间接红细胞凝集试验诊断血吸虫病
血吸虫病
血吸虫病[填空题]1血吸虫病概述参考答案：一、概述血吸虫病曾是一种严重危害我国人民身体健康的寄生虫病，是由血吸虫寄生于人体内所引起的一种人畜共患的自然疫源性疾病。
寄生于人体的血吸虫主要有6种，即日本血吸虫、埃及血吸虫、曼氏血吸虫、间插血吸虫、湄公血吸虫和马来血吸虫。
我国流行的是日本血吸虫病，是由日本血吸虫寄生于人体和哺乳动物体内所引起的疾病。
二、流行病学（一）地方性血吸虫病的流行有着严格的地方性，没有钉螺，就没有血吸虫病流行，两者分布基本一致。
根据地理环境、钉螺分布特点和血吸虫病流行特征，我国血吸虫病流行区大致可分成湖沼、水网和山丘3种类型。
（二）季节性血吸虫病的高发季节受两方面因素的影响。
一是水位上涨，感染性钉螺浸没于水中而大量逸出尾蚴，尤以首次涨水逸蚴量为甚；二是由于生产生活的需要，人员大批下水，发生血吸虫感染。
各种流行区的高发季节稍有不同。
水网地区以夏季5～8月高发，湖沼地区为5～9月，而山区多在6～9月。
（三）易感人群不同种族和性别的人对日本血吸虫均易感，人群感染率和感染度的差别取决于感染性钉螺的密度以及人群暴露于疫水的强度。
从事农业和渔业生产的农民、渔民、船民常是血吸虫病的高危易感人群。
另外，儿童往往喜欢游泳、嬉水，亦为高发人群。
非流行区的人群进入血吸虫病重流行区活动，较本地居民的急性感染发病率为高。
（四）易感环境感染性钉螺密度较高的有螺环境及其尾蚴波及的水域，是血吸虫的易感环境。
水网地区的易感环境常在村庄附近，群众生产、生活常到的地点或渔船民集散地附近，或灌溉沟渠内。
湖沼地区多为地势低洼、地形复杂、积水不易排出的地点。
山丘地区常在居民区附近的沟渠、小溪、池塘、稻田及家畜放牧的地方。
（五）感染方式血吸虫病的感染方式及途径取决于生产生活方式的不同。
在易感环境从事田间插秧、割运湖草、抢收作物、捕鱼捉虾、采摘粽叶等生产活动均可引起感染；从事淘米、洗菜、洗衣、游泳、嬉水等生活活动同样可导致血吸虫感染。
血吸虫病如何诊断、鉴别诊断
血吸虫病如何诊断、鉴别诊断血吸虫病如何诊断、鉴别诊断：诊断：诊断血吸虫病的诊断包括病原诊断和免疫诊断两大部分。
病人的确诊需要从粪便中检获虫卵或孵化毛蚴。
1.病原学诊断：从粪便内检查血吸虫虫卵和毛蚴以及直肠黏膜活体组织检查虫卵称病原学检查, 是确诊血吸虫病的依据。
常用的病原学检查方法有改良加藤法、尼龙袋集卵孵化法、塑料杯顶管孵化法等。
2.免疫学诊断：免疫学诊断包括检测患者血清中循环抗体、循环抗原和循环免疫复合物。
常采用的诊断方法有间接红细胞凝集试验（IHA）、酶联免疫吸附试验（ELISA）、胶体染料试纸条法（DDIA）、斑点金免疫渗滤试验（DIGFA）。
鉴别诊断：1.急性血吸虫病：须与败血症、疟疾、伤寒与副伤寒, 急性粟粒性肺结核, 病毒感染, 其他肠道疾病鉴别。
主要根据籍贯、职业、流行季节, 疫水接触史、高热、肝脏肿大伴压痛、嗜酸性粒细胞增多, 大便孵化阳性为鉴别要点。
2.慢性血吸虫病：须与慢性菌痢、阿米巴痢疾、溃疡性结肠炎、肠结核、直肠癌等病鉴别。
粪便孵化血吸虫毛蚴阳性可确诊。
嗜酸性粒细胞增生有助于本病之诊断。
肠镜检查及组织检查可有助于确诊。
粪便常规检查、培养、X线钡剂灌肠, 诊断性治疗有助于诊断与鉴别诊断。
3.晚期血吸虫病：须与门脉性肝硬变及其他原因所致的肝硬变鉴别。
血吸虫病肝硬变的门脉高压所引起的肝脾肿大、腹水、腹壁静脉怒张改变较为突出, 肝细胞功能改变较轻, 肝表面高低不平。
门静脉性肝硬变表现为乏力, 厌食、黄疸、血管痣、肝肿大显著甚至缩小, 不易摸到表面结节, 且有活动性肝功改变, 如转氨酶增高等。
4.异位血吸虫病：肺血吸虫病须与支气管炎、粟粒性肺结核, 肺吸虫病鉴别。
急性脑血吸虫病应与流行性乙型脑炎鉴别。
慢性脑血吸虫病应与脑瘤及癫痫鉴别。
尾蚴性皮炎需与稻田皮炎鉴别。
稻田皮炎由寄生于牛、羊、鸭等动物的门静脉中的动物血吸虫尾蚴侵袭皮肤引起, 多见于我国东南、东北、西南各省市。
宿主排卵入水、孵出毛蚴、入锥实螺, 后尾蚴逸出螺体。
间接红细胞凝集试验诊断血吸虫病
（三）红细胞鞣化
取1/10000鞣酸溶液与等量2.5%红细胞悬液 混匀，置于37℃ 中15min，并不断摇动。洗 涤，去除多余的鞣酸。
鞣化红细胞的优点 鞣化后红细胞易吸附蛋白抗原。
（四）红细胞致敏
取虫卵抗原原液1:100稀释，与2.5%的鞣化红 细胞等量混合，置于37℃水浴中30min，并不断摇 动，然后离心，洗涤，去除多余抗原。
用含有5%蔗糖及1%正常兔血清（56℃灭活） 的pH7.2PBS保护液，配成10%浓度的
（五）致敏红细胞的冰冻干燥
将上述致敏红细胞悬液摇匀，分装于2ml安瓿 内。每支0.4ml，立即放入-40℃冰箱冰冻，待全部 分装完毕后，移入冰冻干燥机内，冰冻干燥约24h， 干燥后封口，保存于4℃中备用。
（二）红细胞醛化
取人“O”型血红细胞3份（不同个体） 混合 ，用生理盐水洗涤 。置冰浴内，将戊 二醛溶液慢慢滴入红细胞悬液中，边加边 摇，醛化1h。用1/10000的柳硫汞蒸馏水配 成10%的红细胞悬液，置于4℃备用。
醛化红细胞优点 克服了个体差异，保证实验重复性 延长红细胞的保存时间，在4℃可保存1年 避免操作过程中因振荡、低渗、冻融使红细
（四）在第2、第3孔中各加致敏红细胞悬液 25μl，将反应板放在振荡器上振荡1min，室 温下静置45min，观察反应结果。
四、反应标准
（一）阴性反应：红细胞全部下沉在 凹底部，形成紧密的圆点，周围整齐 清晰。 （二）阳性反应：待检者血清以1:10 稀释度出现凝集反应为阳性起点
（三）反应强度 “-”：红细胞全部下沉在凹底部，形成紧密 的 圆点，周围整齐清晰 “+”：多数红细胞下沉在凹底部形成圆点， 周围可见少量凝集红细胞 “++”：凹底部可见明显的红点，凝集红细 胞在底部形成小薄层
血吸虫病判断题 (学生用)
血吸虫病判断题1.吡喹酮是当前治疗血吸虫病的首选药，对移行期童虫有明显的杀虫效果。
（×）2.急性血吸虫的现场处置中不需要对病人、病畜的粪便进行灭卵处理。
（×）3.日本血吸虫是一种人畜共患的疾病，除人外，尚有40余种哺乳动物可感染血吸虫。
（√）4.日本血吸虫尾蚴多分布在水体表面。
（√）5.有疫水接触史，出现发热、肝脏肿大及周围血液嗜酸性粒细胞增多为主要特征的病人即可定义为急性血吸虫病病例。
（√）6.为了加快加藤片透明速度，在冬季温度较低时，可将加藤片放置于阳光下照射以提高温度。
（×）7.粪便管理的目的是通过无害化处理人畜粪便，杀灭血吸虫虫卵，控制血吸虫病传播。
（√）8.灭螺前活螺平均密度和灭螺后平均密度指标可用来考核灭螺效果。
（√）9.间接红细胞凝集试验（IH√）中使用过的微量板可以浸泡于酸性溶液中，然后用毛刷洗涤，晾干后继续使用。
（×）10.血吸虫病四类流行村要求每3年对有钉螺分布的村民组和有疫水接触史的常住居民（6-65岁）用血清学方法查病1次，受检率达90%以上。
血清学阳性者给予一次化疗。
（√）11.防止钉螺扩散不是目前血吸虫病防治中的重点和难点。
（×）12.人接触疫水的次数越多，接触时间越长，暴露的面积越大，则感染血吸虫的机会越多，感染的程度越重。
（√）13.血吸虫病和钉螺的地理分布有严格的地方性，两者分布基本一致。
（√）14.血吸虫病传播途径3个重要环节分别为：含虫卵的粪便污染水体、水中存在钉螺和人畜接触疫水。
（√）15.我国血吸虫病流行区类型包括：湖沼型、平原水网型和山区丘陵型。
（√）16.日本血吸虫生活史对人体危害最大的致病阶段为成虫阶段。
（×）17.日本血吸虫的发育阶段分别为：成虫、虫卵、毛蚴、母胞蚴、子胞蚴、尾蚴、童虫。
（√）18.我国2006年颁布的《血吸虫病防治条例》中规定的血吸虫病防治工作原则是：坚持防治结合、分类管理、综合管理、联防联控，人与家畜同步防治。
治疗日本血吸虫病需要做哪些化验检查
治疗日本血吸虫病需要做哪些化验检查指日本血吸虫寄生在人体静脉系统而引起的寄生虫病。
以发热、变态反应、腹痛、腹泻、肝脾肿大为特点。
(1)血常规检查:急性期白细胞(WBC)总数显著升高，嗜酸性粒细胞(E)也显著增高，达(4～10)×109/升以上，而慢性期嗜酸性粒细胞在10%以内;晚期因脾功能亢进，全血细胞与血红蛋白(Hb)不同程度的减少，此时嗜酸性粒细胞增高就不明显了。
(2)血清蛋白测定:白蛋白(A)明显下降，而球蛋白(G)，尤其是γ-球蛋白(γ-G)显著增高，A/G比倒置。
(3)粪便直接涂片及沉淀孵化检查:粪便直接涂片法虫卵检出率较低，而沉淀集卵可提高阳性率;沉淀孵化法检查毛蚴，阳性率约为80%。
(4)间接红细胞凝集试验:可为阳性，有辅助诊断意义。
检查项:1. 白细胞(WBC或LEU)2. 白细胞分类(DC)3. 嗜酸性粒细胞(E)直接计数4. 红细胞(RBC或BLC)5. 血清白蛋白(ALB或A)6. 血清球蛋白(GLB或G)7. 血清白蛋白/球蛋白比值(A/G)8. 血吸虫抗体白细胞(WBC或LEU)(正常值及其临床意义)【单位】个/升(个/L)【正常值】成人白细胞数为(4.0～10.0)×109/升。
儿童随年龄而异，新生儿为(15.0～20.0)×109/升;6个月～2岁为(11.0～12.0)×109/升;4～14岁为8.0×109/升左右。
【临床意义】(1)增多:常见于急性细菌性感染、严重组织损伤、大出血、中毒和白血病等。
(2)减少:常见于某些病毒感染、血液病、物理及化学损伤、自身免疫性疾病和脾功能亢进等。
白细胞分类(DC)(正常值及其临床意义)【单位】百分比(常用1.0表示100%)【正常值】(1)嗜中性粒细胞(N):成人0.40～0.75(40%～75％)，儿童0.30～0.65(30%～65%)。
(2)嗜酸性粒细胞(E):0.005～0.05(0.5%～5%)。
血吸虫病诊断及相关检测技术标准诠释20190911
已颁布国家和行业血防标准目录
序号 G-1 G-2 G-3
标准编号
标准名称
GB 20048-2006 丝虫病消除标准
GB 26345-2010 疟疾控制和消除标准
GB 15976-2015 血吸虫病控制和消除
代替标准号 GB15976-1995；GB15976-2006
3、取血凝反应板，横向平放纵向使用。于第 1 列第 1 孔加稀释液 100 μL，第 1 列的第 3、4 孔各加稀释液 25 μL，第 2 孔不加稀释 液。
4、于第 1 列第 1 孔加 1 号待测样本 25 μL，充分混匀后吸出 25 μL 至第 2 孔，再从第 1 孔吸出 25 μL至第 3 孔，充分混匀后吸出 25 μL 至第 4 孔，充分混匀后吸出 25 μL 弃去。
晚期血吸虫病：应与结节性肝硬化、原 发性肝癌、疟疾、结核性腹膜炎、慢性粒细胞 性白血病等疾病相鉴别
附录A （资料性附录） 流行病学及临床表现
A.1 流行病学 A.2 临床表现 A.2.1 急性血吸虫病 A.2.2 慢性血吸虫病 A.2.3 晚期血吸虫病
附录B （规范性附录）
血清学检查
B.1 间接红细胞凝集实验 B.2 酶联免疫吸附试验 B.3胶体染料试纸条实验 B.4 环卵沉淀试验 B.5 斑点金免疫渗滤实验
（WS/T 630-2018）
一、适用范围
标准适用范围
各级疾病预 防控制机构
各级医疗 机构
二、术语和定义
血吸虫病 由血吸虫寄生于人和其他哺乳动物所引起的疾病 ，在我国特指日本血吸虫病（注：改写GB 15976—2015， 定义3.1 ）
间接红细胞凝集试验 将抗原包被于红细胞表面，成为致敏 的载体，然后与相应的抗体结合，通过抗体桥联，出现肉眼 可见的凝集现象，以检测样本中的相应抗体。最常用的红细 胞为健康人“O”型红细胞。
血吸虫
致病机理
童虫 童虫在宿主体内移行（肺） 发热、咳嗽、痰中带血、嗜酸性粒细胞增多 局部炎症及虫体代谢产物引起的变态反应
血管炎，毛细血管栓塞、破裂，产生局部细胞 浸润和点状出血
致病机理
成虫 成虫可引起的损害 静脉内膜炎等 代谢产物、虫体分泌物、排泄物、虫体外皮层 更新脱落物等，与抗体形成免疫复合物，激活 补体，使中性粒细胞聚集，吞噬了复合物的中 性粒细胞释放蛋白酶，损伤血管及周围组织。
•我国仅有日本血吸虫。
•日本血吸虫是由日本学者于１９０４年首先 鉴定、命名。
种
名
寄生部位
膀胱V丛 肠系膜V 肠系膜V及门V 肠系膜V及门V
主要流行地区
埃及血吸虫 曼氏血吸虫 湄公血吸虫 间插血吸虫
非洲 拉丁美洲
湄公河流域（泰国 老挝 柬埔寨）
非洲（扎伊尔、加蓬 等）
日本血吸虫
肠系膜V
亚洲
血吸虫病是地方性疾病，主要流行于亚、非、 拉美的76个国家。 动物宿主有牛、猪、羊等多种哺乳动物。
急、慢性血吸虫病没有及时彻底治疗，可发展成 晚期血吸虫病。晚期血吸虫病有的表现为肝硬化 ，出现腹水，成为大肚子。有的脾脏肿大，成为 巨脾；有的影响生长发育，成为侏儒症；严重者 发生呕血、便血（解黑色大便）、肝性昏迷，以 至死亡。
异位血吸虫病的临床表现
血吸虫寄居或虫卵肉芽肿病变成生于门静脉系统以外. 异位损害常见于急性期和重度感染的患者。 比较常见的异位损害是肺与脑，其次为皮肤、肾、胃 和阑尾炎等。 •肺部血管内可有成虫寄生并产卵，大量虫卵沉积，使 患者有干咳、呼吸困难等症状。 •大脑血管可有虫卵沉积，致使脑组织软化、水肿，虫 卵阻塞脑动脉也可引起周围脑组织缺血性坏死，急性 期表现为脑膜炎症状，慢性期症状为癫痫发作。
间接血凝试验(IHA)应用于牛血吸虫病诊断效果的观察
现明显的病理组织学变化。
由此可以说明，抗感败毒口服液按推荐剂量（1mL/L ）饮水给药对靶动物鸡是安全的。
█参考文献：[1]胡超群,王湘妍,段梦迪,等.抗感败毒口服液解热镇痛抗炎试验[J].中国兽医杂志,2017,53(1):106-108.[2]农业部兽医局.中华人民共和国农业部公告第1569号公告[S].2011.[3]王永彬,周绪正,张继瑜.板黄口服液在靶动物鸡中的安全性研究[J].中国畜牧兽医,2014,41(9):126-131.[4]许春燕,刘希望,孔晓军,等.银翘蓝芩口服液对鸡的安全性试验[J].动物医学进展,2017,38(7):62-65.[5]贾兴,刘欣,魏丽娟,等.复方芩兰口服液长期毒性试验研究[J].中国兽药杂志,2019,53(7):49-55.[6]段梦迪,王湘妍,胡超群,等.抗感败毒口服液对大鼠生长和血液理化指标的影响[J].中国兽药杂志,2017,51(9):30-35.作者简介：刘雪芹（1986.11—），女，农学硕士，执业兽医师。
间接血凝试验（IHA ）应用于牛血吸虫病诊断效果的观察刘雪芹（山东畜牧兽医职业学院山东潍坊261000）我国血吸虫病流行程度逐年降低，以粪便毛蚴孵化法为主要技术手段的家畜病原学诊断技术的敏感性也逐步降低，造成漏检现象时有发生，对我国传染源控制措施的实施造成潜在威胁。
我国目前在血吸虫病流行区仍施行家畜普查政策，但由于可操作性等多方面的原因，血清学诊断技术在家畜血吸虫病诊断，尤其初筛应用较少。
以间接血凝试验为基础的试剂盒在人群血吸虫病筛查中发挥重要作用，是基层血防站点必备的试剂和必掌握的技术，极大的减少了工作量，节省了工作时间。
为适应现阶段家畜血吸虫病流行新形势，在全县新一轮家畜（牛）血吸虫病筛查时应用IHA 试剂盒进行初筛，并与病原学检测结果进行对比，以评估IHA 在牛血吸虫病的筛查效果。
接血凝试验（IHA ）；牛血吸虫病；诊断效果间接血凝试验自20世纪50年代末引入我国，是典型的利用抗原检测抗体的特异性反应，因其技术包容性强，制备工艺相对简单，且具备较高敏感性和较好的重复性，很快应用于多种疾病的诊断，并研发出一系列的疾病检测试剂盒[1]。
血吸虫病血清学诊断常用方法
血吸虫病血清学诊断常用方法说实话血吸虫病血清学诊断这事，我一开始也是瞎摸索。
我先试的是间接血凝试验（IHA）。
这就像是一场特别的聚会，红细胞是客人，抗原抗体就是牵线搭桥的组织者。
把血吸虫抗原包被在红细胞上，如果病人血清里有对应的抗体啊，红细胞就会聚集起来。
不过刚开始的时候，我老是掌握不好这个红细胞悬液的浓度，就像调饮料的浓度一样，浓了淡了都不行。
有时候悬液太浓，那结果就容易假阳性，看起来就好像错误地说人家生病了。
后来我就小心翼翼地多做了几次试验对比，才慢慢找准了合适的浓度。
还有环卵沉淀试验（COPT）呢。
这个就有点像给虫子的卵盖房子，我们把血吸虫的卵和病人血清放在一起。
要是病人血清里有抗体，那在卵的周围就会生出像小山包一样的沉淀物。
我刚开始做这个的时候，观察得不够仔细，差点把那些小小的沉淀给忽略了，以为结果是阴性呢。
后来我才知道，看这个得非常专注，就像寻宝一样。
免疫酶标试验（ELISA）也很常用。
这就像玩拼图，把各种不同的试剂当作拼图块。
先让血吸虫抗原和酶标记物结合，再和病人的血清反应。
不过倒试剂的时候我常常提心吊胆的，因为稍微多一点少一点都会影响结果。
以前有次试剂加过量了，整个显色就乱了套，结果完全不对。
吸取教训后，我每次都用很精准的移液器，还会多做几次重复试验来确保结果准确。
乳胶凝集试验也可以用于血吸虫病血清学诊断。
这就像小珠子聚会，把抗原吸附在乳胶颗粒上，如果病人血清中有抗体，乳胶颗粒就会聚到一起。
我当时做这个，对这个乳胶颗粒的保存温度没把握好，有些乳胶颗粒变性了，导致结果不可靠。
后来我就严格按照要求的温度去保存乳胶颗粒。
另外，还有快速试纸条法。
就像用验孕棒一样方便快捷，只要把病人血清滴在试纸上，看有没有显色带就大概能知道结果。
不过这个方法虽然快，但准确性可能相对低一些，只能作为初步筛查。
要是初筛有问题，还是要用前面那些更准确的方法再确定一下。
日本血吸虫抗体检测 间接红细胞凝集试验
日本血吸虫抗体检测间接红细胞凝集试验1范围本标准规定了检测日本血吸虫抗体的间接红细胞凝集试验。
本标准适用于各级疾病预防控制机构和医疗机构对人体血清中日本血吸虫抗体的检测。
2术语和定义下列术语和定义适用于本文件。
2.1血吸虫病schistosomiasis由血吸虫寄生于人和其他哺乳动物所引起的疾病，在我国特指日本血吸虫病（schistosomiasis japonica）。
注：改写GB15976—2015，定义3.12.2间接红细胞凝集试验indirect haemagglutination test将抗原包被于红细胞表面，成为致敏的载体，然后与相应的抗体结合，通过抗体桥联，出现肉眼可见的凝集现象，以检测样本中的相应抗体。
最常用的红细胞为健康人“O”型红细胞。
2.3可溶性虫卵抗原soluble egg antigen血吸虫虫卵经匀浆和超声破碎等处理后离心收集的上清液，含蛋白质、糖蛋白、多糖等多种成分复合物。
3仪器设备3.1台式低速离心机最高转速≥2500r/min，或最大相对离心力≥800g。
3.2平板微量振荡器最高振动频率2800r/min，最大振幅6mm。
3.3电热恒温水浴箱控温范围室温+5℃～99.9℃，温度分辨率/波动度0.1℃/±0.5℃。
3.4微量移液器量程范围10μL～100μL，增量1μL；量程范围100μL～1000μL，增量5μL。
4试剂材料4.1冻干致敏红细胞主要组成成分为日本血吸虫可溶性虫卵抗原、健康人“O”型红细胞和蔗糖，制备方法参见附录A。
4.2阳性对照血清感染日本血吸虫的兔混合血清，参见附录A。
4.3阴性对照血清正常兔混合血清，参见附录A。
4.4稀释液pH7.2磷酸盐缓冲液（PBS），参见附录A。
4.5血凝反应板“V”型微孔有机玻璃血凝板为宜，操作程序参见附录B。
5检测步骤5.1样本准备采集末梢血100μL或静脉血2mL，室温下放置至血块收缩后，800g离心5min，分离出血清后进行检测，参见附录B。
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（三）红细胞鞣化
取1/10000鞣酸溶液与等量2.5%红细胞悬液混 匀，置于37℃ 中15min，并不断摇动。洗涤， 去除多余的鞣酸。
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鞣化红细胞的优点 鞣化后红细胞易吸附蛋白抗原。
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（四）红细胞致敏
取虫卵抗原原液1:100稀释，与2.5%的鞣化红 细胞等量混合，置于37℃水浴中30min，并不断摇 动，然后离心，洗涤，去除多余抗原。
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四、反应标准
（一）阴性反应：红细胞全部下沉在 凹底部，形成紧密的圆点，周围整齐 清晰。 （二）阳性反应：待检者血清以1:10 稀释度出现凝集反应为阳性起点
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（三）反应强度 “-”：红细胞全部下沉在凹底部，形成紧密的 圆点，周围整齐清晰 “+”：多数红细胞下沉在凹底部形成圆点， 周围可见少量凝集红细胞 “++”：凹底部可见明显的红点，凝集红细 胞在底部形成小薄层
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（五）生理盐水：用于稀释IHA试剂、阳 参、阴参、血清样本的生理盐水必须保持 无菌。
（六）判断反应结果：在判断反应结果时
应在反应板下面衬一张白纸，使反应结果
更加清晰。先观察空白对照、阴参、阳参，
再观察样本。
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六、评价
IHA的优点： 敏感性高，阳性符合率在90%以上，对粪检阳 性者可高达95%，假阳性率一般不超过4%。 操作方便，用血量少，便于现场使用。 试剂生产方便，成本低，符合国情。 IHA的缺点： 特异性欠强、与其它吸虫有较高的交叉反应。 交叉反应主要在肺吸虫感染，可达50%以上。
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国外最早于1955年应用于检测马抗血清 国内陶义训等（1958）首先应用于诊断
日本血吸虫病 杨赞元等（1976）应用冰冻干燥方法
制备试剂
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一、基本概念
（一）凝集反应 是指细菌、细胞等颗粒性抗原加入相应抗体， 并在适量电解质存在的条件下，两者特异性 结合且进一步凝聚成肉眼可见的小块。
用含有5%蔗糖及1%正常兔血清（56℃灭活） 的pH7.2PBS保护液，配成10%浓度的致敏红细胞 悬液。
致敏效果与抗原的活性及纯度有关。
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（五）致敏红细胞的冰冻干燥
将上述致敏红细胞悬液摇匀，分装于2ml安瓿 内。每支0.4ml，立即放入-40℃冰箱冰冻，待全部 分装完毕后，移入冰冻干燥机内，冰冻干燥约24h， 干燥后封口，保存于4℃中备用。
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（二）红细胞醛化
取人“O”型血红细胞3份（不同个体） 混合 ，用生理盐水洗涤 。置冰浴内，将戊 二醛溶液慢慢滴入红细胞悬液中，边加边 摇，醛化1h。用1/10000的柳硫汞蒸馏水配 成10%的红细胞悬液，置于化红细胞优点 克服了个体差异，保证实验重复性 延长红细胞的保存时间，在4℃可保存1年 避免操作过程中因振荡、低渗、冻融使红细
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（三）第1孔中加待检血清25μl，混匀后吸出 25μl加于第2孔中，在第2孔中混匀后，吸出 25μl加于第3孔中，混匀后弃去25μl。此时第 1、2、3孔中的血清稀释度依次为1:5 、1:10 、 1:20。
（四）在第2、第3孔中各加致敏红细胞悬液 25μl，将反应板放在振荡器上振荡1min，室 温下静置45min，观察反应结果。
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“+++”：凹底部可见很弱的红点，红细胞呈 疏松的颗粒凝集 “++++”：红细胞呈明显的颗粒凝集，均匀 散布于凹底部周围形成薄层，有时呈皱褶状
效价(滴度)：发生凝集现象最高的血清稀释度。
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五、影响因素及注意事
（一）试剂：保存、对照、效价、摇匀。 （二）反应板：“V”型，底角应为90°。 反复冲洗。 （三）毛细吸管：校正、垂直。 （四）血清样本：新鲜为宜，保存在冰盒 内。溶血样本将影响测定结果的准确性。
凝集反应分为直接凝集和间接凝集反应。
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（二）间接红细胞凝集试验
原理 日本血吸虫可溶性虫卵抗原 载体颗粒 绵羊、家兔、鸡的红细胞及O型人红细胞 致敏的新鲜红细胞保存时间短，且易变脆、溶血和污染，
只能使用2～3天 致敏前将红细胞醛化，可长期保存而不溶血 常用的醛类有甲醛、戊二醛、丙酮醛
（一）血吸虫虫卵抗原制备 分离虫卵→ 脱水、脱酯干燥→ 研磨成细粉 → 冻融→ 超声粉碎→ 普通离心→ 高速离心。 经离心后的上清液，即为虫卵抗原原液，保存于 -20℃中备用。
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理想抗原 敏感性高，特异性强，能区别不同感染度， 能区别现在感染还是过去感染，价廉。 但目前还没有，今后可能依靠杂交瘤技术、 DNA技术而获得理想的抗原。
间接红细胞凝集试验诊断血吸虫病
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间接红细胞凝集试验 （Indirect haemagglutination test, IHA）
以红细胞为载体 吸附预先制备的特异性抗原或抗体作为试剂 检测标本中的相应抗体或抗原 血清学方法 特点：抗原与其抗体之间的特异性反应
红细胞凝集现象
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（三）间接血凝的类型
IHA：用抗原致敏红细胞检测标本中抗体 反向间接血凝试验：用特异性抗体致敏红
细胞检测标本中的相应抗原 间接血凝抑制试验 反向间接血凝抑制试验
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（正向）间接凝集反应
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反向间接凝集反应
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间接凝集抑制反应
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二、冻干致敏红细胞的制备
冰冻干燥具有高科技含量不是单纯干燥，在冰 冻状态下使水分子升华，不使红细胞破裂，不影响 抗原活性。
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三、操作步骤
（一）取生理盐水2ml，加入装有冰冻干 燥红细胞的安瓿中，配成2.0%的红细胞 悬液，摇匀。 （二）在“V”型微量血凝反应板的第1孔 中加生理盐水100μl, 第2、3孔中各加25μl。
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七、实用价值
（一）可作为血吸虫病的辅助诊断。无血 治史者和治疗史3年以上者，IHA阳性可给 予扩大治疗。
（二）在血吸虫病流行区，可作为查病的 过筛方法。
（三）可作为血清流行病学调查及疫情监 测的方法
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