卫生微生物月-食品微生物检验方法的国内外研究进展
国内外食品微生物快速检测技术应用进展
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食品微生物检测技术和方法研究进展
食品微生物检测技术和方法研究进展摘要：近年来，经济快速发展，社会不断进步，人们物质生活水平日渐提升，食品安全问题受到了广泛的关注。
由微生物造成的各种食品安全问题频发，应提高对预防和控制食源性疾病的重视，进一步完善微生物检验方法。
笔者在食品微生物检验内容、影响因素以及常用检验方法分析基础上，提出一些有效的控制策略。
关键词：食品微生物；检测技术；方法研究引言随着我国社会经济的不断发展，人们所能接触到的食品种类也在不断增多，这也使得食品产业逐渐成为我国众多产业当中最为重要的部分。
但在食品产业不断发展的过程当中食品安全事件的频发，导致食品安全成为当今社会当中最为基本的民生问题。
在这样一种大背景下，进行食物微生物检验是最妥当的解决办法，并通过控制食物微生物检验的质量来达到提高食品安全的目的。
1微生物检测技术在食品安全检测中的重要性微生物检测是食品安全保障中的重要环节，同时也是判断食品是否具备食用价值的根本性指标依据。
目前主要检测对象包括蛋制品、奶制品、罐头、淀粉制品以及食品调味品等。
其大多是人们生活中经常食用或使用的食品及配料，一旦其存在微生物污染，则会对人体健康产生较大的不利影响。
因此在相关食品检测中科学运用微生物检测技术是至关重要的，其有助于检验食品微生物类型与数量，筛查出不符合质量安全标准的食品，对食品行业的健康、持续发展具有积极意义。
2食品微生物检测技术和方法研究进展2.1快速酶促反应检测微生物在食品“提供”的生长环境中的繁殖速度非常快。
微生物在生长过程中会有大量酶合成，检测人员可以利用快速酶促反应检测其中的微生物，通过应用一些化学试剂，可以显出酶在化学反应中发生的一些颜色的变化，因此可以通过观察颜色变化分析微生物的数量与危害程度，这是一种相对而言较直观、快捷的微生物检验方法。
2.2电阻抗法微生物在生长繁殖的过程中会将培养皿中的营养物质分解，这样会增强培养基的导电性，导致其电阻抗性的降低，由此推断，根据培养基培养前后的电阻抗的变化可以测定微生物的生长繁殖情况，该方法已经普遍应用于食品微生物检测，不过很少有关于生鲜乳的微生物检测应用电阻抗法的研究。
食品微生物检验检测方法及进展
食品微生物检验检测方法及进展摘要：近年来，在食品领域由于食源性微生物没有得到有效控制导致食品安全问题形势严峻，食品直接关系到人们的身体健康，因此需要不断加强食品微生物检测以控制和提升检测质量，促进食品安全工作有序开展。
这也意味着在检测活动开展过程中，需要加大对最新检测技术的应用力度，提升检测活动的有效性。
关键词：食品微生物；检验检测；进展引言近年来，食品行业的发展越来越迅速，市场上涌现出多样化的食品，但随之而来的食品安全问题不容忽视。
微生物污染在食品安全问题中占有较大的比重，通过食品微生物检验工作，能确保食品中无病菌或病菌数量和种类处于安全范围内，微生物检验结果是衡量食品安全性的重要指标，因此提高食品微生物检验工作质量迫在眉睫[1]。
应加强对食品微生物检验工作的管理，从技术、标准、监管方面入手，不断提高食品微生物检验工作的规范性与合理性，从源头上避免不合格食品流入市场，切实有效地解决食品安全问题。
1.食品微生物检测内容法律法规中明确规定的检测内容主要包括食品中的重金属含量、病原性微生物含量、农药残留以及其他对消费者身体健康可能会造成威胁的残留物；食品添加剂的品种以及用量；食品是否符合国家行业质量标准；食品是否按照国家要求做好说明书以及外包装上各类信息的标识；特殊功能食品是否符合国家监管要求；食品在生产和销售等各个环节卫生标准是否符合国家要求[1]。
食品中的食源性致病菌含量是食品微生物检测的主要内容之一。
食源性致病菌是指在食物中含有的一种进入人体就能寄生和繁殖的微生物，当其在人体大量繁殖后，能引起人体出现各类疾病，正是由于食源性致病菌的危害性极大，且大多通过口腔途径进入人体，因此食源性致病菌是食品微生物检测的重点。
此类致病菌主要存在于禽畜蛋奶以及肉制品中，一旦食源性致病菌进入人体，就会导致人体出现呕吐、腹泻等症状，严重时还会危及人们生命安全。
2.食品微生物检验的现存问题食品检验机构良莠不齐，检验队伍配备不齐；目前，我国对食品安全问题高度重视，由国家市场监督管理总局负责食品安全检验工作，其中食品微生物检验工作主要由卫健委和市场监管局负责。
快速检测食品中微生物方法的进展研讨
快速检测食品中微生物方法的进展研讨快速检测食品中微生物的方法在食品行业中起着重要的作用，能够帮助食品生产商和监管部门及时发现食品中存在的微生物污染问题，保障食品安全。
近年来，快速检测方法的研究不断取得进展，本文将对这方面的研究进展进行探讨。
其次，免疫学方法也在快速检测食品中微生物方面得到了广泛应用。
酶联免疫吸附法(ELISA)、免疫荧光法(IFA)和免疫层析法(IC)等免疫学方法可以通过检测微生物的抗原或抗体来进行快速检测。
同时，近年来还发展了一些新的免疫学方法，如免疫磁珠分离、荧光微球免疫分析法(FMIA)和表面等离子共振(SPR)等技术，提高了快速检测的准确性和性能。
此外，基于生物传感器的方法也在快速检测食品中微生物方面展现了巨大潜力。
生物传感器能够将生物分子与传感器技术有效结合，实现对微生物的快速检测。
例如，使用DNA或RNA探针修饰的电化学传感器、光学传感器和表面等离子共振传感器等，可以通过监测微生物与探针的特异性相互作用来实现快速检测。
此外，还可以利用纳米技术的进展，如纳米颗粒和纳米结构修饰的传感器，提高生物传感器的灵敏度和选择性。
最后，微流控芯片技术也在快速检测食品中微生物方面展现了潜力。
微流控芯片具有微型化、集成化和高通量等特点，可以在很短的时间内完成样品的处理、分离和检测，大大提高了检测的速度和效率。
例如，可以使用微流控芯片对微生物进行富集、分离和特异性检测，通过微流控芯片上的微通道和微阀门实现快速检测。
综上所述，快速检测食品中微生物的方法在食品安全监测中扮演着重要角色，能够及时发现食品中存在的微生物污染问题。
未来，随着分子生物学、免疫学、生物传感器和微流控芯片等技术的持续发展，相信快速检测食品中微生物的方法将得到进一步改进和优化，为食品安全提供更加可靠的保障。
关于食品微生物快速检测技术的研究进展
关于食品微生物快速检测技术的研究进展近年来，国内外的食品安全事件层出不穷，不仅严重影响了市场秩序，而且还给公众带来了无处不在的恐慌。
因此，建立食品病原微生物的快速检测方法对于食品安全及人类健康有着重要的意义。
本文笔者来谈一谈就对食品微生物快速检测技术的研究进展。
标签：食品微生物;快速检测;食品安全;研究进展随着食品工业的迅速发展和人们生活水平的不斷提高，食品安全问题越来越受到人们的重视，而食品的污染大多数是因为病原微生物引起的，这就迫切要求建立和研究食品病原微生物快速检测方法以加强对食品卫生安全的监测。
近年来，由于新技术新方法在食品微生物检验领域得到了广泛应用，有效的提高了检测效率和检验速度。
下面介绍几种食品微生物快速检测方法。
一、免疫学技术1、免疫荧光技术：免疫荧光技术（Immunofluorescence techIIique就是通常所说的荧光抗体技术，在该抗体或者抗原上加人含有荧光的物质，该物质不会影响机体的特性，通过显微镜下的观察，就会找到荧光标记的抗原或抗体，实现监督和鉴别的功能。
1）从待检样本中分离出抗体或者抗原，然后将样本跟抗体结合，让固相载体与其发生反应。
2）利用洗涤的方式将抗原抗体从固相载体中分离出来，以一定的比例让固相载体跟待检样本混合。
添加一些酶，与其发生反应，产生可以辨别的有色物质，根据有色物质的深浅来分析和判定待见样本中的微生物状况等。
该检测方式耗费时间短，灵敏度较高。
2、酶联免疫吸附技术：酶联免疫吸附技术中涵盖了荧光技术跟免疫技术，主要是通过抗体和抗原受固相载体的吸附作用而产生的免疫酶染色，如果底物出现颜色，定量的有色产物就会很容易从待检样本中脱离出来。
该方式特点为应用分为广、便捷操作、灵敏度高、定量分析、检测的速度快，且耗费较少的成本费用。
3、免疫层析技术：免疫层系技术可以有效的实现对金黄色葡萄糖球菌、霍乱杆菌、沙门氏菌、布氏杆菌和大肠杆菌的检测和鉴定，检测速度快、准确，方便快捷，无污染。
[研究进展,检测技术,微生物]食品微生物快速检测技术研究进展
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食品微生物快速检测技术研究进展摘要：近些年，由食品安全引发的问题已经引起了全社会的关注。
食品微生物作为评价食品安全的一项重要指标，越来越受到人们的重视。
相对于传统的食品微生物检测技术，快速检测技术对提高检测效率和应对突发事件具有重大意义，越来越受到检验人员的重视。
当前主流的快速检测技术有PCR技术、酶联免疫吸附技术、ATP生物发光技术、LAMP、阻抗法等，本文对以上几种快检技术进行分析总结和展望。
关键词：食品安全食品微生物快速检测伴随着科技的发展和人们对食品安全的重视，作为评价食品安全重要指标之一的食品微生物，其快速检测技术备受人们的关注。
国标中关于食品微生物的检验方法，不仅步骤繁琐，且耗时耗力，尤其面对突发食品安全事件时，检测结果往往滞后于监管需要。
因此，食品微生物快速检测技术备受人们的欢迎。
本文将对近些年来微生物快速检测技术，如PCR技术、酶联免疫吸附技术、ATP生物发光技术、LAMP、阻抗法等的研究进展进行分析、总结和展望。
1 PCR技术PCR（Polymerase Chain Reaction）技术，聚合酶链式反应，用于扩增放大特定DNA片段的分子生物学技术，是在体外的一种特殊DNA复制。
PCR技术能在短时间内将特定的基因片段扩增数百万倍。
由于其具有简便、快速、敏感性高和特异性强的优点，适用于时间紧的检测工作和突发食品安全事件。
PCR技术在不断的发展，多重PCR、荧光定量PCR、实时定量PCR等就是PCR技术的衍生[1]。
PCR技术耗材多为一次性，配套的仪器设备较为昂贵。
若能进一步降低使用成本，必定能扩大使用范围。
2 酶联免疫吸附技术酶联免疫吸附（ELISA）是指将可溶性的抗原或抗体结合到固相载体上，对免疫酶进行染色，利用抗原抗体结合专一性进行免疫反应的定性和定量检测方法。
酶联免疫吸附技术集免疫荧光法和放射免疫测定法优点于一身，灵敏度高、特异性强、操作判断简单、实验设备要求简单[2]。
3 ATP生物发光技术ATP是活的生物体中的能量货币，普遍存在于所有活的生物体中。
微生物检测技术在食品检测中的应用研究进展 文献综述
微生物检测技术在食品检测中的应用研究进展摘要：食品问题关系国计民生，食品的安全越来越受到人们关注。
在食品工业迅速发展的今天，建立食品微生物快速检测方法，对食品质量进行检测、监控尤为重要。
近几年各国的许多机构和学者都很重视食品微生物检测技术和方法的研究，本文对此进行了详细的介绍。
关键词：检测技术微生物食品安全Progress of the research on the application of Microbial Detection Technology in food testingAbstract:Food is the people's livelihood. Food safety has received more and more attention. At present, the food industry is developing rapidly. Therefore, developing an rapid testing method of Microorganism in the food is especially important in detection and monitoring of food quality. In recente years, many institutes and researchers from different country attach great importance to the research of food microbiological testing techniques and methods. This article will give a detailed introduction to this below. Key words:the testing techniques Microorganism food safety1前言随着时代的不断发展，人们生活水平不断提高，食品安全问题也越来越受到人们的关注，近几年来，三聚氰氨、苏丹红、漂白剂等等一系列的食品安全问题使人们对食品产生了强烈的不信任感，因此，食品微生物检测技术的应用也越来越广泛，同时，食源性微生物的检测技术也趋向迅捷、准确、大通量的方向发展。
食品微生物检测技术的研究与改进
食品微生物检测技术的研究与改进食品安全一直是人们关注的重要问题之一，生活中食品的安全性直接影响到人们的健康。
食品微生物检测技术的研究与改进，对于确保食品品质和消费者健康具有重要意义。
本文将探讨食品微生物检测技术的研究进展和改进方向。
第一部分：食品微生物检测技术的研究现状目前，常见的食品微生物检测技术包括传统培养法、分子生物学方法和光子学检测技术等。
传统培养法是一种经典的检测方法，它通过将食品样品培养于富含营养的培养基上，观察和计数细菌的生长情况来检测微生物的存在。
然而，传统培养法需耗费较长的时间，并且对某些难以培养的细菌无法有效检测。
分子生物学方法是一种新型的微生物检测技术，其基于核酸的特异性识别和扩增原理。
常见的分子生物学方法包括聚合酶链反应（PCR）、实时荧光定量PCR、核酸杂交等。
这些方法具有高灵敏度、高特异性和快速的优点，可以有效检测微生物污染。
然而，分子生物学方法的设备成本较高，操作技术要求较高，因此在实际应用中仍存在一定的局限性。
光子学检测技术是近年来快速发展的新兴食品微生物检测方法之一。
这种方法利用光的散射、透射或荧光等性质来检测微生物的存在。
光子学检测技术具有快速、无需培养、无需标记等优点，可用于实时在线检测。
然而，光子学检测技术在复杂食品样品中的应用仍存在一定的挑战，需要进一步完善。
第二部分：食品微生物检测技术的改进方向为了改进食品微生物检测技术，提高检测速度和准确性，研究人员不断探索新的方法和技术。
首先，应该进一步发展基于核酸技术的微生物检测方法。
在现有的PCR技术基础上，可以引入新的扩增技术和检测标记物，提高检测的特异性和灵敏度。
例如，引入等温扩增方法，如环介导等温扩增（LAMP），可以在简单的温度条件下进行高效的核酸扩增，减少仪器的复杂性和成本。
其次，应该加强纳米技术在食品微生物检测中的应用。
纳米技术可以将微观世界的特性应用于食品微生物检测中，具有更高的敏感性和选择性。
例如，可以利用纳米粒子来标记微生物，并利用其光学、电化学或磁性特性进行快速检测。
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食品微生物检验技术的国内外研究进展陆杰明摘要：近30年来，随着国际食品经济和贸易的发展，全球性食品安全问题备受关注，故对食品微生物的检验技术越来越重视。
本文介绍了近几年来国内外对食品微生物的检验技术，以及提出对检验方法方向的展望。
关键词：食品微生物检验；分子生物学技术；免疫学；仪器化Research progress of food microbiological testing methods at home andabroadLu Jie-MingAbstract:In the past 30 years, with the development of international food economy and trade, the global food safety problem has attracted much attention. This paper introduces the research progress of food microbiological inspection methods in recent years and puts forward the prospect of testing methods.Keywords:Food microbe testing;Molecular biology technology;immunology; Instrumentation.1.引言随着人们生活水平的不断提高，食品安全问题逐渐成为各国政府、公众关注的焦点问题。
食品达到细菌学的卫生条件是最终制品中不允许存在致病菌，即使存在食物中毒菌，也必须达到不损害人体健康的安全水平。
由于食品微生物污染的广泛发生，严重影响人民的健康，因此食品微生物检验工作对评价食品卫生质量，保证消费者饮食卫生有着极为重要的作用，并且研究灵敏度更高、特异性更强、简便快捷的食品安全检测技术和方法，建立和完善食品安全微生物检测技术和体系越来越重要。
本文将介绍近几年来国内外食品微生物检验中具有代表性的几种检验方法2. 国内外食品微生物检验方法的进展2.1电阻抗法电阻抗法的原理是电阻抗法的主要原理是检测培养基中的大分子在电中性或弱离子条件下的微弱电位变化。
从而在未出现菌落之前就能检测到微生物的存在『1』。
电阻抗法一次可同时测定128份试样,操作简便、快捷,可避免人工操作造成的主观判断差异,全部结果量化并由打印机自动打出。
但是电子讯号、食品配方、培养基、温度等变化都会影响检测结果,因此制作校正曲线必须在同一配方试样间进行,也就是说校正曲线的服务对象必须是单一的,该方法对食品中菌落总数测定的改进和对食品生产企业快速监测食品中细菌污染有很大的作用［2］。
2.2分子生物学技术（1）核酸探针技术1.以DNA为靶目标的检验中国开展的食品微生物检验项目主要包括细菌总数、大肠菌群、沙门菌、霉菌和酵母以及毒素等[3]。
所以,有关的检测有很多是针对细菌而来的。
DNA是细菌的主要遗传物质,所以设计的探针一般是目标DNA的互补序列。
在设计探针时要依照待检测微生物特异的DNA序列。
比如在设计检测产气荚膜梭菌的探针时,克隆的是产气荚膜梭菌的产毒基因[4]。
致肠病的大肠杆菌则针对其致肠病的基因序列来设计。
这种检验在食品微生物检测中的应用研究十分活跃,例如食品中的大肠杆菌(Escherichia coli)、沙门菌(Salmonella)、志贺菌(Shigella spp)、小肠结肠炎耶尔森(Yersinia enterocoliti-ca)、产单核细李斯特菌(Listeria monocytogenes)、金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)的检测等。
2.以rRNA为靶目标的检验该种检验方法常使用AccuProbe基因作为探针,其原理是利用Acridinium ester作为荧光发光物质,标记特异性单链作为探针,与待测细菌中的核糖体RNA(rRNA)互补,形成稳定的DNA:RNA杂交体。
选择试剂再将未结合的多余探针破坏掉,最后通过发光仪检测标记的杂交体。
翁文川等应用该方法检测食品中产单核细胞李斯特菌,结果表明,采用该基因探针方法检测食品中产单核细胞李斯特菌特异性强,需要的时间短。
吴仲梁等也用AccuProbe检测食品中的产单核细胞李斯特菌,同样证明该方法具有正确、灵敏、快速、简便等优点,适于推广应用.［6］（2）聚合酶链式反应(PCR)技术聚合酶链反应，是一种在体外模拟自然DNA复制过程，对特定的DNA或DNA 片段进行快速扩增的方法。
PCR技术除了具有核酸分子杂交的优点如特异性强、可从基因水平进行诊断和同时检测大量样品等外，比核酸分子杂交更加敏感、更加快速和简便，且易自动化操作。
PCR技术在基因诊断方面比基因探针法更敏感。
PCR即聚合酶链反应是在体外酶促扩增特定DNA或RNA片段的技术。
这种技术被誉为近半世纪来生命科学中最伟大的发明。
PCR具有如下特点：由于以碱基配对原则使引物与模板DNA特异正确结合， DNA聚合酶合成反应的忠实性和靶基因的特异性与保守性，共同决定了 PCR的高特异性；PCR具有高敏感性，因为PCR 产物量是以指数方式增加的，能将皮克量级的起始待测模板扩增到微克水平。
能从100万个细胞中检出一个靶细胞；在细菌检测中，最小检出率可达3个细菌；简便、快速，通过使用耐高温的 TaqDNA聚合酶，一次性将反应液加好后，在DNA 扩增仪上进行变性 - 退火 - 延伸反应，一般在 2~4 小时完成扩增反应，扩增产物易分析，不一定使用放射性核素，无放射性污染、易推广，对标本的纯度要求低，适应范围广［4］。
更有研究发现，将PCR技术和核酸杂交技术综合起来应用,可以增强检验的灵敏度。
因为通过PCR可以将要检测的核酸扩增得很多,从而使核酸杂交的靶序列得到了增强。
A Ingianni等曾报道用PCR与核酸杂交结合的办法进行了180多个样品中产单核细胞李斯特菌的检测,同时比较了直接PCR,单独的核酸分子杂交及其它相关的检测方法,表明两种方法结合相比其它方法更加快速和特异[6]。
2.3 抗体的方法(1)乳胶凝集反应利用抗原与抗体特异性结合的特性，加上人工大分子的乳胶颗粒而发生肉眼可见的凝集反应。
Au-reus Test用于食品样品中金黄色葡萄球菌的检测，该试剂盒中含有对免疫抗蛋白A IgG和鞭毛蛋白敏感的聚苯乙烯乳胶粒子，因细菌蛋白A 和IgG结合，凝聚酶和鞭毛抗原结合，所以当含有金黄色葡萄球菌的样品悬浮液加人含乳胶粒子的试剂盒中时1 min内将产生凝集反应。
该法的灵敏度和特异性均较高。
(2)酶联免疫吸附法这是用于定性或定量测定特异抗原抗体的一种技术，它多采用“夹心式”设计，即用抗体包被聚苯乙烯孔捕获抗原，用另一个结合了酶的抗体与抗原结合形成抗原抗体复合物，再用一种生色酶底物通过肉眼观察或比色法记录结果。
随着单克隆抗体酶联免疫技术的出现，免疫检测法的特异性有了明显的提高。
2. 4仪器法随着微生物快速检测法的不断发展，很多检验技术日趋成熟和完善，并被人们进一步开发、研制成自动或半自动微生物检测仪。
(1)流式细胞术(FCM )该技术是用流式细胞仪对细胞悬液进行自动快速定量分析和分选的新技术，具有速度快、精确度高、记数细胞量大以及参数分析、全面测量细胞和分选细胞等优点。
由于FCM检测到的荧光强度的强弱与DNA片段的大小成比例，根据荧光浓度的直方图就可知道细菌的DNA指纹图谱，从而确定细菌的种类。
现在该技术已经能够检测纯化的DNA可达Pg级水平，在10 min内可以完成数据的收集和分析。
近年来在临床实验室已经逐步用于病毒、细菌的检测、计数、鉴定等。
(2)免疫磁性微球免疫磁性分离技术不但广泛用于医学的各个领域，而且在食品卫生检测方面的应用也见端倪。
由于食品检样常为固液多相混合体，采用常规方法难以将少量的致病微生物分离出来。
借助免疫磁性分离技术，可以达到快速分离的目的。
免疫磁性分离技术与常规检验方法相比具有显著的优点，可以很快地在含有大量杂菌的悬液中有选择性地分离出目的微生物，并节省时间。
(3)电阻电导检测器原理是当细菌生产繁殖时，将蛋白质、糖类等大分子物质分解成氨基酸、有机酸等带电荷的小分子物质，改变培养液的导电度，这样，测量电阻和导电度的变化，就可推算出样品原来的含菌数。
(4)VITEK一AMS该系统为用于微生物鉴定及药敏试验的设备，其原理是将微生物数码鉴定的方法与计算机技术结合起来，实现了从读数、编码、解码、打印结果的鉴定全过程的自动化。
其特点为:①鉴定细菌类型广;②具有最大的准确性;③鉴定时间短;④高度可重复性;⑤仪器操作方便。
(5)VIDAS全自动免疫分析仪VIDAS全自动化荧光酶标免疫测试系统的特点和优点为:全自动操作，所有样品的洗涤、结合、基质读数及报告说明等都是全自动操作;快速测定:由样品进人仪器计算，约需1一2. 5 h即可出结果及报告，容量大，可同时测定30个标本。
(6)ATP生物发光法ATP生物发光法快速，甚至可以将细菌计数时间缩短至几分钟，操作简便、灵敏度高，具有其他微生物快速检测方法不可比拟的优势，曾被称为是检测环境中微生物最方便可靠的方法。
［3］3.食品微生物的检验技术发展方向通过上面的介绍可见，各种方法各有各的优点和不足。
但随着分子生物学和微电子技术的飞速发展，快速、准确、特异检验微生物的新技术、新方法不断涌现，微生物检验技术由培养水平向分子水平迈进，并向仪器化、自动化、标准化方向发展，提高了食品微生物检验工作的高效性、准确性和可靠性。
特别是近年来兴起的基因芯片技术及自动微生物检测系统，将从根本上改变微生物的检测方法，一些新的微生物检验方法和手段将不断涌现。
现更有联合几种检测技术来提高灵敏度或特异度的联合试验。
4.结语随着近几年的新技术、新方法的涌现，食品微生物检验技术将向高效率、高标准、高精度和高灵敏度的方向发展，必定对人类公共卫生、食品安全、营养健康与疾病预防等做出巨大贡献。
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