实验五 薄层色谱实验
实验五薄层色谱实验
实验五薄层色谱实验
一、实验原理
薄层色谱(Thin-Layer Chromatography,TLC)是一种分离分析技术，
它将混合物分离并加以分析，以测定化学物质在混合物中的含量，并对其
结构进行分析。
薄层色谱实验的一般步骤为：用菲林纸或其他实验材料，
在玻璃板上均匀铺设一层纸片，在纸片中加入一定量溶剂，并将要分析的
物质涂在纸片上，然后放入含有一定量溶剂的气相色谱仪中，溶剂从纸片
上上升，复杂的物质分子会随着溶剂上升而沿着纸片的方向分离，当溶剂
沿着纸片方向移动时，部分物质分子会停留在纸片移动轨迹上，从而可以
以物质分子逐渐沿着纸片的轨迹分布的方式对复杂的物质进行分离和检测。
二、实验准备
1.实验仪器
（1）薄层色谱仪：用于给纸片滴加溶剂，把溶剂按一定速度从纸片
上升起，滴加溶剂的速度可以用薄层色谱仪调节。
（2）紫外可见光检测仪：它能够测量沿着纸片的轨迹上出现的物质
吸收紫外线的能力，以来检测混合物中物质的比例和浓度总量。
2.实验材料
（1）纸片：一般使用硅胶薄层色谱纸片，其薄厚约为0.25mm，它的
表面非常细腻，不吸附变性物质，表面有良好的润湿性，可以形成一层薄层。
薄层色谱 实验报告
薄层色谱实验报告
《薄层色谱实验报告》
实验目的：
本次实验旨在通过薄层色谱技术对混合物中的化合物进行分离和鉴定，以掌握薄层色谱技术的操作方法和原理，提高化学实验操作能力。
实验原理：
薄层色谱是一种基于物质在固定相和流动相之间分配系数不同而进行分离的技术。
在薄层色谱实验中，我们将待分离的混合物在薄层板上均匀涂布，然后将薄层板放入含有流动相的密闭槽中，流动相会在薄层板上上升，使得混合物中的成分被带上移动，不同成分会在薄层板上形成不同的斑点，最终通过比色或紫外光照射来观察分离效果。
实验步骤：
1. 准备薄层板和混合物样品
2. 在薄层板上均匀涂布混合物
3. 将薄层板放入密闭槽中，加入流动相
4. 等待流动相上升至薄层板顶端，取出薄层板
5. 观察薄层板上的斑点，并进行比色或紫外光照射
实验结果：
通过薄层色谱实验，我们成功将混合物中的化合物分离开来，并观察到了不同化合物在薄层板上形成的斑点。
通过比色或紫外光照射，我们可以对分离出的化合物进行鉴定和定量分析，实现了对混合物的分离和鉴定。
实验结论：
薄层色谱是一种简单而有效的分离和鉴定技术，能够快速分离出混合物中的化合物，并且操作简单，成本低廉。
通过本次实验，我们对薄层色谱技术有了更深入的了解，并且掌握了其操作方法和原理，为今后的化学实验打下了良好的基础。
薄层色谱法分析实验报告
薄层色谱法分析实验报告一、实验目的本实验旨在掌握薄层色谱法（TLC）的基本原理和操作方法，能够运用该方法对混合物中的成分进行分离和分析。
二、实验原理薄层色谱法是一种快速、简便、灵敏的分离分析技术。
它基于混合物中各组分在固定相（通常是硅胶或氧化铝等吸附剂）和流动相（展开剂）之间的分配系数不同，从而实现分离。
当样品点在薄层板的一端，并置于装有展开剂的展开缸中时，展开剂在毛细作用下沿薄层板上升，样品中的各组分随着展开剂的移动而在固定相上不断地进行吸附、解吸、再吸附、再解吸的过程，导致不同组分在薄层板上移动的速度不同，最终形成相互分离的斑点。
通过与标准物质的斑点进行对比，可以对样品中的成分进行定性分析；通过测量斑点的面积或强度，可以对样品中的成分进行定量分析。
三、实验仪器与试剂1、仪器薄层板（硅胶 G 板或氧化铝板）展开缸点样毛细管紫外光灯（254nm 和 365nm）铅笔、直尺2、试剂样品溶液（待分析的混合物）标准物质溶液（已知成分的纯物质）展开剂（根据样品的性质选择合适的溶剂系统，如正己烷乙酸乙酯、氯仿甲醇等）四、实验步骤1、薄层板的制备选择合适的吸附剂（硅胶 G 或氧化铝），加入适量的蒸馏水或粘合剂（如羧甲基纤维素钠），搅拌均匀，调成糊状。
将糊状的吸附剂均匀地铺在干净的玻璃板上，厚度约为 025 05mm。
放置在水平台上晾干，然后在 105 110℃的烘箱中活化 30 分钟，取出后冷却备用。
2、点样用铅笔在薄层板距底边 15 2cm 处轻轻画一条起始线。
用微量注射器或点样毛细管吸取样品溶液和标准物质溶液，分别在起始线上点样。
点样时要注意斑点的大小和间距，一般斑点直径不应超过 2mm，相邻斑点之间的距离应不少于 1cm。
3、展开将点样后的薄层板放入装有展开剂的展开缸中，展开剂的液面高度应低于起始线。
盖上盖子，使展开缸内形成饱和的蒸汽环境，以保证展开效果的重复性。
待展开剂前沿上升到距薄层板顶端 1 2cm 处时，取出薄层板，晾干。
实验五类胡萝卜素的提取和薄层色谱
实验五类胡萝卜素的提取和薄层色谱实验五：类胡萝卜素的提取和薄层色谱一、实验目的1.学习和掌握类胡萝卜素的基本性质和提取方法。
2.了解和掌握薄层色谱的基本原理和操作方法。
3.通过实验，亲手操作提取类胡萝卜素，并利用薄层色谱对其进行分析。
二、实验原理类胡萝卜素是一类重要的天然色素，呈红色或黄色，主要存在于植物中，如胡萝卜、番茄、菠菜等。
其结构包含多个共轭双键，具有较高的稳定性，因此适用于提取和分析。
类胡萝卜素的提取主要采用有机溶剂萃取法。
通过使用具有极性的有机溶剂，如乙醇、丙酮等，将类胡萝卜素从植物材料中溶解出来，再利用类胡萝卜素在极性溶剂中的溶解度随着温度的升高而增大的性质，加热以提高其溶解度，从而得到类胡萝卜素。
薄层色谱是一种常用的分离和分析方法，其基本原理是利用不同物质在固定相和移动相之间的分配比的不同，从而实现物质的分离。
通过将待测样品点在薄层板上，固定相为硅胶或纤维素等，移动相为有机溶剂或混合溶剂等，当移动相在固定相上移动时，不同物质会以不同的速度移动，从而实现分离。
三、实验步骤1.准备试剂和器材：乙醇、丙酮、石油醚、硅胶G、玻璃板、点样器、展开剂、显色剂等。
2.样品处理：选取新鲜的胡萝卜或菠菜，洗净后烘干，磨成粉末。
称取适量粉末，加入适量的乙醇和丙酮混合液（体积比1:1），搅拌均匀后，静置10分钟。
3.装柱：将硅胶G研碎成粉末，加入适量石油醚溶解，制成硅胶G薄层。
将硅胶G薄层倒入玻璃板中，用玻璃棒轻轻搅拌，使硅胶G均匀分布在玻璃板上。
4.点样：用点样器取少量待测样品，轻轻点在薄层板上，避免样品重叠。
5.展开：将薄层板置于展开剂中（通常为石油醚和乙酸乙酯的混合液），展开剂会向上移动，带动样品向上移动。
当展开剂移动至薄层板末端时，取出薄层板。
6.显色：将展开后的薄层板置于浓氨水蒸气中熏蒸数分钟，取出后用乙醇-乙酸乙酯溶液进行喷雾显色。
7.观察和记录：观察显色后的薄层板上各色带的颜色和位置，根据各色带的Rf值（比移值）进行定性和定量分析。
薄层色谱法实验报告
薄层色谱法实验报告实验目的，通过薄层色谱法对混合物中的化合物进行分离和鉴定。
实验原理，薄层色谱法是一种以薄层吸附剂为固定相，液态或气态为流动相，利用化合物在固定相和流动相之间的分配作用，进行分离和鉴定的方法。
在薄层色谱法中，混合物中的化合物在固定相上的分配系数不同，因此会在流动相的作用下以不同速度迁移，从而实现分离的目的。
实验仪器，薄层色谱仪、薄层板、样品施加器、显色剂、紫外灯等。
实验步骤：1. 准备薄层板，将薄层板放入样品施加器中，用吸管将流动相均匀地涂抹在薄层板上，使其表面湿润。
2. 样品施加，用微量吸管将待测样品滴在薄层板上，注意控制滴加量，避免样品扩散过大。
3. 开展色谱，将滴加好样品的薄层板放入薄层色谱仪中，开展色谱过程，观察化合物的迁移情况。
4. 显色鉴定，将色谱后的薄层板用显色剂喷洒或浸泡，然后在紫外灯下观察化合物的显色情况，记录下相应的Rf值。
实验结果，根据实验所得的Rf值和显色情况，可以初步判断出混合物中的化合物种类和含量。
实验总结，薄层色谱法是一种简便、快速、准确的分离和鉴定方法，适用于各种化合物的分析。
在实验中，我们通过薄层色谱法成功地对混合物中的化合物进行了分离和鉴定，获得了较好的实验结果。
实验注意事项：1. 在操作过程中要注意样品的控制量，避免过多或过少的情况发生。
2. 使用显色剂和紫外灯时要注意安全，避免接触皮肤和眼睛。
3. 实验结束后要及时清洗和整理实验仪器，保持实验环境的整洁。
通过本次实验，我们对薄层色谱法有了更深入的了解，掌握了其操作方法和实验技巧，为今后的实验和科研工作打下了良好的基础。
同时，也加深了对色谱分析方法的认识，为化学分析领域的发展和应用提供了有力支持。
结语，薄层色谱法作为一种重要的分离和鉴定方法，在化学分析领域具有广泛的应用前景。
通过本次实验，我们不仅掌握了薄层色谱法的基本原理和操作技巧，也提高了实验操作能力和科学素养，为今后的科研工作和学习打下了坚实的基础。
薄层色谱法实验报告
薄层色谱法实验报告
撰写时间：2023年5月
一、实验目的
本实验旨在熟悉薄层色谱（TLC）的原理，掌握TLC分析的步骤及操
作方法，用TLC技术分析指定药物样品中的组分，了解TLC方法的优越性。
二、原理
薄层色谱是一种微量分析技术，它利用高效液相色谱柱（TLC）的特点，将待分析样品在含有吸附剂的硅胶玻璃板上加以分析的技术。
样品在
硅胶玻璃板表面形成一个均匀的紧密层，经过注入一定量的浸液，通过管
升使浸液在表面上移动，当浸液含有离子的时候，将样品吸附和分离，样
品形成一条条的拖把形渗出线，被称为拖把线。
由于样品迁移速度不同，
拖把线之间也会出现差异，根据迁移距离的不同可以用荧光染料、紫外线
检测等方法对样品进行检测分析。
三、试剂
(1)硅胶玻璃板、（2）吸附剂（3）浸液（4）荧光染料（5）溶液（6）标准品。
四、实验步骤
1.准备样品：在清洁的硅胶玻璃板上，使用量筒和包络刀把样品放在
指定位置，加入活性炭（粉末），用包络刀将活性炭和样品紧密地混合搅拌，灌入溶剂搅拌，得到溶解液。
2.吸附剂处理：在硅胶玻璃板上膜的样品处加入吸附剂。
薄层色谱法分析实验报告
薄层色谱法分析实验报告一、实验目的1、掌握薄层色谱法的基本原理和操作方法。
2、学会使用薄层色谱法分离和鉴定混合物中的成分。
3、熟悉薄层色谱法在有机化学中的应用。
二、实验原理薄层色谱法（Thin Layer Chromatography，TLC）是一种快速、简便、灵敏的分离和分析方法。
它基于混合物中各组分在固定相和流动相之间的分配系数不同，从而实现分离。
在薄层色谱中，固定相通常是涂在玻璃板或塑料板上的吸附剂，如硅胶、氧化铝等。
流动相则是一种挥发性的有机溶剂或其混合物。
当样品溶液点在薄板的一端，并将薄板放入装有流动相的层析缸中时，流动相通过毛细作用沿薄板上升，样品中的各组分在固定相和流动相之间不断进行吸附、解吸、再吸附、再解吸的过程，使得不同组分在薄板上移动的速度不同，从而达到分离的目的。
分离后的组分可以通过显色剂显色，或者在紫外灯下观察荧光，从而实现定性和定量分析。
三、实验仪器与试剂1、仪器薄层板：硅胶 G 板层析缸点样毛细管紫外灯喷雾器烘箱2、试剂展开剂：正己烷乙酸乙酯（体积比 7 ： 3）显色剂：碘蒸气样品：混合有机化合物（如苯甲酸、苯甲醛、苯胺）四、实验步骤1、制板取适量硅胶 G 粉，加入适量蒸馏水，搅拌均匀成糊状。
将糊状硅胶均匀涂布在玻璃板上，厚度约为 025 05 mm。
水平放置，自然晾干后，在 110℃烘箱中活化 30 分钟，取出，置于干燥器中备用。
2、点样用毛细管吸取样品溶液，在距薄板底边 15 2 cm 处，轻轻接触薄板，形成直径约 2 3 mm 的样点。
每个样点之间相距 1 15 cm。
3、展开将适量展开剂倒入层析缸中，高度约为 05 1 cm。
将点样后的薄板放入层析缸中，密封，使展开剂的液面低于样点。
待展开剂上升至距薄板顶端 1 2 cm 时，取出薄板，晾干。
4、显色将晾干后的薄板放入盛有碘蒸气的容器中，进行显色。
或者在紫外灯下观察荧光。
5、计算比移值（Rf 值）测量原点至样点中心的距离（a）和原点至展开剂前沿的距离（b）。
薄层色谱分析实验报告
薄层色谱分析实验报告1. 实验目的本实验旨在通过薄层色谱分析方法，对给定的混合物进行成分的分离和鉴定，并学习薄层色谱分析的基本原理和操作技巧。
2. 实验原理薄层色谱是一种常用的化学分析方法，它利用不同物质在固定相上的吸附效应和移动相的溶解效应来实现样品的分离。
薄层色谱分析主要包括以下几个步骤：•准备薄层色谱板：将薄层色谱板放入色谱槽中，添加适当的移动相，使其达到平衡状态。
•样品处理：将待测混合物溶解在适当的溶剂中，得到待测溶液。
•样品上样：利用微量注射器或吸管，在薄层色谱板上均匀地点涂上待测溶液。
•开始分离：将薄层色谱板放入色谱槽中，待移动相上升至预定高度时取出，用铅笔标记上升高度。
•显色检测：将薄层色谱板放入显色槽中，用合适的显色剂使化合物显色。
•结果分析：根据样品在薄层色谱板上的迁移距离以及显色情况，确定样品的成分。
3. 实验步骤3.1 准备薄层色谱板将薄层色谱板放入色谱槽中，添加适当的移动相，使其达到平衡状态。
3.2 样品处理将待测混合物溶解在适当的溶剂中，得到待测溶液。
3.3 样品上样利用微量注射器或吸管，在薄层色谱板上均匀地点涂上待测溶液。
3.4 开始分离将薄层色谱板放入色谱槽中，待移动相上升至预定高度时取出，用铅笔标记上升高度。
3.5 显色检测将薄层色谱板放入显色槽中，用合适的显色剂使化合物显色。
3.6 结果分析根据样品在薄层色谱板上的迁移距离以及显色情况，确定样品的成分。
4. 实验结果与讨论根据实验步骤，我们成功进行了薄层色谱分析实验，并获得了如下结果：•样品A在薄层色谱板上迁移距离为X cm，显色剂反应为蓝色。
•样品B在薄层色谱板上迁移距离为Y cm，显色剂反应为绿色。
根据已知标准物质的迁移距离和显色反应，我们确定样品A为某化合物A，样品B为某化合物B。
通过对样品的分离和鉴定，我们可以得出混合物中的不同成分，并进行定性和定量分析。
5. 实验总结本实验通过薄层色谱分析的方法，成功地对给定的混合物进行了分离和鉴定。
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将配制好的浆料倾注到清洁干燥的载玻片上， 拿在手中轻轻的左右摇晃，使其表面均匀平滑， 在室温下晾干后进行活化。 本实验用此法制备薄层板4片。
3、薄层板的活化
将涂布好的薄层板置于室温凉干后，放在烘箱 内加热活化，活化条件根据需要而定。硅胶板 一般在烘箱中渐渐升温，维持105—110℃活化 30min。氧化铝板在200℃烘4h可得到活性为Ⅱ 级的薄板，在150—160℃烘4h可得活性为Ⅲ— Ⅳ级的薄板。 活化后的薄层板放在干燥器内保存待用。
实验五 薄层色谱实验
一、实验目的
• 1、掌握薄层色谱的操作技术。 • 2、了解薄层色谱的基本原理和应用。
二、实验原理：
1、原理 薄层色谱(Thin Layer Chromatography附剂（固定相）和 溶剂（移动相）之间进行分离。由于各种化 合物的吸附能力各不相同，在展开剂上移时 ，它们进行不同程度的解吸，从而达到分离 的目的。
色谱识别：日光下观察，供试品色谱中部 可见与熊果酸对照品相同的紫红色斑点为 主斑。紫外光灯下的荧光色谱除熊果酸显 橙黄色荧光斑点外，尚有其他荧光斑点， 可供辅助鉴别。
五、实验讨论：
•载玻片应干净且不被手污染，吸附剂在玻 片上应均匀平整。 •点样不能戳破薄层板面，各样点间距11.5cm，样点直径应不超过2mm。 •展开时，不要让展开剂前沿上升至底线。 否则，无法确定展开剂上升高度，即无法 求得Rf值和准确判断粗产物中各组分在薄 层板上的相对位置。 •显色加热时间不宜过长，否则薄层板表面 易炭化而背景被污染。
4、点样
•先用铅笔在距薄层板一 端 1cm处轻轻划一横线作为 起始线，然后用毛细管吸 取样品，在起始线上小心 点样，斑点直径一般不超 过2mm。
•若因样品溶液太稀，可重复点样，但应待前 次点样的溶剂挥发后方可重新点样，以防样点 过大，造成拖尾、扩散等现象，而影响分离效 果。若在同一板上点几个样，样点间距离应为 1。 •点样要轻，不可刺破薄层。
溶剂前沿
距溶 离质 前 沿 至 原 点 原溶 中 点质 心 中最 心高 距浓 离度 中 心 至
Rf值计算示意图
溶质最高浓度中心
原点中心
薄层色谱流动相及展开机制
TLC展开就是流动相沿薄层（固定相）运动，以实现样品混 合组分分离的过程。 • 选择原则为“相似相容” • 强极性试样用强极性展开剂，弱极性试样用弱极性展开剂， 常用溶剂极性顺序为： 乙烷<二硫化碳<苯<四氯化碳<二氯甲烷<乙醚<乙酸乙酯< 丙酮<丙醇<甲醇<水
6、显色
•被分离物质如果是有色组分，展开后薄层色谱 板上即呈现出有色斑点。 •如果化合物本身无色，则可用碘蒸气熏的方法 显色。还可使用腐蚀性的显色剂如浓硫酸、浓 盐酸和浓磷酸等。 •对于含有荧光剂的薄层板在紫外光下观察，展 开后的有机化合物在亮的荧光背景上呈暗色斑 点。
比较常用的显色剂由两种，碘和5%--10%硫酸 甲醇溶液，一般的物质在这两种显色剂中都能 显色。碘显色的好处是显完色后放置一段时间 碘挥发后不影响你的点，缺点是它显所有的点 都是黄色的；硫酸显色的颜色很丰富，可以根 据颜色初步判断物质的种类，也可以判断Rf值 相同的点是否是同一物质。
六、思考题
1.如何利用Rf值来鉴定化合物？ 2.薄层色谱法点样应注意些什么？ 3.常用的薄层色谱的显色剂是什么？
2、薄层色谱的用途：
1）化合物的定性检验。（通过与已知标准物对比 的方法进行未知物的鉴定）在条件完全一致的情 况，纯碎的化合物在薄层色谱中呈现一定的移动距 离，称比移值（Rf值），所以利用薄层色谱法可以 鉴定化合物的纯度或确定两种性质相似的化合物是 否为同一物质。
影响比移值的因素很多，如薄层的厚度，吸附剂 颗粒的大小，酸碱性，活性等级，外界温度和展开 剂纯度、组成、挥发性等。所以，要获得重现的比 移值就比较困难。为此，在测定某一试样时，最好 用已知样、品进行对照。
5、展开
薄层色谱的展开，需要在 密闭容器中进行。在层析 缸中加入配好的展开溶剂， 使其高度不超过1cm。将 点好的薄层板小心放入层 析缸中，点样一端朝下， 浸入展开剂中。盖好瓶盖， 观察展开剂前沿上升到一 定高度时取出，尽快在板 上标上展开剂前沿位置。
晾干，观察斑点位置，计算Rf值。 在特定的色谱系统中，化合物 的Rf值是一定的，比较未知物 和标准物的Rf值能够作为鉴定 未知物的依据。
薄 层 板
SiO2 玻璃板 上涂吸附剂层 Al2O3 上行法
下行法 层 析 缸 滤纸条 展开剂 薄层板
层 析 缸
薄层板 展开剂
1.薄层板的制法；
2.薄层色谱活化； 3.薄层色谱点样； 4.薄层色谱展开； 5.薄层色谱显色与分析；
四、实验步骤：
1、吸附剂的选择 薄层色谱的吸附剂最常用的是氧化铝和硅胶。 1）硅胶： “硅胶H”—不含粘合剂； “硅胶G”—含煅石膏粘合剂； 其颗粒大小一般为260目以上。颗粒太大，展开剂 移动速度快，分离效果不好；反之，颗粒太小溶 剂移动太慢，斑点不集中，效果也不理想。
溶质最高浓度中心至原点中心的距离 Rf 溶剂前沿至原点中心的距离
2、快速分离少量物质（几到几十微 克，甚至0.01µg） 3、跟踪反应进程 在进行化学反应 时，常利用薄层色谱观察原料斑点 的逐步消失，来判断反应是否完成。 4、化合物纯度的检验（只出现一个斑 点，且无拖尾现象，为纯物质）
三、实验装置
四、实验步骤：
对化合物的吸附能力与它们的极性成正比， 具有较大极性的化合物吸附较强，因而Rf值较 小。
酸和碱 > 醇、胺、硫醇 > 酯、醛、酮 > 芳香族化合物 > 卤代物、醚 >烯 > 饱和烃 本实验选择的吸附剂为薄层色谱用硅胶G。
2、薄层板的制备：
薄层板制备的好坏直接影响色谱的结果。薄层 应尽量均匀且厚度要固定。否则，在展开时前 沿不齐，色谱结果也不易重复。在烧杯中放入 2g硅胶G，加入5—6ml0.5%的羧甲基纤维素钠水 溶液，调成糊状。
山楂的薄层鉴别： 供试液制备： 取本品粉末0.5g，加醋酸乙酯2ml．浸 渍24小时，取上清液作为供试品溶液。 对照液制备： 取熊果酸对照品．加甲醇制成每1ml含 1mg的溶液，作为对照品溶液。
点样：供试品溶液点样4ul，对照品溶液点 样2ul 展开剂：甲苯-醋酸己酯一甲酸(20：4： 0.5) 显色：喷以硫酸乙醇溶液(3 -10)，80℃加 热数分钟，至斑点显色清日析，置日光和 紫外光灯( 365nm)下检视。