特殊毒性及其试验与评价方法
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F0（断奶或出生８周）
第一次交配 第二次交配
给予受试物8到12周
F１a
观察三个月，喂饲普通饲 料，观察其生长发育情况
F１b
断乳后给予受试 物８到１２周
F２a
观察三个月，喂饲普通饲 料，观察其生长发育情况
F２b 断乳后给予受试
物８到１２周
F３a
F３b
2．两代一窝和一代一窝生殖试验
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一、生殖毒性试验与评定
外来化合物对生殖过程的损害作用，即生殖 毒性。生殖毒性可发生于妊娠期，也可发生 于妊娠前期和哺乳期。
生殖毒性试验主要研究外来化合物对生殖细 胞发生、卵细胞受精、胚胎形成、妊娠、分 娩和哺乳过程的损害及其评定。过去也称为 繁殖试验。
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生殖毒性试验的目的在于了解外源化学物 及其代谢产物对机体成年哺乳动物的生殖 功能和生育力的影响。
分娩时出生幼仔数
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4．幼仔哺乳成活率反映雌性动物授乳哺育幼 仔的能力。
21天断奶幼仔存活数
幼仔哺乳成活率= —————————×100%
出生后4天幼仔存活数
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（四）结果判定
将试验组动物各项观察指标统计结果与对 照组动物进行比较，如试验动物在交配、 妊娠、幼仔存活、幼仔发育(哺育)等方面 受到影响，则说明受试物对动物繁殖功能 有损害作用。
第七章 特殊毒性作用及其试验 与评价方法
第一节 生殖发育毒性及其试验与评价方法 第二节 致突变作用及其试验与评价方法 第三节 致癌作用及其试验与评价方法
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第一节 生殖发育毒性及其试验与评价方法
一、 生殖毒性试验与评定 二、发育毒性试验与评定
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亲代动物（F0）所生仔鼠为第一代（F1）。出生后应检查每窝幼 仔数、死亡数以及肉眼可见幼仔畸形。出生后第4天和第21天逐个 称取重量，仔鼠断奶后，母鼠休息10天，再与雄鼠交配一次，并生 出第二窝仔鼠，亲代共生出仔鼠两窝，分别为F1a和F1b。F1b出生 后，将雄性亲鼠淘汰，雌性亲鼠继续喂受试物，直至F1b出生后21 天断奶为止。F1a断奶后观察其发育情况，不再喂受试物。F1b断 奶后，继续接触受试物8 ～12周，直到性发育成熟，选出雌雄各 16～20只，按前法进行交配。F1b所产第一窝幼仔为F2a，F2a断奶 后，其母鼠F1b休息10天，再次交配，所生幼仔为F2b，F2b断奶后， 将F1b淘汰。F2b交配处理方法与F1b相同。但F2b也可只交配一次， 所产仔鼠为F3a，不再进行第二次交配，试验结束。
多代繁殖试验在整个生命期内接触受试化 学物，更符合人类实际生活中长期低剂量 接触食品添加剂、微量重金属、农药及环 境污染物的情况。
ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ
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（1）试验方法原则
生殖毒性试验多用性成熟大鼠，也可用小鼠或 家兔。大鼠自然受孕率较小鼠为高，较为理想。 一般设三个剂量组，另设对照组。
近年来许多国家与机构多规定采用两代一窝或 一代一窝试验法。
两代一窝生殖试验法基本程序与三代两窝试验 法相同，但只进行到第二代F2，每代只交配一 窝。
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两代一窝(和一代一窝)生殖试验
出生第8周给予受试物（F0） 第16~19周 雌雄交配 F1（每窝选留幼仔８只，雌雄各半）
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动物接触受试物的方式应参照人类实际接触 途径。 一般可混入饲料或饮水中，由动物摄取；也 可采用灌胃或胶囊法。 利用大鼠或小鼠进行试验时，每组雌雄各 16～20只，或雌性16～20只，雄性8～10只。
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（2）试验方法
①三代两窝生殖试验
大鼠断奶或出生8周后，开始喂受试物或以 其它方式与受试物接触，共进行8～12周， 即直到性发育成熟，相当出生后4个月左右。 每周至少称体重一次，记录进食量并观察 有无中毒症状或死亡。
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二、发育毒性试验与评定
1.基本概念 发育毒性指出生前经父体和（或）母体接 触外源理化因素引起的在子代到达成体之 前内出现的有害作用，包括结构畸形、生 长迟缓、功能障碍及死亡。 能造成发育毒性的物质称为发育毒物。
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断奶，给予受试物 F１交配
F2出生，每窝留８只幼仔 F2断奶，检查发育情况
（三）观察指标
在上述各种生殖毒性试验中，根据哺乳动物全部 生育繁殖过程，可观察下列4个指标： 1．受孕率反映雌性动物生育能力以及雌性动物受 孕情况。
妊娠雌性动物数
受孕率= ————————×100%
交配雌性动物数
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最高剂量组剂量应该超过预期人类实际接触
水平，希望能使亲代动物出现轻度中毒，但
不出现死亡或死亡率不超过10%，也不能完 全丧失生育能力。
低剂量组的亲代动物不应观察到任何中毒症
状。
另设中间剂量组应仅能出现极为轻微的中毒
症状。
中间剂量与高剂量和低剂量应呈等比级数。
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将雌雄亲代动物（F0）同笼交配，雌雄比 例为1︰1或2︰1，直到受孕或进行3周为 止。雌鼠受孕后即单笼饲养，继续接触 受试物。交配3周后，如仍未受孕，则停 止交配，并进行生殖器官病理学检查。
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确定是否受孕的方法是每日清晨进行雌性动物阴 道涂片，检查有无精子；亦可检查阴道有无阴栓 出现，以确定受精日期。小鼠阴栓可在阴道口存 留较长时间，但在大鼠极易脱落，次晨检查时往 往在笼下粪便盘中检出。发现阴栓或检出精子， 即为受孕0日，也有作为受孕第1日。
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2．正常分娩率反映雌性动物妊娠过程是否受到影 响。
正常分娩率=
正常分娩雌性动物数
————————
×100%
妊娠动物数
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3．幼仔出生存活率反映雌性动物分娩过程是 否正常，如分娩过程受到影响，则幼仔往往在 出生4天内死亡。
出生后4天存活幼仔数
幼仔出生存活率= ———————————×100%
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新药药理学：特殊毒性试验
皮肤光毒性试验
光毒性反应指药物吸收的紫外光能量在皮 肤中释放导致皮肤损伤的作用，即皮肤或 全身接触或应用化学物质后，继而暴露在 紫外线照射下所引起的一种皮肤毒性反应
临床表现与晒伤相似：红斑、水肿、皮肤 瘙痒、色素沉着，甚至局部坏死、溃烂或 表皮脱落
皮肤光毒性试验
试验动物：成年白色豚鼠 试验分组：设阴性、阳性（8-甲氧基补骨脂素） 对照及受试物不同剂量组 试验前24h，将脊柱两侧皮肤去毛，2x2cm2 涂敷相应药物30min后，一侧用铝箔覆盖，一侧 用UVA照射 根据评分标准判定皮肤反应 1只或以上动物皮肤反应分值≥2，受试物具有光 毒性
溶血性试验
❖ 溶血性试验：观察受试物是否能够引起 溶血和红细胞凝聚等反应
❖ 凡注射剂和可能引起免疫性或非免疫性 溶血反应的其他药物制剂均应进行溶血 性试验
溶血性试验
❖ 制备血红细胞悬液，加入受试物，充分混匀 后观察：
红细胞全部下沉，上清液体无色透明，说明无溶 血
溶液呈澄明红色，管底无细胞或有少量红细胞残 留，表明有溶血发生
眼刺激性试验
眼用药物及可能接触眼睛的受试物均应考虑进行 眼刺激性试验 首选家兔，可采用同体左右侧自身对比法 试验前24h需检查动物双眼 每只眼睛滴入0.05~0.1ml或涂敷0.1g受试物 给药后1、2、4、24、48及72h进行眼部检查 持久性损伤需延长观察期限，一般不超过21d 采用裂隙灯进行眼部检查，记录眼部反应分值， 判断刺激程度
特殊毒性试验
特殊毒性试验
❖ 狭义的特殊毒性试验：指遗传毒性试验、生 殖毒性试验、致癌试验，即一般常说的“三 致”试验
❖ 广义的特殊毒性试验：除“三致”试验以外， 还包括依赖性试验、过敏性试验、局部刺激 性试验、溶血性试验、免疫毒性试验、光敏 试验、眼毒试验、耳毒试验等等
中药A注射剂特殊毒性实验 药理实验
中药A注射剂特殊毒性实验【实验目的】通过对中药A注射剂的刺激性、过敏性、溶血性实验，研究该注射剂的安全性。
【实验原理】略。
【实验材料】动物：SD大鼠20只，雌雄各半，200—250g；豚鼠60只，雌雄各半，200—250g；家兔1只，1.5～2.0 kg。
试剂：中药A注射剂，75%乙醇，蛋清，蒸馏水，0.9%氯化钠溶液，苦味酸试剂。
仪器：全光谱灯，离心机，恒温箱，含玻璃珠的三角烧瓶，剃须刀，砂纸，玻璃纸，胶布，绷带，试管，玻璃棒，载玻片。
【实验方法】（一）刺激性试验方法皮肤刺激性试验1 实验动物选SD大鼠，20只，雌、雄各半。
设赋形剂（75%乙醇）对照，采用同体左右侧自身对比法。
试验前24小时对背部给药区用剃须刀进行脱毛处理。
去毛范围左、右各3 cm×3 cm。
给药前检查去毛皮肤是否因去毛而受损伤，有损伤的皮肤不进行试验。
进行破损皮肤的刺激性研究时，在用药部位用砂纸磨或划“井”字并以渗血为度。
2 给药方法取受试物0.5 ml直接涂布于一侧已去毛的皮肤上，然后用二层纱布（2.5 cm×2.5 cm）和一层玻璃纸覆盖，再用无刺激性胶布和绷带加以固定；另一侧涂布赋形剂75%乙醇作对照。
贴敷时间4小时。
贴敷结束后，除去受试物并用温水清洁给药部位。
3 结果观察在自然光线或全光谱灯光下观察皮肤反应。
按表1给出的评分标准对皮肤红斑和水肿进行评分。
①单次给药皮肤刺激性试验，在去除药物后30-60分钟，24、48和72小时肉眼观察并记录涂敷部位有无红斑和水肿等情况。
如存在持久性损伤，有必要延长观察期限以评价上述变化的恢复情况和时间。
但延长期一般不超过14天。
对出现中度及以上皮肤刺激性的动物应在观察期结束时对给药局部进行组织病理学检查。
4 结果评价计算每一观察时间点各组受试物及赋形剂皮肤反应积分的平均分值，按表2进行刺激强度评价。
表1.皮肤刺激反应评分标准判断指标：表2.皮肤刺激强度评价标准（二）过敏性试验方法全身主动过敏试验（ASA）对致敏成立的动物体内，静脉注射抗原，观察抗原与IgE抗体结合后导致肥大细胞、嗜碱性细胞脱颗粒、释放活性介质而致的全身性过敏反应。
食品毒理学作业
食品毒理学作业题第七章特殊毒性作用及其试验与评价方法1、急性毒性实验的概念和目的2、Ames 实验的原理3、改良Karber法的要求4、蓄积性毒性试验的概念及目的5、亚慢性毒性试验的概念和目的6、生殖毒性和发育毒性的概念，评价的试验方法、指标答：①生殖毒性的概念：外来化合物对生殖过程的损害作用，主要包括对生殖细胞的发生、卵细胞受精、胚胎形成、妊娠、分娩和哺乳作用的损害作用。
发育毒性的概念：外来化合物对发育过程中的损害作用，主要包括对胚胎的发育、胎仔发育及出生幼仔发育的损害作用。
②生殖毒性作用的评定主要通过生殖毒性试验进行，也称繁殖试验，主要有三代两窝试验法、两代一窝、一代一窝生殖试验法。
可观察的指标有受孕率、正常分娩率、幼仔出生存活率、幼仔哺乳存活率。
③发育毒性的评定主要是评价受试物的致畸作用，对胎鼠进行体表检查、内脏检查、骨骼检查、生理功能异常的观察。
可观察的指标有活产幼仔平均畸形出现数、畸胎出现率、母体畸胎出现率。
7、微核是什么？其来源于何？细胞质中发现微核说明了什么？答：微核在细胞的有丝分裂后期染色体有规律的进入子细胞形成细胞核时，仍然留在细胞质中的染色单体或染色体无着丝片断或环。
它在末期之后，单独形成一个或几个规则的次核，被包含在子细胞的细胞质中形成，由于比核小得多故称微核。
微核来源于染色体，在细胞质中发现微核说明染色体发生了变化，发生断裂，受试物对染色体产生了损伤。
第十章食品中有毒有害物质限量标准的制定及风险评估与管理1、安全限量标准制定的意义答：保证食品的食用安全性；国家食品安全质量监督管理的依据；食品安全生产的基础；食品贸易的基本条件。
2、限量标准制定中应综合考虑的因素有哪些？答：在制定限定标准时，应综合考虑各种化学物的来源，毒性大小、毒性特点、实际摄入情况以及社会经济发展情况，权衡该物质可能对人体造成的危害以及可能产生的有益作用，将标准从严制定或者放宽。
考虑因素如下：（一）在体内有蓄积性，不宜排泄或解毒者从严（二）可能产生三致作用的从严（三）接触频度高，长期大量食用者从严（四）供应幼儿、病人食用者从严（五）化学性质稳定，在加工或者烹调过程中不宜破坏者从严（六）与其他化学成分产生协同毒性作用者从严总之，制定的限量标准带有一定的相对性，随着科技进步和社会的发展，限量标准应该适时修订。
特殊毒性试验
三、人群流行病学调查
➢ 动物致癌试验，根据阳性结果 检出潜在的人类致癌物
➢ 描述流行病学调查或临床观察 发现怀疑人类致癌物
➢ 病例-对照研究 ➢ 队列研究
四、致癌作用模型
转基因动物 (transgenic animal)
借助基因工程技术将确定的外源基因通 过生殖细胞或早期胚胎导入动物个体的染色 体上，在其基因组内稳定地整合经导入的外 源基因，并能遗传给后代的一类动物
化学、物理或生物等致癌因素作用于细胞 后，引起原癌基因突变使之激活，转变成癌 基因后才会导致细胞癌变
2．抑癌基因 (anti-oncogene)
正常细胞分裂生长的负性调节因子， 其编码的蛋白质能够降低或抑制细胞分裂 活性，或称为肿瘤抑制基因(tumor suppressor gene)、肿瘤易感基因(tumor susceptibility gene)
致癌毒性试验
肿瘤(tumor，neoplasm) ：有分裂潜能的细胞 受致癌因素作用后发ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ恶性转化和克隆性增生 所形成的新生物
良性肿瘤：呈膨胀生长，与周围组织有明显的 界限，多有包膜，它们生长常有“自限性”， 对机体破坏较小
恶性肿瘤：癌和肉瘤
癌(carcinoma)：由上皮细胞来源的恶性肿瘤
肉瘤(sarcoma)：由间质细胞来源的恶性肿瘤
第三节
观察化学毒物致癌作用的 基本方法
化学致癌物的判别
➢ 人群流行病学调查：两项以上由不同 研究者在不同地点、不同对象中以不同 调查方法获得的结论相符的证据；
➢ 动物实验证据：两项按现行常规设计 进行，符合GLP（good laboratory practice），在不同物种动物中所得结果 一致的动物致癌物鉴定资料。
全身用药的毒性评价
（三）观察时间及指标
观察时间
• 给药后几小时内应严密观察动物反应，以 后每天上下午各观察一次
• 急性毒性试验必须观察7-14天，一般不超 过两周
（三）观察时间及指标
观察指标
给药前后应观察体重、进食、进水的状况，密切观 察异常应毒每性日症记状录包体括重①、行毒动性：反不应安和定死、亡多情动况、，发濒死 声；②动 和神物 病经应 理系单 组统独 织反饲学应养观：，察举死。尾后试、及验振时结颤解束、削存痉进 活挛行 动、肉 物运眼 也动观 进失察 行 调、姿解态剖异，常如；有③病自变主进神行经组系织统学反观应察：。眼球突出、 流涎、流泪、排尿、下泻、竖毛、皮肤变色、呼 吸；④死亡。
• 实验动物首选大鼠，给药前禁食6-12小时，给受 试物后再禁食3-4小时。采用一次给药的方式进行
• 如无资料证明雄性动物对受药试物更敏感，首先 用雌性动物进行预试。
（三）固定剂量法（Fixed-dose procedure）
• 根据受试物的有关资料，从上述四个剂量中选择 一个作为初始剂量
• 若无有关资料可作参考时，可用500mg/kg作为 初始剂量进行预试，如无毒性反应，则用2000 mg/kg进行预试，此剂量如无死亡发生即可结束 预试。
<50%，LD50>限度剂量；3）死亡率>50%，重新设 计。
（一）最大给药量试验
以小鼠口服为例： 动物数不得少于10只，雌雄各半，容量一次不 超过0.4ml/10g(体重)，多次给药间隔时间不 低于4h，观察14日，记录毒性反应和体重变化。 如仍未见毒性反应或体重正常增加，则可认为 该药物小鼠最大给药量未见毒性反应，或LD50 大于最大给药量。
目 了解毒性反应剂量、时间、强度、症状、靶器官及可逆性等， 的 为临床方案提供参考、预测出现的毒性反应，制订临床防护
药物半数致死量LD50的测定jy
(1)是衡量药物毒性大小的指标，评价药物优劣的重要参数
(2)评价药物安全性---治疗指数
(3)申报新药过程中必须提供的药理学资料
新药审批办法规定：
• 三、药理资料 • 13. 与功能主治有关的主要药效学试验资料及文献资料。 • 14. 一般药理研究的试验资料及文献资料。
• 15. 动物急性毒性试验资料及文献资料。
药物半数致死量(LD50)的测定
特殊毒性试验（致畸、致癌、 致突变） 毒性试验 长期（慢性）毒性试验
急性毒性试验：1～7d
• 半数致死量（lethal dose 50%, LD50）：是指能够
引起试验动物一半死亡的药物剂量，通常用药物致死剂量 的对数值表示。
• 测定LD50意义
TI=LD50/ED50
毒性大小的指标?
实验结束
各组将实验台和实验器材刷洗干净
D2= D1·r ,…，Dn= Dn-1·r, Dm
3．配制等比稀释溶液：要求各小鼠给药容积一样，一般0.1ml/10g，
按下列公式计算浓度：
C母
D 等容注射量
药液配制的具体步骤：
预试中Dm=344mg/kg， Dn=141mg/kg，算出r=1.25，小鼠的 平均体重为20g，每组10只，用药量为0.1ml/10g=10ml/kg
• LD50的测定方法有很多。如：目测机率单位法、 加权机率单位法(Bliss 法)、寇氏法、序贯法等。
• Bliss 法是目前推荐使用的方法。此法对剂量分组 无严格要求，不需要剂量组有0%和100%死亡率， 是目前公认最准确的测定方法。但本法计算繁琐， 故现多采用计算机程序计算。
• 我国卫生部规定，Bliss法是作为新药LD50测定评 定必须采用的方法。
第二次理论课 特殊毒性试验
4 ℃，9000g，离心10min
（3）S9混合液： 平衡盐系统，其中含S9 5～30％（v/v）
试验方法
（标准平皿掺入法）：
顶层琼脂＋测试菌株、 受试物、S9混合液 底层琼脂培养基平皿 固化 （点试法）： 37 ℃，培养48h 菌落计数
结果评价：
Rt/Rc≥2，并有量效关系，判为阳性；
滤纸片周围长出一圈密集的回变菌落。
阴性（－） 可疑（±） 弱阳性（＋） 中度阳性（＋＋） 强阳性（＋＋＋）
•注意：遇阳性或可疑阳性时，可选啮齿动物显性致死试验或精原细胞染色体畸变试验
正常染色体
畸变染色体
3.啮齿类动物体内微核试验
微核 （Micronucleus）：染色单体或染色体的无着丝点断片，或
因纺锤体受损而丢失的整个染色体，在细胞分裂后期，仍然遗留在细胞 质中。末期之后，单独形成一个或几个规则的次核，被包含在子细胞的 胞质内，因比主核小，故称为微核。
药物特殊毒性研究
内容：
遗传毒性 致癌作用 生殖和发育毒性 药物依赖性
致癌试验
致癌试验的目的
是考察药物在动物体内的潜在致癌作用，从而评价和预测其可能对人 造成的危害。
任何体外实验、动物毒性试验和人体应用中出现的潜在致癌性因素均可提示 是否需要进行致癌试验。
由于致癌试验耗费大量时间和动物资源，只有当确实需要通过动物长期给药研 究评价人体中药物暴露所致的潜在致癌性时，才应进行致癌试验。
不适用受试物
用于晚期全身肿瘤的抗肿瘤药物，通常不需要进行致癌试验。 对于替代治疗的内源性物质（浓度在生理水平），尤其是 当同类产品（如动物胰岛素、垂体来源的生长激素和降钙素） 已有临床使用经验时，通常不需要进行致癌试验 系统暴露量非常小的局部用药不需要以经口给药途径来评价 其对内脏器官的潜在致癌作用，若有潜在光致癌性担忧， 可能需要进行皮肤给药致癌试验。 除非有明显的全身暴露或相关担忧，经眼给予的药物通常 不需要进行致癌试验 有致癌潜在，但是短期接触或非经常使用药物（麻醉/放射） 经化学合成、从动物或人体组织中提取纯化或生物技术方法 （如重组DNA技术）生产的内源性肽类或蛋白质及其类似物， 可能需要特殊考虑。
急慢性毒性试验及其评价
应超过平均体重的20%－控制离散度 性别：♀♂各半
2、剂量和分组
给药剂量：未见毒性量严重毒性量 设空白和/或溶媒（辅料）对照 小动物4-6个剂量组, 组距0.65-0.85,求LD50 大动物可用50%等量递升法,不必达到致死量
近似致死剂量（approximate lethal dose， ALD ） 最大耐受量（maximal tolerance dose，MTD ） 最大无毒性作用剂量(no observed adverse effect level, NOAEL)
我国农药蓄积毒性分级标准
Kcum
蓄积性强度
<1 1≤Kcum <3 3≤Kcum <5 Kcum ≥ 5
高度蓄积性 明显蓄积性 中等蓄积性 轻度蓄积性
生物半减期法
生物半减期(biological half time, T1/2)： 指进入机体的外源化学物通过机体的生物转
运和生物转化过程而被消除一半所需要的时间。
五、 急性毒性的主要指标
1.绝对致死量(absalute lethal dose, LD100) 是指引起一群个体全部死亡的最小剂量。
2.半数致死量(median lethal dose, LD50) 指引起一群个体50%死亡所需的剂量。 以mg/kg表示，LD50 数值越↓，化合物的毒性越↑
3.半数致死浓度(median lethal concentration , LC50) 指引起一群个体50%死亡所需的浓度。 以mg/m3-气体， mg/L-液体表示
(四)染毒途径
模拟人群实际接触途径 和预期进行的慢性毒性试验途径一致
(五) 剂量选择与分组
• 设3~4个受试剂量组和1个对照组
高剂量组：不发生死亡或仅有个别动物死亡， 但有明显的中毒效应或者靶器官 出现明显的中毒效应。
2、剂量和分组
给药剂量：未见毒性量严重毒性量 设空白和/或溶媒（辅料）对照 小动物4-6个剂量组, 组距0.65-0.85,求LD50 大动物可用50%等量递升法,不必达到致死量
近似致死剂量（approximate lethal dose， ALD ） 最大耐受量（maximal tolerance dose，MTD ） 最大无毒性作用剂量(no observed adverse effect level, NOAEL)
我国农药蓄积毒性分级标准
Kcum
蓄积性强度
<1 1≤Kcum <3 3≤Kcum <5 Kcum ≥ 5
高度蓄积性 明显蓄积性 中等蓄积性 轻度蓄积性
生物半减期法
生物半减期(biological half time, T1/2)： 指进入机体的外源化学物通过机体的生物转
运和生物转化过程而被消除一半所需要的时间。
五、 急性毒性的主要指标
1.绝对致死量(absalute lethal dose, LD100) 是指引起一群个体全部死亡的最小剂量。
2.半数致死量(median lethal dose, LD50) 指引起一群个体50%死亡所需的剂量。 以mg/kg表示，LD50 数值越↓，化合物的毒性越↑
3.半数致死浓度(median lethal concentration , LC50) 指引起一群个体50%死亡所需的浓度。 以mg/m3-气体， mg/L-液体表示
(四)染毒途径
模拟人群实际接触途径 和预期进行的慢性毒性试验途径一致
(五) 剂量选择与分组
• 设3~4个受试剂量组和1个对照组
高剂量组：不发生死亡或仅有个别动物死亡， 但有明显的中毒效应或者靶器官 出现明显的中毒效应。
第八章-特殊毒性及其试验与评价方法(3)PPT课件
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16
No Image
组2，对人类是很可能或可能致癌物。又分为两组， 即组2A和组2B。
组2A，对人类很可能(probably)是致癌物。指对人 类致癌性证据有限，对实验动物致癌性证据充分。 对人体致癌的可能性较高的物质或混合物，在动物 实验中发现充分的致癌性证据。对人体虽有理论上 的致癌性，而实验性的证据有限。 如丙烯酰胺、无机铅化合物、氯霉素等。
42
（1）哺乳动物长期致癌试验
No Image
又称哺乳动物终生试验，是目前公认的确证动物 致癌物的经典方法。 化学致癌的最大特点是潜伏期长，在啮齿类动物 进行1~2年的试验即相当于人类大半生的时间。 如果采用流行病学调查方法确证一种新化学物的 致癌性，一般需要人类接触受试物20年后才能进 行。
43
癌作用的代谢物和不需代谢活化的致癌物）。
5
No Image
前致癌物
正常细胞
活化
终致癌物
DNA结合
修复
致癌物-DNA加 合物
DNA复制 错配修复失败
DNA修复
引发的细胞
促长
分化的肿瘤
进展
不分化的癌
细胞死亡
6
细胞含错 配碱基
转移
16
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组2，对人类是很可能或可能致癌物。又分为两组， 即组2A和组2B。
组2A，对人类很可能(probably)是致癌物。指对人 类致癌性证据有限，对实验动物致癌性证据充分。 对人体致癌的可能性较高的物质或混合物，在动物 实验中发现充分的致癌性证据。对人体虽有理论上 的致癌性，而实验性的证据有限。 如丙烯酰胺、无机铅化合物、氯霉素等。
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（1）哺乳动物长期致癌试验
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又称哺乳动物终生试验，是目前公认的确证动物 致癌物的经典方法。 化学致癌的最大特点是潜伏期长，在啮齿类动物 进行1~2年的试验即相当于人类大半生的时间。 如果采用流行病学调查方法确证一种新化学物的 致癌性，一般需要人类接触受试物20年后才能进 行。
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癌作用的代谢物和不需代谢活化的致癌物）。
5
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前致癌物
正常细胞
活化
终致癌物
DNA结合
修复
致癌物-DNA加 合物
DNA复制 错配修复失败
DNA修复
引发的细胞
促长
分化的肿瘤
进展
不分化的癌
细胞死亡
6
细胞含错 配碱基
转移
第五章环境化学物的特殊毒性及其评价
6
三联密码
7
基因的概念
• 基因是一段有功能的DNA（RNA）片段 • 基因位于染色体上 • 基因决定生物
性状、发育、 代谢和免疫 状态等
8
等位基因
• 等位基因 – 位于同源染色体同一位置的基因 – 等位基因决定生物体的某一性状
– 在一般情况下，一个基因只有两种等位形式。其中 一个起决定作用， 为显性；另一个为隐性。
20
基因突变与性状改变
21
基因突变 ——血红蛋白β链基因突变
22
基因突变 ——血红蛋白β链基因突变
23
诱发基因突变的因素 常见的诱变剂有：
1） 物理诱变 X-射线 -射线 紫外线
2） 化学诱变 苯、亚硝酸盐、
3） 生物诱变 病毒
24
（二）染色体突变 即染色体畸变，指染色体结构的改变。 包括裂隙、断裂、断片、微小体、无着丝点环、环状染
48
三 环境化学致癌物的分类 （一）按致癌作用机制分类 1 遗传毒性致癌物 （1）直接致癌物：芳香基环氧化物、亚硝胺等 （2）间接致癌物：多环芳烃类、硝基杂环类等 （3）无机致癌物：镍 铬
49
2 非遗传毒性致癌物 （1）促长剂：氯丹、雌激素等 （2）激素调控剂：雌二醇、已烯雌酚等 （3）细胞毒剂：氯仿 （4）免疫抑制剂：硫唑嘌呤、6-巯基嘌呤 （5）固态物质：石棉和其他矿物粉尘 （6）过氧化物酶体增生剂：增塑剂 3 暂未确定遗传毒性的致癌物：噻吡二胺
28
（三）基因组突变 指基因组中染色体数目的改变，也称染色体数目畸变。 每一种属的机体中各种体细胞所具有的染色体数目是一
致的，而且成双成对，即具有两套完整的染色体组， 称为二倍体。生殖细胞在减数分裂后，染色体数目减 半，仅具有一套完整的染色体组，称为单倍体。（表 5-1）
三联密码
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基因的概念
• 基因是一段有功能的DNA（RNA）片段 • 基因位于染色体上 • 基因决定生物
性状、发育、 代谢和免疫 状态等
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等位基因
• 等位基因 – 位于同源染色体同一位置的基因 – 等位基因决定生物体的某一性状
– 在一般情况下，一个基因只有两种等位形式。其中 一个起决定作用， 为显性；另一个为隐性。
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基因突变与性状改变
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基因突变 ——血红蛋白β链基因突变
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基因突变 ——血红蛋白β链基因突变
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诱发基因突变的因素 常见的诱变剂有：
1） 物理诱变 X-射线 -射线 紫外线
2） 化学诱变 苯、亚硝酸盐、
3） 生物诱变 病毒
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（二）染色体突变 即染色体畸变，指染色体结构的改变。 包括裂隙、断裂、断片、微小体、无着丝点环、环状染
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三 环境化学致癌物的分类 （一）按致癌作用机制分类 1 遗传毒性致癌物 （1）直接致癌物：芳香基环氧化物、亚硝胺等 （2）间接致癌物：多环芳烃类、硝基杂环类等 （3）无机致癌物：镍 铬
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2 非遗传毒性致癌物 （1）促长剂：氯丹、雌激素等 （2）激素调控剂：雌二醇、已烯雌酚等 （3）细胞毒剂：氯仿 （4）免疫抑制剂：硫唑嘌呤、6-巯基嘌呤 （5）固态物质：石棉和其他矿物粉尘 （6）过氧化物酶体增生剂：增塑剂 3 暂未确定遗传毒性的致癌物：噻吡二胺
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（三）基因组突变 指基因组中染色体数目的改变，也称染色体数目畸变。 每一种属的机体中各种体细胞所具有的染色体数目是一
致的，而且成双成对，即具有两套完整的染色体组， 称为二倍体。生殖细胞在减数分裂后，染色体数目减 半，仅具有一套完整的染色体组，称为单倍体。（表 5-1）