1一脱氧野尻霉素的生物特性及功能

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DNJ—1-脱氧野尻霉素

DNJ—1-脱氧野尻霉素

DNJ—1-脱氧野尻霉素DNJ是源自桑叶的一种天然生物碱DNJ是从桑树(Morus alba L.)发现的一种天然生物碱。

除桑树外,风信子、野拓草和芽孢杆菌等几种植物与微生物体内也发现含有少量的DNJ。

然而,桑树中的DNJ含量远远高于其他已发现的植物与微生物。

桑树中的DNJ主要分布在桑树的叶、根和枝,其中桑叶中的DNJ含量较高(约占干重的千分之一)。

而且,桑叶占整个桑树干物质的比重最大,约65%。

因此,桑叶已经目前成为获取天然DNJ的主要来源。

图1 桑树图DNJ是桑叶降血糖的主要功效分子在各种天然产物中,桑叶是公认的一种具有调节血糖疗效的食材,自古以来就作为一种治疗糖尿病的中药应用于临床。

在《本草图经》中,桑叶被称为“神仙草”。

《本草纲目》记载:桑叶“汁煎代茗,能止消渴”。

然而,桑叶降糖的活性成分及其作用机理却一直未能得到解答。

历经20多年的研究,科学家们才逐渐揭开桑叶降糖的秘密。

1976年,Yoshiaki从桑树的根和枝条中首次检测到DNJ分子。

1994年,Asano等从桑树的叶子中分离出包含DNJ分子在内的6种生物碱,1995年,Kimura等证实了DNJ分子的降血糖作用最为显著。

也就是说,DNJ分子是桑叶降血糖的主要活性成分。

1997年,Kato确定了DNJ的分子结构。

桑叶提取物是源自桑叶的天然产物,不含有任何人工色素与防腐剂,不添加任何西药的成分。

利用先进的HPLC(高效液相色谱)分析技术,能够成功检测桑叶提取物的主要组成成分。

桑叶提取物中不仅含有降血糖的主要功效分子DNJ,还有其他种类的、且具备一定降糖功效的生物碱与桑叶多糖等活性分子,如Fagomine、DAB和4-Hydroxyhygrinic acid 等。

这些活性分子在人体内会协同作用,有效地调节血糖水平。

表1 DNJ是桑叶提取物中的主要活性成分DNJ 5%Fagomine 1%DAB 0.5%4-Hydroxyhygrinic acid 3%DNJ的化学性质【中文名称】1-脱氧野尻霉素【英文名称】1-Deoxynojirimycin【化学名称】(2R,3R,4R,5S)-2-羟甲基哌啶-3,4,5-三醇【分子式】C6H13NO4【分子量】163.17【CAS 号】19130-96-2图2 DNJ分子结构式DNJ是通过多重途径的联合作用,来保持人体内健康的血糖水平多年来的研究结果表明,DNJ的降糖机理十分复杂,其具备多重的药理与生理作用。

1一脱氧野尻霉素的生物特性及功能

1一脱氧野尻霉素的生物特性及功能

1一脱氧野尻霉素的生物特性及功能一脱氧野尻霉素(Deoxynivalenol,DON)是一种由镰刀菌属(Fusarium)真菌产生的次生代谢产物,也被称为镰刀菌素B,是一种广泛存在于小麦、玉米、大麦等谷物中的毒素。

DON在食品中的存在对人类和动物健康构成潜在威胁,因此其生物特性和功能备受关注。

首先,DON具有强烈的毒性。

它可抑制蛋白质合成,特别是对肠道细胞的蛋白质合成具有抑制作用。

这种抑制作用可能导致肠粘膜功能障碍,造成肠道屏障功能的破坏,从而增加肠道对病原菌的易感性。

此外,DON还可抑制细胞内钙离子的增加,干扰细胞信号传导和细胞凋亡等生物过程,从而对多个器官和系统产生不同程度的毒性效应。

其次,DON还具有免疫调节作用。

研究表明,DON可通过多种机制调节免疫系统的功能。

一方面,DON可抑制巨噬细胞和淋巴细胞的活性,减弱机体对病原体的清除能力。

另一方面,DON可激活多种炎症因子的产生,增强炎症反应。

这些免疫调节作用可能导致机体易感感染、免疫功能紊乱等问题。

此外,DON还具有抗氧化作用。

研究发现,DON能够通过清除自由基、抑制氧化酶活性等方式,减少氧化应激的发生。

然而,DON的抗氧化作用可能与其毒性相互关联,因为一些研究发现,DON的抗氧化作用可能与其对细胞膜的损伤有关。

最后,DON还具有潜在的致癌作用。

研究表明,长期暴露于DON可能增加肿瘤的发生风险。

这种致癌作用可能与DON对DNA的直接损伤、细胞凋亡的干扰等有关。

然而,目前对于DON的致癌作用仍存在争议,需要进一步的研究来明确其致癌风险。

综上所述,一脱氧野尻霉素是一种广泛存在于谷物中的毒素,具有强烈的毒性和免疫调节作用,同时可能具有抗氧化和致癌作用。

对于DON的生物特性和功能的深入了解,有助于我们更好地评估其对人类和动物健康的潜在风险,制定相应的控制和监测策略,保障食品安全。

1-脱氧野尻霉素

1-脱氧野尻霉素

1-脱氧野尻霉素
【中文名称】1-脱氧野尻霉素
【英文名称】1-Deoxynojirimycin,简称1-DNJ、DNJ
【化学名称】(2R,3R,4R,5S)-2-羟甲基哌啶-3,4,5-三醇
(2R,3R,4R,5S)-2-Hydroxymethyl-piperidine-3,4,5-triol
【结构式】
【分子式】C6H13NO4
【分子量】163.17
【CAS号】19130-96-2
【产品来源】自桑科植物桑Morus alba L.的枝、叶、根中提取,运用现代中药分离纯化技术制得。

【药理作用】本品属于强效α-葡萄糖苷酶抑制剂,吸收优于阿卡波糖;抑制人体糖分的转化,降低空腹血糖和餐后血糖的升高优于磺脲类药物,而发生低血糖和其它副作用的可能性大大低于其它降血糖药物,安全性好;使用本品可以不改变正常的饮食结构。

【性状】白色粉末
【含量】HPLC ≥ 98%(外标法,非归一法)
【规格】10mg/支、20mg/支、50mg/支、100mg/支、200mg/支、500mg/支、1g/支
【贮藏】2~8℃,遮光密封保存。

【用途】作对照品用,可供鉴别、检查和含量测定等。

【生产单位】凯比特
【技术支持】凯比特(QQ:1595157456,E-mail:kaibite@) 【质量承诺】非人为造成的产品质量问题,我司负责包退包换。

桑叶中1-脱氧野尻霉素提取分离工艺研究的开题报告

桑叶中1-脱氧野尻霉素提取分离工艺研究的开题报告

桑叶中1-脱氧野尻霉素提取分离工艺研究的开题报告研究背景及意义:1-脱氧野尻霉素(1-Deoxynojirimycin,DNJ)是桑叶中一种重要的生物活性成分,具有很多药理学和生理学活性,如降低血糖、抗肿瘤、抗病毒、降脂等,因此备受关注。

而从桑叶中提取和分离DNJ成为了目前研究的焦点。

然而,目前的DNJ提取分离方法多为化学方法,存在着化学残留和环境污染等问题,对人体和环境都有一定的危害。

因此,研究开发一种无污染、高效、低成本的DNJ提取分离工艺,不仅可以满足人们对健康食品和医药的需求,同时也有利于环境保护和可持续发展。

研究内容及方法:本研究拟采用水/乙醇二元混合溶剂法提取桑叶中的DNJ,借助高效液相色谱(HPLC)检测DNJ的含量。

同时结合响应面法和正交试验优化提取工艺的条件,以最大化DNJ提取率和提取效率为目的。

进一步,考虑到桑叶中除DNJ外还存在其他生物活性成分,为进一步提高DNJ的纯度和清晰度,本研究将优化后的提取液通过柱层析法进行纯化和分离,借助HPLC 检测DNJ的纯度和纯化率,并对DNJ的物理化学性质进行表征。

预期结果:通过开展此项研究,期望获得以下几点预期结果:1.确定桑叶提取DNJ的最佳工艺条件,并得到最佳工艺下所提取的DNJ含量。

2.建立DNJ提取液的工艺优化模型,预测提取率和提取效率。

3.采用柱层析技术对DNJ提取物进行纯化处理,并确定最佳纯化工艺条件和纯度/纯化率。

4.对纯化后的DNJ进行物化性质分析,以评估其可行性和实用价值。

研究意义:本研究将对桑叶中DNJ的提取分离工艺进行深入研究,借助响应面法和正交试验优化提取工艺,不仅可以探究不同操作因素对DNJ含量的影响,更重要的是提高提取纯度和效率,减少生产成本和环境污染。

同时,研究结果的成功实现将极大地丰富DNJ的资源来源,为其开发制备健康食品、医药和日化产品打下良好的基础,可推动相关产业的快速和健康发展,更有利于满足人们日益增长的健康需求和促进社会经济发展。

1_脱氧野尻霉素_DNJ_的研究进展

1_脱氧野尻霉素_DNJ_的研究进展
刘韦鋆等[19] 用 70%乙醇提取桑叶,浓缩、过 大孔吸附树脂、过阳离子交换树脂、蒸馏水洗、 0.5mol/L 氨水洗脱、浓缩后通过硅胶纯化,合并 含 DNJ 较纯的组分,浓缩、真空干燥。获得的 DNJ 含量为 23.2%,收率为 0.355%。李宇亮等[20]
研究比较了不同因素对 DNJ 提取率的影响,得到 乙醇提取的最佳条件是:以 65%的乙醇为提取剂, 料液比 1:8,超声强化细胞破碎 20min(1800W),提 取率为 95.8%;用阳离子交换树脂纯化,DNJ 的 获得率为 124.54mg/100g,纯度为 92.3%以上。
John J. [42] 等研究发现 DNJ 可作为药理分子伴 侣辅助治疗庞贝氏症,一种由编码酸性 α- 葡糖 苷酶(GAA)基因突变引起的溶酶体储藏变质(LSD)。 实验结果表明,DNJ 显著增加了 16 种不同的、在 患者衍生的纤维细胞和暂时转染的 COS-7 细胞中
第3期
1- 脱氧野尻霉素(DNJ)的研究进展
摘 要:1- 脱氧野尻霉素 (DN)J 是一种哌啶类多羟基生物碱,作为 α-葡糖苷酶抑制剂,具有降
血糖、抗肿瘤及抗病毒作用,成为当前的研究热点。本文对 1- 脱氧野尻霉素的来源、提取和分离纯化方
法以及生理活性的研究进展进行综述。
关键字:1- 脱氧野尻霉素 提取;分离纯化方法;生理活性
中图分类号:S886.9
47
的 GAA 变异体的蛋白质含量和酶活性,并加快这 些 GAA 变异体成为成熟的溶酶体的过程,提出通过 分泌途径促进运输,即 DNJ 可辅助治疗庞贝氏症, 具有开发成为相关药物的潜力。 4.2 DNJ 的抑瘤作用及机理
王然君等[43]报道,DNJ 能明显抑制 B16F10 细胞 的入侵、转移、细胞粘附,抑制率分别达到 50%、 35%、60%;对 MMP-2 的抑制活性仅在 50μg /ml 剂量处有明显抑制,对 MMP-9 的抑制在 50μg /ml 剂量处达到 20%;对 MMP-2 和 MMP-9mRNA 表 达的抑制率分别为 60%和 28%;对 TIMP1 mRNA 表达无明显作用,TIMP2 mRNA 表达则明显增加 31%;此外 DNJ 增加细胞表面 α- 甘露糖的水平 49%、降低低聚糖的水平 21%和甲基化水平 30%。 这些结果表明,DNJ 可作为抑制癌细胞转移的辅 助药剂。 4.3 DNJ 对病毒活性的抑制作用

桑叶中提取1-脱氧野尻霉素的研究进展

桑叶中提取1-脱氧野尻霉素的研究进展

来。 由 于 1 - D NJ 能够与 G 【 一 糖 苷 酶存 在 竞 争性 抑制 ,能 够有 效 的控 制饭 后 机体 血 糖 浓度 的 急剧 升 高 , 因此 1 - D N J 在 治疗
糖尿病 及 相 关的并 发症 有很 大的 药用价 值 ,因此 发展 的前 景非 常广 阔。文 中综 述 了 1 - D N J的不 同来源 、提 取 纯化 的方 法 、
9 5 . 9 8 %。
研 究 发 现 ,蚕 对 1 - D N J 有 累积 效 应 ,1 - D N J 其体 内
含量远 高于桑叶 ,家蚕幼虫制作的全蚕粉中也 1 - D N J
被检 出 。 1 . 3 微 生物来 源
2 . 1 . 4 乙醇提 取法
刘 韦 望 等 用 7 0 % 无水 乙醇提 取 1 - D N J , 将 提 取 液 进 行 浓 缩 处理 、而后 经过 离 子 树 脂纯 化 、 使用 恒 温 干 燥 箱 对 纯 化 液 进 行 干 燥 ,经 检 测 得 到 的 1 - D N J含 量 为
2 1 - D N J 的提取 与分离纯化
2 . 1 1 - D N J 的提取
将取冻干桑叶粉放置于微管中,将微管至于超声波环境
下,以 l : 1 乙腈和水为 溶剂进行提取 1 - D N J ,处理时 间
1 - D NJ 的提取方法有很 多种 ,而进行提取最为常用
的有蒸馏水提取法、盐酸提取法等方法 ;以下将介绍最 为常用的几种方法 。 2 . 1 . 1 蒸馏水提取法
进行 2次提取 1 h ,提 取完 成后过 滤并合 并 2 次 滤液,
1 1 - D NJ 的来源
1 - D N J 是 由野尻霉素通过氢化加成所得 ,目前 ,学

桑叶中1—脱氧野尻霉素提取纯化及检测方法研究进展

桑叶中1—脱氧野尻霉素提取纯化及检测方法研究进展

桑叶中1—脱氧野尻霉素提取纯化及检测方法研究进展桑叶中1—脱氧野尻霉素(1-Deoxynojirimycin,DNJ)是一种重要的生物活性物质,具有抗糖尿病、抗癌、抗病毒等多种药理活性。

对于桑叶中DNJ的提取纯化和检测方法的研究具有重要的临床应用价值。

本文将对桑叶中DNJ的提取纯化和检测方法的研究进展进行综述。

桑叶中DNJ的提取一般采用溶剂提取法和超声波辅助提取法。

溶剂提取法是将桑叶与适量的溶剂(如甲醇、乙醇、水等)混合,通过搅拌、浸泡等方法将DNJ溶解到溶剂中。

超声波辅助提取法则是在溶剂的基础上,利用超声波的作用产生剪切力和振荡力,从而促进DNJ与溶剂的充分接触,提高提取效率。

这两种方法都可以有效地提取桑叶中的DNJ,但超声波辅助提取法更加快速、高效。

桑叶中DNJ的纯化方法主要有溶剂萃取法、树脂吸附法、柱层析法等。

溶剂萃取法是通过控制溶剂的极性和挥发性,将DNJ与其他杂质分离。

树脂吸附法则是利用树脂对DNJ 的亲和性,通过溶液与树脂的接触,将DNJ吸附到树脂上,再通过洗脱等步骤将DNJ从树脂上获得。

柱层析法是将提取物注入到柱中,利用固定相、流动相以及样品的分配系数等原理,将DNJ与其他成分分离。

这些方法能够有效地提高DNJ的纯度和产率。

对于桑叶中DNJ的检测方法,主要有高效液相色谱法(HPLC)、气相色谱法(GC)、质谱法(MS)等。

HPLC是最常用的方法,可以通过样品的色谱保留时间和峰面积来定量分析DNJ的含量。

GC法则是将DNJ转化为易于气相色谱分析的衍生体,再通过GC的蒸发、分离等步骤得到DNJ的含量。

质谱法则是通过将DNJ溶解在溶剂中,利用质谱仪分析DNJ的质荷比和相对丰度,从而获得DNJ的含量。

这些方法可以对桑叶中的DNJ进行准确、快速的检测。

桑叶中DNJ的提取纯化和检测方法的研究进展取得了显著的成果。

这些方法不仅能够获得高纯度和高产率的DNJ,还能够对桑叶中的DNJ进行准确、快速的检测。

桑叶中1—脱氧野尻霉素提取纯化及检测方法研究进展

桑叶中1—脱氧野尻霉素提取纯化及检测方法研究进展

桑叶中1—脱氧野尻霉素提取纯化及检测方法研究进展摘要:桑叶中的1-脱氧野尻霉素 (1-deoxynojirimycin, DNJ) 是一种重要的生物活性物质,具有降血糖、抗肿瘤、抗氧化、抑制糖化等多种药理活性。

本文综述了目前桑叶中 DNJ 的提取、纯化和检测方法的研究进展,包括常规离子交换层析、高效液相色谱、质谱、毒素结合试验、酶联免疫吸附法、近红外光谱及其对 DNJ含量测定的检测方法,并对其各项优缺点进行了分析比较和展望。

1.引言DNJ 分子式为 C6H13NO4,分子量为 163.18 Da,是一种丝氨酸葡萄糖苷酶(α-glucosidase) 抑制剂,具有降低血糖的作用。

此外,DNJ 还具有一定的抗肿瘤[2]、抗氧化[3]和抑制糖化[4]等生物活性。

由于 DNJ 具有广泛的生物活性和较高的药理学研究价值,因此其在药物、保健品、化妆品等领域中的应用前景广阔,已成为当前国内外研究的热点之一。

本文旨在综述桑叶中 DNJ 的提取、纯化和检测方法的研究进展,并尝试对其优缺点进行评价和展望,以期为该领域的后续研究提供参考依据。

2.DNJ 的提取和纯化方法2.1 常规离子交换层析法常规离子交换层析法是目前 DNJ 提取和纯化的主流方法之一,其主要原理是利用固定在层析柱填料上的离子交换基团与待提取化合物的亲和性差别,通过电荷相互作用和竞争吸附来实现分离纯化[5]。

具体方法为:先提取桑叶中的总黄酮和 DNJ ,用超滤膜切分黄酮体系,然后在经过提取的细胞滤液中加入硫酸铵粉末,沉淀时间 2 h,收集沉淀,用常规离子交换层析柱进行纯化[6]。

其优点是简单易行,可扩展性好,但存在一定的操作难度和效率低的缺点。

2.2 高效液相色谱法高效液相色谱法 (High Performance Liquid Chromatography, HPLC) 是 DNJ 分离、纯化和检测的一种高效且常用的方法。

与常规离子交换层析方法相比,其分离能力更强、杂质排除率更高、精度和效率更高,适用于大规模生产和高标准纯化[7]。

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生物碱,其化学名称是3,4,5-三羟基-2-羟甲基四氢吡啶,分子式为C6H13NO4,分子量为8
163
[44-45]

1.2.1.2 DNJ的来源
野尻霉素首先由Inoue等作为抗生素从链霉菌中得到,DNJ是由野尻霉素氢化得到
的。DNJ的来源有两大类:植物来源和微生物来源。植物来源包括:桑(Morus alba L.),
野拓草是野拓草科(commelianceae)植物,它在中药中作为非传染性感冒的退热药及
治疗腹水、浮肿和睑腺炎的主要成分,最近这种草药被用于治疗糖尿病。Hang Sub,Kim
等首次从野拓草中分离并鉴定出DNJ,4 kg干的野拓草中含DNJ 450 mg,其含量为
0.01125%
[50]

风信子是百合科(Hyacinthaceae)植物。Asano等从风信子鳞茎的甲醇提取物中分离到

离子色谱法具有样品处理简单、易操作等优点,但分离效果和可靠性不够理想。而
且该方法对于设备要求高,一般实验室不具备实验条件。在可供查阅的资料中也没有对
该方法进行色谱分析方法认证的相关试验。
1.2.4.2高效液相色谱法
(1)高效液相色谱法-蒸发光散射检测法(HPLC-ELSD)
姜永涛[75],杨梅[76]等人曾分别用高效液相色谱法-蒸发光散射检测法(HPLC-ELSD)
的,甚至有人称其为万能检测器,不过目前还在发展摸索的阶段,技术不是很成熟,价
及蚕沙冲剂中的DNJ进行了定量分析。主要方法是,先将家蚕幼虫或蚕沙粉碎后经过
超声处理1h,然后在60℃水中抽提1h,12 000 r/min离心取上清液,之后进行离子色谱
检测。检测结果得到黄血蚕中DNJ的含量是0.1890%,蚕沙中DNJ含量是0.1071%,
蚕沙冲剂中DNJ含量是0.1099%
[73][74]
衍生物及其类似物的抗肿瘤转移活性,指出DNJ是野尻霉素的结构类似物,它对肿瘤转
移的抑制率是80.5%,并阐明了抗肿瘤转移活性与抗糖苷酶和抗β-葡萄糖苷酶活性的可
能的关系,认为DNJ对肺肿瘤转移的抑制机理可能是:DNJ通过抑制糖苷酶的活性在肿瘤
细胞表面产生未成熟的碳水化合物链,削弱了肿瘤的转移能力。这些表面活性发生改变
测定桑叶中DNJ的含量。杨梅等人测定了不同产地桑叶样品中DNJ的含量,其中陕西
桑叶为0.1764%,浙江桑叶为0.1932%,河北桑叶为0.1195%,重庆桑叶为0.1806%,
河北蚕沙为0.0613%。姜永涛等人测定了山东桑叶和蚕沙中DNJ的含量,结果为:山东
桑叶606 mg/kg,蚕沙241 mg/kg。
很多,例如CO2、丙烷、乙烷、乙烯、甲醇、水等
[72]
。11
当然,除了以上一些方法外,还有絮凝澄清法、膜分离技术、半仿生提取法,而对
于其中哪一种方法最适合桑叶中DNJ的提取,有待于检验。从文献资料分析,对DNJ的
提取及分离纯化研究并不多,普遍存在提取率低,并且没有一整套的提取纯化工艺。期
望从中摸索出最佳的提取工艺和能够大量处理总生物碱的分离方法以及简便、快捷、实
的肿瘤细胞被寄主免疫系统攻击而使这些肿瘤细胞不能结合到寄主细胞上[63]。但其详细
的作用机理尚不清楚,有待于进一步研究。
1.2.3 DNJ的提取方法10
近年来,国内外对生物碱类成分的研究日趋深入,其提取工艺文献研究报道较多,
主要有煎煮法、浸渍法、渗漉法、超声法和回流法等[64]。其中煎煮法受热时间长,温度
野拓草(Commelina communis),风信子(Hyacinthus orientalis),沙参属植物(Adenophora
triphylla var.japonia)和爵床科植物(Jacobinia suberecta)。微生物来源包括浅紫灰链酶菌
GC-148(Streptomyces Lavendulae GC-148)和芽抱杆菌(Bacillus)。
选出96株含有DNJ的菌株。从土壤中分离出的浅紫灰链霉菌MB-733的变异株浅紫灰链霉
菌GC-148在发酵罐中发酵,从其培养过滤液也可分离出DNJ。
Formmer等从芽抱杆菌的培养过滤液中也分离得到了DNJ。
1.2.2 DNJ的作用及用途
1.2.2.1 DNJ的降血糖作用
DNJ是所有哺乳动物α-葡萄糖苷酶的有效的抑制剂,它能通过降低碳水化合物的
7.4~63×10
-8
M。DNJ对a-葡萄糖苷酶表现为竞争性抑制,它常作用于底物结合位点或
其附近,与底物竞相与酶结合[58,59]。
DNJ的降血糖机理:饮食中的糖类,如淀粉,由于唾液α一淀粉酶的作用,边水解边
进入胃中,到了胃内尚未与唾液混合的部分,约70%仍在进行水解。然后进入十二指肠,
在胰液α-淀粉酶作用下继续加水分解,生成蔗糖、麦芽糖等二糖。二糖运送到小肠时,
了DNJ,7.6 kg鲜风信子鳞茎可得160 mg DNJ,其含量为0.0012%
[51]

桔梗科(Campanulaceae)沙参属植物Adenophora triphylla var.japonica中含有五种生
物碱,Naoki Asano等从3 kg新鲜植株中分离得到了DNJ 26 mg,DNJ含量为0.00086%
蒸发光散射检测器(ELSD)是一种新型通用的质量型检测器,其响应只与被测物
质的质量成正比,而不依赖于物质的官能团和光学特性,理论上适用于挥发性低于流动
相的任何组分的检测[77]。用ELSD作为高效液相色谱的检测器,具有快捷,灵敏,准确
重现性好等优点。蒸发光散射检测器的适用面可能是目前所有的HPLC检测器中最广
7
1.2 1-脱氧野尻霉素的研究现状
1.2.1 DNJ的结构和来源
1.2.1.1 DNJ的结构
桑叶含有多种功能性成分,某些成分的含量与鲜茶或某些蔬菜中的含量相当甚至更
高。桑叶的功能性成分包括大量矿物质、维生素、食物纤维、氨基酸和黄酮类化合物,
桑叶还含有另一种生物碱:1-脱氧野尻霉素(DNJ),具有特殊的功能。DNJ是一种哌啶
-液分配分离技术,HSCCC分离效果好,溶剂用量少,应用范围广,不需要固体支持剂(载
体),不存在被分离组分的不可逆吸附,避免了样品的损耗和变性,其溶剂系统的选择
可在较广泛的范围内进行。到目前为止,高速逆流色谱技术应用于研究氨基酸、嘌呤、
吡啶、吲哚类植物激素、抗生素、酸、低肽混合物和中草药中的黄酮类、生物碱、蒽醌
酶病毒活性,其IC50为1.2~2.5μg/mL,且随DNJ剂量的增加,其抑制力增强。糖蛋白形
成过程中多糖前体转移到新生肽和以后的葡萄糖修饰等糖基化步骤对HIV被膜的加工、
折叠是必要的。葡萄糖修饰是通过α-葡萄糖苷酶I和II切断外接α-1,2葡萄糖残基和内接
α-1,3葡萄糖残基完成的,DNJ作为这些酶的抑制剂能够抑制葡萄糖的修饰,而改变HIV
糖苷酶不能对二糖进行分解,而使二糖不能水解成葡萄糖而直接被送入大肠。由于DNJ
的作用,进入血液的葡萄糖减少,因而血糖值降低了。
1.2.2.2DNJ对病毒活性的抑制作用
人类免疫缺陷病毒(HIV)是一种逆转录酶病毒,它能引起T4

(CD4

)淋巴细胞病
变。HIV有两种糖基化的被膜蛋白:糖蛋白gpl20连接于CD4抗原上。糖蛋白gp41是一种
[52]

爵床科植物Jacobinia suberecta的叶中也检测到DNJ。
(2)微生物中的DNJ
浅紫灰链霉菌的一些菌株的发酵液中也能检测到DNJ。Yohji Ezure等首先从土壤中
分离出了生产DNJ的链霉菌,经鉴定为浅紫灰链霉菌SEN-158。他们从土壤中新分离出
的8 500株链霉菌经斜面培养,α-葡萄糖淀粉酶和α-淀粉酶鉴定,薄层层析法检测,筛
物细胞,加速成分进入溶剂。可缩短萃取时间和提高萃取率并且还不破坏提取物的结构,
超声萃取的选择性主要是通过溶剂的选择性来实现的,用超声萃取的方法提取生物碱、
苷类、黄酮类、蒽醌类、天然香料和植物油等各类成分均有研究报道[71]。
1.2.3.4超临界萃取法(Supercritical fluid extraction,SFE)
借存在于小肠上部的微纤毛膜表面的α-糖苷酶水解为葡萄糖和果糖等单搪,通过肠壁吸
收进入体内,导致血液中葡萄糖浓度急剧上升。将食物与DNJ一起摄入时,食物也到达
小肠被分解成二糖,同时DNJ也进入小肠与其中的α-糖苷酶结合,由于DNJ与a-糖苷酶
的亲和力大于二糖与α-糖苷酶的亲和力,因此DNJ阻碍了二糖与α-糖苷酶的结合,结果α-
高,生物碱易被破坏;浸渍法和渗漉法生产工艺长,溶媒用量大,提取液处理工艺繁琐,
生物碱提取率低。但对桑枝的研究多见于药理方面,对其总生物碱提取分离及纯化工艺
则几乎未见报道,长安大学李宇亮等人[65]研究了从桑叶中提取分离1-脱氧野尻霉素
(DNJ)的方法,探讨了提取剂、提取方法、料液比、提取次数、时间等因素对提取率的影
超临界流体萃取技术是近年来发展起来的一种新型化工分离技术,被誉为21世纪的
溶剂萃取技术。超临界流体是处于临界温度(tc)和临界压力(pc)以上的流体,兼有气体和
液体的双重特点,既具有和气体相当的高扩散系数和低黏度,又具有和液体相近的密度,
对物质具有良好的溶解力,可被用作溶剂进行萃取分离。可作为超临界萃取的溶剂种类
在CD4培养细胞中的感染力。另外,由DNJ对葡萄糖苷酶I的抑制作用而致的未成熟糖蛋
白的积累可能通过抑制细胞融合、病毒与寄主细胞受体结合、病毒穿透力和合胞体形成
来抑制病毒的复制,从而抑制病毒活性[62]。
1.2.2.3DNJ抑制肿瘤转移的作用
Tsutomu Tsuruoka等以小鼠B-16肺黑色细胞肿瘤为模型,研究了与野尻霉素相关的
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