放线菌的形态观察.
实验4放线菌、酵母菌、霉菌形态观察.
实验4放线菌、酵母菌、霉菌形态观察.实验四放线菌、酵母菌、霉菌形态观察（一）放线菌的形态观察1 目的观察放线菌的基本形态特征掌握培养放线菌的几种方法2 原理放线菌一般由分枝状菌丝组成，它的菌丝可分为基内菌丝(营养菌丝)、气生菌丝或有孢子丝三种。
放线菌生长到一定阶段，大部分气生菌丝分化成孢子丝，通过横割分列的方式产生成串的分生孢子。
孢子丝形态多样，有直、波曲、钩状、螺旋状、轮生等多种形态。
孢子也有球形、椭圆形、杆状和瓜子状等等。
它们的形态构造都是放线菌分类鉴定的重要依据。
放线菌的菌落早期绒状同细菌菌落月牙状相似，后期形成孢子菌落呈粉状、干燥，有各种颜色呈同心圆放射状。
3 材料3.1 菌种灰色链霉菌(Str. griseus),天蓝色链霉菌(Str. coelicolor),细黄链霉菌（Str.microflavus）。
3.2 培养基高氏1号培养基。
3.3 器皿培养皿，载玻片、盖玻片、无菌滴管、镊子、接种环、小刀(或刀片)、水浴锅，显微镜，超净工作台，恒温培养箱。
4 流程4.1插片法: 倒平板→插片→接种→培养→镜检→记录绘图4.2压印法: 倒平板→划线接种→挑取菌落→加盖玻片→镜检→记录绘图4.3埋片法: 倒琼脂→切槽→接种→培养→镜检→记录绘图5 步骤5.1插片法5.1.1倒平板将高氏1号培养基熔化后，倒10~12毫升左右于灭菌培养皿内，凝固后使用.5.1.2插片将灭菌的盖玻片以45度角插入培养皿内的培养基中，插入深约为1/2或1/3(图5-1)。
5.1.3接种与培养用接种环将菌种接种在盖玻片与琼脂相接的沿线，放置28℃培养3～7天。
5.1.4观察培养后菌丝体生长在培养基及盖玻片上，小心用镊子将盖玻片抽出，轻轻擦去生长较差的一面的菌丝体，将生长良好的菌丝体面向的载玻片，压放于载玻片上。
直接在显微镜下观察。
5.2压印法5.2.1制备放线菌平板同5.1.1。
在凝固的高氏1号培养基平板上用划线分离法得到单一的放线菌菌落。
微生物学 实验3 放线菌的形态观察
3 、染色及干燥。滴加适量番红染液，染色 1 min ；水 洗至流出液为无色； 在酒精灯高处加热干燥。
4 、镜检。先用低倍镜寻找视野，然后用油镜进行观察。 注意区分气生菌丝、孢子丝和孢子的形态及排列方式。
五、观察与绘图
1.描述放线菌5406的菌落特征（大小、形 状、颜色、边缘情况等特征）。 2.绘制观察到的放线菌气生菌丝及孢子丝 形态。
3、孢子丝——有些气生菌丝分化成各种孢子丝，呈螺 旋状、波浪形或分枝状等，着生形式有丛生、互生和轮 生三种。
孢子的表面光滑或粗糙，圆或椭圆和线菌的重要依据。
分生孢子形态
三、材料
1、菌种：“5406”放线菌培养72 h的 平板培养物； 2、染料：蕃红； 3、器材：载玻片、盖玻片、酒精灯、镊 子、接种针、接种铲等。
四、方法及步骤
1、印片。取2片干净的载玻片，用解剖刀无菌挖取一块 放线菌的菌落（注：带培养基切下），放在一块载玻 片的中央（注：菌落面朝上）；用另一干净的载玻片 盖在这一菌落上轻轻按压，再小心取下这块载玻片 （注：不要使菌落移动）。 2、干燥固定。将取下的上面的载玻片在酒精灯火焰高 处烘烤干燥（注：有菌落的面朝上）；然后迅速通过 火焰2～3次，加热固定。
细黄链霉菌(Streptomyces microflavus)
显微形态：单细胞菌丝体，菌丝内一般无隔膜。
菌丝体分为三部分： 1、基内菌丝—深入培养基中的营养型一级菌丝 （较透明、颜色浅色）。一般无隔膜，直径 0.2～0.8 µ m，可产生各种色素。 2、气生菌丝—由基内菌丝从培养基向上伸展的 二级菌丝（颜色较深），直径1～1.4 µ m。
实验三 放线菌的形态观察
一、实验的目的
1、学会用”印片法” 法制作标本片。 2、观察放线菌的群体形态及个体形态 特征。
放线菌的形态观察
实验四放线菌的形态观察一、目的要求1. 学习并掌握观察放线菌形态的基本方法。
2. 了解放线菌的形态特征和繁殖方式。
二、基本原理放线菌是由纤细的有分枝的菌丝构成，菌丝体为单细胞原核微生物。
大多数放线菌的菌丝分化为营养菌丝和气生菌丝两部分。
营养菌丝深入培养基中生长，气生菌丝则生长在培养基的表面，并向空中伸展。
因此用普通方法制片，往往很难观察到放线菌的整体形态。
必须采用适当的培养方法，以便将自然生长的放线菌直接置于显微镜下观察。
通常采用的方法有玻璃纸培养法、插片法和印片法。
三、材料及器材1. 菌种：细黄链霉菌(5406放线菌)2. 溶液和试剂：吕氏美蓝染液3. 仪器及其他用具：盖玻片，载玻片，擦镜纸，接种环，显微镜，剪刀，镊子，吸管，玻璃涂布棒，玻璃纸等。
四、方法与步骤（一）插片法1. 取一淀粉琼脂培养基平板，用接种环将菌种在琼脂平板上划线接种，然后用无菌镊子将灭菌的盖玻片以大约45°角插人琼脂内(插在接种线上，插片数量可根据需要而定。
2. 倒置培养，28℃，3～5天。
3. 用镊子小心取出盖玻片，擦去背面培养物，然后将有菌的一面朝上放在载玻片上，直接镜检。
（二）玻璃纸法1. 以无菌操作用镊子将已灭菌的小块玻璃纸片铺在琼脂淀粉培养基表面，用无菌涂布棒将玻璃纸压平，使其紧贴在琼脂表面，不留气泡，每个平板可铺5～10块玻璃纸。
2. 用接种环挑取菌种斜面培养物在玻璃纸上划线接种。
3. 平板倒置，28℃，培养3～5天。
4. 镜检在载玻片上加一小滴水，用镊子小心取下玻璃纸片，菌面朝上放在玻片的水滴上，使玻璃纸平贴在玻片上，中间不要有气泡，直接镜检。
（三）印片法用一洁净盖玻片，平放在培养皿中放线菌的培养物上，轻轻按压一下，取出盖玻片，将印有放线菌的一面朝下，放置在加有一滴美蓝染液的载玻片上，观察孢子丝和孢子。
五、实验作业及实验报告（一）结果绘图说明你所观察到的放线菌的主要形态特征。
（二）思考题1. 试比较3种培养和观察放线菌方法的优缺点。
放线菌的形态观察实验报告
放线菌的形态观察实验报告放线菌的形态观察实验报告放线菌是一类广泛存在于自然界中的微生物，具有丰富的多样性和重要的生物学功能。
本次实验旨在通过对放线菌的形态进行观察，了解其基本特征和生长习性。
以下是实验过程和观察结果的详细描述。
实验材料和方法：1. 实验材料：放线菌培养基、无菌培养皿、无菌匙、显微镜、石英片。
2. 实验方法：a. 取一块无菌培养皿，将放线菌培养基倒入培养皿中，待其凝固。
b. 使用无菌匙，将待观察的放线菌菌落划入培养基表面，尽量避免交叉污染。
c. 将培养皿盖好，放置在恒温箱中，温度设定为28摄氏度。
d. 每隔一段时间，取出培养皿进行观察，使用显微镜观察放线菌的形态特征，并用石英片进行取样。
实验观察结果：1. 放线菌的形态特征：a. 放线菌呈现为长而细的菌丝状，类似于细长的线状结构。
b. 放线菌的菌丝通常呈现分枝状，形成复杂的网络结构。
c. 放线菌的菌丝颜色多样，包括白色、黄色、红色等，具有一定的色彩变异性。
d. 放线菌的菌丝表面常常有颗粒状物质附着，形成颗粒状结构。
2. 放线菌的生长习性：a. 放线菌生长缓慢，通常需要较长时间才能形成可见的菌落。
b. 放线菌的菌落呈现不规则形状，边缘模糊不清，有时会形成分支状的菌落。
c. 放线菌的菌落表面通常光滑而湿润，有时会有微小的颗粒状结构。
d. 放线菌在培养基上生长的过程中，会逐渐扩散并形成新的菌落。
3. 放线菌的细胞结构：a. 放线菌的菌丝由一系列细胞组成，细胞间通过连接点相互连接。
b. 放线菌的细胞内含有细胞质和细胞核，细胞核通常位于细胞中央。
c. 放线菌的细胞质内含有丰富的有机物质和细胞器，包括线粒体、内质网等。
实验讨论和结论：通过对放线菌的形态进行观察，我们可以发现放线菌具有独特的细胞结构和生长习性。
放线菌的菌丝状结构和分枝状特征使其能够在土壤中广泛分布，并与其他微生物相互作用。
放线菌的色彩变异性可能与其生长环境和代谢产物有关，这也为进一步研究放线菌的生态功能提供了线索。
放线菌的形态观察
4、观察：在载玻片中央滴一滴染液，小心用镊 子将盖玻片抽出，带菌面朝下，覆盖于染色 液上，浸泡2min后，用吸水纸将多余染色液 吸干，镜检。低-高-油
五、实验结果
菌名
培养法
菌丝形态 形态特征
六、思考题 用插片法制备放线菌标本的优点
基内菌丝、气生菌丝和孢子丝三类。
基内菌丝：伸入培养基内的菌丝，具有吸收 营养的功能
该种菌丝无隔，直径较细，有的无色，有的 产生色素，呈现不同的颜色
气生菌丝：基内菌丝向空间生长的菌丝。直径较 基内菌丝粗，呈直形或弯曲形。产生的色素较深
孢子丝：气生菌丝发育到 一定阶段，其顶端可分化 形成孢子。这种形成孢子 的菌丝称孢子丝。孢子成 熟后，可从孢子丝中逸出 飞散
孢子丝的形状、着生方式， 螺旋方向（左旋还是右 旋）、数目、疏密程度以 及形态特征是鉴定放线菌 的重要依据
放线菌孢子丝形态
孢子 --孢子是孢子丝成熟后，分化产生出的繁殖 细胞
孢子的形状多样，球、椭圆、杆状等；
表面结构不一样，光滑、疣刺、毛发状等；
孢子常有色素，单个无色透明，聚集表现；
孢子抗干燥能力强，抗热性不及芽孢，强于营养细 胞。
三、实验材料 菌种：链霉菌 染色液：0.1%美兰 培养基：马铃薯培养基 器皿：显微镜、载玻片、盖玻片、接种环、
酒精灯、镊子等
四、方法与步骤
1、倒平板：将马铃薯培养基
2、插片：用无菌镊子取无菌盖玻片，插在平板 培养基上（40°-50°插入）
实验四 放线菌的形态观察
一、实验目的 1、学会用插片培养法培养放线菌的制片方法 2、观察放线菌的菌落特征、个体形态特征
二、实验原理
放线菌的形态观察
放线菌的形态观察（一）实验目的要求学习并掌握放线菌形态的基本方法初步了解放线菌的形态特征（二）基本原理放线菌是指能形成分枝丝状体或菌丝体的一类革兰氏阳性细菌．常见放线菌大多能形成菌丝体，紧贴培养基表面或深入培养基内生长的叫基内菌丝(简称“基丝”)，基丝生长到一定阶段还能向空气中生长出气生菌丝(简称“气丝”)，并进一步分化产生孢子丝及孢子．有的放线菌只产生基丝而无气丝．在显微镜下直接观察时，气丝在上层、基丝在下层，气丝色暗，基丝较透明．孢子丝依种类的不同，有直、波曲、各种螺旋形或轮生．在油镜下观察，放线菌的孢子有球形、椭圆，杆状或柱状．能否产生菌丝体及由菌丝体分化产生的各种形态特征是放线茁分类鉴定的重要依据．为了观察放线茵的形态特征，人们设计了各种培养和观察方法，这些方法的主要目的是为了尽可能保持放线菌自然生长状态下的形态特征。
本实验介绍其中几种常用方法．扦片法：将放线菌接种在琼脂平板上，扦上灭菌盖玻片后培养，使放线菌苗丝沿着培养基表面与盖玻片的交接处生长而附着在盖玻上．观察时，轻轻取出盖玻片，置于载玻片上直接镜检．这种方法可观察到放线茵自然生长状态下的特征，而且便于观察不同生长期的形态。
玻璃纸法：玻璃纸是一种透明的半透膜，将灭菌的玻璃纸覆盖在琼脂平板表面，然后将放线菌接种于玻璃纸上，经培养，放线菌在玻璃纸上生长形成菌苔。
观察时，揭下玻璃纸，固定在载玻片上直接镜检。
这种方法既能保持放线菌的自然生长状态，也便于观察不同生长期的形态特征．印片法：将要观察的放线菌的菌落或苗苔，先印在载玻片上，经染色后观察．这种方法主要用于观察孢子丝的形态、孢子的排列及其形状等．方法简便，但形态特征可能有所改变．（三）实验设备1．菌种细黄链霉菌(Streptomyces microflavus)或青色链霉菌(S.glaucus)，弗氏链霉菌(S.fradiae).2．培养基灭菌的高氏Ⅰ号琼脂。
3、仪器或其他用具经灭菌的：平皿，玻璃纸，盖玻片，玻璃涂棒，以及载玻片，接种环，接种铲，镊子，石炭酸复红染液，显微镜等。
放线菌形态观察课件
颜色
生长环境
主要生长在土壤、植物根际等环境中 ，对植物病害具有一定的拮抗作用。
菌落较小，颜色多为白色、黄色或橙 色。
诺卡菌属
特征描述
诺卡菌属的菌丝体发达，呈网状 或束状，革兰氏染色呈阳性。
颜色
基内菌丝和气生菌丝的颜色多为黄 色、橙色或褐色。
生长环境
主要生长在土壤、木材、植物残体 等环境中，对植物病害具有一定的 拮抗作用。
培养观察法
总结词
通过培养观察放线菌的生长特性和形 态变化
详细描述
将放线菌接种在适宜的培养基上，观 察其生长速度、菌落形态、色素分泌 等特性，以及在显微镜下观察其形态 变化，有助于深入了解放线菌的生物 学特征。
03
放线菌的形态特征
链状放线菌
链状放线菌是一种常见的放线菌 类型，其菌落呈圆形或椭圆形的 颗粒状，表面干燥、粗糙，有时
05
放线菌的应用与价值
在医药领域的应用
抗生素生产
放线菌是抗生素的主要生产者， 如青霉素、头孢菌素等。
药物筛选
放线菌可用于发现新的药物，如 抗癌药物、免疫抑制剂等。
疾病治疗
某些放线菌具有抗菌、抗炎和抗 肿瘤活性，可用于疾病治疗。
在农业领域的应用
生物防治
孢子
放线菌的孢子有多种形状，光滑或具刺，有的能抗酸。
03
菌落
放线菌的菌落一般圆形、隆起、表面光滑，有的菌落与培养基连接处产
生放线状或放射状排列的气生菌丝。
放线菌的分类
01
02
03
链霉菌属
基内菌丝不断裂，气生菌 丝通常发育良好，形成长 链状孢子丝，在固体培养 基上形成致密的菌苔。
小单孢菌属
只含有一个孢子的分生孢 子梗，常气生，有时伸长 达5～6cm并产生大量基 内菌丝体。
实验5-放线菌形态观察
实验六放线菌的形态观察；霉菌子实体、分生孢子及菌落形态观察Ⅰ放线菌的形态观察一、目的要求1、学习并掌握观察放线菌的操作方法。
2、巩固掌握放线菌的形态特征。
二、实验原理放线菌是单细胞原核微生物。
菌丝无隔、分枝、纤细，分为生长于培养基内或匍匐于培养基表面的、从培养基吸取营养物质的基内菌丝，以及伸出培养基表面的气生菌丝。
气生菌丝的上部分化出孢子丝，呈螺旋状、波纹状，或分枝状等，孢子丝的着生方式因种而。
放线菌多可产生色素，菌丝呈各种颜色，有的放线菌能产生水溶性色素分泌至培养基中使培养基变色。
孢子丝长出各种形态的孢子，孢子有不同的颜色。
放线菌的菌落在培养基上着生牢固，与基质结合紧密，难以用接种针挑起。
而且由于有大量孢子存在，因而表面呈干粉状，使得易于与其他类型的微生物相区别。
放线菌的形态特征是其菌种鉴定与分类的重要依据。
三、实验器材1、菌种未鉴定放线菌菌株；2、仪器显微镜；3、材料玻璃纸、载玻片、盖玻片，镊子、盖玻片、接种环、香柏油、二甲苯。
4、染料石炭酸复红染色液。
四、操作步骤1、观察自然生长状态的放线菌用镊子小心取出用插片法培养的放线菌培养皿中的一张盖玻片，将其背面附着的菌丝体擦净。
然后将长有菌的一面向上放在洁净的载玻片上，用低倍镜、高倍镜观察。
找出3类菌丝及其分生孢子，并绘图。
注意放线菌的基内菌丝、气生菌丝的粗细和色泽差异。
2、水封片观察取石炭酸复红染色液一滴滴于载玻片中央，从培养皿中取出插片法培养放线菌的盖玻片，将无菌或菌较少的一面以擦镜纸擦净，并将有菌面朝下，放在载玻片上，浸在染色液中，制成水封片，用高倍镜观察其单个分生孢子及其基内菌丝，并绘图。
五、注意事项1、培养放线菌中要注意，放线菌的生长速度较慢，培养期较长，在操作中应特别注意无菌操作，严防杂菌污染。
并控制培养时间。
2、在镜检观察时，要仔细观察放线菌的营养菌丝、气生菌丝和孢子丝等。
六、实验报告1、绘图绘出观察的放线菌基内菌丝、气生菌丝和孢子丝的形态。
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实验四放线菌的形态观察
一、目的要求
1. 学习并掌握观察放线菌形态的基本方法。
2. 了解放线菌的形态特征和繁殖方式。
二、基本原理
放线菌是由纤细的有分枝的菌丝构成，菌丝体为单细胞原核微生物。
大多数放线菌的菌丝分化为营养菌丝和气生菌丝两部分。
营养菌丝深入培养基中生长，气生菌丝则生长在培养基的表面，并向空中伸展。
因此用普通方法制片，往往很难观察到放线菌的整体形态。
必须采用适当的培养方法，以便将自然生长的放线菌直接置于显微镜下观察。
通常采用的方法有玻璃纸培养法、插片法和印片法。
三、材料及器材
1. 菌种：细黄链霉菌(5406放线菌)
2. 溶液和试剂：吕氏美蓝染液
3. 仪器及其他用具：盖玻片，载玻片，擦镜纸，接种环，显微镜，剪刀，镊子，吸管，玻璃涂布棒，玻璃纸等。
四、方法与步骤
（一）插片法
1. 取一淀粉琼脂培养基平板，用接种环将菌种在琼脂平板上划线接种，然后用无菌镊子将灭菌的盖玻片以大约45°角插人琼脂内(插在接种线上，插片数量可根据需要而定。
2. 倒置培养，28℃，3～5天。
3. 用镊子小心取出盖玻片，擦去背面培养物，然后将有菌的一面朝上放在载玻片上，直接镜检。
（二）玻璃纸法
1. 以无菌操作用镊子将已灭菌的小块玻璃纸片铺在琼脂淀粉培养基表面，
用无菌涂布棒将玻璃纸压平，使其紧贴在琼脂表面，不留气泡，每个平板可铺5～10块玻璃纸。
2. 用接种环挑取菌种斜面培养物在玻璃纸上划线接种。
3. 平板倒置，28℃，培养3～5天。
4. 镜检在载玻片上加一小滴水，用镊子小心取下玻璃纸片，菌面朝上放在玻片的水滴上，使玻璃纸平贴在玻片上，中间不要有气泡，直接镜检。
（三）印片法
用一洁净盖玻片，平放在培养皿中放线菌的培养物上，轻轻按压一下，取出盖玻片，将印有放线菌的一面朝下，放置在加有一滴美蓝染液的载玻片上，观察孢子丝和孢子。
五、实验作业及实验报告
（一）结果绘图说明你所观察到的放线菌的主要形态特征。
（二）思考题
1. 试比较3种培养和观察放线菌方法的优缺点。
2. 玻璃纸法是否适用于其他类群微生物的培养和观察?为什么?
3. 放线菌的菌体为何不易挑取？
六、实验结束、检查试验仪器破损情况，清理实验室。