凝结芽孢杆菌对凡纳滨对虾生长和免疫的影响
凝结芽孢杆菌益生机制及应用研究进展
凝结芽孢杆菌益生机制及应用研究进展郭庆丰;陈林;马经纬【摘要】益生菌凝结芽孢杆菌是近年来国内外学者的研究热点,不仅具有益生菌的调节肠道内菌群平衡、促进营养物质代谢和利用、提高免疫力等保健特性,更重要的是具有耐高温、耐酸和耐胆盐等高抗逆性特点.凝结芽孢杆菌作为新型微生态制剂,在畜牧业、水产养殖业、医药、保健和食品行业已广泛应用.主要对凝结芽孢杆菌概况、生物学特性、益生作用机理、安全性、微生态制剂及临床应用等方面研究进展进行概述.【期刊名称】《食品研究与开发》【年(卷),期】2018(039)018【总页数】6页(P208-213)【关键词】凝结芽孢杆菌;益生菌;微生态制剂;临床应用【作者】郭庆丰;陈林;马经纬【作者单位】黄河科技学院,河南郑州450063;郑州市药用资源研究重点实验室,河南郑州450063;黄河科技学院,河南郑州450063;郑州市药用资源研究重点实验室,河南郑州450063;黄河科技学院,河南郑州450063;郑州市药用资源研究重点实验室,河南郑州450063【正文语种】中文益生菌是指一类服用足够数量能够对宿主健康有益的活性微生物，其主要作用在于其进入肠道后能够维持肠道菌群的平衡，促进有益菌的繁殖和抑制致病菌生长，因此对人体健康有益[1-2]。
凝结芽孢杆菌既能像乳酸菌和双歧杆菌具有益生作用，又具有芽孢菌的抗逆性强、耐高温高压和易贮藏等优点，能够改善肠道菌群结构、调节肠道功能紊乱、维持肠道内菌群平衡和提高机体免疫水平、促进营养物质代谢和利用，是近年来研究的热门菌种。
本文主要对凝结芽孢杆菌概况、生物学特性、益生作用机理、安全性、微生态制剂及临床应用研究等方面进行综述。
1 凝结芽孢杆菌概况1915年，Hammer[3]首次从凝结的变质牛奶中分离出凝结芽孢杆菌（B.coagulans），1932 年，Sarles等[4]对凝结芽孢杆菌进行了详细描述，同年，Horowitz-Wlassowa和Nowotelnow首次用芽孢乳酸菌（Lactobacillus sporogenes）来描述凝结芽孢杆菌，由于其含有乳酸菌和芽孢杆菌的双重特性，其分类一直存在争议，直到第八版的《伯杰氏鉴定细菌学手册》（Bergey’s Manual of Determinative Bacteriology）将接触酶阳性的，嗜热的乳杆菌归于芽孢杆菌属，将其重新分类，统一规范命名了凝结芽孢杆菌[5]。
芽孢杆菌在水产养殖中的应用研究进展
__________技术学堂口TECHNOLOGY FORUM芽抱杆菌在水产养殖中的应用研究进展■王凯杨华王路英沈娟娟(江门市澳保生物科技有限公司，广东江门529100)根据《2020年中国渔业统计年鉴》，2019年，我国水产养殖总面积为7,108.5千hn?,养殖总产量达6,480.36万t,按2019年价格计算，全社会渔业经济总产值26,406.5亿元，其中渔业产值12,934.49亿元。
水产养殖模式的集约化有效提高了水产动物养殖密度，增加了养殖产量。
同时，饵料的投放量也相应增加，使得水体中残饵、动物粪便等有机物堆积，消耗大量溶解氧(D0),化学需氧量(COD)升髙。
氨氮(NH-N)和亚硝酸盐氮(NO-N)等有害物质严重超标，导致池塘水质恶化，水产动物极易发病，养耐量大幅下降，严重损害养殖户经济效益。
传统的水质改良法以化学法为主，通过向水体中泼洒化学增氧剂或消毒剂来达到改善水质的目的，其作用效果明显但是持续时间短，通过加水换水来解决水质问题又对养殖场所有较大限制，不便于推广。
Koz迪等在1986年首次釆用微生态制剂治疗鳗鱷致病菌感染问题，大幅降低鳗輪死亡率。
此后，微生态制剂以其安全、环保、无抗性的特点，在水产养殖中被广泛应用。
芽砲杆菌是一类革兰氏阳性化能异养菌，好氧或兼性厌氧，在自然界中分布广泛。
芽葩杆菌能够形成芽鞄，具有耐酸碱、耐高温、耐挤压等优点，其生物活性在恶劣环境中不会降低，与乳酸菌等其它芽范杆菌相比，具有明显的优势。
因具有改善水体环境，促进生长，提高免疫力和抑制病原菌等功能，芽抱杆菌已成为水产养殖过程中常用的微生态制剂。
众多研究表明，芽葩杆菌在水产养殖中能降低水体氨氮亚盐水平，增强消化酶活性、抗氧化酶活性、免疫相关基因和应激相关基因的表达，提髙鱼体对病原傩物力等。
近年来，随着抗生素滥用的问题日益严重，农业农村部已在2020年禁止了在饲料生产中添加抗生素，这使得益生菌类芽葩杆菌在水产养殖中发挥的作用更加重要。
免疫增强剂对凡纳滨对虾幼虾生长、免疫及抗应激的影响
免疫增强剂对凡纳滨对虾幼虾生长、免疫及抗应激的影响一、本文概述本文旨在探讨免疫增强剂对凡纳滨对虾幼虾生长、免疫及抗应激的影响。
通过对免疫增强剂的应用，我们期望能够提高凡纳滨对虾幼虾的生长速度、增强其免疫力，以及提升其对应激的抵抗能力。
本文将对免疫增强剂的作用机制进行详细阐述，并通过实验数据来验证其对凡纳滨对虾幼虾生长、免疫及抗应激的具体影响。
本文还将对免疫增强剂在凡纳滨对虾养殖中的应用前景进行讨论，以期为实际生产提供理论支持和科学依据。
二、材料与方法本研究采用的免疫增强剂为市面上常见的几种，具体品牌及成分将在后续的研究结果中详细列出。
实验对象为健康的凡纳滨对虾幼虾，购自当地的水产市场，平均体重约为克，体长约为厘米。
所有幼虾在实验开始前均经过严格的健康检查，确保无疾病且生长状况良好。
本实验采用随机分组设计，将凡纳滨对虾幼虾随机分为四组，每组约含只幼虾。
四组分别为对照组（无免疫增强剂处理）、低剂量组（免疫增强剂低浓度处理）、中剂量组（免疫增强剂中等浓度处理）和高剂量组（免疫增强剂高浓度处理）。
实验期间，所有组别的幼虾均在同一环境下饲养，保持相同的水质、饲料和养殖管理。
实验期间，每天按照设定的剂量向各组的饲料中添加相应的免疫增强剂。
每隔天记录各组幼虾的体重、体长及存活率，计算生长性能指标。
同时，定期采集各组幼虾的血样，测定其免疫相关指标，如血细胞数量、吞噬活性、抗体水平等。
为了模拟养殖过程中的应激条件，实验期间还进行了次应激处理，观察各组幼虾在应激条件下的表现。
所有实验数据均采用SPSS软件进行统计分析。
通过单因素方差分析（ANOVA）比较各组间的差异，以P<05为显著性水平。
采用相关性分析探讨免疫增强剂处理与幼虾生长、免疫及抗应激能力之间的关系。
通过以上实验设计与方法，旨在全面评估免疫增强剂对凡纳滨对虾幼虾生长、免疫及抗应激能力的影响，为实际养殖中合理应用免疫增强剂提供科学依据。
三、免疫增强剂对凡纳滨对虾幼虾生长的影响为了评估免疫增强剂对凡纳滨对虾幼虾生长的影响，我们在实验条件下对幼虾进行了为期六周的处理。
饲料中添加芽孢杆菌和中草药制剂对凡纳滨对虾生长及肠道菌群的影响
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不同比例复合益生菌对凡纳滨对虾生长免疫及抗氨氮-中国水产科学
中国水产科学 2015年11月, 22(6): 1299-1307 Journal of Fishery Sciences of China研究简报收稿日期: 2015-01-13; 修订日期: 2015-07-01.基金项目: 中央级公益性科研院所基本科研业务费专项资金项目(2012C016).作者简介: 夏磊(1976–), 副研究员, 研究方向为渔用药物研发. E-mail: xialei666@ 通信作者: 张洪玉, 男, 研究方向为渔用药物开发. E-mail: zhanghy@DOI: 10.3724/SP.J.1118.2015.14565不同比例复合益生菌对凡纳滨对虾生长、免疫及抗氨氮能力的影响夏磊1, 2, 赵明军1, 张洪玉1, 2, 唐夏2, 杨铿3, 杨润清11. 中国水产科学研究院, 北京100141;2. 北京鑫洋水产高新技术有限公司, 北京 102488;3. 中国水产科学研究院 南海水产研究所, 广东 广州510300摘要: 对从凡纳滨对虾(Litopenaeus vannamei )肠道中分离出的鲍鱼希瓦氏菌(Shewanella haliotis )、蜡样芽孢杆菌(Bacillus cereus )和双壳气单胞菌(Aeromonas bivalvium ) 3株有益菌株, 利用正交设计得到9种复合比例, 通过饲料中添加上述9种比例混合的菌体(菌数总量为109 cfu/g)饲喂凡纳滨对虾, 经过28 d 养殖实验, 评价其对凡纳滨对虾生长、免疫指标的影响。
随后, 利用氯化铵调节水体氨氮浓度至26.67 mg/L, 经过16 d 的氨氮毒性实验, 研究不同比例复合益生菌对凡纳滨对虾抗氨氮能力的影响。
研究结果表明, 9个复合益生菌实验组的增重率和特定生长率均显著高于对照组(P <0.05), 并且以3株菌菌数6︰1︰3比例效果较好; 不同配比的复合益生菌能够显著提高酸性磷酸酶(ACP)、碱性磷酸酶(ALP)、总超氧化物歧化酶(T-SOD)活力(P <0.05), 并表现出了不同的影响效果, 其中, 3株菌菌数(菌数总量为109 cfu/g, 下同) 2︰3︰3、4︰2︰3及6︰1︰3比例对ACP 活力具有显著促进作用(P <0.05), 3株菌菌数4: 2︰3和6︰1︰3比例对ALP 活力具有显著促进作用(P <0.05); 3株菌菌数2︰1︰1比例对T-SOD 活力具有显著促进作用(P <0.05); 各比例的复合菌对溶菌酶活力的影响不显著(P >0.05); 氨氮浓度26.67 mg/L 条件下, 不同比例复合菌组对虾累计存活率显著高于对照组(P <0.05), 其中以3株菌菌数4︰3︰1和6︰3︰2比例组累计存活率较高, 即抗氨氮效果较好。
益生菌在水产养殖中的应用研究进展
益生菌在水产养殖中的应用研究进展作者：金珈羽来源：《农业灾害研究》2024年第02期摘要：在水产养殖中，益生菌在改善生长性能、抗病性、免疫力、健康状况、肠道微生物组和水质方面起着重要作用。
益生菌在水产养殖中的应用可以减少抗生素的使用。
在水产养殖中推广益生菌有助于促进水产养殖业生产并保障人类健康。
概述了常用益生菌种类、益生菌益生物质、益生菌改善养殖动物健康状况以及对病原体的抑制和作用机制的研究进展，探讨了益生菌在水产养殖领域面临的挑战和未来发展方向，为实现现代水产养殖的绿色可持续发展提供参考。
关键词：益生菌；水产养殖；抗生素中图分类号：S963 文献标志码：B 文章编号：2095–3305（2024）02–000-03随着人口的迅速增加和内陆天然湖泊渔获量的减少，我国水产养殖模式从粗放型养殖体系向半集约型和集约型养殖体系转变。
这种密集的养殖方式也提高了水产养殖动物的发病率，而早期我国在水产养殖中通常使用抗生素来预防水产养殖动物生病[1]。
抗生素的大量使用会使细菌产生耐药性，污染环境。
因此，寻找绿色、无污染、无残留的抗生素替代物对水产养殖的发展至关重要。
当前，研究已发现的潜在替代品有益生菌制剂、抗菌肽、中草药、植物提取物、寡糖和多糖以及腐殖酸等[2]。
主要介绍用于水产养殖的益生菌种类及其作用机制，为未来益生菌在水产养殖中的应用提供参考。
1 常见益生菌的种类及其应用多种益生菌可以被应用于水产养殖（表1）。
1.1 芽孢杆菌芽孢杆菌属于厚壁菌门，是好氧或兼性厌氧的革兰氏阳性菌，能产生多种胞外酶。
芽孢杆菌对外界环境的抵抗能力较强，对酸性、高温等具有一定的抵抗能力。
芽孢杆菌具有抗病原菌和抗病毒能力，当前已经被应用于制药业。
水产养殖中应用的芽孢杆菌主要包括枯草芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌，其中使用频率最高的是枯草芽孢杆菌。
使用添加了枯草芽孢杆菌的饲料喂养半滑舌鳎，可改善半滑舌鳎的生长状况和提高饲料的利用率[3-5]。
芽孢杆菌对水生动物抗氧化能力和免疫力的影响
2024.3益生菌也被称为微生态制剂，在水生动物生长、发育、免疫、消化等多个方面起到积极的作用。
芽孢杆菌是益生菌的一种，属于革兰氏阳性菌，容易在养殖水体中形成优势菌群。
芽孢杆菌为鱼体自身细菌群落，因此可以避免应用时微生物对鱼体肠道产生不利影响。
与乳酸杆菌等其他益生菌相比，芽孢杆菌能够产生抗应激能力较强的孢子，能够很好地应对饲料加工、储存和运输等环境变化。
定殖于机体肠道后，芽孢杆菌能更好地改善鱼体肠道健康状况、提高免疫力、促进生长。
目前芽孢杆菌常被添加在饲料中的种类有蜡样芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌、凝结芽孢杆菌等。
一、芽孢杆菌的种类及特性1.蜡样芽孢杆菌蜡样芽孢杆菌是一种兼性厌氧菌，可以从动物肠道或者水体中获得。
在水体环境中获取的蜡样芽孢杆菌具有耐盐性好、脱氮率高等特性。
蜡样芽孢杆菌不仅可以显著提高消化酶的活性，影响机体的消化能力，还能通过改善鱼体的肠道形态结构来增加肠道的吸收面积，大大促进了鱼体对营养物质的吸收。
2.枯草芽孢杆菌枯草芽孢杆菌是一种好氧性菌，其代谢产物具有多种功能，比如提高饲料转化率、改善水质、提高机体免疫力、抑制氧化应激等。
由于枯草芽孢杆菌在生长过程中可以产生系列具有抑制菌体活性功能的成分，如枯草杆素、制霉菌素、葛莱霉素、多黏菌素等，被视为抗生素的理想代替物。
而且枯草芽孢杆菌能有效分解养殖水体中的残余饵料、浮游生物残体、排泄物等大分子有机物，还可以直接利用水体中的亚硝酸盐与硝酸盐，进而达到净化水质的效果。
3.地衣芽孢杆菌地衣芽孢杆菌是一种嗜热细菌，可以从鱼体的肠道内获得。
地衣芽孢杆菌对胆汁酸和高温有很好的耐受，并且可以分泌多种胞外酶，能够很好地提升鱼体的抗氧化能力、免疫力、肠道功能和生长性能。
另外，地衣芽孢杆菌可以很好地降解鱼饲料中的营养物质，添加到饲料中可以促进鱼体肠道对营养物质的吸收和利用。
4.凝结芽孢杆菌凝结芽孢杆菌是一种兼性厌氧菌，进入肠道后通过消耗游离氧在肠道中繁殖，有利于双歧杆菌和厌氧微生物乳酸菌的生长增殖，以此达到调节鱼体内肠道菌群平衡的效果。
益生菌对凡纳滨对虾生长和全虾营养组成的影响
益生菌对凡纳滨对虾生长和全虾营养组成的影响林黑着;李卓佳;郭志勋;冯娟;文国樑;丁贤【期刊名称】《南方水产科学》【年(卷),期】2008(004)006【摘要】研究了芽孢杆菌制剂(Bacillus sp.,109CFU·g-1)对凡纳滨对虾Litopenaeus vannamei(初始体重0.03 g·尾-1)生长性能、全虾营养成分和氨基酸的影响.7种试验饲料中芽孢杆菌制剂的添加量分别为0,0.5,1.0,1.5,2.0,2.5和3.0 g·kg-1饲料.芽孢杆菌制剂对凡纳滨对虾的成活率没有显著影响.摄食添加益生菌1.0和1.5g·kg-1饲料的凡纳滨对虾的增重率高并且饲料系数低于对照组,特别足添加量为1.0 g·kg-1时,差异显著;然而,其它添加量并不存在显著性差异.添加益生菌对凡纳滨对虾全虾的水分、蛋白质和灰分含量的影响不显著;投喂添加益生菌1.0和1.5 g·kg-1饲料,脂肪含量高于对照组.饲料中添加益生菌可以改变凡纳滨对虾全虾中部分氨基酸的含量.【总页数】6页(P95-100)【作者】林黑着;李卓佳;郭志勋;冯娟;文国樑;丁贤【作者单位】中国水产科学研究院南海水产研究所,广东,广州,510300;中国水产科学研究院南海水产研究所,广东,广州,510300;中国水产科学研究院南海水产研究所,广东,广州,510300;中国水产科学研究院南海水产研究所,广东,广州,510300;中国水产科学研究院南海水产研究所,广东,广州,510300;中国水产科学研究院南海水产研究所,广东,广州,510300【正文语种】中文【中图分类】S963.73【相关文献】1.饲料中添加混合益生菌对幼参生长、消化酶活力和体壁营养组成的影响 [J], 包鹏云;李璐瑶;陈炜;孙静娴;左然涛;马悦欣2.饲料中添加混合益生菌对幼参生长、消化酶活力和体壁营养组成的影响 [J], 包鹏云;李璐瑶;陈炜;孙静娴;左然涛;马悦欣;3.不同饲料对冬棚养殖凡纳滨对虾生长及全虾营养成分的影响 [J], 胡园;陈琛;曾国权;於俊琦;陈劲飞;李敏4.不同品牌商品饲料对冬棚养殖凡纳滨对虾生长及全虾营养成分影响的研究(上) [J], 胡园;陈琛;曾国权;淤俊琦;陈劲飞5.不同品牌商品饲料对冬棚养殖凡纳滨对虾生长及全虾营养成分影响的研究(下) [J], 胡园;陈琛;曾国权;淤俊琦;陈劲飞因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
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凝结芽孢杆菌对凡纳滨对虾生长和免疫的影响汪波;曾佳丽;黎于汾;贾甜甜;周思雨;陈鑫;颜亨梅【摘要】旨在探讨饲料中添加凝结芽孢杆菌对凡纳滨对虾幼虾生长性能和非特异性免疫力的影响.选用的凡纳滨对虾幼虾,平均分为4个组,在基础目粮中分别添加0.0％(Ⅰ组,对照组)、(0.5％(Ⅱ组)、1.0％(Ⅲ组)、和1.5％(Ⅳ组)的凝结芽孢杆菌制剂,饲养20d.结果表明:随着凝结芽孢杆菌添加量的增加,试验组凡纳滨对虾的增质量率和特定生长率都显著高于对照组(P＜0.05),同时显著降低饵料系数,提高养殖的存活率(P＜0.05).凡纳滨对虾的超氧化物歧化酶(SOD)和碱性磷酸酶(AKP)活性在添加1.5％的凝结芽孢杆菌组分别达到最大值,并显著高于对照组(P＜0.05).试验组的酸性磷酸酶(ACP)也显著高于对照组(P＜0.05),但试验组间差异不显著(P＞0.05),3个试验组的酚氧化酶(P(O)活性、过氧化物酶(POD)活性均与对照组差异不显著(P＞0.05).说明,添加凝结芽孢杆菌可在一定程度上提高凡纳滨对虾幼虾的生长性能和改善其非特异性免疫力.【期刊名称】《西北农业学报》【年(卷),期】2015(024)006【总页数】6页(P10-15)【关键词】凝结芽孢杆菌;凡纳滨对虾;生长性能;非特异性免疫【作者】汪波;曾佳丽;黎于汾;贾甜甜;周思雨;陈鑫;颜亨梅【作者单位】北京师范大学珠海分校,广东珠海519087;北京师范大学珠海分校,广东珠海519087;北京师范大学珠海分校,广东珠海519087;北京师范大学珠海分校,广东珠海519087;北京师范大学珠海分校,广东珠海519087;北京师范大学珠海分校,广东珠海519087;北京师范大学珠海分校,广东珠海519087【正文语种】中文【中图分类】S963.73凡纳滨对虾(Litopenaeus vannamei)又名南美白对虾，是广温广盐性热带虾类[1]。
其肉质好、味道鲜，营养丰富，富含蛋白质和矿物质、个体大、耐高密度和低盐度、生长迅速，是世界养殖产量最高、范围最广的3种对虾之一[2]。
然而，随着养殖密度的提高，产生了一系列不利于对虾健康生长的负面影响[3]。
有研究[4-6]表明，养殖密度的增加使得水质恶化、营养盐缺乏，导致对虾机体免疫力下降、发病甚至死亡，降低产出效率。
因此，人们加大了对虾免疫力、抗病力添加剂的研发力度，利用益生菌来调节动物体内的微生态平衡，恢复机体正常生理功能、防治病害、增进健康，正逐渐成为世界范围内的热潮。
研究发现，适量添加复合益生菌能显著提高鱼体的生长率和饲料的消化率，显著降低词料系数，节约饲料成本。
付天玺等[7]研究表明，饲料中添加1.0×1011 cfu/kg的凝结芽孢杆菌就能显著提高奥尼罗非鱼的生长和饲料营养物质的利用，胃蛋白酶的活性提高30.59%，消化吸收率提高10.68%，蛋白质表观消化率提高4.71%。
袁丰华等[8]发现，把凝结芽孢杆菌的粉末制剂以0.5% 的比例添加到饲料中能提高尖吻鲈的增质量率和特定生长率，分别比对照组增加9.54%和4.01%，对尖吻鲈的生长有一定的促进作用。
王彦波[9]研究表明，饵料中添加一定浓度的凝结芽孢杆菌，其通过与动物肠道等的互作可以显著改善罗非鱼的生长性能和肌肉中粗脂肪、钙、磷的质量分数。
在对虾养殖产业中，应用于饲料的芽孢菌类较多集中在枯草芽孢杆菌(Bacillussubtilis)[10]、地衣芽孢杆菌(Bacillus licheniformis)[11]和短小芽孢杆菌(Bacillus pumilus)[12]等。
然而，关于不同浓度凝结芽孢杆菌对凡纳滨对虾的影响的研究还不多见，本研究以凝结芽孢杆菌作为微生态制剂菌种，通过试验分析饲料中添加凝结芽孢杆菌后对凡纳滨对虾生长性能和非特异性免疫的影响，为凝结芽孢杆菌在凡纳滨对虾饲料生产中的应用提供参考。
1 材料与方法1.1 试验材料试验所用幼虾体质量为(1.12±0.03) g，幼虾运回后暂养1周再开始试验。
共设4组试验饲料，分别在基础饵料中添加质量分数为0、0.5%、1.0%和1.5%的凝结芽孢杆菌粉状制剂(活菌量达1010 cfu/g)，分别为Ⅰ组、Ⅱ组、Ⅲ组和Ⅳ组，制成粒径为1.0 mm的饲料，保存在4 ℃备用。
1.2 饲养管理挑选大小一致、健康无伤的对虾，平均分为4个组，每组3个重复，每重复50尾。
试验期间水温为(24.0±2.0)℃。
每天投料2次，投料时间为10:00和17:00。
自由采食，每天观察对虾的健康状况。
每天换水1次，每次换水量为约试验水族箱水量的1/10。
同时根据摄食情况及时调整投饲量。
1.3 生长性能指标的测定正式饲养试验前对虾的体质量定义为初体质量，试验结束前停止喂养饲24 h，全组称量，定义为末体质量，养殖20 d后，测定凡纳滨对虾体质量增质量率和特定生长率。
增质量率=(末均体质量-初均体质量)/初均体质量×100%，特定生长率=[ln(末均体质量)-ln(初均体质量)]/饲养时间×100%，饵料系数=饵料摄入量 /(对虾末体质量-对虾初体质量)×100%，成活率=(试验结束时对虾尾数 / 试验开始时对虾尾数)×100%1.4 非特异性免疫指标的测定超氧化物歧化酶(SOD)活性参照改良的黄嘌呤氧化酶法[13]测定，酸性磷酸酶(ACP)活性、碱性磷酸酶(AKP)活性参照磷酸苯二钠法[14]测定，酚氧化酶(PO)活性以左多巴胺为底物，参照改进的Ashida等[15]方法进行测定，过氧化物酶(POD)活性按照愈创木酚法[16]测定。
1.5 统计与分析采用Excel软件对数据进行统计分析，先对组间差异的显著性作单因素方差分析(One-way ANOVA)，处理后组间若有显著差异，则作LSD多重比较，P<0.05表示差异显著。
2 结果与分析2.1 不同凝结芽孢杆菌添加量下凡纳滨对虾生长结果饲料中添加不同质量分数凝结芽孢杆菌对凡纳滨对虾生长特性的影响如表1所示。
随着凝结芽孢杆菌在饲料中添加量的增加，凡纳滨对虾的增质量率和特定生长率呈现逐渐增加的趋势，显著高于对照组(P<0.05)，但试验组间无显著差异(P>0.05)。
饵料系数的情况则相反，随着饵料中添加凝结芽孢杆菌，能显著降低其饵料系数(P<0.05)。
另一方面，凝结芽孢杆菌的添加，有利于提高凡纳滨对虾养殖过程中的存活率(P<0.05)，但试验组间同样没有显著差异(P>0.05)。
表1 不同凝结芽孢杆菌添加量下凡纳滨对虾生长情况Table 1 Growth performance of Litopenaeus vannamei influenced by different doses levels of Bacillus coagulas supplement in basic dietⅠ组Group ⅠⅡ组Group ⅡⅢ组Gr oup ⅢⅣ组Group Ⅳ初体质量/g Initial bodymass1.15±0.041.13±0.061.11±0.031.15±0.02末体质量/g Finial bodymass2.42±0.062.66±0.102.74±0.132.95±0.07增质量率/% Growthrate111.08±2.13 a136.34±6.91 b144.27±1.00 b141.04±6.61 b特定生长率/%Specific growth rate3.74±0.05 a4.30±0.15 b4.47±0.02 b4.40±0.14 b饵料系数Feed coefficient1.96±0.04 b1.83±0.07 a1.80±0.05 a1.84±0.06 a成活率/% Survival rate67.33±3.06 a75.33±3.06 b79.33±5.03 b80.67±4.16 b注：数据用“平均值±标准差”表示。
同行标不同字母表示差异显著(P<0.05)。
Note: Data were shown in “mean±standard deviation”.The different letters in the same row show significant difference (P<0.05).2.2 凝结芽孢杆菌对凡纳滨对虾SOD活性的影响饲料中添加不同质量分数凝结芽孢杆菌对凡纳滨对虾肌肉中SOD活性的影响如图1所示，凝结芽孢杆菌对凡纳滨对虾肌肉中SOD活性影响显著(P<0.05)。
随着凝结芽孢杆菌在饲料中添加量的增加，凡纳滨对虾的SOD活性呈增加的趋势。
在投喂凝结芽孢杆菌后第5天，Ⅱ组与对照组相比差异不显著(P>0.05)，Ⅲ组和Ⅳ组与对照组相比差异显著(P<0.05)；第10天时，3个试验组的SOD活性均有所上升，但Ⅱ组与对照组差异不显著(P>0.05)，Ⅲ组和Ⅳ组与对照组差异显著(P<0.05)；第15天时，除Ⅱ组外，其他2个试验组与对照组相比差异显著(P<0.05)；第20天时，3个试验组的SOD活性显著高于对照组(P<0.05)。
2.3 凝结芽孢杆菌对凡纳滨对虾AKP活性的影响饲料中添加不同质量分数凝结芽孢杆菌对凡纳滨对虾肌肉中AKP活性的影响如图2所示，养殖初期，试验组与对照组之间无显著差异(P>0.05)，但是从第10天开始，凝结芽孢杆菌对凡纳滨对虾肌肉中AKP活性影响显著(P<0.05)，Ⅲ组、Ⅳ组的AKP活性显著高于对照组(P<0.05)；第15天时，Ⅳ组的AKP活性与对照组差异显著(P<0.05)；第20天，所有试验组均显著高于对照组(P<0.05)，且从第15天开始，试验组间Ⅳ组的AKP活性与其他2个试验组相比存在显著性差异(P<0.05)，免疫增强效果明显。
2.4 凝结芽孢杆菌对凡纳滨对虾PO活性的影响饲料中添加不同质量分数凝结芽孢杆菌对凡纳滨对虾肌肉中PO活性的影响如图3所示，Ⅱ组和Ⅳ组2个试验组在投喂凝结芽孢杆菌后20天内PO活性一直略有升高，但与对照组相比差异不显著(P>0.05)。
而Ⅲ组在投喂凝结芽孢杆菌后PO活性明显增加，所有取样时间点内，都显著高于对照组(P<0.05)，且高于其他2个试验组。