脂类细胞化学——苏丹Ⅲ染色法
苏丹iii染液成分
苏丹III染液成分一、引言苏丹III染液是一种常用的组织染色剂，广泛应用于医学、生物学和病理学领域。
本文将对苏丹III染液的成分进行详细的探讨，包括其化学组成、制备方法以及应用领域等方面。
二、化学组成苏丹III染液的主要成分是苏丹III染料，它属于亚硝基苯胺类染料。
苏丹III染料的化学结构为苯胺基团与亚硝基团的结合物，其化学式为C22H16N4O3。
除了苏丹III染料外，苏丹III染液中还包含了一些辅助成分，如染液稳定剂、溶剂和pH调节剂等。
这些辅助成分的添加可以提高染液的稳定性和染色效果。
三、制备方法苏丹III染液的制备方法相对简单，一般可以按照以下步骤进行：1.准备苏丹III染料：将苏丹III染料溶解于适量的溶剂中，如乙醇或甲醇，并搅拌均匀，得到苏丹III染料溶液。
2.添加辅助成分：将染液稳定剂、溶剂和pH调节剂等辅助成分逐步加入苏丹III染料溶液中，并搅拌均匀，得到最终的苏丹III染液。
3.过滤和灭菌：为了去除杂质和微生物，可以将苏丹III染液进行过滤和灭菌处理，以保证染液的纯净度和无菌性。
4.包装和储存：将制备好的苏丹III染液进行适当的包装和储存，以防止其受到外界环境的影响。
四、应用领域苏丹III染液在医学、生物学和病理学等领域有着广泛的应用。
下面将分别介绍其在这些领域中的应用。
4.1 医学应用在医学领域，苏丹III染液常用于组织切片的染色。
它可以染色细胞核和细胞质，使组织切片在显微镜下更清晰地展示细胞结构和组织形态。
这对于医生进行病理诊断和研究具有重要意义。
4.2 生物学应用在生物学研究中，苏丹III染液可用于染色细胞内的脂质。
脂质是细胞内常见的有机化合物，苏丹III染液可以与脂质结合形成特定的染色物质，从而帮助研究人员观察和分析细胞内脂质的分布和含量。
4.3 病理学应用在病理学领域，苏丹III染液可用于染色肿瘤组织。
由于肿瘤组织中脂质含量较高，苏丹III染液可以与肿瘤细胞内的脂质结合，使肿瘤组织呈现红色或橙色，有助于病理医生对肿瘤的定性和定量分析。
脂肪鉴定实验之苏丹Ⅲ和苏丹Ⅳ性质配制及使用方法
脂肪鉴定实验之苏丹Ⅲ和苏丹Ⅳ性质配制及使用方法前几天，有学生问我，“老师关于课本中的脂肪的检测观察实验有两种方案，其中方案一是向花生子叶制作的组织样液里滴加苏丹Ⅲ或苏丹Ⅳ来检测和观察，但是苏丹Ⅲ或苏丹Ⅳ本来就是有颜色是不是有颜色干扰，如果苏丹Ⅲ和苏丹Ⅳ本身颜色就是橘黄色和红色，那我怎么判断脂肪被染色了呢？”其实关于这个知识点，以前教书都是一笔带过，平时练习考试中也没有出现过这种类型的考题，也就没有真正的去探讨这个问题。
学生的刁钻问题就不得不让我更深入地去了解加苏丹Ⅲ或苏丹Ⅳ两种染料了，下面分享我从网络上整理的加苏丹Ⅲ或苏丹Ⅳ相关知识。
1、苏丹III是一种化学染色剂，红棕色粉末；生物染色剂，如脂肪及其类似物质染色。
主要是用于石油、机油和其他的一些工业溶剂中，目的是使其增色，也用于鞋、地板等的增光；具有致癌性，对人体的肝肾器官具有明显的毒性作用。
2、苏丹Ⅳ为深褐色，苏丹Ⅳ可用于检验脂肪（脂肪被染成红色）。
对脂肪的亲和力比苏丹III好。
从这里可以看出，两种染色剂本身的颜色和与脂肪染色后的颜色还是有区别的，所以可以利用制作的组织样液里滴加苏丹Ⅲ或苏丹Ⅳ来检测和观察。
3、苏丹Ⅲ和苏丹Ⅳ的配制方法：苏丹红Ⅲ配制：取0.1g苏丹Ⅲ，溶解在20ml95%酒精中。
苏丹Ⅳ溶液的配制称取0.1 g苏丹Ⅳ干粉，溶于50 mL丙酮中，再加入体积分数为70%的酒精50 mL，充分混合后即可使用。
4、什么是浮色，为什么用酒精洗？因为苏丹Ⅲ本身有颜色，它碰到脂肪后，会变成橘黄色，与遇脂肪前的颜色不同，所以要检验组织中的脂肪，就必须要除掉那些未与脂肪接触的多余的苏丹三染液，以免对检验结果造成影响。
这个浮色就是指那些没有与脂肪接触而变色的多余的苏丹三染液的颜色。
苏丹三不溶于水，易溶于酒精，所以要用酒精洗，才能把多余的苏丹三溶解并洗净。
5、为什么苏丹Ⅳ比苏丹III染色时间短？苏丹Ⅲ和苏丹Ⅳ染色时间不能太长，时间太长染色太深，反而影响观察。
第四次实验 脂类化学—苏丹III染色法
在铺片时应掌握好力度，若用力过大，则肠系膜容易被撕破，铺片不成功；若用力过小，则细胞不能被铺呈单层，影响染色及观察。
【实验步骤】
1、断头法处死小鼠，置于解剖盘中，剪开腹腔，用镊子提起小肠，将盖玻片紧贴于肠系膜，用剪刀连同盖玻片和其上粘附的肠系膜剪下，反扣与载玻片上，由盖玻片一边滴入甲醛，使其渗入盖玻片与载玻片间的空隙里，固定20min。
2、吸蒸馏水滴入载玻片与盖玻片之间冲洗，用滴管不断吸去液体，以除去固定液。
3、用70%乙醇溶液代替蒸馏水重复步骤2的操作，再进行一次冲洗。
苏丹染料是偶氮染料，它对脂类的显示是一种简单的物理变化。
苏丹染料是一种脂溶性染料，易溶于乙醇但更易溶于脂肪，所以当含有脂肪的标本与苏丹染料接触时，苏丹染料即脱离乙醇而溶于该含脂肪结构中而使其显色。
脂肪染料一般选用有机溶剂做溶剂，丙酮和乙醇对染料和脂肪都是很好的溶剂，这样可以染色大的脂肪积累块，但是小的脂肪滴会溶解。60%异丙醇当溶剂，可以减轻脂类的溶解。丙二醇或磷酸三乙酯不会溶解脂类物质，但是能溶解染料，是比较理想的溶剂。用这些溶剂配的染料溶液要过滤以去掉沉淀，防止蒸发，因蒸发会引起染料在材料中积累。常用相同溶剂洗掉多余的染料，然后再用水洗，可以防止多余的染料在材料中沉淀。
㈡实验中注意事项有：
1.在抓握小鼠时，应迅速掐住其两耳之间的皮肤，使其头部不可扭动，并用同一只手掐住其背部至尾巴的皮肤，使小鼠整个腹部皮肤紧绷，不能反击。
脂肪染色法
脂肪染色
【试剂配制】
苏丹III染液：
苏丹III 0.15g
70%酒精100ml。
两者充分混合后，使苏丹III充分溶解，最后行成饱和溶液备用。
试剂瓶密封，使用时过滤。
【染色方法】
（1）冰冻切片厚度8～15μm；
（2）Harris苏木素染约1分钟；
（3）自来水洗后，用0.5%盐酸乙醇分化，再水洗直至胞核返蓝为止；
（4）蒸馏水洗后移入70%乙醇内浸洗一下；
（6）浸入苏丹III染液中约30分钟或更长时间。
如果置于56℃温箱中可适当缩短时间；
（7）在70%乙醇分化数秒钟；
（8）待切片在空气中稍凉干或用冷风机吹干；
（9）及时用明胶甘油封片。
【结果】脂肪呈橘红色，脂肪酸不着色，胞核淡蓝色。
实验报告 脂类的化学——苏丹三染色
姓名 xxxx 班级 xxxxxx 同组人 xxxxxxxx 科目细胞生物学实验题目脂类的化学——苏丹Ш染色组别第2组一．实验目的1.熟悉脂类的显示技术。
2.了解脂类在细胞中的分布。
二．实验原理脂肪是体内储存能量和供给能量的重要物质，根据其性质可以分为中性脂肪、脂肪酸、胆固醇、鞘磷脂等。
很多细胞都含有脂肪，游离状态的脂肪呈小滴状悬浮于细胞质内，比较显著的如肝细胞。
脂肪小滴可以集合，将细胞质及细胞核挤到一旁，如脂肪细胞。
脂肪不溶于水，易溶于浓乙醇、苯、氯仿和乙醚等，因此制作脂类标本一般不用石蜡切片，而用冰冻切片或者铺片法以保存脂类，固定多用甲醛类固定液。
其染色方法有脂溶性染料显示法、化学显示法和特异染色法等。
脂肪染料一般选用有机溶剂做溶剂，丙酮和乙醇对染料和脂肪都是很好的溶剂，这样可以染色大的脂肪积累块，但是小的脂肪滴会溶解。
60%异丙醇当溶剂，可以减轻脂类的溶解。
丙二醇或磷酸三乙酯不会溶解脂类物质，但是能溶解染料，是比较理想的溶剂。
用这些溶剂配的染料溶液要过滤以去掉沉淀，防止蒸发，因蒸发会引起染料在材料中积累。
常用相同溶剂洗掉多余的染料，然后再用水洗，可以防止多余的染料在材料中沉淀。
用锇酸固定的脂肪不溶于无水乙醇、二甲苯等类似的液体，可用于石蜡切片，但是脂肪的标本一般不用石蜡切片或火棉胶包埋，而用如下方法：冰冻切片，明胶包埋冰冻切片，铺片法。
本实验中使用的脂溶性染料显示法利用苏丹染料中的苏丹III、苏丹IV或者苏丹黑等溶于脂类，而使脂类显色的原理显示脂类，使用时，要注意选择溶剂，要求既要溶解苏丹染料，又不溶掉脂肪。
苏丹染料是偶氮染料，它对脂类的显示是一种简单的物理变化。
苏丹染料是一种脂溶性染料，易溶于乙醇但更易溶于脂肪。
当它与含有脂类的标本接触时，苏丹染料即脱离乙醇而溶于该含脂结构中使其显色。
三．实验仪器及试剂1.仪器解剖盘，解剖剪，镊子，盖玻片，载玻片，显微镜，胶头滴管2.试剂苏丹Ш染液，甲醛钙溶液，70%乙醇溶液，蒸馏水3.材料小白鼠一只四．实验步骤1.断头法处死小鼠，置于解剖盘中。
脂肪鉴定的实验。观察细胞质流动实验
二、显微镜的结构：
目镜
粗准焦螺旋
镜筒
细准焦螺旋 镜臂
压片夹
载物台 遮光器与光圈 反光镜物镜镜柱镜座实验三：在显微镜下观察字
1.在载玻片上写下字母 A 2.放在显微镜下观察
实验材料
1.菠菜叶 2.显微镜 3.蒸馏水
实验步骤：
1.取菠菜叶稍带叶肉细胞的下表皮，放在载 玻片上 2.滴一滴蒸馏水，盖上载玻片 3.放在显微镜下，先用低倍镜下找到绿色菠 菜叶，再用低倍镜观察
实验现象
实验分析：
未观察到细胞质流动的原因： 温度过低，新陈代谢慢，细胞质流动不明 显 细胞切片太厚，观察不明显
实验一：脂肪的鉴定
实验原理
苏丹Ⅲ为一种脂肪染色剂(易溶解于酒精，不 溶解于水)。苏丹Ⅲ染液遇脂肪的颜色反应为橘黄 色。其反应式为:
脂肪
苏丹Ⅲ
橘黄色
实验材料
浸泡过的花生一粒，苏丹Ⅲ染液，质量分 数为50%的酒精溶液，滤纸，小刀，显微 镜
实验步骤
取材：花生种子（浸泡３h），去皮，将削成薄片 从培养皿中选取最薄的切片，用毛笔蘸取放 在载玻片中央； 在薄片上滴加苏丹Ⅲ 染液3滴，染色２min
制片：
滴加体积分数为50%的酒精溶液2滴，洗去浮色 吸去余液，滴1-2滴蒸馏水，盖上盖玻片
观察： 先在低倍镜下找到已着色的薄片，后用高倍镜观察
结果： 有被染成橘黄色的脂肪微粒
实验现象
拓展实验
将羊油放入试管中，滴入五滴苏丹Ⅲ染液， 另取一试管，滴入五滴苏丹Ⅲ染液，
实验二：观察细胞质流动
实验原理 叶绿体一般是绿色的、扁平的椭球形或球行， 可以用光学显微镜的高倍镜观察得到。 活细胞的细胞质是流动的，有助于新陈代谢 物质的转换，但是细胞质是胶质，不易观 察到它的流动，我们一般以其它的细胞器 为参照物来观察细胞质的流动。
实验报告脂类的化学——苏丹三染色
一．实验目的1.熟悉脂类的显示技术。
2.了解脂类在细胞中的分布。
二．实验原理脂肪是体内储存能量和供给能量的重要物质，根据其性质可以分为中性脂肪、脂肪酸、胆固醇、鞘磷脂等。
很多细胞都含有脂肪，游离状态的脂肪呈小滴状悬浮于细胞质内，比较显著的如肝细胞。
脂肪小滴可以集合，将细胞质及细胞核挤到一旁，如脂肪细胞。
脂肪不溶于水，易溶于浓乙醇、苯、氯仿和乙醚等，因此制作脂类标本一般不用石蜡切片，而用冰冻切片或者铺片法以保存脂类，固定多用甲醛类固定液。
其染色方法有脂溶性染料显示法、化学显示法和特异染色法等。
脂肪染料一般选用有机溶剂做溶剂，丙酮和乙醇对染料和脂肪都是很好的溶剂，这样可以染色大的脂肪积累块，但是小的脂肪滴会溶解。
60%异丙醇当溶剂，可以减轻脂类的溶解。
丙二醇或磷酸三乙酯不会溶解脂类物质，但是能溶解染料，是比较理想的溶剂。
用这些溶剂配的染料溶液要过滤以去掉沉淀，防止蒸发，因蒸发会引起染料在材料中积累。
常用相同溶剂洗掉多余的染料，然后再用水洗，可以防止多余的染料在材料中沉淀。
用锇酸固定的脂肪不溶于无水乙醇、二甲苯等类似的液体，可用于石蜡切片，但是脂肪的标本一般不用石蜡切片或火棉胶包埋，而用如下方法：冰冻切片，明胶包埋冰冻切片，铺片法。
本实验中使用的脂溶性染料显示法利用苏丹染料中的苏丹III、苏丹IV或者苏丹黑等溶于脂类，而使脂类显色的原理显示脂类，使用时，要注意选择溶剂，要求既要溶解苏丹染料，又不溶掉脂肪。
苏丹染料是偶氮染料，它对脂类的显示是一种简单的物理变化。
苏丹染料是一种脂溶性染料，易溶于乙醇但更易溶于脂肪。
当它与含有脂类的标本接触时，苏丹染料即脱离乙醇而溶于该含脂结构中使其显色。
三．实验仪器及试剂1.仪器解剖盘，解剖剪，镊子，盖玻片，载玻片，显微镜，胶头滴管2.试剂苏丹Ш染液，甲醛钙溶液，70%乙醇溶液，蒸馏水3.材料小白鼠一只四．实验步骤1.断头法处死小鼠，置于解剖盘中。
剪开腹腔，用镊子提起小肠将盖玻片紧贴于肠系膜，并在其下放置一载玻片，用剪将连同载玻片和其上粘着的肠系膜取下。
脂类染色
脂类染色脂肪和类脂（磷脂、糖脂、固醇脂等）统称为脂类。
它是构成人体组织的正常成分，不溶于水而易溶于酒精、乙醚、氯仿等脂溶剂中。
在化学组成上，脂类属于脂肪酸的酯或与这些酯有关的物质。
脂类的主要功能是氧化供能。
脂肪主要存积于脂肪组织中，并以油滴状的微粒存在脂肪细胞浆内。
在病理检验中，脂类染色法最常用以证明脂肪变性，脂肪栓子以及肿瘤的鉴别。
脂类染色使用最广泛的染料是苏丹染料，最常用的有苏丹Ⅲ，苏丹Ⅳ，苏丹黑及油红O等。
脂肪被染色，实际上是苏丹染料被脂肪溶解吸附而呈现染料的颜色。
经研究认为组织中脂质在液态或半液态时，对苏丹染料着色效果最好。
根据这一原理，适当提高温度（37℃-60℃）对组织切片染色效果是有好处的。
脂类染色，用冰冻或石蜡切片，以水溶性封固剂封固，如甘油明胶和阿拉伯糖胶等。
一、苏丹Ⅲ(Sudan Ⅲ)染色法：操作方法：（1）固定于10%甲醛的组织。
（2）水洗后采用冰冻或石蜡切片。
（3）经蒸馏水后，浸染于Harris苏木素或明矾苏木素中淡染1-2分钟。
（4）自来水冲洗。
（5）水洗后，移入70%酒精5秒钟。
（6）投入苏丹Ⅲ染液中约30分钟或更长时间，置于56℃温箱中。
（7）在70%酒精中洗涤5-10秒钟。
（8）洗于蒸馏水中，然后将切片移于载玻片上。
（9）切片移于玻片上，将切片周围的水分小心擦掉。
（10）甘油明胶封固。
结果：脂肪呈橙红色或鲜红色或黑色，胆脂素呈淡红色，脂肪酸不着色，细胞核呈蓝色。
试剂配制：1. 苏丹Ⅲ染液配法：将0.15克苏丹Ⅲ溶解于100ml70%酒精或纯丙酮和70%酒精混合液中（各50ml），临用时过滤，所得滤液即为饱和浓度。
注：浸染时，容器必须盖好，否则酒精或丙酮挥发，染料沉淀。
2.甘油明胶配制：明胶 40g蒸馏水 210ml甘油 250ml石碳酸结晶 5ml先将明胶浸入蒸馏水中2小时或更长时间，然后加甘油和石碳酸，加热15分钟，摇搅直至混合液均匀为止。
二、苏丹Ⅳ(Sudan Ⅳ)染色法：苏丹Ⅳ又名猩红，是苏丹Ⅲ的衍生物，作为脂肪染剂，经各地实验证明，其结果优于苏丹Ⅲ。
脂类细胞化学—苏丹Ⅲ染色法
姓名菜星星班级生命基地班学号 201000140@@@ 同组者：@@@ 科目细胞生物学实验题目脂类细胞化学—苏丹Ⅲ染色法组别 @@@脂类细胞化学—苏丹Ⅲ染色法【实验目的】1.了解动物细胞融合的常用方法2.学习化学融合和电融合的基本操作过程3.观察动物细胞融和过程中细胞的行为和变化【实验原理】A.细胞融合的方法细胞融合是指在自发或者诱导条件下，两个或两个以上细胞合并为双核或者多核细胞的过程。
目前人们已经发现有很多方法可以诱导细胞融合，包括病毒诱导融合、化学诱导融和和电激诱导融合。
1.病毒诱导融合仙台病毒、牛痘病毒、新城鸡瘟病毒和疱疹病毒等可以介导细胞的融合。
这类病毒的被膜中有融合蛋白，可介导病毒同宿主细胞融合，同时也可介导细胞与细胞的融合。
用紫外线灭活后，这些病毒即可诱导细胞发生融合。
但该法由于病毒的灭活较为复杂，故实验室多不采用此法用于细胞的融合。
2.化学诱导融合很多化学试剂能够诱导细胞融合，如聚乙二醇()、二甲基亚砜、山梨醇、甘油、溶血性卵磷脂、磷脂酰丝氨酸等。
这些物质能够改变细胞膜脂质分子的排列，在去除这些物质之后，细胞膜趋向于恢复原有的有序结构。
在恢复过程中想接触的细胞由于接口处脂质双分子层的相互亲和与表面张力，细胞膜融合，胞质流通，发生融合。
化学诱导方法，操作方便，诱导融合的概率比较高，效果稳定，适用于动、植物细胞，但对细胞具有一定的毒性。
PEG是广泛使用的化学融合剂。
3.电激诱导融合包括电诱导、激光诱导等。
其中，电诱导是先使细胞在电场中极化成为偶极子，沿电力线排布成串，再利用高强度、短时程的电脉冲击破细胞膜，细胞膜的脂质分子发生重排，由于表面张力的作用，两细胞发生融合。
电诱导方法具有融合过程易控制、融合概率高、无毒性、作用机制明确、可重复性高等优点。
B.PEG诱导细胞融合聚乙二醇(PEG)结构为：HOH2C(CH20CH2)nCH2OH，为一系列不同相对分子量的多聚体。
相对分子质量在200-6000均可用作细胞融合剂。
脂类细胞化学--苏丹Ⅲ染色法实验报告讲解
姓名班级 13级生命基地班学号同组者：科目细胞生物学实验实验题目脂类细胞化学--苏丹III染色法【实验题目】脂类细胞化学--苏丹III染色法【实验目的】1. 了解脂肪染色的原理、掌握脂类标本制片；2. 学习用苏丹III染色法进行脂肪细胞的染色技术；3. 学会用断头法处理小白鼠以及小白鼠的解剖方法。
【实验材料与用品】1. 试剂：苏丹Ⅲ染液、70%乙醇溶液、甲醛钙2. 器具：显微镜，载玻片，盖玻片，胶头滴管，镊子，剪刀，解剖盘3. 材料：小白鼠【实验原理】脂类包括的范围很广，有单纯脂、复合脂、衍生脂等。
脂肪依其性质可分为中性脂肪、脂肪酸、胆固醇、鞘磷脂以及其他类脂质。
脂肪是体内储存能量和供给能量的重要物质。
很多细胞都含有脂肪，游离状态的脂肪呈小滴状悬浮于细胞质内，比较显著的如肝细胞。
脂肪小滴可以集合，将细胞质及细胞核挤到一旁，如脂肪细胞。
脂肪与类脂类和蛋白质结合时，往往不易显出，但用重铬酸钾、升汞、硝酸钴或硝酸铀氧化组织块或切片，可以显现出脂肪和类脂类。
脂类不溶于水，易溶于浓乙醇、苯、氯仿和乙醚等，因此脂类标本的制作，需用不含酒精或不能溶脂的液体固定，一般常用甲醛类固定剂。
脂溶性染料显示法利用苏丹染料中的苏丹III、苏丹IV、苏丹黑或者苏丹红等溶于脂类，而使脂类显色的原理显示脂类，使用时，要注意选择溶剂，要求既要溶解苏丹染料，又不溶掉脂肪。
苏丹染料是偶氮染料，它对脂类的显示是一种简单的物理变化。
苏丹染料也是一种脂溶性染料，易溶于乙醇但更易溶于脂肪，所以当含有脂肪的标本与苏丹染料接触时，苏丹染料即脱离乙醇而溶于该含脂肪结构中而使其显色。
脂肪染料一般选用有机溶剂做溶剂，丙酮和乙醇对染料和脂肪都是很好的溶剂，这样可以染色大的脂肪积累块，但是小的脂肪滴会溶解。
60%异丙醇当溶剂，可以减轻脂类的溶解。
丙二醇或磷酸三乙酯不会溶解脂类物质，但是能溶解染料，是比较理想的溶剂。
用这些溶剂姓名 班级 13级生命基地班 学号 同组者：科目 细胞生物学实验 实验题目 脂类细胞化学--苏丹III 染色法配的染料溶液要过滤以去掉沉淀，防止蒸发，因蒸发会引起染料在材料中积累。
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
细胞生物学实验报告
题目：脂类细胞化学——苏丹Ⅲ染色法
姓名：学号：班级：时间：
一、实验目的：
了解脂类染色原理，操作步骤及脂类标本制片原则。
二、实验原理：
脂类包括的范围很广，有单纯脂、复合脂、衍生脂等，脂肪依其性质可分中性脂肪、脂肪酸、胆固醇、髓磷脂以及其他类脂类。
通常，各种脂与类脂质在体内不是单独存在，是以某种程度混合存在。
此外，脂肪与类脂质和蛋白质结合时，往往不易显出，但用重铬酸钾、升汞、硝酸钴或硝酸铀氧化组织块或切片，可以显现出脂肪及类脂质。
脂类不溶于水，易溶于酒精、苯、乙醚、氯仿。
因此脂肪标本的制作，需要不含酒精或不能溶脂的液体固定，一般常用甲醛类固定剂（或戊二醛）。
用锇酸固定的脂肪不溶于无水乙醇、二甲苯等类似的液体，可用于石蜡切片。
但是脂肪的标本一般不用石蜡切片或火棉胶包埋，而用如下方法：冰冻切片
明胶包埋冰冻切片
铺片法
脂溶性染料有：苏丹染料中的苏丹Ⅲ、苏丹Ⅳ（猩红）、苏丹黑。
[染色原理]染料溶于脂类而使脂类显色，使用时注意选择溶剂，要求既要溶解（苏丹）染料，又不溶掉脂类。
三、实验用品：
1.器材：
镊子、解剖剪、解剖针、解剖盘、盖玻片、载玻片、显微镜。
2.试剂：
甲醛钙溶液、蒸馏水、70%乙醇溶液、苏丹Ⅲ染液。
3.材料：
小鼠。
四、实验步骤：
1.断头法处死小鼠，置于解剖盘中，剪开腹腔，用镊子提起小肠将盖玻片
紧贴于肠系膜，用剪刀连同盖玻片和其上粘的肠系膜取下，反扣于已滴
加甲醛钙的载玻片上，固定20min。
2.吸蒸馏水滴入载玻片与盖玻片之间冲洗，用滴管不断吸取液体以去除固
定液。
3. 用70%乙醇溶液代替蒸馏水重复步骤2的操作，再进行一次冲洗。
4. 用苏丹Ⅲ染色30min 。
5. 吸去溢出染液，擦净盖玻片表面及周边，显微镜观察。
五、实验结果：
1. 脂肪细胞是圆球形，内充满桔红色脂类物质。
细胞外也有散在的桔红色圆脂肪滴。
2. 实验图片：
图1 脂肪细胞苏丹Ⅲ染色结果（10×40）
六、结果分析：
1. 观察到的细胞不清晰，原因是盖玻片与载玻片之间不是一层细胞，多层细胞重叠使观察效果不理想。
2. 染色时间要足够长，否则会染色不彻底，橘红色不明显。
脂肪细胞
散在的脂肪滴。