血流感染诊断的金标准正确的血培养课件
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血培养规范化操作PPT课件
答：保存在室温即可，过夜不会对检验结果造成影 响，但仍需要尽快送检
问题与回答
两套血培养可以在一个穿刺点采集吗？
答：不可以第二套需从第二个穿刺点采集，这样就 能帮助判断污染。
可否在导管内采血？
答：不可以，因为检出污染或定值菌可能性较大
问题与回答
如果用注射器采血后注入瓶内前，需要更换针头 吗？
采血量不足时，应先保证需氧瓶
皮肤消毒三步法
先用75%酒精擦拭穿刺部位待30秒
然后一根碘酊或碘伏或安尔碘消毒 60秒，直径为 1.5-2cm
最后75%酒精消毒脱碘
对碘过敏的患者，只能用75%酒精消毒60秒，待酒精挥发 后进行穿刺
血培养瓶消毒程序
用 75%酒精（不能使用含碘消毒剂）消毒血培养 瓶橡皮塞子
酒精作用待60秒
在血液注入血培养瓶之前，用无菌纱布或棉签清 除橡皮塞子表面剩余的酒精，然后注入血液
颠倒混匀标本与肉汤，以避免血液凝聚
问题与回答
培养瓶未使用时，是否需要冷藏或冷冻？
答：不需要冷藏，更不能冷冻，保存在 15-25 摄氏 度的室温即可，温度过低会导致对温度敏感的细菌 死亡
加入标本后未能及时送检的是否需要冷藏或放在 35度的温箱内？
答：不需要，对检出率无提升，会增加针刺伤的几 率
标签可否随意张贴？
答：标签应贴在瓶身，不能遮盖原有标签，条形码 ，以免影响扫码及查询结果
污染细菌
血培养污染的定义：在几次血培养中单个血培养 下列细菌阳性:
凝固酶阴性葡萄球菌
棒状杆菌
微球杆菌 丙酸杆菌 芽孢杆菌
2023版血液培养技术用于血流感染诊断临床实践专家共识解读ppt课件
2023版血液培养技术用于血流感 染诊断临床实践专家共识解读
汇报人：xxx 2023-1-03
目 录
• 共识背景与目的 • 共识内容概述 • 共识详细解读 • 共识实施建议与挑战 • 未来展望与研究方向
01 共识背景与目的
血流感染现状及挑战
血流感染发病率
血流感染是一种常见的严重感染类型 ，发病率较高，且呈上升趋势。
提高患者及家属认知度与配合度
宣传教育
通过开展讲座、发放宣传资料等形式，向患者及家属 普及血流感染相关知识，提高认知度。
心理疏导
对患者进行心理疏导，减轻其焦虑和恐惧情绪，提高 治疗依从性。
家属参与
鼓励家属积极参与患者护理过程，提供情感支持和生 活照顾，减轻患者负担。
优化抗菌药物使用与管理政策
严格执行抗菌药物使用指南
根据共识和指南，规范抗菌药物的使用种类 、剂量和疗程，降低耐药风险。
加强抗菌药物监管
定期对医院抗菌药物使用情况进行监测和评 估，确保药物使用的合理性和规范性。
完善抗菌药物管理政策
建立抗菌药物分级管理制度，加强处方审核 和点评，促进抗菌药物合理使用。
05 未来展望与研究方向
新型血液培养技术应用前景
病原体多样性
导致血流感染的病原体种类繁多，包 括细菌、真菌、病毒等，给诊断和治 疗带来挑战。
耐药性问题
随着抗菌药物的广泛使用，耐药菌株 不断增多，给血流感染的治疗带来困 难。
临床诊断需求
血流感染的早期诊断和病原体鉴定对 于制定治疗方案和改善预后具有重要 意义。
血液培养技术应用与发展
血液培养技术原理
通过制定共识，规范血液培养技术的临床应用，提高血流感染的诊 断准确性和及时性。
促进抗菌药物合理使用
汇报人：xxx 2023-1-03
目 录
• 共识背景与目的 • 共识内容概述 • 共识详细解读 • 共识实施建议与挑战 • 未来展望与研究方向
01 共识背景与目的
血流感染现状及挑战
血流感染发病率
血流感染是一种常见的严重感染类型 ，发病率较高，且呈上升趋势。
提高患者及家属认知度与配合度
宣传教育
通过开展讲座、发放宣传资料等形式，向患者及家属 普及血流感染相关知识，提高认知度。
心理疏导
对患者进行心理疏导，减轻其焦虑和恐惧情绪，提高 治疗依从性。
家属参与
鼓励家属积极参与患者护理过程，提供情感支持和生 活照顾，减轻患者负担。
优化抗菌药物使用与管理政策
严格执行抗菌药物使用指南
根据共识和指南，规范抗菌药物的使用种类 、剂量和疗程，降低耐药风险。
加强抗菌药物监管
定期对医院抗菌药物使用情况进行监测和评 估，确保药物使用的合理性和规范性。
完善抗菌药物管理政策
建立抗菌药物分级管理制度，加强处方审核 和点评，促进抗菌药物合理使用。
05 未来展望与研究方向
新型血液培养技术应用前景
病原体多样性
导致血流感染的病原体种类繁多，包 括细菌、真菌、病毒等，给诊断和治 疗带来挑战。
耐药性问题
随着抗菌药物的广泛使用，耐药菌株 不断增多，给血流感染的治疗带来困 难。
临床诊断需求
血流感染的早期诊断和病原体鉴定对 于制定治疗方案和改善预后具有重要 意义。
血液培养技术应用与发展
血液培养技术原理
通过制定共识，规范血液培养技术的临床应用，提高血流感染的诊 断准确性和及时性。
促进抗菌药物合理使用
血流感染与血培养 PPT课件
外科ICU常见感染的部位
下呼吸道6%
手术切口15%
肺炎33%
胃肠道4%
心血管4%
眼耳鼻喉3% 皮肤软组织3%
血流13%
尿路18%
Richards M, et al. Epidemiology, prevalence, and sites of infections in intensive care units. Seminars in Respiratory and Critical Care Medicine. 2003;24(1):3-22
送检方法：不保留情况
从独立的外周静脉无菌采集2套血培养 无菌状态下取出导管并剪下5cm导管尖端或近心
端交付实验室进行Maki半定量平板滚动培养或 者定量培养（Following Vortex或超声降解）
的45% ICU的医院感染率比一般病房高5～10倍 ICU的耐药菌分离率高，感染难治
Richards M, et al. Epidemiology, prevalence, and sites of infections in intensive care units. Seminars in Respiratory and Critical Care Medicine. 2003;24(1):3-22
完整的血培养过程
医师开出医嘱 护理人员收集送检样本 实验室检测、分离并鉴定导致血流感染的
微生物 三级报告：为临床医生提供抗菌药物敏感
性试验结果
国内血培养现状 —阳性检出率低10%（国外约为15％）
原因何在？
血流中含菌量低 血培养的临床实践
血液中抗菌物质
欠规范！！
抗生素的应用
第一套取血量 ml
血流感染诊断和金标准正确和血培养共54页
血流感染诊断和金标准正确和血培养
36、如果我们国家的法律中只有某种 神灵， 而不是 殚精竭 虑将神 灵揉进 宪法， 总体上 来说， 法律就 会更好 。—— 马克·吐 温 37、纲纪废弃之日，便是暴政兴起之 时。— —威·皮 物特
38、若是没有公众舆论的支持，法律 是丝毫 没有力 量的。 ——菲 力普斯 39、一个判例造出另一个判例，它们 迅速累 聚进 而变成 法律。 ——朱 尼厄斯
40、人类法律，事物有规律，这是不 容忽视 的。— —爱献 生
66、节制使快乐增加并使享受加强。 ——德 谟克利 特 67、今天应做的事没有做，明天再早也 是耽误 了。——裴斯 泰洛齐 68、决定一个人的一生，以及整个命运 的，只 是一瞬 之间。 ——歌 德 69、懒人无法享受休息之乐。——拉布 克 70、浪费时间是一桩大罪过。——卢梭
36、如果我们国家的法律中只有某种 神灵， 而不是 殚精竭 虑将神 灵揉进 宪法， 总体上 来说， 法律就 会更好 。—— 马克·吐 温 37、纲纪废弃之日，便是暴政兴起之 时。— —威·皮 物特
38、若是没有公众舆论的支持，法律 是丝毫 没有力 量的。 ——菲 力普斯 39、一个判例造出另一个判例，它们 迅速累 聚进 而变成 法律。 ——朱 尼厄斯
40、人类法律，事物有规律，这是不 容忽视 的。— —爱献 生
66、节制使快乐增加并使享受加强。 ——德 谟克利 特 67、今天应做的事没有做，明天再早也 是耽误 了。——裴斯 泰洛齐 68、决定一个人的一生，以及整个命运 的，只 是一瞬 之间。 ——歌 德 69、懒人无法享受休息之乐。——拉布 克 70、浪费时间是一桩大罪过。——卢梭
血流感染的实验室诊断ppt课件
阳性检出率（%）
采血量对阳性检出率的影响
120 100
80 60 40 20
0 0
10
20
30
40
50
60
70
采血量（ml）
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14
（二）标本运送
• 采血后的血培养瓶应立即送检，不得超过2h。
• 不能放入冰箱或冷冻，有些苛养菌如肺炎链球菌 、脑膜炎奈瑟菌等遇冷很容易死亡。
• 如在培养之前不得不放置一段时间，应置于室温 。
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12
（一）标本采集
• 寒战后体温高峰前 细菌含量最高。
• 血液细菌含量随着 体温从最高峰逐渐 下降而越来越少。
• 血液采样的最佳时 间是在寒战后和发 热高峰前，此时阳 性检出率最高。Fra bibliotek完整版课件
13
（一）标本采集
采血量 成人采血量为5～10ml / 瓶，分别采取需氧瓶和厌氧瓶，双部位抽血。 儿童采血量为3～5ml / 瓶，采取儿童瓶。
血流感染的实验室诊断
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1
1 血流感染概述 2 自动化血培养系统 3 标本采集和运送 4 阳性报警后处理方法 5 如何判断是否污染
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2
一、血流感染概述
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3
（一）血流感染的定义
• 血流感染（bloodstream infections,BSI ）是指各种病原微生物侵入血循环，释放 毒素和代谢产物，并诱导细胞因子释放， 对机体所有脏器造成损害，严重者可导致 休克、多脏器衰竭、弥散性血管内凝血， 甚至死亡，是一种严重的全身感染性疾病 。
酶阴性的葡萄球菌，也应考虑为致病 菌
完整版课件
25
（二）细菌种类
血流感染实验室诊断.pptx
血培养污染菌
• 在多次血培养中单次培养下列细菌阳性 • 凝固酶阴性葡萄球菌 • 棒状杆菌 • 微球菌 • 丙酸杆菌 • 芽孢杆菌
• 如多次培养阳性，可能为条件致病菌，需 结合临床分析
26
第27页/共70页
为什么需氧+厌氧？
两种组合均能检测
非条件致病菌 Mayo Clinic
Pathogen No.
or <4 G/L or >10% 未成熟中性粒细胞 • 32%患者有1瓶以上CNS阳性，BSI68 %，污染12% (p <0.001) • 没有SIRS症状：BSI 5%，污染29% (p <0.001)
Clin Microbiol Infect. 2012 online
第32页/共70页
单瓶血培养CNS的BSI和污染患者区 别
OR=1.23
OR=0.93
Schuyler Halverson, et al. JCM. 2013 online
第39页/共70页
抗菌药物治疗与血流感染死亡率
死亡率
Chest 115 (2): 1999 第40页/共70页
血培养三级报告制度
血培养 阳性
终报告
40
第41页/共70页
血培养结果回报对治疗的影响
第44页/共70页
阳性血培养－基于PCR的检测
• PCR特异性检测
• 病原特异性PCR
• 特定耐药基因检测：葡萄球菌mecA, 肠球菌van • 细菌载量：肺炎链球菌自溶毒A基因lytA拷贝数
• 广谱检测：PCR扩增特定靶位
• 多态性分析 • 测序 • 后续基因检测 • 种特异性real-time PCR
• 血流感染（bloodstream infection, BSI）：败血症和菌血症 目前统称为血流感染。
血流感染诊断的金标准正确的血培养53页PPT
血流感染诊断的金标准正确的血培养
36、“不可能”这个字(法语是一个字 )，只 在愚人 的字典 中找得 到。--拿 破仑。 37、不要生气要争气，不要看破要突 破，不 要嫉妒 要欣赏 ，不要 托延要 积极， 不要心 动要行 动。 38、勤奋，机会，乐观是成功过 统计学 和成功 人士的 分析得 出，乐 观是成 功的第 三要素 。
39、没有不老的誓言，没有不变的承 诺，踏 上旅途 ，义无 反顾。 40、对时间的价值没有没有深切认识 的人， 决不会 坚韧勤 勉。
谢谢你的阅读
❖ 知识就是财富 ❖ 丰富你的人生
71、既然我已经踏上这条道路，那么，任何东西都不应妨碍我沿着这条路走下去。——康德 72、家庭成为快乐的种子在外也不致成为障碍物但在旅行之际却是夜间的伴侣。——西塞罗 73、坚持意志伟大的事业需要始终不渝的精神。——伏尔泰 74、路漫漫其修道远，吾将上下而求索。——屈原 75、内外相应，言行相称。——韩非
36、“不可能”这个字(法语是一个字 )，只 在愚人 的字典 中找得 到。--拿 破仑。 37、不要生气要争气，不要看破要突 破，不 要嫉妒 要欣赏 ，不要 托延要 积极， 不要心 动要行 动。 38、勤奋，机会，乐观是成功过 统计学 和成功 人士的 分析得 出，乐 观是成 功的第 三要素 。
39、没有不老的誓言，没有不变的承 诺，踏 上旅途 ，义无 反顾。 40、对时间的价值没有没有深切认识 的人， 决不会 坚韧勤 勉。
谢谢你的阅读
❖ 知识就是财富 ❖ 丰富你的人生
71、既然我已经踏上这条道路，那么，任何东西都不应妨碍我沿着这条路走下去。——康德 72、家庭成为快乐的种子在外也不致成为障碍物但在旅行之际却是夜间的伴侣。——西塞罗 73、坚持意志伟大的事业需要始终不渝的精神。——伏尔泰 74、路漫漫其修道远，吾将上下而求索。——屈原 75、内外相应，言行相称。——韩非
血流感染的实验室诊断
精品课件
（三）阳性检出时间
• 阳性检出时间与血标本中含菌量呈反比关系。 • 阳性报警出现时间小于24h，一般为血流感染
大于48h，多为污染
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（四）重复培养结果
• 与病人静脉导管培养或其他部位标本的培养结果 相比较，2次以上分离细菌的菌种与药敏谱相同时 ，考虑血流感染。
精品课件
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。
精品课件
四、阳性报警后处理方法
精品课件
• 血培养阳性报警后，如何处理？
观察培养曲线 涂片、转种血平板 镜检 报告危急值
革兰染色
• 若革兰染色镜检未发现细菌，怎么办？
重新涂片，作瑞氏染色
以培养曲线作初步判断是否假阳性，次日观察血平 板上是否生长
精品课件
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精品课件
• 阳性曲线
精品课件
• 阴性曲线
精品课件
（二）血流感染的类型
• 菌血症（bacteremia）：细菌侵入血流，尚未大 量繁殖且未引发临床症状，往往是一过性的。
• 败血症（septicemia）：细菌进入血液大量繁殖 ，分泌毒素或代谢产物，产生严重的临床症状。
• 脓毒败血症（pyemia）：细菌进入血液大量繁殖 ，分泌毒素或代谢产物，产生严重的临床症状，常 伴有多发性脓肿或败血性休克。
（三）血培养的现状
• 不正确采样 • 污染问题
皮肤定植菌群是血培养污染的最常见细菌 。
• 阳性检出率低 • 检验周期长
精品课件
二、全自动血培养系统
精品课件
二、自动化血培养系统
我院使用的是BacT / ALERT 3D 全自动细 菌、分枝杆菌培养系 统
工作原理： 细菌在培养基中代谢 基质时产生CO2,并 水解成H+， H+透过 瓶底滤过膜，瓶底乳 胶感应器颜色由墨绿 色变成黄色。
（三）阳性检出时间
• 阳性检出时间与血标本中含菌量呈反比关系。 • 阳性报警出现时间小于24h，一般为血流感染
大于48h，多为污染
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（四）重复培养结果
• 与病人静脉导管培养或其他部位标本的培养结果 相比较，2次以上分离细菌的菌种与药敏谱相同时 ，考虑血流感染。
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。
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四、阳性报警后处理方法
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• 血培养阳性报警后，如何处理？
观察培养曲线 涂片、转种血平板 镜检 报告危急值
革兰染色
• 若革兰染色镜检未发现细菌，怎么办？
重新涂片，作瑞氏染色
以培养曲线作初步判断是否假阳性，次日观察血平 板上是否生长
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• 阳性曲线
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• 阴性曲线
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（二）血流感染的类型
• 菌血症（bacteremia）：细菌侵入血流，尚未大 量繁殖且未引发临床症状，往往是一过性的。
• 败血症（septicemia）：细菌进入血液大量繁殖 ，分泌毒素或代谢产物，产生严重的临床症状。
• 脓毒败血症（pyemia）：细菌进入血液大量繁殖 ，分泌毒素或代谢产物，产生严重的临床症状，常 伴有多发性脓肿或败血性休克。
（三）血培养的现状
• 不正确采样 • 污染问题
皮肤定植菌群是血培养污染的最常见细菌 。
• 阳性检出率低 • 检验周期长
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二、全自动血培养系统
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二、自动化血培养系统
我院使用的是BacT / ALERT 3D 全自动细 菌、分枝杆菌培养系 统
工作原理： 细菌在培养基中代谢 基质时产生CO2,并 水解成H+， H+透过 瓶底滤过膜，瓶底乳 胶感应器颜色由墨绿 色变成黄色。
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多次血培养可提高G-菌的检出率
• 导致血流感染的常见G-菌，首次血培养即可获得阳性结果的比率较低， 仅60-78%，尤其是铜绿假单胞菌。但大多数可在前3次血培养中获得 阳性结果
行4次血培养
行3次血培养
阳性率 阳性率
PPT学习交流
19
3.Lee A et al. JOURNAL OF CLINICAL MICROBIOLOGY.2007;45(11):3546–3548
单一病原体感染：多次血培养可提高阳性率
• 24小时血培养次数≥3次或4次的患者，前两次血培养的阳性率<90%； 而前4次血培养的阳性率>99%
阳性率
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16
3.Lee A et al. JOURNAL OF CLINICAL MICROBIOLOGY.2007;45(11):3546–3548
腹部术后感染，…) • 心率异常加快 • 低血压或高血压 • 呼吸频率加快
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5
血培养现状—假阳性率高
皮肤消毒不彻底 采血操作不规范 临床实践欠规范
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7
优化血培养流程、提高检出 率
采血时机 采血份数 采血量 规范操作
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8
• 由于血流感染病原菌种类多，难以根 据临床表现鉴别，正确的病原学诊断 有赖于早期的血培养及脓液或其他体 液标本进行的涂片和培养1
肠球菌 链球菌
20
结论
• 24h内进行4次血培养，导致血流感染的病原体阳性检出率 高达99%
• 各种不同病原体血培养的阳性检出率略有差异，金黄色葡 萄球菌在首次血培养即可获得阳性结果的比例较高；而铜 绿假单胞菌首次血培养即可获得阳性结果的比例较低
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21
3.Lee A et al. JOURNAL OF CLINICAL MICROBIOLOGY.2007;45(11):3546–3548
多次血培养可提高G+菌的检出率
• 导致血流感染的金黄色葡萄球菌在首次血培养即可获得阳性结果的比率在90% 左右，其他常见G+菌，大多数可在前3次血培养中获得阳性结果
行4次血培养
行3次血培养
阳性率 阳性率
肠球菌 链球菌
PPT学习交流 3.Lee A et al. JOURNAL OF CLINICAL MICROBIOLOGY.2007;45(11):3546–3548
• 血培养是检测患者是否存在血流 感染的重要手段，当血培养获阳 性结果时，可明确诊断，是诊断 的“金标准”，同时也可以为临 床靶向治疗提供依据2
由于各种原因，目前各医院在血培养的次数以及每次的采血量 存在差异。这种差异是否影响血培养的阳性率？ 血培养是否可以成为判断某些定植率是感染还是定植的方法？
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可疑的亚急性心内膜炎患者每间隔30分钟至1h采集1套， 连续采集3套标本。如果24小时内报告阴性，则继续采集2 套血培养
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11
采集血培养样本的最佳时间？
尽可能在患者寒战或开始发热时采血 如患者已经应用抗菌药物进行治疗，应在下一次
用药之前采血培养
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12
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13
血培养次数对阳性率的影响
采血体积及培养皿孵化时间对血培养阳 性率的影响
正确的血培养对判断常见定植菌感染的 意义
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血流感染诊断的金标准： ——正确的血培养
ICU
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1
基本概念：血流感染？
血流遭受的微生物（细菌或真菌）侵入所引 起的感染
患者有发热、寒战或低血压等临床症状且血 培养有致病菌
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2
基本概念：血培养？
血培养是一项实验室检查，从患者体内采血，并 将其装入含有培养基的瓶中，以此来确定导致患 者感染的微生物（细菌或真菌）是否已经侵入患 者的血液。
14
研究简介
• 对2004年1月-2005年12月入 住Robert Wood Johnson大 学附属医院及Duke大学医疗 中心且血培养阳性的成人患 者进行回顾性分析，患者在 24h内均接受 ≥3次血培养
• 研究旨在评估血培养次数与 阳性率的相关性
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15
3.Lee A et al. JOURNAL OF CLINICAL MICROBIOLOGY.2007;45(11):3546–3548
9
1.汪复等.实用抗感染治疗学.2005 2. Hall KK et al. CLINICAL MICROBIOLOGY REVIEWS.2006;19(4):788–802
问题：
怀疑血流感染，何时采血最佳？
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寒战 体温
血培养
细菌浓度
0
30
60
时间 (分钟)
研究表明：细菌通常在病人寒战和发热前1h进入血流
混合感染：多次血培养可提高所有病原体的检出率
• 58例混合感染检出的病原体共121株，所有病原体在前4次血培养可获 得阳性结果 N=121株
阳性率
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3.Lee A et al. JOURNAL OF CLINICAL MICROBIOLOGY.2007;45(11):3546–3548
混合感染：多次血培养可提高阳性率
• 研究期间，共发生58例由多种病原体导致的血流感染，该类患者前三 次血培养的阳性率为100% N=58例
阳性率
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17
3.Lee A et al. JOURNAL OF CLINICAL MICROBIOLOGY.2007;45(11):3546–3548
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3
血培养非常重要
菌血症和真菌血症 → 早期诊断 阳性血培养：证实有感染性的病原体 → 鉴定病原体 → 优化抗菌药物治疗 → 改善预后
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4
什么时候进行血培养?
脓毒症患者应常规行血培养
怀疑血流感染患者常规行血培养，如：
• 不明原因的发热(＞37℃)或体温过低(＜36℃) • 休克，寒颤，僵直 • 严重的局部感染(脑膜炎，心内膜炎，肺炎，肾盂肾炎，
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22
问题： 标本须间隔多久采集?
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23
标本须间隔多久采集?
对于非持续性菌血症，同时或短时间内采集2～3套血培养， 因为体内巨细胞吞噬系统会在15～30min内清除掉进入人 体内的细菌
可疑急性心内膜炎患者要立即取血作血培养，30分钟内完 成3套血培养的采集，采集后立即进行抗菌药的经验治疗。 如果24小时内报告阴性，则继续采集2套血培养