TECAN Freedom Evolyzer全自动酶免疫分析一体机的应用体会
TECAN Freedom EVO Clinical 150-8型样本前处理仪故障案例分析
维修工程156 ZHONGGUOYIXUEZHUANGBEI[文章编号] 1672-8270(2019)08-0156-02 [中图分类号] R197.39 [文献标识码] B[关键词] 化验样本；前处理仪；故障处理杜智洋① 陈楚群① 郭向辉①TECAN Freedom EVO Clinical 150-8型样本前处理仪故障案例分析①佛山市妇幼保健院设备科 广东 佛山 528000作者简介：杜智洋，男，(1987- )，本科学历，工程师，从事检验及超声类医疗设备维护维修工作。
目前，医院检验科的化验样本量呈快速增长趋势，大量的化验样本处理依靠检验人员不停地重复工作，工作速率低又容易出错。
样本前处理仪作为快速、精准加样设备，代替人手的重复操作，降低人手操作疲劳与出错率，提升检验流程效率[1]。
由于此类设备自动化程度高，重复运动零部件较多，易出现机械性故障，且每次维修费用较高。
为此，分析TECAN样本前处理仪故障案例和解决方法，具有维修参考意义。
1 样本前处理仪的原理与结构Freedom EVO Clinical 150-8型样本前处理仪(瑞士TECAN公司)可为酶免分析(ELISA)前处理分液、预稀释及留样等样本处理，适用于临床实验室大量重复性精确的分液、加样等工作，极大减少人力操作时间，降低出错概率，其程序控制系统提供多种加样模式选择，设备适用性较高，其动作主要分为冲洗、浸泡、吸液及加液，其定量加样结构见图1。
DOI: 10.3969/J.ISSN.1672-8270.2019.08.043中国医学装备2019年8月第16卷第8期 China Medical Equipment 2019 August V ol.16 No.8注：图中A 为试剂容器；B 为快速冲洗器；C 为吸液管；D 为分液器；E 为连接管；F 为三通阀；G 为定量注射器；H 为吸量管；I 为加样针；K 为集液盒；L 为废液管；M 为废液罐图1 定量加样结构(1)冲洗。
FAME全自动酶免分析仪原理和日常保养及常见故障处理费
FAME全自动酶免分析仪原理和日常保养及常见故障处理费了解FAME全自动酶免分析仪的特性，分析器械使用的常见故障原因，在充分了解FAME全自动酶免分析仪的特性后，提出日常使用过程中保养、常见故障处理措施，进而有效延长FAME全自动酶免分析仪的使用期限。
标签：全自动酶免分析仪；原理；故障；维护FAME 全自动酶免分析系统在对大批量血液标本的全自动快速检测过程中拥有仪器的精密度高，效率高，标本处理量大，自动化程度高等优点[1]，现已被广泛应用于血站对大批量血液标本的全自动快速检测，应用FAME 全自动酶免分析仪后虽然很大程度上节约劳动力，提高工作效率，但由于分析仪模块零件复杂，因此在频繁使用的过程中极易出现各种故障，笔者根据工作经验对使用FAME 过程中的常见故障及处理方法进行了分析总结，现将报告总结如下。
1 FAME全自动酶免分析仪原理FAME全自动酶免分析仪是运用ELISA测定的基本原理，具有洗板、进板、孵育、试剂分配、读板等多种功能。
准确、快速、省时、灵敏和标准化等是FAME 全自动酶免分析仪最主要的优点。
2 FAME全自动酶免分析仪日常保养内容与方法2.1日维护按仪器提示冲洗管路是每次关机之前必须要做的一项工作，主要包括浸泡清洗探针、清洗槽中冲洗液体、清除堵塞及沾附物等步骤。
可用干净的毛巾擦拭残留有液体洗液桶通道。
清洁废液桶时可以首先加入消毒液浸泡，然后将消毒液倒空，最后用清水清洗、凉干。
对于装粘性及腐蚀性试剂（如终止液）的注射器，先用50℃的温水清洗，再用去离子水清洗1次/3 d[2-3]。
2.2周维护依次用浓度为1∶100 的CDS-C溶液、1∶1000的生理盐水溶液、蒸馏水冲洗洗液管路和洗板头，以溶解管壁上的残留物。
再将洗液桶单向阀的桶内部分用坩锅钳夹住，拧下单向阀的桶外螺帽。
用配好的消毒液浸泡桶内塑料软管、单向阀、洗液滤网，对内壁进行彻底性清洗。
2.3月维护用75%酒精清洁条码扫描枪、洗液通道的后部、孵育槽、传输架微板感应板、洗板头托盘等仪器表面。
使用全自动免疫组化机的体会
使用全自动免疫组化机的体会免疫组化在病理诊断中起着非常重要的作用。
免疫组化技术在肿瘤分类、诊断、预后判断方面广泛应用。
随着全自动免疫组化机广泛应用，作者把使用了一段时间全自动免疫组化仪后的体会与大家探讨。
本文通过对免疫组化技术的原理的探讨，分析了全自动免疫组化机在应用中注意事项及优点，从而探讨其应对措施。
标签：免疫组化技术；全自动免疫组化染色机免疫组织化学染色技术是病理技术中的一项重要染色方法，固免疫组织化学染色技术在目前病理诊断中起着非常重要的辅助作用，病理医师在很多情况下需要借助免疫组化来明确病变的性质、类型以及累及范围等。
免疫组化技术的应用，为相关肿瘤组织抗原的治疗以及预后供了重要的依据。
可是，在当前全自动免疫组化仪广泛应用的同时，也伴随着一些注意事项及优点。
下面从免疫组化染色原理来探讨以下几点注意事项及优点。
1 免疫组化染色技术的原理免疫组化染色技术是通过抗体结合特殊抗原用DAB显色及苏木素复染的染色技术。
这些抗体抗原的相互结合往往是以与这抗体相结合的酶元素来进行显示。
主要是因为没有着色物质的特性，抗原与抗体的结合使得一些有色物质在抗体-抗原相结合的位置进行沉淀。
酶沉淀的物质主要包括蛋白质、多肽、激素、病原体等，用光学显微镜才能看到。
目前使用甲醛固定促使了蛋白的交和凝固，使蛋白质的结构发生了变化，但对抗原决定镞的结构（苯环）不会产生影响。
在使用蛋白酶进行消化后，将抗原决定镞中的一些杂蛋白行清除，从而使其打开交联，在通过使用微波和高压锅等热抗原的修复工，使抗原决定镞发生最大程度的暴露。
从而提升免疫组化染色的敏感性[1]。
2 全自动免疫组化仪染色中注意以下几个问题2.1抗体的浓度，在滴加一抗时的量，一般在100ul（2～3滴）。
2.2组织的前期处理组织固定时间以4～6h为宜，最长不超过24h，过长过短都会对染色结果产生不良影响。
因组织固定时间过长会封闭或破坏组织的抗原活性，而固定时间过短则抗原弥散和组织结构不清晰。
全自动酶联免疫分析仪的工作原理及应用
全自动酶联免疫分析仪的工作原理及应用全自动酶联免疫分析（简称全自动酶免分析）系统的发展，可以回溯到20世纪90年代初期。
第一代全自动酶免分析系统基本技术特征是单/双针加样系统与酶标板处理系统一体化，多数孵育位置少于4块板。
由于加标本将占用较长时间（单针每板需15分钟，三块板通常需45分钟完成加标本工作），因此，第一代全自动酶免分析系统，被认为是“节约劳动力而不提高效率”。
第二代全自动酶免分析系统的基本技术特征为非多任务和单一轨道。
由于不能同时处理两种过程（如洗板的同时，不能加试剂等）。
因此，其工作任务表（或时间管理器）“堵车”现象仍无法避免，而造成处理过程不能严格执行和试验完成时间延长。
不含标本加样装置全自动酶免分析系统，通常也俗称“后处理系统”。
第三代全自动酶免分析系统的基本特征是采用多任务、多通道，完全实现平行过程处理。
典型产品为瑞士哈美顿公司的FAME全自动酶免分析系统。
FAME系统独特品质表现在，硬件上采用了综合模块化设计，广泛采用液体水平检测（LLD）技术、体积与重量传感、光学位置传感等实现了真正全过程控制（TPC），特别是专利的洗板液体传感，确保了最佳洗板效果。
在软件与功能上，目前仍是唯一的全自动GMP/ GLP规范符合系统，如全面的系统跟踪记录（Traceability）与系统追溯，标本/试剂加样校验（sample verification）及“自由任务管理器”实现随时增加检测板。
1997年费米获得美国FDA认证许可，用于血站筛查实验室，至今仍是唯一的特许全自动酶免分析系统。
由于酶免试验过程具有反应时间长而要求严格、步骤多而复杂。
因此，就一项具体的酶免试验而言，其试验过程与完成试验时间是不可改变和缩短的。
但对于多项目的批量处理（mass processing）时，总体的试验时间将大大缩短。
因此，酶免试验全过程自动化的意义，并非仅仅限于降低劳动强度、减少人为的误差。
根据一项多中心检测（multi-center clinical trail）的评价报告，全自动酶标分析系统可以普遍地、显著地提高酶免试验的特异性，并可提高某些检测试剂的灵敏度。
EVOlyzer SOP 操作规程
EVOlyzer SOP 操作规程Freedom EVOlyzer®全自动酶联免疫分析一体机前言：注意直到电源开关的状态灯灭才可以再次启动设备。
注意可能的设备故障以及机械臂和实验室器具的撞击。
◆在运行过程中，目前载界面为红色时，不要抽出载架；当空工作台上某一块加载界面为红色时，不要在它上面放置任何载架。
Next键。
在维护序列的环境下Next键的意义与其在其它运行控制对话框中的意义有所不同。
STOP停止键。
点击此键，并确认后将停止所有工作，并提示警告Main menu键。
点击此键，您将中止维护序列并回到主菜单。
Done键。
点击此键，意味着所需要的维护步骤已成功完成，您将进入下一阶段。
Skip键。
点击此键，您将跳过当前的维护阶段进入下一阶段。
而未完成的维护阶段之后的运行将出现警告标记。
Repeat键。
点击此键，您可以重复一个维护阶段里的某个程序，如灌注程序。
Print键。
点击此键，您可以打印出一份报告，如维护完成后的维护报告。
开始运行：选择开始运行确认使用的数据库和仪器维护状态后，仪器将加载选择的数据库。
按仪器提示确认仪器状态，正确调整机械臂位置。
随后仪器正式开始初始化运行完成初始化后，按提示或表格（EXCEL）按需要放置试剂，洗液，测试板条每完成一部分后按点击“下一步”继续所有组件装载完毕后将进行系统冲洗图：灌注液体系统对话框建议您现在检查管道系统是否有气泡。
如果管道系统里仍然有气泡，点击“重复”重复灌注过程。
现在，加热孵育舱已经加热到了工作温度。
预期的完成时间将在对话框中显示出来。
孵育舱的加热程序完成时，将提示您将标本装载到工作台上。
加载标本对话框注：可用于标本的部分用绿色的LED在加载界面的相应网格处标注出来。
当工作台操作程序所需的所有耗材都已装载完毕之后，请单击下一步进行下一个步骤。
标本将被扫描。
如果想停止运行准备工作，并回到主菜单，请按主菜单。
注：使用者须对工作台的正确布置负责，具体按照软件中所示，即，装有正确患者分配文件的特定架必须装载到工作台上。
TecanFreedomEvolyzer-2200全自动酶免疫分析仪应用评价
（ 收稿 日期 ： ２ ０ １ ３ ． ０ ５ ． １ ９ ）
Ｔ ｅ ｃ ａ ｎ Ｆ ｒ ｅ ｅ ｄ ｏ ｍ Ｅ ｖ ｏ ｌ ｙ ｚ ｅ ｒ 一 ２ ２ ０ ０ 全 自动 酶免疫分析仪应用评价
江 苏省 南 京鼓 楼 医 院集 团宿 迁 市人 民 医Ｆ ￣（ ２ ２ ３ ８ ０ ０ ） 朱 美 芹 王 莉 莉
同时进行 Ｔ Ｐ Ｐ Ａ确认和 Ｒ Ｐ Ｒ滴度试验 ， 然后结 合病史 、 症状、
胶颗粒代替 Ｔ Ｐ ＨＡ试验 的红细胞 为载体 ， 检测 血清中的梅毒
特异性抗体 ， 灵敏度好 ， 特异性好 ， 试剂稳定 ， 批间差小 ， 单人份 检测 ， 不需特殊设备 ， 是 目前公认 的梅毒血清确认试验 ， 检测 结果不随病情发展和治疗而变化 ， 不易出现假 阳性反应 ， 但是
Ｉ ４ ］ 庞妍 ， 张志勇 ， 赵燕 玲 ， 等． 三种 梅毒抗体 检测 方法 的比较．
天津医科大学学报 ， ２ ０ ０ ７ ，１ ３ （ ３ ） ：４ ４ ２ ．
【 ５ ］ 白雪梅 ， 闪全忠 ， 刘欧， 等． 不同方法检测抗梅 毒抗 体阳性标
本的分析． 临床检验杂志 ， ２ ０ ０ ７ ，２ ５ （ ２ ） ： ９ ６ ． ９ ８ ．
效判断。而且 Ｔ Ｐ Ｐ Ａ采用的是纯化 的致病性 梅毒 螺旋体菌体 抗原 ， 针对的是 Ｔ Ｐ １ ５ ～ Ｔ Ｐ ４ ５的抗体 ， 所 以当仅有 １ ’ Ｐ ｌ ７ ～ Ｔ Ｐ ４ ７
抗体时 ， Ｔ Ｐ Ｐ Ａ无法出现阳性 ， 有报道 Ｔ Ｐ ４ ７为梅毒早期诊 断
指标 ［ ５ １ ， Ｔ Ｐ １ ５是活 动期 梅毒标 志抗体闸 ，因此 这 ９份抗体 不 全 型梅 毒标本 可能 属 于早期 感染 或 隐性感 染 的患 者 说 明 Ｃ Ｌ Ｉ Ａ比Ｔ Ｐ Ｐ Ａ在早期或隐性 梅毒感染 中的检测更具优势 。
探讨FAME全自动酶免分析系统的应用
.冬季夜晚实验室温度通常低于 １４℃ ,那么
[
２]
早晨即使打开空调使实验 室 室 温 达 标,但 由 于 洗 液 温
度上升较慢 无 法 达 标 仍 然 会 影 响 工 作. 所 以 需 要 把
FAME 洗液桶及洗液放在水浴箱内预加热,当洗液温
度达到室温后再开 始 FAME 检 测,保 证 FAME 的 洗
保养程序,并按照程序不折 不 扣 地 对 仪 器 设 备 实 施 维
作态度,理解 仪 器 设 备 维 护 保 养 工 作 的 重 要 意 义,熟
护保养,只有这样才能保证 仪 器 设 备 正 常 运 行 和 高 质
练掌握仪器设备维护保 养 方 法 和 常 见 故 障 应 对 措 施.
臂和注射器抓手,以清 除 可 能 的 污 渍. 用 无 纺 布 涂 抹
样本性质而定,因为过高而 产 生 交 叉 污 染 同 样 会 影 响
少量润滑油于机械臂轨道.(
５)用 无 纺 布 擦 拭 条 码 扫
描头激光输出窗口,擦拭 清 理 传 输 架 及 洗 板 单 元 的 感
献血者献血时容易忽视无 油 饮 食,导 致 血 液 样 本 有 不
５)试 剂 加 到 微 孔 外,可 能 原
因是加样器定位不准,应 对 措 施 是 进 入 电 脑 维 修 菜 单
本站检验实验室近几年 FAME 全自动酶免分析系统
调整加样 器 位 置,直 到 加 样 器 对 准 酶 免 反 应 板 微 孔
出 现 的 各 种 故 障,有 针 对 性 地 采 取 了 对 应 的 维 护 程
堵塞情况等,问题解决之后 点 击 软 件“继 续”按 钮 后 仪
病等检查项 目;避 免 人 工 加 样 错 误,同 时 还 可 以 降 低
全自动酶免分析仪的应用体会及流程优化
第一次插入新批次时机 再次插入新批次时机 第三次插入新批次时机
表 2 插入新批次时机
前舱
后舱
有足够空板位 预计现有酶标板正在孵育时间大于新批
可不考虑
次标本加样时间
有足够空板位 预计现有酶标板正在孵育时间大于新批
有足够空板位
次标本加样时间
有足够空板位
有足够空板位
预计现有酶标板正在孵育时间大于新批 或预计前一批次试验结果完成时间在当前加样
[关键词] 全自动酶免分析仪； 酶免疫试验； 洗板机
全自动酶免分析仪具有操作智能化、 检测流程 标准化又能与 lis 对接实现全流程信息化等优点， 在 基层实验室应用越来越普及。 它不仅能减轻工作者 的劳动强度， 更主要的是能减少人为操作误差， 使 整个检验流程标准化和规范化， 提高检测结果的精 确性和可溯源性 ， [1-2] 因此受到检验工作者的青睐。 在使用过程中如果操作不当， 会给试验结果带来一 定的影响。 下面分享我们在使用过程中的一些体会 及合理的流程优化。
4 仪器维护
全自动酶免疫分析仪最重要的两个部件是洗板机 和酶标仪， 我们要按照标准操作程序对其进行维护 和保养。 仪器的外观与可见的零部件要每天检查与 清洁， 以便及时发现问题及时解决问题， 试仪器处于 良好的工作状态。
4.1 洗板机维护与清洁 洗板是整个试验步骤中非常重要的一个环节， 直 接关系到试验的成败。 如果洗板效果不好， 很容易出 现花板现象， 导致假阳性结果的出现， 即使使用再高 质量的试剂也不可能得到理想的试验结果。 日维护： 每次试验前和试验后用专用维护液维护洗板机,检查 洗板机每个注液针头注液高度是否一致， 检查吸液 后每孔的残留液是否过多， 发现问题及时处理； 周维 护： 用专用维护液浸泡洗板机针头； 月维护： 由仪器
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TECAN Freedom Evolyzer全自动酶免疫分析一体机的应用体会
Freedom EVOlyzer（全自动酶免工作站）是TECAN公司推出的新一代全自动酶免疫分析工作站。
它具备专业的酶免分析平台，可满足不同批处理量的试验要求，实现微孔板ELISA 试验的自动化，并且依靠其高品质的组件来确保酶免疫试验高效、快速、安全地完成。
1、功能呢特点Freedom EVOlyzer带有8根液体加样针和独立的全自动机械臂，提供12
个加热孵育器和32个微孔板存储位置，并通过新型Columbus Pro洗板机和Sunrise酶标仪来完成操作。
它提供可视化用户向导界面，其开放的平台使ELISA试验自动化，包括样本分配、预稀释、移液、孵育、洗涤、判读及试验结果的生成。
其优点是：操作性更强，更加智能、简便、快捷；缺点是：一旦出现致命错误，机器随即“死机”，所有程序即刻终止，不给用户干预的机会。
1.1操作简单从最初的样本识别，到传输试验结果，再到实验室信息的处理，一键式操作。
1.2软件易用仪器的Run Control 软件操作简单易用
1.3进样灵活仪器的连续进样模式可以根据实验室的样品量自动调整。
1.4更改轻松当实验标本被仪器扫描或工作表被载入后，在试验开始前仍然有机会通过点
击“处理架子并解决问题”来对实验项目进行最后的更改。
1.5提示智能仪器台面上的LED状态灯会通过持续或闪烁的红色和绿色指示灯来显示设备
的运转状态。
当操作系统需要人工干预时，仪器会以声光报警提示。
2、使用维护仪器管理是科室的一项重要任务，掌握Freedom EVOlyzer的主要保养方法，
定期做好管道的清洁、加样针的清洗、去蛋白处理等至关重要。
按照操作规程做好仪器的保养工作，可降低仪器故障的发生率和延长设备的使用寿命。
2．1即时维护即时维护是指仪器在运行过程中发生不可预知的状况时，须立即进行的维护。
出现以下几种情况需要即时维护：（1）若设备发生漏液，须立即关闭仪器，阻断泄露源；（2）若发生液体处理机械臂撞击，应检查加样针的准直性，确定固定式加样针排列准直且均能达到要求以及工作台上的物件位置正确无误；（3）若发生机械臂撞击，则应检查机械抓手两侧的正确定位，即其应与工作台表面保持水平，确定工作台上的物件为证正确无误。
如果撞击严重或在检查时发现异常则应联系工程师维修。
2.2日维护日维护分为仪器运行开始时，运行时以及运行结束时的维护工作，现分别介绍如下：（1）仪器运行开始时：检查液体系统是否发生泄漏，将微量注射器和活塞螺钉拧紧；检查加样针是否完好，并清洗其外壳锁紧螺帽座；灌注系统液容器，清空废液桶，灌注液体系统并进行紧密性检查看有无直接流出物和气泡，再用蒸馏水启动（液体流经管道）清洗Columbus Pro洗板机。
（2）仪器运行进行时：及时清空废液桶，检查系统液容器的注水高度并及时补充。
（3）仪器运行结束时：清空洗液桶并用水漂洗或收起，用蒸馏水启动（液体流经管道）清洗Columbus Pro洗板机。
（2）仪器运行进行时：及时清空废液桶，检查系统液容器的注水高度并及时补充。
（3）仪器运行结束时：清空洗液桶并用水漂洗或收起，用蒸馏水启动（液体流经管道）清洗Columbus Pro洗板机，灌注加样针的内外部，用水漂洗系统液容器并灌注，清洁载架、支架、机械手、洗针站、工作台面、前安全挡板以及低位一次性加样针卸载选件的摇杆，清空废液桶并用水漂洗，再次检查液体系统是否有漏液并处理。
另外，勿用次氯酸钠溶液来清洗加样针和洗板机，以防其与底物液产生非特异性反应而造成“花板”。
2.3周维护需在每周的最后一个工作日和很长时间闲置不用后进行。
包括清洁并灌注系统液容器，清空并清洁废液桶，清洁液体系统、前机械臂导轨、液体处理机械臂和机械手臂以及激光束射出窗口，用蒸馏水启动（分别灌注每一管道）清洁Columbus Pro洗板机。
2.4 半年维护为了保证设备的良好工作状态，半年维护由一位得到Tecan授权的现场服务工程师完成。
3 常见故障处理仪器的故障发生有不可预知性，为防止因发生故障导致工作停滞或发出错误报告，造成难以弥补的损失，这就需要专职人员对仪器进行全方位有效的管理。
以下仅对Freedom EVOlyzer日常使用中出现的一些常见故障原因分析及解决方法进行总结。
3.1条形码无法扫描原因分析：条形码不合规范，或位置摆放不当，或使用的类型与指定的不符或条形码本身缺损，或条形码重复使用，抑或激光束导致窗口不干净。
排除方法：清洁激光光束输出窗口，按照规定选择合适的条形码，沿边缘粘贴工整或是更换破损的条码。
3.2 载架无法检测原因分析：载架未放置或放置不到位，或放置位置错误，或载架的条码破损，或载架的传感器故障。
排除方法：按照要求将载架放置到位，检查其条形码的完好性，然后点击“处理架子并解决问题”来重新载入载架。
3.3 标本无法检测原因分析：试管长度不够，反馈给条码扫描器的信号不够或没有信号。