他脂肪酸检测服务，以满足您的不同需求。
HPLC、LC-MS和GC-MS测定二十二碳六烯酸样本要求：
1. 请确保样本量大于0.2g或者0.2mL。
周期：2~3周
项目结束后迪信泰检测平台将会提供详细中英文双语技术报告，报告包括：
1. 实验步骤（中英文）
2. 相关质谱参数（中英文）
3. 质谱图片
4. 原始数据
5. 二十二碳六烯酸含量信息。
家禽和猪营养中的二十二碳六烯酸:动物产品中的富集对其性能和健康的影响
家禽和猪营养中的二十二碳六烯酸：动物产品中的富集对其性能和健康的影响付亚楠【摘要】:ω-3多不饱和脂肪酸(Omega-3 Polyunsaturated Fatty Acids,n-3 PUFA)与多种健康益处相关,可以对抗人类的机能紊乱与疾病.然而,典型的西方饮食中通常n-3 PUFA较低而n-6 PUFA较高,这表明这些必需脂肪酸的推荐摄入量很少能达标.因此,富含n-3 PUFA的动物肉类和蛋类的饮食有助于增加这些脂肪酸的消费.鱼油和微藻(Microalgae,MA)是长链n-3 PUFA的丰富来源,特别是二十碳五烯酸(Eicosapentaenoic Acid,EPA)和二十二碳六烯酸(Docosahexaenoic Acid,DHA).为动物饲喂这些海产品已被证明可以增加组织和蛋黄中的DHA含量,然而,这也有可能导致其对抗氧化剂需求的增加,以防止氧化变质以及相关的负面感观属性.尽管如此,增加DHA对猪和家禽的生长、繁殖、免疫和骨骼强度方面都有良好的效果.这些发现表明,为单胃动物饲喂富含DHA的成分可以丰富人类的饮食,并为动物带来额外的益处.【期刊名称】《国外畜牧学-猪与禽》【年(卷),期】2019(039)005【总页数】4页(P69-72)【关键词】添加剂;饲料;营养【作者】付亚楠【作者单位】【正文语种】中文【中图分类】S816典型的西方饮食中缺乏ω-3多不饱和脂肪酸(Omega-3 Polyunsaturated Fatty Acids，n-3 PUFA)，尤其是二十碳五烯酸 (Eicosapentaenoic Acid，EPA，20：5n-3)和二十二碳六烯酸(Docosahexaenoic Acid，DHA，22：6n-3)，而富含ω-6多不饱和脂肪酸(Omega-6 Polyunsaturated Fatty Acids，n-6 PUFA)，尤其是亚油酸(Linoleic Acid，LA，18：2n-6)。
气相色谱仪测定血液中DHA、EPA含量
气相色谱仪测定血液中DHA、EPA含量作者：冯剑军来源：《科技与创新》2014年第03期摘要：二十二碳六烯酸（DHA）、二十碳五烯酸（EPA）是人体血液中的两种物质，对人体的健康有着重要的影响。
因此，使用科学方法对血液中DHA，EPA进行检测是非常重要的。
使用气相色谱仪对血液中的DHA和EPA进行检测实验，详细介绍了实验材料、方法和结果，最终证实，气相色谱仪适用于检测血液中的DHA和EPA。
关键词：气相色谱仪；血液；DHA；EPA中图分类号：TQ016.51 文献标识码：A 文章编号：2095-6835（2014）03-0042-02DHA，即二十二碳六烯酸，俗称脑黄金，是一种对人体非常重要的不饱和脂肪酸，属于Omega-3不饱和脂肪酸家族中的重要成员。
EPA ，即二十碳五烯酸，是鱼油的主要成分，属于Ω-3系列多不饱和脂肪酸。
目前测定这两种脂肪酸的方法有很多种，而气相色谱仪法是比较常用的一种。
通过对气相色谱仪测定血液中DHA，EPA含量进行探讨，以期更准确地测定血液中DHA和EPA的含量。
1 实验材料的准备仪器：GC112A气相色谱仪、WYB-Ⅱ静音无油空气泵、SPGN-ⅡA高纯氮发生器、SPGH-300高纯氢发生器、XH-B型漩涡混合器、CF-长风水浴箱、B600A型低速离心机、TFG-1200通风柜。
试剂：甲醇、乙酸乙酯、正己烷等，均为分析纯；DHA甲酯标准品、EPA甲酯标准品；内标溶液（1 mg/mL，正二十三碳烷酸无水乙醇溶液）；盐酸甲醇溶液（氯化钠与浓硫酸反应，产生的氯化氢气体导入甲醇中，经标定物质的量浓度为1.3 mol/L）。
312名来我院产检的孕妇，体检未发现重大疾病，且无不良嗜好。
空腹抽取静脉血2 mL，及时分离血清，待检。
2 实验方法与结果2.1 色谱条件的选择毛细管柱：老化过后毛细管柱，型号FFAP，规格30 m（长）×0.25 mm（内径）×0.25μm （液膜厚度）。
深海鱼油的标准
深海鱼油的标准
深海鱼油是一种营养补充剂，通常含有丰富的omega-3脂肪酸，特别是EPA（二十碳五烯酸）和DHA（二十二碳六烯酸）。
深海鱼油的标准通常包括以下内容：
1. EPA和DHA含量：标准通常要求深海鱼油中的EPA和
DHA含量明确标示，并符合相应国家或地区的食品或药品安
全标准。
通常，一个合格的深海鱼油产品至少应提供每日500
毫克的EPA和DHA的摄入量。
2. 鱼油来源：深海鱼油通常来源于富含omega-3脂肪酸的深海鱼类，如三文鱼、鳕鱼、沙丁鱼等。
产品标准通常要求明确标示鱼油的来源，并确保来源鱼类的健康和环境可持续性。
3. 不含有害物质：深海鱼油的标准通常要求不含有害物质，如重金属（汞和铅）、农药残留物和其他污染物。
产品通常需要经过严格的质量控制和测试，以确保安全性和品质。
4. 加工方式：深海鱼油的加工方式也是标准的一部分。
通常要求采用特定的提取和精炼方法来保留鱼油中的omega-3脂肪酸，并去除不必要的杂质和氧化物。
总之，深海鱼油的标准主要涉及EPA和DHA含量、鱼油来源、不含有害物质和合适的加工方式，以确保产品的质量和安全性。
这些标准通常由相关监管机构或行业组织制定，并严格监督和执行。
二十二碳六烯酸(DHA)、二十碳五烯酸(EPA)、亚油酸、亚麻酸和花生四烯酸(AA)在婴幼儿配方奶粉中的
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食品研究与拜发
检 分 测析
十二碳六烯酸（ Ｈ 、 Ｄ Ａ） 十碳五烯酸（ Ｐ 、 Ｅ Ａ）亚油酸 、 亚麻酸和花生 四烯酸（ Ａ 在婴幼儿配方奶粉中的测定 Ａ ）
二
马文宏 ， 张燕 ， 薛刚 ， 闫磊 ， 张均媚 ， 刘伟 娟 （ 天津市乳 品食 品监督检验测试 中心 ， 天津 ３ ０ ８ ） ０ ３ １
ｃ ｎ ｉ ｏ ｉ ｄ ｔｒ ｉａｉｎ ｗａ ｔ ｄ ｅ ． ｏ ｄｔ ｎ Ｏ ｌ ｅ ｅ ｎ ｔ ｓ ｓｕ ｉｄ ＤＨＡ ， Ａ ． ｏｅｅ ａ ｉ ｌ ｏｅ ｉ ｃｄ ａ ｄ ＡＡ ｒ ｅ ａ ａｅ ｂ ｏ ｉ ｍ ｏ ＥＰ １ｎ ｌ ｉ ｃｄ，ｉ ｌｎｃ ａ ｉ ｎ ｉ ｎ ｗｅ ｅ ｓ ｐ ｒｔｄ ａ ｓ —
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食品中二十碳五烯酸和二十二碳六烯酸的测定
1 原理
油脂经皂化处理后生成游离脂肪酸，其中的长碳链不饱和脂肪酸（EPA和DHA）经甲酯化后挥发性提高。
可以用色谱柱有效分离，用氢火焰离子化检测器检测，使用外标法定量。
2试剂
2.1 正己烷：分析纯，重蒸；
2.2 甲醇：优级纯；
2.3 2mol/L氢氧化钠-甲醇溶液：称取8g氢氧化钠溶于100mL甲醇中。
2.4 2mol/L盐酸-甲醇溶液：把浓硫酸小心滴加在约100g的氯化钠上，把产生的氯化氢气体通入事先量取的约470mL甲醇中，按质量增加量换算，调制成2mol/L盐酸-甲醇溶液，密闭保存在冰箱内。
2.5 二十碳五烯酸、二十二碳六烯酸标准溶液：精密称取EPA、DHA各50.0mg，加入正己烷溶解并定容至100mL，此溶液每毫升含0.50mgDHA；
3仪器
3.1 气象色谱仪附有氢火焰离子化检测器（FID）。
3.2 索氏提取器。
3.3 氯化氢发生系统（启普发生器）。
3.4 刻度试管（待分刻度）：2ml、5ml、10ml。
3.5 组织捣碎机。
3.6 旋涡式震荡混合器。
3.7 旋转蒸发仪。
4试样制备
4.1海鱼类食品：用蒸馏水冲洗干净晾干，先切成碎块去除骨骼，然后用组织捣碎机捣碎、混匀，称取样品50g置于250ml具塞碘量瓶中，加100ml-200ml石油醚（沸程30℃-60℃），充分摇匀后，放置过夜，用快速滤纸过滤，减压蒸馏挥干溶剂，得到油脂后称重备用（可计算提油率）。
4.2添加食品：称取样品10g置于60ml分液漏斗中，用60ml正己烷分三次萃取（每次振摇萃取10min）,合并提取液，在70℃水浴上挥至近干，备用。
4.3 鱼油制品：直接进行样品前处理。
5 分析步骤
5.1 皂化
5.1.1 鱼油制品和海鱼类食品：取鱼油制品或经处理得到的海鱼油脂1g于50ml 具塞容量瓶中，加入10ml正己烷轻摇使油脂溶解，并用正己烷定容至刻度。
吸取此溶液1.00-5.00ml于另一10ml具塞比色管中，再加入2mol/L氢氧化钠-甲醇溶液1ml，充分震荡10min后放入60℃水浴中加热1min-2min，皂化完成后，冷却到室温，待甲酯化用。
5.1.2 添加食品：用2ml-3ml正己烷分两次将经5.4.2处理而得的浓缩样液小心转至10ml具塞比色管中，再加入2mol/L氢氧化钠-甲醇溶液1ml，充分震荡10min 后放入60℃水浴中加热1min-2min，皂化完成后，冷却到室温，待甲酯化用。
5.2 甲酯化
5.2.1 标准溶液系列：准确吸取配制的标准溶液1.0、2.0、5.0ml分别移入10ml 具塞比色管中，再加入2mol/L盐酸-甲醇溶液2ml，充分震荡10min，并于50℃的水浴中加热2min，进行甲酯化，弃去下层液体，再加约2ml蒸馏水洗净并去除水层，用滴管吸出正己烷层，移至另一装有无水硫酸钠的漏斗中脱水，将脱水后的溶液在70℃水浴上加热浓缩，定容至1ml，待上机测试用。
此标准系类中DHA或EPA的浓度依次为0.5、1.0、2.5mg/mL。
5.2.2 样品溶液：在经皂化处理后的样品溶液中加入2mol/L盐酸-甲醇溶液2ml，充分震荡10min，并于50℃的水浴中加热2min，进行甲酯化，弃去下层液体，再加约2ml蒸馏水洗净并去除水层，用滴管吸出正己烷层，移至另一装有无水硫酸钠的漏斗中脱水，将脱水后的溶液在70℃水浴上加热浓缩，定容至1ml，待上机测试用。
此标准系类中DHA或EPA的浓度依次为0.5、1.0、2.5mg/mL。
6 气相色谱测定
6.1色谱柱
玻璃柱1m×4mm(id)，填充涂有10%DEGS/Chromosorb W DMCS 80目-100目的担体。
6.2气体及气体流速
氮气50mL/min 、氢气70mL/min 、空气100mL/min 。
6.3系统温度
色谱柱185℃、进样口210℃、检测器210℃。
7测定
7.1 标准曲线制作：分别吸取经甲酯化处理后的标准溶液 1.0μL ，注入气相色谱仪中，可测得不同浓度EPA 甲酯、DHA 甲酯的峰高，以浓度为横坐标，相应的峰高相应值为纵坐标，绘制标准曲线。
7.2 把经甲酯化处理后的样品溶液1.0μL-5.0μL 注入气相色谱仪中，以保留时间定性，以测得的峰高响应值与标准曲线比较定量。
8计算
8.1 海鱼类（以脂肪计）按下式计算： X=2
13V m V V A ⨯⨯⨯ 8.2 鱼油制品按下式计算：
2
13V m V V A X ⨯⨯⨯= 8.3 添加食品按下式计算：
m
V A X 3⨯= 式中：
X ——试样中二十碳五烯酸或二十二碳六烯酸的含量，单位为毫克每克（mg/g ）； A ——被测定样液中二十碳五烯酸或二十二碳六烯酸的含量，单位为毫克每毫升（mg/mL ）；
V1——鱼油和海鱼类试样皂化前定容总体积，单位为毫升（mL ）；
V2——鱼油和海鱼类试样用于皂化样液体积，单位为毫升（mL ）；
V3——样液最终定容体积，单位为毫升（mL ）；
m ——样品的质量，单位为克（g ）。
计算结果保留两位有效数字。
9精密度
在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不得超过算术平均值的15%。