不同禽流感疫苗免疫蛋鸡后抗体效价变化和消长规律研究_蒋建一

分别于免疫前 、首免后 7 , 15 , 30 , 45 , 60 ,
75 , 105 , 128 , 143 , 158 , 173 , 188 , 218 , 248 d 进行鸡翅静脉采血 , 分离血清 , - 20 ℃保存待检 。 115 检测方法
采用美国 IDEXX 公司的 Flock2chek AI 酶联免
所有试验组鸡在 15 日龄监测分析后 , 按使用 说明书所述剂量在腿部肌肉注射各种亚型禽流感油 乳剂灭活疫苗 , H5 二免组在一免后 7 d , 即 22 日 龄时进行第 2 次免疫 。所有实验鸡在 120 日龄左右 进行禽流感油乳剂灭活疫苗的再次免疫 , 对照组同 时注射灭菌生理盐水 左右开始缓慢下降 , 至 首免后 218 d 左右接近临界值 。H5 亚型油乳剂疫苗 免疫效果明显高于 H9 亚型禽流感疫苗免 疫 组 , H921 组和 H922 组在加强免疫后抗体水平变化不 大 , 组间禽流感疫苗免疫效果相差无几 。经统计学 分析 , H921 和 H922 组间差异不显著 。在整个试验 过程中 , 对照组禽流感抗体均为阴性 , 对照组和受 试鸡未发生禽流感疫情 , 应用抗体分型诊断试剂对 每批样品的抽样检测中 , 未发现与疫苗种类不相符 合的亚型抗体 。
疫 , 不愿补免和加强免疫 , 这是非常危险的 。因为 家禽的品种 、遗传因素 、营养状况 、环境因素 、母 源抗体 、机体状态等情况的不同 , 疫苗免疫效力也 会有一定差异 。其它各种因素 , 如疫苗的保存 、运 输情况 、注射质量及其他病原疾病都会影响疫苗的 免疫效果 。这次实验我们发现 , H5 亚型禽流感疫 苗免疫后 3 个多月 , 疫苗抗体水平已经有了较明显 的下降 , 必须进行再次加强免疫 , 试验中我们在首 免后 105 d 左右进行了 1 次加强免疫 , 抗体水平较 前次上升的更快 , 抗体滴度也更高 , 持续时间也更 长 , 至蛋鸡 260 日龄左右时降至临界点附近 。
收稿日期 : 2004204206 基金项目 : 杭州市农业发展基金项目 作者简介 : 蒋建一 (1953 - ) , 男 , 浙江杭州人 , 兽医师 , 主要从事动物疫病的防治工作 。
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疫 ( ELISA) 检测试剂盒 。检验时将待检样品 (血 清) 500 倍稀释 , 取 100μ1 稀释后的样品分别加入 酶标板 , 室温孵育 30 min 。用洗涤液洗涤 3～5 次 , 甩尽孔内液体 , 并在滤纸上拍干 。每孔加入酶标抗 体 100 μl , 室温作用 30 min 。用洗涤液洗涤 3～5 次 , 甩尽孔内液体并拍干 , 每孔加入 100μl 底物 ( TMP) 溶液 , 室温作用 15 min , 然后每孔加入 100 μl 终止液 , 混匀 。于 BIO2RAD550 型酶标仪上 650 nm 处读数 , 利用 XCHKIS 软件系统处理数据 。
2 结果与分析
211 一免组抗体水平 试验结果 (图 1) 可见 , 3 种疫苗免疫前 , 即
蛋鸡 15 日龄时 , 试验组和对照组鸡禽流感血清抗 体全为阴性 ( SΠP ≥015 为阳性) 。免疫后 7 d (22 日龄) 抗体水平开始上升 , 但阳转率很低 ( 仅 10 %左右) 。免疫后 7～15 d , 禽流感抗体急剧上 升 , 整体抗体水平很高 , 100 %阳转 , 到 30 d 时左 右达到峰值 , 之后缓慢下降 。首免后 75 d , H5 一 免组 、H921 、H922 疫苗免疫组禽流感抗体水平下 降至临界值附近 , 部分样品阴转 。 212 二免组抗体水平
每天每头奶牛的喂料和挤奶等工作 , 按常规进 行 。日喂 3 餐 , 粗干料和水自由采食 , 每天早晚各 挤奶 1 次 。 113 试验设计
试验分预试期10 d和正试期30 d 。试验组奶牛 在预试期平均每头添加天然矿物质添加剂275 gΠd , 由少 到 多 逐 步 等 量 递 增 , 至 10 d 后 达 到 每 头 500 gΠd , 添加剂与精料混合均匀饲喂 。对照组奶牛 精料中不加添加剂 。
3 小结与讨论
我国现已研制出高致病性的禽流感疫苗 , 在家 禽机体机能处于良好状态的情况下 , 疫苗接种对控 制高致病性禽流感的传播是非常有效的 。通过试验 我们发现 , 供试疫苗中 , H5 亚型禽流感灭活疫苗 注射后 15 d 即能产生较高的免疫抗体 , 获得较强 的免疫保护力 。免疫后 30 d 左右 , 抗体水平即达 到高峰 , 并可持续 2 个多月 。如果在首免后 7 d 能 加强免疫 , 则抗体水平将会更高 、持续时间更长 。 由于禽流感变异非常快 , 不同亚型间疫苗交叉免疫 保护弱 。而 2 种 H9 亚型灭活疫苗 , 免疫效果相对 较差 , 持续时间相对较短 , 特别是在我国此次爆发 的均为 H5N1 亚型禽流感 。因此 , 根据本试验结 果 , 我们提倡使用 H5 亚型疫苗 。
1 材料和方法
111 供试材料 禽 H5 、H9 亚型禽流感灭活油乳剂苗购自浙江
省牧工商总公司 , 为国内 2 个法定生产禽流感疫苗 厂家 (青岛易邦生物工程公司和哈尔滨兽医研究
所) 产品 , 疫苗名称定为 H5 和 H921 、H922 , 按规 定保存和使用 。 112 试验分组
在建德选择 2 个饲养环境好 、基础防疫设施齐 全的蛋鸡饲养场 。挑选未经禽流感疫苗免疫的 15 日龄蛋鸡进行试验 。试验前进行血清学检测 , 挑选 禽流感抗体阴性 、正常健康的蛋鸡作试验用 , 试验 设 1 个对照组 、4 个试验组 , H5 、H921 和 H922 分 别设置 1 组 , H5 疫苗组另设在 H5 疫苗一免后 7 d 加强免疫的 H5 二免组 , 每组蛋鸡 10～20 羽 。 113 疫苗免疫剂量和免疫方法
在禽流感疫苗的实际使用过程中 , 很多养禽专 业户和规模饲养场的业主认为 , H5 亚型禽流感疫 苗免疫 1 次 , 即可使家禽获得终生免疫保护力 , 特 别是个别蛋鸡和种禽饲养户 , 家禽饲养周期长 , 疫 病多 , 因怕禽流感免疫影响产蛋量 , 仅在雏禽时免
图 1 产蛋鸡不同 AI 疫苗免疫后抗体效价消长规律
在使用了 H5 亚型的禽流感疫苗后 , 我们不能 对高致病性禽流感就高枕无忧或掉以轻心 , 一种亚 型的疫苗只对一种亚型病毒所导致的疾病有效 。因 此我们必须密切注视其它亚型禽流感的感染和爆 发 , 加强疫情监测 。此外 , 我国使用的 H5 亚型灭 活疫苗对鸡的免疫效果很好 , 但对鸭等水禽的免疫 效果还有待评估 。野禽实施免疫接种存在一定困 难 , 而且疫苗免疫尚不能有效清除禽体带毒问题 。 因此 , 疫苗免疫只是权宜之计 , 从长远上讲 , 要从 根本上解决问题 , 还是要应用生物安全等综合措 施 , 才能更好地防治本病 。
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天然矿物质对奶牛产奶量和乳脂率的影响
项 云1 ,2 , 傅 衍1 , 陈启银2 , 吴春金3 , 陶志伦4 , 郑艮云5 , 邱基洪6
(11 浙江大学 动物科学学院 , 浙江 杭州 310029 ; 21 金华市农科所 , 浙江 金华 321000 ; 31 金华市畜牧兽医站 , 浙江 金华 321000 ; 41 金华市婺城区畜牧兽医站 , 浙江 金华 321000 ; 51 浙江省第三地质大队 , 浙江 金华 321000)
114 项目测定 参试奶牛每天早上测定产奶量 , 间隔10 d测定
1 次乳脂率 ( F) , 并对产奶量进行乳脂率 4 %标准 化校正 。 115 分析处理
收稿日期 : 2004203201 基金项目 : 金华县科委资助项目 (92253) ; 浙江省科技厅资助项目 (021102188) 作者简介 : 项 云 (1963 - ) , 男 , 浙江金华人 , 高级畜牧师 , 主要从事猪育种和奶牛饲养研究工作 。 注 : 项 云为浙江大学动物科学学院在读硕士 。
金华本地天然矿物质贮藏丰富 , 奶牛在金华畜 牧业中具有重要的地位 。为了充分利用本地天然矿 物质资源 , 探索矿物质对奶牛生产性能的作用 , 特 进行本项试验 , 现将试验结果报道如下 。
1 材料和方法
111 试验材料 试验材料取自浙江省本地产的沸石等天然矿物
原料 , 经加工后按一定比例配制成天然矿物饲料添 加剂 。天然矿物质及其饲料添加剂化学成份见表 1 。参试奶牛来自金华良种奶牛繁育场 , 挑选胎次 、 个体大小和 产 奶 量 等 性 状 基 本 相 近 的34 头 泌 乳 奶 牛 , 随机分成对照组和试验组 , 每组各17头 。 112 饲养管理
禽流感疫苗首免 7 d 后 , H5 疫苗组中的二免 组进行 H5 疫苗的加强免疫 。由图 1 结果可知 , 在 二免疫后 15 , 30 , 45 , 60 d , H5 二免组禽流感抗 体水平极显著高于 H5 一免组 。 213 持续时间
所有试验组鸡在 120 日龄 , 即首免后 105 d 左 右加强免疫后 , H5 一免组和二免组禽流感抗体水 平急剧上升 。高滴度的禽流感抗体水平持续时间也
关键词 : 禽流感 ; 免疫 ; 蛋鸡 ; 抗体检测 中图分类号 : S852165 + 915 文献标识码 : B 文章编号 : 052829017 (2004) 0420221202
禽流行性感冒是由正粘病毒科 A 型流感病毒 引起的禽类急性传染病 , 被国际兽疫局定为 A 类 传染病 , 可感染几乎所有野生禽和家禽 , 与其它动 物流感有紧密联系 , 甚至威胁人类健康 。禽流感没 有特效药可以防治 , 只能依靠消灭传染源和注射相 关疫苗来进行预防 。根据我国国情 , 采取疫苗免疫 是控制禽流感最实际 、最经济和最有效的途径 。我 国已研制出 H5 和 H9 型全病毒禽流感油乳剂灭活 苗 , 具有安全性好 、抗原组分齐全和免疫原性强等 特点 。但禽流感病毒变异快 , 血清亚型众多 , 亚型 间缺乏较好的交叉保护作用 , 在实际生产过程中 , 免疫效果不够确定 。原因除了跟疫苗的选用有关 外 , 还与免疫程序是否科学有关 。我们以法定疫苗 生产厂家生产的 H5 、H9 禽流感疫苗免疫不同日龄 的产蛋鸡 , 监测杭州市家禽对不同禽流感疫苗的免 疫应答情况 , 考察疫苗免疫后血清抗体的变化规 律 , 现将试验研究结果报道如下 。