研究生 蛋白质技术
蛋白质定量分析了解生物体内蛋白质表达的方法
蛋白质定量分析了解生物体内蛋白质表达的方法蛋白质是生物体内重要的组成成分，它们在维持生命活动以及调节生理功能等方面起着关键作用。
了解生物体内蛋白质的表达水平对于研究生物体的功能与疾病机制具有重要意义。
在实验室中，科学家们常常需要进行蛋白质定量分析来准确测量生物体内蛋白质的表达水平。
本文将介绍几种常见的蛋白质定量方法。
一、BCA（巴氏反应）法BCA法是一种常用的蛋白质定量方法，它基于巴氏反应原理，通过将被测蛋白质样本与BCA试剂反应生成可着色的络合物，然后利用分光光度计测定络合物的吸光度来确定蛋白质浓度。
BCA法具有操作简单、反应时间短、灵敏度高的特点，被广泛应用于生物科学研究领域。
二、Lowry法Lowry法是另一种常用的蛋白质定量方法，它利用蛋白质在碱性条件下与铜离子和碱式碳酸铜反应生成可测量的蓝色复合物，再利用比色法测定复合物的吸光度来确定蛋白质浓度。
Lowry法具有较高的敏感性和较宽的线性范围，在分析蛋白质样品时非常可靠。
三、Bradford法Bradford法是一种相对快速且便于操作的蛋白质定量方法。
该方法利用考马斯亮蓝G250（Coomassie Brilliant Blue G-250）与蛋白质之间的非共价相互作用形成蓝色复合物，再通过比色法来测定蛋白质样品的吸光度。
Bradford法具有灵敏度高、线性范围广等优点，常被用于较快速的蛋白质定量。
四、荧光定量法荧光定量法是一种常用于测定蛋白质浓度的灵敏度高的方法。
该方法利用特定的荧光染料与蛋白质发生非共价相互作用，生成荧光染料-蛋白质复合物，进而通过测量荧光信号的强度来确定蛋白质浓度。
相比于上述几种方法，荧光定量法的线性范围更广，并且对于小样本量也能获得可靠结果。
五、质谱分析法质谱分析法是一种利用质谱技术对蛋白质进行定量分析的方法。
此方法通常结合先进的液相色谱技术与质谱仪器，通过将样品中的蛋白质分离和离子化，进而测量离子化蛋白质的质量-电荷比（m/z），最终得到蛋白质的浓度。
蛋白质组学技术研究进展及应用
蛋白质组学技术研究进展及应用一、本文概述蛋白质组学，一门专注于研究生物体内所有蛋白质的表达、结构、功能和相互作用的科学，已经成为现代生物学的重要分支。
随着科学技术的飞速发展，蛋白质组学技术在方法学上取得了显著的进步，其应用领域也在不断扩大。
本文旨在综述近年来蛋白质组学技术的最新研究进展，并探讨其在生命科学、医学、农业、工业等领域的应用。
我们将首先回顾蛋白质组学技术的发展历程，然后重点介绍当前的研究热点和前沿技术，最后展望其未来的发展趋势和潜在应用。
通过本文的阐述，我们希望能够为读者提供一个全面而深入的蛋白质组学技术研究进展及应用的概览。
二、蛋白质组学技术进展随着科技的飞速发展，蛋白质组学技术也取得了显著的进步，为生命科学的研究开辟了新的道路。
蛋白质组学技术主要包括蛋白质分离、鉴定、定量以及相互作用分析等关键技术环节。
在蛋白质分离技术方面，二维凝胶电泳（2D-PAGE）仍然是经典的蛋白质分离方法，但其分辨率和重现性有待进一步提高。
近年来，液相色谱（LC）和毛细管电泳（CE）等新技术逐渐崭露头角，这些技术具有更高的分离效率和分辨率，为复杂样品中的蛋白质分析提供了有力工具。
蛋白质鉴定技术也取得了显著进展。
传统的质谱技术（MS）已经得到了广泛应用，而新一代质谱仪器如质谱成像技术（MSI）和单分子质谱技术（SMS）的出现，极大地提高了蛋白质鉴定的准确性和灵敏度。
生物信息学和数据库技术的不断发展，也为蛋白质鉴定提供了更加完善的数据支持。
在蛋白质定量方面，稳定同位素标记技术（SILAC）和同位素编码亲和标签技术（ICAT）等定量方法的出现，使得对蛋白质表达水平的精确测量成为可能。
这些技术不仅提高了定量的准确性，还能够在复杂样品中同时检测多个蛋白质，大大提高了研究的效率。
蛋白质相互作用分析是蛋白质组学研究的另一个重要领域。
传统的酵母双杂交技术和免疫共沉淀技术仍然是常用的方法，但近年来，基于质谱的蛋白质相互作用分析技术（如亲和纯化质谱技术）的发展，为蛋白质相互作用研究提供了新的视角。
生物化学中的蛋白质研究
生物化学中的蛋白质研究蛋白质是生命中重要的组成部分，它们在细胞结构和功能、代谢调节、信号传导等方面都起着至关重要的作用。
因此，在生物化学领域中，研究蛋白质的结构和功能成为了一项重要的课题。
一、蛋白质的结构蛋白质通过氨基酸连接形成链状的多肽，进而构成特定的三维结构。
这种结构的形成是由蛋白质内的氨基酸序列控制的，具体包括多肽链的折叠和相应功能的形成。
蛋白质的结构分为四个层次：1.一级结构一级结构是指蛋白质的氨基酸序列。
在蛋白质合成过程中，20种不同的氨基酸按照一定的次序连接起来，形成多肽链。
这也是蛋白质的基本构成。
2.二级结构二级结构是指多肽链中氨基酸间的一些规则排列形式。
常见的二级结构包括α螺旋和β折叠。
在α螺旋中，多肽链中的氨基酸呈螺旋状相互缠绕。
在β折叠中，多肽链中的氨基酸通过氢键等相互作用形成折叠的结构。
3.三级结构三级结构指的是在二级结构的基础上，由不同的二级结构通过一定的融合和调整，形成了具有特定功能的整体结构。
三级结构是一个蛋白质的空间结构，能够影响蛋白质的功能。
4.四级结构四级结构指由两个或多个蛋白质分子相互作用形成的大分子复合物结构。
这些复合物可以包括几个相同的多肽链，或者包括不同的多肽链。
二、蛋白质的功能蛋白质的结构和功能密切相关，蛋白质的功能多种多样，包括：1.结构支持蛋白质可以提供细胞的支撑和形态稳定，也能够形成骨骼、肌肉、毛发、爪子等组织。
2.催化代谢蛋白质可以作为酶催化氧化还原反应和分解反应等，参与能量代谢、物质代谢、血液凝固和荷尔蒙合成等生物化学反应。
3.免疫防御蛋白质可以作为抗体、补体和调节蛋白等，参与人体的免疫防御。
4.信号传导蛋白质可以扮演受体和信号转导分子的角色，参与神经传递和生长发育调节等生命活动。
三、蛋白质的研究方法为了深入了解蛋白质的结构和功能，生物化学研究者使用了许多研究方法，包括：1. 生物化学方法生物化学方法是研究生物体中各种分子成分的核心技术，包括分离、纯化、鉴定和定量等。
蛋白质的表达和纯化技术
蛋白质的表达和纯化技术概述蛋白质是生命体内最基本的组成部分之一，它们扮演着各种不同的角色，如催化酶、参与信号转导等。
了解蛋白质的结构和功能，能够帮助科学家研究生命过程和疾病发生的机制。
因此，蛋白质表达和纯化技术是现代生物学研究中的重要环节。
蛋白质表达技术蛋白质表达技术是指将目标蛋白质基因导入到宿主细胞中，使其能够在细胞内大量表达目标蛋白质的过程。
根据目标蛋白质的性质和功能需求，可以选择不同的表达系统，如大肠杆菌、酵母、哺乳动物细胞等。
大肠杆菌是最常用的表达系统之一。
其具有成本低、表达量高等优点，同时易于培养和操作。
但是，大肠杆菌的表达系统在表达复杂蛋白质时存在很多问题，如蛋白毒性、折叠错误等。
因此，针对不同类型的目标蛋白质，需要选择不同的表达系统，并优化其表达条件。
蛋白质纯化技术蛋白质纯化技术是指从混合物中纯化目标蛋白质的过程，包括初级纯化、中级纯化和高级纯化等步骤。
初级纯化包括离心、过滤和电泳等方法，主要是为了去除大分子和杂质。
中级纯化主要使用柱层析和凝胶电泳等技术，分离目标蛋白质和杂质。
最后，高级纯化主要通过高效液相色谱（HPLC）等手段，获得高纯度的目标蛋白质。
在进行蛋白质纯化时，需要考虑目标蛋白质的性质，如分子量、电荷性、亲和力等。
根据这些属性，可以选择合适的纯化方法，并进行优化。
同时，需要注意纯化过程的选择和条件设置，以确保目标蛋白质的活性和稳定性。
结论蛋白质表达和纯化技术对于生物学研究和生物制药等领域具有重要的意义。
在不同的研究领域中，选择合适的表达和纯化技术是确保研究成功的关键之一。
因此，对蛋白质表达和纯化技术的理解和掌握，有助于推动生物科技的发展。
蛋白质的定量和定性分析方法
蛋白质的定量和定性分析方法蛋白质是生物体内最重要的功能分子之一，对于研究生物体的结构和功能具有重要意义。
为了准确地了解蛋白质的含量和性质，在科学研究和实际应用中，我们需要使用定量和定性分析的方法来研究蛋白质。
一、定量分析方法1. 低里德伯法（Lowry method）低里德伯法是一种经典而广泛应用的蛋白质定量方法。
该方法利用蛋白质与碱式铜络合物在碱性条件下反应生成蓝色产物，通过比色法测定溶液的吸光度来计算蛋白质含量。
这是一种灵敏且相对简单的方法，适用于大多数蛋白质样品的定量分析。
2. 比色法（Colorimetric assay）比色法是一种常用的蛋白质定量方法，通过蛋白质与染料的结合来测定蛋白质浓度。
常用的染料有布拉德福蓝（Bradford）、库吉铃蓝（Coomassie Brilliant Blue）、BCA法（Bicinchoninic Acid assay）等。
这些染料与蛋白质结合后形成一种复色物，通过比色法测定溶液的吸光度可以定量分析蛋白质。
比色法具有操作简便、灵敏度高等特点，被广泛应用于蛋白质定量领域。
3. 分子标记法（Molecular tagging method）分子标记法是一种新兴的蛋白质定量方法，利用特定的分子标记物（如荧光染料、放射性示踪剂等）标记蛋白质，然后通过测定标记物的荧光强度或放射性信号来计算蛋白质浓度。
分子标记法具有高灵敏度、高特异性等优点，适用于微量蛋白质的定量测定。
二、定性分析方法1. SDS-PAGE（Sodium Dodecyl Sulfate Polyacrylamide Gel Electrophoresis）SDS-PAGE是一种常用的蛋白质定性分析方法，通过电泳将蛋白质在聚丙烯酰胺凝胶中分离出来。
在电泳过程中，蛋白质在SDS（十二烷基硫酸钠）的作用下具有相同的电荷密度，只受到大小的限制而移动。
蛋白质在凝胶中的分离程度取决于其分子量大小，可以通过对比标准品的迁移距离来估计样品中蛋白质的相对分子量。
生物化学实验中的蛋白质分析技术
生物化学实验中的蛋白质分析技术蛋白质分析技术在生物化学实验中的应用在生物化学实验中，蛋白质分析技术是一项十分重要的技术。
蛋白质是生物体中最基本的分子组成部分之一，对于研究生物体的生化过程和功能具有重要意义。
本文将介绍几种常用的蛋白质分析技术，包括SDS-PAGE、Western Blot、质谱分析和免疫沉淀等。
重点讲述这些技术的原理、操作步骤以及其在生物化学实验中的应用。
一、SDS-PAGE技术SDS-PAGE（Sodium Dodecyl Sulfate Polyacrylamide Gel Electrophoresis）是一种常用的蛋白质分析技术，通过电泳的方式将蛋白质样品分离成不同的电泳带来研究其分子量和组成。
1. 原理：SDS-PAGE利用带负电荷的SDS使蛋白质样品具有净电荷，根据蛋白质分子量的不同，通过电泳的方式将蛋白质分离到聚丙烯酰胺凝胶中，然后用染色方法可视化蛋白质电泳带。
2. 操作步骤：制备凝胶、样品处理、电泳、染色等。
3. 应用：常用于估计蛋白质的分子量、纯度和相对表达水平等。
二、Western Blot技术Western Blot是一种用于检测特定蛋白质的技术，常用于研究蛋白质的表达、定位和相互作用等。
1. 原理：Western Blot主要由蛋白质电泳分离、转膜、蛋白质与抗体的特异性结合以及信号检测等步骤组成。
2. 操作步骤：SDS-PAGE分离蛋白质、转膜、抗体孵育、信号检测等。
3. 应用：常用于检测特定蛋白质在不同样品中的表达差异、研究蛋白质的翻译后修饰等。
三、质谱分析技术质谱分析技术是一种可以确定蛋白质分子量和氨基酸序列的方法，广泛应用于蛋白质鉴定和结构研究等领域。
1. 原理：质谱分析技术常用的方法有质谱图谱分析和串联质谱分析。
2. 操作步骤：样品制备、质谱分析、数据解析等。
3. 应用：常用于蛋白质的鉴定、研究蛋白质的翻译后修饰、蛋白质定量等。
四、免疫沉淀技术免疫沉淀技术是一种通过特异性抗体与特定蛋白质结合，进而将目标蛋白质从混合物中分离出来的方法，常用于研究蛋白质相互作用以及功能等。
测定蛋白质含量的方法
测定蛋白质含量的方法蛋白质是构成生物体细胞的重要组成部分，对于研究生物体的功能和特性具有重要意义。
测定蛋白质含量的方法有多种，包括经典的定性和定量分析方法以及现代的生物技术方法。
本文将介绍常用的测定蛋白质含量的几种方法。
1. 布里奥涅法（Biuret法）布里奥涅法是一种常用的蛋白质定量方法，基于天冬氨酸和脯氨酸等含有两个或多个肽键的氨基酸能与铜离子络合生成深蓝色的配合物。
在该方法中，首先将待测的蛋白质样品与碱性溶液反应形成紫色复合物，然后通过分光光度计测定样品的吸光度，根据吸光度与样品中蛋白质浓度之间的线性关系，计算出样品中的蛋白质含量。
2. Lowry法Lowry法是另一种经典的蛋白质定量方法。
该方法基于蛋白质与碱性铜离子和碱式离子交互作用而引起的氧化反应。
在测定中，蛋白质样品与碱性铜离子发生氧化反应生成蓝色离子复合物，然后加入离子交换剂将复合物转化为悬浮物，在酸性条件下生成含酚酞的产物。
最后通过分光光度计测定样品的吸光度，根据吸光度与样品中蛋白质浓度之间的线性关系，计算出样品中的蛋白质含量。
3. BCA法（双硫腙法）BCA法是一种具有较高灵敏度的蛋白质定量方法，基于蛋白质与双硫腙反应生成紫色络合物。
在该方法中，蛋白质样品与BCA试剂（含有双硫腙和铜盐）发生化学反应生成紫色络合物，然后通过分光光度计测定样品的吸光度，根据吸光度与样品中蛋白质浓度之间的线性关系，计算出样品中的蛋白质含量。
4. Bradford法Bradford法是一种常用的蛋白质定量方法，根据蛋白质与染料结合产生吸光度变化的原理。
在该方法中，蛋白质样品与Coomassie Brillant Blue染料结合生成蓝色复合物，然后通过分光光度计测定样品的吸光度，根据吸光度与样品中蛋白质浓度之间的线性关系，计算出样品中的蛋白质含量。
以上所述的方法都具有一定的优缺点，根据需要选择适合的测定方法。
另外，近年来，随着生物技术的发展，一些新的方法也被广泛应用于蛋白质定量，例如免疫分析方法（如ELISA）、质谱分析方法等。
蛋白质检测方法
蛋白质检测方法
蛋白质是生物体内最重要的有机物之一，它们被用来和其他物质组成细胞组织，以及完成消化和代谢过程。
正因如此，蛋白质的测定是研究生物体和活动的重要工具。
近年来，随着科学技术的发展，以及生物技术的迅速发展，新的蛋白质检测方法也不断出现。
最常见的蛋白质检测方法是物理化学方法，这些方法主要依赖于蛋白质的物理和化学性质来进行检测。
这些方法可将蛋白质从生物样品中提取出来，并能够检测出蛋白质的细胞外表观。
物理化学方法包括：电泳、色谱、凝胶联电泳、流式细胞仪以及免疫沉淀法等。
免疫学方法也是一种常见的蛋白质测定方法，它利用抗体特异性与抗原结合特性来识别和定量蛋白质。
目前，常见的免疫学法有免疫比色法、免疫包被法和免疫流式细胞仪法等。
此外，分子生物学技术在蛋白质检测方面也有所发展。
聚合酶链反应（PCR）是一种用于检测蛋白质序列的分子生物学技术。
PCR可以检测活性的或不活性的蛋白质，它可以用于检测蛋白质的存在或活性水平。
此外，变性聚合酶链反应（denaturing PCR）、蛋白质组学、质谱分析等分子生物学技术也可以用于蛋白质检测。
在蛋白质检测方面，新一代高通量测序技术是一种新的、有效的技术。
这种技术可以用来研究和分析大量的蛋白质，并能够快速、准确地检测蛋白质。
这些方法包括：高通量质谱分析、大规模蛋白质组学试验和新一代测序等。
总的来说，利用物理化学方法、免疫学方法、分子生物学技术以
及新一代高通量测序技术，可以有效地检测蛋白质。
未来，随着科学技术不断进步，可能还会有更多新型蛋白质检测方法出现，用以更好地检测蛋白质。
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凝胶过滤的注意事项
1. 要根据待分离物质的分子量，选择特定的凝胶过 要根据待分离物质的分子量， 滤基质； 滤基质； 2. 凝胶过滤层析不仅可用于亲水性分子的分离，也 凝胶过滤层析不仅可用于亲水性分子的分离， 可用于疏水性分子的分离， 可用于疏水性分子的分离，当用于疏水性分子分 离时，该类层析往往被称为“凝胶通透层析” 离时，该类层析往往被称为“凝胶通透层析”； 3. 凝胶过滤层析可提供样品的分子量信息； 凝胶过滤层析可提供样品的分子量信息； 4. 凝胶过滤的上样量一般在柱床体积的1～5％； 凝胶过滤的上样量一般在柱床体积的1 上样量一般在柱床体积的 5. 凝胶过滤的样品浓度越大越好，但一般不要超过 凝胶过滤的样品浓度越大越好， 样品浓度越大越好 100mg/ml。 100mg/ml。
Ion-Exchange chromatography
+ +
If pH mobile phase =7.2 Then charge of the proteins: (-) (-) (+) (+)
+ + + +
+ + +
-
+ + +
+ + + + + + +
-
+
Anion exchange column = + charged
1- the strength with which these ions are held to the NTA resin
NTA has a tetradentate chelating group that occupies four of six sites in the nickel coordination sphere
蛋白质的分离纯化 与定性定量分析
什么是蛋白质的分离纯化
分离：将蛋白质混合物分成单一的蛋白成分。 分离：将蛋白质混合物分成单一的蛋白成分。 纯化：得到单一蛋白的纯品。 纯化：得到单一蛋白的纯品。
为什么要纯化蛋白质？ 为什么要纯化蛋白质？
研究特定蛋白质的生物学功能（ 研究特定蛋白质的生物学功能（酶、生物活性 蛋白，etc） 蛋白，etc） 制备抗体 蛋白质晶体学研究 研究蛋白质研究蛋白质-蛋白质相互作用
怎样纯化蛋白质？ 怎样纯化蛋白质？
生化学家根据特定蛋白质与其他蛋白质的性质差 生化学家根据特定蛋白质与其他蛋白质的性质差 来分离或纯化它。 异，来分离或纯化它。 可溶性、等电点、分子大小、生物学性质…… 可溶性、等电点、分子大小、生物学性质……
可溶性：硫酸铵沉淀 可溶性： 等电点：离子交换层析 等电点： 分子大小：凝胶过滤层析 分子大小： 生物学性质：亲和层析 生物学性质：
Size-exclusion chromatography
Size-exclusion chromatography
Absorbance at 280 is used to identify protein-containing fractions. You can also perform an enzyme specific assay.
蛋白质纯化的基本设计原则
原料应易得到，并尽可能富含目的蛋白； 原料应易得到，并尽可能富含目的蛋白； 应有特异性的蛋白质检测方法（最重要的因素， 应有特异性的蛋白质检测方法（最重要的因素， 特异性的蛋白质检测方法 决定了纯化能否成功）； 决定了纯化能否成功） 分级分离，先粗后细； 分级分离，先粗后细； 纯化条件尽量温和，避免蛋白失活。 纯化条件尽量温和，避免蛋白失活。
Affinity chromatography
Makes use of specific binding interactions between molecules 1- Incubate crude sample with the immobilized ligand
3- Elute
2- Wash away non bound sample components from solid support
2- the specificity of the interaction between histidine residues and immobilized nickel ions
基因工程中 亲和层析是基因工程 最常用的纯化技术 亲和层析是基因工程中最常用的纯化技术
在各种表达载体上都带有各种标签蛋白 在各种表达载体上都带有各种标签蛋白，如 标签蛋白， GST-tag、His-tag、V5-tag等 GST-tag、His-tag、V5-tag等，它们不仅可用于 鉴定蛋白表达与否，更可用于与之相连的目标蛋 鉴定蛋白表达与否， 白的纯化； 白的纯化； 通过免疫亲和层析技术，只需一步， 通过免疫亲和层析技术，只需一步，即可纯化带 有标签的目标蛋白。 有标签的目标蛋白。
怎样纯化蛋白质？ 怎样纯化蛋白质？
生化学家根据特定蛋白质与其他蛋白质的性质差 来分离或纯化它。 异，来分离或纯化它。 可溶性、等电点、分子大小、生物学性质…… 可溶性、等电点、分子大小、生物学性质……
可溶性：硫酸铵沉淀 可溶性： 等电点：离子交换层析 等电点： 分子大小：凝胶过滤层析 分子大小： 生物学性质：亲和层析 生物学性质：
Ion-Exchange chromatography
+ +
+
-
+ -
+ + + +
+
+ + +
Cl-
Cl- +
Cl-
+
+ Cl+ Cl-
+
Na+ Na+ Na+ -
Na+Na+
Na+ Na+ Na+ Na+
+
Cl-
+
Increased salt concentration
分步洗脱
梯度洗脱
2. 凝胶过滤层析
Affinity chromatography
Commonly used affinity columns:
Ni2+ binds to poly Histines (example 6xHis) Specific antibodies (anti-Flag tag) glutathione binds to GST Protein A or G binds antibodies
3. 亲和层析
以样品的生物活性为依据的分离方法。生物分子的 样品的生物活性为依据的分离方法。 为依据的分离方法 特点是有专一的活性，如酶与底物的结合， 特点是有专一的活性，如酶与底物的结合，抗原与 抗体，激素与受体，糖与凝集素……等。 抗体，激素与受体，糖与凝集素……等 将上述作用体系的一方连接到层析基质上，使之固 将上述作用体系的一方连接到层析基质上，使之固 定化，就有可能分离纯化专一作用的另一方。 定化，就有可能分离纯化专一作用的另一方。
Affinity chromatography
Possible elution strategies:
pH Ion strengh Denature Competitor ligand or analog
Ni-NTA columns
The high affinity of the Ni-NTA resins for 6xHis-tagged proteins or peptides is due to:
1. 离子交换层析
离子交换层析利用物质的电荷与层析载体（离子 离子交换层析利用物质的电荷与层析载体（ 交换剂） 交换剂）电荷之间的相互作用而达到分离纯化的 目的，属于吸附层析。 目的，属于吸附层析。 离子交换层析的固定相称为离子交换剂，由基质 离子交换层析的固定相称为离子交换剂， 基团两部分组成 两部分组成。 和基团两部分组成。 ① 基质：纤维素、琼脂糖、葡聚糖、苯乙烯-二 基质：纤维素、琼脂糖、葡聚糖、苯乙烯乙烯苯等高分子聚合物； 乙烯苯等高分子聚合物； ② 基团：共价结合在基质上的带电基团，可分 基团：共价结合在基质上的带电基团， 正电基团和负电基团。 为正电基团和负电基团。
相对离心力/ 相对离心力/×g 1 000 4 000 15 000 30 000 100 000
时间/min 时间/min 5 10 20 30 3～10 h
沉降的组分 真核细胞 叶绿体、细胞碎片、 叶绿体、细胞碎片、 细胞核 线粒体、 线粒体、细菌 溶酶体、细菌细胞 溶酶体、 碎片 核糖体
2. 粗分级分离（rough fractionation） 粗分级分离（ fractionation） 获得蛋白质提取液后，用一定方法， 获得蛋白质提取液后，用一定方法，将蛋白质与 其它杂蛋白分离开来。 其它杂蛋白分离开来。 常用方法：盐析、等电点沉淀、有机溶剂分级分 常用方法：盐析、等电点沉淀、 离等 特点：简便、处理量大、既能除去大量杂质（ 特点：简便、处理量大、既能除去大量杂质（包 括脱盐），又能浓缩蛋白质溶液。 括脱盐），又能浓缩蛋白质溶液 ），又能浓缩蛋白质溶液。
chrome意为“色彩” graphy源自希腊文 chrome意为“色彩”，graphy源自希腊文，意为 源自希腊文， 意为 “写”。“层析”就是“色谱” 。 层析”就是“色谱” 层析最早由俄国植物学家 Цвет 于1903年创造， 1903年创造 年创造， 1941年英国学者 1941年英国学者Martin和Synge提出分配层析， 年英国学者Martin和Synge提出分配层析 提出分配层析， 此后这种方法得到很大的发展。 此后这种方法得到很大的发展。 层析是利用物质在固定相 流动相之间不同的分 层析是利用物质在固定相与流动相之间不同的分 固定相与 配比例，达到分离目的的技术。 配比例，达到分离目的的技术。