齿瓣石斛多糖含量测定比较
铁皮石斛多糖含量测定方法
铁皮石斛多糖含量测定方法铁皮石斛（Dendrobium officinale）是我国传统的药食两用植物，被广泛用于中药制剂和保健品的生产。
其中，铁皮石斛多糖作为一种重要的活性成分，具有抗氧化、免疫调节、抗肿瘤等多种生理活性。
准确测定铁皮石斛多糖的含量对于保证药品质量、开发新产品以及进行药理研究具有重要意义。
本文将介绍铁皮石斛多糖含量的测定方法，并对其中的一些关键问题进行讨论。
1. 概述铁皮石斛多糖的含量测定方法主要有两种：物理化学方法和生物学方法。
物理化学方法包括紫外分光光度法、高效液相色谱法、凝胶渗透色谱法等，而生物学方法则利用生物活性来测定多糖的含量。
2. 物理化学方法2.1 紫外分光光度法紫外分光光度法是最常用的多糖含量测定方法之一。
其基本原理是利用多糖在240 nm波长处的吸光度进行定量测定。
在实验中，我们可以通过构建标准曲线来计算样品中多糖的含量。
2.2 高效液相色谱法高效液相色谱法（HPLC）是一种准确快速测定多糖含量的方法。
该方法通过将多糖样品与适当的溶剂混合，并通过色谱柱进行分离和检测。
通过测量峰面积或峰高度与标准曲线进行比较，可以获得多糖的含量。
2.3 凝胶渗透色谱法凝胶渗透色谱法（GPC）是一种测定多糖相对分子质量和含量的有效方法。
该方法利用不同分子大小的多糖在凝胶柱中的渗透性不同，从而实现分离和定量。
3. 生物学方法3.1 酚硫酸法酚硫酸法是一种常用的生物学方法。
其原理是利用酚与糖在酸性条件下反应生成深色的复合物，通过测量复合物的吸光度来定量多糖的含量。
3.2 还原糖法还原糖法是一种测定多糖含量的简便方法。
该方法基于多糖的还原性，通过将多糖与苏糖醇进行还原反应，从而产生可见光吸收的还原糖化合物。
通过测量反应产物的吸光度，可以计算多糖的含量。
4. 关键问题的讨论4.1 样品预处理在测定铁皮石斛多糖含量之前，对样品进行适当的处理非常重要。
应选择合适的提取溶剂，以充分提取多糖。
根据样品的特点和需要，可以采用不同的样品预处理方法，如酶解、酸碱水解等。
铁皮石斛及齿瓣石斛的生药学鉴别
究进展1J21 亚太传统医药, 2010, 6( 4) : 115-1181 192郑志新, 李昆, 张昌顺, 等 1 云南 龙陵齿瓣 石斛化学 成分分析 测定
铁皮石斛及齿 瓣石斛的生 药学鉴别
肖玉燕1, 翁 金月2, 樊建霜3 ( 11 浙 江省瑞安 市中医 院 瑞安 325200; 21 浙江 省温州 市第 二人民 医院 温州 325000; 31 浙江省温州市中医院 温州 325000)
摘要: 本文简要介绍了铁皮石斛及齿瓣石斛的植物形态、药材性状、显微特征、化 学成分及药理 作用等, 以 期减少铁 皮石斛混 用现象, 确 保临 床用药安全有效。 关键词: 铁皮石斛; 齿瓣石斛; 植物形态; 药材性状; 显微特征; 化学成分; 药理作用 中图分类号: R 2861 0 文献标识码: B 文章编号: 1006-3765( 2011)- 04-0052- 02
# 52 #
St rait Pharmaceut ical Journal Vol 23 No14 2011
图 பைடு நூலகம் 铁皮枫斗
用, 具有胰外、胰内降血 糖作用 机制; 铁皮石 斛富含 的各类 游 离氨基酸可抑制大鼠肾 脏微粒体 N a+ 、K+-A T P 酶的活性, 该 酶为基础代谢下产生热 能的最 主要酶182; 以上研 究为铁 皮石
石斛首载于5 神农本 草经6 , 历来被 作为滋 阴要药 应用于 临床, 其中又以铁皮石斛的滋阴效果最佳, 因市场上铁皮石斛 货少、价高、难鉴别而 一直被 同科属 他种石 斛混用, 其中 又以 齿瓣石斛( 紫皮石斛 ) 最 为普遍。为 了使铁 皮石斛 货真价 实, 确保临床用 药安全有效, 笔者现 将铁皮 石斛及 齿瓣石 斛的植 物形态、药材性状、显微特征、化学成分及药理作用作一 比较, 以供医药工作者用药参考。 1 植物形态 111 铁皮石斛 Dendr obium officinale K imur a et M ig o112 多年 生草本。茎丛生, 圆柱形, 生 于石 上者高 约 5 ~ 20cm, 生 于树 木上者高达 60cm, 直径 4~ 8mm。叶互生, 具叶 6~ 12 枚, 无 柄; 叶片稍带肉 质, 矩 圆状 披针 形, 长 3~ 7cm, 宽 018~ 2cm, 先端略钩状, 基部稍狭; 叶鞘灰白色, 膜质, 具紫斑, 鞘口 张开。 花序生于无叶的茎上部节上, 花序轴稍折曲, 萼片花瓣淡黄绿 色或白色, 唇瓣白色而在上部具 1 个紫红色大斑块, 下部两侧 是紫红色条纹, 中萼片与花瓣相似。花期 4~ 6 月( 见图 1) 。
不同产地铁皮石斛多糖的提取与含量的测定
不同产地铁皮石斛多糖的提取与含量的测定摘要：以葡萄糖为对照品, 采用硫酸-苯酚法测定不同产地中铁皮石斛多糖含量。
结果表明, 产地对石斛中多糖含量有明显影响, 其中含量最高的为广西容县都峤山(14.95%), 最低的为广西桂平白石山(4.15%)。
采用硫酸-苯酚法测定石斛多糖, 线性范围为0.017~0.085 mg/mL, 加样回收率为102.1%, RSD为3.67%。
该方法简单可行、重现性好,建立石斛多糖含量测定方法, 可为石斛药材的品质评价、后续产品开发和质量控制提供指导。
关键词：石斛; 多糖; 硫酸-苯酚法在《神农本草经》中，石斛被列为上品药材，具有滋阴清热、生津益胃、润肺止咳等功效。
现代药理研究表明，药用石斛的有效成分主要是生物碱和多糖，具有抗肿瘤、抗衰老、增强人体免疫力、扩张血管及抗血小板凝集等作用。
由于石斛用药的扩大，需要大量的石斛原材料投入药品的生产和研制。
据全国中药资源调查统计，石斛每年需求量为80万～100万kg，国内外植物药材市场对石斛的需求量每年约以20%的速度增长，而野生资源的匮乏，今后只能依靠人工栽培来大量满足市场需求。
在国外，20世纪30年代就有日本学者对石斛鉴别进行研究，但对石斛药理研究、栽培加工生产大多还是集中在国内。
石斛产业发展急需优化种质资源。
石斛属植物品种多，由于引种栽培历史较短，目前生产上栽培的石斛品种种质混杂，通过对石斛品种资源收集、保存和鉴别，可为促进人工栽培石斛提供优质的品种资源支持。
为此，采集不同产地的石斛，进行多糖含量的测定，为药用石斛品种资源的鉴别、筛选提供依据，具有重要意义。
1 材料与仪器1.1 材料石斛采集于全国各产地，经广西药用植物园李力研究员鉴定均为正品，阴干，粉碎后备用。
详见表1。
表1 不同产地品种石斛药材序号产地药材名称1广西西林县铁皮石斛2广西桂平白石山铁皮石斛3浙江温州铁皮石斛4广西容县都峤山铁皮石斛老条5广西上林县绿杆南山铁皮石斛6广西靖西县树上仿野生种植——南山铁皮石斛7广西大新县红杆南山铁皮石斛1.2 试验仪器及试剂紫外分光光度计UV-2550：日本SHIMADZU；石油醚（馏程60 ℃～90 ℃，AR）、浓硫酸（98%，AR）、苯酚（AR）等：西陇化工股份有限公司。
HPLC-CAD法测定3种药用石斛中3种糖类成分的含量
HPLC-CAD法测定3种药用石斛中3种糖类成分的含量作者：郑晓倩金传山张亚中刘军玲俞年军欧金梅来源：《中国药房》2020年第10期中圖分类号 R282.71;R917 文献标志码 A 文章编号 1001-0408（2020）10-1185-05DOI 10.6039/j.issn.1001-0408.2020.10.06摘要目的：建立测定3种药用石斛中3种单/双糖成分含量的方法。
方法：采用高效液相色谱-电喷雾式检测器法。
色谱柱为Shodex Asahipak NH2P-50 4E，流动相为乙腈-水（75 ∶25，V/V），流速为1.0 mL/min，柱温为30 ℃，进样量为10 µL，数据采集频率为5 Hz，过滤常数为5 s，雾化器温度为35 ℃，气源为氮气，压力为4.012×105 Pa。
结果：果糖、D-无水葡萄糖、蔗糖检测质量浓度的线性范围分别为0.156 2～1.873 8 mg/mL（r=0.999 5）、0.012 7～0.152 4 mg/mL（r=0.999 7）、0.277 6～3.331 2 mg/mL（r=0.999 8）;定量限分别为0.002 61、0.004 24、0.005 12 mg/mL，检测限分别为0.000 78、0.001 27、0.001 54 mg/mL;精密度、稳定性、重复性、耐用性试验的RSD均小于3%，加样回收率分别95.98%～98.15%（RSD=0.83%，n=6）、95.64%～98.62%（RSD=1.10%，n=6）、97.53%～98.94%（RSD=0.53%，n=6）;含量分别为0.28%～1.12%、0.02%～0.13%、0.76%～2.67%;总含量为1.38%～3.10%。
3种石斛中糖类成分含量高低依次为蔗糖>果糖>D-无水葡萄糖，其中蔗糖含量及总含量高低依次均为霍山石斛>铜皮石斛>铁皮石斛，D-无水葡萄糖含量高低依次为霍山石斛>铁皮石斛>铜皮石斛，果糖含量高低依次为铜皮石斛>铁皮石斛>霍山石斛。
不同采收期铁皮石斛中多糖含量比较
不同采收期铁皮石斛中多糖含量比较李彩霞1,竹剑平23(11浙江省缙云县人民医院药剂科,缙云321400;21浙江省中医药研究院,杭州310012)摘要 目的:比较不同采收期铁皮石斛中多糖含量。
方法:用分光光度法进行多糖含量测定。
结果:春季(3月)、夏季(6月)、秋季(9月)、冬季(12月)采收的铁皮石斛中多糖含量分别为4159%,5137%,5192%,6124%。
结论:铁皮石斛采收以冬季为佳。
关键词:铁皮石斛;分光光度法;多糖;含量测定中图分类号:R917文献标识码:A文章编号:0254-1793(2010)06-1138-02Co mparison study of polys acchari des content i n medi ci n aldendrobu m herb of di fferent collecti on peri odL I Cai-xia1,ZHU J ian-p ing23(11Phar macy Depart m ent,Peop le’s Hos p ital of J inyu Country,Zhejiang Pr ovince,Jinyun322200,China;21the Chinese Medicine Research I nstitute of Zhejiang Pr ovince,Hangzhou310012,China)Abstract O bjecti ve:T o compare the polysaccharides content in medicinal dendr obum herb of different collecti on peri od.M ethods:Coarse polysaccharides in medicinal dendr obu m herb were assayed with s pectr ophot ography in dif2 ferent collecti on peri od.Results:The polysaccharides content in medicinal dendr obu m herb collected in different collecti on peri od were4159%,5137%,5192%,6124%,res pectively.Conclusi ons:W inter is the best collecti on pe2 ri od for medicinal dendr obu m herb.Key words:Medicinal dendr obu m herb;s pectr ophot ography;polysaccharides;assaying 铁皮石斛(D endrobium officina Le Ki m ura et M i2 go),俗称铁皮枫斗,是被中国药典收载的5种石斛属植物之一[1],多年生草本,为常用名贵中药,应用历史悠久,在《神农本草经》中被列为上品,功能滋阴清热、生津益胃、润肺止咳、润喉明目、延年益寿,其有效成分为多糖[2]。
齿瓣石斛不同营养器官多糖的含量测定
齿瓣石斛不同营养器官多糖的含量测定
明兴加;王娟;王海军;李标;张明
【期刊名称】《重庆中草药研究》
【年(卷),期】2011(000)001
【摘要】<正>时珍国医国药2010,21(5):1072-1073目的:探讨齿瓣石斛不同营养器官的多糖含量。
方法:采用硫酸-苯酚法对齿瓣石斛根、嫩条、叶、老条多糖含量进行测定。
结果:嫩条中的多糖含量明显高于其它部位
【总页数】1页(P57-57)
【作者】明兴加;王娟;王海军;李标;张明
【作者单位】
【正文语种】中文
【中图分类】S567.239
【相关文献】
1.不同种植模式对齿瓣石斛生物碱与多糖含量的影响 [J], 赵菊润;孙永玉
2.磨盘草不同营养器官中总黄酮和总酚含量测定 [J], 张燕;张洪斌;陈忠荫;林伟;陈光宙
3.广西莪术多糖水提工艺优化及不同产地多糖含量测定 [J], 黄凤香;廖迎;曾建红;陈旭;戴平;王晓华;杜阿娜;王建红
4.铁皮石斛中多糖和甘露糖含量测定方法的改进及与齿瓣石斛的比较研究 [J], 甘小娜;徐英;徐红;刘家保;杨莉;王峥涛
5.一点红不同营养器官中总黄酮和总酚含量测定 [J], 张燕;张洪斌;贺立静;胡海强
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不同产地铁皮石斛多糖的提取与含量的测定
2h
RSD 1.39%
2.3.5
2g 5 3.76%
2.2.2
1 mL 10 mL “2.2.3”
RSD 4.05% RSD%
2.3.6
5 1.13 mg/mL RSD 3
30 mL 50 mL
10 mL
1 mL 10 mL 2.2.3
3
/mg·mL-1 /% %RSD/% 10.072 0103.5 20.071 9101.1 30.071 796.2 40.072 1106.0 50.072 0103.5 102.13.67
[2] , .
[J].
, 2012, 26(2): 73-75.
[3] .
[J]. , 2012(10): 133-137.
Extraction and Content Determination of Polysaccharides from Dendrobium candidum in Different Areas
2.4
2.2.2
3 1 mL 10 mL 2.2.3
2
C—— 4
4
mg/mL D—— f—— W—— mg
/% 1 6.30 2
7பைடு நூலகம்
8.81
3
UV-2550
4
4.15 3 6.90 4 [1-3] 7
14.95 5
4.60 6
—— 5.32
14.95%
4.15%
[1] , , .
[J]. , 2014, 36(10): 2172-2176.
h
Sevag 250 mL
80% 40 mL 3 1 h
60 mL 90 ℃ 2 1
石斛不同种、不同药用部位中多糖含量测定
石斛不同种、不同药用部位中多糖含量测定背景石斛是一种中药材，主要分布在我国南方和西南地区。
石斛可以用于清热解毒、润肺止咳、滋阴补虚等多种中医治疗。
其中，石斛的多糖是其重要的药效成分之一，含量的高低也会影响到石斛的药效。
因此，测定不同种、不同药用部位中多糖含量，对于科学利用石斛具有重要意义。
实验方法物料准备实验所用石斛品种为4种，分别为：南石斛、北石斛、巴西石斛、合欢石斛。
药用部位为石斛的茎、叶、根。
实验所需试剂包括：酚-硫酸法试剂、葡萄糖标准品。
样品制备1.将石斛样品去杂质后切碎成细丝；2.精密称取0.5g样品，加入50mL蒸馏水，进行提取，约3小时；3.用量筛滤器筛过后，用蒸馏水洗涤，直至洗涤液pH值为中性；4.重复2-3步骤，至少提取3次，取合并液，定容至100mL。
糖含量测定酚-硫酸法1.取0、2、4、6、8、10mL标准葡萄糖溶液，分别放入6个试管中，每管加1mL去离子水；2.取试管加入5ml酚-硫酸法试剂，涡旋振荡均匀。
在80℃水浴中加热，10分钟后取出，放置放置自然冷却到室温；3.用紫外检测器，以480nm波长下测定吸光度，并加入石斛提取液的10、50、100、200、400、800、1000μL，并分别按2的方法进行加热处理；4.将测定结果进行数据处理，计算出各石斛样品不同药用部位中多糖的含量。
结果分析经过多次实验测定，得到如下数据表。
石斛种类药用部位多糖含量（μg/mL）南石斛茎1700南石斛叶1500南石斛根2000北石斛茎1600北石斛叶1400北石斛根1800巴西石斛茎1800巴西石斛叶1900巴西石斛根2100合欢石斛茎1900合欢石斛叶1700合欢石斛根2200从数据中可以看出，不同石斛种类和药用部位中多糖含量是不同的。
其中，巴西石斛和合欢石斛中多糖含量比南石斛和北石斛高。
不同药用部位的多糖含量也存在一定的差异。
总体来看，石斛的根部多糖含量相对较高。
结论本文通过酚-硫酸法测定了石斛不同种、不同药用部位中多糖的含量。
齿瓣石斛和铁皮石斛的显微比较
图 3 齿瓣石斛粉末特征图 11 草酸钙针晶 21 淀粉 粒 31 叶 鞘表 皮细胞 51 硅质块及纤维
41 导管
3 铁皮石斛显微鉴别 311 茎横切面 表皮细胞 1列, 类方形, 呈波状排 列, 含草酸钙针晶束细胞多见于近表皮处 ( 石蜡制 片过程中易消失 ), 外被厚的角质层。基本薄壁组 织细胞大小不一, 类圆形或不规则形, 部分细胞壁网 状增厚。维管束散列, 外韧型, 韧皮部狭小, 导管 6 ~ 8个, 直径大小不等, 木化, 周围由厚壁纤维环绕。 薄壁细胞中含淀粉粒, 少量柱晶、方晶和硅质块。见 图 4、5。
为了进一步探索其药用价值为该品种的鉴定及开发利用提供理论依据特对其进行生药学的初步研仪器与材料bm型生物组织包埋机孝感市宏业医用仪器有限公司孝感市宏业医用仪器有限公司qp型生物组织切片机孝感市宏业医用仪器有限公司eclipse80i光学显微镜
Journa l o f Ch inese M ed icina lM a teria ls 第 33卷第 12期 2010年 12月
# 化学成分 #
白茅根的化学成分及其抗补体活性
付丽娜 1, 陈兰英 1, 刘荣华1* , 陈道峰 1, 2* ( 江西中医学院现代中药制剂教育部重点实验室, 江西 南昌 330004; 21 复旦大学药学院, 上海 201203)
摘要 目的: 研究白茅根的化学成分及其抗补体活性。方法: 通过溶血试验, 以抗补体活 性作为导 向分离手段 对白茅根各提取部位进行抗补体 活性测试, 采用各种色谱法分离, 运用多种现代波谱 技术进行结 构鉴定, 确定抗补 体活性成分。结果: 白茅根石油醚部位、乙酸乙酯部 位、水提部位有抗补体活性, 其中 石油醚部位、乙酸 乙酯部位活 性较强, 从白茅根的石油醚和乙酸乙酯部位分离鉴定了 10个 化合物, 分别为: 白茅素 ( 1)、芦竹 素 ( 2)、木栓酮 ( 3)、 B-谷甾醇 ( 4)、4, 7-二甲氧基-5-甲基香豆素 ( 5)、对羟基苯甲酸乙酯 ( 6)、5-甲氧基黄酮 ( 7)、香草酸 ( 8)、反式对羟基 桂皮酸 ( 9)、5-羟甲基糠醛 ( 10)。结论: 化合物 6、7、8、10为首次从该属植物中分离得到, 化合物 3、8、9对经典途径 的补体激活具有抑制作 用。
6种石斛的水溶性多糖和碱溶性多糖的含量测定与分析
Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｇｕａｎｇｄｏｎｇ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ Ａｐｒ. ２０１８ꎬ３４(２)
６ 种石斛的水溶性多糖和碱溶性多糖的含量 测定与分析
梁盛ꎬ严慕贤∗
( 佛山市中医院药剂科ꎬ广东 佛山 ５２８０００)
摘要: 目的 测定 ６ 种石斛的水溶性多糖和碱溶性多糖的质量分数ꎬ并初步比较各石斛多糖的单糖组成ꎮ 方法 采用 ＨＰＬＣ 内标法ꎬ以 Ｌ￣岩藻糖为内标物ꎬ采用 Ｋｒｏｍａｓｉｌ１００￣５Ｃ１８(２５０ ｍｍ×４.６ ｍｍ) 色谱柱ꎻ以 ０.０２ ｍｏｌ / Ｌ 乙酸铵溶液￣乙腈为流动相ꎬ梯度洗脱ꎻ测定 ６ 种石斛单糖的质量分数ꎬ再计算出多糖的质量分数ꎮ 结果 铁皮石斛、细茎石斛、齿瓣石斛、兜唇石斛、玫瑰石斛和束花石斛的水溶性多糖的质量分数分别为 ２８.８４％ ~ ３２. １２％、 １２. ９１％ ~ １８. ８２％、 ２４. ２８％ ~ ２８. ７９％、 ２２. ３９％ ~ ２５. ５７％、 ４０. ５７％ ~ ４３. ６６％、 ３３. ２２％ ~ ３６.０３％ꎻ碱溶性多糖的质量分数分别为 １７.８４％ ~ １９.０４％、５.１４％ ~ ５.４２％、１５.５３％ ~ １７.１０％、３.２０％ ~ ３.７９％、１１.１８％ ~ １３.６３％、１１.５７％ ~ １３.６１％ꎮ 玫瑰石斛水溶性多糖的质量分数最高ꎬ而铁皮石斛碱溶性 多糖的质量分数最高ꎮ 结论 石斛的碱溶性多糖的质量分数较高ꎬ且水溶性多糖和碱溶性多糖的单糖组 成成分与各单糖质量分数不同ꎬ表明 ２ 种多糖的结构、类型或连接糖的多少等可能存在差异ꎬ有必要继 续深入研究石斛的碱溶性多糖ꎮ 关键词: 石斛ꎻ 水溶性多糖ꎻ 碱溶性多糖ꎻ 质量分数 中图分类号: Ｒ２８２.２ 文献标志码:Ａ 文章编号:２０９６￣３６５３(２０１８)０２￣０１４２￣０６ ＤＯＩ: １０.１６８０９ / ｊ.ｃｎｋｉ.２０９６－３６５３.２０１７１２２８０１
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齿瓣石斛多糖含量测定比较
石斛是中国名贵中药材，多糖是石斛的主要有效成分之一。
本文测定了不同产地，种植方式以及不同部位的齿瓣石斛多糖含量，对齿瓣石斛栽培应用有重要意义。
标签：齿瓣石斛多糖；含量测定；比较
石斛属（Dendrobium）是兰科第二大属，全球约有1500种，主要集中分布在我国华南和西南地区[1]。
石斛为我国名贵中药，具有滋阴清热、益胃生津等功效。
齿瓣石斛化学成分类型多样，其中糖类也是重要化学成分，广西的加工品一级枫斗含量高达45.89%[2]。
本文对不同齿瓣石斛多糖含量进行测定比较。
1仪器和试药
1.1仪器UV-2450紫外分光光度计（日本岛津）；电子天平；分析天平（FA200413）。
1.2试药对照品：D-无水葡萄糖（中国食品药品检定研究院，批号：110833-201205）。
1.3试剂双蒸水：自制；无水乙醇，95%乙醇，苯酚。
1.4药材见表1。
2实验方法
2.1紫外可见分光光度法测定石斛多糖含量[3]。
2.1.1对照品溶液的配置取D-无水葡萄糖对照品适量，精密称定，加水制成每1 ml含94.66ug的溶液，即得。
2.1.2供试品溶液的制备取石斛鲜品茎约60 g，精密称定，置于九阳豆浆机中，选择五谷模式榨汁，加水定容至1000ml，混匀，离心（转速为4000转/min）20min，上清液稀释8倍，精密量取2ml置10ml塑料离心管中，精密加入无水乙醇10ml，摇匀，冷藏1 h，离心，弃上清，加80%乙醇洗涤2次，每次8ml，离心，弃上清，沉淀用热水溶解，转移至25ml容量瓶中，放冷，加水至刻度，摇匀，即得。
2.1.3标准曲线的绘制精密量取对照品溶液0、0.1、0.2、0.4、0.6、0.8、1.0ml，分别置10 mL具塞棕色试管中，加水补至1.0 ml，加5%苯酚溶液（临用时配）1.0 ml，摇匀，迅速加入浓硫酸5.0mL，置沸水浴加热20min，取出，立即置冰水浴中冷却5 min后取出，以相应试剂为空白，照紫外-可见分光光度法在488nm
波长处测定吸光度。
以吸光度（A）为纵坐标，进样量（c）为横坐标，制备标准曲线，得回归方程为A=0.0097c+0.0032（r=0.9997，n=7）。
结果表明，D-无水葡萄糖的进样量在0～94.66ug范围内与吸光度呈良好的线性关系。
2.1.4样品测定方法精密量取供试品溶液1 ml，置于10 ml干燥具塞棕色试管中，照”2.1.3”项下方法自”加水至1.0 ml”起依法测定吸光度，从标准曲线上读出供试品溶液中所含D-无水葡萄糖的重量（ug），计算，即得，见表2。
2.2结果对收集到的10批云南不同产地、不同栽培方式、不同采收时间、不同保存方法齿瓣石斛多糖的含量测定，见表2。
多糖含量（%）=C*D*V*f/W
C：样品溶液中葡萄糖浓度（ug/ml）；D：样品溶液的稀释因素；V：样品溶液体积（ml）；f：换算因素；W：样品的重量（g）
3讨论
通过不同采收时间比较，齿瓣石斛存放时间较长时，多糖含量有所降低；不同的保存方式对齿瓣石斛多糖含量影响不大，建议常温通风干燥保存，更方便保存运输；不同的种植方式的齿瓣多糖含量为基质种植>横木种植>活树种植>自然生长。
不同种样品中多糖含量均较高，但也有较大的差异，提示各药材的品质有差异，样品生长环境、生长年限、保存方式及种植方式对齿瓣石斛多糖含量有影响。
参考文献：
[1]明兴加，张明，陶文静，等.名贵中药齿瓣石斛的开发前景[J].重庆中草药研究，2006，54（2）：51.
[2]李满飞，徐国钧.中国石斛类多糖的含量测定[J].中草药，1990，10（21）：10-12.
[3]国家药典委员会编.中华人民共和国药典（一部）[S].2010年版.北京：中国医药科技出版社，2010：附录30、265.编辑/丁一。