菌体理化性质鉴定试验
紫花苜蓿根瘤菌的鉴定及其与土壤理化性质相关性分析
紫花苜蓿根瘤菌的鉴定及其与土壤理化性质相关性分析紫花苜蓿（Trifolium pratense L.）是一种广泛种植的牧草和绿肥植物，其与根瘤菌的共生对土壤氮素固定和植物生长发育有重要影响。
本文旨在利用分子生物学技术对紫花苜蓿根瘤菌进行鉴定，并分析其与土壤理化性质之间的相关性。
为了确定根瘤菌的菌株类型，我们自农田土壤中分离紫花苜蓿根部的根瘤样品，并使用无菌技术将根瘤菌分离培养。
然后，从分离培养的纯株中提取细菌基因组DNA，并使用通用引物扩增16S rRNA基因，得到了长度为约1.5 kb的DNA片段。
通过测序并与NCBI数据库进行比对，我们得到了根据16S rRNA基因序列确定的根瘤菌的物种分类。
通过对多个菌株基因序列比对和系统发育分析，我们发现分离株中主要存在于根瘤菌属（Rhizobium）和致病根瘤菌属（Agrobacterium）中的不同物种。
其中，绝大部分菌株属于根瘤菌属，与已报道的Rhizobium leguminosarum和Rhizobium trifolii最为相似。
而少数菌株属于致病根瘤菌属，与已报道的Agrobacterium radiobacter和Agrobacterium tumefaciens最为相似。
这些结果表明，紫花苜蓿与多种根瘤菌共生，其中优势菌株属于Rhizobium属。
然后，我们收集了不同地点的土壤样品，并分析了其理化性质，包括土壤pH值、有机质含量和速效氮含量。
通过与紫花苜蓿根瘤菌的鉴定结果进行对比分析，我们发现不同根瘤菌物种与土壤理化性质之间存在一定的相关性。
首先，我们发现根瘤菌的物种组成与土壤pH值密切相关。
在土壤pH值较高（6.5-7.5）的地区，多数菌株属于Rhizobium属；而在土壤pH值较低（5.0-6.0）的地区，少数菌株属于Agrobacterium属。
这与已有研究结果一致，表明不同根瘤菌物种对土壤pH值有不同的适应性。
其次，我们发现根瘤菌的物种组成与土壤有机质含量密切相关。
3 细菌的理化性状与代谢
需要
周浆间隙 受体蛋白 离子梯度 透性酶泵 磷酸转 移酶系
能量
高能磷酸 键（ATP） 电势能 高能磷酸键
营养物质的获取实施、完成，必经由生物膜半透性 完成
（三）细菌生长的条件因素
营养物质和能量 适宜的环境因子
营养物质和能量
– 碳源、氮源、水、无机离子、生长因子 – 提供原料、能量
– 肉汤培养基 – 普通琼脂培养基 – 蛋白胨水
增菌培养基(enrichment medium)：基础培 养基中加入一些特殊的营养物质，以满足营 养要求较高的细菌生长。
迟缓期 (lag phase): 适应、活化期 对数期 (logarithmic phase)：迅速生长期，典型性 稳定期 (stationary phase):新生、死亡平衡特征产物积累期
衰亡期 (decline phase)：营养少，代谢物蓄积，菌体死亡
细菌群体的生长曲线（growth curve）
吲 哚 试 验
大肠杆菌：+ 产气杆菌：–
阳 性
乙型副伤寒沙门 氏菌和变形杆菌
H2S试 验
含硫氨基酸 硫化氢 遇铁或铅
硫化物
试尿 验素 酶 对 照 阳 性 阴 性
变形杆菌 （尿素酶）
尿素
氨（碱性）
（2）合成代谢产物及其在医学上的意义
A 、具致病作用
1 、热原质(pyrogen) —— G—的内毒素（脂多糖）；G＋的致热性多糖 致热性 0.001ug/公斤 发热 耐热性 180℃ 2hr 250℃ 30min 去除方法：干烤、高压18磅 3hr、过滤吸附
附：细菌获取营养物质的方式
摄取营养的 方式
浓度方向 高——低
食用菌中各理化性质分析检测方法模板
三种食用菌产品品质检测一、检测组分水分、灰分、可溶性糖、粗脂肪、粗蛋白、挥发性香气物质、纤维素、氨基酸、重金属、农药残留。
二、检测方法2.1样品预处理2.1.1干法灰化除汞外大多数金属元素和部分非金属元素的测定都能够用此法处理样品。
2.1.2浸提法振荡浸渍法: 将样品剪碎, 放在合适的溶剂中浸渍、振荡即可从样品中分离出被测成分。
( 挥发性香气成分)2.1.3溶剂萃取法2.1.4蒸馏法2.2水分2.2.1直接干燥法取一干净烧杯及蒸发皿放至95~105摄氏度干燥烘箱内, 烘30~60min, 取出冷却至室温, 称重, 复烘30min, 两次质量差不超过0.5mg视为恒重。
精密称取处理好的试样20~30g于恒重的烧杯内, 置于烘箱, 烘3小时。
盖上蒸发皿, 取出冷却, 称重, 复烘30min, 直至前后两次质量差不超过0.5mg, 即为恒重。
水分=m1-m2/m1-m0x100%式中: m0-----------烧杯及蒸发皿的质量; gm1-----------干燥前烧杯、蒸发皿及样品的质量; gm2------------干燥后烧杯、蒸发皿级样品质量; g2.2.2减压干燥法2.2.3共沸蒸馏法2.3灰分2.3.1高温灼烧法操作方法:1、取大量适宜的瓷坩埚置高温炉中, 在600℃下灼烧0.5小时, 冷至200℃以下后取出, 放入干燥器中冷至室温, 精密称量, 并重复灼烧至恒量。
2、加入2-3克固体样品或5-10克液体样品后, 精密称量．3, 液体样品须先在沸水浴上蒸干, 固体或蒸干后的样品, 先以小火加热使样品充分炭化至无烟, 然后置高温炉中, 在550—600℃灼烧至无炭粒, 即灰化完全。
冷至200℃以下后取出放入干燥器中冷却至室温, 称量。
重复灼烧至前后两次称量相差不超过0.5mg为恒量。
计算:X=(m1-m2)/(M3-m2) X 100x-样品中灰分的含量, ％;m1-坩埚和灰分的质量, g;m2-坩埚的质量, g;m3-坩埚和样品的质量, g。
常见细菌理化性质鉴定试验
常见细菌理化性质鉴定试验淀粉水解：淀粉在酸的催化作用下，能发生水解；淀粉的水解过程：先生成分子量较小的糊精(淀粉不完全水解的产物)，糊精继续水解生成麦芽糖，最终水解产物是葡萄糖。
培养基：将细菌接种在平板上，置37度温箱中培养24h，加革兰氏碘液于菌落上，观察颜色变化，呈蓝色者为阴性，无蓝色为阳性。
甲基红试验：是根据肠杆菌科各菌属都能发酵葡萄糖，在分解葡萄糖过程中产生丙酮酸，进一步分解中，由于糖代谢的途径不同，可产生乳酸，琥珀酸、醋酸和甲酸等大量酸性产物，可使培养基PH值下降至pH4.5以下，使甲基红指示剂变红这个原理进行的测验。
产氨实验（乙酰胺肉汤）原理：铜绿假单胞菌产生一种脱酰胺酶，可使乙酰胺经脱酰胺作用释放氨，滴加纳氏试剂（碘化汞钾），氨在碱性条件下与碘化汞钾作用，生成红色络合物。
操作：将纯培养物接种到装有乙酰胺肉汤的试管中，在36℃±1℃下培养20h～24h。
然后向每支试管培养物加入1～2滴钠氏试剂，检查各试管的产氨情况，如表现出从深黄色到砖红色的颜色变化，则为阳性结果，否则为阴性。
吲哚试验：是指有些细菌如大肠埃希菌、变形杆菌、霍乱弧菌等能分解培养基中的色氨酸生成吲哚(靛基质)，经与试剂中的对二甲基氨基苯甲醛作用，生成玫瑰吲哚而呈红色，则为吲哚试验阳性。
过氧化氢酶试验（又名：接触酶试验）一、原理：具有过氧化氢酶的细菌，能催化过氧化氢生成水和新生态氧，继而形成分子氧出现气泡。
二、试剂3%过氧化氢溶液：临用时配制。
三、试验方法挑取固体培养基上菌落一接种环，置于洁净试管内，滴加3%过氧化氢溶液2mL，观察结果。
四、结果于半分钟内发生气泡者为阳性，不发生气泡者为阴性。
革兰氏阳性球菌中，葡萄球菌和微球菌均产生过氧化氢酶，而链球菌属为阴性，故此试验常用于革兰阳性球菌的初步分群。
脲酶试验原理：存在于大多数细菌、真菌和高等植物里。
它是一种酰胺酶、能酶促有机物质分子中酶键的水解。
脲酶的作用是极为专性的，它仅能水解尿素，水解的最终产物是氨和碳酸。
临床医学检验技术(师)：免疫原和抗血清制备必看考点三
临床医学检验技术(师)：免疫原和抗血清制备必看考点三1、单选制备细胞核与核膜抗原前需将细胞破碎，常用的方法有（）A.研磨法B.超声破碎法C.自溶法D.酶处理法E.十二烷基磺酸钠处理正确答案：A参考解析：研磨法常（江南博哥）用于组织匀浆的制备。
2、单选从免疫血清中粗提γ球蛋白最简便的方法为（）A.亲和层析B.离子交换层析C.凝胶过滤D.超速离心E.硫酸铵盐析正确答案：E参考解析：免疫球蛋白纯化的方法很多，有单一法，但大多数采用二步法以上相结合的方法，特别是以硫酸铵盐析为基础，再经过层析柱的方法来提高免疫球蛋白及其各成分的纯度最为常用。
3、单选以下哪一个是对半抗原的正确描述（）A.只有和载体结合后才能和抗体分子结合B.是大分子C.是多肽D.没有免疫原性E.只能诱生体液免疫应答正确答案：D参考解析：半抗原是只有抗原性而无免疫原性的物质。
其可与抗体或致敏淋巴细胞特异性结合，但不能单独诱发免疫应答，在体内单独存在时不引起抗体产生，当其与蛋白质或胶体颗粒结合后，则可引起抗体形成。
半抗原可与其特异性抗体结合。
如细菌的多糖和类脂质等。
在半抗原与蛋白质结合物中，一般是蛋白质使结合物具有抗原性，而半抗原则决定结合物的抗原特异性。
4、单选下列物质中免疫原性最强的是（）A.核酸B.蛋白质C.多糖D.半抗原E.脂类正确答案：B5、单选抗原抗体结合反应最终出现肉眼可见沉淀现象，其原因是（）A.从亲水胶体变为疏水胶体B.从疏水胶体变为亲水胶体C.抗原抗体结合导致蛋白变性所致D.抗原抗体结合和盐析共同作用所致E.抗原抗体反应是单向反应正确答案：A6、单选首次与第二次免疫接种的时间间隔最好为（）A.1周内B.10~20天C.7~10天D.20~30天E.30天以上正确答案：B参考解析：初次免疫与第二次免疫的间隔时间多为2~4周，再次免疫后两周内进行。
7、单选免疫接种后易引起局部持久溃疡和形成肉芽肿的佐剂为（）A.弗氏不完全佐剂B.弗氏不完全佐剂+卡介苗C.细胞因子佐剂D.多聚核苷酸E.肉毒素正确答案：B参考解析：弗氏不完全佐剂加卡介苗即弗氏完全佐剂，可提高佐剂效能，但注射后易产生局部持久性溃疡和肉芽肿。
一株抗植物致病真菌的深海霉菌的鉴定和活性成分理化性质分析
１ 材 料 和方 法
１ ． １ 指 示菌 本 实验所 用 的 指示 真 菌 主要 包 括 ： 宛 氏拟 青 霉 （ Ｐ ａ ｅ ｃ ｉ ｌ ｏ ｍ ｙ ｃ ｅ ｓ ｖ ａ ｒ ｉ ｏ ｔ ｉ ） 、 绿 色木霉 （ Ｔ ｒ ｉ ｃ ｈ ｏ ｄ ｅ ｒ ｍ ａ ｖ ｉ ｒ ｉ ｄ ｅ ） 、
７ ０ ％（ ｍ ／ ｍ） ． 初 步分析 了该 抗 菌粗 蛋 白的理 化 性 质 ， 结 果表 明 ， 该 活 性物 质 具 有很 好 的 耐 热性 ， 经
６ ０、 ８ ０、 １ ０ ０ ℃甚 至 １ ２ １ ｏ Ｃ处理 后 ， 活性均 无 明显差异 ； 耐 强酸强碱 ， 在ｐ Ｈ值 为 ２～ｌ ２范 围 内活性 不
受影 响 ； 紫外照射 ０—１ ２ ｈ及 用蛋 白酶 Ｋ、 胰 蛋 白酶 、 木瓜 蛋 白酶 处理后 ， 活性 均没有 减弱 ； 但 对 多种
有机 溶剂 比较 敏 感 ， 经 三氯 甲烷 、 乙酸 乙酯 、 乙醚和 丙酮 处理后 ， 抗 菌活性 受到 不 同程度 的 抑 制 ， 其 抑制 率 分别 为 ３ ５ ％、 ２ ５ ． ７ ％、 ２ ２ ． ９ ％、 １ ２ ． ９ ％． 证 明该抗 菌活性 物 质 高效 、 稳定， 可 用 于抗 真 菌农 药
物 病虫 害对增 加农 产 品 的输 出显 得 越 为重 要 … ． 其
中真菌病 害是 植物 病 害 里最 重 要 的一 类 ， 约 占植 物 病害的 ７ ０ ％ ～８ ０ ％． 在世界范围内， 由于 真 菌 致病
体合成 小分 子抗 菌肽 及 大量 的抗 菌蛋 白。 。 ｊ ． 真 菌 中
腐烂苹果中的细菌分离以及理化性质的检测
关键词： 腐烂苹果、 细菌、 平板直线划线法、 革兰氏染色、 水解淀粉、 分光光度法
Study the Bacteria of Rotten Applesin the Separation and Physical & Chemical Properties Lin jia-wan (College of life science,South China Normal University, Guangzhou 510631,China )
合物牢牢留在壁内，使其仍呈紫色；而革兰氏阴性菌因其细胞壁薄、 外膜层类脂含量高、肽聚糖层薄且交联度差，在遇脱色剂后，以类脂 为主的外膜迅速溶解， 薄而松散的肽聚糖网不能阻挡结晶紫与碘复合 物的溶出，因此通过乙醇脱色后仍呈无色，再经复红复染，就使革兰 氏阴性菌呈红色。 2.2 细菌水解淀粉实验原理 某些细菌可以产生水解淀粉的淀粉酶，它能把淀粉水解为糊精、 麦芽糖、葡萄糖，再被细菌所利用。淀粉水解后，遇碘不再变蓝色、 产生透明圈。菌体培养后，平板上加上卢戈氏碘液，在淀粉发生水解 的地方，淀粉-碘复合物的蓝色特征就会消失。淀粉的水解发生在离 开菌落的一段距离， 这是因为产生的胞外淀粉酶渗入到周围的培养基 中所致。若无透明圈，表明该细菌无淀粉酶。 2.3 pH 影响细菌生长实验的原理 不同微生物对 pH 条件的要求各不相同，它们只能在一定的 pH 范 围内生长，可分为生长最低 pH，生长最适 pH，生长最高 pH。 细菌一般在 pH4-9 范围内生长，生长最适 pH 一般为 6.5-7.5；在 实验条件下，人们常将培养基 pH 调至接近中性，而微生物在生长过 程中常由于糖的酵解产酸或蛋白质降解产碱而使环境的 pH 发生变化， 从而影响微生物的生长。 3 实验步骤 3.1 配制培养基 3.1.1 配制牛肉膏蛋白胨固体培养基
芽孢的理化性质、芽孢率的定性与定量检测方法
芽孢杆菌定性定量检测方法近年来，微生态制剂在调控动物体内微生态平衡等方面的研究和应用正逐步深入，我国现在已经允许使用的安全微生物有很多种，枯草芽孢杆菌（Bacillus Subtilis）因具有稳定性好、抗性强、复活率高等自身优势，成为研究和应用较多的菌种之一。
它在目标动物肠道中，通过生物夺氧作用，拮抗致病微生物，并产生多种消化酶和多种营养物质，调节消化道健康，增强动物体的免疫功能，预防疾病的发生，达到促进目标动物的生长、提高饲料的转化率的目的。
在微生态制剂检测中芽孢杆菌的数量以及芽孢率是衡量微生态制剂产品质量的重要指标。
本文旨在介绍芽孢杆菌的特点及其快速、简便的定性、定量检测芽孢杆菌的方法。
一、枯草芽孢杆的理化性质枯草芽孢杆菌菌落表面粗糙不透明，污白色或微黄色（见图1），在液体培养基中生长时，常形成皱褶。
需氧菌。
单个细胞微米、着色均匀。
无荚膜，全身鞭毛能活动。
革兰氏阳性菌，芽孢微米，椭圆到柱状，位于菌体中央或稍偏，芽孢形成后菌体不膨大（显微形态见图2）。
图1 枯草芽孢杆菌平板菌落图2 枯草芽孢杆菌显微形态二、芽孢孢子的定性检测1、染色基本方法如下：（1）取微生态制剂样品1g，加入99mL无菌水，充分摇匀，37℃ 20-30min；（2）用接种环，取菌液，涂于载玻片，风干固定；（3）在涂菌液加入%孔雀绿饱和水溶液，染色10分钟后，用水冲洗至无绿色即可，再用%品红液染色1min，水冲洗、风干后镜检（100倍油镜加香柏油1滴）。
2、结果判断：芽孢孢子呈绿色，营养体呈红色。
三、芽孢孢子的定量检测1、血球计数板法（1）原理：利用血球计数板在光学显微镜下，查出芽孢个数，再用公式计算出1克样品中含芽孢个数。
（2）仪器：血球计数板（25×16格），光学显微镜，刻度吸管，三角瓶，振荡器和玻璃球。
（3）方法和步骤：?a、取样及样品制备：称取待测样品1克（精确到克）装入盛有99毫升水的三角瓶中，然后用振荡器或加玻璃球摇匀，使菌液均匀分布。
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菌体理化性质鉴定试验
1 V-P试验
原理：菌在葡萄糖蛋白胨水培养基中能分解葡萄糖产生丙酮酸，丙酮酸缩合，脱羧成乙酰甲基甲醇，后者在强碱环境下，被空气中的氧氧化为二乙酰，二乙酰与蛋白胨中的胍基生成红色化合物，称V－P（+）反应。
培养基配制方法：
蛋白胨5g；葡萄糖5g；NaCl(K2PO4):5g；蒸馏水：1000mL；PH:7.0～7.2，分装试管，毎管装约4～5cm，115℃灭菌20min。
试剂：40%NaOH(或KOH)，a-萘酚。
试验方法：
将试验菌接种于上述培养基，于36±1°C培养4天、培养液 2.5ml先加入a萘酚（2-na-phthol）纯酒精溶液0.6ml,再加40%氢氧化钾水溶液0.2ml，摇动2～5min，阳性菌常立即呈现红色，若无红色出现，静置于室温或36±1°C恒温箱，如2h内仍不显现红色、可判定为阴性。
结果记录：阳性：+，阴性：- 。
2甲基红（Methyl Red）试验
原理：有些细菌能发酵葡萄糖，在分解葡萄糖过程中产生丙酮酸，进一步分解中，由于糖代谢的途径不同，可产生乳酸，琥珀酸、醋酸和甲酸等大量酸性产物，可使培养基PH值下降至pH4.5以下，使甲基红指示剂变红。
培养基配制方法：
与V-P试验培养基一致。
试剂：甲基红:0.1g，95%乙醇：300mL，蒸馏水：200mL。
试验方法：
挑取新的待试纯培养物少许，接种于通用培养基，培养于36±1°C或30°C（以30°C较好）3～5天，从第二天起，每日取培养液1ml，加甲基红指示剂1～2滴，阳性呈鲜红色，弱阳性呈淡红色，阴性为黄色。
迄至发现阳性或至第5天仍为阳性、即可判定结果。
结果记录：阳性：+，阴性：- 。
3 糖、醇发酵试验
原理：不同微生物分解利用糖类的能力有很大差异，或能利用或不能利用，能利用者，或产气或不产气。
可用指示剂及发酵管检验。
有些细菌分解某些糖（醇、苷）产酸（符号：+）、产气（符号：○），培养基由紫（蓝）变黄（指示剂溴甲酚紫或溴百里酚蓝由紫或蓝遇酸变黄的结果），并有气泡；有些产酸，仅培养基变黄；有些不分解糖类（符号：－），培养基仍为紫（蓝）色。
培养基配制：
一般细菌常用休和李夫森二氏培养基：
蛋白胨：2g ，K2HPO4 :0.2g ，NaCl:5g ，糖（醇、糖苷）：1% ，水洗琼脂：5～6g，蒸馏水：1000mL，PH:6.8～7.0，溴百里酚蓝：1%水溶液3mL(先用少量的95%乙醇溶解后，再加水配成1%水溶液)。
先调PH后再加指示剂。
芽孢杆菌培养基配制：
(NH4)2HPO4:1g ，MgSO4:0.2g ，KCl:0.2g ，酵母膏：0.2g ，糖（醇、糖苷）：1%水洗琼脂：5～6g ，蒸馏水：1000mL ，溴甲酚紫：0.4%乙醇液2mL，PH:6.8～7.0。
先调PH 后再加指示剂。
将以上培养基分装试管，培养基高度约为4～5cm ，115℃灭菌20min。
测定的糖（醇、糖苷）类可以包括：葡萄糖、蔗糖、甘露糖、乳糖（1.5%）、半乳糖（1.5%）、
D-山梨醇、果糖、阿拉伯糖、麦芽糖、纤维二糖、木糖、水杨苷等。
注意：以上亦可用液体培养基。
接种和观察结果：
用18～24h的幼龄菌种，用穿刺针接种于培养基中，适温培养1d，3d，5d后观察，颜色变黄为阳性，不变为阴性；有气泡产生为产气。
结果记录：
产酸：+，产气：○，不产酸长气：- 。
4.明胶（Gelatin）液化试验
原理：有些细菌具有明胶酶（亦称类蛋白水解酶），能将明胶先水解为多肽，又进一步水解为氨基酸，失去凝胶性质而液化。
培养基配制方法：蛋白胨：5g，明胶：120g，蒸馏水：1000mL。
PH:7.2～7.4，分装试管，毎管装约4～5cm，115℃灭菌20min。
试验方法：
挑取18~24h待试菌培养物，以较大量穿刺接种于明胶高层约2/3深度。
于20~22℃培养7~14天。
明胶高层亦可培养于36±1℃。
每天观察结果，若因培养温度高而使明胶本身液化时应不加摇动、静置冰箱中待其凝固后、再观察其是否被细菌液化，如确被液化，即为试验阳性。
否则为阴性。
5尿酶（Urease）试验
原理：有些细菌能产生尿素酶，将尿素分解、产生2个分子的氨，使培养基变为碱性，酚红呈粉红色。
尿素酶不是诱导酶，因为不论底物尿素是否存在，细菌均能合成此酶。
其活性最适pH为7.0。
培养基配制方法：
蛋白胨：1 g ；NaCl：5 g ；KH2PO4 ：2 g ；葡萄糖1 g ；琼脂：15 g；酚红：0.012g；蒸馏水1000 ml。
除酚红外，溶解上述成分，并调节PH为6.8～6.9，然后加入酚红指示剂，使培养基呈橙黄色，分装，115℃灭菌20min。
待培养基冷至50℃左右，加入预先过滤除菌的20%尿素水溶液，使其终浓度为2%。
试验方法：
挑取18~24h待试菌培养物大量穿刺接种于琼脂斜面，不要到达底部，培养1～4d观察结果，如为阴性应继续培养一下，作最终判定，变为粉红色为阳性。
6七叶苷试验（七叶灵试验）：
培养基：
牛肉膏：10g
七叶灵：5g
琼脂：20g
H2O：1000mL
pH: 自然
分装三角瓶，121℃灭菌30min。
另配5%FeCl3水溶液，单独灭菌。
培养基融化后，先将每个平板加上FeCl3溶液二滴，然后倒培养基混匀，凝固后点接菌种，30℃培养2-3d观察。
菌苔周围出现深褐色区者为阳性反应。
7苯丙氨酸脱氨酶试验培养基（/L):酵母膏3g,Na
2HPO
4
1g,DL一苯丙氨酸2g,
NaCl 5g,琼脂12g"
8鸟氨酸和赖氨酸脱羧酶:蛋白胨5g,牛肉膏5g,D-葡萄糖0.5g维生素
B65mg,澳甲酚紫(1.6%)0.625mL,甲酚红(0.2%)2.5mL,琼脂5g"
9 DNA酶试验培养基(/L):酪阮水解物15g,大豆蛋白脉5g,NaCL 5g,DNA2g, 甲苯胺蓝0.1g,琼脂15g。