动物营养及研究方法.ppt
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的收集与处理等）
2020/10/25
12
2020/10/25
13
动物营养研究方法
➢化学分析、物理测试 ➢动物试验 ➢其它：同位素示踪
外科造瘘 无菌技术
2020/10/25
14
化学分析
➢饲料成分的分析 ➢动物组织和血液成分的分析 ➢动物粪便及成分
2020/10/25
15
饲料分析
概略养分分析 Van soest 饲草分析方法 纯养分分析 动物排泄物（粪尿）及组织分析 抗营养因子和毒素分析 其他分析方法
2020/10/25
6
动物营养实验的一般目的
➢动物营养实验的主要目的在于验证某一个假设，
即研究一个或多个因素对一特定指标有无影响。
➢一个正确的试验设计可以使我们分离、补偿、消
除和考虑非试验因素的影响，这样一来，我们可 以从实验结果得出有关试验处理的有效结论。
2020/10/25
7
影响营养试验结果的某些因素
Cys测定
2020/10/25
1) 二硫化物类试剂保护法 2) 过甲酸氧化法
21
以回收Trp为目的的水解
➢ 代替6N-HCl的是使用4N甲烷磺酸，按用盐酸加水
分解的方法让其分解。
➢ 分解后，由于不能减压干燥，加入4N-NaOH, 在
PH=2调节
➢ 在0.02N-HCI给一定的容量作样品
注意事项：1）甲烷磺酸是用1ml小玻璃瓶装入，由技术化学制品株式会社 出售，其组成是在4N甲烷磺酸中含有0.2% 3-(2-氨基乙烷)吲哚[氮（杂）
中性洗涤剂可溶物,NDS (蛋白质、脂肪、淀粉、糖)
酸性洗涤纤维, ADF
(纤维素，木质素，硅酸盐)
72%硫酸，20~30℃，3h
酸性洗涤木质素, ADL (木质素，硅酸盐)
500℃ 灼烧
酸性洗涤剂可溶物,ADS (半纤维素)
水解液 （ 纤维素）
2020/10/25
残渣
(灰分，即硅酸盐)
逸失物 （ 木质素）
如，叶酸缺乏则尿中亚胺甲基谷氨酸（FIGLV)排泄增 加；烟酸缺乏，尿中N-甲基烟酰胺减少；B6缺乏，尿中黄 尿酸或犬尿酸含量增加
2020/10/25
动物因素 种类、品种 遗传 年龄 体重 性别 生理状态 生产阶段 生产水平 动物个体
环境因素 房屋 栏舍 季节 温度 光照 日粮 管理 试验前的处理
8
一个试验应该包括3个阶段
1) 周密细致的试验设计 2) 试验的实施阶段 3) 对试验结果进行恰当的统计分析
2020/10/25
统计推断
范氏分析法原理示意图
19
纯养分分析
常
➢ 容量分析
用
➢ 比色分析
分
➢ 仪器分析（色谱分析、原子吸
析 方
收、荧光光谱分析、红外光谱 分析、核磁共振等）
法
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例
❖高效液相色谱（HPLC）法是目前用于氨
基酸分析的常用技术 。 这种方法的样品处理：一般用 6N HCl于 110℃水解24h。但这种处理法会使Cys遭 破坏 。
结论
9
试验设计的基本要素
1) 试验因素 2) 受试对象 3) 处理效应
观测指标
2020/10/25
指标的关联性、客观性 灵敏性、精确性
10
动物营养实验设计的基本原则
1) 重复的原则 2) 随机化原则 3) 局部控制的原则（减少误差）
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11
要求
➢差异的唯一性 ➢动物的代表性和随机化 ➢环境的一致性 ➢试验结果的重演性（重复、试验时间、数据
量
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23
例
❖有效赖氨酸化学分析方法 。
➢赖氨酸的ε-氨基与1-氟，2，4-二硝基苯反 应。
➢与2，4，6-三硝基苯磺酸 反应。
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24
动物排泄物（粪尿）及组织分析
2020/10/25
25
尿成分分析
尿中某些代谢中间产物或尾产物的水平，可能反映动 物机体某些养分的代谢或营养状况。
粗纤维（CF）
无氮浸出物（NFE）
17
Weende 分析法仅能给出饲料中“粗养分” 含量的测定值，而未给出“粗养分”中各种 具体营养成分的含量。
概 略 养
分
在碳水化合物分析方法上存在不足，在ＣＦ 的测定过程中，酸处理使大部分的半纤维素 水解，碱处理又使部分的木质素溶解，使得
分 析
饲料中粗糙的成分并未完全包括在ＣＦ中。 法
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16
概 略 养 分 分 析 方 法
2020/10/25
饲料样品
105℃烘干至恒重
干物质,DM
水分
550℃灰化至恒重
有机物OM
灰分（Ash）
凯氏定氮法
无氮有机物
粗蛋白质（CP）
乙醚回流浸提
碳水化合物
粗脂肪（EE）
稀酸、碱（1.25%H2SO4和 0.313mol/L NaOH分别处理)
功能、缺乏、过量及中毒
需要量确定
2020/10/25
3
动物营养学的研究内容
饲料营养价值评定或 养分生物效价的评定
能量
2020/10/25
蛋白质、氨基酸 矿物元素 维生素
4
动物营养学的研究内容
营养物质间的相互关系 与抗营养因子
有毒元素 有害物质
2020/10/25
颉抗物质
5
动物营养学的研究内容
饲料资源的调查与开发利用 动物营养代谢调控 动物营养与环境和自然资源
2）中和时的PH，使用PH试纸 3）分析了20个被检体后，将分解柱用再生液清洗4小时左右， 这是为除去从树脂中混入到试剂的吸附物质。
4）对氢硫基乙烷磺也有效
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以回收Cys 、Met为目的的加水分解
➢ 精确称量1~2mg样品 ➢ 加入2ml过蚁酸，在0℃放置4~24小时 ➢ 添加48%HBr 0.3ml ➢ 减压干燥 ➢ 依从盐酸加水分解的方法，减压进行到干燥为止 ➢ 加入1ml的0.2N-NaOH，放置1小时 ➢ 在0.05 N~0.1 NCHI，进行PH调制和给一定的容
动物营养研究技术
动物营养教研室
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1
动物营养研究的主要任务
➢ 动物所需要的营养素 ➢ 研究并确定营养素的需要量 ➢ 饲料评定与饲料资源开发 ➢ 营养素的代谢及其调节 ➢ 研究动物营养与环境的关系 ➢ 寻求和改进动物营养的研究方法
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动物营养学的研究内容
营养物质的需要 消化、吸收与代谢
从而加大了无氮浸出物的计算误差。
的
CF并非化学上的一种物质，而是几种物质 缺 比例不确定的混合物，同时也并未将饲料中 陷
的这几种物质全部包括在其中。
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范氏分析法
饲草、粗饲料
3%十二烷基硫 酸钠，煮沸1h
ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ
中性洗涤纤维, NDF
(半纤维素，纤维素，木质素，硅酸盐)
2%十六烷三甲基 溴化铵，煮沸1h
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动物营养研究方法
➢化学分析、物理测试 ➢动物试验 ➢其它：同位素示踪
外科造瘘 无菌技术
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化学分析
➢饲料成分的分析 ➢动物组织和血液成分的分析 ➢动物粪便及成分
2020/10/25
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饲料分析
概略养分分析 Van soest 饲草分析方法 纯养分分析 动物排泄物（粪尿）及组织分析 抗营养因子和毒素分析 其他分析方法
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动物营养实验的一般目的
➢动物营养实验的主要目的在于验证某一个假设，
即研究一个或多个因素对一特定指标有无影响。
➢一个正确的试验设计可以使我们分离、补偿、消
除和考虑非试验因素的影响，这样一来，我们可 以从实验结果得出有关试验处理的有效结论。
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影响营养试验结果的某些因素
Cys测定
2020/10/25
1) 二硫化物类试剂保护法 2) 过甲酸氧化法
21
以回收Trp为目的的水解
➢ 代替6N-HCl的是使用4N甲烷磺酸，按用盐酸加水
分解的方法让其分解。
➢ 分解后，由于不能减压干燥，加入4N-NaOH, 在
PH=2调节
➢ 在0.02N-HCI给一定的容量作样品
注意事项：1）甲烷磺酸是用1ml小玻璃瓶装入，由技术化学制品株式会社 出售，其组成是在4N甲烷磺酸中含有0.2% 3-(2-氨基乙烷)吲哚[氮（杂）
中性洗涤剂可溶物,NDS (蛋白质、脂肪、淀粉、糖)
酸性洗涤纤维, ADF
(纤维素，木质素，硅酸盐)
72%硫酸，20~30℃，3h
酸性洗涤木质素, ADL (木质素，硅酸盐)
500℃ 灼烧
酸性洗涤剂可溶物,ADS (半纤维素)
水解液 （ 纤维素）
2020/10/25
残渣
(灰分，即硅酸盐)
逸失物 （ 木质素）
如，叶酸缺乏则尿中亚胺甲基谷氨酸（FIGLV)排泄增 加；烟酸缺乏，尿中N-甲基烟酰胺减少；B6缺乏，尿中黄 尿酸或犬尿酸含量增加
2020/10/25
动物因素 种类、品种 遗传 年龄 体重 性别 生理状态 生产阶段 生产水平 动物个体
环境因素 房屋 栏舍 季节 温度 光照 日粮 管理 试验前的处理
8
一个试验应该包括3个阶段
1) 周密细致的试验设计 2) 试验的实施阶段 3) 对试验结果进行恰当的统计分析
2020/10/25
统计推断
范氏分析法原理示意图
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纯养分分析
常
➢ 容量分析
用
➢ 比色分析
分
➢ 仪器分析（色谱分析、原子吸
析 方
收、荧光光谱分析、红外光谱 分析、核磁共振等）
法
2020/10/25
20
例
❖高效液相色谱（HPLC）法是目前用于氨
基酸分析的常用技术 。 这种方法的样品处理：一般用 6N HCl于 110℃水解24h。但这种处理法会使Cys遭 破坏 。
结论
9
试验设计的基本要素
1) 试验因素 2) 受试对象 3) 处理效应
观测指标
2020/10/25
指标的关联性、客观性 灵敏性、精确性
10
动物营养实验设计的基本原则
1) 重复的原则 2) 随机化原则 3) 局部控制的原则（减少误差）
2020/10/25
11
要求
➢差异的唯一性 ➢动物的代表性和随机化 ➢环境的一致性 ➢试验结果的重演性（重复、试验时间、数据
量
2020/10/25
23
例
❖有效赖氨酸化学分析方法 。
➢赖氨酸的ε-氨基与1-氟，2，4-二硝基苯反 应。
➢与2，4，6-三硝基苯磺酸 反应。
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动物排泄物（粪尿）及组织分析
2020/10/25
25
尿成分分析
尿中某些代谢中间产物或尾产物的水平，可能反映动 物机体某些养分的代谢或营养状况。
粗纤维（CF）
无氮浸出物（NFE）
17
Weende 分析法仅能给出饲料中“粗养分” 含量的测定值，而未给出“粗养分”中各种 具体营养成分的含量。
概 略 养
分
在碳水化合物分析方法上存在不足，在ＣＦ 的测定过程中，酸处理使大部分的半纤维素 水解，碱处理又使部分的木质素溶解，使得
分 析
饲料中粗糙的成分并未完全包括在ＣＦ中。 法
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概 略 养 分 分 析 方 法
2020/10/25
饲料样品
105℃烘干至恒重
干物质,DM
水分
550℃灰化至恒重
有机物OM
灰分（Ash）
凯氏定氮法
无氮有机物
粗蛋白质（CP）
乙醚回流浸提
碳水化合物
粗脂肪（EE）
稀酸、碱（1.25%H2SO4和 0.313mol/L NaOH分别处理)
功能、缺乏、过量及中毒
需要量确定
2020/10/25
3
动物营养学的研究内容
饲料营养价值评定或 养分生物效价的评定
能量
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蛋白质、氨基酸 矿物元素 维生素
4
动物营养学的研究内容
营养物质间的相互关系 与抗营养因子
有毒元素 有害物质
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颉抗物质
5
动物营养学的研究内容
饲料资源的调查与开发利用 动物营养代谢调控 动物营养与环境和自然资源
2）中和时的PH，使用PH试纸 3）分析了20个被检体后，将分解柱用再生液清洗4小时左右， 这是为除去从树脂中混入到试剂的吸附物质。
4）对氢硫基乙烷磺也有效
2020/10/25
22
以回收Cys 、Met为目的的加水分解
➢ 精确称量1~2mg样品 ➢ 加入2ml过蚁酸，在0℃放置4~24小时 ➢ 添加48%HBr 0.3ml ➢ 减压干燥 ➢ 依从盐酸加水分解的方法，减压进行到干燥为止 ➢ 加入1ml的0.2N-NaOH，放置1小时 ➢ 在0.05 N~0.1 NCHI，进行PH调制和给一定的容
动物营养研究技术
动物营养教研室
2020/10/25
1
动物营养研究的主要任务
➢ 动物所需要的营养素 ➢ 研究并确定营养素的需要量 ➢ 饲料评定与饲料资源开发 ➢ 营养素的代谢及其调节 ➢ 研究动物营养与环境的关系 ➢ 寻求和改进动物营养的研究方法
2020/10/25
2
动物营养学的研究内容
营养物质的需要 消化、吸收与代谢
从而加大了无氮浸出物的计算误差。
的
CF并非化学上的一种物质，而是几种物质 缺 比例不确定的混合物，同时也并未将饲料中 陷
的这几种物质全部包括在其中。
2020/10/25
18
范氏分析法
饲草、粗饲料
3%十二烷基硫 酸钠，煮沸1h
ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ
中性洗涤纤维, NDF
(半纤维素，纤维素，木质素，硅酸盐)
2%十六烷三甲基 溴化铵，煮沸1h