双波长紫外分光光度法测邻苯二甲酸间苯二甲酸
实验一双波长分光度计法测定Co2+、Cr3+中Co2+的测定
实验一双波长分光度计法测定Ｃo2+、Cr3+中Co2+的测定[实验目的和要求]1、掌握双波长分光光度法的方法原理。
2、了解紫外分光光度计的构造、原理。
[实验内容]1、Co2+标准溶液的配制。
2、Co2+、Cr3+吸收光谱测定。
3、Co2+工作曲线制作。
4、Co2+、Cr3+混合试液中Co2+测定。
[主要实验仪器与试剂]1．ＵＶ－2501 PC紫外分光光度计（岛津公司）。
2．Co2+标准溶液实验二火焰光度法测河水中钾、钠的含量[实验目的和要求]1、掌握火焰光度计操作。
2、学习火焰光度法测钾、钠含量的方法。
[实验内容]1、工作曲线绘制。
2、试样测定。
[主要实验仪器与试剂]6400型火焰光度计、钾、钠标准溶液、试样。
实验三荧光分析法测定邻-羟基苯甲酸和间-羟基苯甲酸[实验目的和要求]1、学习荧光分析法的基本原理和操作；2、用荧光分析法进行多组分含量的测定。
[实验内容]1、标准系列和未知溶液的配制；2、荧光激发光谱和发射光谱测定；3、荧光强度测定。
[主要实验仪器与试剂]1、荧光光度计2、邻-羟基苯甲酸和间-羟基苯甲酸标准液实验四原子吸收法测定水样中铜[实验目的和要求]1、掌握原子吸收分光光度计的使用方法。
2、掌握原子吸收法的定量测量技术。
[实验内容]1、溶液配制。
2、吸光度测定。
[主要实验仪器与试剂]1、Z5000型原子吸收分光光度计。
2、铜空心阴极灯。
3、空气压缩机。
实验五HAAS和CAAS测定人发中的汞（一）[实验目的和要求]1、掌握原子吸收分光光度计的使用方法。
2、掌握二种原子吸收法的定量测量技术。
[实验内容]1、溶液配制。
2、吸光度测定。
[主要实验仪器与试剂]1、Z5000型原子吸收分光光度计和冷原子吸收仪。
2、高压汞灯。
3、高纯氮。
实验六HAAS和CAAS测定人发中的汞（二）[实验目的和要求]1、了解复杂样品的预处理方法；2、掌握二种原子吸收仪器测汞优缺点的比较。
[实验内容]1、样品处理；2、吸光度测定。
紫外分光光度法测定两面针中总生物碱的含量
·50· Chinese Journal of Information on TCM Jan.2008 Vol.15 No.1紫外分光光度法测定两面针中总生物碱的含量章伟1,刘韶2,何桂霞1,(1.湖南中医药大学药学院,湖南 长沙 410004；2.中南大学湘雅医院药剂科,湖南 长沙 410008)摘要：目的 建立紫外分光光度法测定两面针中总生物碱含量的方法。
方法 采用紫外分光光度法,以氯化两面针碱为对照,在329 nm波长处进行含量测定。
结果 线性范围为3～8 µg/mL,回归方程：Y＝97.746X－0.025 5,r＝0.999 1 (n＝6)。
氯化两面针碱的平均回收率为99.5%,RSD＝2.32%(n＝5)。
结论 方法简便、提取完全、重现性好、结果准确。
关键词：两面针；生物碱；含量测定；紫外分光光度法中图分类号：R284.1 文献标识码：A 文章编号：1005-5304(2008)01-0050-02Determination of Alkaloids in Zanthoxylum Nitidum by Ultraviolet Spectrophotometry ZHANG Wei1, LIU Shao2, HE Gui-xia1(1.Hunan University of TCM, Changsha 410004, China；2.Xiangya Hospital of South China University, Changsa 410008, China)Abstract：Objective To establish a simple method for determination the Alkaloids contents from Zanthoxylum nitidum. Methods Adopting nitidunechloride as reference, alkaloids in Zanthoxylum nitidum were by ultraviolet spectrophotometry at 329 nm.Results The liner arrange was 3～8 µg/mL, regression equation：Y＝97.75X－0.025 5, r＝0.999 1 (n＝6). The mean recovery of Nitidunechloride was 99.46%, RSD＝0.93% (n＝5).Conclusion The method performed is accurate and simple. The reproducibility and rate of extraction are also desirable.Key words：Zanthoxylum nitidum；Alkaloids；content determination；ultraviolet spectr-ophometry两面针[Zanthoxylum nitidum(Roxb.)DC.]为芸香科花椒属植物,在我国主要分布于福建、广东、广西、云南等地,是民间常用的一种植物药。
实验一紫外可见分光光度法测定Fe2+含量一、实验目的
实验一紫外可见分光光度法测定Fe2+含量一、实验目的1．掌握721B、752等紫外可见分光光度计的操作方法；2．掌握水中Fe2+的测定原理及方法；3．掌握标准曲线的绘制方法及利用标准曲线进行定量分析的方法。
二、实验原理1，10-邻二氮菲（邻菲罗啉）是测定微量铁的一种较好的显色剂。
在PH值2～9的水溶液中，邻菲罗啉与Fe2+生成稳定的橙红色配合物。
反应如下：Fe2++ 邻菲罗啉→邻菲罗啉亚铁（橙红色）本实验在水溶液中，以邻菲罗啉为显色剂，在510nm波长下，以2cm比色皿测定一组标准显色溶液的吸光度，绘制标准曲线，并同时测定试样中Fe2+的吸光度，利用标准曲线求得试样中Fe2+的含量。
三、仪器与试剂1．仪器紫外可见分光光度计1台；50mL 容量瓶7个；10mL 移液管1只；10mL 量筒1只。
2．试剂（1）10μg/mL Fe2+标准液准确称取0．7021克分析纯（NH4）2Fe （SO4）26H2O置于烧杯中，加入30 mL浓度为2mol/L的HCl溶液˙溶解后转入1000 mL容量瓶中，以水稀至刻度，从此溶液中吸取50 mL 于500 mL容量瓶中，加入20 mL浓度为2mol/L的HCl溶液后以水稀释至刻度。
（2）10%盐酸羟胺（用时配制）（3）0.15%邻菲罗啉溶液（用时配制）（4）HAc-NaAc缓冲溶液四、实验步骤1．Fe2+标准系列及Fe2+试液的配制准确移取10ug/mL Fe2+标准液0.00，1.00，2.00，3.00, 4.00，5.00mL 分别于6个50mL容量瓶中，在另一个50mL容量瓶中准确加入Fe2+试液2.5mL ，在上述标准溶液及试液中依次分别加入5mL HAc-NaAc 缓冲溶液，2.5mL盐酸羟胺以及2.5mL邻菲罗啉，然后用蒸馏水稀至刻度，摇匀后备用。
2．标准曲线的绘制及试液测定在510nm波长下，以2cm比色皿依次测定上述标准溶液及试液的吸光度，然后以吸光度为纵坐标，以浓度为横坐标，绘制标准曲线，并从曲线上查出Fe2+试液的浓度，计算出原始试液的质量浓度。
双波长分光实验报告
一、实验目的1. 了解双波长分光光度法的基本原理和操作步骤。
2. 掌握双波长分光光度法测定溶液浓度的方法。
3. 熟悉实验仪器的使用和操作。
二、实验原理双波长分光光度法是一种基于物质对特定波长光吸收特性的分析方法。
其原理是在单位时间内，有两条不同波长的光束交替照射待测溶液，通过检测器测出两个波长下溶液的吸光度，并计算吸光度差值，从而确定待测物质的浓度。
该方法的优点是：1. 克服了单波长法易受溶液混浊和背景吸收等干扰的缺点。
2. 提高了测定结果的精密度和准确度。
三、实验仪器与试剂1. 实验仪器：双波长分光光度计、比色皿、移液管、吸管、烧杯、蒸馏水、待测溶液等。
2. 实验试剂：待测溶液（已知浓度）、标准溶液（已知浓度）、参比溶液、试剂等。
四、实验步骤1. 将待测溶液、标准溶液和参比溶液分别倒入比色皿中。
2. 将比色皿放入双波长分光光度计中，设定测量波长和参比波长。
3. 打开仪器，预热10分钟。
4. 分别测定待测溶液、标准溶液和参比溶液在测量波长和参比波长下的吸光度。
5. 计算吸光度差值（ΔA = A测 - A参）。
6. 以标准溶液的浓度为横坐标，吸光度差值为纵坐标，绘制标准曲线。
7. 根据待测溶液的吸光度差值，从标准曲线上查得待测溶液的浓度。
五、实验结果与分析1. 标准曲线绘制：根据实验数据，绘制标准曲线，如图所示。
2. 待测溶液浓度测定：根据待测溶液的吸光度差值，从标准曲线上查得待测溶液的浓度为0.05 mg/L。
六、实验讨论1. 实验过程中，应注意保持仪器和比色皿的清洁，避免污染。
2. 实验数据应准确记录，减少误差。
3. 标准曲线绘制时应尽量使标准溶液的浓度范围与待测溶液的浓度相近，以提高测定结果的准确度。
4. 双波长分光光度法在实际应用中，应注意选择合适的测量波长和参比波长，以克服干扰因素的影响。
七、实验总结本实验通过双波长分光光度法测定了待测溶液的浓度，结果表明该方法具有操作简便、准确度高、抗干扰能力强等优点。
紫外实验课件
四、分子吸收光谱与电子跃迁
1．紫外—可见吸收光谱
有机化合物的紫外—可见吸收光谱，是其分子中外层价 电子跃迁的结果（三种）：σ电子、π电子、n电子。 分子轨道理论：一个成 键轨道必定有一个相应的反 键轨道。通常外层电子均处 于分子轨道的基态，即成键 轨道或非键轨道上。
吸收光谱法紫外可见分光光度法原子吸收光谱法红外吸收光谱法x射线吸收光谱法y射线光谱法莫斯鲍尔核磁共振波谱法激光吸收光谱法电磁波和跃迁类型y射线核跃迁内层电子跃迁远紫外中层电子跃迁紫外可见外层电子跃迁红外光分子振动微波分子转动当强度为i0的一定波长的单色入射光束通过装有均匀待测物的溶液介质时该光束将被部分吸收ia部分反射ir余下的则通过待测物的溶液it即有
1）测量波长的选择：
max Amax 测定灵敏度高 max 左右 较小的A
A E 须在max 下测定 C l
2013-12-9
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2）吸光度读数范围的选择： 3）参比溶液(空白溶液)的选择：
选A=0.2~0.8
注：采用空白对比消除因溶剂和容器的吸收、光的散射和 界面反射等因素对透光率的干扰
3.紫外—可见分子吸收光谱与电子跃迁
物质分子内部三种运动形式： （1）电子相对于原子核的运动 （2）原子核在其平衡位置附近的相对振动 （3）分子本身绕其重心的转动
分子具有三种不同能级：电子能级、振动能级和转动能级
三种能级都是量子化的，且各自具有相应的能量 分子的内能：电子能量Ee 、振动能量Ev 、转动能量Er 即 E＝Ee+Ev+Er ΔΕe>ΔΕv>ΔΕr
双波长分光光度法测定
邹 晓 菊
目
录
前言
实验原理 实验部分
结果与讨论
结论
前言
5- Br - PADAP 是一个性能优良的杂环偶氮指示 剂。已被用于铁、锰、镍、锌等微量金属离子 的测定，有关此试剂的性能及应用已有报道。 测定解离常数的方法有电位滴定法，分光光度 法，电导率法和毛细管电泳法等。
Y=0.3794pH-4.0195；R2=0.9713 Y=0.3848pH-4.0700；R2=0.9633 Y=0.3292pH-3.5870；R2=0.9563 Y=0.4177pH-4.3413；R2=0.9623 Y=0.5285pH-5.4789；R2=0.9690 Y=0.5549pH-5.6193；R2=0.9705
10.59 10.58 10.90 10.39 10.37 10.13
表3 本文结果与文献值的比较
离解常数 测量值 文献值
pKa2 2.37 2.39
pKa3 10.59 11.64
结论
1、由于测量时溶液与文献值测量时条件不同，而且未 在实验条件及操作完全相同的情况下采取多做几组取 平均值的方法，因而测量值与文献值有所不同。 2、 应用双波长分光光度法测定药物的pKa值时无需知 道供试液的准确浓度，只要求各份溶液的浓度相等， 因此操作较为方便和迅速。本文虽控制离子强度为一 定值，但在离子强度确定的情况下，酸解离常数仍然 会受有机溶剂的影响，由此可 A2
(5)
-1)则
Y= pH-pKa （6）
若其酸式体的摩尔吸光系数相等，即 εHL1 =εHL2 。 在这种情况下，根据类似的数学推导，可以得 到下式： AHL1 AHL 2 lg( -1)=pKa-pH (7) A A
教案：紫外可见分光光度计法测定食品中苯甲酸钠的含量
教案：紫外可见分光光度计法测定⾷品中苯甲酸钠的含量紫外可见分光光度计法测定⾷品中苯甲酸钠的含量⼀、实验⽬的1、了解和熟悉紫外-分光光度计的原理、结构和操作⽅法；2、掌握紫外分光光度法测定苯甲酸的吸收光谱图；3、掌握标准曲线法测定样品中苯甲酸钠的含量。
⼆、实验原理为了防⽌⾷品在储存、运输过程中发⽣腐蚀、变质，常在⾷品中添加少量防腐剂。
防腐剂使⽤的品种和⽤量在⾷品卫⽣标准中都有严格的规定，苯甲酸及其钠盐、钾盐是⾷品卫⽣标准允许使⽤的主要防腐剂之⼀，其使⽤量⼀般在0.1%左右。
苯甲酸及苯甲酸钠具有芳⾹结构在近紫外光区具有较强的吸收。
通过实验证实，苯甲酸在230nm处具有最⼤吸收。
另⼀⽅⾯，它在⽔中具有适当的溶解度，所以，可将标样和样品处理成⽔溶液，采⽤紫外分光光度计，通过标准曲线法⽽实现酸性⾷品中苯甲酸（钠）含量的测定。
由于⾷品中苯甲酸⽤量很少，同时⾷品中其它成分也可能产⽣⼲扰，因此⼀般需要预先将苯甲酸与其它成分分离。
从⾷品中分离防腐剂常⽤的⽅法有蒸馏法和溶剂萃取法等。
本实验测定雪碧、可⼝可乐、醒⽬等饮料中苯甲酸（钠），样品不⽤处理，在230nm波长处测定标准溶液及样品溶液的吸光度，绘制标准曲线法，可求出样品中苯甲酸的含量。
3、仪器和试剂仪器：紫外可见分光光度计 TU-1810（北京普析通⽤仪器有限公司），1.0cm⽯英⽐⾊⽫，50ml容量瓶11个，吸量管5mL⼀⽀、1mL两⽀。
试剂：苯甲酸钠标准贮备液（1.000g/L）：准确称量经过⼲燥的苯甲酸钠1.000g（105℃⼲燥处理2h）于1000mL容量瓶中，⽤适量的蒸馏⽔溶解后定容。
该贮备液可置于冰箱保存⼀段时间；0.1mol/L NaOH溶液；市售饮料。
四、实验步骤1、标准曲线的制作苯甲酸钠标准溶液（100.0mg/L）：准确移取苯甲酸储备液5.00mL 于50mL容量瓶中，加⼊蒸馏⽔稀释定容。
苯甲酸钠系列标准溶液的配制：分别准确移取苯甲酸钠标准溶液0.00mL、1.00mL、2.00mL、3.00mL、4.00mL和5.00mL于6个50mL容量瓶中，各加⼊0.1mol/LNaOH溶液1.00mL蒸馏⽔稀释定容，摇匀。
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紫外分光光度法测定两面针中总生物碱含量 2012-12-28 【编者按】：医药论文是科技论文的一种是用来进行医药科学研究和描述研究成果的论说性文章。
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紫外分光光度法测定两面针中总生物碱含量 【摘要】：目的建立紫外分光光度法测定两面针中总生物碱含量的方法。
方法采用紫外分光光度法,以氯化两面针碱为对照,在329 nm波长处进行含量测定。
结果线性范围为3～8 g/mL,回归方程：Y=97.746X-0.025 5,r=0.999 1(n=6)。
氯化两面针碱的平均回收率为99.5%,RSD=2.32%(n=5)。
结论方法简便、提取完全、重现性好、结果准确。
【关键词】两面针生物碱含量测定紫外分光光度法 Abstract：Objective To establish a simple method for determination the Alkaloids contents from Zanthoxylum nitidum. Methods Adopting nitidunechloride as reference, alkaloids in Zanthoxylum nitidum were by ultraviolet spectrophotometry at 329 nm. Results The liner arrange was 3～8 g/mL, regression equation：Y=97.75X-0.025 5, r=0.999 1 (n=6). The mean recovery of Nitidunechloride was 99.46%, RSD=0.93% (n=5). Conclusion The method performed is accurate and simple. The reproducibility and rate of extraction are also desirable. Key words：Zanthoxylum nitidum;Alkaloids;content determination;ultraviolet spectr-ophometry 两面针[Zanthoxylum nitidum(Roxb.)DC.]为芸香科花椒属植物,在我国主要分布于福建、广东、广西、云南等地,是民间常用的一种植物药。