应用微生物学实验
医学微生物学实验技术
咽拭子、粪便、血液等。
样品保存与运输
03
采集后尽快送检，如需暂存，应选择合适的保存条件和运输方
式，避免样品变质或污染。
分离与纯化方法选择依据
微生物种类与特性
不同微生物具有不同的生长特性和营养需求，需选择适合的分离 与纯化方法。
样品来源与污染程度
样品来源和污染程度不同，需采用不同的分离与纯化策略。
实验目的灭菌
对实验器材、培养基等进行严 格消毒或灭菌处理，防止微生 物污染。
废弃物处理
对实验废弃物进行分类、收集 和处理，避免对环境和人员造
成危害。
03
微生物分离与纯化技 术
微生物样品采集与处理方法
采集工具与容器选择
01
无菌棉签、无菌吸管、无菌容器等，确保采集过程中不污染样
品。
采集部位与方法
02
根据微生物种类和感染类型，选择合适的采集部位和方法，如
利用PCR技术可以特异性地扩 增微生物的某个或某些基因片 段，实现快速、灵敏的微生物 检测和鉴定。
将大量的微生物基因探针固定 在芯片上，通过与待测微生物 样品的杂交反应，可以一次性 检测多种微生物的存在和种类 。
通过直接提取环境样品中的全 部微生物DNA进行测序和分析 ，可以研究微生物群落的组成 、结构和功能，为微生物生态 和进化研究提供新视角。
的利用能力和酶活性。
应用领域
生理生化鉴定技术广泛应用于临 床微生物学、食品微生物学、环 境微生物学等领域，用于检测和 鉴定病原微生物、食品污染菌等
。
分子生物学鉴定技术进展
基因测序技术
聚合酶链式反应（PCR）
生物芯片技术
宏基因组学技术
通过测定微生物的基因组序列 ，可以准确鉴定微生物的种类 和遗传特征，为微生物分类和 进化研究提供有力手段。
医学微生物学实验
医学微生物学实验在医学领域中，微生物学实验扮演着至关重要的角色。
它们为研究人员提供了了解微生物的生长、传播和致病机制的机会。
本文将探讨医学微生物学实验的不同类型和其在医学研究中的应用。
一、培养实验培养实验是最基本的微生物学实验之一。
通过将微生物接种到特定培养基上，并为其提供适宜的环境条件，可以促进微生物的生长和增殖。
培养实验还可用于鉴定微生物的种类和性质。
例如，革兰氏染色法可以帮助鉴定细菌是否为革兰氏阳性或革兰氏阴性。
此外，培养实验也可以用于测试微生物对不同药物的敏感性。
二、抗生素敏感性实验抗生素敏感性实验是评估微生物对抗生素的敏感性的重要方法。
这些实验可以帮助医生选择最合适的抗生素治疗方案，以对抗细菌感染。
一种常用的抗生素敏感性实验是纸片扩散法，它通过在琼脂平板上置放含有不同抗生素的纸片来观察微生物对抗生素的反应。
根据纸片周围形成的抑制区域大小，可以推测微生物对抗生素的敏感性。
三、酶活性实验酶活性实验用于评估微生物代谢过程中酶的活性和效率。
这些实验可以帮助我们了解微生物对特定底物的降解能力以及其在生物合成中所起的作用。
例如，过氧化氢酶活性实验可以检测细菌的生产氢过氧化物的能力，这对于了解某些微生物的致病机制非常重要。
四、PCR实验聚合酶链反应（PCR）是一种常用的分子生物学技术，用于扩增和检测微生物DNA的特定片段。
这种实验可以快速、准确地鉴定微生物的种类和亚型。
PCR实验在病毒检测、感染病原体鉴定以及基因突变的检测上有着广泛的应用。
五、流式细胞术流式细胞术是一种用于分析和分离微生物细胞的高级技术。
它通过将微生物细胞与荧光染料结合，以区分不同类型的细胞，并通过流式细胞术仪对其进行计数和分类。
这种实验可以帮助研究人员迅速而准确地了解微生物种群的组成和动态变化。
六、抗体检测实验抗体检测实验用于检测微生物感染引起的免疫反应。
这些实验可以检测患者体内的特定抗体是否存在，并确定感染的类型和程度。
例如，ELISA实验可以检测人体内是否存在病毒抗体，从而判断是否感染了某种病毒。
微生物学实验技术的应用
微生物学实验技术的应用微生物学实验技术是研究微生物的重要手段，广泛应用于医学、环境科学、食品工业、农业等领域。
本文将围绕微生物学实验技术的应用展开阐述。
一、微生物学实验技术在医学中的应用微生物学实验技术在医学中起着重要的作用。
例如，在病原微生物的检测和鉴定中，常用的实验技术包括细菌培养、PCR法、酶联免疫吸附试验（ELISA）等。
这些技术可用于快速准确地检测和鉴定病原微生物，为临床诊断和治疗提供依据。
此外，微生物学实验技术还广泛应用于抗菌药物的研发和耐药性检测等方面，为临床治疗提供了强有力的支持。
二、微生物学实验技术在环境科学中的应用环境中的微生物是一种重要的生物指示器，可以反映环境的污染程度和生态系统的健康状况。
微生物学实验技术可以用来监测环境中的微生物多样性和群落结构，分析微生物在环境中的分布和变化规律。
例如，通过分析水体、土壤和大气中的微生物群落，可以评估环境的污染程度和生态系统的稳定性。
此外，微生物学实验技术还可以用来研究微生物对环境因子的响应和适应机制，为环境保护和生态修复提供科学依据。
三、微生物学实验技术在食品工业中的应用微生物学实验技术在食品工业中起着重要的作用。
例如，在食品的质量检测和卫生监测中，常用的实验技术包括微生物培养、PCR法、酶活性检测等。
这些技术可用于检测食品中的致病微生物和食品安全指标，确保食品的质量和安全。
此外，微生物学实验技术还可以用于食品发酵工艺的研究和优化，提高食品的品质和营养价值。
四、微生物学实验技术在农业中的应用微生物学实验技术在农业中具有广泛的应用前景。
例如，在农作物的病害防治中，可以利用微生物学实验技术筛选和应用有益微生物，如生物农药和生物肥料，实现绿色农业的可持续发展。
此外，微生物学实验技术还可以用于土壤微生物的监测和调控，提高土壤的肥力和抗逆性。
另外，微生物学实验技术还可以用于农产品的质量检测和加工改良，提高农产品的商品价值和市场竞争力。
微生物学实验技术在医学、环境科学、食品工业和农业等领域具有广泛的应用。
微生物学在医学中的应用
微生物学在医学中的应用微生物学是研究微生物（包括细菌、病毒、真菌、寄生虫等）的科学，它有着广泛的应用，其中医学领域是它应用最广泛的一个方向。
微生物学在医学中的应用主要包括以下几个方面。
一、微生物在疾病诊断中的应用1.细菌培养细菌培养是细菌学中最基本的实验技术之一，也是诊断病原菌最重要的手段之一。
通过培养，可以得到细菌的单一纯种，进一步进行鉴定和药敏试验，确定病原菌种类和药物敏感性，为治疗提供依据。
2.病毒检测病毒是许多传染病的致病根源，病毒检测可以帮助医生和研究者诊断病毒性疾病，制定相应的治疗方案。
病毒检测的方法包括血清学检测、PCR技术、免疫荧光等方法，其中PCR技术是目前常用的高效病毒检测技术之一。
3.真菌检测真菌感染是一种非常常见的疾病，真菌检测帮助医生确定感染类型和严重程度，所以也是非常重要的。
真菌检测常用的方法包括真菌培养、快速真菌检测技术、血清学检测等。
4.寄生虫检测寄生虫感染是一些热带地区经常出现的疾病，寄生虫检测有助于确定感染类型、严重程度和治疗方案。
寄生虫检测常用的方法包括血液检测、粪便检测、尿液检测等。
二、微生物在药物研发中的应用微生物在药物研发中有着重要作用，其中包括以下几个方面。
1.抗生素的发现和研制抗生素是临床上治疗细菌性感染必不可少的药物之一，而绝大部分抗生素都是从微生物中发现并提取出来的。
比如，青霉素最初就是由青霉属真菌所产生的一种抗生素，而阿奇霉素则是由镰刀菌属真菌所产生的一种。
2.疫苗的研发疫苗是预防传染病的最有效工具之一，大部分疫苗都是以微生物基础研究为基础的。
例如，百日咳疫苗是由百日咳杆菌制备的，流感疫苗则是由多种不同的流感病毒制备并混合而成的。
3.药物筛选微生物在药物筛选中也起到了重要的作用。
在药物研发过程中，首先需要在大量微生物中筛选出具有治疗效果的化合物，这些化合物可以被人工合成为新药，并用于临床治疗。
其中，金黄色葡萄球菌和大肠杆菌等细菌常常被用于药物筛选。
微生物实验报告
微生物实验报告实验目的，通过观察微生物在不同环境条件下的生长情况，了解微生物的生长规律，为微生物在工业生产和生活中的应用提供参考。
实验材料，琼脂培养基、试管、无菌移液器、培养皿、恒温培养箱、显微镜等。
实验步骤：1. 准备琼脂培养基，将琼脂培养基加热至液态状态后倒入培养皿中，待琼脂凝固后，用无菌移液器在琼脂表面均匀涂抹微生物样本。
2. 将涂有微生物样本的培养皿放入恒温培养箱中，设置不同的温度和湿度条件，观察微生物的生长情况。
3. 每隔一定时间，取出培养皿观察微生物的生长情况，记录下微生物的数量、形态和颜色等信息。
4. 利用显微镜对微生物进行观察和拍摄，进一步了解微生物的细胞结构和生长状态。
实验结果：在25摄氏度和相对湿度为60%的条件下，大肠杆菌的生长速度最快，菌落数量呈指数增长；在30摄氏度和相对湿度为70%的条件下，酵母菌的生长状况最佳，菌落呈现出圆润饱满的状态；而在20摄氏度和相对湿度为50%的条件下，霉菌的生长速度最慢，菌落数量增长缓慢。
结论：通过本次实验，我们发现微生物的生长受到环境条件的影响很大，不同的微生物在不同的温度和湿度条件下有着不同的生长规律。
这为微生物在工业生产中的应用提供了重要的参考，也为我们更好地了解微生物的生长特性提供了依据。
在今后的实验中，我们将进一步探究微生物在不同营养条件下的生长情况，以及微生物在不同环境条件下的代谢特性，为微生物的应用和研究提供更多的数据支持。
通过本次实验，我们对微生物的生长规律有了更深入的了解，也为微生物在工业生产和生活中的应用提供了更多的可能性。
希望本次实验结果能够对相关领域的研究和应用产生积极的影响。
微生物学实验知识点总结与实践应用
微生物学实验知识点总结与实践应用微生物学实验是一门非常重要的课程，它不仅能够帮助我们更深入地理解微生物的特性和生命活动，还能培养我们的实验技能和科学思维。
在这篇文章中，我将对微生物学实验的一些重要知识点进行总结，并探讨它们在实际中的应用。
一、微生物的培养与观察（一）培养基的制备培养基是微生物生长和繁殖的营养基础。
常见的培养基有固体培养基、液体培养基和半固体培养基。
制备培养基时，需要准确称量各种成分，按照一定的比例混合，并调节 pH 值。
例如，牛肉膏蛋白胨培养基常用于培养细菌，而马铃薯葡萄糖培养基则适用于真菌的培养。
（二）无菌操作技术在微生物实验中，保持无菌环境至关重要。
无菌操作包括使用无菌器材、在无菌工作台上操作、对实验材料进行灭菌处理等。
常用的灭菌方法有高压蒸汽灭菌、干热灭菌和过滤除菌。
（三）微生物的接种与培养接种是将微生物引入培养基的过程。
可以通过平板划线法、稀释涂布平板法等方法进行接种。
接种后的培养基需要在适宜的温度、湿度和氧气条件下进行培养。
不同的微生物有不同的培养条件，例如，大多数细菌在 37℃下培养，而真菌则在 28℃左右培养。
（四）微生物的观察通过显微镜观察微生物的形态和结构是微生物学实验的重要内容。
显微镜的类型包括光学显微镜和电子显微镜。
在光学显微镜下，可以观察到微生物的细胞形态、大小、排列方式等。
染色技术可以增强微生物的对比度，便于观察。
二、微生物的生理生化特性（一）酶活性的测定微生物产生的各种酶在其生命活动中起着重要作用。
例如，淀粉酶可以分解淀粉，蛋白酶可以水解蛋白质。
通过测定酶的活性，可以了解微生物的代谢能力。
（二）糖发酵试验某些微生物能够发酵特定的糖类，产生酸和气体。
通过观察培养基中的指示剂颜色变化和气泡产生情况，可以判断微生物是否具有发酵某种糖的能力。
（三）吲哚试验用于检测细菌是否能够产生色氨酸酶，分解色氨酸产生吲哚。
吲哚与试剂反应产生红色物质，从而判断试验结果。
三、微生物的遗传与变异（一）基因突变微生物在生长过程中可能会发生基因突变，导致其性状发生改变。
微生物学实验技术
微生物学实验技术
微生物学实验技术是研究和发掘微生物的重要方法，也是一门多种实验技术和方法的
综合。
它既可以应用于生物体内，对微生物调查，可以使用培养基或特定介质进行鉴定，
也可以用来通过遗传工程分离、改造微生物，了解不同微生物的全部 trait 特性。
一、培养微生物
培养微生物是一种最常用的微生物实验技术，需要使用特定的培养基，通过控制温度、湿度等变量的变化来培养不同的微生物。
通过检测培养基中的微生物数量及某些代表性特征，可确定微生物的分类特征，来鉴定微生物的种类和形式。
二、基因组测序
基因组测序是一种实验技术，是分析一个微生物种类全部 genetic 的方法。
主要利
用高通量DNA测序技术，对样品中贮藏的 DNA 进行范围检测，得到 DNA 的测定序列，从
而确定微生物的遗传结构、物种种类，以及特定物种生态和功能特征。
三、共价法抗菌药敏试验
共价法抗菌药敏试验是研究微生物对一类药物或多类药物的抗性程度的重要方法之一。
通过检测药物剂量的不同，在药物浓度相同的情况下微生物在某种时间内生长情况不同，
来确定微生物对某种药物或多类药物的抗性情况。
四、特异性提取
特异性提取是一种以特定方法从微生物中提取出特定“ biomolecule ”，比如 DNA、蛋白质等，分离和纯化微生物某功能元件或特征分子的实验技术。
这种技术既可以提取大
量的基因片段，也可提取微量的特异性物质。
五、遗传修饰
遗传修饰是一种利用遗传工程改造或添加微生物特定遗传物质来改变微生物的特性的
实验技术，常用来进行分子育种和改良育种，以提高产品的质量和性能。
微生物学实验报告
微生物学实验报告实验一普通光学显微镜的使用及细菌染色与形态观察第一部分：显微镜的使用一、目的要求1．熟悉普通光学显微镜的构造、油镜的使用原理和显微镜的维护方法。
2．学会正确使用油镜观察细菌的基本形态和特殊构造。
3．了解各种显微镜的主要特征。
二、实验原理（一）光学显微镜的构造微生物实验室中最常用的是普通光学显微镜，它的构造可分为机械部分和光学部分。
1、机械部分普通复式光学显微镜的机械部分通常包括以下几个部分：目镜、镜筒、基座回转器、物镜、载物台、光圈、聚光器、光源、镜臂、细调节器、粗调节器等。
2、光学部分：目镜、物镜、聚光器、光圈、光源。
（二）放大倍数标本首先经物镜放大，在目镜的焦距平面上形成一个实像，再经过目镜放大成最终的虚像。
总的放大倍数是物镜放大倍数与目镜放大倍数的乘积。
物镜的放大倍数愈大，其工作距离（物镜镜头到标本片之间的距离）愈短，这时光圈就要打开得愈大。
显微镜的性能受物镜的分辨距离或分辨力所限制。
分辨距离即透镜所能分辨的两个物点之间的最小距离，分辨距离愈小，透镜的分辨力愈高，物像也就愈清晰。
因此常以分辨距离来衡量显微镜的分辨力。
R=0.61λ/N.A式中：R-----分辨距离；λ------作用光的波长；N.A------数值口径。
一些介质的折射率介质折射率空气水玻璃香柏油1 13 55 1.56三、实验内容（一）材料：显微镜，香柏油，擦镜纸。
（二）方法：细菌很小，须使用油镜方可观察到。
油镜是显微镜上最重要的部件之一，观察时与玻片非常接近，稍不小心即可压碎玻片，更严重的是损坏镜头，故必须极其仔细地学习油镜的使用方法：1、为使低倍镜取得最适之光源，可将低倍镜头调节到离载物台约1cm的高度，将聚光器提高，光圈完全打开，然后调节电压旋钮至视野最合适。
2、滴一滴香柏油，固定于载物台上，用推动器调节到载物台正中。
在双目侧视下，下旋粗调节器，使油镜头浸入油中几乎与标本片相接触。
然后眼睛从目镜观察（如光线不足，可适当增大电源电压），徐徐上旋粗调节器至看到模糊物像之后，再用细调节器调节以使物像清晰。
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一、目的和要求 掌握了解食用菌组织分离的方法和实际操作技术，明确食用菌组织
分离在食用菌生产中的重要性。 二、原理
用子实体的某一部分来分离菌种的方法，称为组织分离法。组织分 离法简便，后代不易发生变异，能保持原菌株的优良特性。组织分离法 是利用菇类组织块能再生成菌丝的特性获得纯种的一种简捷方法，是野
和普通牛奶相比，酸奶的最大特点是含有大量活着的微生物，是具 有生命力“活”着的特殊食品。酸奶中的微生物根据它们功能分为2大 类： 1．发酵用乳酸菌：是指那些起源于奶制品长期用于酸奶制造的乳 酸菌。
2．生物活性用乳酸菌：是近年从人体分离、驯化而成具有特定生 物活性的乳酸菌，基本都是后述的益生菌。
发酵用乳酸菌主要用途是决定酸奶风味及口感，关系到酸奶本身的 商品价值。生物活性用乳酸菌是用于强化酸奶营养价值，使它具有某些 传统酸奶所不具备的生理功能，满足人们健康上的特殊需要。由于现存 的生物活性用乳酸菌(益生菌)的大多数因是来自人体，在牛奶里生长发 育缓慢，代谢产物除了乳酸以外还有其他多种挥发性物质，风味上差强 人意。因此多数情况下，都是同时混合利用这2类乳酸菌。
PDA培养基：Slice potatoes thin. Add 1000ml of water, immediately to prevent Oxidtion of juice and boil until soft. (approximately 30min.). Filter through cotton-cloth. Autoclave at 115℃ for 20 minutes.（注：取去皮马铃 薯200克，切成小块，加水1000毫升煮沸30分钟，滤去马铃薯块，将滤 液补足至1000毫升，加葡萄糖20克，琼脂15克，溶化后分装，15磅灭菌 30分钟。） 四、实验步骤
1.将脱脂乳和水以1:7～10(W/W)的比例，同时加入5%--6%蔗糖，充 分混合，于80～85℃灭菌10～5min，然后冷却至35～40℃，作为制作饮 料的培养基质。
2.将纯种嗜热乳酸链球菌、保加利亚乳酸杆菌及两种菌的等量混合 菌液作为发酵剂，均以2%～5%的接种量分别接入以上培养基质中即为 饮料发酵液，亦可以市售鲜酸乳为发酵剂，接种后摇匀，分装到已灭菌 的酸乳瓶中，每一种菌的饮料发酵液重复分装3～5瓶，随后将瓶盖拧紧 密封。
如种菇已受雨淋，吸水较多，应取菌褶作为接种材料。 组织分离后将试管外面放在恒温箱中培养。待组织块周围萌发出菌 丝，并向 培养基蔓延生长后，再挑取生长健壮的菌丝进行转管培养。 组织分离法操作简便，又不易带入杂菌，容易获得纯菌种。但对银 耳、黑木耳等胶质菌；因其子实体中菌丝的含量极少，如用组织分离培 养，则往往不易成功。 五、实验结果 根据观察结果比较两菌种间菌丝生长情况和同一菌种不同部位组织 分离后菌丝生长情况，评价何种部位更适宜该菌种的组织分离繁殖，并 对操作的各个环节提出改进建议。 六、注意事项 （1）此法对于胶质的耳类及菇体较小较薄的菇类，如金针菇等不 太适宜。 （2） 此法应严格遵循无菌操作。 （3）子实体在升汞溶液中消毒时间应严格按规定时间进行，漂洗 要迅速，否则子实体受损太大，影响效果。 七、思考题 如何避免因污染而造成的组织分离的失败？
在食用菌生产中，采用组织分离的方法繁殖母种是大多数菌类普遍 采用的方法。而组织分离成功与否是与种菇子实体的选择、分离过程中 的操作方法等分不开的，这直接关系到所繁菌种的优劣。因此食用菌组 织分离是食用菌生产中的重要环节之一。 三、材料和用具
培养皿；试管斜面培养基；平菇、金针菇或蘑菇较成熟的子实体； 酒精灯，接种针，75%酒精，甲醛；高锰酸钾；新洁尔灭消毒液以及温 箱；冰箱等。
(2)计算公式: 乳酸/g·(100mL)-1=(V×M×△ε×D)÷1000×ε×1×Vs V：比色液最终体积(3.44mL) M：乳酸的克分子重量(lmol/l=90g) △ε：(A2-A1)-(B2-B1) D：稀释倍数(10) ε：NADH在340nm吸光系数(6.3×103×l×mol-1×cm-l) 1：比色皿的厚度(0.1cm) Vs：取样体积(0.2mL) (3)测定乳酸试剂的配制(见附录) 3.酸乳的检查指标 ①感观指标：酸乳凝块均匀细腻，色泽均匀无气泡，有乳酸特有的 悦味 ②合格的理化指标：如脂肪≥3%，乳总干物质≥11.5%，蔗糖 ≥5.00%，酸度70～110T，Hg<0.01×10-6mg/mL等；③无致病菌，大肠菌 群≤40个/100m L。
不管是何种酸奶，其共同的特点都是含有乳酸菌。这些乳酸菌在人 体的肠道内繁殖时会分泌对人体健康有益的物质，因此酸奶对人体有较 多的好处：一是能将牛奶中的乳糖和蛋白质分解，使人体更易消化和吸 收；二是酸奶有促进胃液分泌、提高食欲、加强消化的功效；三是乳酸 菌能减少某些致癌物质的产生，因而有防癌作用；四是能抑制肠道内腐 败菌的繁殖，并减弱腐败菌在肠道内产生的毒素；五是有降低胆固醇的 作用，特别适宜高血脂的人饮用。
BCG牛乳培养基，乳酸菌培养基，脱脂乳试管，脱脂乳粉或全脂乳 粉，鲜牛奶，蔗糖，碳酸钙。
恒温水溶锅，酸度计，高压蒸汽灭菌锅，超净工作台，培养箱，酸 乳瓶(200～280mL,)，培养皿，试管，300mL三角瓶。
BCG牛乳培养基： （A）溶液：脱脂乳粉100g，水500ml，加入1.6%溴甲酚绿（B. C. G）乙醇溶液1mL，80℃灭菌20min。 （B）溶液：酵母膏10g，水500mL，琼脂20g，pH 6.8，121℃湿热 灭菌20min。以无菌操作趁热将（A)、（B）溶液混合均匀后倒平板。 乳酸菌培养基（CMRS）： 蛋白胨 5g； 牛肉膏 5 g ； 酵母浸膏 2.5 g ； 乳糖 7.5 g； 土 温80 0.5ml； 磷酸氢二钾 1g ； 乙酸钠2.5g ； 柠檬酸二铵1g ； 七 水硫酸镁0.1g ； 四水硫酸锰0.1g ； 番茄汁 50ml； 琼脂条9g；
外采集菌种和食用菌栽培中防止品性退化，保持优良品种特性常用的一 种手段。此法适宜多数食用菌，是野外工作者和种菇专业户必须掌握的 一种方法。
组织分离最好采用正处于旺盛生长中的幼嫩子实体或菇蕾作为分离 材料，采取菌盖与菌柄交接处的组织进行分离，效果最好，对于那些有 内或外菌幕保护的菇类来说,取在菌幕保护下的幼嫩菌褶接种，生活力 更加旺盛。对于某些菌根菌，则取用靠近基部的菌柄组织才能成活。
凝乳情况
口感
香味
异味
pH值
结论
ห้องสมุดไป่ตู้
六 问题和思考 1、发酵酸乳为什么能引起凝乳？ 2、为什么采用乳酸菌混合发酵的酸乳比单菌发酵的酸乳口感和风味更 佳？ 3、试设计一个从市售鲜酸乳中分离纯化乳酸菌的制作乳酸菌饮料的程 序。
附录： 1、乳酸检测方法
定性测定：取酸乳上清液的10mL于试管中，加入10% H2SO4 1mL, 再加2% KMnO4 1mL，此时乳酸转化为乙醛，把事先在含氨的硝酸溶液 中浸泡的滤纸条搭在试管口上，微火加热试管至沸，若滤纸变黑，则说 明有乳酸存在，这里因为加热使乙醛挥发的结果。
在实验室中可以用“稀释涂布平板法”“平板划线法”来分离细菌。通 常培养后通过观察细菌的菌落可以辨别是哪种细菌，也可以在培养基中 加入特定的染色试剂使特定的细菌染色来观察。 三、实验材料和用具
嗜热乳酸链球菌(Streptococcus thermophilus)，保加利亚乳酸杆菌 (Lactobacillus bulgaricus)，乳酸菌种也可以从市场销售的各种新鲜酸乳 或酸乳饮料中分离。
选用的子实体先经0.1％开汞水或70％酒精表面消毒后。用无菌水 冲洗并用无菌纱布擦去表面水分。
如分离香菇时用无菌解剖刀自菌柄处切开少许，再用手将子实体掰 开为二，在菌盖与菌褶交界处，切取0.3～0.4立方厘米的一小块菌肉， 移放在斜面培养基中央。如已开伞的种菇、则选菌盖与菌柄交界处的菌 肉。
分离草菇时，用无菌解剖刀把菌蕾纵切少许；再用手把菌盖轻轻剥 开，在菌柄上方和菌盖交界处，切取1～5毫米的细块，接在斜面培养基 中。
实验一、酸奶生产菌的分离纯化及应用
一、实验目的和内容 学习乳酸发酵和制作乳酸菌饮料的方法，了解乳酸菌的生长特性。
内容包括：1.从新鲜酸乳中进行乳酸菌的分离纯化；2.乳酸发酵及检 测；3.乳酸菌饮料制作；4.自制乳酸质量品尝。 二、原理
酸奶是鲜奶经过乳酸菌发酵而制成的乳制品，具备鲜奶的全部营养 成分。酸奶含有人体必需的蛋白质、脂肪、维生素、矿物质、乳糖酶和 活性乳酸菌等。酸奶是采用优质纯鲜牛奶加入白糖均质，经超高温灭菌 后接入乳酸菌发酵后制成的一种发酵型乳制品。在发酵过程中，鲜牛奶 中的酪蛋白遇酸凝固，成为有弹性的凝块，颜色乳白、气味清香、酸甜 可口，别具一番风味。乳酸菌具有把奶类中的乳糖，分解成乳酸的功 能，称为乳酸发酵。在形成乳酸的同时也产生其他一些酸类物质，从而 导致了PH 值的下降，当达到乳类蛋白质的等电点时（如牛奶蛋白质的 等电点约在PH4.5 左右），引起蛋白质的沉淀，使原来流动性较大的乳 类，因凝固作用而变成类似果冻的胶状物，称之为“凝乳”。
4.作为卫生合格标准还应按卫生部规定进行检测，如大肠菌群检测 等。经品尝和检验，合格的酸乳应在4℃条件下冷藏，可保存6～7d。 五,实验报告
1. 乳酸发酵过程，检测结果及结果分析。 2. 将发酵的酸乳品评结果记录于表1中;
品评项目
表1 乳酸菌单菌及混合菌发酵的酸乳品评结果
球菌
杆菌
球菌杆菌混合 (1:1)
定量测定： (1)测定方法：取稀释10倍的酸乳上清液0.2mL，加至3mL pH9.0的 缓冲液中，再加入0.2mL NAD溶液，混匀后测定OD340nm值为A1，然
后加入0.02mL L(+)LDH，0.02 D(一)LDH，25℃保温lh后测定OD340nm 值为A2。同时用蒸馏水代替酸乳上清液作对照，测定步骤及条件完全 相同，测出的相应值为Bl和B2。
加入500ml蒸馏水中加热溶解，调pH值为 6.8，115℃，灭菌15分 钟。