多糖提取实验设计流程【复习准备】
多糖提取测定实验报告
一、实验目的1. 掌握多糖提取的基本原理和操作流程。
2. 了解不同植物多糖提取方法的优缺点。
3. 学习并掌握多糖含量的测定方法。
4. 通过实验，提高实验操作技能和数据分析能力。
二、实验原理多糖是一类由单糖通过糖苷键连接而成的生物大分子，广泛存在于植物、动物和微生物中。
多糖具有多种生物活性，如免疫调节、抗炎、抗氧化、降血糖等。
本实验采用水提醇沉法提取植物多糖，并利用苯酚-硫酸法测定多糖含量。
三、实验材料1. 实验药品：苯酚、浓硫酸、95%乙醇、无水乙醇、NaOH、盐酸等。
2. 实验仪器：电子天平、电热恒温水浴锅、分光光度计、烧杯、漏斗、玻璃棒等。
3. 实验材料：植物样品（如大蒜、枸杞、人参等）。
四、实验方法1. 植物样品处理：将植物样品干燥、研磨成粉末，过筛，备用。
2. 多糖提取：称取一定量的植物样品粉末，加入适量的水，在80℃水浴中提取2小时，过滤，收集滤液。
3. 醇沉：向滤液中加入等体积的95%乙醇，搅拌，静置过夜，使多糖沉淀。
4. 沉淀处理：将沉淀用无水乙醇洗涤三次，每次洗涤后静置，取上清液，浓缩至一定体积。
5. 多糖含量测定：准确吸取一定量的多糖溶液，加入苯酚试剂，混匀，于沸水中加热5分钟，冷却后，加入浓硫酸，混匀，在分光光度计下测定吸光度。
五、实验结果与分析1. 不同植物样品多糖提取率比较：通过比较不同植物样品多糖提取率，可以了解不同植物多糖的提取效果。
2. 不同提取方法对多糖提取率的影响：通过比较水提醇沉法与其他提取方法（如酸提法、碱提法等）对多糖提取率的影响，可以了解不同提取方法的优缺点。
3. 多糖含量测定结果：根据苯酚-硫酸法测定多糖含量的原理，可以计算出多糖的含量。
六、实验结论1. 水提醇沉法是一种简单、有效的植物多糖提取方法。
2. 不同植物样品多糖提取率存在差异，可能与植物种类、生长环境等因素有关。
3. 苯酚-硫酸法是一种准确、可靠的多糖含量测定方法。
七、实验注意事项1. 提取过程中，注意控制温度和时间，以避免多糖分解。
多糖提取_实验报告
一、实验目的1. 了解多糖的基本性质和提取方法。
2. 掌握水提法、醇沉法、离子交换法等多糖提取方法。
3. 通过实验，提高对多糖提取技术的实际操作能力。
二、实验原理多糖是一类高分子碳水化合物，广泛存在于植物、动物和微生物中。
多糖具有多种生物活性，如免疫调节、抗炎、抗病毒、抗肿瘤等。
多糖的提取方法有水提法、醇沉法、离子交换法等。
本实验采用水提法、醇沉法、离子交换法三种方法提取多糖。
三、实验材料与试剂1. 实验材料：胡萝卜、葡萄糖、淀粉、纤维素酶、DE-23、DE-41、Sepharose（2B、4B、6B）等。
2. 实验试剂：蒸馏水、95%乙醇、95%丙酮、NaCl、NaOH、HCl、氯化钙、蒽酮、十六烷基三甲基溴化铵（CTAB）、葡萄糖、磷酸盐缓冲溶液（PBS）等。
3. 仪器：组织匀浆机、水浴锅、台式高速离心机、分光光度计、磁力搅拌器、抽滤瓶、烧杯、移液管、试管等。
四、实验步骤1. 水提法提取多糖（1）将胡萝卜洗净、去皮、切片，称取适量胡萝卜组织，用组织匀浆机匀浆。
（2）将匀浆液转移到烧杯中，加入适量的蒸馏水，搅拌溶解。
（3）将溶液转移到离心管中，离心分离，取上清液。
（4）将上清液转移到烧杯中，加入95%乙醇，静置过夜。
（5）次日，离心分离，取沉淀。
（6）将沉淀用95%丙酮洗涤，干燥，得到胡萝卜多糖。
2. 醇沉法提取多糖（1）将胡萝卜匀浆液转移到烧杯中，加入适量的蒸馏水，搅拌溶解。
（2）将溶液转移到离心管中，离心分离，取上清液。
（3）将上清液转移到烧杯中，加入适量的95%乙醇，搅拌溶解。
（4）将溶液转移到离心管中，离心分离，取沉淀。
（5）将沉淀用95%丙酮洗涤，干燥，得到胡萝卜多糖。
3. 离子交换法提取多糖（1）将胡萝卜匀浆液转移到烧杯中，加入适量的蒸馏水，搅拌溶解。
（2）将溶液转移到离心管中，离心分离，取上清液。
（3）将上清液转移到烧杯中，加入适量的NaCl，搅拌溶解。
（4）将溶液转移到离子交换柱中，用蒸馏水冲洗至流出液无Cl-。
正交设计多糖提取实验方案
多糖正交实验方案基本提取工艺流程：黄精、百合干燥粉碎——石油醚脱脂2次——加水热提——提取液过滤——水浴浓缩——离心取上清——加入Sevag试剂脱蛋白操作——取上层水层——加无水乙醇沉淀——收集沉淀——用水溶解——过滤除杂质——重复1次醇沉——收集沉淀——加水溶解定容——成为贮备液。
精密量取贮备液——加水稀释定容——供测多糖含量。
精密量取贮备液——置锥形瓶水浴蒸干——干燥3h——冷却后——称重，计算浸膏得率。
一、提取过程的正交方案：1、称取黄精、百合各10g干燥至恒重——粉碎成粗粉（过筛）——（置于圆底烧瓶中）加入5倍量（100ml）石油醚——水浴50℃加热回流1h，共2次，进行脱脂及除去小分子糖——弃液留渣，药渣晾干（置于培养皿中于通风处过夜晾干，或置于圆底烧瓶中水浴上加热至能轻松倒出）——（按照正交设计表的要求）加适量蒸馏水，于适宜温度，水浴加热回流提取规定次数——合并提取液—减压抽滤——水浴——浓缩（90℃）——至固定量30ml（浓缩过量时补足体积）——4000r/min离心10min——（注射器抽取）取上清液2、——置于锥形瓶中——加入Sevag试剂（氯仿：正丁醇=5:1）约等量——置于恒温水浴振荡器50℃振荡15min——改置于分液漏斗中静置20min以上——待其分层后，取最上层（从上口倒出）——重复操作2次——置于广口瓶，加醇处理，加入4倍量的无水乙醇（预冷过）——冰箱冷藏过夜使其沉淀——减压抽滤，收集沉淀——（连同滤纸一起）用20ml蒸馏水溶解——过滤除去水不溶物——重复1次加醇沉淀，减压抽滤——收集沉淀，加少量蒸馏水溶解，加水稀释——定容至50ml容量瓶中，成为贮备液。
3、精密量取1ml贮备液，加至100ml容量瓶中，加水稀释至刻度，定容摇匀。
供测定多糖含量。
4、精密量取10ml贮备液，置于（已干燥并精密称重的）小锥形瓶中，水浴蒸干，于105℃烘箱干燥3h，取出迅速置于玻璃干燥器内冷却30min，迅速称重，计算浸膏得率。
大枣多糖的提取实验报告
大枣多糖的提取实验报告
一、实验材料
1.1实验药品
1.2实验仪器
二、试验方法
2.1大枣枣肉的成分分析
大枣枣肉的水分、总糖、蛋白质、脂肪、粗纤维、果胶、灰分按常规方法测定。
2.2多糖的得率
多糖得率（%）=M1×C×V
M2×M3×103
×100%
M 1——粗多糖质量g，C——多糖浓度ug/ml，V——样品溶液（500ml），M
2
——配置样品溶液称取的粗多糖质量（20mg），M
3
——大枣粉质量g。
2.3采用苯酚-硫酸法检测糖分
制作标准曲线，准确称取标准葡聚糖20mg于500ml容量瓶中，加水至刻度，分别吸取0.4、0.6、0.8、1.0、1.2、1.4、1.6及1.8ml,各以水补至2.0ml于2~9号比色管，然后加入6%苯酚1.0ml及浓硫酸5.0ml，静置10min，摇匀，室温放置20min以后，于490nm处测光吸光度，以2.0ml水于1号比色管按同样显
色操作为空白，数据如下表。
根据上表，以糖浓度为横坐标，吸光度为纵坐标，绘制标准曲线如下图
由上图可得线性回归方程y=0. 0586x+0. 0601，R2=0. 9992所以本检测方法中糖浓度和吸光度有良好的线性关系。
样品含量的测定：称取20mg粗多糖，配成500ml样品溶液，去1.0ml 样品液，按2.3的步骤操作，测出吸光度，以标准曲线方程计算出多糖浓度C,将浓度C代入2.2公式中，算出多糖得率。
多糖提取工艺流程
第一部分：野生灵芝菌种的分离、扶壮、保藏和培养前言采集吉林长白山野生灵芝，经过菌种分离，鉴定为GANODERMA（英文名称）多孔菌科真菌赤芝Ganoderma lucidum(Leyss.ex Fr.) Karst．的菌种。
经过纯化扶壮培养，成为一支优良的灵芝菌种，为灵芝菌丝体发酵培养和灵芝多糖的提取奠定了基础。
实验室流程：（百级净化超净工作台)菌种分离菌种接种（恒温培养箱）菌种培养扶壮（恒温恒湿冷藏柜）优良菌种保藏（百级净化超净工作台)菌种分离菌种接种（摇床）发酵菌种摇瓶培养（用于接种菌种罐）第二部分：灵芝菌丝体液体发酵培养前言液体发酵培养不同于灵芝子实体栽培，周期短，产量高，无污染，灵芝多糖含量高，节省木材和耕地。
是一种灵芝多糖理想的工厂化现代科技生产方式。
经过摇瓶培养的灵芝菌种接种于种子罐，待生长良好，在接种于扩大的发酵罐中，通过通气恒温培养，长成成年灵芝菌丝体，生长完全后，进行离心分离喷雾干燥，就得到相当于灵芝子实体的灵芝菌丝体粉，多糖含量达到15%左右。
进一步提取加工得到高含量的灵芝多糖。
灵芝菌丝体发酵工艺流程:（配料罐）培养液的配制（菌种罐）菌种的发酵培养（发酵罐）灵芝菌丝体发酵培养（离心机）灵芝菌丝体固液分离（浓缩液配制罐)灵芝菌丝体配制成浓缩液（喷雾干燥塔）浓缩液喷雾干燥，得到灵芝菌丝体粉第三部分：灵芝菌丝体多糖的提取分离前言灵芝菌丝体粉，是大部分不溶解于水，食用以后象灵芝子实体一样，只有少部分成分被吸收，通过现代提取手段，将灵芝菌丝体经过提取罐的水提取，经过真空浓缩，在经过醇沉工艺，加工成可以全部被人体吸收，灵芝多糖含量提高到30-40%灵芝菌丝体提取物。
极大的提高了功效，减少了服用量。
灵芝多糖提取工艺流程：(提取罐）灵芝菌丝体粉水提取（外循环真空浓缩罐）提取液真空浓缩（醇沉罐）浓缩液乙醇沉淀多糖（离心机）沉淀多糖分离(浓缩液储罐）沉淀物配制成多糖浓缩液（喷雾干燥塔）灵芝多糖喷雾干燥（粉碎机）灵芝多糖粉碎到100目（混合机）灵芝多糖粉批量混合（真空包装机）食品塑袋真空包装。
提取植物多糖的实验报告
一、实验目的1. 掌握植物多糖提取的基本原理和操作方法。
2. 学习植物多糖的分离纯化技术。
3. 探讨植物多糖的生物活性。
二、实验原理植物多糖是一类具有生物活性的天然高分子化合物，广泛存在于植物中。
提取植物多糖的原理是利用植物多糖在特定溶剂中的溶解度差异，通过物理或化学方法将植物多糖从植物组织中分离出来。
三、实验材料1. 实验植物：绿豆2. 实验药品：乙醇、蒸馏水、氢氧化钠、盐酸、无水乙醇、丙酮、苯酚、硫酸等3. 实验仪器：粉碎机、搅拌器、离心机、超声波清洗器、紫外可见分光光度计、色谱柱等四、实验步骤1. 植物样品处理取绿豆种子，用粉碎机粉碎成粉末，过筛后备用。
2. 植物多糖提取将绿豆粉末加入一定量的蒸馏水中，搅拌均匀，加热至沸腾，保持沸腾状态30分钟。
然后加入氢氧化钠溶液，调节pH值为7.0，继续煮沸30分钟。
将煮沸后的溶液冷却至室温，加入适量的盐酸溶液，调节pH值为7.0，静置过夜。
3. 植物多糖分离纯化将静置后的溶液离心分离，取上清液。
将上清液加入无水乙醇，静置过夜，沉淀植物多糖。
将沉淀物用蒸馏水洗涤，然后用丙酮洗涤，干燥后得到植物多糖粗提物。
4. 植物多糖结构鉴定采用高效液相色谱（HPLC）法对植物多糖进行结构鉴定。
将植物多糖粗提物溶解于一定浓度的水溶液中，进行HPLC分析，根据保留时间和峰面积判断植物多糖的结构。
5. 植物多糖生物活性测定采用DPPH自由基清除法测定植物多糖的抗氧化活性。
将植物多糖溶解于一定浓度的水溶液中，与DPPH自由基溶液混合，在室温下反应30分钟，测定溶液的吸光度。
以Vc为对照，计算植物多糖的自由基清除率。
五、实验结果与分析1. 植物多糖提取率通过测定植物多糖粗提物的重量，计算植物多糖的提取率。
实验结果表明，绿豆植物多糖的提取率为2.5%。
2. 植物多糖结构鉴定HPLC分析结果表明，绿豆植物多糖主要由葡萄糖、甘露糖和半乳糖组成，分子量为10万～20万。
3. 植物多糖抗氧化活性DPPH自由基清除法测定结果表明，绿豆植物多糖的自由基清除率为60.2%，具有较好的抗氧化活性。
多糖提取的相关操作
一、DEAE柱：1.准备柱子：（1）洗柱：洗涤剂、自来水、去离子水，洗至不挂水珠、水不成股下流。
（2）浸泡滤膜：95%酒精，浸泡柱上下滤膜（包括胶圈）至少30min，时间可延长（5h 左右），主要作用是脱去脂溶性杂质。
每次柱使用完毕后都要做此步骤。
（3）洗布氏漏斗：用10%HCL 抽滤，后用蒸馏水洗涤，去除滤膜板中可能灰尘。
（4）装柱：铁夹夹紧对齐，装完柱后要检查是否漏水。
2.准备填料：（再生步骤）（1）DM过酸过碱：0.2M/L HCL 和NaOH 浸泡填料，先碱后酸，从加入碱时开始计时，一般为30min，加入时用玻棒搅动，以防与碱作用不充分。
但若是新填料，浸泡20min后即可使用。
碱对填料有影响，忌浸泡时间超过30min，一般20min即可。
入碱后，用去离子水（﹥2L，充分去除OH根离子）在布氏漏斗上过滤。
脱水完全(洗2-3遍至中性)。
后浸泡酸。
重生方法同上。
（2）脱气：先溶解DM，再倒入抽滤瓶，真空抽滤，至无白沫，可时而摇晃，抽至无白沫无气泡。
重要，最好能延长脱气时间。
3.上柱：倾倒填料时浓度尽量稀，使填料贴壁下流。
静止。
待填料沉降，吸出上清液，统一收集，反复此操作，尽可能回收填料。
（尽量不起气泡）沉降一段时间后，待上清未完全沉降时倒入尚未倒完的胶，防止多次倾倒引起的分层现象。
此时，用夹子夹住软管，使其不漏液，待沉降完全，出现清水层，去除夹子，滴液。
4.平衡：若上柱平衡后暂时不上样，可隔一天平衡一次，防止长菌。
滴数：三秒1滴，20分钟收集一管约10ml，33小时过柱一体积。
水层不能滴干，防止胶出现干裂现象。
5.检验：用1M AgNO3 检验过柱水中Cl离子是否洗净，至无Cl离子后再过一柱体积。
皆用去离子水。
6.上样：上样前样品水溶，离心，先取上清，收集保留不溶物。
（1）粗柱子：DEAE量占柱体积80%高度（标记高度，要有足够的塔板数），上8克样。
上样步骤：先将螺旋拧开，用夹子夹紧软管，放在液面以上，使其液面不下降。
提取多糖的实验报告(3篇)
第1篇一、实验目的1. 掌握多糖提取的原理和操作流程；2. 了解不同提取方法对多糖提取率的影响；3. 学习多糖的鉴定方法；4. 熟悉实验仪器的使用。
二、实验原理多糖是一类高分子碳水化合物，广泛存在于植物、动物和微生物中。
多糖具有多种生物活性，如抗炎、抗氧化、免疫调节等。
多糖的提取方法主要有热水提取法、酸提取法、碱提取法等。
本实验采用热水提取法提取多糖，并利用苯酚-硫酸法对提取的多糖进行鉴定。
三、实验材料与试剂1. 实验材料：干燥的植物原料（如香菇、大枣、紫菜等）；2. 实验试剂：蒸馏水、NaOH、HCl、苯酚、硫酸、乙醇、DPPH、卡拉菲指示剂等；3. 实验仪器：组织匀浆机、水浴锅、台式高速离心机、分光光度计、容量瓶、移液管、烧杯、漏斗等。
四、实验步骤1. 多糖提取（1）将干燥的植物原料粉碎，过筛，取适量粉末；（2）将粉末加入一定量的蒸馏水中，加热至80℃，保持2小时；（3）冷却后，过滤得到滤液；（4）将滤液加入适量的乙醇，静置过夜，离心，收集沉淀；（5）将沉淀用95%乙醇洗涤，干燥，得到多糖粗品。
2. 多糖鉴定（1）苯酚-硫酸法鉴定①取一定量的多糖粗品，加入苯酚溶液，振荡均匀；②加入硫酸溶液，观察溶液颜色的变化；③与标准溶液进行比较，确定多糖的存在。
（2）DPPH自由基清除法①配制一定浓度的DPPH溶液；②取一定量的多糖粗品，加入DPPH溶液，振荡均匀；③在一定时间后，测定溶液的吸光度；④计算DPPH自由基清除率，评估多糖的抗氧化活性。
五、实验结果与分析1. 多糖提取实验结果表明，热水提取法能够有效地提取植物原料中的多糖，提取率较高。
2. 多糖鉴定（1）苯酚-硫酸法鉴定实验结果显示，多糖粗品与苯酚-硫酸溶液反应后，溶液颜色变为深棕色，说明多糖的存在。
（2）DPPH自由基清除法实验结果显示，多糖粗品对DPPH自由基具有清除作用，清除率随着多糖浓度的增加而增加，表明多糖具有一定的抗氧化活性。
六、实验结论1. 热水提取法能够有效地提取植物原料中的多糖，提取率较高；2. 多糖具有抗氧化活性，可作为天然抗氧化剂；3. 本实验为多糖的提取和鉴定提供了一种简单、实用的方法。
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
食用菌多糖的提取方法有水提法、碱提法和酶提法等，其中酶提法是利用酶对细胞结构的破坏作用，使存在于细胞内部的多糖释放出来，从而提高了多糖的得率。
本次实验采用纤维素酶和果胶酶对紫蘑菇进行水解，研究香菇多糖的最佳提取工艺，并探讨蘑菇粒度、蘑菇溶解方法以及酶法提取中多糖提取效果的评价方法。
可以同步做三组对比试验：⑴采用水提，不加酶；⑵采用酶法提取；⑶采用酶空白（只加酶，不加蘑菇粉）。
由于酶中也含有少量的糖类成分，其存在将会对蘑菇多糖的提取产生影响。
因此，在计算酶法提取多糖的效果时，要减去酶本身所引入的糖。
在确定最佳酶浓度时更要考虑。
一、实验流程：蘑菇干燥→粉碎过筛→加水浸泡0.5h→调PH→加入纤维素酶→提取→离心过滤→测多糖提取率
式中：n一提取液稀释倍数；
C一提取液中多糖的浓度（mg/mL）；
V一提取液体积（mL）；
m一蘑菇的质量（mg）。
测定时取三个平行样，结果数据为平行样的平均数值。
二、具体实验步骤：
1、多糖标准曲线的绘制
精密称取105℃干燥恒重的葡萄糖标准品100mg,置于100 mL容量瓶中,加蒸馏水至刻度,摇匀。
精密吸取0.4、0.8、1.2、1.6、2.0、2.4、2.8 mL分别置于50 mL 容量瓶中,加蒸馏水至刻度,摇匀。
精密吸取上述各种溶液2.0 mL,分别加入5%苯酚溶液1.0 mL,摇匀,迅速加入5.0 mL浓硫酸,振摇5min,置沸水浴上加热15 min,然后置冷水浴中冷却30 min,随行空白,在490 nm波长处测定吸光度。
以标准溶液浓度为横坐标,吸光度值为纵坐标绘制标准曲线，并计算其标准曲线回归方程。
（1）精密度试验:精密吸取1.0 ml供试液按“标准曲线的制备”项下操作，分别测定吸光度，求得RSD。
（2）重现性及多糖含量测定:精密称取巴西蘑菇多糖0.1000g，按“供试液
的配制”和“标准曲线的制备”项下操作，分别测定吸光度，求得多糖的平均含量，及RSD值。
2、单因素实验
（1）水提法
称取蘑菇粉末2g，加入适量水（最佳固液比为1:20），在50℃水中浸泡1h。
升温至100℃，提取2.5h。
将混合物离心、浓缩、乙醇沉淀，计算多糖提取率和纯度。
单因素选择范围
提取温度(℃) 固液比(W/V) 提取时间(h)
70 1:16 1h
80 1:18 1.5h
90 1:20 2h
100 1:22 2.5h
1:24 3h
（2）酶法提取
称取蘑菇粉末2g，加入适量水（最佳固液比为1:20），在50℃水中浸泡1h。
升温至90℃，提取0.5h。
冷却至40℃，加入酶浓度1%，提取液总体积为100ml，PH值5.0，酶解提取1h。
然后升温至90℃提取1h灭酶。
将混合物离心、浓缩、乙醇沉淀，计算多糖提取率和纯度。
单因素选择范围
酶浓度% 酶解温度℃PH值酶解时间h
0.25 30 3.5 0.5
0.5 35 4.0 1
0.75 40 4.5 2
1.0 45 5.0 3
1.25 50 5.5 4
1.5 55 6.0
实验所需药品：纤维素酶，果胶酶，葡萄糖，苯酚，浓硫酸，乙醇器材：100ml容量瓶，50ml容量瓶。