薄层色谱
色谱学 第三章 薄层色谱
在吸附色谱过程中，溶质、溶剂和吸附剂三 者是相互联系而又相互竞争的，如此构成了 整个层析分离过程 。 在薄层吸附色谱过程中，主要为物理吸附， 无选择性。因之吸附剂与多元组分溶液接触 时，一方面任何溶质都可被吸附（当然单位 重量吸附剂所能吸附物质的量，即“吸附量” 会因物质种类而异），另一方面，吸附剂也 可吸附流动相分子。由于物理吸附是可逆的， 故被吸附的分子同时也可被解吸出来。
偶氮染料 偶氮苯 对甲氧基偶氮苯 苏丹黄 苏丹红 对氨基偶氮苯 对羟基偶氮苯
Ⅱ 0.61 0.28 0.18 0.11 0.04 0.01
表3-2 硅胶活度分级法 Rf Ⅲ Ⅳ 0.70 0.83 0.43 0.67 0.30 0.53 0.13 0.40 0.07 0.20 0.01 0.07
除上二种外，还有其他一些吸附剂。吸附剂品种如下： （1）硅胶：薄层色谱用为200~250目粒度，规格很多，一般如有石膏作粘 结剂，称硅胶G；石膏含量为5~20%，一般为10~13%，亦有用淀粉作粘 结剂的，称硅胶S，不加粘结剂者称硅胶H或硅胶N，为了便于观察组分的 斑点，也可在硅胶中加入荧光指示剂。如果又加有粘结剂时，则称为硅胶 GF或硅胶GF254，即吸收254nm紫外光。 （2）氧化铝：根据加有粘结剂情况不同，有H、G、HF、GF等品种。 （3）硅镁吸附剂：即费罗里硅土，使用前要在130℃下活化二小时。 （4）纤维素：长度仅为2~20微米的短纤维，分天然纤维和微晶纤维两种 形式，也可加粘合剂、一般用于亲水性物质的分离，如羟基化物等，但缺 点为不能用浓硫酸等腐蚀性溶剂进行显色。 （5）聚酰胺：这是一种使用广泛的有机吸附剂，多用于分离酚类化合物， 样品容量大，但粘结能力差，可加入纤维素或淀粉作粘结剂。 （6）烧结薄层板：这是一种多次使用的薄层板，是由200~300目石英或玻 璃粉，与200~300目硅胶或氧化铝按1：25重量混合，用乙醇调成浆料，涂 在玻璃板上。0.25~0.3毫米厚，然后在700~780℃高温下烧结，即成烧结板。 烧结板用一次后可用乙醇或其它有机溶剂洗涤，最后用水洗干净后烘干再 继续使用。
薄层色谱分析主要影响因素
薄层色谱分析主要影响因素薄层色谱（Thin Layer Chromatography，TLC）是一种常用的色谱技术，用于分离、鉴定和定量分析化学物质。
薄层色谱分析的主要影响因素包括色谱载体、流动相、样品溶液、色谱发展条件和检测方法等方面。
1.色谱载体：色谱载体是薄层色谱分析中的关键参数，它对分离性能和分析效果起着重要作用。
常用的薄层色谱载体包括硅胶、氧化铝和聚甲基丙烯酸酯等。
不同类型的载体具有不同的极性和吸附性质，对样品的分离能力和保留行为有所影响。
2.流动相：流动相是指在色谱过程中用于移动样品的溶剂系统。
选择合适的流动相可以有效地提高样品的吸附性能和分离效果。
流动相的组成和性质是影响色谱分离的关键因素，其pH值、溶剂极性和添加剂的类型与浓度等都会对分离效果产生影响。
3.样品溶液：样品的溶解性和浓度对薄层色谱的分析结果也有重要影响。
溶液的选择要根据目标化合物的极性和溶解性来确定，应尽量使样品溶解度高、稳定性好，避免出现沉淀和聚集现象。
此外，样品的浓度也会对分离效果和检测灵敏度产生影响。
4.色谱发展条件：色谱发展条件包括色谱层厚、溶剂的饱和度、发展时间和温度等因素。
色谱层厚的选择要根据目标化合物的性质和分析要求来确定，一般在0.1-0.25mm之间。
溶剂的饱和度和发展时间要适当控制，过度或不足都会对分离效果产生不良影响。
温度因素是影响分离的重要参数之一，合适的温度能加速色谱发展速度和提高分离效果。
5.检测方法：综上所述，薄层色谱分析的主要影响因素包括色谱载体、流动相、样品溶液、色谱发展条件和检测方法等。
研究者在进行薄层色谱分析时，需要合理选择上述参数，以获得准确、可靠的分析结果。
薄层色谱
表 1 一些常用的显色剂
显色剂
配制方法
检出对象
浓硫酸
10%H2SO4
大多数有机化合物在加热后可显 出黑色斑点
碘蒸气
将薄层板放入缸内被碘蒸气饱和数 很多有机化合物显黄棕色
分钟
碘的氯仿溶液
0.5%碘的氯仿溶液
同上
5%磷钼酸乙醇溶液，喷后 120℃烘
硝酸铈铵
6%硝酸铈铵的 2mol／L 硝酸溶液 显色剂，多元醇在黄色底色上有
棕黄色斑点
香兰素-硫酸
3g 香兰素溶于 100mL 乙醇中，再加 高级醇及酮呈绿色
入 0.5mL 浓硫酸
茚三酮
0.3g 茚三酮溶于 100mL 乙醇，喷 氨基酸、胺、氨基糖
后,110℃热至斑点出现
东北师范大学化学学院综合化学实验学习资料
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了荧光）。也可将展开完毕的薄 层板烘干后用显色剂喷雾显色。常用的显色剂有碘和三氯化铁水溶液等。许多有机化合物能 与碘生成棕色或黄色的络合物，利用这一性质，在一密闭容器中（一般用展开缸即可）放几 粒碘，将展开并干燥的薄层板放入其中，稍稍加热，让碘升华，当样品与碘蒸气反应后，薄 层板上的样品点处即可显示出黄色或棕色斑点。除饱和烃和卤代烃外，均可采用此方法。
有关，其活性随含水量的增加而下降。活化温度：硅胶板于烘箱中逐渐升温至 105～110℃ 烘 30min；氧化铝板于 150～160℃烘 4h。活化后的薄层板放在干燥器内保存备用。
（3）点样 在距薄层板底端 8~10mm 处，划一条线，作为起点线。用毛细管（内径小于 1mm）吸 取样品溶液（一般以氯仿、丙酮、甲醇、乙醇、苯、乙醚或四氯化碳等作溶剂，配成 1%溶 液），垂直轻轻地接触到薄层的起点线上。如溶液太稀，一次点样不够，第一次点样干后， 再点第二次、第三次，多次点样时，每次点样都应点在同一圆心上。点样次数依样品溶液浓 度而定，一般为 2~5 次。若样品量太少时，有的成分不易显出；若量太多时易造成斑点过大， 互相交叉或拖尾，不能得到很好的分离。点样后的斑点直径以扩散成 1~2mm 圆点为度。若 为多处点样时，则样点间距为 1~1.5cm。 （4）展开 薄层的展开需在密闭的容器中进行。先将选择的展开剂放在层析缸中，使层析缸内的空 气饱和 5~10min，再将点好试样的薄层板放入层析缸中进行展开。样点的位置必须在展开剂 液面之上。当展开剂上升到薄层的前沿（离顶端 5~10mm）或各组分已明显分开时，取出薄 层板，立即用铅笔或小针划出溶剂前沿的位置，晾干或烘干后即可显色。根据标样对照或 Rf 值的不同对各组分进行鉴定。 展开剂的选择主要是根据样品的极性、溶解度和吸附剂的活性等因素来综合考虑。溶剂 的极性越大，则对化合物的洗脱力越大，即 Rf 值也越大。如发现样品各组分的 R f 值 较大， 可考虑换用一种极性较小的溶剂，或在原来的溶剂中加入适量极性较小的溶剂展开，如原用 氯仿为展开剂，则可加入适量的苯。相反，如原用展开剂使样品各组分的 R f 值较小，则可 加入适量极性较大的溶剂，如氯仿中加入适量的乙醇试行展开，以达到分离的目的。 （5）显色 展开完毕，取出薄层板, 划出前沿线，如果化合物本身有颜色, 就可直接观察它的斑点。 如果本身无色，可用显色剂法或紫外光照射法显色。用硅胶 GF254 制成的薄板层，由于加入
薄层色谱
和颜色的深浅，并与标准品在相同条件下展开所得 到的一系列已知不同浓度的标准斑点相比较，而近 似地判断样品中所测成分的含量。 2 测面积法
展开后色谱上的斑点面积与化合物含量间，符 合一定的线性关系。 3 仪器测定法
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3 仪器测定法
用光密度计或称薄层扫描仪（TLC Scanner）扫描定量， 该方法已成为薄层定量的主要方法。 1.吸收测定法
相对比移值，即相对于某一物质x的Rf值，用Rx 表示。 其定义为：Rx＝组分的Rf值／物质x的Rf值 组分A相对于物质B的“相对比移值” RB =a/b
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三.薄层色谱的操作
吸附剂的选择 薄层板的制作 展开剂的选择 点样 展开 定位与显色 薄层层析的定量测定
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(一) 薄层层析用的吸附剂
常用的薄层层析吸附剂有硅胶、氧化铝、纤 维素、聚酰胺等。
吸附剂的选择：首先决定于样品成分的性质， 即它们的溶解性、酸碱性、极性以及是否与 吸附剂起化学反应等；
其次要考虑吸附剂、载体是否容易得到及其 价格等。
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(二) 薄层板的制作
层析板是用专门的涂布器把浆状的吸附剂（纸浆、纤维素、硅胶、 中性氧化物、聚酰胺、多孔性玻璃粉，硅烷化键合硅胶等）均匀 地涂在在薄层板（玻璃板、金属板或弹性塑料板）上，干燥 （110℃活化）后即可使用。
2.点样量
点样量的多少与薄层的性能、厚薄及显色剂的 灵敏度有关。一般来说，样品量最小为几ng，常用 量为几至几十µg，制备型的分离可以点样到mg量。 总之点样量随分离目的而定。
3.点样方式 最好是直径3—5mm的圆点。
常用的点样方式
a 一般点样 b 径向点样 c 条状点样 d 线形小孔点样
薄层色谱
实验二十薄层色谱一、实验目的1、学习薄层色谱法的原理和方法；2、掌握比移值的计算方法；3、了解比移值的影响因素。
二、实验原理薄层色谱(thin layer chromatography)常用TLC表示，依其所采用的薄层材料性质和物理、化学原理的不同，可分为吸附薄层色谱、分配薄层色谱、离子交换薄层色谱和排阻薄层色谱等。
吸附薄层色谱采用硅胶、氧化铝等吸附剂铺成薄层，将样品以毛细管点在原点处，用移动的展开剂将溶质解吸，解吸出来的溶质随着展开剂向前移动，遇到新的吸附剂，溶质又会被吸附，新到的展开剂又会将其解吸，经过多次的解吸-吸附-解吸的过程，溶质就会随着展开剂移动。
吸附力强的溶质随展开剂移动慢，吸附力弱的溶质随展开剂移动快，这样不同的组分在薄层板上就得以分离。
一个化合物在吸附剂上移动的距离与展开剂在吸附剂上移动的距离的比值称为该化合物比移值R f展开剂是影响色谱分离度的重要因素。
一般来说，展开剂的极性越大，对特定化合物的洗脱能力也越大，一般常用展开剂按照极性从小到大的顺序排列大概为：石油醚<己烷<甲苯<苯<氯仿<乙醚<THF<乙酸乙酯<丙酮<乙醇<甲醇<水<乙酸。
三、主要试剂和材料邻硝基苯胺对硝基苯胺薄层层析硅胶G 薄玻璃板乙酸乙酯石油醚 0.5%羧甲基纤维钠(CMC-Na)水溶液毛细管(内径小于1mm)四、实验装置五、实验步骤【操作要点及注意事项】1、调浆时要将硅胶加到CMC-Na中，以免生成太多的团块,浆液要有一定的流动性，稠度以能沿玻棒成细线性下滴为宜。
2、铺板时一定要铺匀，特别是边、角部分，晾干时要放在平整的地方。
3、点样时点要细，直径不要大于2mm,间隔0.5cm以上，浓度不可过大，以免出现拖尾、混杂现象。
4、展开用的烧杯要洗净烘干，放入板之前，要先加展开剂，盖上表面皿，让烧杯内形成一定的蒸气压。
点样的一端要浸入展开剂0.5cm以上,但展开剂不可没过样品原点。
薄层色谱的原理
薄层色谱的原理
薄层色谱（thin layer chromatography，TLC）是一种常用的色谱技术，其原理基于化合物在静止相（固定在玻璃或塑料基底上）和流动相（液体或气体）之间的分配行为。
利用该分配行为，可以将不同的化合物分离并检测。
在薄层色谱中，首先需要准备一层薄的静止相涂覆在玻璃或塑料基底上，这层涂层通常是硅胶或氧化铝。
准备好的薄板即为薄层色谱板。
然后将待分离的混合物溶解在流动相中，流动相通常是有机溶剂或混合溶液。
接下来，将薄层色谱板浸入流动相中，使浸湿并等待流动相上升。
当流动相从底部向上渗透时，化合物会根据其亲水性或亲油性在静止相和流动相之间发生分配。
亲水性较强的化合物会更多地留在静止相中，而亲油性较强的化合物则会随流动相上升。
这样，不同化合物在薄层色谱板上会形成不同的斑点。
为了可视化这些斑点，通常会使用染料或化学试剂对化合物进行标记。
染料或化学试剂与化合物发生反应后，能产生明显的色斑或荧光。
通过比较样品中斑点的相对位置、颜色或荧光强度，可以对待分离的化合物进行鉴定。
薄层色谱因其简便、快速且经济的特点，在实验室常用于药物分析、有机合成、食品检测、环境监测等领域。
它不仅可以用于分离化合物，还可以确定某一物质的纯度、判断反应的进行以及监测反应的过程。
它是一种常用的分离和分析工具，广泛应用于化学、生物化学和药学等领域。
薄层色谱名词解释
薄层色谱名词解释薄层色谱（Thin-Layer Chromatography，简称TLC）是一种分离、鉴定和质量检测分子间差别的实验技术，是按照分子大小、结合强弱及极性差异来分离和鉴定有机物质的一种实验技术，是现代分析实验中经常所用的一种为主的技术。
一、基本原理薄层色谱是一种浸透分析方法，它利用分子结合性大小和极性的差异，使混合物在固体涂布的表面中分离。
它是将样品淋到固定相（薄层沉积物）上，集中并在表面形成握样带，然后溶剂沿固定相传播和扩散，物质磁通的距离随着溶剂的运动而不断增加而发生分离，形成多条相峰，且每种物质出现的位置不同，因此可以用来鉴定其组成及监测已知物质在混杂物中的含量。
二、相关仪器薄层色谱所使用的关键仪器包括色谱柜、柜内溶剂槽、棉球、料筒、制备紫外线的拉曼管、微波辐照仪等。
其中，色谱柜用于分离混合物；柜内溶剂槽用于储存溶剂，一般选用四甲基橡皮筋或过滤纸固定；棉球可以帮助溶剂从料筒释放；料筒用来储存混合物；拉曼管可以用来制备紫外线用来无刺激地检测样品；微波辐照仪可以使混合物在固体表面样品重新分离。
三、步骤（1）准备固体涂布溶剂：取一定体积的固定相（例如硅胶、石英粉、均质膏），用溶剂在玻璃容器中调节，使其形成涂布液。
（2）涂布：在检测板上加入涂布液，使其稳定形成涂布，以便将混合物分离和拖提形成斑点。
（3）测试：将样品加在涂布板上，经过加热处理，取出产物后进行光学或电子观察。
（4）分析：分析各物质形成的斑点和拖提线之间的距离，用以检测混合物中物质的含量。
四、应用薄层色谱可以应用于天然产物、制药、食品、生物学等领域，可以用来检测毒素、除草剂、营养素、激素、抗生素，用于鉴定医药制剂中有效成份、白蛋白活性型/氧化型分析、杂质检测，另外，还可以用来检测食品中的色素、添加剂等。
薄层色谱操作规程
薄层色谱操作规程
《薄层色谱操作规程》
一、实验目的
通过薄层色谱进行化合物分离和鉴定，掌握薄层色谱操作技术，提高实验操作能力。
二、实验仪器和试剂
1. 薄层色谱仪
2. 薄层色谱板
3. 色谱柱
4. 样品溶液
5. 各种溶剂
三、实验操作步骤
1. 准备薄层色谱板，标出样品点和色谱进样位置。
2. 准备好样品溶液，进行前处理工作，如筛选、过滤等。
3. 用吸头将样品溶液均匀地吸附在薄层色谱板上的样品点上，待干燥后再进行操作。
4. 将干燥后的薄层色谱板放置在色谱槽中，加入适量的色谱溶剂，使之在薄层色谱板上上升，直至触及顶部。
5. 将色谱板拿出，标记出色带位置，用紫外灯照射和标记，记录色带的长度和颜色。
6. 根据色带的长度和颜色，与标准色谱图对照，确定其成分。
7. 根据色带的长度和颜色，计算Rf值，并与标准值对照鉴定
成分。
四、注意事项
1. 操作过程中需轻拿轻放，避免薄层色谱板受损。
2. 使用各种溶剂时，要注意其挥发性和易燃性。
3. 色带观测和鉴定时，要在相应的波长下观察，如紫外灯波长254nm。
4. 操作结束后，要对薄层色谱仪进行清洁和维护。
通过《薄层色谱操作规程》的实验操作，可以掌握薄层色谱技术的基本操作流程，提高化合物分离和鉴定的能力。
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薄层色谱（TLC）——APC薄片的剖析
应091-3 十一组
200921501340 张桂起
200921501338 徐成成
200921501315 李倩
指导老师：赵老师
2012.04.13
一、实验原理
1、学习薄层色谱的原理与应用；
2、掌握制作及应用薄层色谱板；
3、鉴定阿司匹林药品的成分。
二、实验原理
1、色谱法的基本原理
色谱法是利用混合物中各组分在某一物质中的吸附或溶解性能（即分配）的不同，让混合物的溶液流经该物质，经过反复的吸附或分配等作用，从而将各组分分开。
固定不动的物质称为固定相，固定相可以是固体吸附剂，也可以是液体（吸附在支持剂上）。
根据组分在固定相中的作用原理不同，可分为吸附色谱、分配色谱、离子交换色谱、排阻色谱等；按操作条件可分为薄层色谱、柱色谱、气相色谱和高压液相色谱等。
流动相的极性小于固定相极性时为正相色谱，而流动相的极性大于固定相时为反相色谱。
三、薄层色谱的原理与应用
薄层色谱简称TLC，它是一种固液吸附色谱的形式。
用薄层色谱分离混合物的时，将已溶解的样品滴到薄层板上，吸附在固定相(吸附剂)上，然后用展开剂（流动相）进行展开，流动相带着混合物的组分上移。
样品中各组分再吸附剂上的吸附能力不同，一般来说，极性大的吸附能力强，极性小的吸附能力相对弱一些。
各组分在展开剂中的溶解度不一样，被解析的能力也就不同。
非极性组分由于在固定相中的吸附能力弱，首先被解析出来随流动相向上移动。
而极性组分由于吸附能力强，因此不易被解析出来。
TLC的最大优点是：简易，快速，灵敏，高效，范围广（定性—定量，0.01ug~500mg）。
TLC常应用于有机物的鉴定和分离，如通过与已知结构的化合物相比较，可鉴定有机混合物的组成；在有机化学反应中可以用于对反应进行跟踪；在柱色谱分离中，经常用其来确定分离条件和监控分离的过程。
TCL不仅可以分离少量样品（几微克），而且也可以分离较大量的样品（可达500毫克），特别适用于挥发性较低，或在高温下易发生变化而不能用气相色谱进行分离的化合物。
在TLC中所用的吸附剂颗粒比柱色谱中用的要小得多，一般为260目以上。
当颗粒太大时，表面积小，吸附量少，样品随展开剂移动速度快，斑点扩散较大，分离效果不好；当颗粒太小时，样品随展开剂移动速度慢，斑点不集中，效果也不好。
薄层色谱所用的硅胶有多种：硅胶H不含粘合剂；硅胶G含粘合剂（煅石膏）；硅胶GF254含有粘合剂和荧光剂，可在波长254nm紫外光下发出荧光；硅胶HF254只含荧光剂。
同样氧化铝也可分为氧化铝G、氧化铝GF254及氧化铝HF254。
氧化铝的极性比硅胶大，易用于分离极性小的化合物。
硬板∕软板：加粘合剂的薄板为硬板，不加粘合剂的薄板为软板。
样品溶剂要求：溶解性好，沸点尽量低。
展开剂的洗脱能力与其极性成正相关：石油醚﹤环己烷…苯﹤乙酸乙酯…﹤甲醇﹤水﹤乙醇。
板活性要与其含水量有关，可用标准样品进行实验测得。
常用显色方法有：碘熏法、特性反应、UV灯等。
比移值R f=（样品组分最高浓度中心距原点距离）∕（展开剂前沿距原点距离）。
影响R f的因素有粒度、厚度、均匀度、活性、展开剂极性及杂质含量、环境温度等。
在TLC中要特别注意吸附剂的确定、展开剂的选择及薄板的制板技术
四、实验仪器和试剂
仪器：载玻片（5块）、烧杯（100ml）、玻璃棒、分液漏斗、WFH-三用紫外分析仪、烘箱、毛细管（一根）、广口瓶、镊子、量筒（10ml）、锥形瓶（250ml）
试剂：羧甲基纤维纳水溶液、硅胶GF254、无水硫酸镁、APC药片（一片）、二氯甲烷、乙酰水杨酸标准液、咖啡因标准液、乙酰苯胺标准液、展开剂（苯：乙醚：冰乙酸：甲醇=120：60：18：1）
五、实验步骤
1、薄层板的制备
取3g硅胶GF254与9.5ml羧甲基纤维素钠水溶液混合，调成和糊状。
将糊状硅胶均匀快速地（5min之内完成）倒在五块载玻片上，用手轻轻震动至平。
2、薄板层的活化
薄层经过自然干燥后，放入烘箱中活化，进一步除去水分，加热30min。
3、样品液的准备
1片APC药片用纸包住碾碎，在烧杯中加10ml水溶解，搅拌、静置。
将上层液倾至分液漏斗中，加5mlCH2Cl2，振摇分层，取有机层于锥形瓶中，加入少量无水硫酸镁干燥，盖上表面皿溶液备用。
4、点样
在距薄层板一端1cm处，用铅笔在薄板的两边做轻微的标记（不能将薄板层破坏）。
用内径小于1mm干净并且干燥的毛细管吸取少量样品液，轻轻触及薄层板的起点线左侧，然后立即抬起。
同样方法在起点线右侧距离样品约1cm处点乙酰水杨酸标准样。
同样方法制备样品液和咖啡因，样品液和乙酰苯胺的薄层板。
5、展开
取约5ml展开剂于广口瓶中，将薄层板放入广口瓶中，盖上瓶盖。
待展开剂距薄层板上沿约1cm处时，取出薄层板标记前沿，用吹风机吹干。
干燥后在254nm 波长的紫外灯下观察，将薄层板上的样品点和标准样品点用铅笔画好，画出原板图。
6、将薄层板上的硅胶刮到垃圾袋内，冲洗干净放回原处，收拾整理仪器和桌面
六、注意事项
1、铺板时，尽可能将吸附剂铺均匀，不能有气泡或颗粒等；
2、铺板时，吸附剂的厚度不能太后也不能太薄，太厚展开时会出现拖尾，太少样品分不开，一般厚度为0.5- 1mm；
3、湿板铺好后，应放在比较平的地方晾干，不可快度干燥，否则薄层板会出现裂痕；
4、控制点样的量，太多展不开，太少斑点不明显或看不到；
5、取羧甲基纤维素钠的量筒和盛放萃取的有机层的锥形瓶一定要充分干燥，除去水分；
6、样品液要用表面皿盖好，防止空气中的水分进入；
7、展开时要盖好广口瓶的玻璃盖。
六、数据处理
乙酰水杨乙酸
2、数据处理
（1）薄层板一
样品中各组分移动离开原点的距离：D乙酰水杨酸3=4.6cm，D乙酰苯胺3=3.2cm，D咖啡因3=1.7cm 乙酰水杨酸标准液移动离开原点的距离：D咖啡因0=1.6cm
展开剂前沿距原点中心的距离：D3=5.1cm
比移值:
样品 R乙酰水杨酸3= D乙酰水杨酸3/D3=4.6/5.1=0.90
R f乙酰苯胺3= D乙酰苯胺3/ D3=3.2/5.1=0.62
Rf咖啡因3= D咖啡因3/ D3=1.7/5.1=0.33
标准液R f咖啡因= D咖啡因0/ D3=1.6/5.1=0.31
样品于标准液的相对误差为（0.33-0.31）/0.31×100%=6.45%
结论：APC药片组成中含有咖啡因。
（2）薄层板二
样品中各组分移动离开原点的距离：D乙酰水杨酸1=4.1cm，D乙酰苯胺1=3.0cm，D咖啡因1=1.7cm 乙酰水杨酸标准液移动离开原点的距离：D乙酰水杨酸0=4.1cm
展开剂前沿距原点中心的距离：D1=5.3cm
比移值:
样品 R乙酰水杨酸1= D乙酰水杨酸1/D1=4.1/5.3=0.77
R f乙酰苯胺1= D乙酰苯胺1/ D1=3.0/5.3=0.56
Rf咖啡因1= D咖啡因1/ D1=1.7/5.3=0.32
标准液R f乙酰水杨酸= D乙酰水杨酸0/ D1=4.1/5.3=0.77
样品于标准液的相对误差为（0.77-0.77）/0.77×100%=0.00%
结论：APC药片组成中含有乙酰水杨酸。
（3）薄层板三
样品中各组分移动离开原点的距离：D乙酰水杨酸2=3.7cm，D乙酰苯胺2=2.7cm，D咖啡因2=1.3cm 乙酰水杨酸标准液移动离开原点的距离：D乙酰苯胺0=3.0cm
展开剂前沿距原点中心的距离：D2=5.3cm
比移值:
样品 R乙酰水杨酸2= D乙酰水杨酸2/D2=3.7/5.3=0.70
R f乙酰苯胺2= D乙酰苯胺2/ D2=2.7/5.3=0.51
Rf咖啡因2= D咖啡因2/ D2=1.3/5.3=0.24
标准液R f乙酰苯胺= D乙酰苯胺0/ D2=3.0/5.3=0.57
样品于标准液的相对误差为（0.51-0.57）/0.57×100%=10.52%
结论：APC药片组成中可能含有乙酰苯胺。
七、实验注意事项
1、铺板时一定要铺匀，特别是边、角部分，晾干时要放在平整的地方。
2、点样时点要细，直径不要大于2mm,间隔0.5cm以上，浓度不可过大，以免出现拖尾、混杂现象。
3、展开用的烧杯要洗净烘干，放入板之前，要先加展开剂，盖上表面皿，让烧杯内形成一定的蒸气压。
点样的一端要浸入展开剂0.5cm以上,但展开剂不可没
过样品原点。
当展开剂上升到距上端0.5－1cm时要及时将板取出，用铅笔标示出展开剂前沿的位置
八、误差分析和结果讨论
影响R f值的因素较多，如点样量、展开剂、吸附剂、薄层板的厚度温度等均能影响R f值，实验中由于制得的板的厚度不一样，及点样量的不同对实验影响大一些。
在所画的图中最上面的斑点是半月牙形状，是因为上层的展开剂由于蒸汽压的影响没有达到饱和，中心偏下一点。