栀子对大鼠肝毒性的实验研究

栀子苷鲥ｐｏｓｉｄｅ）具有一定的肝毒性【１｜。为了保障
栀子及其有效成分的合理应用，有必要对其肝毒性 问题进一步研究。 １材料与方法 １．１动物ＳＤ大鼠，雌雄各半，体重１００～１２０ ｇ，北 京维通利华实验动物有限公司，动物合格证号ＳＣＸＫ （京２００２．０００３）。 １．２ 药品与试剂栀子购自江西省樟树中药饮片 厂，经中国中医科学院中药研究所何希荣主管药师 鉴定，系茜草科植物栀子Ｇ．ｊａｓｍ／ｎｏ／ｄｅｓ。取栀子药 材，加水煎煮３次，每次２ ｈ，加水量为药材量的８ 倍；合并煎煮液，过滤，浓缩，７０℃减压干燥，粉碎成 细粉，经ＨＰＬＣ检测水提物中栀子苷为８．１２％；取栀 子药材，加７０％的乙醇冷浸过夜，加入乙醇量为药 材量的４倍；过滤，药渣再重复提取２次，合并醇液， 浓缩，７０℃减压干燥粉碎成细粉，经ＨＰＬＣ检测醇提 物中栀子苷为１４．１０％。
生化分析仪，检测血清脚，ＡＳＴ，ｒＩＢＩＬ。肝脏称重，
计算肝脏指数，肝脏指数＝肝重／体重×１００。取肝 脏组织固定于１０％的甲醛中，石蜡包埋切片，ＨＥ染 色，光学显微镜下进行病理观察。 １．５ 统计方法 数据均以牙±５表示，运用 ＳＰＳＳ．１０统计软件，进行单因素方差分析。 ２结果 ２．１动物一般情况及体重、肝重变化栀子水提 物、醇提物、栀子苷的大剂量组在给药的第２天，出 现背部轻微脱毛现象，第３天背部大面积严重脱毛； 尾巴上深蓝色的色斑；体重增长缓慢。栀子水提物
［４］Ｗａｎｇ Ｃ Ｊ，Ｗａｎｇ Ｓ Ｗ，Ｌｉｎ Ｊ Ｋ．Ｓｕｐｐｒｅｓｓｉｖｅ ｅｆｆｅｃｔ ｏｆ ｇｅｎｉｐｏｓｉｄｅ ｏｎ
ｔｈｅ ｈ邙。ｔｏｔ０菇ｃｉｔｙ ａｎｄ ｈｅｐａｔｉｃ ＤＮＡ ｂｉｎｄｉｎｇ ｏｆ ａｆｌａｔｏｘｉｎ Ｂｉ ｉｎ ｒａｔｓ． Ｃ．ｄｕｌｏｅｒ Ｌｅｔｔ，１９９１，６０：９５．
坏死。栀子水提物、醇提物、栀子苷的大剂量组的肝 栀子苷的大剂量组所分离的血清呈鲜黄色，ＡＬＴ，
重和肝脏指数与空白组比较均Ｐ＜０．００１，具有极显 著性差异。栀子水提物、醇提物、栀子苷的小剂量组
ＡＳＴ，ＴＢＩＬ与空白组比较，Ｐ＜０．０１或Ｐ＜０．００１，具
有显著的统计学差异。醇提物小剂量组的札Ｔ数
肝重与空白组比较增大趋势明显，但无统计学差异， 据离散明显，有３只大鼠的活性明显增高，致使数据
［摘要］目的：探讨栀子不同化学部位的肝毒性作用。方法：灌胃给药３ ｄ后，观察大鼠外观、行为及体重变 化；称量肝脏重并计算肝指数；测定大鼠血清丙氨酸氨基转移酶（ＡＩＴ）、天冬氨酸氨基转移酶（Ａｓｒ）活性及总胆红素 （ＴＢ儿）含量；对肝脏组织进行光镜的病理学观察。结果：３．０８ ｇ·ｌ‘ｇ一的水提物、１．６２ ｇ·ｋｇ－１的醇提物、０．２８ ｇ·ｌ【ｇ一的 栀子苷导致肝重增加，肝指数增大，与空白比较Ｐ＜０．０５，Ｐ＜０．００１；ＡＬＴ，Ａｓｒ活性增高，ＴＢＩＬ含量增加，与空白比较 Ｐ＜０．０５，Ｐ＜０．００１；光镜下可见明显的肝细胞肿胀、坏死，大量炎症细胞浸润等形态改变。结论：栀子水提物、醇提 物、栀子苷具有肝毒性，栀子苷是栀子肝毒性的主要物质基础。
栀子水提物、醇提物、栀子苷小剂量组：肉眼可 见肝脏大小正常、未见明显坏死区域，肝脏成暗红 色。肝枯否细胞明显增生，核分裂相多见，增殖的细 胞肥大。少部分肝小叶中央静脉瘀血并有轻 度扩张。
栀子水提物、醇提物、栀子苷大剂量组：肉眼可 见肝脏明显肿胀、出现大片状苍白色的坏死区域，其 他区域肝脏成黑色或暗红色。光镜下可见肝细胞索 排列紊乱，失去正常结构，大部分肝细胞明显肿胀， 胞核浓缩，胞质空网状，似气球样变，部分肝细胞坏 死，个别区域仅见残留的坏死肝细胞碎片，碎片中央 可见嗜酸性变，可见裸核、双核或多核的肝细胞。汇 管区胆管明显增生，胆管周围有大量炎症细胞浸润， 各组情况分别见图１～４。
图４栀子苷大剂量组肝脏病理切片（×４００）
３讨论 栀子的水提物、醇提物、栀子苷连续给大鼠灌胃
３ ｄ，它们的大剂量组均能导致肝重增加，肝脏指数 增大；明显升高血清中ＡＬＴ，ＡＳＴ的活性，增加ＴＢＩＬ 含量；病理观察可见明显的肝细胞肿胀、坏死，大量 炎症细胞浸润等形态改变。证实３．０８ ｇ·ｋｇ。１的水 提物、１．６２ ｇ·ｋｇ一的醇提物、０．２８ ｇ·ｋｓ‘１栀子苷组均 具有明显的肝脏毒性。栀子苷在水提物和醇提物中 的含量分别为８．１２％和１４．１０％，栀子水提物 ３．０８ ｇ·ｋｇ。１剂量组，相当于给予大鼠栀子苷０．２５ ｇ· ｋｇ～，栀子醇提物１．６２ ｇ·ｋｇ一剂量组，相当于给予
大鼠栀子苷０．２２８ ｇ·ｋｇ－。。据此推测，栀子苷是栀 子肝毒性的主要物质基础，但是栀子中的其他成分 在肝损伤中的作用尚待研究。另外，醇提物小剂量 组的部分动物的ＡＬＴ活性明显增高，可能是大鼠的 个体差异所致，提示小剂量的醇提物也能导致肝损 伤。
栀子苷被认为是栀子的主要有效成分，具有保 肝解毒、抗氧化等活性，对四氯化碳［２］、异硫氰酸．１． 萘酯［３］３、黄曲霉素Ｂｌ［４ｊ等导致的肝损伤具有良好的 保护作用；本研究结果和文献报道［１］显示大剂量栀 子苷具有明显的肝毒性。因此，有必要进行栀子苷 的肝保护和肝毒性相关性研究。另外，有研究表明， 栀子苷在肠道内细菌ｐ．葡萄糖苷酶的作用下水解 成京尼平（ｇｅｎｉｐｉｎ）ｔ ５ｌ，京尼平在栀子苷肝保护和肝 毒性两种效应中的意义，需要进一步研究。 ［参考文献】
Ｙ堍 ＹＡＮＧ Ｈｏｎｇ－ｊｕｎ，ＦＵ Ｍｅｉ－ｈｏｎｇ，ＷＵ Ｚｉ－ｌｕｎ，ＬＩＡＮＧ Ｒｉ－ｘｉＪｌｇ，ＨＵＡＮＧ Ｌｕ—ｑｉ，ＦＡＮＧ Ｊｉｎｇ，ＬＩ Ｇｅｎｇ，ＣＡＯ
（Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ ｏｆ Ｃｈｉｎｅｓｅ Ｍａｔｅｒｉａ Ｍｅｄｉｃａ，Ｃｈｉｎａ Ａｃａｄｅｍｙ ｏｆ Ｃｈ／ｎｅｓｅ Ｍｅｄ／ｃａ／Ｓｃ／ｅｔｗｅｓ，ｔｋ０＂／ｎｇ １００７００，Ｃｈ／ｎａ）
· 】０９１ ·
第３１卷第１３期 ２００６年７月
中国中药杂志 Ｃｈｉｎａ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｃｈｉｎｅｓｅ Ｍａｔｅｒｉａ Ｍｅｄｉｃａ
ｖ０１．３１．Ｉｓｓｕｅ １３ Ｊｕｌｙ，２００６
大、小剂量组、栀子苷的大剂量组在给药期间分别死 指数与空白组比较Ｐ＜０．０５，具有显著差异（表１）。
亡４只、１只和２只，解剖后发现严重的大面积肝脏 ２．２ 对大鼠肝功能的影响栀子水提物、醇提物、
第３ｌ卷第１３期 ２００６年７月
中国中药杂志 Ｃｈｉｎａ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｃｈｉｎｅｓｅ Ｍａｔｅｒｉａ Ｍｅｄｉｅａ
Ｖ０１．３１．Ｉｓｓｕｅ １３ Ｊｕｌｙ，２００６
栀子对大鼠肝毒性的实验研究
杨洪军，付梅红，吴子伦，梁日欣，黄璐琦”，方 婧，李耿，曹 莹
（中国中医科学院中药研究所，北京１００７００）
【收稿日期】２００５４１７．１４ ［基金项目】国家科技基础条件平台项目（２００４ＤＥＡ７１１７０）；科 研院所社会公益研究专项（２００４ＤＩＩ挖Ｊ０６２） 【通讯作者】 。黄璐琦，Ｔｅｌ：（０１０）６４０１４４１１－２９５５，Ｅ－ｍａｉｌ：ｈｕａｎ一 ０Ｉｌｑｉ＠２６３．ｎｅｔ
万方数据
栀子苷样品购自安徽毫州亚强天然产物制品 厂，经ＨＰＬＣ检测栀子苷含量为９８．５４％。
赖氏法丙氨酸氨基转移酶（ＡＬＴ）试剂盒，批号 ０５０３２３；赖氏法天门冬氨酸氨基转移酶（Ａ．ＳＴ）试剂 盒，批号０５０１１３；化学比色法总胆红素（１’ＢＩＩＪ）试剂 盒，批号０４１２０３。以上试剂盒均是北京北化康泰临 床试剂有限公司产品。 １．３仪器ｚＳ一３型半自动生化分析仪（北京中生 生物工程高技术公司）。 １．４方法将大鼠按体重随机分成７组，雌雄各 半。空白对照组，栀子水提物３．０８ ｇ·ｋｇ。１组（相当 于生药９ ｇ·ｋｇ。１），１．５４ ｇ·ｋｇ。组，醇提物１．６２ ｇ· ｋｇ－１组（相当于生药９ ｇ·ｋｇ．１），０．８１ ｇ·ｋｇ一组，栀子 苷０．２８ ｇ·ｋｇ。组，０．１４ ｇ·ｋｇ一组。按照以上给药剂 量，连续灌胃给药３ ｄ，第４天股动脉采血，分离血清 用于生化指标检测，按照试剂盒说明书，运用半自动
［１］郑若玄，陈逸涛，戴庄国汾，等．去羟栀子甙对大鼠急性黄疸 的防治作用．中国药理学报，１９８６，７：６９．
［２］张德权，吕飞杰，台建祥．等．栀子黄色素对四氯化碳肝损伤 小鼠的影响．营养学报，２００２，２４（３）：２６９．
Ｅ３Ｊ孙旭群。赵新民，杨旭。栀子苷利胆作用实验研究．安徽中 医学院学报，２００４，２３（５）：３３．
ｔｈｏｓｅ ｏｆｔｈｅ ｂｌａｎｋ ｇｒｏｕｐ（Ｐ＜０．０５，Ｐ＜０．００１．
Ｔｈｅ ｌｉｖｅｒ ｃｅｌｌｓ ｗｅｒｅ ｏｂｖｉｏｕｓｌｙ ｓｗｅｌｌ，ｎｅｃｒｏｔｉｃ ａｎｄ ｃ１１ａ【ｌｌ罢刚ｗｉｔｈ ｉｎｆｌａｍｍａｔｏｒｙ ｉｎｆｉｌｔｒａｔｅ．ｏ咖ｄ－ｌ嘲ｎ：Ａｑｕｅｏｕｓ ｅｘｔｒａｃｔ，ａｌｃｏｈｏｈｃ ｅｘｔｒａｃｔ ａｎｄ
［５］Ａｋａｏ Ｔ，Ｋｏｂａｓｈｉ Ｋ，Ａｂｕｍｄａ Ｍ．ＥＩｌｚ孵ｌｉｃ ｓｔｕｄｉｅｓ ｏｎ ｔｈｅ ａｎｉｍａｌ ａｎｄ
ｉｎｔｅｓｔｉｎａｌ ｂａｃｔｅｒｉａｌ ｍｅｔａｂｏｌｉｓｍ ０ｆ群ｍｉｐｏ画曲．Ｂｉｄ Ｐｈａｒｍ Ｂｕｌｌ，１９９４， １７（１２）：１５７３．
Ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌ ｓｔｕｄｉｅｓ ｏｎ ｈｅｌｍｔｏｔｏｘｉｃｉｔｙ ｏｆ ｒａｔｓ ｉｎｄｕｃｅｄ ｂｙ Ｆｒｕｃｔｕｓ Ｇａｒｄｅｎｉａｅ
ｌＡｌ谴ｒｎｃｔ］Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ：Ｔｏ ｓｔｕｄｙ ｔｈｅ ｈｅｐａｔｏｔｏｘｉｃｉｔｙ ｅｆｆｅｃｔｓ ｉｎ ｒａｔｓ ｗｉｔｈ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ ｅｘｔｒａｃｔ ｏｆ Ｆｍｃｔｕｓ Ｃ，ｍｄｅｎｉａｅ．Ｍｅｔｈｏｄ：Ｏｂｓｅｒｖｅ ｔｈｅ
ｃｈｌｈ＇ａ．ｇｅ ｏｆ ａｐｐｅａｒａｎｃｅ，ｂｅｈａｖｉｏｒ ａｎｄ ｗｅｉｇｈｔ ｏｆ ｒａｔｓ ｔｈｍｕ曲ｏｒａｌ ｇａｒａｇｅ ｄａｉｌｙ ｆｏｒ ３’ｄ．Ｗｅｉｇｈ ｔｈｅ Ｈｖｅｒ ａｎｄ ｃａｌｃｕｌａｔｅ ｔｈｅ ｌｉｖｅｒ ｉｎｄｅｘ．Ｄｅｔｅｃｔ ｔｈｅ ＡＩＪＴ。ＡＳＴ ａｎｄ ＴＢＩＬ．Ｏｂｓｅｒｖｅ ｔｈｅ ｌｉｖｅｒ ｔｉｓｓｕｅ ｂｙ ｏｐｔｉｃａｌ ｍｉｃｒｏｓｃｏｐｅ．Ｒｅｓｕｌｔ：Ｔｈｅ ｗｅｉｇｈｔ ａｎｄ ｉｎｄｅｘ ｏｆ ｌｉｖｅｒ ｗｅｒｅ ｉｎｃｒｅａｓｅｄ ｂｙ ３．０８ ｇ‘ｋｇ。１