6毕赤酵母介绍
毕赤酵母表达知识归纳
毕赤酵母表达知识归纳1a.配制500×BIOTIN stock solution（0.02％）有这么3种方案：1、懒人是将Biotin直接溶在去离子水中，放过夜，基本就能溶；2、急性子是将溶液配成0.02N的NaOH，就很容易溶解了；3、水浴加热，温度不能高于50度。
D－生物素是具有生物活性的生物素，也就是vitaminH。
在毕赤酵母代谢过程中，作为多种酶的辅基起作用。
天然培养基中一般可以不单独添加，因为YNB中、酵母粉、蛋白胨中均含有一定量的生物素，但是做高密度发酵还是必须要添加的。
b.有几个比较迷惑的问题请教大家：(很典型的小问题）1、制感受态细胞，OD多少比较好？pyrimidine 战友的方法：取1mlGS115过夜培养物(OD约6-10) 分装到1.5ml EP管中。
说明书还有一些文献是说在1.3左右效率高，再高了效率会很低2、关于高效转化法，文献说用(LiAc)，而invitrogen的说明书说转化毕赤酵母用(LiAc)没用，要用LiCl。
Lithium acetate does not work with Pichia pastoris. Use only lithium chloride.3、YNB到底能高温灭么？有的说能有的说不能。
过滤灭菌的怎么操作？我是把滤器装好膜绑到瓶口用纱布盖上，报纸包上，瓶盖放烧杯里单灭。
然后把配好的溶液用注射器一点点推进去。
4、葡萄糖为什么在YPD里一起灭颜色很深，单灭则不会。
该115度还是121度灭？网上搜了下，都有人用！5、电转化参数用400欧还是200欧？有的用400，有的还专门说不是用400。
都是从园里看到的！电击参数：1.5KV，25uF，200欧姆（不是400）6、电转后，在MD平板上长的应该就是整合了目的基因的重组子了吧？如果不想筛高拷贝的，是否PCR验证一下即可？网友的回答：ynb最好不灭菌，我是0.22um过滤处理的。
invitrogen手册上可以灭菌的。
毕赤酵母形态结构
毕赤酵母形态结构毕赤酵母是一种广泛存在于大自然中的真菌，也是食品、饮料生产中常用的一种微生物。
其特殊的形态结构，使得其在众多微生物中拥有独特的地位。
接下来，我们将从多个角度来介绍毕赤酵母的形态结构。
一、大小形态毕赤酵母的大小一般为10-15微米，呈椭圆形状，有时也会呈现出类圆形。
其细胞膜柔软，而细胞壁则相对坚硬。
其大小和形态让它更容易在微生物中被识别和分离。
二、色素组成毕赤酵母具有特殊的色素组成，包括了叶黄素和类胡萝卜素等，这两种色素都属于类胡萝卜素类。
这种独特的色素组成，使毕赤酵母在生长过程中能够吸收更多的可见光，提高光合成的效率，从而更快地生长和繁殖。
三、菌落形态毕赤酵母在固体培养基上生长时，呈现出一种橙黄色的菌落，表面光滑，呈现凸起状。
这种菌落形态，在对毕赤酵母的鉴定和鉴别中有着非常重要的作用。
四、细胞壁结构毕赤酵母的细胞壁由多种不同的有机化合物组成，如蛋白质、糖类以及长链脂质。
这种复杂的结构，不仅能够保护细胞免受外界环境的伤害，还能够维持其在生长过程中必要的细胞形态。
同时，细胞壁的结构在毕赤酵母的营养生长和繁殖中也扮演着非常关键的角色。
五、内质网络结构毕赤酵母内质网的形态结构也非常特殊，其分布在整个细胞内，形成了一条条网状结构。
这种网状结构为毕赤酵母的新陈代谢和物质运输提供了强有力的支持。
六、染色体形态毕赤酵母的染色体为单核型，基因组大小为12M。
通过高通量测序技术的应用，当前已经整理出其完整的基因组序列，这为毕赤酵母在分子生物学和基因组学领域的研究提供了重要的参考材料。
七、膜蛋白结构膜蛋白是毕赤酵母的细胞膜中最为丰富的一类蛋白质。
其结构不仅决定了细胞膜的特性和生理功能，还可以作为药物研究和药物开发的重要靶点。
因此，对毕赤酵母膜蛋白结构的研究，对于开发新型的药物具有非常重要的意义。
总之，毕赤酵母的形态结构非常复杂，细致入微。
其大小、色素组成、菌落形态、细胞壁结构、内质网络结构、染色体形态以及膜蛋白结构，都为毕赤酵母的生长和繁殖提供了非常重要的保障。
巴斯德毕赤酵母
巴斯德毕赤酵母表达系统点击认领巴斯德毕赤酵母表达系统是近十年发展起来的真核表达体系，是目前最为成功的外源蛋白表达系统之一，与现有的其它表达系统相比，巴斯德毕赤酵母在表达产物的加工、外分秘、翻译后修饰以及糖基化修饰等方面有明显的优势，现已广泛用于外源蛋白的表达。
编辑摘要巴斯德毕赤酵母表达系统 - 简介十年代巴斯德毕赤酵母曾被用于生产单细胞蛋白（SCP），有很好的发酵基础，菌体密度可达100g/L干重。
其生长培养液的组分包括无机盐、微量元素、生物素、氮源和碳源，廉价而无毒。
它能在以甲醇为唯一碳源的培养基中快速生长，其中醇氧化酶AOX——甲醇代谢途径的关键酶可达细胞可溶性蛋白的30%。
而在葡萄糖、甘油或乙醇作为碳源的培养细胞中则检测不到AOX。
AOX的合成是在转录水平调控的。
其基因启动子具有明显的调控功能，可用于调控外源基因的表达。
此调控作用是由一般碳源抑制/解抑制及碳源特殊诱导又重机制控制的。
外源基因在甲醇以外的碳源中处于非表达状态，而在培养液中加入甲醇后，外源基因即被诱导表达。
巴斯德毕赤酵母中存在着一种称为微体的细胞器，其中大量合成过氧化物酶，因此也称为过氧化物酶体。
合成的蛋白质贮存于微体中，可免受蛋白酶的降解，且不对细胞产生毒害。
巴斯德毕赤酵母表达系统 - 毕赤酵母表达系统的特点自从1987年Cregg等首次用巴斯德毕赤酵母（Pichia pastoris）作为宿主表达外源蛋白以来,作为一种新的高效的表达系统，毕赤酵母越来越引起人们的重视，到1995年，已有四十多种外源蛋白在该宿主菌中获得表达。
而最近几年每年报道的在毕赤酵母中表达的外源基因就有几十种，且一年比一年多，与其它表达系统相比，毕赤酵母表达系统具有以下优势：1）含有特有的强有力的AOX（醇氧化酶基因）启动子，用甲醇可严格地调控外源基因的表达；2）表达水平高，即可在胞内表达，又可分泌型表达。
毕赤酵母中，报道的最高表达量为破伤风毒素C为12g/l，一般大于1g/l。
毕赤酵母实验操作手册
精心整理毕赤酵母表达实验手册大肠杆菌表达系统最突出的优点是工艺简单、产量高、生产成本低。
然而，许多蛋白质在翻译后，需经过翻译后的修饰加工，如磷酸化、糖基化、酰胺化及蛋白酶水解等过程才能转化成活性形式。
大肠杆菌缺少上述加工机制，不适合用于表达结构复杂的蛋白质。
另外，蛋白质的活性还依赖于形成正确的二硫键并折叠成高级核生物表达系统基因表达调控和蛋白修饰功能，避免了产物活性低，包涵体变性、复性等等间题［1］。
与大肠杆菌相比，酵母是单细胞真核生物，具有比较完备的基因表达调控机制和对表达产物的加工修饰能力，人们对酿酒酵母（Saccharomyces.Cerevisiae）分子遗传学方面的认识最早，酿酒酵母也最先作为外源基因表达的酵母宿主．1981年酿酒酵母表达了第一个外源基因一干扰素基因，随后又有一系列外源基因在该系统得到表达。
虽然干扰素和胰岛素已大量生产并在人群中广泛应用，但很大部分表达由实验室扩展到工业规模时，培养基中维特质粒高拷贝数的选择压力消失，质粒变得不稳定，拷贝数下降，而大多数外源基因的高效表达需要高拷贝数的维特，因此引起产量下降。
同时，实验室用培养基复杂而昂贵，采用工业规模能够接受的培养母（一。
⑷毕赤酵母中存在过氧化物酶体，表达的蛋白贮存其中，可免受蛋白酶的降解，而且减少对细胞的毒害作用。
Pichia.pastoris基因表达系统经过近十年发展，已基本成为较完善的外源基因表达系统，具有易于高密度发酵，表达基因稳定整合在宿主基因组中，能使产物有效分泌并适当糖基化，培养方便经济等特点。
利用强效可调控启动子AOX1，已高效表达了HBsAg、TNF、EGF、破伤风毒素C片段、基因工程抗体等多种外源基因，证实该系统为高效、实用、简便，以提高表达量并保持产物生物学活性为突出特征的外源基因表达系统，而且非常适宜子扩大为工业规模［4］。
目前美国FDA已能评价来自该系统的基因工程产品，最近来自该系统的Cephelon制剂已获得FDA批准，所以该系统被认为是安全的．Pichia.pastoris表达系统在生物工程领域将发挥越有中，需带有信号肽序列。
毕赤酵母抗菌肽发酵工艺流程
毕赤酵母抗菌肽发酵工艺流程一、毕赤酵母是啥呀。
毕赤酵母可厉害啦，它就像是一个小小的魔法工厂。
这种酵母呀，和咱们平时做面包用的酵母有点不一样呢。
它是专门用来生产抗菌肽的小能手。
抗菌肽是个好东西呀，就像我们身体里的小卫士，可以对抗那些坏细菌。
毕赤酵母有它独特的本事，能够在合适的环境里，按照我们想要的方式生产出抗菌肽。
二、发酵前的准备。
1. 酵母的挑选。
这就像是挑选手下的精兵强将。
我们得选那些活力满满的毕赤酵母菌株。
这些菌株得是健康的、强壮的，这样才能在发酵过程中表现出色。
不能选那些病恹恹的或者是很弱小的酵母，不然它们可干不好生产抗菌肽这个大任务。
2. 培养基的制作。
培养基就像是酵母的食物和小窝。
我们要精心调配培养基，就像给酵母做一顿美味又营养的大餐。
里面要有合适的碳源，比如说葡萄糖之类的，这就像是给酵母的能量棒。
还有氮源，像酵母提取物、蛋白胨等，这就像是酵母的蛋白质补充剂。
而且呢，还要调节好培养基的酸碱度，让酵母在里面感觉舒舒服服的，就像我们喜欢住在温馨的小房子里一样。
三、发酵过程。
1. 接种。
把选好的毕赤酵母接种到准备好的培养基里，这就像是把小种子种到土里一样。
这个过程要很小心，就像对待娇嫩的小宝贝。
接种的量也很有讲究呢，不能太多也不能太少。
太多了的话，酵母们可能会因为空间太挤、食物不够而打架；太少了呢，它们又会觉得孤单寂寞，生产抗菌肽的速度就会很慢。
2. 温度和搅拌。
发酵的时候，温度就像一个魔法数字。
要把温度控制在毕赤酵母最喜欢的那个度数，一般是二十多度的样子。
这个温度下，酵母们就像在温暖的阳光下一样，活力满满地开始工作。
同时，还要进行搅拌呢。
搅拌就像是给酵母们做按摩，让它们在培养基里均匀地分布，这样每个酵母都能充分接触到食物，也能更好地呼吸新鲜空气，然后就能开开心心地生产抗菌肽啦。
3. 通气。
酵母们和我们一样，也需要呼吸新鲜空气呢。
所以在发酵过程中要给它们通气。
就像我们打开窗户让新鲜空气进来一样。
库氏毕赤酵母生长温度
库氏毕赤酵母生长温度库氏毕赤酵母（Kluyveromyces lactis）是一种广泛存在于自然环境中的酵母菌，是工业上常用的微生物菌种之一。
它能够利用多种碳源和氮源进行生长和代谢，具有高效的产乳酸能力。
库氏毕赤酵母在食品、医药、化工等领域有着广泛的应用。
一、库氏毕赤酵母的生长特性1. 生长速率快：库氏毕赤酵母在适宜条件下生长速率较快，繁殖周期约为2-3小时。
2. 耐受性强：库氏毕赤酵母对温度、pH值、盐浓度等环境因素具有较强的耐受性，在不同条件下都能够适应生长。
3. 代谢多样性：库氏毕赤酵母能够利用多种碳源和氮源进行代谢，包括葡萄糖、乳糖、果糖等单糖以及淀粉、纤维素等复杂碳水化合物。
二、库氏毕赤酵母的生长温度1. 最适生长温度：库氏毕赤酵母的最适生长温度为30℃-37℃。
2. 生长温度范围：库氏毕赤酵母的生长温度范围比较广，能够在10℃-45℃的范围内生长，但在较低或较高温度下其生长速率会受到一定程度的影响。
3. 高温抑制：当库氏毕赤酵母暴露在较高的温度下时，会出现细胞死亡、代谢减缓等现象，导致发酵效果下降。
4. 低温限制：当库氏毕赤酵母暴露在较低的温度下时，会出现细胞增殖缓慢、代谢减弱等现象，导致发酵效果下降。
三、影响库氏毕赤酵母生长的因素1. 温度：库氏毕赤酵母对于不同温度的适应性不同，过高或过低的温度都会对其产生一定程度的影响。
2. pH值：库氏毕赤酵母对于不同pH值的适应性也有所不同，过高或过低的pH值都会影响其生长和代谢。
3. 氧气浓度：库氏毕赤酵母需要一定的氧气浓度进行呼吸作用，但过高或过低的氧气浓度都会对其产生影响。
4. 碳源和氮源：库氏毕赤酵母需要合适的碳源和氮源才能进行正常的生长和代谢。
四、库氏毕赤酵母在工业上的应用1. 食品工业：库氏毕赤酵母可以用于奶制品、面包、啤酒等食品的发酵和加工中。
2. 医药工业：库氏毕赤酵母可以用于制备乳酸、维生素B12等医药原料。
3. 化工工业：库氏毕赤酵母可以用于制备有机溶剂、化学品等化工原料。
《毕赤酵母(Pichiapastoris)LNF013产纳豆激酶发酵优化及发酵动力学研究》
《毕赤酵母（Pichia pastoris）LNF013产纳豆激酶发酵优化及发酵动力学研究》一、引言随着生物技术的快速发展，酶类物质在工业、医药及生物工程等领域的应用日益广泛。
纳豆激酶作为一种天然存在的溶栓酶，因其具有良好的生物活性和稳定性而备受关注。
本文选取毕赤酵母（Pichia pastoris）LNF013作为纳豆激酶的生产菌株，通过对其发酵过程进行优化及发酵动力学研究，以期提高纳豆激酶的产量及发酵效率。
二、材料与方法2.1 材料本研究所用材料包括毕赤酵母LNF013菌株、发酵培养基、酶活性检测试剂等。
2.2 方法（1）发酵过程优化：通过调整培养基组成、发酵温度、pH 值、接种量等参数，对毕赤酵母LNF013产纳豆激酶的发酵过程进行优化。
（2）发酵动力学研究：采用动力学模型对发酵过程进行描述，分析各参数对纳豆激酶产量的影响，并建立相应的数学模型。
三、结果与分析3.1 发酵过程优化结果通过调整各参数，我们发现：（1）培养基组成：适当增加碳源、氮源浓度有助于提高纳豆激酶的产量。
（2）发酵温度：在30℃左右，毕赤酵母LNF013产纳豆激酶的活性较高。
（3）pH值：pH值为6.5左右时，菌株生长及纳豆激酶产量达到最佳状态。
（4）接种量：适宜的接种量有助于提高菌株的生长速度及纳豆激酶的产量。
3.2 发酵动力学研究结果通过建立动力学模型，我们发现：（1）菌体生长与纳豆激酶产量之间存在明显的相关性，可通过监测菌体生长情况来预测纳豆激酶的产量。
（2）各参数对纳豆激酶产量的影响程度不同，其中培养基组成、温度和pH值对纳豆激酶产量的影响最为显著。
四、讨论通过对毕赤酵母LNF013产纳豆激酶的发酵过程进行优化及发酵动力学研究，我们找到了提高纳豆激酶产量的关键因素。
在实际生产中，可根据实际情况调整这些参数，以实现更高的纳豆激酶产量及发酵效率。
此外，建立的动力学模型有助于预测和调控发酵过程，为工业化生产提供有力支持。
毕赤酵母生长温度
毕赤酵母生长温度毕赤酵母是一种常见的酵母菌，广泛应用于食品工业中的发酵过程。
而酵母菌的生长温度对其生长速度和产酒效果有着重要影响。
本文将探讨毕赤酵母的适宜生长温度范围以及不同温度下的生长特点。
适宜生长温度范围毕赤酵母的适宜生长温度范围较广，一般在15℃至35℃之间。
在这个温度范围内，酵母菌的生长速度较快，代谢活性高，能够有效地发酵产生酒精和二氧化碳。
相比于低温和高温环境，适宜温度下的毕赤酵母菌能够更好地利用底物，产生更多的发酵产物。
低温下的生长特点当温度低于15℃时，毕赤酵母的生长速度显著下降。
在低温环境下，酵母菌的代谢活性减弱，细胞分裂速度变慢，导致生长周期延长。
此外，低温还会影响酵母菌的细胞膜流动性，使得细胞内物质的转运速率减缓。
因此，在低温条件下，毕赤酵母的发酵效果较差，产酒速度较慢。
高温下的生长特点当温度超过35℃时，毕赤酵母的生长速度也会受到抑制。
高温环境下，酵母菌的细胞膜脂肪酸组成发生变化，导致细胞膜的渗透性增加，进而影响细胞的生长和代谢。
此外，高温还会导致酵母菌内部蛋白质的失活和DNA的损伤，进一步影响其生长和繁殖能力。
因此，高温条件下的毕赤酵母菌生长较慢，发酵效果也较差。
温度对毕赤酵母发酵的影响毕赤酵母在发酵过程中，温度是一个重要的调控因素。
不同温度下，酵母菌的代谢途径和产物生成会发生变化。
适宜温度下，毕赤酵母菌能够充分利用底物，产生较多的酒精和二氧化碳。
而在过高或过低的温度条件下，酵母菌的代谢途径会出现异常，导致产物生成不稳定甚至产生副产物。
温度还会影响酵母菌的菌种稳定性和抗性。
适宜温度下的毕赤酵母菌生长得较为稳定，细胞数量较多，并且对外界环境的变化有较强的适应能力。
而在过高或过低的温度条件下，酵母菌的菌种稳定性会下降，易受到外界环境的干扰和竞争菌种的入侵。
毕赤酵母的生长温度对其生长速度和产酒效果有着重要影响。
适宜生长温度范围为15℃至35℃，低温和高温条件下的生长特点分别为生长速度减慢和发酵效果较差。
毕赤酵母菌株类型
毕赤酵母菌株类型
毕赤酵母是一种广泛存在于自然界中的酵母菌，其在食品、饮料、
医药等领域中有着广泛的应用。
毕赤酵母的种类繁多，按照其形态、
生理特性和遗传特征等方面的不同，可以将其分为以下几类。
一、形态分类
毕赤酵母的形态分类主要是根据其菌落形态和细胞形态来进行的。
根
据菌落形态的不同，毕赤酵母可以分为光滑型、粗糙型、乳白色型、
乳酸型等。
而根据细胞形态的不同，毕赤酵母可以分为球形、椭圆形、卵圆形、长条形等。
二、生理分类
毕赤酵母的生理分类主要是根据其代谢特性和生长条件来进行的。
根
据代谢特性的不同，毕赤酵母可以分为醇型、乳酸型、乙酸型、丙酮
酸型等。
而根据生长条件的不同，毕赤酵母可以分为厌氧型、好氧型、耐酸型、耐碱型等。
三、遗传分类
毕赤酵母的遗传分类主要是根据其基因型和表型来进行的。
根据基因
型的不同，毕赤酵母可以分为野生型、突变型、重组型等。
而根据表
型的不同，毕赤酵母可以分为高产型、低产型、耐受型、敏感型等。
四、应用分类
毕赤酵母的应用分类主要是根据其在不同领域中的应用情况来进行的。
根据应用领域的不同，毕赤酵母可以分为食品酵母、饮料酵母、医药
酵母、工业酵母等。
总之，毕赤酵母的种类繁多，不同的分类方法可以从不同的角度来了
解和研究毕赤酵母的特性和应用。
在未来的研究中，我们需要更加深
入地了解毕赤酵母的分类和特性，以更好地发挥其在各个领域中的应
用价值。
毕赤酵母表达载体及宿主菌介绍
由于甲醇营养型酵母菌体内无天然质粒，所以携带外源基因的重组体必须整合于染色体中才能实现外源基因的表达。
整合表达的优点在于保持外源基因稳定性并可产生多拷贝基因。
典型的毕赤氏酵母表达载体含有醇氧化酶基因的调控序列，主要的结构包括：5’AOX1启动子片段、多克隆位点(MCS)、转录终止和polyA形成基因序列(TT)、筛选标记(His4或Zeocin)、3’AOX1基因片段，作为一个能在大肠杆菌中繁殖扩增的穿梭质粒，它还有部分pBR322质粒或COLE1序列。
如果是分泌型表达载体，在多克隆位点的前面，外源基因的5’端和启动子的3’端之间插人了分泌作用的信号肽序列。
在这个分泌信号的引导下，外源蛋白在内质网和高尔基体中经修饰和加工后能够由胞内转移至胞外，将成熟的蛋白质分泌到细胞外。
为方便于操作，通常表达载体都是穿梭质粒。
表达载体与酵母染色体有单交换和双交换整合2种方式，单交换整合时，或插入A0X1位点，或插入his位点。
有文献报道，以his4作为整合位点时，染色体突变株与表达盒间存在基因转换，偶而可使Laz表达盒丢失，故AOX1位点更好。
一般认为，单交换转化效率比双交换效率高，且易得到多拷贝整合，其发生机制可能是重复单交换引起的。
携带外源基因的表达载体可通过电穿孔、原生质体生成法或全细胞法转化酵母细胞。
甲醇酵母转化和大肠埃希氏菌转化不同之处是前者较为复杂。
对于大肠埃希氏菌而言，只要把重组表达载体导入细胞体内即可。
因其载体上携带有自身复制原点，可随染色体复制而复制，重组表达载体能够稳定存在。
在甲醇酵母系统中，所有的表达载体均不含酵母复制原点。
这就是说，导入酵母体内的重组表达载体只有和酵母染色体上的同源区发生重组，整合到染色体上，外源基因才能够稳定存在，外源蛋白才能得到稳定表达，这种整合的转化子一旦形成就非常稳定。
如果转化后的重组表达载体未能整合到染色体上，而是以游离的附加体形式存在，这种转化子就不稳定，重组表达载体极易丢失。
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毕赤酵母及级胰岛素——优思灵巴斯德毕赤酵母(P／ch／a pastor／s)表达系统是目前最优秀、应用最广泛的外源基因表达系统之一，它不但克服了大肠杆菌表达系统不能表达结构复杂的蛋白质、表达的蛋白多形成不溶性包涵体、背景蛋白多、表达产量低等缺陷，弥补了哺乳类细胞、昆虫细胞表达系统操作复杂、表达水平低、产业化生产造价昂贵的不足，还具有其他酵母表达系统无法比拟的优越之处。
酵母作为一种最简单的单细胞真核生物, 兼有原核生物和真核生物的某些优点。
毕赤酵母生活史与酿酒酵母十分相似。
这使得毕赤酵母的发酵工程部分可与酿酒酵母相同, 从而节省了重新购臵设备和进行新技术探索的巨额花费, 这是用其他方法进行大规模商品化的外源蛋白生产所不能比拟的优势。
现将毕赤酵母表达系统优点概括如下:
①毕赤酵母更接近高等真核细胞, 不含内毒素和其他有害物质, 使用安全;
②同酿酒酵母一样, 繁殖速度快, 对培养条件要求低, 培养基价廉, 能进行高密度培养, 且能耐受较高的液体静压, 便于工业化生产;
②该系统的载体能与核基因组进行整合, 因此构建的菌株较稳定, 一般不会
在传代过程中出现丢失现象;
③在毕赤酵母中表达的蛋白既可存在于胞内, 又可在分泌信号作用下将蛋白
分泌至胞外;
⑤具有强有力的易控制的乙醇氧化酶基因(AOX1)或磷酸甘油酸脱氢酶( GAP) 基因启动子作为外源基因启动子, 可对外源蛋白的表达进行严格调控;
⑥作为真核表达系统, 可对表达的外源蛋白进行翻译后的加工和修饰, 即二硫键的形成、脂肪的酰化、蛋白磷酸化、折叠、信号序列加工、N糖基化、O糖基化, 从而使目的蛋白具有所应有的生物学活性;
⑦外源蛋白表达量高, 同时自身分泌的背景蛋白少, 表达产物易于纯化;
⑧和酿酒酵母相比, 毕赤酵母中加到翻译蛋白上的糖链长度平均每条侧链为8～14个甘露糖残基, 比酿酒酵母每条侧链平均50～150个甘露糖残基短得多。
毕赤酵母极少出现过渡糖基化, 可避免外源蛋白生产过强的免疫原性或因糖链过长干扰外源蛋白正确折叠而影响其功能, 而且糖链中不含具有致敏作用的α21, 32甘露糖, 使其使用更加安全。
★ 独特的毕赤酵母表达技术
胰岛素
需要破壁
原核
胰岛素
分泌型，不需破壁
真核
毕赤酵母与其它表达系统相比的优点
在公开的资料中使用）
名词：
启动子：对遗传转录起发动作用的基因。
DNA分子上能与RNA聚合酶结合并形成转录起始复合体的区域，在许多情况下，还包括促进这一过程的调节蛋白的结合位点。
（毕赤酵母甲醇氧化酶(alcohol oxidase，AOX)基因的强启动子特别适用于外源基因的调控表达；通过质粒整合到毕赤酵母基因组的外源基因结构稳定，不易丢失；且外源基因能以高拷贝数整合到毕赤酵母基因组中，能够筛选到高表达菌株）
翻译后的加工与修饰：……肽链从核蛋白体释放后，经过细胞内各种修饰处理过程，成为有活性的成熟蛋白质，称为翻译后加工（post-translational processing）包括高级结构的加工修饰、一级结构的加工修饰和靶向运输三个方面。
糖基化：在酶作用下，蛋白质或脂质分子添加糖残基的过程。
（蛋白质经过糖基化作用之后，可形成糖蛋白。
）
免疫原性：抗原能诱导机体产生体液免疫或细胞免疫应答的性能。
（毕赤酵母对外源蛋白产物进行N一乙酰糖基化修饰的结构为高甘露糖型，糖链平均为8～14个甘露糖基，更接近于高等生物，且聚糖末端不含 1，3连接的甘露糖残基(有强的免疫原性)，因而适用于临床应用）
安全：纯（外源表达、不易糖基化）
有效：生物活性（翻译后加工与修饰？）
经济：易培养、高表达。