临床微生物检验学考试复习知识重点资料
临床微生物学与检验重点
微生物与检验重点1. 简述致病菌引起全身感染后，常见的几种类型？答：①毒血症②菌血症③败血症④内毒素血症⑤脓毒血症3. 试述构成细菌侵袭力的物质基础。
答：①荚膜②黏附素③侵袭性物质4. 简述病原菌感染机体后，机体如何发挥抗菌免疫功能？答：首先遇到机体的非特异性免疫包括皮肤与粘膜构成的屏障结构，血脑屏障，胎盘屏障及吞噬细胞对细菌的非特异性的吞噬和体液中杀菌抑菌物质对细菌的攻击。
7-10天后，机体产生特异的细胞免疫和体液免疫与非特异性免疫一起杀灭病原菌1. 简述细菌耐药性产生的主要机制。
答：①钝化酶的产生②药物作用靶位发生改变③胞壁通透性的改变和主动外排机制④抗菌药物的不合理使用形成了抗菌药物的选择压力，在这种压力的作用下，原来只占很少比例的耐药菌株被保留下来，并不断扩大。
1．举例说明细菌命名的原则。
答：细菌的命名一般采用国际上通用的拉丁文双命名法。
一个细菌种的学名由两个拉丁字组成，属名在前，用名词，首字母大写；种名在后，用形容词，首字母小写；两者均用斜体字。
中文译名种名在前，属名在后。
如Mycobaterium tuberculosis（结核分枝杆菌）。
属名亦可不将全文写出，只用第一个大写字母代表，如M. tuberculosis 2.如何确定从标本中分离的细菌为葡萄球菌？并确定其有无致病性。
答：①直接镜检，经革兰染色后镜检发现革兰染色阳性呈葡萄状排列的球菌，可初步报告疑为葡萄球菌，需进一步分离培养鉴定。
②分离培养：血培养需经增菌后转种血平板进一步鉴定，若无细菌生长，需连续观察7天，并以血平板确定有无细菌的生长。
脓液、尿道分泌物、脑脊液沉淀物可直接接种血平板，37℃过夜，可形成直径约2-3mm、产生不同色素的菌落。
金葡菌菌落周围有透明溶血环。
③试验鉴定：血浆凝固酶试验，甘露醇发酵试验，耐热核酸酶试验，肠毒素测定，SPA检测。
致病性葡萄球菌菌落周围有透明溶血环，血浆凝固酶试验阳性，甘露醇发酵试验阳性，耐热核酸酶试验阳性，SPA检测有A蛋白的存在。
临床微生物学检验复习资料总结
临床微生物学检验显性感染（n）：如果宿主的抗感染免疫力较弱，或侵入的病原体数量较多，毒力较强，机体的组织细胞受到不同程度的损害并出现一系列的临床症状和体征。
细菌大小以微米为测量单位。
鞭毛是细菌的运动器官。
培养基按用途分类：1.基础培养基。
2.营养培养基。
3.鉴别培养基。
4.选择培养基（n）:在培养基中加入某些特殊化学物质，抑制某些细菌的生长而有助于需要的细菌种类的生长，使需要菌从混杂的微生物群体中分离出来。
细菌的遗传物质包括染色体和质粒，其化学组成为DNA，DNA籍其构成特定基因来传递遗传信息。
质粒（n）：是染色体外的DNA，携带有编码某些遗传特性的基因，它能独立于染色体进行自我复制。
质粒的特性:不相容性；可转移性；自主复制质粒；质粒可自然丢失或用人工方法消除。
（P67）S-R变异（n）：新从患者体内分离的沙门菌通常为光滑型，经人工培养后菌落呈粗糙型。
丝状菌（或称霉菌n）：营养体呈多细胞类型的真菌是由菌丝和孢子交织组成。
细菌的科学命名：属名在前，是名词，首字母大写；种名在后，是形容词，无论是人名还是地名均小写，两者均用斜体表示。
中文译名则种名在前属名在后。
氧化-发酵试验（O-F）：细菌在分解葡萄糖的过程中，必须以分子氧作为电子受体的称为氧化型；细菌在分解葡萄糖的过程中，可以进行无氧降解的称发酵型，此类细菌无论有氧或无氧均可以分解葡萄糖，通常为兼性厌氧菌；不分解葡萄糖的细菌称产碱型。
此试验用于细菌种属间的鉴别：肠杆菌科细菌为发酵型，非发酵菌通常为氧化型或产碱型。
此外，微球菌属可氧化葡萄糖，而葡萄球菌属则能发酵葡萄糖。
迟缓分解乳糖(n):只有β-半乳糖苷酶而缺乏半乳糖苷渗透酶（或是其活性很弱）的细菌，不能很快将乳糖运送到细菌细胞内，需要几天时间乳糖才能被分解。
氧化酶试验：氧化酶或称细胞色素氧化酶，是细胞色素呼吸酶系统的终末呼吸酶。
作氧化酶试验时，此酶首先使细胞色素C氧化，然后氧化型细胞色素C再使对苯二胺氧化，产生颜色反应。
临床微生物学检验考试重点知识总结
临床微生物学检验第一章微生物感染与宿主免疫根据微生物与人体的关系：有益微生物条件致病微生物病原微生物。
肠道中双歧杆菌最为典型P11 *1潜伏感染：若宿主与病原病体在相互作用过程中暂时处于平衡状态，病原体潜伏在病灶内或某些特殊组织内，一般不排除体外。
（如果宿主的抗感染免疫力减弱，或侵入的病原体数量增多，毒力较强，机体的组织细胞受到不同程度的损害并出现一系列临床症状和体征，则称为显性感染。
）病原微生物的传播V：空气传播飞沫传播接触传播共同媒介物传播虫媒传播多途径传播P21 2，（病原菌的毒力包括侵袭力和毒素。
）侵袭力：病原菌在宿主见传播侵袭定植并逃避免疫的能力，称为侵袭力。
由菌体表面结构和侵袭物质等构成P25 3、胞内菌感染免疫：胞内菌分专职和兼职，兼职胞内菌在宿主体内主要寄居在细胞内生长繁殖，但是亦可在细胞外没有无活细胞的环境生存繁殖。
（如结核分支杆菌麻风分枝杆菌）第二章细菌的基本形状P38 1、细菌大小以微米um为测量单位。
人肉眼的最小分辨率为0.2mm. 按其外形：球菌杆菌螺旋菌球形呈圆球形、近圆球形、矛头状和肾形P41 2 、鞭毛功能：1）动力：鞭毛是细菌的运动器官，（旋转运动是由基础小体的同心环旋转产生，推动力来自质子动能，即质子浓度梯度流动所释放的ATP。
鞭毛旋转方向决定运动类型，观察细菌动力用悬滴法或压滴法在显微镜下观察其运动，也可将细菌接种于半固体培养基观察动力）2）鉴别细菌；鞭毛及细，一般染色不能看见，常用特殊染色和镀银染色观察细菌有无鞭毛及鞭毛数量、分布，可用于鉴别细菌P42 3、性菌毛可也结合的方式在细菌之间传到DNA，导致细菌毒性及耐药性的变异6、糖萼功能 1）与细菌毒力有关：有糖萼的细菌表面光滑，不易被细菌细胞吞噬，消化，逃避免疫吞噬后的细菌可在机体组织细胞中生长繁殖引起感染。
2）细菌的鉴别和分形：夹馍物质具有特异性抗原，可作为细菌的鉴别和分形。
3）形成生物膜7、革兰阴性菌细胞壁特有组分-----磷壁酸8、芽孢功能：1）对热力、干燥、辐射、化学消毒具有强大抵抗力2）以是否能杀死芽孢作为物品消毒灭菌效果的判断指标，3）芽孢在菌体的位置和直径的大小随菌种的不同，这种形态特点有利于细菌的鉴别。
临床微生物学检验复习重点
临床微生物学检验复习重点临床微生物学检验复习重点第一章生物安全和医院感染1.实验室生物安全保障：指单位和个人为防止病原体或毒素丢失、被盗、滥用、转移或有意释放而采取的安全措施。
2.医院感染（NI）：在医疗机构中获得的感染。
包括外源性和内源性，外源性来自于另一感染者/环境内源性：患者，正常菌群迁徙至其他部位等导致病原体过度生长。
第二章临床微生物检验标本的采集1.标本的一般采集原则1.1早期采集病程早期、急性期或症状典型时，使用抗生素或其他抗菌药物之前。
1.2无菌采集：采集的标本应无外源性污染。
消毒，无菌容器。
1.3根据目的菌的特性用不同的方法采集1.4采集适量标本伤寒-1周：血液 2周：粪便和尿夜1.5安全采集2.厌氧菌：在有氧条件下不生长，在无氧条件下生长的细菌。
2.1厌氧菌感染的条件：组织缺氧或氧化还原电势降低→原因：局血障：血管损伤、肿瘤压迫、烧伤、动脉硬化、组织水肿、坏死、有异物等，刺伤，大面积外伤2.2厌氧菌感染的临床特征（1）分泌物具典型的腐臭，血性渗出物呈黑色。
在紫外线下可发红色荧光(产黑色素普氏菌或卟啉单胞菌感染)。
（2）感染组织局部有大量气体产生→皮下有捻发音时为产气荚膜梭菌。
（3）部位为黏膜附近（4）长期使用氨基糖苷类抗生素无效者，新近流产史，胃肠术后（5）深部外伤枪伤，咬伤后继发感染（6）分泌物经革兰染色后，有细菌，规培：阴性液体及半固体培养基深部生长第三章临床细菌学检验技术1.细菌形态学检查→显微镜检其菌体形态1.1涂片 1.2干燥 1.3固定1.4 染色：（1）初染：加草酸铵结晶紫一滴，约一分钟，水洗。
（2）媒染：滴加碘液冲去残水，并覆盖约一分钟，水洗。
（3）（3）脱色：将载玻片上的水甩净，并衬以白背景，用95%酒精滴洗至流出酒精刚刚不出现紫色时为止，约20—30秒，立即用水冲净酒精。
（4）复染：用复红液染1—2分钟，水洗。
1.5镜检：干燥后，置油镜观察。
革兰氏阴性菌呈红色，革兰氏阳性菌呈紫色。
临床微生物学检验重点知识归纳
临床微生物学检验重点知识归纳
临床微生物学检验重点知识归纳：
1.细菌的基本结构有：细胞壁、细胞膜、细胞质、核质。
2.细菌的特殊结构：荚膜（抗吞噬作用）、菌毛（细菌的黏附器官）、鞭毛（细菌的运动器官）、芽胞（细菌在不良环境中的存活方式）。
3.肽聚糖：为革兰阳性菌和革兰阴性菌细胞壁的共同成分。
4.磷壁酸：为革兰阳性菌细胞壁特殊成分。
5.外膜层：为革兰阴性菌细胞壁特殊成分。
6.质粒：是细菌染色体外的遗传物质，存在于细胞中，是小的双股闭合环状DNA分子，可独立于染色体存在并复制，也可整合到染色体上。
7.细菌L型：是细胞壁缺陷型细菌。
8.细菌以“二分裂”方式繁殖。
9.细菌的生长曲线主要包括四期：延缓期、对数期（最佳研究时期）、稳定期、衰亡期。
10.细菌常见的遗传变异类型：
①转化（供体菌游离的DNA片段直接进入受体菌）；
②接合（通过性菌毛互相连接，将遗传物质从供体菌转移给受体菌）；
③转导（以温和噬菌体为载体，将遗传物质从供体菌转移给受体菌）；
④S-R变异（细菌菌落由光滑型到粗糙型的变异）。
11.细菌非染色标本：检查细菌动力。
12.革兰染色：是细菌学中最经典、最常用的染色方法。
13.革兰染色步骤：初染（结晶紫）、媒染（碘液）、脱色（酒精）、复染（石炭酸复红）。
14.标本处理的一般原则：早期、无菌、适量、方法、安全。
15.培养基种类：基础培养基、选择培养基（SS培养基）、鉴别培养基（克氏双糖铁）、营养培养基（巧克力平板）、特殊培养基（细菌L型培养基）。
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第一章细菌检验的基本技术第一节细菌形态学检查第二节细菌的培养和分离技术1、可用哪些方法观察细菌的动力？有动力细菌的运动和布朗运动有何区别？1)不染色标本直接镜检(常用的方法：悬滴法和压滴法)。
2)鞭毛染色：具有鞭毛的细菌具有运动能力（硝酸银染色法）有动力：可见鞭毛；无动力：不见鞭毛。
3)半固体穿刺接种法有动力：可看到细菌自一处移至另一处，有明显的方向性位移。
无动力：细菌呈现布朗运动，只在原地颤动而无位置的改变。
2、用普通光学显微镜进行染色细菌形态学观察主要观察什么？染色标本的检查，主要观察细菌的染色性、形态、排列、大小、某些特殊结构等。
3、革兰染色法的影响因素。
①菌龄：选取对数生长期的细菌进行染色，可正确反映染色的结果，若菌体细胞未成熟或已老化，染色结果可能会出现完全相反的情况；②涂片质量：涂片太厚，菌体明显堆积在一起，不易脱色或脱色不完全，使革兰氏阴性菌成革兰氏阳性菌，革兰氏阴性菌残留大量结晶紫，经复染后难以观察到典型的蓝紫色。
③媒染时间：媒染时间过短,不利于初染液结晶紫与细胞之间的结合,因而可能造成阳性菌呈阴性结果;反之,媒染时间过长,容易使阴性菌呈假阳性。
媒染时间应控制在60s左右为宜。
④乙醇脱色时间:若脱色时间过长,革兰氏阳性菌也有可能被脱色,成为假阴性菌。
同样若脱色时间不足,革兰氏阴性菌细胞壁的部分类脂质未被乙醇溶解,使结晶紫—碘复合物不能被洗脱出来,成为假阳性菌4、平板分区划线的目的是什么？是细菌分离培养常用的一种方法。
其目的是使标本或培养物中混杂的多种不同细菌分散生长，形成单个菌落。
根据菌落的形态特征，挑选单个菌落进行纯培养，为进一步对目的菌进行研究和鉴定提供条件。
5、细菌培养的方法有哪些？1)需氧培养法2)二氧化碳培养法（5%--10%CO2）3)厌氧培养法4)微需氧培养法（5% O2、10%CO2、85%N2）6、何为“选择培养基”？培养基中加入抑制剂，抑制标本中杂菌生长，选择性让目的菌生长的培养基。
临床微生物检验考试复习重点知识总结
临床微生物检验细菌整理（球菌）临床微生物检验细菌整理（肠杆菌科）临床微生物检验细菌整理（肠杆菌科）临床微生物检验细菌整理（肠杆菌科）临床微生物检验细菌整理（不发酵革兰阴性杆菌）临床微生物检验细菌整理（苛氧菌）★定义：苛养菌是对营养要求高，培养条件苛刻,普通培养基上不生长或很难生长的一类细菌。
体外培养时需添加生长因子或其它营养成分，提供特殊的生长环境，需要长时间才能检测到生长，故又称“难培养的细菌”。
临床上常见的苛养菌：①球菌：肺炎链球菌、脑膜炎奈瑟菌和淋病奈瑟菌。
②阴性杆菌：“HACEK”细菌群、军团菌属、布鲁菌属、鲍特菌属等。
“HACEK”细菌群由五个菌属组成：H →嗜血杆菌属A →凝聚杆菌属C →心杆菌属E →艾肯菌属K →金氏杆菌属临床微生物检验细菌整理（弧菌属）本属细菌的一些主要特点：①生化反应：OXI+（麦氏弧菌除外）、GLU（F）、O/129（S）②嗜盐性：钠离子可刺激细菌生长，除霍乱弧菌和拟态弧菌外，其它所有弧菌绝对需要钠离子，某些细菌无盐不生长。
③生长特性：BAP可出现各种溶血现象，肠道选择培养基上为糖不发酵菌落。
④选择培养基：TCBS琼脂和碱性蛋白胨琼脂。
分解蔗糖的菌种在TCBS琼脂形成黄色菌落，不分解者为绿色菌落；某些弧菌在此培养基上不生长。
临床微生物检验细菌整理（气单胞菌属和邻单胞菌属）临床微生物检验细菌整理（棒状杆菌属）临床微生物检验细菌整理（有芽孢需氧革兰阳性杆菌）临床微生物检验细菌整理（分枝杆菌属）★分枝杆菌属的形态特点：①菌体形态：为微弯曲或直的杆菌。
②细菌排列：单个、V、Y、T或条索状排列，有的堆积成球状。
③染色：革兰阳性菌，但不易着色，镜下可见“影子”细菌。
④形态异质性：菌种不同，形态有差异；不同生长环境同一菌株形态不同。
③严禁在涂抹标本的同时对载玻片进行加热④涂片应厚薄均匀，通过标本膜看报纸上5号字，字迹较模糊为适宜厚度。
⑤染液需覆盖痰膜，加热用微火至染液呈现蒸汽，离开火焰维持5分钟，及时补充染液，勿使染液干涸⑥细流水轻缓冲洗⑦染色后肉眼观察痰膜呈兰色，不得有红色斑块⑧痰膜脱落部分在10%以下⑨镜下视野背景清晰，抗酸菌呈红色，其它细菌和细胞呈蓝色⑩操作应在生物安全柜中进行。
临床医学检验技术(师)：临床微生物学检验考试资料一
临床医学检验技术(师)：临床微生物学检验考试资料一1、单选鉴定幽门螺杆菌的重要依据是（）A.定居于胃粘膜层中B.产生大量脲酶，分解尿素为氨C.运动活泼、生化反应活泼D.革兰阴性无芽孢杆菌E.胃液涂片（江南博哥）镜检正确答案：B2、单选下呼吸道标本采集错误的是（）A.自然咳痰法B.咽后壁采集标本C.清水漱口D.清晨第一口痰E.用抗生素前采集正确答案：B参考解析：下呼吸道标本采集常采用自然咳痰法、支气管镜采集等，以清晨第一口痰为宜，最好在用抗菌药物前采集，必须先用清水漱口，避免唾液混入；而在咽后壁采样属于上呼吸道标本采集方法。
3、单选外斐反应：OX19阳性，OXk阴性。
可能的诊断是（）A.恙虫病B.流行性斑疹伤寒C.Q热D.甲型副伤寒E.乙型副伤寒正确答案：B4、单选女孩，5岁，住南方小镇，春节刚过，开始高热，抽搐多次，意识不清楚，送院查体，面色苍白，昏迷，时有惊厥，两瞳孔不等大，光反射迟钝，脉细，呼吸弱，粪便镜检，脓细胞4个，白细胞数16×109／L，中性粒细胞75％，脑脊液检查正常，可初步诊断为（）A.流行性乙型脑炎B.败血症C.暴发型流行性脑脊髓膜炎D.中毒型细菌性痢疾E.森林脑炎正确答案：D5、单选迟缓发酵乳糖的细菌缺乏的酶是（）A.β-半乳糖苷酶B.β-半乳糖苷渗透酶C.半乳糖苷酶D.半乳糖苷渗透酶E.半乳糖渗透酶正确答案：D6、单选用于制作接种针或接种环的材料为（）A.银丝B.铁丝C.铜丝D.铅丝E.铂丝正确答案：E7、单选上呼吸道感染应采集（）A.鼻咽拭子标本B.咽拭子标本C.痰标本D.支气管镜标本E.胃内标本正确答案：A参考解析：上呼吸道感染指喉及喉以上呼吸道的感染，应采集鼻咽拭子；而痰、咽拭子、支气管镜下采集标本、胃内采集标本为下呼吸道感染的标本采集方法。
8、单选尿素分解试验可鉴别（）A.痢疾志贺菌和伤寒沙门菌B.大肠埃希菌和伤寒沙门菌C.摩根菌和痢疾志贺菌D.摩根菌和普通变形杆菌E.普通变形杆菌和奇异变形杆菌正确答案：C参考解析：普通变形杆菌、奇异变形杆菌、摩根菌尿素试验均阳性，大肠埃希菌、痢疾志贺菌、伤寒沙门菌尿素试验均阴性，故尿素试验可鉴别摩根菌和痢疾志贺菌。
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第一章微生物感染与宿主免疫1.显性感染：如果宿主的抗感染免疫力较弱，或侵入的病原体数量较多、毒力较强，机体的组织细胞受到不同程度的损害并出现一系列的临床症状和体征，则称为显性感染。
2.病原菌的毒力包括侵袭力和毒素。
病原菌在宿主间传播、侵袭、定植并逃逸免疫的能力，称为侵袭力。
3.侵袭力【黏附：可由黏附素介导，革兰阴性菌为菌毛，革兰阳性菌为磷壁酸。
宿主黏膜上皮细胞表面的黏附素受体一般是糖蛋白或糖脂。
】第二章细菌的大小与形态1. 细菌的大小以微米（um）为测量单位。
2. 鞭毛功能动力，鞭毛是细菌的运动器官，呈现旋转运动是由基础小体的同心环旋转产生，推动力来自于质子动能，即质子浓度梯度流动所释放的ATP。
鞭毛旋转方向决定运动类型。
3. 观察细菌动力可用悬滴法或压滴法在显微镜下直接观察其运动，也可将细菌穿刺接种半固体培养基观察动力。
4.选择培养基：在培养基中加入某些特殊化学物质，抑制某些细菌生长而有助于需要的细菌种类生长，使需要菌从混杂的微生物群体中分离出来。
第三章细菌的遗传与变异1. 细菌的遗传物质包括染色体、质粒。
2. 质粒：是细菌染色体外的DNA，携带有编码某些遗传特性的基因，它能独立于染色体进行自我复制。
3. 质粒的特性：a.不相容性【是指相似的质粒在同一细胞中不能共存】b.可转移性【质粒的转移方式随不同质粒而不同，最重要的一种方式是有质粒编码的接合系统】c.自主复制质粒【利用宿主系统独立于染色体进行复制】d.质粒可自然丢失或用人工方法消除。
4. 培养特性变异新从患者体内分离的沙门菌通常为光滑型，经人工培养后菌落呈粗糙型，这种变异称S-R变异。
S-R变异常伴有抗原、毒力和某些生化特性的改变。
第四章病毒的基本性状1. 病毒的结构可分为基本结构和辅助结构。
病毒的基本结构包括核心、衣壳。
辅助结构是包膜（是包围在病毒核衣壳外面的双层膜结构），包膜对乙醚是敏感的，若呈阳性，则说明有乙醚存在。
第五章真菌的基本性状1．营养体呈单细胞类型的真菌又称酵母菌。
营养体呈多细胞类型的真菌是由菌丝和孢子交织组成，称为丝状菌或霉菌。
第六章微生物的分类和命名1. 细菌的科学名称的生物双名式，有一个属名和一个种名构成，属名在前，是名词，首字母大写；种名在后，是形容词。
第七章感染病病原学诊断与预防1. 病原学检测（标本采集的原则）：⑴尽早采集：一旦怀疑细菌感染，应及时采集标本进行细菌学检验。
⑵选择不同采集时机和标本种类：根据临床症状和流行病学资料可预测感染性疾病的病原体，根据病程和感染部位的不同，选择合适时机采集不同种类标本。
⑶在抗生素应用前采集：应尽可能在抗生素留取前标本。
⑷遵守无菌操作：应严格注意无菌操作，不得被其他部位细菌污染。
盛放标本的容器应无菌。
⑸正确保存和运送：采集的标本及时运送，如路途遥远，一般应冷藏（但对脑膜炎和淋病奈瑟菌，需保温35~37℃）。
2. 革兰染色的影响因素：①涂片厚薄②酒精脱色时间③染液贮存时间④细菌生长时期3. 氧化-发酵实验（O-F实验）细菌在分解葡萄糖的过程中，可以进行无氧降解的，称为发酵型，此类细菌无论在有氧或无氧的环境中都能分解葡萄糖，通常为兼性厌氧菌。
利用此实验可区分细菌的代谢类型。
4．β-半乳糖苷酶实验（ONPG实验）只有β-版乳糖苷酶而缺乏半乳糖苷渗透酶（或是其活性很弱)的细菌，不能很快将乳糖运送到菌细胞内，通常需要几天时间乳糖才被分解，称迟缓分解乳糖。
5．氧化酶试验：氧化酶或称细胞色素氧化酶，是细胞色素呼吸酶系统的终末呼吸酶。
做氧化酶实验时，此酶首先使用细胞色素C氧化，然后氧化型细胞色素C 在使对苯二胺氧化，产生颜色反应。
本试验肠杆菌科阴性，弧菌科、非发酵菌阳性（除个别菌种外）、奈瑟菌属均阳性。
用途:G-杆菌的鉴别。
6. 荚膜肿胀试验原理：有荚膜的细菌如肺炎链球菌等，当与相应的抗血清反应时荚膜将明显增宽，在显微镜下可见在蓝色细菌周围有边界清晰的环状物，厚薄不等，而对照侧无，则为荚膜肿胀试验阳性。
用途：常用于肺炎链球菌、流感嗜血杆菌等的检测。
7.二倍体细胞培养：广泛用于病毒分离和疫苗制备。
第八章抗微生物化学疗法1．纸片扩散法（K-B法）：培养基：pH为7.2~7.4，琼脂厚度为4mm。
对营养要求较高的细菌如链球菌、肠球菌属、流感嗜血杆菌和脑膜炎奈瑟菌等需加入相应的营养添加剂。
细菌接种：用0.5麦氏管校正菌液浓度（1.5×108CFU/ml），在琼脂表面均匀涂布接种3次，每次旋转平板60°以保证接种菌的均匀分布，各纸片中心相距>24mm，纸片距平板內缘>15m，苛养菌应孵育在含CO2的环境中，肠球菌检测对苯咗西林和万古霉素的耐药性须孵育24h。
2. 最低抑菌浓度（MIC）：稀释法所测得的某抗菌药物能抑制待测菌肉眼可见生长的最低药物浓度称为最低抑菌浓度。
用途：是体外药敏试验衡量细菌对抗菌药物的敏感指标。
3. K-B法影响因素：1.培养基：培养基的质量如pH、硬度、湿度、深度。
2.药敏纸片：药敏纸片的含药量、药敏纸片的保存和厚薄。
3.接种菌量4.试验操作质量：孵育条件和温度、时间，抑菌圈测量工具等。
4. E-试验：是一种结合稀释法和扩散法的原理和特点测定微生物对抗菌药物的敏感度的定量技术，E试条是一种宽5mm，长50mm的商品化塑料试条。
5. 联合药物敏感试验：体外联合药物敏感试验的意义：(1)治疗混合性感染(2)预防或延迟细菌抗生素耐药性的发生(3)联合用药可以减少剂量以避免达到病毒性剂量（4）联合用药比单一用药时常常效果更好。
抗菌药物联合用药可以出现4种结果：1.拮抗作用2.无关作用3.累加作用4.协同作用。
2. 联合抑菌试验判断标准：FIC指数<0.5协同作用；0.5~1为相加作用；1~2为无关作用；>2为拮抗作用。
第九章微生物检验质量保证与生物安全1. 培养基的一般质量控制：(1）外观：每种培养基均应标注清楚、无浑浊，固体培养基应无菌落生长。
(2）无菌试验：培养基制作完成后，应检测每批培养基的灭菌效果，无菌生长为合格。
(3）培养基的量：斜面培养基的长度为试管长度的2/3。
双塘铁培养基底层至少有1cm的直立段。
MH平板的厚度为4mm，即直径为90mm的平皿，注入25ml的培养基即可。
其他平板厚度一般为3mm，在90mm 直径的平皿中注入15—20ml的培养基。
(4）培养基pH：配制好的培养基pH应与规定的pH相差±0.2以内。
(5)性能试验：每一批新配制的、新购入的培养基，均应用已知性质的标准菌株进行预测，合格方可使用。
2. 生物安全水平及适用范围：⑴一级生物安全防护实验室BSL-1：是微生物基础实验室，进行试验用的都是最低等级的污染物或安全的微生物，并且完全符合标准实验室操作，如枯草芽孢杆菌等。
⑵二级生物安全防护实验室BSL-2：适用于对人或环境具有中等潜在危害的微生物，属于第三类病原微生物的如：沙门菌属、乙型肝炎病毒等的试验操作。
⑶三级生物安全防护实验室BSL-3：操作对象一般是可以经呼吸道传播的危险微生物，如：结核分枝杆菌。
⑷四生物安全防护实验室级BSL-4：进行试验研究的物质是一些非常高危险性并且可以致命的有毒物质，可以通过空气传播并且现今并没有有效的疫苗或者治疗方法来处理，如:出血热病毒。
第十章医院感染1. 医院感染（NI）：又称医院获得性感染，包括在医院获得而出院后才发生感染，但不包括入院前已存在的感染或入院时已处于潜伏期的感染。
探视者在医疗机构中获得的感染、工作人员的职业性感染也属于医院感染，入院48h后发生的感染通常认为是医院感染。
2. 医院感染病原体特点：（1）病原体以细菌最多见，真菌感染明显增多（2）大多数为条件治病微生物（3）多数病原菌对抗菌药物具有耐药性或多重耐药（4）免疫功能低下患者可以感染多种病原体。
常见的医院感染：泌尿道感染。
第十一章血流感染1.血液标本采集：.①采血时机：理想的血液细菌培养应该是患者接受抗生素治疗之前进行，故采集血培养应尽可能在患者寒战或发热前。
②采血部位：应行径皮外周静脉穿刺采血，应严格无菌操作。
③采血份数：对每名患者应至少从不同部位采集至少2~3份，对怀疑亚急性感染性心内膜炎的患者，应间隔1h，连续采集3份血进行培养④采血量：通常采血量应是培养基的1/5或1/10，成人患者每次最好采集10~15ml；对于儿童患者，每瓶至少注入1~5ml⑤血培养瓶的使用：根据不同的血培养方法，采集到的血液标本应立即注入血培养瓶或含有聚茴香磺酸钠SPS的无菌容器中，并尽快进行培养。
2.学培养的指征：当患者发热（大于或等于38℃），或低体温（小于或等于36℃）时，或外周白细胞计数超过10*10^9/L(特别是存在核左移时)，或绝对粒细胞减少（成熟中性粒细胞计数少于1*10^9/L）或合并有明显感染症状体征和伴有感染病灶存在时，就应该采血进行血液细菌培养。
怀疑有脓毒血症的患者应尽早血液细菌培养。
第十二章中枢神经系统感染1. 用于常规细菌检测的脑脊液应为1ml或大于1ml；用于检测抗酸菌的脑脊液量应为5ml或大于5ml。
第十三章皮肤及软组织感染1. 皮肤和软组织感染的细菌学检查A、封闭性脓肿：局部消毒后，用注射器抽取脓液和脓肿标本置于厌氧运送培养基内送检。
B、放线菌感染标本：选取流出脓液中的额“硫磺样颗粒”置于无菌试管内送检。
2. 检验方法：①肉眼观察②直接显微镜检查③分离培养与鉴定。
第十四章呼吸系统感染1．急性呼吸道感染约有70%~80%由病毒引起。
3.痰液标本的采集法中的气管镜采集法：通过支气管镜用保护性导管支气管刷采取的呼吸道标本，受上呼吸道菌群污染的可能性最小，最适合进行细菌培养（包括需氧与厌氧培养）。
4.上呼吸道标本的分离培养：常规接种血平板、巧克力平板及麦康凯平板。
5.痰液标本的检查方法【一般细菌、真菌涂片检查目的是①确定标本是否适合做细菌培养，采用标本直接涂片镜检，依据在低倍视野中鳞状上皮细胞<10个，或白细胞>25个，同时几乎见不到鳞状上皮细胞为符合要求的痰标本，否则视为不合格痰标本②初步判定是否有病原菌存在】。
第十五章胃肠道感染1.染色性和形态无法区别病原菌，故一般不做直接涂片检查。
2.与抗生素相关性腹泻（ADD）有关的病原菌主要有艰难梭菌、金黄色葡萄糖菌、产气荚膜梭菌等。
第十七章泌尿系统感染1.膀胱穿刺法：常采用耻骨上膀胱穿刺抽取尿液法，该方法是目前判断膀胱内有无细菌感染的金标准，常在怀疑厌氧菌感染时采用。
2.怀疑结核分枝杆菌感染时用集尿法采集。
3.尿液中一般细菌及假丝酵母菌培养菌落计数>105CFU/m l提示可能为泌尿系统感染。
第十八章生殖系统感染1.培养法是WHO推荐的淋病筛查的唯一方法，也是实验室诊断的“金标准”。