附子中新乌头碱的含量测定(一)
附子高压蒸制生物碱含量测定
附子高压蒸制生物碱含量测定［摘要］本文在中药炮制理论指导下，以生附子、常压蒸附子炮制品为对照，以三种乌头生物碱及炮制品的外观评分为指标，比较高压蒸制工艺。
结果:附子高压蒸制效果最佳，附子经润湿法处理后，使用立式压力蒸汽灭菌器（LS-50LJ）蒸制 150 min时，与各炮制品综合评分比较相近，从各方面考察分析:外形美观符合药典规定，双酯型生物碱含量急剧下降低至0.04mg/g。
达到2015版药典对炮制附子的要求。
结论:该工艺简便、可控、易行，可作为替代传统炮制工艺的新方法。
经高压蒸制法处理后其双酯型生物碱大大降低，单酯型生物碱明显增加，总生物碱含量变化不大，说明该工艺稳定可行，适合工业化生产。
［关键词］附子；高压蒸制；生物碱；总生物碱；一、概述附子为毛茛科草本植物乌头子根的加工品，始载于《神农本草经》，味辛、甘，性大热；具有回阳救逆、补火助阳、散寒止痛的功效［1］。
其生品所含的乌头碱等酯型生物碱毒性较大，但它既是有效成分，又是毒性成分，临床使用的安全范围较小，通过合理的加工可使生物碱由双酯型水解为单酯型，从而达到降毒存效的目的。
但实际操作时往往出现炮制不及，毒性太大，炮制太过，药效不存的现象。
目前能同时控制附子毒性和保证疗效的工艺尚不规范，同时对其安全性和有效性的科学、量化的质量标准不明确，造成各地附子炮制品的质量相差很大［2］。
历版《中国药典》制法耗时耗能，依赖经验，可控性较低，炮制过程中化学成分较难控制。
传统炮制工艺是在产地进行洗净、泡胆巴、煮、剥皮、切片、漂片等加工处理，在此过程中，生物碱损失约81.3% ，其中泡胆巴损失31.6% ，漂片 33.6% ，蒸片16.1% ［3］。
本文提出的高压蒸制法，操作简单、可控、省时，去毒效果好，是目前炮制研究的热点。
二、实验部分2.1仪器与试药2.1.1实验试药表2.1实验试药试药批号厂家附子采自陕南上海源叶生物料技有限公司乌头碱对照品P23S7F21639上海源叶生物料技有限公司次乌头碱对照品M12A7S19326上海源叶生物料技有限公司新乌头碱对照品Y12A7H19379乙睛、四氢呋喃、用醇、乙醇、乙酸铵、冰乙酸、异丙醇、三氯甲烷、乙酸乙酯、氨水，其中乙睛和四氢呋喃为色谱纯，其余为分析纯，水为纯化水。
高效液相色谱法测定附子中次乌头碱的含量
高效液相色谱法测定附子中次乌头碱的含量【关键词】高效液相色谱摘要：目的成立附子中次乌头碱的含量测定方式。
方式色谱柱为Hypersil ODS2，5 μm，4.6 mm×250 mm；流动相为0.2%冰醋酸(用三乙胺调pH 6.25)乙腈(63∶37)；流速：1.0 ml/min。
结果次乌头碱在0.151～1.208 μg范围内线性关系良好，r=0.999 8，加样回收率为98.13%，RSD为1.14%。
结论该法可作附子的质量操纵指标之一。
关键词：附子；次乌头碱；高效液相色谱法附子为毛莨科植物乌头Aconitum carmichaeli Debx.子根的加工品，依炮制方式不同有盐附片、黑顺片、白附片等饮片规格。
《中国药典》2000版Ⅰ部附子项下未收载含量测定方式。
附子中含双酯型生物碱，要紧有乌头碱、次乌头碱和新乌头碱等。
文献报导酯型生物碱含量测定有酸性染料比色法［1～2］、高效液相色谱法(HPLC)［3～5］和薄层扫描法［6］。
本文采纳HPLC对附子中酯型生物碱进行分析，经预实验附子中乌头碱的含量极低或未能检出，新乌头碱的含量也很低，，次乌头碱的量最大，而且次乌头碱是酯型生物碱毒性显著降低的水解产物，故以次乌头碱的含量作为定量指标，作为附子质量操纵指标之一。
1 仪器与材料1.1 仪器高效液相色谱仪(HP1050)；色谱柱：Hypersil ODS2，5 μm,4.6 mm×250 mm。
1.2 材料附子(购自广东省药材公司中药饮片厂、广州市药材公司经营)，次乌头碱(购自中国药品生物制品检定所)，乙腈为色谱纯，其他试剂为分析纯。
2 方式与结果2.1 色谱条件确信2.1.1 检测波长的选择次乌头碱的甲醇溶液别离进行紫外扫描，结果均在235 nm处有最大吸收，与文献报导［3］的测定波长一致，故采纳235 mm作为检测波长。
2.1.2 流动相的选择文献［4～5］报导的流动相碱性过强或加入氯仿。
RP-HPLC同时测定附子地上部分中新乌头碱和次乌头碱的含量
Ｋｅ ｒ ｓ ｅ ａ ａ ｔ ｆＲａ ｉ ｏ ｉ ａ ｅ ａｉ Ｐ ａ ｐ ｒ ｔ ； ｓ ｃ ｎｔ ｅ ｈ ｐ ｃ ｎｔ ｅ； — Ｌ ｙ ｗｏ ｄ ：ａ ｒ ｌ ｒ ｏ ｄｘ Ａｃ ｎ ｔ Ｌ ｔ ｒｌ ｒ ｅ ａ ａａ ｍｅ ａ ｏ ｉ ｎ ； ｙ ａ ｏ ｉ ｎ ＲＰ ＨＰ Ｃ ｉ ｐ ｉ ｓ ｉ ｉ
头碱 、 次乌头碱均得到较好分离 ， 分别在 １ ． ０ ｇ・ ～、１４ ２ ５～１ ０ｍ Ｌ １． ６～１１０ ｍ Ｌ 呈 良好 的线性关 系 ； ２ ０ ｇ・ 加样 回收率 分别为 该方法简便 、 灵敏 、 准确 ， 可用于附子中双酯型生物碱 的定量 分析 。
Ｄｅ ｅ ｍ ｉ ａ ｉ ｎ ｆ ｍ ｅ ａ ｏ ｉｉ ｅ ａ ｙ ｃ ｎ ｔｎ ｎ ｔ ｅ ａ ｒ ａ ａ ｔ ｏ ｔ ｒ ｎ ｔｏ ｏ ｓ ｃ ｎ ｔｎ ｎｄ ｈ ｐａ ｏ ｉ ｅ ｉ ｈ ｅ ｉ ｌｐ ｒ ｆ ｉ Ｒａ ｉ ｏ ｉｉＬａ ｅ ａ ｉ ａ ｐ ｒ ｔ ｙ ＲＰ． ｄ ｘ Ａｃ ｎ ｔ ｔ ｒ ｌ Ｐｒ ｅ ａ ａ ａ ｂ ｓ ＨＰＬＣ
ｍ ５Ｉ ； ｍ， ， 流动相为 乙腈－． ％ 乙二胺水 溶液 ， ｚ ｍ） ０１ 梯度 洗脱 ： ０
～
１３ 药材 ．
附子地上部分采 自汉 中洋 县 ， 由西安 医学 院中药
１ ｉ，６ 乙腈 ；７ 叭 ～ ３ ｉ ，２ 乙腈 ； ７ｍｎ ５ ％ １． ０ｍ ｎ ９ ％ 检测 波长 ：
２ ０ｎ 柱 温 ：０ｏ 流 速 ：． ・ ｉ ～； 样 量 ：０ Ｉ。 色 ３ ｍ； ３ Ｃ； １０ｍｌ ｍ ｎ 进 １ ｌ ｘ
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附子理中丸中乌头碱的限量检查
附子理中丸中乌头碱的限量检查
忻丁烯;邓群;吴安明;王胜利;程紫骅
【期刊名称】《中草药》
【年(卷),期】1983(0)2
【摘要】附子理中丸由制附子、党参、炒白术、干姜、甘草五味中药组成,为常用中成药。
生附子含乌头碱,成人口服0.2毫克乌头碱即能引起中毒。
为防止由于炮制不当而引起中毒事故,我们研究了附子理中丸中乌头碱的限量检查法。
1.样品来源附子理中丸,江西国药厂产品,批号810226,每丸9克。
2.乌头碱标准品 E.Merck,用无水乙醇溶解,配成1毫升相当于1毫克乌头碱。
【总页数】1页(P17-17)
【关键词】限量检查;中乌头碱;附子理中丸
【作者】忻丁烯;邓群;吴安明;王胜利;程紫骅
【作者单位】江西国药厂;江西中医学院
【正文语种】中文
【中图分类】R286.0
【相关文献】
1.构建限量检查医院制剂姜红活血止痛酊中乌头碱的薄层色谱法研究 [J], 彭波;刘春龙
2.骨痹止痛液中乌头碱的限量检查 [J], 李喜香;李兴勇;王雪梅;包强
3.流感丸中乌头碱的限量检查及HPLC含量测定方法的建立 [J], 刘高宏;魏立莉;
4.流感丸中乌头碱的限量检查及HPLC含量测定方法的建立 [J], 刘高宏;魏立莉
5.流感丸棒嘎药材中乌头碱限量检查方法学研究 [J], 仇朝红;马元龙
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附子中3种双酯型生物碱含量测定方法建立
附⼦中3种双酯型⽣物碱含量测定⽅法建⽴2 附⼦研究概况附⼦为亚门⽑茛科(Ranunculaceae)植物乌头(AconitumcarmichaeliDebx．)侧根(⼦根)的加⼯品，其性⼤热、⾟、⽢，归⼼、肾，⽣品极毒。
中医认为附⼦具有回阳救逆、补⽕助阳、散寒⽌痛、逐风通痹、温阳⾏⽔等功效。
附⼦始载于《神农本草经》，主风寒咳逆邪⽓，温中，⾦疮，破症坚积聚，⾎瘕，寒湿，拘挛膝痛，不能⾏步[1]。
2.1 附⼦化学成分研究国内外学者对附⼦化学成分的研究表明，附⼦的化学成分分为⽣物碱类物质、脂类物质和多糖类物质三⼤类。
其中⽣物碱类物质为其主要成分，包括脂溶性⽣物碱：乌头碱（aconitine），中乌头碱（新乌头碱mesaconitine），次乌头碱（下乌头碱、海帕乌头碱hypaconitine），塔拉乌头胺（talatisamine），和乌胺（higeramine）棍掌碱氯化物（coryneine chloride）[2]，异飞燕草碱（isodelphinine），苯甲酰中乌头碱（benzoyl mesaconitine），新乌宁碱（neoline），北乌头碱（beiwutine），多根乌头碱（karakoline），去氧乌头碱（deoxyaconitine），准葛尔乌头碱（songorine）；⽔溶性⽣物碱：江油乌头碱（jiangyouaconitine），新江油乌头碱（neojiangyouaconitine）、尿嘧啶(Uracil)[3]、附⼦亭碱（fuzitine）、消旋去甲基衡州乌药碱（demethylcoclaurine）[4]、、附⼦宁碱（fuziline）、去甲猪⽑菜碱（salsolinol）[5]等。
其中双酯型⽣物碱乌头碱（aconitine），中乌头碱（mesaconitine），次乌头碱（hypaconitine）为其主要成分，约占0.4%-0.8%，易溶于氯仿、苯、⽆⽔⼄醇和⼄醚，难溶于⽔，微溶于⽯油醚，既是附⼦的药效成分，⼜是毒性成分。
HPLC法测定附子及其样品中6种乌头类生物碱的含量
HPLC法测定附子及其样品中6种乌头类生物碱的含量栾永福;孙蓉【期刊名称】《中国药物警戒》【年(卷),期】2014(000)005【摘要】目的：建立同时测定附子药材及其样品中6种乌头类生物碱含量的高效液相色谱分析方法。
方法C18柱，乙腈-四氢呋喃（25：15）为流动相A，以0.1mol·L-1醋酸铵溶液为流动相B，梯度洗脱，流速1.0mL·min-1，检测波长235nm。
结果6种乌头类生物碱均达到了较好的分离，分别在一定范围内呈良好的线形关系。
结论该方法简便、快速、灵敏，可有效地用于附子的鉴别和内在质量控制。
%Objective To establish a HPLC method for the determination of six kinds of Aconitum alkaloids in Aconitum carmichaeli and its samples. Methods A C18 column was used, and acetonitrile-tetrahydrofuran(25:15) as the mobile phase A, 0.1mol·L-1 NH4AC solution as the mobile phase B, gradient elute with a flow rate of 1.0mL·min-1 and a detection wavelength of 235nm. Results The six kinds of Aconitum alkaloids were separated, and the calibra tion curves of them were in good linearity over the certain range respectively. Conclusion This method is simple and accurate. It can be used in the identification and quality control of A. carmichaeli.【总页数】5页(P271-274,280)【作者】栾永福;孙蓉【作者单位】天津中医药大学，天津300073;山东省中医药研究院，山东济南250014【正文语种】中文【中图分类】R917;R282【相关文献】1.HPLC测定乌头汤提取物中3种乌头类生物碱的含量 [J], 张晓芬;王彬辉;章文红;王石健;王金明;杨赛成2.HPLC-Q-TOF-MS法测定不同厂家小金丸中9种乌头类生物碱的含量 [J], 黄阳;曹益鸣;张小龙;卜红闽3.HPLC法测定生附子及其炮制品中乌头碱及次乌头碱的含量 [J], 崔敏;杨武德4.RP-HPLC法测定蒙药那如-3丸中乌头类生物碱含量 [J], 陶淑娟;邵太丽;毕开顺5.HPLC法测定附子配伍前后乌头类生物碱含量 [J], 张丽;李锦;王玉明;刘昆因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
附子不同组织中生物碱含量的测定
Vol. 24 No. 1 M ar. 2009
附子不同组织中生物碱含量的测定
侯大斌 赵祥升 王 惠 许 源
(西南科技大学生命科学与工程学院 四川绵阳 621010)
摘要 :对附子不同组织中乌头总碱和 3种双酯型生物碱 —新乌头碱 、乌头碱和次乌头碱的含量进行了测定 。用酸性 染料比色法测定乌头类总生物碱的含量 ;反相高效液相色谱法测定新乌头碱 、乌头碱 、次乌头碱的含量 ,色谱柱为 : Zorbax extend - C18 (150 mm ×4. 6 mm , 5. 0μm ) ,流动相为乙腈 —0. 1%乙二胺 ,梯度洗脱 ,流速为 l mL /m in,检测波 长为 240 nm ,柱温 30 ℃。结果表明 :附子不同组织中生物碱的含量呈现明显的差异性 。子根 、茎秆 、叶 、须根和母 根中乌头类总生物碱含量分别为 : 5. 53, 3. 81, 14. 77, 8. 87和 4. 58 mg/ g; 3种双酯型生物碱含量在不同组织中的含 量顺序为 :须根 >子根 >母根 >叶片 >茎秆 。该研究可为附子资源的综合利用提供科学依据 。 关键词 :附子 新乌头碱 次乌头碱 乌头碱 高效液相色谱法 中图分类号 : R282; S567 文献标识码 : A 文章编号 : 1671 - 8755 (2009) 01 - 0098 - 04
高效液相色谱法测定附子中3组分的含量
中国药房 ２ ０ ０ ６年第 １ 卷第 １ ７ ６期
Ｃｈｉ ａ Ｐｈ ｒ ａ ｙ ０ ６ Ｖｏ ． ７ ｎ ａ ｍ ｃ ２ ０ １ １ Ｎｏ． ６ １
。１ ５５。２
维普资讯
５ ， ｍｌ 振荡使之溶解 ， ． ０ ４ ｍ微孔滤膜过滤 ， 取续滤液 １／ ， ０ ｌ供 １ 高效液相色谱法分析 。 ２ ５ 线 性关 系考 察 ．
Ｓｉ ｕ ｔ ｎｅ ｕ ｎｔ ｎｔ Ｄ ｅ ｅ ｍ ｉ ｍ ｌａ ｏ ｓ Ｃｏ ｅ ｔ ｒ ｎａｔｏ ｏ ｔｎｅ， ｉ ｎ ｏｆ Ａｃ ｎｉｉ Ｈｙｐａ ｏ ｔｎｅ ａ ｄ Ｍ ｅ ａ ｏｎｉｉ ｎ Ｆｕｚ ｙ Ｈ ＰＬＣ ｃ ｎｉｉ ｎ ｓｃ ｔｎｅ ｉ ｉｂ
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２ ３ 内标 溶 液 的 制 备 ． 准确称取阿普唑仑 １ ．ｍｇ 置于 ５ ｍｌ ０２ ， ０ 容量瓶 中， 加水溶
仑 对照品均 由中国药 品生物制 品检定所提供 ；甲醇为色谱纯 ， 水 为超纯水 ， 三乙胺 、 磷酸等试剂均为分析纯。
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附子中新乌头碱的含量测定(一)
作者：贾金艳，彭小冰，沈洲卿，杨卫平
【摘要】目的建立以高效液相色谱法测定附子中新乌头碱含量的方法。
方法采用Welchrom-C18色谱柱(5μm,4.6mm×250mm)，以甲醇－水－三乙胺（75∶25∶0.033）为流动相，流速为1.0ml·min-1，检测波长为233nm，柱温为30℃。
结果新乌头碱在0.0464～0.3248μg 范围内呈良好线性关系，r=0.9999；平均回收率为100.7%，RSD=2.19%。
结论该方法操作简便、准确、重复性好，可用于附子中新乌头碱的含量测定。
【关键词】附子；新乌头碱；高效液相色谱法
附子为毛茛科植物乌头AconitumcarmichaeliDebx.子根的加工品，具有回阳救逆、补火助阳、逐风寒湿邪的功效〔1〕。
附子的主要成分是乌头类生物碱，可分为单酯类、双酯类和胺基醇类生物碱。
其中以双酯型类生物碱如乌头碱、次乌头碱、新乌头碱成分毒性较大，但又同时是附子的药性成分。
历代医家都非常重视附子的毒性及其用量〔2〕。
为保证用药的安全性，本文在参考有关文献的基础上〔3，4〕，对附子生品中的新乌头碱进行含量测定，希望能够为其在质量控制方面提供一定的依据。
1仪器与试药
1.1仪器岛津LC-20A高效液相色谱仪,HS10260D超声洗洁器，XS205电子天平（十万分之一），JT1003电子天平（千分之一）。
1.2试药新乌头碱对照品（中国药品生物制品检定所，供含量测定用，批号：110799－200404）；甲醇为色谱纯；三乙胺、乙醚为分析纯；盐酸；氨水；纯净水。
2方法与结果
2.1色谱条件色谱柱：Welchrom-C18(5μm，4.6mm×250mm)；流动相为甲醇-水-三乙胺（75∶25∶0.033）；流速：1.0ml·min-1；检测波长：233nm；柱温：30℃。
进样量：5μl。
在该色谱条件下，新乌头碱与杂峰分离良好。
结果见图1～2。
2.2溶液的配制
2.2.1对照品溶液的制备精密称取新乌头碱对照品适量，配制成0.116mg·ml-1的对照品溶液，再精密吸取此对照品溶液，0.4，0.8，1.2，1.6，2.0，2.4，2.8ml分别定容于5ml容量瓶中。