弧菌显色培养基
弧菌显色培养基检测副溶血弧菌检测结果
1382018 年第 5 卷第 35 期2018 Vol.5 No.35临床医药文献杂志Journal of Clinical Medical弧菌显色培养基检测副溶血弧菌检测结果庄鹏飞，陈佳渊，凌 燕（常州市新北区疾病预防控制中心，江苏 常州 213022）【摘要】目的 选取三种国内外不同厂家所生产的菌弧显色培养基，分别对副溶血弧菌进行检测，判断几种菌弧显色培养基检测副溶血弧菌的结果。
方法 分别对三种弧菌显色培养基额的特异性、灵敏度进行测试，并对人工污染样品和实际样品进行检验。
结果 HKC vibrio 对副溶血性菌弧具有较好的选择性和特异性。
三种培养基在检测灵敏度方面的对比；差异无统计学意义（P ＞0.05）。
HKC vibrio 、CHROMagar vibrio 比TCBS 具有更高的检出率，能够直接对副溶血性弧菌进行分离鉴定。
结论 HKC vibrio 具有较好的灵敏性和特异性，是一种比较有价值的分离平板，具有较高的应用价值。
【关键词】弧菌显色培养基；副溶血弧菌；结果【中图分类号】R446 【文献标识码】B 【文章编号】ISSN.2095-8242.2018.35.138.02副溶血性菌弧是一种革兰氏阴性菌嗜盐细菌，能够在人畜之间传播，副溶血性菌弧主要分布于各种水产品特别是海产品中，世界各地的沿海地区都有副溶血性菌弧的存在，由副溶血性菌弧所引起的食物中毒在细菌性食物中毒中所占的比例非常高，对人类的健康造成了很大的威胁[1]。
为了防止副溶血性菌弧大规模的污染和扩散，对副溶血性菌弧进行及时的检测是比较关键的防治手段。
弧菌显色培养基检测是一种新型的检测方试，主要通过在培养基中加入特异性酶的显色底物，根据菌落显示出的颜色对菌种进行初步的鉴别，简化了对菌株进行纯培养和生化鉴定的步骤，检测效率能够获得较大的提升[2]。
为了研究弧菌显色培养基检测副溶血弧菌检测结果，选取三种国内外不同厂家所生产的菌弧显色培养基，分别对副溶血弧菌进行检测，现报告如下。
弧菌显色培养基平板说明书
专注微生物监测控制 为食药安全保驾护航广东环凯微生物科技有限公司 网址：地址：广州市黄埔区科学城神舟路788号 邮编：510663 传真：************-8619销售热线：************转8602（分机） 技术热线：************转8876、8877（分机）产品说明书Product Manual【产品名称】通用名称：弧菌显色培养基平板英文名称：Chromogenic Vibrio Agar Plate【产品编号与包装规格】产品编号 产品类型 包装规格 CP0560即用型成品平板20个/盒【产品用途】用于弧菌特别是副溶血性弧菌的分离和初步鉴定。
【检验原理】蛋白胨和酵母膏粉提供氮源、维生素、氨基酸和碳源；蔗糖为可发酵的糖类；抑菌剂抑制大部分非弧菌细菌，氯化钠可维持均衡的渗透压；琼脂是培养基的凝固剂；混合色素与副溶血性弧菌、霍乱弧菌和创伤弧菌所对应的酶发生特异性反应，水解底物，释放出显色基团，在淡黄色平板上产生品红色菌落(副溶血性弧菌)和绿-蓝绿色的菌落(霍乱弧菌和创伤弧菌)。
【配方成分】【使用方法】在洁净环境，打开包装即可使用，需注意无菌操作。
【质量控制】下列质控菌株接种后于35～37℃培养24h ，观察结果如下表：【储存条件与保质期】2-8℃，贮存于避光、干燥处。
有效期见产品标签。
【注意事项】1、一次性平板培养基置于冰箱冷藏保存需与存放容器冷凝管保持一定距离以避免冻损坏。
产品多次在低温与常温之间变更会引起琼脂的泌水，属于正常现象。
使用前应平衡至室温且尽量在无菌干燥箱中预干燥。
2、质检报告可以登录环凯网站 ， 打开“下载中心”页面，输入产品批号下载。
【废物处理】检测之后带菌物品置于121℃下高压灭菌30分钟后处理。
【执行标准】Q/HKSJ 03-【说明版本】2019年5月14日成分 含量（每升） 成分 含量（每升） 蛋白胨 18.8g 琼脂 13.0g 酵母膏粉 5.0g 混合色素 3.0g 蔗糖 20.0g 抑菌剂 1.5g 蒸馏水 1000mL 氯化钠10.0g最终pH9.0±0.2指标 质控菌株及编号标准值 特征性反应 生长率副溶血性弧菌ATCC17802 PR ≥0.5 品红色菌落 霍乱弧菌VBO 非01 绿蓝色菌落 特异性 溶藻弧菌ATCC33787 —— 无色，不扩散选择性大肠埃希氏菌ATCC25922G ≤1——副溶血性弧菌：品红色；。
显色培养基在几种食源性致病菌快速检测中的应用
显色培养基在几种食源性致病菌快速检测中的应用显色培养基是一种鉴定微生物的快速检测技术，它的原理是通过在培养基中加入微生物自身代谢生产的酶，根据相应显色底物反应的颜色对菌种进行判断与鉴定。
显色培养基较传统培养基具有灵敏度高、特异性大的优点，是一种新型的分离培养。
大肠杆菌显色培养基、沙门氏菌培养基、金黄色葡萄球菌显色培养基、弧菌显色培养基、李斯特菌显色培养基等这几种食源性致病菌已经有效、广泛应用于食品、环境卫生、医药等领域，取得了一定的成效。
但显色培养基尚还存在一些假阳（阴）等问题，这就影响了检测的结果，因此还需要进一步的研究。
标签：显色培养基；食源性致病菌；快速检测；应用随着人们生活水平逐渐的提高和近年来一系列食品安全问题的出现，食品的安全问题越来越受到人们的重视。
食品安全问题与微生物密切相关，微生物可造成食品环境的污染，因此，微生物的检测技术已经成为检测食品安全问题的重要工具。
微生物传统的检测方法耗时长，操作步骤繁琐，已经不能满足当今食品、环境卫生、医药等领域检测的需要。
研究各种新型微生物的检测技术，提高检测的效率是有效预防和控制各种微生物感染的有效措施[1]。
本文就显色培养基在大肠杆菌显色培养基、沙门氏菌培养基、金黄色葡萄球菌显色培养基、弧菌显色培养基、李斯特菌显色培养基等食源性致病菌快速检测中的应用进行研究总结。
显色培养基的原理是通过在培养基上加入微生物自身代谢产生的酶的底物，底物是由发色基团和微生物可代谢物质组成，为无色，但在特异性酶作用下游离出发色基团并显示一定颜色，直接观察菌落颜色，对菌种做出鉴定，减少了对菌株进行纯培养和进一步生化鉴定的步骤[2]。
1 几种食源性致病菌应用显色培养基快速检测的近况1.1 显色培养基在大肠杆菌应用的研究研究表明，绝大多数的大肠杆菌具有β-D-葡萄糖苷酸酶（β-D-Gud），利用β-葡萄糖醛酸酶分解底物，使色源游离出来显色而区分大肠杆菌和其它的细菌。
沙门菌、志贺氏菌和耶尔森氏菌不能产生β-D-Gud，因此可以利用β-D-Gud底物有效检测大肠杆菌。
科玛嘉弧菌显色培养基对创伤弧菌检测效果的研究
科玛嘉弧菌显色培养基对创伤弧菌检测效果的研究许柯;劳华均;李如松;孙萍【期刊名称】《安徽农业科学》【年(卷),期】2012(040)023【摘要】[目的]探讨科玛嘉孤菌显色培养基( CHROMagarTM Vibrio)对创伤弧菌的检测效果.[方法]通过CHROMagarTM Vibrio、梅里埃弧菌显色培养基( ChromID Vibro)与硫代硫酸盐-柠檬酸盐-胆盐-蔗糖(TCBS)琼脂培养基之间进行比对,采用阳性菌株直接平板计数和人工污染样品的方法,对CHROMagarTM Vibrio的灵敏度、特异性和检测效果进行评价.[结果]CHROMagarTMVibrio平板上创伤弧菌为绿色圆形直径约2～3 mm的光滑菌落(培养24h后).CHROMagarTM Vibrio平板在特异性上优于另2种平板,在灵敏度上跟ChromIDVibro相近,但大大优于TCBS平板.当样品中大约有3.0 cfu/ml浓度的目标菌时,经过选择性增菌培养,3种平板均可以检出.[结论]CHROMagarTM Vibrio 具有良好的灵敏度、特异性,能提高创伤弧菌的检出率.【总页数】2页(P11833-11834)【作者】许柯;劳华均;李如松;孙萍【作者单位】宁波检验检疫局技术中心,浙江宁波315012;宁波检验检疫局技术中心,浙江宁波315012;宁波检验检疫局技术中心,浙江宁波315012;宁波检验检疫局技术中心,浙江宁波315012【正文语种】中文【中图分类】S182【相关文献】1.科玛嘉显色培养基在快速检测呼吸道假丝酵母感染中的应用分析 [J], 刘桂荣;黄永青2.科玛嘉念珠菌显色培养基检测阴道念珠茵效果评价 [J], 秦海秋3.科玛嘉显色培养基在检测饲料中沙门氏菌的应用评价 [J], 周春红;毕昊容;王苏华;朱林4.运用TCBS琼脂平板与科玛嘉弧菌显色培养基对腹泻病原微生物检验结果的分析[J], 赵颖5.科玛嘉弧菌显色培养基对弧菌的分离培养 [J], 朱敏华;项明洁;倪语星因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
弧菌显色培养基
弧菌显色培养基弧菌显色培养基(ChromogenicVibrioAgar)用途：用于水产品及食物中毒样品中弧菌特别是副溶血性弧菌的分离和鉴定。
(GB/T4789.7-2008，SN0173-2010和SN1022-2010) 原理：蛋白胨和酵母膏粉提供氮源、维生素、氨基酸和碳源；蔗糖为可发酵的糖类；抑菌剂抑制大部分非弧菌细菌，氯化钠可维持均衡的渗透压；琼脂是培养基的凝固剂；混合色素与副溶血性弧菌、霍乱弧菌和创伤弧菌所对应的酶发生特异性反应，水解底物，释放出显色基团，在淡黄色平板上产生品红色菌落(副溶血性弧菌)和绿-蓝绿色的菌落(霍乱弧菌和创伤弧菌)。
配方（每升）：蛋白胨18.8g酵母膏粉5g蔗糖20g氯化钠10g抑菌剂1.5g琼脂13g混合色素3g最终pH9.0±0.2使用方法1、取瓶内干粉71.3克，用1000ml蒸馏水或纯水溶解，可按比例扩增或缩小。
搅拌加热煮沸至完全溶解，不需高压灭菌，冷至约50℃，倾注灭菌平皿。
2、以无菌操作取检样25g（mL），加入3%氯化钠碱性蛋白胨水225mL，用旋转刀片式均质器以8000r/min均质1min，或拍击式均质器拍击2min，或用Pulsifier脉冲式样品处理器均质30秒，制备成1:10的均匀稀释液。
如无均质器，则将样品放入无菌乳钵中磨碎，然后放在500mL的灭菌容器内，加225mL3%氯化钠碱性蛋白胨水，并充分振荡。
3、增菌：将上述1:10稀释液于36±1℃培养8～18h。
4、分离在增菌液中用接种环取一环，于弧菌显色平板上划线分离，于236±1℃培养18～24h。
5、通过验证试验进一步确认假定性副溶血性弧菌和其他弧菌，如氧化酶、革兰氏染色、生化鉴定等。
质量控制：本品倾注平皿后呈淡黄色，下列菌株接种后36±1℃培养18-24小时生长情况如下表：质控菌株接种量(cfu/平板)生长情况菌落色泽副溶血性弧菌ATCC17802霍乱弧菌VBO非01溶藻弧菌ATCC3378730–300 30–300--良好良好良好品红色绿-蓝绿色无色大肠埃希氏菌ATCC259225000不长－注：最后的鉴定须做补充试验。
科马嘉弧菌显色平板原理
科马嘉弧菌显色平板原理
科马嘉弧菌显色平板是一种常用的微生物检测方法，其原理是利用科
马嘉弧菌对亚硝酸盐的还原作用，使培养基中的亚硝酸盐还原成亚氨
基化合物，从而产生红色染色反应。
具体来说，科马嘉弧菌显色平板是一种含有亚硝酸盐和磷酸盐的培养基，其中亚硝酸盐是一种无色化合物，可以被科马嘉弧菌还原成亚氨
基化合物，而磷酸盐则是一种缓冲剂，可以维持培养基的pH值稳定。
当样品中含有科马嘉弧菌时，它们会利用培养基中的亚硝酸盐进行还
原作用，产生亚氨基化合物，从而使培养基变成红色。
这种红色染色
反应是一种可视化的指标，可以用来判断样品中是否存在科马嘉弧菌。
科马嘉弧菌显色平板的优点是操作简单、结果直观、灵敏度高，可以
快速检测样品中的科马嘉弧菌。
但是，它也存在一些局限性，比如只
能检测科马嘉弧菌，不能检测其他细菌；还需要一定的培养时间，不
能实现即时检测。
总的来说，科马嘉弧菌显色平板是一种常用的微生物检测方法，可以
用来快速检测样品中的科马嘉弧菌。
但是，在实际应用中需要根据具
体情况选择合适的检测方法，以达到更好的检测效果。
弧菌培养基
TCBS琼脂培养基TCBS琼脂培养基，英文名称Thiosulfate citrate bile salts sucrose agar culture medium，即硫代硫酸盐柠檬酸盐胆盐蔗糖琼脂培养基。
用途：用于霍乱、副溶血性弧菌的分离培养。
用法：称取本品 8.9g,煮沸溶解于100ml 蒸馏水中,冷至 60℃时, 倾入无菌平皿 ,无需高压灭菌。
成分（单位：g/L）：酵母粉 5.0蛋白胨10.0硫代硫酸钠10.0枸橼酸钠10.0牛胆粉5.0牛胆酸钠3.0蔗糖20.0氯化钠10.0柠檬酸铁1.0麝香草酚兰0.04琼脂15.0pH值8.6 ± 0.1，保存温度25℃培养基中的蛋白胨、酵母浸粉提供碳氮源、维生素和生长因子；氯化钠可刺激弧菌的生长；蔗糖是可发酵的糖类；胆酸钠、牛胆粉、硫代硫酸钠和柠檬酸钠及较高的pH可抑制革兰氏阳性菌和大肠菌群；霍乱弧菌对酸性环境比较敏感，因此该pH值可增强其生长；硫代硫酸钠与柠檬酸铁反应作为检测硫化氢产生的指示剂；溴麝香草酚兰和麝香草酚兰是pH指示剂；琼脂是培养基的凝固剂。
四号琼脂用途：用于霍乱弧菌的选择性分离培养。
贮存：贮存于避光、阴凉干燥处，用后立即旋紧瓶盖。
贮存期三年。
霍乱弧菌介绍：霍乱弧菌是人类霍乱的病原体,霍乱是一种古老且流行广泛的烈性传染病之一。
曾在世界上引起多次大流行，主要表现为剧烈的呕吐，腹泻，失水，死亡率甚高。
属于国际检疫传染病。
四号琼脂使用原理：蛋白胨、牛肉膏粉提供碳氮源、维生素和生长因子;氯化钠维持均衡的渗透压；亚硫酸钠可刺激弧菌生长；十二烷基硫酸钠、猪胆汁粉、雷佛奴尔、庆大霉素和亚碲酸钾及较高的pH可抑制革兰氏阳性菌和部分革兰氏阴性杂菌;霍乱弧菌对酸性环境比较敏感，因此该pH值可增强其生长；琼脂是培养基的凝固剂。
（霍乱弧菌耐低温、耐碱）培养基配方(每升)：蛋白胨20g牛肉膏粉5g氯化钠5g无水亚硫酸钠3g十二烷基硫酸钠0.5g猪胆汁粉5g雷佛奴尔0.03g庆大霉素500U琼脂 15g最终pH8.5±0.2四号琼脂使用方法：1、称取四号琼脂培养基53.5g，加入蒸馏水或去离子水1 L，加热煮沸充分溶解，冷至50℃左右，每500mL培养基加入配套试剂1支(5mg亚碲酸钾)，摇匀立即倾注平皿。
科马嘉弧菌显色平板原理
科马嘉弧菌显色平板原理科马嘉弧菌显色平板是一种常用于细菌培养和检测的实验工具。
它的原理是通过特定的培养基和染色剂，使科马嘉弧菌的生长和代谢产物发生变化，从而形成不同的颜色反应。
这种显色平板在微生物学研究和临床实验中有着广泛的应用。
我们需要了解一下科马嘉弧菌。
科马嘉弧菌是一种革兰氏阴性杆菌，属于肠道菌群的一员。
它在自然界中广泛存在于土壤、水体、动植物的表面和肠道中。
虽然科马嘉弧菌本身对人体并不具有致病性，但它是许多病原菌的潜在媒介，因此对其进行检测和分离具有重要意义。
科马嘉弧菌显色平板的制备过程相对简单。
首先，需要准备一种特定的培养基，其中包含了科马嘉弧菌所需的营养物质。
培养基的主要成分包括葡萄糖、酵母浸出物、胆盐和染色剂。
培养基的配方经过多年的研究和改进，能够提供科马嘉弧菌所需的营养物质，同时也能够与其代谢产物发生反应。
制备好培养基后，我们需要将其倒入培养皿中，并进行无菌处理。
然后，将培养皿放入恒温培养箱中，在适当的温度和湿度条件下进行培养。
科马嘉弧菌在培养皿中生长的过程中，会产生代谢产物，其中包括一些特定的酶。
这些酶在培养基中的染色剂存在下，会引起颜色的变化。
具体而言，当科马嘉弧菌代谢产物中存在酶时，染色剂会发生氧化还原反应，从而产生不同的颜色。
这些颜色变化可以通过肉眼直接观察，从而判断科马嘉弧菌的存在和代谢情况。
科马嘉弧菌显色平板的应用非常广泛。
首先，在食品安全领域，科马嘉弧菌是一种常见的食源性病原菌。
通过使用显色平板，可以对食品和环境样品进行检测，判断其中是否存在科马嘉弧菌，从而评估食品的安全性。
科马嘉弧菌显色平板也被广泛应用于临床实验中。
例如，在尿液检测中，科马嘉弧菌显色平板可以用于快速筛查尿液中是否存在细菌感染。
根据颜色的变化，可以初步判断感染的程度和类型，为临床诊断提供参考。
总的来说，科马嘉弧菌显色平板是一种简单而有效的实验工具。
它通过特定的培养基和染色剂，使科马嘉弧菌的生长和代谢产物发生颜色变化，从而进行细菌检测和分离。
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品种名称：弧菌显色培养基
英文名称：Chromogenic Vibrio Agar
品种编号：CRM008
培养基用途：用于水产品及食物中毒样品中弧菌特别是副溶血性弧菌的分离和鉴定。
弧菌显色培养基使用原理：
蛋白胨和酵母膏粉提供氮源、维生素、氨基酸和碳源;蔗糖为可发酵的糖类;抑菌剂抑制大部分非弧菌细菌，氯化钠可维持均衡的渗透压;琼脂是培养基的凝固剂;混合色素与副溶血性弧菌、霍乱弧菌和创伤弧菌所对应的酶发生特异性反应，水解底物，释放出显色基团，在淡黄色平板上产生品红色菌落(副溶血性弧菌)和绿-蓝绿色的菌落(霍乱弧菌和创伤弧菌)。
图册:
弧菌显色培养基配方(每升)：
蛋白胨19.8g
酵母膏粉5g
蔗糖20g
氯化钠10g
抑菌剂1.5g
琼脂13g
混合色素3g
最终pH 9.0±0.2
弧菌显色培养基使用方法
1、取瓶内干粉培养基72.3克，用100ml蒸馏水或纯水溶解，可按比例扩增或缩小。
搅拌加热煮沸至完全溶解，不需高压灭菌，冷至约50℃，倾注灭菌平皿。
2、以无菌操作取检样25 g(mL)，加入3%氯化钠碱性蛋白胨水225 mL，用旋转刀片式均质器以8 000 r/min均质1 min，或拍击式均质器拍击2 min，或用Pulsifier脉冲式样品处理器均质30秒，制备成1:10的均匀稀释液。
如无均质器，则将样品放入无菌乳钵中磨碎，然后放在500 mL的灭菌容器内，加225 mL3%氯化钠碱性蛋白胨水，并充分振荡。
3、增菌：将1:10稀释液于36 ±1 ℃培养8～18h。
4、分离：在增菌液中用接种环取一环，于弧菌显色平板上划线分离，于36 ±1 ℃培养18～24 h。
5、通过验证试验进一步确认假定性副溶血性弧菌和其他弧菌，如氧化酶、革兰氏染色、生化鉴定等。
弧菌显色培养基质量控制：
本品倾注平皿后呈淡黄色，下列菌株接种后36±1℃培养18-24小时生长情况如下表：
质控菌株生长情况菌落色泽
副溶血性弧菌ATCC17802 良好品红色
霍乱弧菌VBO非01 良好绿-蓝绿色
溶藻弧菌ATCC33787 良好无色
大肠埃希氏菌ATCC25922 不长-
注：最后的鉴定须做补充试验。
外观：
脱水培养基：浅黄色具流动性粉未。
制备好平板：淡黄色的胶。
储存条件和保质期：
脱水培养基：10-30℃，保质期二年。
制备好平板：2-8℃，最多保存两周。