微生物制药实验方案

微生物制药实验方案
微生物制药实验方案

植酸酶高产菌株的筛选与酶的分离纯化

刘晓娇柳青邓平吉鹏朱奇峰

一、研究意义

植酸酶是催化植酸及植酸盐水解为肌醇与磷酸(磷酸盐)的一类酶的总称。植酸及其盐类普遍存在于植物体中,是植物种子及营养器官中磷的主要贮存方式,一般植酸磷占禾谷种子及油料作物总磷60%~80%。在人和单胃动物食物中,植酸具有强烈的抗营养作用。这是由于一方面人和单胃动物缺乏分解植酸的酶类,无法利用植酸中的磷,另一方面植酸能与矿质元素如铁锌、钙和镁等蛋白质形成不溶性的稳定的复合物,降低了矿质元素和蛋白质的利用率。植酸酶作为一种新型的饲料添加剂,能分解饲料中的植酸,形成禽畜可利用的磷酸,提高饲料中有机磷的利用率,减少添加无机磷,降低饲料成本,减轻磷污染,同时解除植酸的抗营养作用,提高饲料的营养价值,具有非常可观的经济效益和生态效益。

二、实验目的

从土壤中筛选到一株植酸酶高产菌株,利用紫外线对该菌株进行诱变提高植酸酶产量,并采用硫酸铵分级沉淀、DEAE-纤维素阴离子交换层析和Sephadex G-100 凝胶过滤层析对植酸酶进行分离纯化。

三、实验材料

3.1 材料

3.1.1(1)筛选培养基:1%植酸钙,3%葡萄糖,200U/ml 青霉素钠,0.5%NH4NO3,0.05%KCl,0.003%,MnSO

4.4H2O,0.05%MgSO4.7H2O,0.003% FeSO4·7H2O,1.5%琼脂,pH

5.5。

(2)液体发酵培养基:1.5%葡萄糖,0.3%蛋白胨,0.2%(NH4)2SO4,0.05%MgSO4·7H2O,0.05%KCl,0.003%MnSO4·4H2O,0.003% FeSO4.7H2O,pH5.5。

(3)查氏合成培养基:硝酸钠 2g,磷酸氢二钾 1g,氯化钾 0.5g,硫酸镁 0.5g,硫酸亚铁 0.01g,蔗糖 30g,琼脂 15~20g,水 1000mL,pH 自然,121℃灭菌20min。

(4)斜面培养基:0.05%MgS04·7H2O,0.003%MnSO4·7H2O,0.003%FeSO4·7H20,麸皮汁100ml,1.5~2%琼脂,pH5.5。

3.1.2 土样来源

土样采自校园共青团花园或农田。去除土层表面枯枝、杂草和砂石,收集距表层

5cm~10cm的土壤。

3.2 仪器

水浴锅、培养箱、烧杯、培养皿、灭菌锅、漏斗、试管、摇床、分光光度计、pH试纸、电炉、干燥箱、超净工作台、移液管等

四、实验方法

4.1 流程

4.2 方法

4.2.1 菌株的筛选:土壤样品稀释1×105倍,涂布于筛选培养基上,30 ℃培养72 h,挑取产生透明圈的菌株。对初筛得到的菌株进行摇瓶复筛,在220 r/min 的转速下发酵培养,测其酶活。

4.2.2 酶活的测定:参照张若寒的钒钼酸铵法略加改进后进行测定。取1 ml 粗酶液加入2 ml 植酸钠溶液并摇匀(对照加入2 ml 钒钼终止液),37 ℃保温反应30 min,立即加入2 ml 钒钼终止液(对照加入2 ml 植酸钠溶液),415 nm 测OD 值,参照磷标准曲线计算酶活。酶活定义:按上述方法,在pH

5.5 的条件下,每分钟从0.0051 mol 的植酸钠溶液中释放1 umol 无机磷所需的酶量为一个活力单位(U)。

4.2.2.1 磷标准曲线制备

原理:利用植酸酶水解植酸盐释放无机磷,通过加入酸性钼一钒试剂,使水解反应停止,同时与水解释放出来的无机磷产生颜色反应,形成黄色的钒钼磷络合物,在415nm波长下测定磷的含量。

按表1加入试剂后,在415nm波长下测OD值,并绘制标准曲线。

4.2.3 菌种鉴定:将复筛酶活力最高的菌接种于查氏合成培养基上,28 ℃恒温培养箱培养

3 d 后,观察菌落形态变化。

4.2.4 诱变处理:取复筛酶活力最高的菌接的孢子悬液10 ml 加入直径为9 cm 的无菌培养皿中,在15W紫外灯下,距离28 cm,进行诱变处理,时间依次为0、3、6、9、12、15min。经紫外线诱变后得到的突变株,将其中透明圈与菌落直径比值较大的进行复筛,测定突变株的酶活。

4.2.5 植酸酶的分离纯化:①取发酵后的培养液在4 ℃,4000 r/min 离心20 min,取上清液,分别加入固体硫酸铵,使硫酸铵饱和度分别为20%~90%,对植酸酶进行沉淀。沉淀重新溶解在乙酸缓冲液中,对蒸馏水透析脱盐。②透析后的植酸酶溶液用DEAE-纤维素阴离子交换层析柱进行分离纯化,用NaCl 溶液进行线性梯度洗脱,于280 nm 检测蛋白质,分部收集,测定每管酶活力。③将上述洗脱液用Sephadex G-100 凝胶柱进一步分离,用乙酸缓冲液进行洗脱,于280 nm 波长检测洗脱液中蛋白质的含量,记录洗脱曲线,分部收集酶活力较大的部分。

4.2.6 酶学性质研究:①用纯化的植酸酶分别在pH 2、2.5、3、3.5、4、4.5、5、

5.5、6、

6.6、7、

7.5、8的乙酸缓冲液中进行酶促反应,测定酶的最适pH。将不同pH的植酸酶溶液,在37 ℃处理30 min,测定酶活力,研究酶的pH 稳定性。②纯化后的植酸酶溶解在乙酸缓冲液中,分别在不同温度(20、25、30、35、40、45、50、55、60、65、70℃)下进行酶促反应,测定植酸酶的最适温度。将植酸酶溶液分别在不同温度下保温30min,再在37 ℃测定酶活力。

4.3 正交试验

4.3.1 明确实验目的,确定实验因素,影响发酵的因素很多,考虑到实验室条件及人力和时间,我们不能在一次试验中包括所有因素,本实验主要从葡萄糖、蛋白胨、硫酸铵、植酸钠4个重要因素,每个因素选择三个水平,采用正交表L9(34)进行探索。

4.3.2 列出水平表(见表1)。根据生产上发酵的现有了解,把葡萄糖、蛋白胨、硫酸铵、植酸钠四个因素各分成三个水平。

4.3.3 选择正交表:根据人力、物力、试验任务,确定因素水平后,选出正交表。表头中L表示正交表,L右下脚9表示有9行,可用来安排9个试验。括号内底数3是因素水平数,指数4是4个因素(见表2)

4.3.4 根据因素水平(表头设计),把正交表的数字代号依次换成该因素和水平的实际数字。

表1 正交表试验设计(%)

因素葡萄糖蛋白胨硫酸铵植酸钠

1 2 0.2 0.4 0.05

2 3 0.4 0.3 0.10

3 4 0.6 0.2 0.15

表2 正交表实验方案

编号葡萄糖蛋白胨硫酸铵植酸钠评价指标

酶活(U/ml)

1 1 1 1 1

2 1 2 2 2

3 1 3 3 3

4 2 1 2 3

5 2 2 3 1

6 2 3 1 2

7 3 1 3 2

8 3 2 1 3

9 3 3 2 1

4.3.5 根据正交表实验方案,配制培养基,每250ml三角瓶装液50ml,灭菌:121℃ 25min,接种量:10%,(将初筛各菌株活化至孢子成熟后)发酵温度30 ℃,摇床转速220 r/min ,培养4天。发酵结束,4层纱布过滤,去除菌体,然后3000r/min离心10min,上清液为粗酶液,测其酶活.

4.3.

5.1 单孢子菌悬液制备:将复筛酶活力最高的黑曲霉菌斜面用10ml无菌水洗下,倒入盛有玻璃珠的无菌三角瓶中,手持振荡20min,用带有无菌脱脂棉的漏斗过滤,然后用无菌生理盐水将所得孢子洗涤2-3次,制成单孢子悬液。

植酸酶高产菌株的筛选与酶的分离纯化实验安排

刘晓娇柳青邓平吉鹏朱奇峰

第一天:

1、采样:采自共青团花园、后山农田及实验室附近。去除土层表面枯枝、杂草和砂石,收集距表层5~10cm的土壤。

2、筛选培养基配制(×9,10~20ml/个):1%植酸钙,3%葡萄糖,200U/ml 青霉素钠,0.5%NH4NO3,0.05%KCl,0.003%,MnSO4.4H2O,0.05%MgSO4.7H2O,0.003% FeSO4·7H2O,1.5%琼脂,pH5.5。

3、制备土壤稀释液:取土壤表层5~10 cm 处的土样。准确称取1 g 土样,放入盛有99 mL 无菌水的锥形瓶(250 mL,放有小玻璃珠)中,用手或摇床振荡20 min,即制成102倍的稀释液。用1 mL无菌移液管,吸取10 2倍稀释液0.5 mL,移入装有4.5 mL无菌水的试管中,配制成103倍稀释液。用同样的方法可制成稀释倍数为10

4、105的系列稀释菌液。

移液时,要将移液管插入液面,吹吸3 次,每次吸上的液面要高于前一次,让菌液混合均匀并减少稀释中的误差。每配一个稀释度要换用一支移液管。

4、样品涂布:吸取稀释倍数为1×105倍的土壤样品稀释稀释液0.1ml,涂布于筛选培养基上,30℃培养72h。

第二天:

1、溶液配制:

(1)稀硝酸溶液量取100ml浓度为65%的浓硝酸,200ml蒸馏水混合。

(2)钼酸铵试剂称取100g铂酸铁,溶解在800ml蒸馏水中,再加入10ml 25%的氨水,定容至 1000ml,储介在暗处,保存期8周。

(3)钒酸铵试剂称取2.35g钒酸铵NH4VO3。,溶解在 400ml水中,预热至55℃,加人20ml 稀硝酸,定容至1000ml储存在暗处,保存期8周。

(4)钒钼终止液取钼酸铵溶液和钒酸铵溶液各50ml,混合,在加入100ml稀硝酸,混合,储存在暗处,该溶液需现配现用。

(5)醋酸缓冲液(pH值为5.5) 称取三水醋酸钠30g和二水氯化钙0.167g,溶解在约500ml 蒸馏水中用冰醋酸调解pH值至5.5,定容至1000ml,保存期1周。

(6) 植酸溶液(底物)称取1.4g植酸钠,溶解在200ml醋酸缓冲液中,在常温下用稀释的冰醋酸溶液调节pH值至5.5,定容至250ml(植酸钠是无水的,Sigma公司生产,分子量为1104,最终植酸钠的摩尔浓度为5.1mM),该溶液需现配现用。

(7) 磷酸储备液称取682mgKH2PO4(经105℃烘干至恒重)溶解在100ml醋酸缓冲液中。0℃- 5℃保存。

(8) 10mM标准磷酸溶液精确吸取10ml磷酸储备液,用醋酸缓冲液稀释至50ml,制成10mM 磷酸溶液。该试剂需现配现用。(制备标准磷酸溶液,浓度分别为2、4、6、8、10、12mM)

第三天:

1、磷标准曲线制备:

表1标准曲线的各反应体系

按表1加入试剂后,在415nm波长下测OD值,并绘制标准曲线。

第四天:

1、斜面种子培养基的制备:0.05%MgS04·7H2O,0.003%MnSO4·7H2O,0.003%FeSO4·7H20,麸皮汁100ml,1.5~2%琼脂,pH5.5。

2、液体发酵培养基(×9,50ml/个):1.5%葡萄糖,0.3%蛋白胨,0.2%(NH4)2SO4,0.05%MgSO4·7H2O,0.05%KCl,0.003%MnSO4·4H2O,0.003% FeSO4.7H2O,pH5.5。

3、查氏合成培养基(×9,10~20ml/个):硝酸钠 2g,磷酸氢二钾 1g,氯化钾 0.5g,硫酸镁 0.5g,硫酸亚铁 0.01g,蔗糖 30g,琼脂 15~20g,水 1000mL,pH 自然,121℃灭菌20min。

第五天:

1、挑选产生的透明圈的菌株,并测量各透明圈与菌落直径的大小。

2、保种。

3、对初筛得到的菌株进行摇瓶复筛,在220 r/min的转速下发酵培养6d。分别在摇瓶发酵的第1、2、3、

4、

5、6天取粗酶液测定酶活,得出其产酶曲线。

4、酶活的测定:取1 ml 粗酶液加入2 ml 植酸钠溶液并摇匀(对照加入2 ml 钒钼终止液),37 ℃保温反应30 min,立即加入2 ml 钒钼终止液(对照加入2 ml 植酸钠溶液),415 nm 测OD 值。

第十一天:

1、菌种鉴定:将复筛酶活力最高的菌接种于查氏合成培养基上,28℃恒温培养箱培养3d 后,观察菌落形态变化(直径;菌丝;产孢部分菌落;菌落表面、边缘、中间;镜检等)分生抱子穗,分生孢子梗顶囊,分生孢子等的特征,进行菌种鉴定。

第十二天:

菌株的诱变:取复筛酶活力最高的黑曲霉菌斜面用10ml无菌水洗下,玻璃珠振荡0.5h,将上述孢子液3000rpm离心1Omin,后弃上清液,然后用无菌生理盐水将所得孢子洗涤2-3次。取10ml加入直径为9cm的无菌培养皿中,在15W紫外灯下(避光),距离28cm,进行诱变处理,时间依次为0、3、6、9、12、15min,然后涂布于筛选培养基上(避光操作),30℃培养至长出菌落,统计菌落数和各菌落的径圈比(透明圈直径与菌落直径之比)。

第十五天:

1、复筛:将其中透明圈与菌落直径比值较大的进行摇瓶复筛,在220 r/min的转速下发酵培养6d。分别在摇瓶发酵的第1、

2、

3、

4、

5、6天取粗酶液测定酶活,得出其产酶曲线。

第十六天:

1、单孢子菌悬液制备:将复筛酶活力最高的黑曲霉菌斜面用10ml无菌水洗下,倒入盛有玻璃珠的无菌三角瓶中,手持振荡20min,用带有无菌脱脂棉的漏斗过滤,然后用无菌生理盐水将所得孢子洗涤2-3次,制成单孢子悬液。

2、正交实验:根据正交表实验方案,配制培养基,每250ml三角瓶装液50ml,灭菌:121℃25min,接种量:10%,(将初筛各菌株活化至孢子成熟后)发酵温度30 ℃,摇床转速220 r/min ,培养4天。发酵结束,4层纱布过滤,去除菌体,然后3000r/min离心10min,上清液为粗酶液,测其酶活.

第二十一天:

1、植酸酶的分离纯化:取发酵后的培养液在4 ℃,4000 r/min 离心20 min,取上清液,分别加入固体硫酸铵,使硫酸铵饱和度分别为20%~90%,对植酸酶进行沉淀。每级沉淀重新溶解在乙酸缓冲液中,对蒸馏水透析脱盐。透析后测酶活(方法同上)。

第二十二天:酶学性质研究

①植酸酶的最适pH 及pH 稳定性。用纯化的植酸酶分别在pH 2、2.5、3、3.5、4、4.5、

5、5.5、

6、6.6、

7、7.5、8的乙酸缓冲液中进行酶促反应,测定酶的最适pH。将不同pH的植酸酶溶液,在37 ℃处理30 min,测定酶活力,研究酶的pH 稳定性。

②植酸酶的最适温度及热稳定性。纯化后的植酸酶溶解在乙酸缓冲液中,分别在不同温度(20、25、30、35、40、45、50、55、60、65、70℃)下进行酶促反应,测定植酸酶的最适温度。将植酸酶溶液分别在不同温度下保温30min,再在37 ℃测定酶活力。

微生物制药的一般工艺流程

微生物制药的一般工艺流程 微生物制药技术 工业微生物技术是可持续发展的一个重要支撑,是解决资源危机、生态环境危机和改造传统产业的根本技术依托。工业微生物的发展使现代生物技术渗透到包括医药、农业、能源、化工、环保等几乎所有的工业领域,并扮演着重要角色。欧美日等国已不同程度地制定了今后几十年内用生物过程取代化学过程的战略计划,可以看出工业微生物技术在未来社会发展过程中重要地位。 微生物制药技术是工业微生物技术的最主要组成部分。微生物药物的利用是从人们熟知的抗生素开始的,抗生素一般定义为:是一种在低浓度下有选择地抑制或影响其他生物机能的微生物产物及其衍生物。(有人曾建议将动植物来源的具有同样生理活性的这类物质如鱼素、蒜素、黄连素等也归于抗生素的范畴,但多数学者认为传统概念的抗生素仍应只限于微生物的次级代谢产物。)近年来,由于基础生命科学的发展和各种新的生物技术的应用,报道的微生物产生的除了抗感染、抗肿瘤以外的其他生物活性物质日益增多,如特异性的酶抑制剂、免疫调节剂、受体拮抗剂和抗氧化剂等,其活性已超出了抑制某些微生物生命活动的范围。但这些物质均为微生物次级代谢产物,其在生物合成机制、筛选研究程序及生产工艺等方面和抗生素都有共同的特

点,但把它们通称为抗生素显然是不恰当的,于是不少学者就把微生物产生的这些具有生理活性(或称药理活性)的次级代谢产物统称为微生物药物。微生物药物的生产技术就是微生物制药技术。可以认为包括五个方面的内容: 第一方面菌种的获得 根据资料直接向有科研单位、高等院校、工厂或菌种保藏部门索取或购买;从大自然中分离筛选新的微生物菌种。 分离思路新菌种的分离是要从混杂的各类微生物中依照生产的要求、菌种的特性,采用各种筛选方法,快速、准确地把所需要的菌种挑选出来。实验室或生产用菌种若不慎污染了杂菌,也必须重新进行分离纯化。具体分离操作从以下几个方面展开。 定方案:首先要查阅资料,了解所需菌种的生长培养特性。 采样:有针对性地采集样品。 增殖:人为地通过控制养分或培条件,使所需菌种增殖培养后,在数量上占优势。

心理咨询室建设方案详细

太和八中心理辅导室建设方案

二〇一六年月日 学校开展心理健康教育,既是学生自身健康成长的需要,也是社会发展对人的素质要求的需要。自1999年教育部颁发《关于加强中小学心理健康教育的若干意见》以来,社会越来越关注中小学生心理健康教育。各级教育行政部门和学校也在积极为心理健康教育创造必要的条件,配备专职心理健康教师,要求有条件的中学逐步建立和完善心理咨询室。2008年,卫生部等17部门联合颁发《全国精神卫生工作体系发展指导纲要(2008年-2015年)》,指导纲要明确提出,到2010年中小学建立心理健康辅导室、设置专职教师并配备合格人员的学校比例,城市要达到40%、农村达到10%;2015年城市达到60%、农村达到30%。心理咨询室作为学校心理健康教育基地,优化建设迫在眉睫。 心理教育和心理咨询由于其专业的特殊性而对咨询室的建设有

特定要求,结合中学咨询室特殊要求,制定以下心理咨询室建设方案。 一、总体要求 心理咨询室是心理老师和学生进行心理活动的主要场所,是学校心理健康教育的根据地。由于心理工作的专业性,咨询室的设置也有一定要求。总体来说,心理咨询室选址应本着安静和方便的原则,选择采光,通风条件良好,冬要保暖,夏要凉爽的地方,不要太靠近办公区和教学区,也不可太僻静,尽量设在图书馆、阅览室附近,中学心理咨询室还要注意中学生私密性的需要,选择保密性好的场所。这样形成一种很好的文化氛围,又不至于过分嘈杂,有助于学生调适自己的心态。 二、具体设置和要求 鉴于不同的方法可以帮助学生和教师调整心理状态,缓解压力和促进健康心理品质的形成,因此,学校心理咨询室的建设日趋多元化,完整的学校心理咨询室可以包含以下各个部分: 1、心理测评实训室 测评实训室主要为训练学生完成网络心理测评提供较为安静的场所,使学生掌握心理测评技能。测验结果受很多因素影响,其中环境因素是引起误差的最常见因素之一,施测现场的温度,光线、桌面高低等都会影响学生进行测验,因此安静、舒适的测评实训室能让学生的测验结果更可信,更能反映学生的真实心理状态。 其主要配备如下:

微生物实验室的化验员个人工作总结范文

最新微生物实验室的化验员个人工作总 结范文 个人最新工作总结范文 转眼走过20XX年,20XX年是我人生旅途中重要的一程,这一年,在领导和同事的热情帮助下,在工作上取 得了业绩,在在某些方面可说还迈向了一个新的台阶, 对于微生物实验室的化验员来说,也在从思想到行动, 从理论到实践的地了的任务。努力使理论与实践紧密相连,现将本年度实验室工作总结如下: 1、工作质量成绩和效益 在工作之前个人工作计划,有主次的的工作,预期的,保质保量的工作,工作高,在工作中学习了东西, 也锻炼了,不懈的努力,使工作长足的进步,开创了工 作的新局面。 2、思想政治、品德素质修养及职业道德。 能够路线方针政策,电视、电脑、报纸、杂志等媒 体关注国内国际,学习知识和政治思想文件、书籍,领 会胡的讲话精神,并把它思想的纲领,行动的指南;遵纪守法,学习法律知识;爱岗敬业,强烈的责任感和事业心,学习专业知识,工作端正。 3、专业知识、工作能力和工作。

在化验室工作期间1化验工作精细琐碎,但搞好工作,我不怕麻烦,向请教、向同事学习、摸索实践,学 习知识,的理论和综合素质。提高了工作能力,在的工 作中锻炼成了熟练的化验员,能够熟练圆满地化验工作,受到了职工的好评和欢迎。 (1)虚心学习,勤于操作,学习国标,理论接合实践,能熟练操做所有化验项目并报证结果的性。 (2)协助化验室主管了文件资料的登记、上报、下发等工作,并把原来整理的文件按类别整理好放入贴好标 签的文件夹内,给大家查阅文件了,受到了大家一致的 表扬。 (3)协助化验室主管关于化验室认证的工作。 (4)按时、高效地各级交办的其它工作。 4、努力工作和勤奋敬业。 热爱的本职工作,能够的对待每一项工作,工作投入,热心为大家服务,遵守劳动纪律,按时出勤,出勤 率高,请假缺岗,工作,坚守岗位,需要加班工作按时 加班加点,工作能按时。在作风上,能遵章守纪、团结 同事、务真求实、乐观上进,严谨的工作和一丝不苟的 工作作风,勤勤恳恳,任劳任怨。在生活中发扬艰苦朴素、勤俭耐劳、乐于助人的优良传统,老老实实做人, 勤勤恳恳做事,勤劳简朴的生活。

医疗器械微生物实验室装修建设方案

随着医疗器械生产质量管理规范的实施,对无菌和植入类医疗器械的微生物实验室已做出相应要求,其中《医疗器械生产质量管理规范无菌医疗器械实施细则》和《医疗器械生产质量管理规范植入性医疗器械实施细则》中第八章监视和测量规定:生产企业应当建立符合要求并与生产产品相适应的无菌检验室。但实际还包括阳性对照室、微生物限度检查室等,总体称之为微生物实验室更加符合实际。目前医疗器械微生物实验室法规要求起步晚,依据不够细化,加之产品的复杂性,因此微生物实验室的规范化设计并不成熟,SICOLAB对微生物实验室的设计和布局进行初步探讨。 1.微生物实验室功能医疗器械的检验通常分为物理性能、化学性能、生物性能检验。理化检验需要设置理化检验室或在相应工位设检验装置;生物性能检验,对其中的生物学评价检验,企业一般不设检验室,而是委托检测机构进行检测,而微生物检测按法规要求需自行建立微生物检验室。微生物实验室应实现以下功能: (1)按照该产品的标准要求(引用GB/方法或药典方法),对产品进行无菌检验; (2)对洁净环境(空气、水、工艺用气、台面、手)进行微生物检验; (3)对原材料、半成品、成品的初始污染菌检测; (4)部分含药的医疗器械还需满足药品检验需要(无菌、微生物限度、抗生素效价的微生物检定),如含药敷料、含有庆大霉素的骨水泥、药物涂层产品等;此外,部分产品标准规定需要进行细菌内毒素检查(如注射器、输液器等一次性使用无菌医疗器械产品,氧合器、血液透析器、冠脉支架系统等部分人工器官和植入物产品)该类检查虽不是微生物检查,但对检查环境有较高的要求的,操作间应设有紫外线灯,并有控制温度、湿度的设备。应有书面操作规程,并有防止污染的措施。 2.微生物实验室设计要求SICOLAB 微生物实验室设计包括以下几个方面:人员,培养基,菌种,设备,实验室的布局和运行,器具及工作服洗涤、存放要求,更衣流程。 人员从事微生物实验工作的人员应具备微生物学或相近专业知识的教育背景。检验人员数量和素质应能满足检验工作的需要。检验人员必须熟悉相关检测方法、程序、检测目的和结果评价。保证人员在上岗前接受胜任工作所必须的设备操作、微生物检验技术和实验室生物安全等方面的培训,经考核合格后方可上岗。 培养基培养基质量稳定可靠,有良好的促菌生长能力,具备适宜的灭菌方式,在规定的条件和环境下贮藏,通过不同菌种的接种试验并观察生长状态,进行灵敏度试验。

微生物实验心得

微生物实验心得体会 这学期的微生物实验已经结束,这是我第一次接触到微生物的世界中,以前也只是在书本中学习,但是真正走进它们的世界中是通过这个课程开始的。在开始微生物实验之前我是以为这个实验不会很难,但是通过本学期的学习发现这个课程真的很难。你不仅需要理论知识作为铺垫,你还需要有严谨的实验精神。 第一节课老师给我们介绍了我们本学期微生物实验的几个实验和报告的要求,也让我们了解了微生物实验和以往其他实验的不同。实验步骤虽然很简单,但是往往一个微小的细节处理不当也会导致你整个实验结果的失败。这个我真的深有体会,我们小组的实验结果都很不理想。实验步骤说难也不难,其实无非是先对配置培养液,然后对清洗干净的试管、培养皿以及配置好的培养液进行灭菌,等灭菌完了就放入无菌室进行细菌的接种,最后将接种好细菌和培养液的培养皿放进恒温培养箱进行培养。看似很简单的操作过程我却状况百出。我总结了几点导致这么多次实验失败的地方。第一是操作不够规范,在培养皿中倒入培养液后没有摇匀导致培养基边缘开裂,未等琼脂培养液凝固就倒置导致培养基分布不均匀。第二是理论知识欠缺,没有等培养液冷却至40到50摄氏度就倒入培养基然后马上就接种了细菌,导致细菌已经被烫死。 好在值得欣慰的是最后一个自主实验还是比较成功的。试验以环境对微生物生长的影响为题设计实验,我们小组通过PH值,温度,紫外线照射三个方面进行研究,结果很满意,很明显。大肠杆菌在PH值为7时生长最适,在温度为37℃时生长最佳,紫外线会抑制其生长。 不得不承认,通过这次实验的学习,我们学到了很多,得到了很多,有些是书本上学不到的,只有自己参与了,操作了,才会知道。也要感谢老师对我们的照顾。

ERP心理教学实验室建设解决方案

ERP心理学实验室解决方案 1.1方案背景 ERP可将刺激事件包括视觉、听觉、体感等物理刺激和心理因素在大脑内引起的相应反应真实客观的表现,为研究大脑功能提供可靠的实验技术方法,是心理学研究不可缺少的工具。在认知心理学、精神病学、运动医学、人体工程学等领域得到广泛的应用。256道事件相关脑电位分析系统,主要从事不同语言的认知活动特征、情绪反应的脑内事件相关电位改变等方面的研究,同时可开展认知神经科学领域的研究。 ERP被誉为"观察脑高级功能的窗口"。ERP(事件相关电位)指的是凡是外加一种特定的刺激,作用于感觉系统或脑的某一部位,在给予刺激或撤消刺激时,在脑区所引起的电位变化。近年来,随着认知神经科学研究的突飞猛进,ERP更是受到脑科学界更为广泛的关注。就认知神经科学而言,它是侧重于研究认知过程神经机制的交叉学科,而ERP的优势正是具有很高的时间分辨率(毫秒),此外,ERP便于与传统的心理测量指标-反应时有机地配合,进行认知过程研究,且具有无创性。多导联ERP设备的应用,也很好地解决了其空间分辨率的局限。 ERP/EEG的研究已经深入到心理学、生理学、医学、神经科学、人工智能等多个领域,发现了许多与认知活动过程密切相关的成分,如CNV、P300、MMN、N400等等。

1.2 EEG/ERP系统的主要功能 128 EEG/ERP系统具有很高的技术优势,在基础教学和科学研究方面均有无可比拟的优点。该系统可以优化学科结构,可以进行多学科的交叉资源共享。例如,可以同时记录被试在某种认知活动或心理状态下的脑电、肌电、心电,由于该设备具有最先进的脑成像分析软件,因此,学生即可以了解脑活动的基本过程,同时又可以把中枢神经系统的功能与周围神经系统的表现有机地综合,从而把生物学、生理学、心理学和医学解剖的教学有机地结合起来。在科学研究方面,128 EEG/ERP系统可以进行多学科的研究,包括生理学、心理学、医学等等,是目前最先进的研究设备。例如,在感觉神经科学方面,该设备可以记录分析听觉、视觉和体感诱发电位,并可以进行2D和3D成像以及溯源分析,以深入研究感觉通路和初级皮层的功能状态;认知神经科学方面,可以进行该领域的各项研究,如语言加工、注意、记忆、意识等;在医学研究方面,可以进行包括精神病、失语征、学习困难、多动症、老年痴呆、睡眠等在内的各种研究。 1.3设计要求 实验间满足绝对阈限实验对实验环境的要求,能实现光、声、电、磁和温、湿度的控制。 1.4设计方案

微生物实验室工作总结

微生物实验室工作总结 Prepared on 22 November 2020

微生物实验室工作总结 忙碌的2011年已经走远,总结一年的工作,尽管有了一定的进步和成绩,但在一些方面还存在着不足,个别工作做的还不够完善,这有待于在今后的工作中加以改进。微生物室将逐渐建立建全各项政策规章制度,修正完善SOP文件,努力使思想觉悟和工作效率全面进入一个新水平,新的起点意味着新的机遇新的挑战,可以预料我们的工作将更加繁重,要求也更高,需掌握的知识更多更广。为此,我将更加勤奋的工作,刻苦的学习,努力提高文化素质和各种工作技能,为微生物室的发展做出更大的贡献。一定努力打开一个工作新局面。 我将从以下几点做科室总结: 一.微生物实验室在合理应用抗生素中作用:怎样才能充分发挥微生物检测报告的作用 将经验用药改为根据药敏试验结果合理使用抗生素,从而有效避免耐药菌的产生首先要规范标本的采集:这是病原菌检测正确与否的关键,若标本的采集与处理不符合要求,则细菌培养的结果就没有意义,甚至会给临床造成误导,延误对患者的正确治疗,将造成严重后果。其次是规范化操作程序和加强病原菌的检验提高时效性和准确性,提高病原菌的阳性率和准确率,鉴定出真正的病原菌,有菌部位标本,如痰,咽拭子,粪便等在培养出细菌时面临判断该菌是致病菌还是正常菌群,以免给临床造成误导。一般标本采集到明

确检验结果需要3—4天,有是需要更长时间,此时患者的病情可能早已发生了变化。检验报告对临床而言,已失去了相应的价值,为让临床及时了解病原菌诊断情况应积极与临床大夫沟通。最后二.与临床沟通:临床微生物实验室比其他任何实验室都需要与临床进行良好的沟通,微生物实验室的各种检验数据尤其是药敏试验结果以及病原菌的分离报告只有与临床结合分析才能真正知道我们的价值所在,另外,这种沟通也会导致临床在感染性疾病的诊治方面采取更有效的手段,更合理的应用抗菌药物。 1、从提高自身素质开始,提高整个实验室的整体素质,增加各方面的知识储备以及综合分析能力与判断能力。 2、把好标本采集与接种关,尽可能要求大夫多注明患者情况特别是以往和目前使用抗菌药物情况,不合格的标本尽量要求重新留取。 3、及时与临床大夫沟通,进一步了解病人详细情况。 4、对每一张检验报告都要认真分析,包括分离菌与药敏结果 5、科室交待,细菌标本送检时间,要让他们知道标本一旦留取,要尽快送到细菌室,不能和其他标本一样等到聚到一起送,从而导致无菌变得有菌。 6、有特殊菌生长,先电话通知临床床医生,这样他们可以调整用药。 7、人认为其实药敏结果比具体的细菌名更加重要,我们不需要拘伲于菌名的百分百准确。 三.微生物检测及消毒,灭菌的检测:应做好每月的院感检测为医院感染保驾护航,对某些科室的空气,工作人员手,桌面等细菌学检测出现超标,不能因各种人情关系出现瞒报或漏报的情况。应实事求是上报院感科。

医疗器械微生物实验室装修建设方案(20200519170517)

医疗器械微生物实验室装修建设方案-喜格 随着医疗器械生产质量管理规范的实施,对无菌和植入类医疗器械的微生物实验室已做出相 应要求,其中《医疗器械生产质量管理规范无菌医疗器械实施细则》和《医疗器械生产质量管理规范植入性医疗器械实施细则》中第八章监视和测量规定:生产企业应当建立符合要求并与生产产品相适应的无菌检验室。但实际还包括阳性对照室、微生物限度检查室等,总体称之为微生物实验室更加符合实际。目前医疗器械微生物实验室法规要求起步晚,依据不够细化,加之产品的复杂性,因此微生物实验室的规范化设计并不成熟,SICOLAB对微生物实验室的设计和布局进行初步探讨。 1.微生物实验室功能医疗器械的检验通常分为物理性能、化学性能、生物性能检验。理化检验需要设置理化检验室或在相应工位设检验装置;生物性能检验,对其中的生物学评价检验,企业一般不设检验室,而是委托检测机构进行检测,而微生物检测按法规要求需自行建立微 生物检验室。微生物实验室应实现以下功能: (1)按照该产品的标准要求(引用GB/方法或药典方法),对产品进行无菌检验; (2)对洁净环境(空气、水、工艺用气、台面、手)进行微生物检验; (3)对原材料、半成品、成品的初始污染菌检测; (4)部分含药的医疗器械还需满足药品检验需要(无菌、微生物限度、抗生素效价的微生物检定),如含药敷料、含有庆大霉素的骨水泥、药物涂层产品等;此外,部分产品标准规定需 要进行细菌内毒素检查(如注射器、输液器等一次性使用无菌医疗器械产品,氧合器、血液 透析器、冠脉支架系统等部分人工器官和植入物产品)该类检查虽不是微生物检查,但对检 查环境有较高的要求的,操作间应设有紫外线灯,并有控制温度、湿度的设备。应有书面操作规程,并有防止污染的措施。 2.微生物实验室设计要求SICOLAB 微生物实验室设计包括以下几个方面:人员,培养基,菌种,设备,实验室的布局和运行, 器具及工作服洗涤、存放要求,更衣流程。 人员从事微生物实验工作的人员应具备微生物学或相近专业知识的教育背景。检验人员数量和素质应能满足检验工作的需要。检验人员必须熟悉相关检测方法、程序、检测目的和结果评价。保证人员在上岗前接受胜任工作所必须的设备操作、微生物检验技术和实验室生物安 全等方面的培训,经考核合格后方可上岗。

微生物制药技术介绍

微生物制药技术介绍 工业微生物技术是可持续发展的一个重要支撑,是解决资源危机、生态环境危机和改造传统产业的根本技术依托。工业微生物的发展使现代生物技术渗透到包括医药、农业、能源、化工、环保等几乎所有的工业领域,并扮演着重要角色。欧美日等国已不同程度地制定了今后几十年内用生物过程取代化学过程的战略计划,可以看出工业微生物技术在未来社会发展过程中重要地位。 微生物制药技术是工业微生物技术的最主要组成部分。微生物药物的利用是从人们熟知的抗生素开始的,抗生素一般定义为:是一种在低浓度下有选择地抑制或影响其他生物机能的微生物产物及其 衍生物。(有人曾建议将动植物的具有同样生理活性的这类物质如鱼素、蒜素、黄连素等也归于抗生素的范畴,但多数学者认为传统概念的抗生素仍应只限于微生物的次级代谢产物。)近年来,由于基础生命科学的发展和各种新的生物技术的应用,报道的微生物产生的除了抗感染、抗肿瘤以外的其他生物活性物质日益增多,如特异性的酶抑制剂、免疫调节剂、受体拮抗剂和抗氧化剂等,其活性已超出了抑制某些微生物生命活动的范围。但这些物质均为微生物次级代谢产物,其在生物合成机制、筛选研究程序及生产工艺等方面和抗生素都有共同的特点,但把它们通称为抗生素显然是不恰当的,于是不少学者就把微生物产生的这些具有生理活性(或称药理活性)的次级代谢产物统称为微生物药物。微生物药物的生产技术就是微生物制药技术。可以认为包括五个方面的内容:

根据资料直接向有科研单位、高等院校、工厂或菌种保藏部门索取或购买;从大自然中分离筛选新的微生物菌种。 分离思路新菌种的分离是要从混杂的各类微生物中依照生产的要求、菌种的特性,采用各种筛选方法, 快速、准确地把所需要的菌种挑选出来。实验室或生产用菌种若不慎污染了杂菌,也必须重新进行分离纯化。具体分离操作从以下几个方面展开。 定方案:首先要查阅资料,了解所需菌种的生长培养特性。 采样:有针对性地采集样品。 增殖:人为地通过控制养分或培条件,使所需菌种增殖培养后,在数量上占优势。 分离:利用分离技术得到纯种。 发酵性能测定:进行生产性能测定。这些特性包括形态、培养特征、营养要求、生理生化特性、发酵周期、产品品种和产量、耐受最高温度、生长和发酵最适温度、最适pH值、提取工艺等。 工业上生产用菌株都是经过选育过的。工业菌种的育种是运用遗传学原理和技术对某个用于特定生物技术目的的菌株进行的多方位的改造。通过改造,可使现存的优良性状强化,或去除不良性质或增加新的性状。 工业菌种育种的方法:诱变、基因转移、基因重组。

2015年微生物室年终工作总结

工作总结 光阴如梭,一年的工作转瞬又将成为历史,2015年即将过去,2016年即将来临。新的一年意味着新的起点、新的机遇、新的挑战、食品微生物室“决心再接再厉,更上一层楼”,一定努力打开一个工作新局面。透视过去的一年在领导的帮助、同事们的关心、配合下,微生物室的这一块工作取得了一些成绩。为了在2016年,更好地完成工作,扬长避短,现将2015年的工作总结如下: 一、微生物检验工作: 1.年初经历了办公楼的搬迁,实验室检测能力的资质认证。为了适应食品检验的更好发展,在中心领导的决定下,将原食品检验科分为了理化检验、仪器检验和微生物检验三个科室,使得科室的职能更细化更专业化。 2.随着食品微生物检验标准的更改,原来只需要每批样品检一份,现在要求检五份,使得微生物检验人员的工作量一下增加了五倍,而我们科室现有的人员只有三人,在人员少工作压力大的情况,科室人员不怕苦不怕累,加班加点,顺利完成了各项检验任务。截止到2015年11月,食品微生物检验共完成检品418批次,其中70%的检品是要求做五份的。 3.科室人员进修情况由于中心领导对检验工作的重视、也为了更好的适应更专业化的工作,为了加强检验人员的培训和考核,逐步提高检验水平。5月份科室共派出两名人员参加了省食检院举办的为期半个月食品生物安全检验的跟班培训,培训期间开拓了视野,提高了认识,并以优异的成绩通过了省食检院的考核。 4.顺利通过了各项审核和验收,扩大了检验范围。2015年5月,中心顺利通过了实验室检测能力的资质认证。 5.微生物实验室每天都会对培养箱温度进行监测,仪器使用情况良好。每次使用前,都检查仪器状况,试验完毕都对仪器进行认真清理,并且定期对各类仪器设备进行维护,使设备都保持正常的工作状态。还对洁净室定期进行消毒灭菌,并对洁净室的环境进行监测,做好监测记录,以保证实验结果准确无误。同时,督促科室人员,提高质量意识,养成良好的实验操作习惯,及时对实验数据进行整理,保证实验过程规范性和数据的准确性。 6.今年6月份和10月份我们科室分别接到国家食品药品监督管理总局下达的

微生物学实验报告--第八周

年级:2009 专业:医学检验班级:一班姓名:赵富海学号:2009221792 实验八、细菌的药物敏感试验 【K-B法】 菌种(均为幼龄菌):金黄色葡萄球菌1.5×108/ml、大肠埃希菌1.5×108/ml 药物纸片:青霉素、庆大霉素、新诺明、环丙沙星 方法: 1.涂菌(棋盘划线法),室温放10min; 2.贴药敏纸片,注意间距(大于24mm)和边距(大于15mm); 3.置35℃ 24h判读结果。 结果如图所示: 金黄色葡萄球菌 金黄色葡萄球菌抗菌药物敏感性试验评价结果 实验结论:金黄色葡萄球菌对青霉素耐药,对庆大霉素、新诺明、环丙沙星敏感。 【试管稀释法】 菌种:金黄色葡萄球菌1.5×108/ml、大肠b1.5×108/ml 抗生素:庆大霉素32u/ml 方法: 1.对倍稀释抗生素 2.加菌液0.1ml/管,摇均35℃ 16—18h

3.判读MIC 试验操作如下图所示: 注意 :设立对照管(肉汤对照管,待测菌生长对照管和质控菌生长对照管) 结果判断: 不出现肉眼可见生长的最低药物浓度为该药对该细菌的MIC. 如图: 实验结论:MIC=原药物浓度(32u/ml) ×稀释倍数(1:24)=2u/ml 【联合药敏试验】(示教) 金黄色葡萄球菌大肠b 结果判断: 金黄色葡萄球菌联合药敏试验结果判读: ①青+链=青单+链单→相加作用 ②青+红=青单+红单→相加作用

③青+万=青单+万单→相加作用 ④青+林>青单+林单→协同作用 大肠b联合药敏试验结果判读: ①青+红=青单+红单→相加作用 ②青+链=青单+链单→相加作用 ③青+林=青单或林单→无关作用 ④青+南>青单+南单→协同作用 【实验讨论】 1.K-B法原理 将含有定量抗菌药物的纸片贴在已接种测试菌的琼脂平板上。纸片中所含有的药物吸取琼脂中的水分溶解后便不断地向纸片周围区域扩散形成递减的梯度浓度。在纸片周围抑菌浓度范围内测试菌的生长被抑制,从而形成透明的抑菌圈。抑菌圈的大小反映测试菌对测定药物的敏感程度。并与该药对测试菌的最低抑菌浓度(MIC)呈负相关关系,即抑菌圈愈大,MIC 愈小。 2.K-B法影响因素 ①培养基的质量,如PH、深度、硬度和表面湿度等; ②药敏纸片的质量,含药量和保存方式; ③接种菌量正确与否是影响结果的重要因素之一,取决于比浊标准的配制,正确使用和保存; ④试验操作质量:接种细菌后贴片时5~15分钟; ⑤孵育条件,温度和时间:培养时间 16~18h,不要超过24h。 3.稀释法原理: 以水解酪蛋白(MH)液体培养基将抗生素作不同浓度的稀释,然后种入待测细菌,定量测定抗菌药物对被测菌的最低抑菌浓度(MIC)或最低杀菌浓度(MBC)。 4. 稀释法影响因素:培养基、接种菌量、蛋白质结合率、抗菌药物的配制、结果观察的时间等因素均能影响本试验的结果。 5.抗生素药物敏感性试验(AST)的意义 ①可预测抗生素治疗的效果,既AST试验结果为“敏感”时,治疗可能有效;试验结果为“耐药”时,使用该药物治疗肯定失败; ②指导临床医生选择使用抗生素,AST的结果往往在给予病人经验性治疗24~48h之后,若AST结果为“敏感”,该治疗为有效,若结果为“耐药”,即应更换药物; ③提供所选择药物的依据; ④监测耐药性,分析耐药菌的变迁,掌握耐药菌感染病的流行病学,控制和预防耐药菌感染的发生和流行。 6.通过此次实验掌握纸片扩散法(K-B法)、试管稀释法的原理、操作方法、结果的判读及其临床意义,并掌握联合药敏试验结果的观察、判断。

微生物实验室个人工作总结

微生物实验室个人工作总结 转眼已经走过20××年。这一年是我人生旅途中的重要一程,透视过去的一年在领导的帮助、同事们的关心、配合下,微生物实验室的这一块工作取得了一些成绩。在某些方面可以说上了一个新台阶,作为微生物实验室的化验员来说,也在从思想到行动,从理论到实践的一些方面较好地完成了自己的任务。努力做到了使实验紧密结合,不断提高了自己诸多方面的素质。现将本年度实验室工作总结如下: 一、工作质量成绩、效益和贡献。 在开展工作之前做好个人工作计划,有主次的先后及时的完成各项工作,达到预期的效果,保质保量的完成工作,工作效率高,同时在工作中学习了很多东西,也锻炼了自己,经过不懈的努力,使工作水平有了长足的进步,开创了工作的新局面,为化验中心的工作做出了应有的贡献。 二、思想政治表现、品德素质修养及职业道德。 能够认真贯彻党的基本路线方针政策,利用电视、电脑、报纸、杂志等媒体关注国内国际形势,学习党的基本知识和有关政治思想文件、书籍,深刻领会胡总书记的讲话精神,并把它作为思想的纲领,行动的指南;遵纪守法,认真学习法律知识;爱岗敬业,具有强烈的责任感和事业心,积极主动认真的学习专业知识,工作态度端正,认真负责。

三、专业知识、工作能力和具体工作。 在化验室工作期间1化验工作精细琐碎,但为了搞好工作,我不怕麻烦,向领导请教、向同事学习、自己摸索实践,认真学习相关业务知识,不断提高自己的理论水平和综合素质。提高了工作能力,在具体的工作中锻炼成了一个熟练的化验员,能够熟练圆满地完成化验工作,受到了领导职工的好评和欢迎。 在这一年,我本着“把工作做的更好”这样一个目标,开拓创新意识,积极圆满的完成了以下本职工作: (1)虚心学习,勤于实际操作,深刻学习国标,理论接合实践,能熟练操做所有化验项目并报证结果的准确性。 (2)协助化验室主管做好了各类文件资料的登记、上报、下发等工作,并把原来没有具体整理的文件按类别整理好放入贴好标签的文件夹内,给大家查阅文件提供了很大方便,收到了很好的效果 (3)协助化验室主管做好关于化验室认证的相关工作。 (4)认真、按时、高效率地做好各级领导交办的其它工作。 同时,我还积极配合其他同事做好工作,并在其他同事有事时能够顶岗。 四、工作态度和勤奋敬业方面。 热爱自己的本职工作,能够正确认真的对待每一项工作,工作投入,热心为大家服务,认真遵守劳动纪律,保证按时出勤,出勤率高,没有请假缺岗现象,

微生物实验室设计解决方案

食品微生物实验室主要负责各类微生物项目的检测,主要检测项目有菌落总数、大肠菌群、霉菌、酵母、乳酸菌、双歧杆菌、罐头商业无菌、致病菌(如沙门氏菌、志贺氏菌、溶血性链球菌、金黄色葡萄球菌等)。 微生物实验室由准备室、洗涤室、灭菌室、无菌室、恒温培养室和普通实验室六部分组成。这些房间的共同特点是地板和墙壁的质地光滑坚硬,仪器和设备的陈设简洁,便于打扫卫生。 微生物实验室选址 三级生物安全防护实验室可与其他用途房屋设在一栋建筑物中 但必须自成一区。该区通过隔离门与公共走廊或公共部位相隔。微生物实验室功能分区 平面布局 三级生物安全防护实验室的核心区包括实验间及与之相连的缓 冲间;缓冲间形成进入实验间的通道。必须设两道连锁门,当其中一道门打开时,另一道门自动处于关闭状态。如使用电动连锁装置断电时两道门均必须处于可打开状态。在缓冲间可进行二次更衣;当实验室的通风系统不设自动控制装置时,缓冲间面积不宜过大,不宜超过实验间面积的八分之一;Ⅱ级或Ⅲ级生物安全柜的安装位置应远离实验间入口,避开工作人员频繁走动的区域,且有利于形成气流由“清洁”区域流向“污染”区域的气流流型。 准备室 准备室用于配制培养基和样品处理等。室内设有试剂柜、存放器

具或材料的专柜、实验台、电炉、冰箱和上下水道、电源等。 洗涤室 洗涤室用于洗刷器皿等。由于使用过的器皿已被微生物污染,有时还会存在病原微生物。因此,在条件允许的情况下,最好设置洗涤室。室内应备有加热器、蒸锅,洗刷器皿用的盆、桶等,还应有各种瓶刷、去污粉、肥皂、洗衣粉等。 灭菌室 灭菌室主要用于培养基的灭菌和各种器具的灭菌,室内应备有高压蒸汽灭菌器、烘箱等灭菌设备及设施。 无菌室 无菌室一般为4-5平方米、高2.5米的独立小房间(与外间隔离),专辟于微生物实验室内。无菌室也称接种室,是系统接种、纯化菌种等无菌操作的专用实验室。在微生物工作中,菌种的接种移植是一项主要操作,这项操作的特点就是要保证菌种纯种防止杂菌的污染。在一般环境的空气中由于存在许多尘埃和杂菌,很易造成污染,对接种工作干扰很大。 无菌室的设置 无菌室应根据既经济又科学的原则来设置。其基本要求有以下几种: (1)无菌室应有内、外两间,内间是无菌室,外间是缓冲室。房间容积不宜过大,以便于空气灭菌。最小内间面积2×2.5=5m2,外间面积1×2=2m2,高以25m以下为宜,都应有天花板。

心理实验室建设方案

解放军第四医科大学心理实验室建设方案 一、心理实验室建设的必要性。 现代战争对军人心理的影响主要反映在对军人的整体心理素质提出了更高的要求,高新技术的普遍应用使现代战争具有更高的突发性、致残率和死亡率,因此建设心理实验室,加强军人的心理素质培养与训练具有重要的意义和紧迫性。 目前大部分的心理实验室关注的是军人的个性心理方面,但是对于18岁参军的军人来说,想对个性心理进行矫治和改变已经非常困难,因此,我校心理实验室建设的重点放在通过后天的矫正和训练容易改变的认知方面(感觉、知觉、注意、记忆、想象、思维等)。 目前大部分的心理实验室关注的是理论研究、神经机制研究等,并没有考虑到战时的实际需要,因此,我们心理实验室的建设重点放在战时需要的心理能力和素质训练上(注意、观察、记忆、思维能力),切实提高战士的战斗力。 目前跟多关注的是普通战士的心理健康情况,而忽略了特殊兵种的心理能力要求,因此,我们心理实验室的建设不仅关注普通战士的心理健康问题,更加注重特殊兵种的心理能力的训练。 我校的心理学科发展的要求。。。。。。。。。。。(需要结合实际补充) 二、心理实验室建设目的 1.用于本科和硕士生开展认知和生物反馈方面的实验课程的教学和实 践。 2.用于本科和硕士生学位论文实验的开展和相关课题的研究。 3.用于部队官兵认知能力训练,提高官兵注意、观察、记忆、思维能力,切实提高战斗力。 4.用于部队官兵进行生物反馈训练(脉搏、心率、心率变异性、α波、δ波、β波、γ波、专注度、放松度) 5.用于侦察兵、特勤兵等特殊兵种的选拔和任用。

三、心理实验室建设的内容 1、注意力训练项目 注意(attention)是心理活动对一定对象的指向和集中。是伴随着感知觉、记忆、思维、想象等心理过程的一种共同的心理特征。注意有两个基本特征,一个是指向性,是指心理活动有选择的反映一些现象而离开其余对象。二是集中性,是指心理活动停留在被选择对象上的强度或紧张。指向性表现为对出现在同一时间的许多刺激的选择;集中性表现为对干扰刺激的抑制。它的产生及其范围和持续时间取决于外部刺激的特点和人的主观因素。 主要指标: 多参数记录:系统自动记录正确反应、错误反应、反应时 训练报告:系统自动比较多参数测历史变化情况,并给出变化折线图。 个性训练方案:根据训练者的要求,调整训练的难度,包括多参数的调节。

微生物室的实习小结

微生物室的实习小结 病原微生物感染引起发病,院内感染不断增加。细菌由于人类不断婪用抗菌药物,耐药性不断增加,这些都严重危害人类健康。病原微生物在实验室潜在对实验室人员的威胁也日趋严峻。生物安全的宣教必不可少,怎样把只有基本微生物知识的学生,与临床实验室大量面对病人标本的采集、运送、接种、培养、观察、鉴定、药敏、报告等各个环节的实践结合起来,由基础知识向专业技能有效转化,把基础理论知识在实习中有效发挥,与实践相结合使之升华,是培养合格检验人才的关键。现就微生物室的实习带教体会总结如下。 1、重视标本送检前的质量控制。 微生物实验室每天都收到来自病房,门诊病人送检的大量标本,有痰、中段尿、伤口分泌物、生殖道拭子、血培养、脓液、术中临时所采集的标本等等。标本的采集、运输和处理是否得当及时对试验结论有直接影响。是分析前质量控制的重要环节,只有让学生全面认识标本采集与处理的全过程及影响因素,才能确保检验结论的准确性、有效性。 标本的采集 例如中段尿的采集,应告知学生尿道内是人体无菌的腔道,尿道外则是有菌的部位。所以采集中段尿时必须对外阴进行彻底消毒,排出前一段尿液,以便冲洗外尿道或外阴,

留取中段尿于无菌杯中送检。如痰标本的采集,应嘱病人于清晨嗽洗口腔,咳出深部的痰液于无菌杯中送检,如是支原体和衣原体的检测,则应留取女性宫颈拭子或男性尿道拭子,因为支原体和衣原体都只寄生在宫颈或者尿道的柱状上皮细胞内。 标本的处理 学生应知道,标本的及时处理接种对微生物的成活率至关重要,例如淋病奈瑟氏菌,需要保温,保湿送检,提倡床边接种,培养基应先预温,接种后放36℃温箱、5%co2环境,保湿培养。又如痰标本应接种在血平板,巧克力平板,沙基,嗜血流感巧克力平板上,血平板和巧克力平板主要观察病人痰标本里的基础菌群的生长状态。沙基主要观察是否有念珠菌生长,嗜血流感巧克力平板主要是观察是否有嗜血流感杆菌属的生长,此平板在配制时加入了针对性抗菌药物,能够抑制革兰氏阴性杆菌和革兰氏阳性球菌的生长,只适合于嗜血杆菌属的生长。学生应学会每一份标本,接种到相应有用、有目的、有选择的培养基中。 2、注重特征、综合分析 细菌的鉴定是运用所学知识,综合性判断的过程。它需要根据病人基本信息,标本来源、诊断、平板上形态特征,生长情况,氧化酶、触酶阴阳性状、革兰氏染色镜下形态,生化反应,药敏结果等进行综合性判断,最终得出鉴定结果。

微生物实验室布局

刚毕业的人,什么都不懂,前面叫我去去参加微生物培训,在他们那边要了两份新标准复印件,看着实验室空空的。就按照标准上面写的开始采购仪器设备试剂微生物实验室常规灭菌及培养设备外,其他设备和材料如下: 1 恒温培养箱:36 ℃±1 ℃,30 ℃±1 ℃。(一台) 2 冰箱:2 ℃~5 ℃。(一台) 3 恒温水浴箱:46 ℃±1 ℃。(一台) 4 天平:感量0.1g 。(一台还买了一台感量0.001g) 5 均质器。(一台) 6无菌吸管:1 mL (具0.01mL 刻度)、10mL (具o.lmL 刻度)或微量移液器及吸头。(3、4个) 7 无菌锥形瓶:容量250 mL 、500 mL 。(6个) 8 无菌培养皿:直径90 mm 。(20个) 9 pH 计或pH 比色管或精密pH 试纸。(一盒) 10 放大镜(一只) 11试管(大号的20支小号20支)、烧杯(大中小各三个)、试管架、小滴管 培养基和试剂 1 平板计数琼脂培养基 2 磷酸盐缓冲液 3 无菌生理盐水:称取8.59 氯化钠溶于1 000 mL 蒸馏水中,121 ℃高压灭菌15 min 。 4 1 mol/L 氢氧化钠(NaOH ) :称取40g 氢氧化钠溶于1 000 mL 蒸馏水中。 5 1 mol/L 盐酸(HCl ) :移取浓盐酸90 mL ,用蒸馏水稀释至1 000 mL 。 总结仪器设备和试剂采购有时候总是以为什么都买回来了,但是一旦你开始做试验你就会发现缺这个少那个,这个那个的没买,导致实验没法开始做,我当当就这两个项目的东西买了四次才全都买回来,没办法在列清单的时候好像什么都列好了,但是但采购回来又发现这个少了。所以但要买东西的时候,你先一步一步的把试验操作模拟出来看到用什么马上写出来,然后在对着实验操作步骤对一遍过去看哪个环节没想到没做到,加深印象,你就会发现很多东西上面没写但是必备的小瓶瓶罐罐的。 一、仪器设备采购、仪器试剂和整体布局 前面那就是开始布局要从这间房间里再分割一间小的房间作为无菌实验室,我们这个实验室占地面积大概就是一个高中教室那么大吧,而我们拿四分之一用来做无菌实验室。第二个就是自来水和管道的安装。(大概图如我画的) 我查阅相关资料食品实验室设计要求达到以下:⑴食品行业化工实验室实验台高度要求根据人体工力学,坐式操作实验台高度为750~850;站式操作高度850~920。试剂架高度1200~1650。高柜1800~2200。 ⑵食品行业化工实验室安全通道:常用实验室门宽为900~1500mm,并设有一个安全门,内部操作流程要求顺畅,防止发生危急情况时,出现通道堵塞现象,设计时常用岛型、半岛型、L字型、U字型等实验室布局方案。主通道、两个中央台双面操作,间距大于1500mm,边台单向距离大于1200。排毒柜双面操作距离大于1500mm。 ⑶食品行业化工实验室通风系统 通风气体管道符合安全要求:工程必须达到化学类实验室安全要求,诸如防火,防爆,防腐,防泄漏,防雷击,保证通风排毒系统在安全状态下运行,安全要求是本工程第一重要因素。

(完整版)微生物与制药综述

微生物制药的研究进展 姓名:李青嵘 班级:生工102 学号:1014200044

摘要 本文通过对历史文献的检索,从微生物生产维生素,微生物生产多价不饱和脂肪酸,微生物生产抗生素,微生物生产抗癌物质,微生物生产医用酶制剂等五个方面综述了微生物制药的研究进展。 关键词:微生物,制药,发酵工程 1.前言 随着生物技术的迅猛发展,在医药领域的许多方面取得了巨大的进展.,其中采用微生物制药,具有生产工艺简单,生产成本低廉,产品产量高,产品纯度高,可大规模工业化生产等优势,同样得到了巨大的发展。从传统工艺,如利用发酵工程生产抗生素、酶制剂以及B-胡萝卜素等;到现今的利用转基因技术生产干扰素、胰岛素、生长因子等几十种新药和疫苗。本文着重综述了微生物的发酵工程在医药研究和生产中应用的最近进展,主要包括生产维生素、多价不饱和脂肪酸、抗生素、抗癌物质医用酶制剂等五个方面。 2.研究内容 2.1.微生物生产维生素 维生素是六大生命要素之一, 为整个生命活动所必需。β-胡萝卜素、VC、VE是目前应用最为广泛,效果最为显著的三种维生素,它们的作用分别是:β-胡萝卜素是强力抗氧化剂, 有抑制癌细胞增殖和提高机体免疫力等作用。V C 和V E 均是抗氧化剂, 前者可阻止、破坏自由基形成,还具有激活免疫系统细胞的活力,刺激机体产生干扰素以抵御外来侵染因子。至于VE可产生抗体,增强机体免疫力。目前,上述的“三素”以实现了微生物工业化生产。 目前,β-胡萝卜素主要是由三孢布拉霉菌生产,在1998年,陈涛等[1]已经针对三孢布拉霉菌的特点,优化发酵工艺,在3M3的发酵罐中发酵120h,生产的β-胡萝卜素产量已达到1146.5mg/L。虽然,传统的工艺生产β-胡萝卜素的产量高,生产周期比较短,但是传统的工艺复杂,成本过高,不利于大规模工业化生产。故,目前许多课题组专注于开发新的生产β-胡萝卜素的菌种或改进传统工艺。据近年所发表的期刊文献,目前,采用红酵母发酵生产β-胡萝卜素是一种工艺简单,成本低廉的方法,虽然在产量方面较传统方法的低很多,但是该方法仍具有很大的发展潜力。何海燕等[2]采用粘红酵母R3-35摇瓶发酵84h,生产的β-胡萝

微生物实验室的化验员个人工作总结【精选】

导读:这一年是我人生旅途中的重要一程,透视过去的一年在领导的帮助、同事们的关心、配合下,微生物实验室的这一块工作取得了一些成绩。 . 为您整理推荐的微生物个人工作总结,欢迎参考阅读。 篇一:微生物实验室的化验员个人工作总结 转眼走过20 年,20 年是我人生旅途中重要的一程,这一年,在领导和同事的热情帮助下,在工作上取得了业绩,在在某些方面可说还迈向了一个新的台阶,对于微生物实验室的化验员来说,也在从思想到行动,从理论到实践的地了的任务。努力使理论与实践紧密相连,现将本年度实验室工作总结如下: 1、工作质量成绩和效益 在工作之前个人工作计划,有主次的的工作,预期的,保质保量的工作,工作高,在工作中学习了东西,也锻炼了,不懈的努力,使工作长足的进步,开创了工作的新局面。 2、思想政治、品德素质修养及职业道德。 能够路线方针政策,电视、电脑、报纸、杂志等媒体关注国内国际,学习知识和政治思想文件、书籍,领会胡的讲话精神,并把它思想的纲领,行动的指南;遵纪守法,学习法律知识;爱岗敬业,强烈的责任感和事业心,学习专业知识,工作端正。 3、专业知识、工作能力和工作。 在化验室工作期间1化验工作精细琐碎,但搞好工作,我不怕麻烦,向请教、向同事学习、摸索实践,学习知识,的理论和综合素质。提高了工作能力,在的工作中锻炼成了熟练的化验员,能够熟练圆满地化验工作,受到了职工的好评和欢迎。 (1)虚心学习,勤于操作,学习国标,理论接合实践,能熟练操做所有化验项目并报证结果的性。 (2)协助化验室主管了文件资料的登记、上报、下发等工作,并把原来整理的文件按类别整理好放入贴好标签的文件夹内,给大家查阅文件了,受到了大家一致的表扬。 (3)协助化验室主管关于化验室认证的工作。 (4)按时、高效地各级交办的其它工作。 4、努力工作和勤奋敬业。 热爱的本职工作,能够的对待每一项工作,工作投入,热心为大家服务,遵守劳动纪律,按时出勤,出勤率高,请假缺岗,工作,坚守岗位,需要加班工作按时加班加点,工作能按时。在作风上,能遵章守纪、团结同事、务真求实、乐观上进,严谨的工作和一丝不苟的工作作风,勤勤恳恳,任劳任怨。在生活中发扬艰苦朴素、勤俭耐劳、乐于助人的优良传统,

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