叶绿体中色素的提取与分离
叶绿体中色素的提取和分离
“叶绿体中色素的提取和分离”实验改进（2）1．提取色素为了得到墨绿色的色素滤液，于实验前2～3天，取质地柔软、深绿色的草本植物的叶片放在通风处阴干。
研磨时，所取叶片要除去粗的叶脉和叶柄。
向研钵中加入少量二氧化硅和碳酸钙，进行研磨。
待研磨充分后，再加入少量氯化钠和适量丙酮，就出现了深绿色的液体，液体经脱脂棉过滤后就得到了墨绿色的色素滤液。
2．划滤液细线用毛细吸管吸取色素滤液，采用毛笔的执笔方式握住毛细吸管，悬腕，沿滤纸条上的铅笔划线作快速的划动，重复2～3次，就可以得到细、匀、齐的滤液细线。
3．分离色素（1）采用小试管法取长15cm、直径15mm的小试管，试管塞用橡皮塞。
在橡皮塞的中央用刀片刻一细槽，然后将划过滤液细线的滤纸条无色素的一端，插入橡皮塞的细槽中。
向小试管内加入3．5ml层析液，将滤纸条慢慢地垂直插入层析液中，橡皮塞要塞紧小试管。
注意滤液细线不能没及层析液。
（2）采用培养皿法不用滤纸条，也不划滤液细线，而取直径为10cm的干燥圆形定性滤纸，用毛细吸管吸取色素滤液，在滤纸的中央点成圆形的色素斑。
重复4～5次。
然后取一枚缝衣针，穿一条细棉线，在棉线末端打个结，将针穿过滤纸上的色素斑中心，在距线结约4cm处剪断棉线。
取直径l0cm的培养皿一套，向培养皿底中加入5ml层析液。
把上述圆形滤纸扣在培养皿底上面，无线结的一面朝下，棉线则浸没在层析液中。
再将培养皿盖盖在滤纸上。
采用该方法，可以看到色素随层析液由线结处向周围均匀扩散。
因此得到的4条色素带呈同心环状，十分清晰。
而且层析时，滤纸上的色素不会没及层析液中，点色素斑比划滤液细线容易得多，实验效果非常显著。
叶绿体色素提取与分离实验
类胡萝卜素 50
叶绿素b 叶绿素a
0
波长
二、捕获光能的色素和结构
（一）捕获光能的色素
色素
叶绿素a （蓝绿色）
叶绿素 叶绿素b
（黄绿色） 含量约占3/4
类胡萝卜素
叶黄素 （黄色） 胡萝卜素 （橙黄色）
含量约占卜素主 要吸收蓝紫光
叶绿素主要吸收 红光和蓝紫光
课堂检测
1、在叶绿体色素的提取和分离实验中在滤纸条上扩散速度 最快的色素是（ ） A、叶绿素a B、叶绿素b C、胡萝卜素 D、叶黄素
4、在圆形滤纸的中央点上，对叶绿体的色素进行色素分析， 会得到近似，同心的四个色素环，排到在最里圈的色素是 （） A、橙黄色 B、蓝绿色 C、黄色 D、黄绿色
练习
1、在植物实验室的暗室内，为了尽可能地降
低植物光合作用的强度，最好安装（ B）
A、红光灯 B、绿光灯 C、白炽灯 D、蓝光灯
2、为提高大棚蔬菜的产量，哪项措施更有效
5、下图是叶绿体色素的提取与分离实验中所用的材料与用具。请回答： 分别在A、B、C三个研钵中加入2克菠菜，经研磨、提取得到三种颜色的溶液： 深绿色、黄绿色（或褐色）、几乎无色。注：“+”表示加，“—”表示不加。
处理 二氧化硅（少量） 碳酸钙（少量） 95%乙醇（10ml） 蒸馏水（10ml）
ABC +++ —+ + + —+ —+ —
（ D）
A、安装红色透光薄膜 B、安装蓝紫色透光薄膜
C、安装绿色透光薄膜 D、安装无色透光薄膜
练习
3．在圆形滤纸的中央点上粘叶绿体的色素滤液， 进行色素分析，会得到近似同心环状的四个色素圈，
排在外圈的色素呈 [ A]
叶绿体中色素的提取和分离
生物体内的主要能源物质是: 糖类 生物体内主要的储能物质是: 脂肪
生物体进行生命活动的直接 能源物质: ATP 最终能量来源: 太阳的光能
能量之源——光与光合作用
太阳光中有能量，我 们制造出太阳能电池板 可以捕获其中的能量并 转化为电能。 绿色植物也能捕获 并转化太阳光中的能量， 那么，绿叶中通过什么 物质或结构捕获并转化 光能呢？
小鼠
存活。
结论： 植物能够净化因燃烧或呼吸而变混浊的空气。
结论1： 普利斯特利的实验 只有在阳光照射下
才能成功
结论2： 植物体只有绿叶才能更 新空气。
结论： 淀粉是光合作用的产物之一。
极 细 光 束
黑暗中
光照下
结论： 叶绿体是植物进行光合作用的场所 光合作用需要在光下进行 光合作用中释放氧气
O2
光合作用的过程
学习目标： 1．了解光合作用的探索历程 2. 掌握光合作用的过程
1
光合作用的概念:
光合作用是指绿色植物通过叶绿体,利 用光能,把二氧化碳和水转化成储存能 量的有机物,并且释放氧气的过程。 2 光合作用反应式: CO2 + H2
*O 光能 叶绿体
有机物 + *O2
在光合作用的探索历程中， 有几个比较重要的突破性实验？ 分别有什么发现？在探索过程中 最杰出的科学家是谁？
光合作用的过程
阅读课本P:103—106,填写下表
项目
光反应
叶绿体的类囊体薄膜上 光、色素、酶，水 H2O
酶
暗反应
叶绿体的基质上 酶，水，ATP, [H]，C5
场所 条件
物质变化
[H]+O2 ↑
酶
ADP+Pi+能量
[叶绿体中色素的提取和分离实验]叶绿体中色素的提取和分离
![[叶绿体中色素的提取和分离实验]叶绿体中色素的提取和分离](https://img.taocdn.com/s3/m/096b67f9fbb069dc5022aaea998fcc22bcd14359.png)
[叶绿体中色素的提取和分离实验]叶绿体中色素的提取和分离叶绿体中色素的提取和分离一、为什么要选新鲜绿色的幼嫩叶片?叶绿体中色素的提取和分离因为叶绿色含N﹑Mg，而老叶中这两种矿质元素很多已经分解转移,所以鲜绿色的幼叶中叶绿素的含量高,适合于实验.二、制备滤纸条要剪去两角实验中需将滤纸条的一端剪去两角，为什么这样做，如果不会怎么样呢? 原来若不剪去滤纸条的两角，色素带的两边和中间不是在一条直线上。
这是由于滤纸条两边水分子可以向三个方向散失，向上“跑”的速度快。
而滤纸条中间的水分子只能向两个方向散失，分别是向内和向外，因而会“跑”得慢一些。
而现在剪去滤纸条的两个角，可以在一定程度上加快中间色素的扩散速度，减慢两边色素的扩散速度，从而真正意义上使这些色素从同一起点随层析液扩散.三、为什么研磨时加无水乙醇或丙酮?因为色素是有机物,根据相似相容性原理,无水乙醇或丙酮能溶解色素四、为什么加入少许二氧化硅?在提取色素的过程中，要加人少许二氧化硅。
原来是为了研磨得充分。
二氧化硅就是石英沙子，研磨时可以增大强度，加快细胞和叶绿体的破裂，而使叶绿体中的色素释放出来。
五、为什么加入少许碳酸钙?在提取色素的过程中，要加人少许碳酸钙。
原来是为了防止在研磨时叶绿体中的色素受到破坏。
叶绿体中的色素原本所处的环境具微碱性。
在实验中,研磨会使细胞结构遭到破坏，细胞液中有机酸流出，酸性的细胞液就会接触到叶绿体中的色素，致使叶绿素的分子结构遭到破坏，使叶绿素失镁，呈黄褐色,如同我们看到到腌制的黄瓜会变色一样,而碳酸钙是强碱弱酸盐，碳酸钙在水中的溶解度很小，但还是有一部分得到溶解，中和细胞液的酸性，制造了一个弱碱环境，保护了色素。
六、为什么用单层尼龙布过滤?在过滤时，漏斗基部放一块单层尼龙布，老教材中是用滤纸来过滤的。
过滤的目的是去掉不需要的杂质如破碎的细胞、二氧化硅、碳酸钙等，相对而言，单层尼龙布可以让色素溶液更好地通过效果比滤纸要好。
叶绿体色素的提取与分离实验
3、用纸层析法将色素进行分离，在滤纸条上出现最宽旳一 条色素带旳颜色是（ ） A、橙黄色 B、黄色 C、蓝绿色 D、黄绿色
类胡萝卜素 50
叶绿素b 叶绿素a
0
波长
二、捕获光能旳色素和构造
（一）捕获光能旳色素
色素
叶绿素a （蓝绿色）
叶绿素 叶绿素b
（黄绿色） 含量约占3/4
类胡萝卜素
叶黄素 （黄色） 胡萝卜素 （橙黄色）
含量约占1/4
吸收可见 旳太阳光
类胡萝卜素主 要吸收蓝紫光
叶绿素主要吸收 红光和蓝紫光
课堂检测
1、在叶绿体色素旳提取和分离试验中在滤纸条上扩散速度 最快旳色素是（ ） A、叶绿素a B、叶绿素b C、胡萝卜素 D、叶黄素
分别在A、B、C三个研钵中加入2克菠菜，经研磨、提取得到三种颜色旳溶液： 深绿色、黄绿色（或褐色）、几乎无色。注：“+”表达加，“—”表达不加。
处理
二氧化硅（少许） 碳酸钙（少许）
95%乙醇（10ml） 蒸馏水（10ml）
ABC +++ —+ + + —+ —+ —
（1）A处理得到旳溶液颜色是 黄绿色 ，原因是__叶__绿__素_被__破__坏__________
（6）色素分离旳成果：相邻色素带间距最宽旳是 他们旳颜色是 橙黄色 和 黄色 ，主要吸收 蓝紫
胡萝卜素 和 叶黄素 ， 光。
（ D）
A、安装红色透光薄膜 B、安装蓝紫色透光薄膜
7------实验：叶绿体中色素的提取和分离
叶绿体中色素的提取和分离一. 课本回扣:1. 实验原理:（1）提取：叶绿体中的色素能够溶解在中, 所以, 可以用提取叶绿体中的色素。
（2）分离: 叶绿体中的色素在层析液中的溶解度: 溶解度高的随层析液在滤纸上扩散得, 溶解度低的随层析液在滤纸上扩散得。
这样几分钟后, 叶绿体中的色素就在扩散过程中分离开来2. 步骤方法：（1）研磨前加入少许石英砂的目的是。
（2）研磨前加入少许碳酸钙的目的是。
（3）加入10mL无水乙醇的目的是。
（4）层析液是有机溶剂, 常由、和混合而成。
也可代用。
层析液的作用是。
3. 实验结果及分析：（1）扩散最快的是（颜色: ）扩散最慢的是（颜色: ）。
滤纸上有四条色素带说明了什么？。
（2）滤液细线为什么不能接触到层析液？。
1. （1）无水乙醇无水乙醇（2）不同快慢2. （1）研磨充分（2）防止叶绿素被破坏（3）溶解（提取）色素（4）20份石油醚2份丙酮1份苯93号汽油使叶绿体中的色素随着层析液在滤纸上的扩散而分离开来3．（1）胡萝卜素（橙黄色）叶绿素b（黄绿色）绿叶中的色素有四种, 它们在层析液中的溶解度不同, 随层析液在滤纸上扩散的快慢也不一样。
（2）滤纸上的滤液细线如果触到层析液, 细线上的色素就会溶解到层析液中, 就不会在滤纸上扩散开来, 实验就会失败。
1. “叶绿体色素的提取和分离”实验:（1）在“叶绿体色素的提取和分离实验”中, 将叶绿体色素进行分离的方法名称是。
（2）某学生在实验过程中将划有滤液细线的滤纸条（已重复几次划线）插入层析液, 几分钟后取出观察, 发现在滤纸条上无色素分带现象, 而其他用同一滤液作实验的同学的滤纸条上却色素分带明显。
其实验失败的原因最可能是。
（3）为了获得整齐又不重叠的四条色素带, 在画滤液细线时应注意：①②（4）如果没有丙酮和菠菜叶片, 要保证分离后的色素带清晰, 可以用来代替的最佳实验材料是A. 酒精和麦苗B. 酒精和大白菜C. 蒸馏水和大白菜D. 蒸馏水和麦苗（1）纸层析法（2）滤液细线没入层析液中（3）应画得细而直待上次凉干后再重复几次（4）A2. 下面是有关叶绿体色素的提取和分离实验的问题, 请回答:（1）实验中加入研钵内的丙酮的作用是；实验中加入研钵内的石英砂的作用是；实验中加入研钵内的碳酸钙的作用是。
叶绿体中色素的提取与分离实验教案
叶绿体中色素的提取与分离实验教案叶绿体是植物细胞中的细胞器，其中含有大量的色素，如叶绿素a、叶绿素b、类胡萝卜素等。
叶绿体的色素对光合作用起着重要的作用。
为了更好地了解叶绿体中的色素，可以进行色素的提取与分离实验。
下面是一个关于叶绿体中色素提取与分离的实验教案的示例：实验目的：通过提取和分离叶绿体中的色素，了解叶绿体中不同色素的组成和分布情况。
实验材料：叶绿体悬液、酒精、丙酮、去离子水、毛细管、滤纸、色谱纸实验步骤：1.准备叶绿体悬液：取新鲜的叶片，用蒸馏水冲洗干净，然后将叶片切碎，加入研磨液中，均匀磨碎，得到叶绿体悬液。
2.提取叶绿体中的色素：取约10mL叶绿体悬液，加入10mL酒精中，轻轻摇匀，使叶绿体中的色素溶解入酒精中。
3.分离叶绿体中的色素：将色素溶液倒入试管中，离心2分钟，使色素沉淀在管底。
4.取出上清液，分别加入等量的丙酮和去离子水，摇匀。
5.使用毛细管吸取溶液上清液，在色谱纸上滴出一个小圆点。
6.取另一块色谱纸，将其一端放入溶液上清液中，实验结束时将其取出，在上面标出溶液上清液滴出的位置。
7.将色谱纸上圆点附近的部分剪下，放入洗涤皿中，加入足够的去离子水，等待色素上升到合适的高度。
8.将色素附近的部分取出，用吸水纸吸干，以保留色素的分布情况。
实验结果与分析：通过实验可以观察到色素在色谱纸上的分离情况。
一般情况下，叶绿素a的迁移距离最短，其次是叶绿素b和类胡萝卜素。
根据色素的迁移情况，可以估算出叶绿体中不同色素在色谱纸上的相对含量。
实验注意事项：1.实验中要使用新鲜叶片制备叶绿体悬液，以提高实验的准确性。
2.酒精要避光保存，以免影响色素的提取效果。
3.实验过程中要注意避免色素溶液的污染，以免影响实验结果的准确性。
4.在操作过程中要小心使用天平、试管离心机等实验仪器，以免发生意外。
扩展实验：1.在提取叶绿体色素的过程中，可以尝试使用不同浓度的酒精溶液，观察对色素提取的影响。
2.可以将提取得到的叶绿体色素溶液分别吸取到不同的试管中，在不同波长下测定其吸光度，了解不同波长的光在叶绿体色素中的吸收情况。
叶绿体中色素的提取与分离实验
2.在研磨时要加少许二氧化硅，目的是为了研 磨充分，有利于色素的提取；加少许碳酸钙 的目的是为了防止研磨过程中，叶绿体中的 色素受到破坏。
3.分离色素时，一定不要让滤纸条上的滤液细 线接触到层析液，这是因为色素易溶解在层 析液中，导致色素带不清晰，影响实验效果。
B．滤纸条上滤液细线会变粗而使色素太分散
C．色素会溶解在层析液中而使结果不明显
D．滤纸条上几种色素会混合起来
5．某人做叶绿体中色素分离实验时，使用的 是圆形滤纸，装置如下图。实验结束时在圆形 滤纸上形成四个同心色素圆环，则最内圈所呈 颜色为 （D）
6．叶绿体中色素经层析后，出现在滤 纸上扩散最宽的色素带是（A）,最窄的 色素带是 （C） , 最整齐的色素带是
（C）
A．叶绿素a C．胡萝卜素
B．叶绿素b D．叶黄素
7．叶绿体的色素能在滤纸条上彼此分 离开的原因是 （C）
A．色素提取液中的不同色素已分层 B．阳光的照射使不同的色素彼此分 开
C．滤纸对各种色素的吸附力不同 D．丙酮酸使色素溶解并彼此分离的 扩散速度不同
小结：在叶绿体色素的提取和分离实验中：
【实 验】
叶绿体中色素的提取和 分离
一、实验原理
1.叶绿体中的色素能溶解在丙酮（有机溶剂: 酒精、汽油、苯、石油醚等）中，所以用 丙酮可提取叶绿体中色素。
2.色素在层析液中溶解度不同，溶解度高的 色素分子随层析液在滤纸条上的扩散得快， 溶解度低的色素分子随层析液在滤纸条上 的扩散得慢，因而可用层析液将不同的色 素分离。
五、实验讨论： 1．滤纸条上有几条不同颜色的色带？其排 序怎样？宽窄如何？这一说明了什么？
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
A. ①②③④ C. ④②③①
B. ②④①③ D. ③②①④
捕获光能
色素
色素的种类与颜色：
色素 种类
含量
叶绿 约占 素 3/4
名称 叶绿素a 叶绿素b
颜色
吸收光
蓝绿色 主要吸收红 黄绿色 光和蓝紫光
类胡 萝卜 素
约占 黄色
主要吸收蓝 紫光
画滤液细线 毛细吸管沿铅笔线画一条直的 滤液细线 .
色素分离
干燥后， 重复一两 次 将滤纸条轻轻插入 层析液 中
滤纸条上呈 现四条颜色、 宽度不同的 色素带
用培养皿盖住烧杯
胡萝卜素： 橙黄 色 叶黄素： 黄 色 叶绿素a： 蓝绿 色 叶绿素b： 黄绿 色
1.在提取绿叶中的色素时，研磨绿叶碎片需要
加入碳酸钙，目的是 （ B ）
捕获光能
色素
色素的吸收光谱
延伸拓展
色素的分布： 叶绿体的类囊体薄膜上
色素的作用： 吸收、传递、转化光能
不同颜色的大棚对光和效率的影响： ① 无色透明大棚光和效率最高； ② 绿色塑料大棚光和效率最低。 ③ 在农业生产中，有些温室中悬挂红色或蓝 色光的灯，可有效提高蔬菜产量。
甲＞乙＞丙＞丁
叶绿体中色素
实验目的：
提取和分离
1) 进行绿叶中色素的提取和分离； 2) 探究绿叶中含有几种色素。
材料用具：
新鲜的绿叶、干燥的定性滤纸、无 水乙醇、层析液、二氧化硅、碳酸 钙、毛细吸管、研钵、剪刀、量筒 等。
一、提取绿叶中的色素
1.取材： 5g绿叶+剪碎+研钵 2.研磨： 二氧化硅+碳酸钙+10ml无水乙醇 3.过滤： 玻璃漏斗+单层尼龙布
A. 使研磨充分 B. 防止色素破坏 C. 加快提取速度 D. 促进色素溶解
2.阳光通过三菱镜能显示出七种颜色的连续光 谱，如果将一瓶叶绿素提取液放在光源和三 菱镜之间，连续光谱中就会出现一些黑色条
带，这些条带应位于 （D）
A. 绿光区
B. 红光区和绿光区
C. 蓝紫光区和绿光区
D. 红光区和蓝紫光区
色素 色素 色素 溶解 扩散 种类 颜色 含量 度 速度
胡萝 卜素 叶黄 素 叶绿 素a 叶绿 素b
橙黄 色
黄色
蓝绿 色 黄绿 色
最少 较少 最多 较多
最高 较高 较低 最低
最快 较快 较慢 最慢
叶绿体中色素
提取和分离
实验结论：
绿叶中含有的四种色素分别是胡萝 卜素、叶黄素、叶绿素a、叶绿素b。 其中含量最多的是叶绿素a，最少 的是胡萝卜素。
二、制备滤纸条
将干燥的滤纸条剪成长与宽略小于试管的滤 纸条，并在一端剪去两角，并在距这一端1 ㎝处用铅笔画一条细的横线
三、画滤液细线
1) 吸取少量滤液，沿铅笔线画出 一条细线，要细、匀、直、浓 2) 干燥后，反复画几次，每次画 完尽量吹干
分离色素
1.装置： 如右图
色素的分离 2.结果：
结果分析
蓝紫 叶绿素a 叶绿素b
红光、蓝紫
叶绿素b
胡萝卜素
叶绿体的结构
1.组成
a.双层膜 b.基粒 c.类囊体薄膜
2.成分
a.色素
(类囊体薄膜)
b.酶
(类囊体薄膜和 叶绿体基质)
叶绿体的功能
叶绿体在光照下 产生了氧气。
3.在叶绿体中色素的提取和分离实验中，滤纸 条上呈现出的四种色素带自下而上 的名称依
次是（ C ）
A. 胡萝卜素、叶黄素、叶绿素a、叶绿素b
B. 叶黄素、叶绿素a、叶绿素b、胡萝卜素
C. 叶绿素b、叶绿素a、叶黄素、胡萝卜素
D. 胡萝卜素、叶黄素、叶绿素b、叶绿素a
橙黄色、黄色、蓝绿色、绿色 胡萝卜素、叶黄素
第5章 细胞的能量供应和应用
叶绿体中色素的提取与分离
问题探讨
叶绿体
蓝藻 叶绿素和藻蓝素
你知道叶绿体中含有哪些色素吗？
叶绿素和类胡萝卜素
叶绿体中色素
提取和分离
实验原理：
1) 提取方法：
绿叶中的色素能溶解在有机溶剂无水乙醇中。 可用无水乙醇提取色素。
2) 分离方法： 纸层析法——色素在层析液中溶解度不同， 使四种色素随层析液在滤纸条上扩散的速度 不同而分离。
延伸拓展
药品作用：
SiO2： 使研磨更加充分、迅速 CaCO3：保护色素分子不被破坏 无水乙醇：提取绿叶中的色素
注意事项：
不要让滤液细线浸没在层析液中， 否则会使色素溶解在层析液中而导 致实验失败。
例题. 在做“绿叶中色素的提取和分离”实验 时，甲、乙、丙、丁四位同学对相关试剂的 使用情况如下表所示，其余操作均正常。则
小结
实 验 原 理
绿
叶
中 色 素 的 提
实 验 步 骤
取
和
分
离
实 验 现 象
提取
有机溶剂(无水乙醇)能溶解色素
分离 色素因在层析液中溶解度不同而扩散速度不同
绿色叶片 剪碎 .
研磨
提取色素 过滤
加入少许 SiO2、CaCO3、10ml无. 水乙
收集滤液 长10㎝，宽1㎝。
制备滤纸条
一端剪去 两角 . 铅笔画一条细的 横线