反相硅胶柱色谱
反相 液相色谱柱 类型
反相液相色谱柱类型1.引言1.1 概述反相液相色谱（reversed-phase liquid chromatography, RP-LC）是指在液相色谱中使用极性流动相和非极性固定相的一种分离技术。
相比于传统的正相液相色谱，反相液相色谱更为常用，其应用领域涵盖了许多不同的样品类型和化学物质。
在反相液相色谱中，固定相通常由选择性的疏水性填料组成，而流动相则是一种较为极性的有机溶剂和水的混合物。
当样品在流动相中被注入柱子时，根据样品分子与固定相之间的相互作用力，不同成分将以不同的速率被分离。
这种分离的基本原理是根据分析物分子的极性差异来实现的。
反相液相色谱柱的选择也是非常重要的，不同类型的柱子具有不同的特点和分离效果。
例如，C18柱是最常用的反相液相色谱柱之一，其固定相表面上有十八个碳原子，对中等极性物质具有良好的分离效果。
另外，还有C8柱、C4柱等，它们根据碳原子数的不同而具有不同的分离能力。
总体而言，反相液相色谱柱是一种非常重要和广泛应用的色谱技术。
它在药物分析、环境监测、食品安全检测等领域发挥着重要的作用。
本文将详细介绍反相液相色谱柱的类型以及它们的特点和应用，希望能够为读者对该领域的了解提供一定的帮助。
1.2 文章结构本文将按照以下结构来展开讨论反相液相色谱柱类型。
在引言部分，我们将首先进行概述，介绍反相液相色谱柱的基本概念和重要性。
接着，我们会详细说明全文的结构和组织方式，以便读者能够清楚地了解文章的整体框架。
最后，我们会明确阐述本文的目的，即为读者提供关于反相液相色谱柱类型的全面指南。
在正文部分，我们将分为两个主要要点进行讨论。
首先，我们将介绍反相液相色谱柱类型的基本原理和特点。
这个要点的主要目的是使读者了解反相液相色谱柱的工作原理和它们在分析化学中的应用。
接着，我们将详细介绍不同类型的反相液相色谱柱，例如C18、C8、Phenyl等。
我们将对每种类型的反相液相色谱柱进行描述和比较，以便读者能够理解它们之间的差异和选择适合自己的柱子。
十八烷基硅烷键合硅胶和苯基硅烷键合硅胶色谱柱
十八烷基硅烷键合硅胶和苯基硅烷键合硅胶色谱柱
十八烷基硅烷键合硅胶色谱柱和苯基硅烷键合硅胶色谱柱都是常见的色谱分析柱。
十八烷基硅烷键合硅胶色谱柱是以硅烷键合剂（硅烷连接剂）为基础，在硅烷链上进一步键合上十八烷基团而制得。
这种柱适用于用逆相液相色谱法分离非极性或微极性化合物，如脂肪酸、脂类、杂环化合物、酚类、酮类等。
该柱具有较高的耐酸碱能力和良好的稳定性。
苯基硅烷键合硅胶色谱柱是以硅烷键合剂为基础，在硅烷链上进一步键合上苯基团而制得。
这种柱适用于用反相液相色谱法分离非极性或微极性化合物，如芳香烃、苯酚、酮类、杂环化合物等。
苯基硅烷键合硅胶色谱柱具有较高的分离效果和良好的稳定性。
总的来说，十八烷基硅烷键合硅胶色谱柱适合分离疏水性化合物，而苯基硅烷键合硅胶色谱柱适合分离芳香性化合物。
选择适合的柱子可以更好地进行分析和检测。
TSK-GEL
特性
�
用途
酰胺-80 键合相不会与还原 糖起化学反应（不同于氨基 柱）。
稳定的键合相
� �
可与蒸发光散射（ELSD）及 质谱（MS）检测器一起使用。 最高操作温度：80°C。
TSKgel Amide-80
独特的极性相
� �
保留极性候选药物与药物代 谢产物。 分离极性范围更广的样品。
在 100%有机淋洗液中表现稳定
P/N
21864 21865 21866 21867 20009 20010 21486 21487 19694 19695 19696 19697 19532 19533 13071 14459 14460
Description
TSKgel Amide-80 TSKgel Amide-80 TSKgel Amide-80 TSKgel Amide-80 TSKgel Amide-80 TSKgel Amide-80 TSKgel Amide-80 TSKgel Amide-80 TSKgel Amide-80 TSKgel Amide-80 TSKgel Amide-80 TSKgelAmide-80 TSKgel Amide-80 TSKgel Amide-80 TSKgel Amide-80 TSKgel Amide-80 TSKgel Amide-80
TSKgel ODS-100V 3um TSKgel ODS-100V 5um
� C18 配体密度相对较低（15% C） ，能提高润湿性并延长极性 化合物的保留时间。 � � 能在 100%含水流动相条件下 使用。 适用于复杂化合物 （包括酸性、 碱性、 两性离子和螯合化合物） 的分析。 � �
TSKgel ODS-100Z 3um TSKgel ODS-100Z 5um
TSKGEL色谱柱的清洗(中文)
吸附的主要原因 反相硅胶柱填充介质（固定相）与样品间常常会发生下列吸附现象： （1） 残存硅醇基与碱性物质间的离子吸附； （2） 硅胶表面的金属杂质与金属配位物质间的吸附； （3） 疏水性极强的物质在柱中的蓄积。 以上现象，会引起反相色谱柱柱效下降、拖尾、重复性不良等状况的发生。
清洗方法 1、疏水性物质的去除 使用有机溶剂（乙腈、甲醇、乙腈与 THF 的混合溶剂）进行清洗。 考虑样品成分对于有机溶剂的溶解性，选用比淋洗液浓度高的有机溶剂、或选用极性较低的有机溶 剂进行过柱清洗。这种情况下，有必要注意淋洗液中盐的析出现象。 2、碱性物质（金属配位物质）的去除 使用酸性水溶液与有机溶剂的混合液（0.1%磷酸、0.1%TFA/乙腈、 甲醇的混合液）进行过柱清洗。 *一般来说，清洗时间可选择为过柱 5-10 个柱体积便可。 在附吸成分其吸附力极强时，即使进行过清洗，柱性能也有可能得 不到恢复。另外，请充分考虑淋洗液的 pH 值，以避免损坏色谱柱。
清洗方法
☆硅胶基质分子尺寸排阻色谱柱 根据上述发生的吸附现象，结合测定样品的具体信 息，请选择下列合适的柱清洗方法。 ☆树脂基质分子尺寸排阻色谱柱 1、离子性吸附 对于阳离子性吸附物质，通过提高盐浓度进行过柱 清洗。 （1mol/L 的醋酸缓冲液） 2、疏水性吸附 对于疏水性吸附物质，可通过提高有机溶剂的浓度 （PW ·PW XL：50%、α 及 SuperAW ：100%可） 进行过柱清洗。 3、复合吸附 对于阳离子性·疏水性物质的去除，可提高盐浓度 进行过柱，水洗后，提高有机溶剂浓度进行过柱。 *一般来说，清洗时间可选择为过柱 5-10 个柱体积便可。 在附吸成分其吸附力极强时，即使进行过清洗，柱性能也有可能得 不到恢复。另外，请充分考虑淋洗液的 pH 值，以避免损坏色谱柱。 1、碱性物质的去除（离子性吸附） 通过提高淋洗液的盐浓度（通常 0.5mol/L）进行过柱清洗。 2、疏水性吸附的去除（疏水性吸附） 在淋洗液中添加甲醇、乙腈（10-20%）等水溶性有机溶剂 进行过柱清洗。本法请注意缓冲液中盐的析出。 3、在淋洗液中添加尿素、中性界面活性剂 在淋洗液中添加 6-8mol/L 的尿素或 0.2-0.3%的中性界面 活性剂（Triton、Tween、Brij 等）后进行过柱清洗。但需 注意尿素及界面活性剂的柱中残留。
ODS-反相柱层析
ODS 反相柱层析（开放柱）2011-05-31 23:55：10| 分类：专业知识笔记|字号订阅ODS(octadecyl silane）即十八烷基硅烷,是以硅胶为基质键合的C18填料,属于反相色谱。
ODS柱色谱，简单地说，就是指用ODS装成的色谱柱。
开放”是指未对色谱柱施加任何压力，让其在重力作用下洗脱；相对于开放ODS柱色谱，有中低压柱色谱,高低柱色谱等等。
平时所说的反相HPLC,一定程度上来也可以说是ODS柱色谱，它的分离效果更好，同时连接了UV、DAD、ELSD等检测手段,其实质还是属于反相柱色谱。
适用范围：对于极性，ODS适合用于分离极性中等偏大的化合物。
对于极性较小的化合物,应该考虑用硅胶、凝胶等手段进行分离纯化，绝对不要尝试ODS，唯一的后果只能是:样品全部死吸附，根本不可能洗脱！!（*＊**不确定r）对于化合物类型,ODS对黄酮苷类、环烯醚萜苷类、糖苷类等成分都能有一定的分离效果,也有很多成功的分离纯化实例。
但是，对于苷元类化合物，则需要慎重考虑,其实还是极性大小的问题：苷元类化合物，一般极性较小。
装柱、上样、洗脱装柱：新买来的ODS,用甲醇浸泡过夜后即可装柱.具体的装柱方法，跟硅胶的装柱子法是一样的，记得用甲醇装柱就行.装完以后，置换成起始流动相系统，即可投入使用了。
上样：分为两种，一种是湿法上样，另一种是拌样.湿法上样，不必多说，就是将样品溶解至一定体积（强烈建议用起始流动相溶解，但体积不可过大，太大相当于原点变大，分离度变差），然后上样；至于拌样，很多的观点表示ODS不应该拌样,我在这里指出，依我个人经验来看,拌样是可以的,尤其对于一些溶解性较差的样品，拌样后分离的效果，比湿法上样好很多,大家可以尝试。
（所谓拌样，就是指将你的样品溶解，然后从柱子里面掏出小部分ODS，然后进行拌匀，注意不要过载）（**＊** 待尝试r)洗脱过程：如果你有ODS薄层板，你可以先点板看看样品大概的极性大小。
硅胶基质反相色谱柱ODS色谱柱硅胶基硅胶基
硅胶基质反相色谱柱 （其他色谱柱）
H2O/CH3OH=45/55 H2O/CH3OH=60/40 H2O/CH3OH=60/40 H2O/CH3OH=45/55 H2O/CH3OH=30/70 基质 : 硅胶
制备柱 * 定制产品
订货号 F7560062 F7560063 F7560054 F7560055 产品名称 Silica 5C8 10E Silica 5C8 20E Silica 5C4 10E Silica 5C4 20E 塔板数 (TP/column) ≥ 15,000 ≥ 15,000 ≥ 15,000 ≥ 15,000 粒径 (μm) 5 5 5 5 规格 (mm) 内径×长 10.0 × 250 20.0 × 250 10.0 × 250 20.0 × 250 对应标准柱 5C8
硅胶基质亲水性相互作用 ・ 正相色谱柱
5C8 5C4 5C4
硅胶基质亲水性相互作用 ・ 正相色谱柱
特 长
5SIL
• 使用高纯度硅胶 （99.99％以上） • 适合与非极性有机溶剂的正相分析 • 对应USP L3 • 适用于糖类的亲水性相互作用色谱 （HILIC） 分析 • 对应USP L8
5NH
标准柱
订货号 F6650050 F6650051 F6650060 F6650061 产品名称 Silica 5SIL 4D Silica 5SIL 4E Silica 5NH 4D Silica 5NH 4E 塔板数 (TP/column) ≥ 9,000 ≥ 15,000 ≥ 5,000 ≥ 8,000 键合相 − − 氨丙基 氨丙基 粒径 (μm) 5 5 5 5 含碳量 (%) − − − − 孔径 (Å) 100 100 100 100 规格 (mm) 内径×长 4.6 × 150 4.6 × 250 4.6 × 150 4.6 × 250 储存溶剂 C6H14/C2H5OH=95/5 C6H14/C2H5OH=95/5 H2O/CH3CN=5/95 H2O/CH3CN=5/95 基质 : 硅胶
什么是正相色谱和反相色谱
什么是正相和反相
发布者：李雨珂发布时间：2011-8-19 9:03:50
所谓正相，就是固定相极性大于流动相极性；反相，就是固定相极性小于流动相极性。
对于气相色谱来说，基本都是正相体系。
因为载气都是氮气之类的非极性物质。
对于液相，才有正相反相一说。
如C18柱一般极性小于常用的甲醇水等流动相的极性，故称为为反相体系，反相体系在液相里应用比较多。
如果是硅胶柱，采用正己烷之类的做流动相，固定相极性大于流动相极性，那就是正相体系。
正相和反相的区别主要指是填料(固定相)的不同。
正相色谱柱填料极性强,洗脱顺序由弱到强；反相色谱柱填料极性弱，洗脱顺序由强到弱。
1、正相色谱正相色谱用的固定相通常为硅胶（Silica）以及其他具有极性官能团胺基团，如（NH2，APS）和氰基团（CN，CPS）的键合相填料。
由于硅胶表面的硅羟基（SiOH）或其他极性基团极性较强，因此，分离的次序是依据样品中各组分的极性大小，即极性较弱的组份最先被冲洗出色谱柱。
正相色谱使用的流动相极性相对比固定相低，如正已烷（Hexane），氯仿（Chloroform），二氯甲烷（Methylene Chloride）等。
2、反向色谱反向色谱用的填料常是以硅胶为基质，表面键合有极性相对较弱官能团的键合相。
反向色谱所使用的流动相极性较强，通常为水、缓冲液与甲醇、乙腈等的混合物。
样品流出色谱柱的顺序是极性较强的组分最先被冲洗出，而极性弱的组分会在色谱柱上有更强的保留。
常用的反向填料有：C18（ODS）、C8（MOS）、C4（Butyl）、C6H5（Phenyl）等。
HPLC色谱柱的种类
高效液相色谱柱大致可分为五类:一、高效反相液相色谱柱以C18为代表的高效反相液相色谱柱•直被描述为药物发现、开发、方法验证(ValidatiOn)的心脏!高效反相液相色谱柱也极其广泛应用在药物代谢及动力学、生命科学、医疗健康、生物分析检测、毒品和兴奋剂检测、食品安全分析、环境分析、军事、国土安全等领域！高效反相液相色谱制备柱也是最重要的分离纯化技术之一！无论是过去，现在和可预见的未来，以球形B型硅胶(5Um或3um)为材料骨架的高效反相液相色谱柱在实际应用中永远占有统治地位!常规HPLC方法的开发几乎总是从C18作为出发点，反相色谱占了80%以上的应用。
过去数十年来，无数努力集注于：1)改善硅胶的品质，优化键合化学；2)开发新颖的材料骨架替代硅胶。
十多年前，使用有机硅材料取代无机硅材料作为起始原料生产球形硅胶代表一个划时代的革命！生产的球形硅胶命名为B型球形硅胶。
无机A型硅胶重金属含量很高，硅胶表面若干位置严重酸化及螯合效应等导致许多碱性化合物回收率低。
球形B型硅胶重金属含量很低，在非常大的程度上消除了A型无机硅胶表面若干位置严重酸化及螯合效应等问题。
用B型球形硅胶合成高效液相色谱填料，导致高效液相色谱柱产品质量有质的飞跃！然而，另一方面，基于客户的大量反馈和我们对几乎所有色谱厂商产品的评估，我们相信键合化学问题没有获得很好的解决。
具体体现在：(1)“纯粹”反相机理的键合相例如C18和C8市场上仍然是单功能，三功能和聚合物键合相”鱼目混杂(2)键合相封端问题没有获得很好的解决，•直是困扰色谱领域最大的问题！迄今为止全部的尝试只获得有限的成功。
(3)极性嵌入式(PolarCmbCddCd)键合相极性嵌入式(PoIarCmbCdded)键合相是C18高效反相液相色谱"卫星群”中最重要的产品，是C18和C8键合相最重要的补充。
极性嵌入式(POIarembedded)键合相起源于SupelcoABZ o SupelcoABZ的键合方法是用aminopropyl键合相和长链按酸缩合反应形成一个C16酰胺。
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反相硅胶柱色谱
反相硅胶柱色谱是一种常用的分离和纯化化合物的技术。
该技术利用了硅胶材料的亲水性和疏水性特性，以及化合物在水相和有机相中的亲水性和疏水性的差异，通过调节流动相的组成和流速，实现化合物的分离和纯化。
在反相硅胶柱色谱中，样品经过前处理后，注入到柱子中，随着流动相的流动，化合物会在柱子中按照亲水性和疏水性的差异，逐渐分离出来。
在柱子中，较为疏水的化合物会首先被分离出来，而较为亲水的化合物则会在后面的流动相中被逐渐洗脱出来。
反相硅胶柱色谱的优点在于操作简便、分离效果好、纯度高、适用范围广等。
因此，该技术在天然产物分离、药物研究、食品检测等领域有着广泛的应用。
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