食品的测定实验四油脂中脂肪酸含量测定
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固定相 液体固定相：由担体和固定液组成
医学ppt
12
分离系统的温度控制
恒温 程序升温
医学ppt
13
恒温和程序升温分析烃类化合物
医学ppt
14
检测器
• 作用： 将色谱分离后的各组分的量 转变成可测量的电信号，然后纪录下来。
• 要求： 灵敏度高
线性范围宽
响应速度快
结构简单
通用性强
• 常用检测器： 热导检测器
• 萃取—加入正己烷将甲酯萃取出
• 加入饱和食盐水—将甲酯与其他水溶性物质分开
• 移取甲酯样品，进样分析
医学ppt
22
实验报告
• 根据标准图谱确定大豆油不同的脂肪酸组分的百分含量
峰1
标准图谱 样品图谱
保留时 脂肪酸 保留时 脂肪酸 百分含 备注
间/min
间/min
量/%
5
C16:0 5
C16:0 20
医学ppt
2
实验目的
• 了解气相色谱法测食用油脂肪酸组成的原理 • 掌握样品的前处理方法 • 学习食用油脂中脂肪酸组分的色谱分析技术
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3
色谱分析法
• 气相色谱系统和理论 • 样品前处理
医学ppt
ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ
4
色谱理论
色谱法是一种重要的分离分析方法，它是根据 不同的待分离组分在两相中作用能力不同而达到 分离目的的。 塔板理论、 速率理论、 层析理论
无机气体、 有机化合物
有机化合物
有机卤素 等化合物 氮、磷 化合物 硫、磷 化合物
医学ppt
16
FID的检测原理
• 在氢火焰中，有机化合物燃烧产生CHO+离 子，该离子强度与含量成正比。
• 该检测器检出的是有机化合物。 • 无机气体及氧化物在该检测器无响应。
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17
FID检测器
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18
油脂中脂肪酸含量测定
－－－气相色谱法检测大豆油脂肪酸组成
医学ppt
1
• 油脂是食品加工中重要的原料和辅料，也是食品的重要组 分和营养成分。
• 气相色谱法测定油脂脂肪酸组分是目前最常用的方法，也 是一些相关标准（如：GB/T17377）规定应用的检测方法。
• 甲酯化是分析动植物油脂脂肪酸成分的常用的前处理方法， 也是常用的标准方法（GB/T 17376-1998）
峰2 15 峰3 峰4 峰5
C18:0 15
C18:0 40
• 完成思考题
医学ppt
23
此课件下载可自行编辑修改，供参考！ 感谢您的支持，我们努力做得更好！
9
毛细管柱进样口
载气
隔垫吹扫出口
分流出口
F1
玻璃衬管
F2
医学ppt
10
气相色谱仪的基本流路图
载气
隔垫吹扫出口
分流出口
F1
玻璃衬管
F2
医学ppt
空气400-600ml/min 氢气40-60ml/min
尾吹气约35ml/min
11
• 3、分离系统
色谱柱 填充柱（2-6mm直径，1-6m长 毛细管柱（0.1-0.5mm直径, 几十米长 固体固定相：固体吸附剂
氢火焰离子化检测器
电子捕获检测器
医学ppt
15
气相色谱的检测器
检测器 载气种类 测定浓度 应用
热导（TCD）
氦、氢、氩、 氮
50ppm
以上
氢火焰离子化 （FID）
氦、氮
数 ppm 以上
电子捕 （ECD）
获氮
数 ppb 以上
火焰热离子 （FTD）
氦、(氮)
数 ppb 以上
火焰光度 （FPD）
氦、氮
约 0.1ppm
TCD的检测原理
• 利用被测组分和载气的热导系数不同而响 应的浓度型检测器。
• 灵敏度低，通常用来测气体样品。
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19
样品的预处理
• 有机溶剂萃取 • 固相萃取（吸附柱法） • 吹扫捕集 • 静态顶空 • 微固相萃取 • 衍生化
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20
样品前处理—样品衍生化
• 前处理的作用
降低气化温度将不挥发成分变为挥发性， 增加组分稳定性，防止热分解， 防止吸附， 改善分离， 加入官能团,使用选择性检测器,提高灵敏度。
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5
气相色谱仪
进 样
汽化室 净化器
放 空
检测器
载
气
记录器
流量计
色谱柱
柱箱
气相色谱仪流程图
医学ppt
6
• 气相色谱仪主要包括四部分： 载气系统
进样系统
分离系统
检测系统
1、载气系统 载气由压缩气体钢瓶供给，经减压阀、稳压
阀控制压强和流速，由压强计指示气体压强，然 后进入检测器热导池的参考臂，继而进入色谱柱。 最后通过热导池、流量计而放入大气。
• 油脂分析常用的前处理方法 甲酯化、乙酯化
• 甲酯化 碱催化、 酸催化、BF3催化
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21
甲酯化步骤
• 取样
• 皂化—样品加KOH甲醇溶液皂化，除去不皂化物， 将脂肪酸从三甘酯上释放出来，
• BF3催化甲酯化—加入BF3甲醇溶液，样品在BF3 的催化作用下与甲醇发生酯化反应生成脂肪酸甲 酯，
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7
常用的载气：
氮气
氢气 氦气
2、进样系统
包括进样装置和汽化室。
进样通常用微量注射器和进样阀将样品引
入。液体样品引入后需要瞬间汽化。汽化 在汽化室进行。
对汽化室的要求是：（1）体积小；（2） 热容量大；（3）对样品无催化作用
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8
散热片
分流出口 接色谱柱
加热块
载气入口
汽化室示意图
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分离系统的温度控制
恒温 程序升温
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13
恒温和程序升温分析烃类化合物
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检测器
• 作用： 将色谱分离后的各组分的量 转变成可测量的电信号，然后纪录下来。
• 要求： 灵敏度高
线性范围宽
响应速度快
结构简单
通用性强
• 常用检测器： 热导检测器
• 萃取—加入正己烷将甲酯萃取出
• 加入饱和食盐水—将甲酯与其他水溶性物质分开
• 移取甲酯样品，进样分析
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实验报告
• 根据标准图谱确定大豆油不同的脂肪酸组分的百分含量
峰1
标准图谱 样品图谱
保留时 脂肪酸 保留时 脂肪酸 百分含 备注
间/min
间/min
量/%
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C16:0 5
C16:0 20
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实验目的
• 了解气相色谱法测食用油脂肪酸组成的原理 • 掌握样品的前处理方法 • 学习食用油脂中脂肪酸组分的色谱分析技术
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色谱分析法
• 气相色谱系统和理论 • 样品前处理
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色谱理论
色谱法是一种重要的分离分析方法，它是根据 不同的待分离组分在两相中作用能力不同而达到 分离目的的。 塔板理论、 速率理论、 层析理论
无机气体、 有机化合物
有机化合物
有机卤素 等化合物 氮、磷 化合物 硫、磷 化合物
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FID的检测原理
• 在氢火焰中，有机化合物燃烧产生CHO+离 子，该离子强度与含量成正比。
• 该检测器检出的是有机化合物。 • 无机气体及氧化物在该检测器无响应。
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FID检测器
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油脂中脂肪酸含量测定
－－－气相色谱法检测大豆油脂肪酸组成
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• 油脂是食品加工中重要的原料和辅料，也是食品的重要组 分和营养成分。
• 气相色谱法测定油脂脂肪酸组分是目前最常用的方法，也 是一些相关标准（如：GB/T17377）规定应用的检测方法。
• 甲酯化是分析动植物油脂脂肪酸成分的常用的前处理方法， 也是常用的标准方法（GB/T 17376-1998）
峰2 15 峰3 峰4 峰5
C18:0 15
C18:0 40
• 完成思考题
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毛细管柱进样口
载气
隔垫吹扫出口
分流出口
F1
玻璃衬管
F2
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气相色谱仪的基本流路图
载气
隔垫吹扫出口
分流出口
F1
玻璃衬管
F2
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空气400-600ml/min 氢气40-60ml/min
尾吹气约35ml/min
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• 3、分离系统
色谱柱 填充柱（2-6mm直径，1-6m长 毛细管柱（0.1-0.5mm直径, 几十米长 固体固定相：固体吸附剂
氢火焰离子化检测器
电子捕获检测器
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气相色谱的检测器
检测器 载气种类 测定浓度 应用
热导（TCD）
氦、氢、氩、 氮
50ppm
以上
氢火焰离子化 （FID）
氦、氮
数 ppm 以上
电子捕 （ECD）
获氮
数 ppb 以上
火焰热离子 （FTD）
氦、(氮)
数 ppb 以上
火焰光度 （FPD）
氦、氮
约 0.1ppm
TCD的检测原理
• 利用被测组分和载气的热导系数不同而响 应的浓度型检测器。
• 灵敏度低，通常用来测气体样品。
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样品的预处理
• 有机溶剂萃取 • 固相萃取（吸附柱法） • 吹扫捕集 • 静态顶空 • 微固相萃取 • 衍生化
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样品前处理—样品衍生化
• 前处理的作用
降低气化温度将不挥发成分变为挥发性， 增加组分稳定性，防止热分解， 防止吸附， 改善分离， 加入官能团,使用选择性检测器,提高灵敏度。
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5
气相色谱仪
进 样
汽化室 净化器
放 空
检测器
载
气
记录器
流量计
色谱柱
柱箱
气相色谱仪流程图
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• 气相色谱仪主要包括四部分： 载气系统
进样系统
分离系统
检测系统
1、载气系统 载气由压缩气体钢瓶供给，经减压阀、稳压
阀控制压强和流速，由压强计指示气体压强，然 后进入检测器热导池的参考臂，继而进入色谱柱。 最后通过热导池、流量计而放入大气。
• 油脂分析常用的前处理方法 甲酯化、乙酯化
• 甲酯化 碱催化、 酸催化、BF3催化
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甲酯化步骤
• 取样
• 皂化—样品加KOH甲醇溶液皂化，除去不皂化物， 将脂肪酸从三甘酯上释放出来，
• BF3催化甲酯化—加入BF3甲醇溶液，样品在BF3 的催化作用下与甲醇发生酯化反应生成脂肪酸甲 酯，
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常用的载气：
氮气
氢气 氦气
2、进样系统
包括进样装置和汽化室。
进样通常用微量注射器和进样阀将样品引
入。液体样品引入后需要瞬间汽化。汽化 在汽化室进行。
对汽化室的要求是：（1）体积小；（2） 热容量大；（3）对样品无催化作用
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散热片
分流出口 接色谱柱
加热块
载气入口
汽化室示意图
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