细粒棘球绦虫Eg95疫苗的研制现状

合集下载

细粒棘球绦虫感染犬及egm9蛋白免疫犬引起免疫应答及研究

细粒棘球绦虫感染犬及EgM9蛋白免疫犬引起的免疫应答研究摘要目前，国内外对宿主抗细粒棘球绦虫免疫的研究主要集中在宿主体内的免疫保护、免疫逃避与免疫损伤机制。

有很多关于细粒棘球绦虫病的中间宿主的免疫抗原Eg95的研究报道，但对终末宿主犬的免疫保护抗原还在研究当中。

本研究通过免疫组织化学方法与分子生物学方法，探索宿主感染细粒棘球绦虫和EgM9蛋白免疫后，机体外周免疫系统、肠道的粘膜免疫系统产生免疫应答的情况，以期为临床研制相关疫苗提供实验依据。

本研究首先经pET-41b重组质粒转化的大肠埃希菌（BL-21）对EgM9蛋白进行诱导表达，通过SDS-PAGE对表达产物进行分析，证明所表达的确实为EgM9蛋白，再对其进行纯化，得到符合免疫抗原要求的EgM9重组目的蛋白。

将实验犬分为四组（Ⅰ组：EgM9蛋白免疫组；Ⅱ组：EgM9蛋白免疫后感染原头蚴组；Ⅲ组：直接感染原头蚴组；Ⅳ组：空白对照组），用纯化后的EgM9蛋白对Ⅰ组和Ⅱ组进行免疫试验，再分别对Ⅱ组和Ⅲ组人工感染原头蚴。

将实验犬剖检后进行荷虫数计算，结果表明用EgM9蛋白免疫犬后，可以使犬取得一定的免疫保护效果。

采集实验犬的肠系膜淋巴结和小肠，依据免疫酶组织化学和免疫荧光组织化学原理，运用直接法和抗原~抗体~抗体标记物法对其进行检测。

直接法结果表明Ⅰ组、Ⅱ组和Ⅲ组犬的肠系膜淋巴结和小肠上存在IgG抗体，反应都呈阳性；抗原~抗体~抗体标记物法结果表明Ⅰ组、Ⅱ组表现阳性，而Ⅲ组呈阴性，荧光显微镜下有明显的荧光位点，说明该方法可以对免疫犬的肠系膜淋巴结和小肠上的IgG进行定位检测。

通过Real-Time PCR对上述实验犬的肠系膜淋巴结和小肠组织中的三种细胞因子（IL-4、TGF-β和INF-γ）检测，表明I组和Ⅲ组实验犬的肠系膜淋巴结和小肠中IL-4与INF-γ均有明显变化，IL-4的数值远高于INF-γ，而在II组中，IL-4的数值虽然也高于INF-γ，但IL-4与INF-γ的数值同时也高于其他两组。

细粒棘球绦虫Eg95疫苗的研制现状

细粒棘球绦虫Eg95疫苗的研制现状李文桂【摘要】囊型棘球蚴病是一种严重危害人类健康的人兽共患寄生虫病,采用疫苗防治该病是当前研究的热点领域之一.Eg95是一种有效的疫苗候选分子,其疫苗种类有重组抗原、合成肽疫苗、DNA疫苗、重组酵母、重组牛痘病毒疫苗、重组BCG 疫苗、转基因苜蓿疫苗和重组双歧杆菌疫苗等.【期刊名称】《国外医学（医学地理分册）》【年(卷),期】2014(035)001【总页数】8页(P1-8)【关键词】细粒棘球绦虫;Eg95;疫苗【作者】李文桂【作者单位】重庆医科大学附属第一医院传染病寄生虫病研究所,重庆,400016【正文语种】中文【中图分类】R383.3+;R39.11囊型棘球蚴病(cystic echinococcosis，CE)是由细粒棘球绦虫(echinococcus granulosus，Eg)的续绦期幼虫寄生在人体肝、肺等脏器引起的一种严重危害人类健康的人畜共患寄生虫病，是国家卫生部规划防治的重点寄生虫病之一。

本病呈全球性分布，主要流行于牧区和半牧区。

我国主要流行或散发在西北、华北、东北以及西南广大农牧区的23个省、市和自治区，以新疆、甘肃、宁夏、青海、西藏、四川西北部和陕西多见。

据近年普查，人群患病率在0.6%～4.5%之间，绵羊的细粒棘球蚴感染率在3.3%～90%之间，家犬的成虫感染率在7%～71%之间，CE已成为我国乃至世界的一种危害严重的寄生虫病。

现已证实国内有31个省市区存在包虫病感染病例，有100多万包虫病现症患者，受威胁人口达几千万，包虫病畜超过4 000万头，每年新发病畜达800多万头，年经济损失超过10亿元。

该病已成为西部牧区群众因病致贫、因病返贫的主要原因。

随着现代社会的发展，人口流动的增加，宠物犬和经济动物狐狸的养殖数量日益增多，导致包虫病从我国西北部向东南部、由畜牧地区向农业地区蔓延扩散。

因此，CE的防治已成为目前研究的热点领域。

健康教育是预防CE的根本措施，对于已发CE病例的首选治疗方法仍是外科手术，但对人体损伤较大，且手术后复发率较高，可达7%～30.1%；对于早期小棘球蚴或难做手术的病例可采用化疗药物或中药进行治疗。

兽医寄生虫疫苗研究现状与展望

.
Echinococcus
Echinococcus granulosus
抗细粒棘球蚴基因工程疫苗 EG95 (Lightowlers 1996)
六钩蚴抗原，天然抗原分子量为24.5kDa cDNA表达产物为153个氨基酸分子量16.5kDa
表达系统E. coli
产物为谷胱甘肽转硫酶(GST)融合蛋白
Babesia canis
体外培养上清中抗原犬减低发病
.
Babesia
Babesia bovis / bigemina
传代致弱苗牛本地工厂化生产应用
.Hale Waihona Puke TheileriaTheileria annulata
体外培养致弱牛本地工厂化生产应用
.
Theileria
Theileria parva
非致弱苗牛本地工厂化生产应用
.
Giardia
Giardia duodenalis (Giardia felis)
GiardiaVax Fort Dodge
速殖子犬、猫减少包囊排出、预防临床症状美国商品化
.
Taenia
Taenia ovis 基因工程疫苗
45W-GST(45W)（Johnson， 1989 ）绵羊带绦虫的六钩蚴抗原
兽医寄生虫疫苗研究现状与展望
南京农业大学动物医学院院长李祥瑞教授
.
疫苗研究必要性
抗药虫株药物研制费用升高公共卫生和食品安全生物学技术高度发展
.
已商品化的兽医寄生虫疫苗
寄生虫
Eimeria spp. Eimeria spp. Eimeria maxima Toxoplasma gondii Neospora caninum Babesia canis Babesia bovis / bigemina Theileria parva Theileria annulata Giardia duodenalis Taenia ovis Dictyocaulus vivparus Boophilus microplus

棘球蚴病疫苗研究进展

被卫计委列人 “ 我国西部重大寄生虫病防治规划 ” 中。
段（原头蚴、六钩蚴和成虫）的表达和基因序列的差异，分别从３个发育阶段中成功克隆得到Ｅｇ９５基因，测序和序列分析结果显示，从３个发育阶段克隆的
接种，保护率为９０％，再接种一次后，保护率增加
至９９％。ＦｒａｉｚｅＭ－１用小鼠验证了细粒棘球蚴幼虫期表达的２种抗原ＥｇＡ３１和ＥｇＴｒｐ的免疫原性，ＥｇＡ３１、
ＥｇＴｒｐ或ＥｇＡ３１一ＥｇＴｒｐ能提高ＩｇＧ和ＩｇＡ的抗体滴
６５
１２／２０１６
棘球蚴病疫苗研究进展
朵红
（青海省畜牧兽医科学院，西宁，８１００１６）
摘要：棘球蚴病是一种重要的人兽共患病，严重阻碍着畜牧业经济的发展和人民的身体健康，已成为我国西部地
区重要的公共卫生问题。长期以来科研工作者在棘球蚴病疫苗研究方面做了大量的工作，已有商品化的疫苗应用于畜牧业生产中。本文对棘球蚴病的基因工程疫苗、核酸疫苗、多肽疫苗的研究现状和进展进行了综述。关键词：棘球蚴；疫苗；研究进展中图分类号：￥８５２．７３４文献标识码：Ｂ文章编号：１００３— ７９５０（２０１６）０６— ００６５—０３
编码序列基因，克隆到原核表达载体ｐＥＴ一２８ａ，构建了Ｅｇ９５基因的原核表达质粒，将重组蛋白加弗氏佐

羔羊包虫病(棘球蚴)疫苗抗体检测效果分析

《西藏科技》2017年12期（总第297期）羔羊包虫病（棘球蚴）疫苗抗体检测效果分析巴桑德吉格桑卓玛德吉玉珍卓玛央吉格桑央宗白吉刘玉芳拉珍拉巴卓玛拉巴次仁达珍德吉边巴央拉扎西卓玛（西藏动物疫病预防控制中心，西藏拉萨850000）摘要：对已经免疫棘球蚴（EG95）疫苗的羔羊血清4299份，进行抗体检测，全区22个试点县羔羊免疫抗体合格数为3627份，平均合格率达84.37%。

从检测结果看，羊棘球蚴（EG95）ELISA疫苗对羔羊感染细粒棘球蚴（包虫）有一定保护力，总体抗体水平较高，有一定的抵抗力。

关键词：羔羊包虫病疫苗检测效果西藏是中国重要的农牧业地区，由于藏区牧民的生活习性（如生吃牛羊肉）和家畜的养殖习惯（如牛、羊、犬、马、猪等多为放养），导致动物包虫病流行较广。

有资料表明，青海、西藏、四川西部等地是肝包虫病的高发区域，受威胁人口约为6000万左右。

而犬是包虫病的终末宿主，通过排泄粪便将虫卵排到环境中，从而感染人类和家畜。

放养家畜的粪便携带的虫卵进一步放大并扩大传播，使大面积的水域受到污染，反过来又对人类和家畜健康造成极大的威胁。

目前中国尚未对犬（终末宿主）实施棘球蚴病疫苗的接种。

但有部分学者开始对中间宿主（羊）实施棘球蚴病基因亚单位疫苗免疫，对羊只进行采血实施病原学监测，阳性率较高的地区可进行疫苗免疫。

国内外已报道的细粒棘球绦虫疫苗仅有基因工程疫苗和基因工程亚单位疫苗，且只针对家畜及仅限于EgA31、EG95毒力因子研究。

尽管血液中各免疫细胞因子显示了较好的免疫应答，但是，其疫苗在预防与治疗方面效果不尽如意；再者，此类疫苗的使用方法为肌肉注射，无论对家畜还是对珍稀野生动物，在治疗及预防上此种使用方式极其不便，易给动物带来较大应激反应。

因此，开发针对细粒棘球绦虫生理、致病特性，且使用方便、效果较好的口服疫苗是今后的发展方向。

［1］1材料与方法1.1材料1.1.1羔羊免疫。

对新生羔羊（8周龄）进行包虫病基因工程单位疫苗（Eg95）的免疫，采用颈部注射的方式进行免疫，一个月后进行二次（12周龄）加强免疫，然后是每年再加强免疫一次。

细粒棘球绦虫重组Bb-Eg95-EgA31疫苗诱导小鼠脾细胞亚群变化的研究

（ｎｔｕｅｆＩｆｃｉｕｎａａｉｃＤｉａｅ，ｅｉｔｆｌｔｄＨｏｐｔｌＩｓｔｔｏｎｅｔｓｄＰｒｓｉｓｓｓｔｒｉｏａｔｅｈＦｓＡｆｉａｅｓｉｉａ
ｏｏｇｉｇＭｅｃｌＵｎｖｒｉｙ，ｏｇｉｇ４０１，ｉａｆＣｈｎｑｎｄｉａｉｅｓｔＣｈｎｑｎ００６Ｃｈｎ）
Ｂｂ－＿Ｅｇ９－５－ＥｇＡ３１ｖｃｉｅａａｎｓｈｉｏｏｃｓｇｒｕｌｓａｃｎｇｉｔＥｃｎｃｃｕａｎｏｕｓ
ＺＨＯＵ — ｉＢｉｙｎｇ，ＣＨＥＮ — ａｇ，ｅ — ｉＹＡＮＧｅＹａｔｎＬＩＷｎｇｕ，Ｍｉ
２１，２（）００６３
ＣｈｉｓｏｕｎａｆＺｏｎｏｅｎｅｅＪｒｌｏｏｓｓ
中国人兽共患病学报
２１１
文章编号：０２—２９（０１０ —０１ —０１０６４２０１３２１４
细粒棘球绦虫重组Ｂ — ９一ｇ３ｂＥｇ５Ｅ１疫苗诱导Ａ小鼠脾细胞亚群变化的研究＊
ＡＢＳＴＲＡＣＴ：ｎｖｓｉａｔｈｅｗｅｇｈｔｒｄｕｔｏｎｏｄａｉｙｓｎｄｌｖｅｆｓｌｎｙｅｓｂｓｔｎｍｉｅｉｍｕｚｄｗｉｈｒ — Ｔｏｉｅｔｇｅｔｉｅｃｉｆｈｙｔｄｃｔａｅｌｏｐｅｏｃｔｕｅｓｉｃｍｎｉｅｔｅ
ｐｏｏｃｌｃｓＡＬｃｍｉｅｗｅｅｉｒｔｓｏｅｅ，ＢＢ／ｃｒｍｍｕｉｅｔｈａｃｎｕｃｔｎｏｓｙ，ｉｔａｓｕａｌｎｒｎｓｌｒｏａｌ．Ｔｈｎｎｚｄｗｉｈｔｅｖｃｉｅｓｂｕａｅｕｌｎｒｍｕｃｌｒｙ，ｉｔａａａｌｏｒｌｙｙｅ

棘球蚴(包虫)病疫苗研究进展

ResearchProgram (９７３Program)ofChina(No．２０１５CB１５０３００),andtheGansuProvincialKeyProjectofScientificandTechＧ
nicalSupportingProjects (No．１２０３NKDA０３９)
Correspondingauthor:Jia WanＧzhong,Email:jiawanzhong 国家重点研发计划(No．２０１７YFD０５０１３０１)、国家重点基础研究发展计划(９７３计划 )(No．２０１５CB１５０３００)和甘肃省科技重大专项 (No．＠caas．cn
２０１９,３５ (１)
中国人兽共患病学报
ChineseJournalofZoonoses
DOI:１０．３９６９/ji．ssn．１００２－２６９４．２０１８．００．２２３
棘球蚴(包虫)病疫苗研究进展
５９
�� 综述 ��
朱国强１,闫鸿斌１ ,李立１,贾万忠１,２
Abstract:EchinococcosisisakindofageＧolddiseaseinhumansandanimalscausedbythelarvalstageofthegenusEchinoＧ coccus,ofwhichcysticechinococcosisandalverolarechinococcosisareseriouslyhinderingthedevelopmentofanimalhusbandry andhumanhealth,andhavecausedhugeeconomiclosses．TheeffectivepreventionofechinococcosisdependsonantiＧechinococＧ cosisdrugs,vaccinesandimplementationofothercomprehensivemeasures．AlthoughsomeantiＧechinococcosisdrugshavebeen appliedasanimportantmeansofdiseasepreventionandcontrol,chemicaldrugsmaycausedrugresistance,drugresidue,enviＧ ronmentalpollutionandotherproblems．However,vaccineshavetheadvantagesofsafety,noresidueorwithdrawalperiod, andadherencetothepolicyofpreventionfirstbeingworthapoundofcure．Therefore,theyarebeingstudiedandused more and morewidelynowadays,andgreatdevelopmentandbreakthroughhasbeenmade．Inthispaper,advancesinresearchondifＧ ferenttypesofvaccinesagainstechinococcosiswerereviewedwiththeaimofmoredeepinsightsandvisionsinthedevelopment ofvaccinesagainstechinococcosis．

基于细粒棘球蚴病不同时期诊断抗原的研究进展

Asian Case Reports in Veterinary Medicine 亚洲兽医病例研究, 2020, 9(3), 25-31Published Online July 2020 in Hans. /journal/acrpvmhttps:///10.12677/acrpvm.2020.93004Research Progress of Diagnostic AntigensBased on Echinococcosis granulosusat Different StagesYingying Ding1, Yanhu Wang1, Tianxiang Chen2, Yipeng Wu2, Mingyi Du1, Zhichuan Ma1, Kejie Yu1, Xiaoyu Sang1, Ying Feng1, Ran Chen1, Na Yang1*1Shenyang Agriculture University, Shenyang Liaoning2Science and Technology and Agricultural and Animal Husbandry Bureau in Zoige County in Sichuan Province, Aba Tibetan and Qiang Autonomous Prefecture, SichuanReceived: May 26th, 2020; accepted: Jun. 9th, 2020; published: Jun. 16th, 2020AbstractCystic echinoccosis is an important zoonotic parasitic disease of humans and animals caused by Echinococcus granulosus. At present, there is no effective method for the disease, so effective di-agnostic methods are particularly important for the prevention and control of cystic echinococcosis.According to the growth stage of Echinococcus granulosus in the intermediate host, the diagnostic antigens can be divided into: oncosphere stage antigen, protoscoleces stage antigen and cystic fluid stage antigen. This article introduces the latest advances in diagnostic antigens to provide a ref-erence for the study of antigens used in immunodiagnosis of cystic echinococcosis.KeywordsEchinococcus granulosus, Diagnostic Antigen, Recombinant Antigen基于细粒棘球蚴病不同时期诊断抗原的研究进展丁莹莹1，王彦虎1，陈天祥2，吴毅鹏2，杜铭怡1，马知川1，于克杰1，桑晓宇1，冯颖1，陈冉1，杨娜1*1沈阳农业大学，辽宁沈阳2四川省若尔盖县科学技术和农业畜牧局，四川阿坝藏族羌族自治州*通讯作者。

1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。

ＫＥＹＷＯＲＤＳ：Ｅｃｈｉｎｏｃｏｃｃｕｓｇｒａｎｕｌｏｓｕｓ；Ｅｇ９５；ｖａｃｃｉｎｅ
囊型棘球蚴病（ｃｙｓｔｉｃｅｃｈｉｎｏｃｏｃｃｏｓｉｓ，ＣＥ）是由
细粒棘球绦虫（ｅｃｈｉｎｏｃｏｃｃｕｓｇｒａｎｕｌｏｓｕｓ，Ｅｇ）的续绦
ＡＢＳＴＲＡＣＴ：Ｃｙｓｔｉｃｅｃｈｉｎｏｃｏｃｃｏｓｉｓｉｓｏｎｅｔｙｐｅｏｆｚｏｏｎｏｓｉｓｓｅｒｉｏｕｓｌｙｅｎｄａｎｇｅｒｉｎｇｈｕｍａｎｈｅａｌｔｈ．Ｉｔｒｅｃｅｎｔｌｙｈａｓ
北、东北以及西南广大农牧区的２３个省、市和自治
牧地区向农业地区蔓延扩散。因此，ＣＥ的防治已成
Ｅｇ９５是一种有效的疫苗候选分子，其疫苗种类有重组抗原、合成肽疫苗、ＤＮＡ疫苗、重组酵母、重组牛痘病毒疫苗、重
组ＢＣＧ疫苗、转基因苜蓿疫苗和重组双歧杆菌疫苗等。
关键词：细粒棘球绦虫；Ｅｇ９５；疫苗
。１ ‘
◇ 专家论坛◇
细粒棘
（重庆医科大学附属第一医院传染病寄生虫病研究所，重庆４０００１６）
摘要：囊型棘球蚴病是一种严重危害人类健康的人兽共患寄生虫病，采用疫苗防治该病是当前研究的热点领域之一。
中图分类号：Ｒ３８３．３；Ｒ３９．１１
文献标志码：Ａ
文章编号：１００１ — ８８８３（２０１４）０１ — ０００１ — ０８
ＴｈｅｒｅｓｅａｒｃｈｓｔａｔｕｓｏｆＥｇ９５ｖａｃｃｉｎｅｏｆＥｃｈｉｎｏｃｏｃｃｕｓｇｒａｎｕｌｏｓｕｓ
ＬＩＷｅｎ — ｇｕｉ
（ＩｎｓｔｉｔｕｔｅｏｆＩｎｆｅｃｔｉｏｕｓａｎｄＰａｒａｓｉｔｉｃＤｉｓｅａｓｅｓ，ｔｈｅＦｉｒｓｔＡｆｆｉｌｉａｔｅｄＨｏｓｐｉｔａｌ，ＣｈｏｎｇｑｉｎｇＭｅｄｉｃａｌＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｃｈｏｎｇｑｉｎｇ４０００１６，Ｃｈｉｎａ）
第３５卷第１期
２０１４年３月
国外医学医学地理分册
Ｆ０ＲＥＩＧＮＭＥＤＩＣＡＬＳＣＩＥＮＣＥＳＥＣＴ１０ＮｏＦＭＥＤＧＥｏＧＲＡＰＨＹ
ＶＯ１．３５ＮＯ．１Ｍａｒ．２０１４
ｂｅｃｏｍｅｔｈｅｈｉｇｈｌｉｇｈｔｔｏｃｏｎｔｒｏｌｔｈｉｓｄｉｓｅａｓｅｂｙｔｈｅｕｓｅｏｆｖａｃｃｉｎｅ．Ｅｇ９５ｉｓａｎｅｆｆｅｃｔｉｖｅｃａｎｄｉｄａｔｅｍｏｌｅｃｕｌｅｏｆｖａｃｃｉｎｅ，ｉｎｃｌｕｄｉｎｇｒｅｃｏｍｂｉｎａｎｔｐｒｏｔｅｉｎ，ｓｙｎｔｈｅｔｉｃｐｅｐｔｉｄｅｓ，ＤＮＡｖａｃｃｉｎｅ，ｒｅｃｏｍｂｉｎａｎｔｙｅａｓｔ，ｒｅｃｏｍｂｉｎａｎｔＭＶＡｖａｃｃｉｎｅ，ｒｅｃｏｍｂｉｎａｎｔＢＣＧｖａｃｃｉｎｅ，ｔｒａｎｓｇｅｎｉｃａｌｆａｌｌａａｎｄｒｅｃｏｍｂｉｎａｎｔＢｂｖａｃｃｉｎｅ．ＴｈｅｐａｐｅｒｒｅｖｉｅｗｓｔｈｅｓｔａｔｕｓｉｎｔｈｅｒｅｓｅａｒｃｈｏｆＥｇ９５ｖａｃｃｉｎｅｓｏｆＥｃｈｉｎｏｃｏｃｃｕｓｇｒａｎｕｌｏｓｕｓ．
多万包虫病现症患者，受威胁人口达几千万，包虫病
畜超过４０００万头，每年新发病畜达８００多万头，年经济损失超过１０亿元。该病已成为西部牧区群众因病致贫、因病返贫的主要原因。随着现代社会的发展，人口流动的增加，宠物犬和经济动物狐狸的养殖数量
日益增多，导致包虫病从我国西北部向东南部、由畜
期幼虫寄生在人体肝、肺等脏器引起的一种严重危害人类健康的人畜共患寄生虫病，是国家卫生部规划防治的重点寄生虫病之一。本病呈全球性分布，主要流行于牧区和半牧区。我国主要流行或散发在西北、华