地中海贫血检测相关问题
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Hb QS高度不稳定，合成后迅速降解。
常见的基因突变类型：
• • • • • • Codon 41-42（ –TCTT） IVS-II-654 （C→T） Codon 17 （ A→T） -28（ A→T） Codon 71-72（ +A） Codon 26 （ G→A）
• Codon 43（ G→Ｔ） • Codon 27/28 （＋Ｃ）
三、参加实验室：广西各级医疗机构、人口服务中心 共23个实验室（调查摸底34家，报名25家，已发 质控品，自愿退出2家）。 四、质控品：选取已确诊地贫接收治疗患儿，治疗时 抽取的全血，用枸橼酸钠抗凝，交公司分装加工成 质控品，每支0.5毫升。样本冻于-20℃，低于4℃ 运送到各实验室。 五、质控品发放：共发放10个血样（其中α-地中海贫 血基因分析和β-地中海贫血基因分析各5个血样， 不同实验室收到的血样不完全相同，避免抄袭结果。 每个病人的血样均留足备份保存于-80℃，用作破 损后的补发和参考实验室确定参考结果。
（二）β-地贫 ： 1、有一家实验室两个标本检测错误，参考答案为 “28M/28M”的报告为“71-72/71-72”，参考答案为 “43M/71-72M”的报告为“71-72M/βn”; 2、另一家实验室参考答案为“28M/71-72M”的报告为“28/-28”； 3、报告格式混乱，参考答案为“28M/28M”的报告格式有： “-28m/-28m ”，“β-28/β-28 ”，“-28N位点突变纯合 子 ”，“-28纯合子 ”，“CD28”，“28位点突变（纯合 子）”， ”β珠蛋白基因28位点突变纯合子，其余位点未见突变”。
• IVS-I-1 （G→A）
• IVS-I-5 （G→Ｃ）
2011第一次地贫基因检验EQA
一、背景： 1、广西与卫生部合作项目，开展地贫防治工程； 2、基因检测在指导有地贫携带基因夫妇进行产 前检查，防止重度地贫孩子出生方面具有重要意 义。已建立三大地贫检测中心。 二、目的：了解广西各医疗机构开展地贫基因检测 的质量情况，进一步规范地贫基因检测、保证质 量。
患胎于妊娠晚期或产后数小时内死亡，全身水
Hb Bart's Hydrops (--SEA/--SEA)
肿，肝脾肿大，可有四肢和外生殖器畸形。由 于胎儿无法合成a亚基，脐血血红蛋白（ Hb Bart’s ，4）含量高（80%-90%）。
Hb Constant Spring (Hb CS) 基因突变：
六、检测要求： 1、α-地中海贫血基因分析：包括中国人群常见的东南亚缺失（-SEA）、右侧缺失（-α3.7）、左侧缺失（-α4.2）三种缺失型基 因检测，以及Hb WS, Hb QS, Hb CS三种α2珠蛋白基因突变的 检测。 2、β-地中海贫血基因分析：包括中国人群常见的8个位点突变 CD41-42-TCCT(41-42M)、IVS-2-654 C变T(654M)、CD17 A变 T (17M)、-28 A变G (28M)、CD26 G变A (βEM)、CD71-72加A (71-72M)、CD43 G变T (43M)、-29 A变G (29M)的检测，以及少 见的9个位点突变、CD14-15加G(14-15M)、CD27-28加C(2728M)、-32 C变A(32M)、-30 T变C(30M)、IVS-1-1 G变T(IVS-11M)、IVS-1-5 G变C(IVS-1-5M)、CD31减C(31M)、CAP-40-43AACC)(CAPM)、起始密码子ATG变AGG(IntM)的检测 。
地中海贫血检测相关问题
周向阳
广西壮族自治区临床检验中心 广西医学检验质量控制中心 广西壮族自治区人民医院
α-地贫基因缺失示意图
a2 a1 a2 -a3.7 -a4.2 --SEA a1 1
α地贫的基因型与表型
• 正常
Normal (αα/αα)
• 静止型－单一α基因缺失或丧失功能 临床无任何症状，一般血液学检查无异样，仅
α+ thal trait (αα/-α3.7) (αα/-α4.2)
平均红细胞体积(MCV) 位于正常值下限。出生 时脐带血Hb Bart’s 可达1%-2%，但很快消失。
α地贫的基因型与表现型
• 标准型－2个α基因缺失或丧Βιβλιοθήκη Baidu功能
临床无症状，血液学检查出现轻微贫血，红细胞大 小不均一，平均红细胞体积(MCV) 及平均血红蛋白 αo Thal trait (αα /--SEA) ( - α/ - α) 含量(MCH)轻度下降。出生时脐带血Hb Bart’s 可 达5%-15%
七、评价方法：
各样本的参考答案由专家组根据参评实验室检测 结果、参考实验室检测结果和患儿病历资料确定，有 异议时可取出血样再次检测。 参考实验室名单： 广西医科大学儿科实验室 自治区妇女儿童医院优生遗传科实验室 自治区人民医院PCR实验室 解放军303医院血液科PCR实验室
八、本次质评发现的问题： （一）a-地贫 ： 1、有一家实验室完全错误，参考答案为 --SEA/αcsα的标本，做成了“αα/αα”。 2、7家实验室未做α2珠蛋白基因突变的检测 ，导致所涉及的三 个样本CS突变未检出。 3、报告格式不规范：参考答案为--SEA/αα的标本， 其他格式有： “αα/--SEA ”， “-SEA/αα ”，“--/αα”， “东南亚缺失型α地贫-1 ”， “1.检出东南亚缺失型α-地中海贫血 2.未检出-α3.7，-α4.2缺 失型α-地中海贫血 3.未检出QS,CS,WS点突变 ”
a2珠蛋白基因142位终止密码子TAA→CAA突
变，其mRNA 不稳定，降解加速，导致Hb CS 合
成减少， Hb CS 在功能上相当于一个a-地中海贫
血2基因。
Hb Quong Sze (Hb QS) 基因突变： a2珠蛋白基因125 位密码子CTG→CCG突
变，导致Hb QS (a125(H8)Leu → Pro)。
九、提醒： 1、地贫基因检测不同于其他检验项目，要求 100%准确。 2、目前检测的突变为中国人常见已知突变， 覆盖90%，检测最好不遗漏‘ 3、报告格式需要规范。遵循原则：信息完整， 表述规范，尽量简洁。 4、室内质控。
谢谢！
•血红蛋白H病－3个α基因缺失或丧失功能
肝脾肿大，中度贫血。HbH含量较高（0.8%-40%），
易发生溶血，有些病例需不定期输血，重者需切脾。
Hb H disease (- α 3.7/--SEA) (- α 4.2/--SEA)
a地贫的基因型与表现型
• Hb Bart’s胎儿水肿综合症 －4个a基因缺失或丧失功能
常见的基因突变类型：
• • • • • • Codon 41-42（ –TCTT） IVS-II-654 （C→T） Codon 17 （ A→T） -28（ A→T） Codon 71-72（ +A） Codon 26 （ G→A）
• Codon 43（ G→Ｔ） • Codon 27/28 （＋Ｃ）
三、参加实验室：广西各级医疗机构、人口服务中心 共23个实验室（调查摸底34家，报名25家，已发 质控品，自愿退出2家）。 四、质控品：选取已确诊地贫接收治疗患儿，治疗时 抽取的全血，用枸橼酸钠抗凝，交公司分装加工成 质控品，每支0.5毫升。样本冻于-20℃，低于4℃ 运送到各实验室。 五、质控品发放：共发放10个血样（其中α-地中海贫 血基因分析和β-地中海贫血基因分析各5个血样， 不同实验室收到的血样不完全相同，避免抄袭结果。 每个病人的血样均留足备份保存于-80℃，用作破 损后的补发和参考实验室确定参考结果。
（二）β-地贫 ： 1、有一家实验室两个标本检测错误，参考答案为 “28M/28M”的报告为“71-72/71-72”，参考答案为 “43M/71-72M”的报告为“71-72M/βn”; 2、另一家实验室参考答案为“28M/71-72M”的报告为“28/-28”； 3、报告格式混乱，参考答案为“28M/28M”的报告格式有： “-28m/-28m ”，“β-28/β-28 ”，“-28N位点突变纯合 子 ”，“-28纯合子 ”，“CD28”，“28位点突变（纯合 子）”， ”β珠蛋白基因28位点突变纯合子，其余位点未见突变”。
• IVS-I-1 （G→A）
• IVS-I-5 （G→Ｃ）
2011第一次地贫基因检验EQA
一、背景： 1、广西与卫生部合作项目，开展地贫防治工程； 2、基因检测在指导有地贫携带基因夫妇进行产 前检查，防止重度地贫孩子出生方面具有重要意 义。已建立三大地贫检测中心。 二、目的：了解广西各医疗机构开展地贫基因检测 的质量情况，进一步规范地贫基因检测、保证质 量。
患胎于妊娠晚期或产后数小时内死亡，全身水
Hb Bart's Hydrops (--SEA/--SEA)
肿，肝脾肿大，可有四肢和外生殖器畸形。由 于胎儿无法合成a亚基，脐血血红蛋白（ Hb Bart’s ，4）含量高（80%-90%）。
Hb Constant Spring (Hb CS) 基因突变：
六、检测要求： 1、α-地中海贫血基因分析：包括中国人群常见的东南亚缺失（-SEA）、右侧缺失（-α3.7）、左侧缺失（-α4.2）三种缺失型基 因检测，以及Hb WS, Hb QS, Hb CS三种α2珠蛋白基因突变的 检测。 2、β-地中海贫血基因分析：包括中国人群常见的8个位点突变 CD41-42-TCCT(41-42M)、IVS-2-654 C变T(654M)、CD17 A变 T (17M)、-28 A变G (28M)、CD26 G变A (βEM)、CD71-72加A (71-72M)、CD43 G变T (43M)、-29 A变G (29M)的检测，以及少 见的9个位点突变、CD14-15加G(14-15M)、CD27-28加C(2728M)、-32 C变A(32M)、-30 T变C(30M)、IVS-1-1 G变T(IVS-11M)、IVS-1-5 G变C(IVS-1-5M)、CD31减C(31M)、CAP-40-43AACC)(CAPM)、起始密码子ATG变AGG(IntM)的检测 。
地中海贫血检测相关问题
周向阳
广西壮族自治区临床检验中心 广西医学检验质量控制中心 广西壮族自治区人民医院
α-地贫基因缺失示意图
a2 a1 a2 -a3.7 -a4.2 --SEA a1 1
α地贫的基因型与表型
• 正常
Normal (αα/αα)
• 静止型－单一α基因缺失或丧失功能 临床无任何症状，一般血液学检查无异样，仅
α+ thal trait (αα/-α3.7) (αα/-α4.2)
平均红细胞体积(MCV) 位于正常值下限。出生 时脐带血Hb Bart’s 可达1%-2%，但很快消失。
α地贫的基因型与表现型
• 标准型－2个α基因缺失或丧Βιβλιοθήκη Baidu功能
临床无症状，血液学检查出现轻微贫血，红细胞大 小不均一，平均红细胞体积(MCV) 及平均血红蛋白 αo Thal trait (αα /--SEA) ( - α/ - α) 含量(MCH)轻度下降。出生时脐带血Hb Bart’s 可 达5%-15%
七、评价方法：
各样本的参考答案由专家组根据参评实验室检测 结果、参考实验室检测结果和患儿病历资料确定，有 异议时可取出血样再次检测。 参考实验室名单： 广西医科大学儿科实验室 自治区妇女儿童医院优生遗传科实验室 自治区人民医院PCR实验室 解放军303医院血液科PCR实验室
八、本次质评发现的问题： （一）a-地贫 ： 1、有一家实验室完全错误，参考答案为 --SEA/αcsα的标本，做成了“αα/αα”。 2、7家实验室未做α2珠蛋白基因突变的检测 ，导致所涉及的三 个样本CS突变未检出。 3、报告格式不规范：参考答案为--SEA/αα的标本， 其他格式有： “αα/--SEA ”， “-SEA/αα ”，“--/αα”， “东南亚缺失型α地贫-1 ”， “1.检出东南亚缺失型α-地中海贫血 2.未检出-α3.7，-α4.2缺 失型α-地中海贫血 3.未检出QS,CS,WS点突变 ”
a2珠蛋白基因142位终止密码子TAA→CAA突
变，其mRNA 不稳定，降解加速，导致Hb CS 合
成减少， Hb CS 在功能上相当于一个a-地中海贫
血2基因。
Hb Quong Sze (Hb QS) 基因突变： a2珠蛋白基因125 位密码子CTG→CCG突
变，导致Hb QS (a125(H8)Leu → Pro)。
九、提醒： 1、地贫基因检测不同于其他检验项目，要求 100%准确。 2、目前检测的突变为中国人常见已知突变， 覆盖90%，检测最好不遗漏‘ 3、报告格式需要规范。遵循原则：信息完整， 表述规范，尽量简洁。 4、室内质控。
谢谢！
•血红蛋白H病－3个α基因缺失或丧失功能
肝脾肿大，中度贫血。HbH含量较高（0.8%-40%），
易发生溶血，有些病例需不定期输血，重者需切脾。
Hb H disease (- α 3.7/--SEA) (- α 4.2/--SEA)
a地贫的基因型与表现型
• Hb Bart’s胎儿水肿综合症 －4个a基因缺失或丧失功能