动物生理学实验指导书

生理学实验指导

目录

实验一神经生理实验

1.1 蛙坐骨神经腓肠肌标本制备

1.2 神经干动作电位引导 1.3 神经传导速度的测定实验二血液生理实验

2.1 红细胞计数 2.2 红细胞渗透脆性试验实验三循环生理实验之蛙心起搏点及心肌特性

3.1 蛙心起搏点

3.2 心肌特性

实验四循环生理实验之蛙心灌流

4.1 蛙心灌流

实验五循环生理实验之动脉血压的直接测定及其影响因素

5.1 动脉血压的直接测定及其影响因素

实验六消化生理实验

7.1 胃肠运动的直接观察

7.2 小肠吸收和渗透压的关系

7.3 离体肠段运动描记

实验七泌尿生理实验

8.1 尿的分泌及其影响与调节

实验八泌尿、循环、呼吸生理综合实验（综合计划 07级）实验九肌肉生理实验

9.1 阈刺激、阈上刺激与最大刺激

9.2 肌肉的单收缩

9.3 肌肉的强直收缩和收缩总和

实验一神经生理实验

年月日星期

1.1 蛙坐骨神经腓肠肌标本制备

目的和原理：蛙类的一些基本生命活动和生理功能与温血动物相似，它的离体组织所需要的生活条件又比较简单，易于控制和掌握，因此在实验中常用蟾蜍或蛙坐骨神经腓肠肌标本来研究神经肌肉的一般生理，如：神经干动作电位引导、神经传导速度测定、肌肉收缩的机能等。

实验对象：蟾蜍或蛙

实验器材和药品：中式剪子，眼科剪，眼科镊，蛙板，玻璃分针（玻璃勾），探针，锌铜弓，培养皿，大头针，棉花，线，任氏液，纱布等。

实验方法：

1、破坏脑脊髓取一只蟾蜍或蛙，用自来水冲洗干净。保定好，用探针从枕骨大孔垂直刺入，然后向前刺入颅腔，左右搅动捣毁脑组织，再向后刺入脊椎管捣毁脊髓。此时蟾蜍四肢松软，呼吸消失，表示脑脊髓破坏完全。

2、剪除躯干上部及内脏，提起蟾蜍的背部，在骶髂关节水平以上0.5-1.0厘米处剪断脊柱（见图），用左手捏住蟾蜍骶髂关节以下的脊柱，使蟾蜍头与内脏自然下垂，右手持中式剪刀，沿脊柱两侧剪除皮肤肌肉和一切内脏（注意勿损伤坐骨神经），仅留骶尾联合以下的后肢、骶骨、脊柱及由它发出的坐骨神经。

3、剥皮剪去泄殖腔外口的皮肤后，用镊子夹住脊柱断端的皮肤边缘，剥掉躯干及后肢的全部皮肤，然后将已剥掉皮肤的后肢，背位放在预先用任氏液浸湿过的清洁蛙板伤。

4、分离两腿用玻璃分针分离和挑起坐骨神经丛，剪断神经下的骶骨及骨盆联合前缘的软

组织，留下一块椎骨。沿脊髓正中线剪开脊椎，将剪开的脊椎骨连同神经分别放在左右大腿的肌肉上，此时须注意不得伤及两侧坐骨神经，最后在骨盆联合部猛然剪开两腿，将两条腿浸于盛有任氏液的培养皿中。

5、分离坐骨神经取一只腿，背面向上放在蛙板上，用玻璃分针沿股二头肌及半膜肌所形成的肌沟，剥离肌膜，露出位于肌沟深处的坐骨神经，，然后沿神经走向仔细分离坐骨神经。

6、完成坐骨神经小腿标本在膝关节上方将股骨周围所有的大腿肌肉完全分离，从膝关节附近剪掉肌肉，露出股骨后，在膝关节以上1厘米处剪断股骨，即成为坐骨神经小腿标本。

7、完成坐骨神经腓肠肌标本在跟腱下穿线结扎，贴股面剪下跟腱，使腓肠肌与周围组织脱离。在膝关节下将其他组织完全剪断，即成为有一段股骨的坐骨神经腓肠肌标本（见图）。

8、用锌铜弓检查标本用经任氏液润湿的锌铜弓迅速接触坐骨神经，如果腓肠肌发生明显

而灵敏的收缩，则表示标本的兴奋性良好，即可将标本放在盛有任氏液的培养皿中，已备实验之用。

注意事项：

1、在剥离标本时，不能用金属器械触碰神经干。

2、分离时，一定要把神经周围的结缔组织剥离干净。

3、不能使皮肤分泌物和血液等玷污神经和肌肉，也不能用水冲洗，以免影响组织的兴奋性，要随时用任氏液湿润神经和肌肉，防止干燥。

4、从第4步起每步均用锌铜弓检察标本的兴奋性，如兴奋性太低或丧失，表明神经的结构或机能受到损伤，则应放弃此标本，重新制作。

实验结果分析：

1、任氏液的生理作用是什么？

2、为什么不能用金属物品触碰神经干？

1.2 神经干动作电位引导

目的和原理：了解双相和单相动作电位的形成和波形，并熟悉PcLab生物信号采集处理系统的使用方法。双相动作电位：将两个记录电极置于神经干的正常部位时，描记出的曲线

是双相的，叫做双相动作电位；若将一记录电极置于正常部位，另一电极置于损伤处，则记录出的曲线是单相的，叫做单相动作电位：伪迹：刺激电流沿神经干表面的电解质液传导到记录电极下而被引导、放大出来的电信号，几乎与刺激信号同时出现。

实验对象：蟾蜍或蛙

实验器材和药品：示波器，前置放大器，电子刺激器，神经屏蔽盒，蛙类手术器械，滤纸片，棉球，任氏液。

实验方法：

1、制备蟾蜍或蛙坐骨神经标本与制备坐骨神经腓肠肌标本方法相同，只是将坐骨神经分离至趾部，然后两端结扎，将坐骨神经从机体上完全分离，不带任何组织。

2、连接PcLab生物信号采集处理系统刺激器使各仪器同步。

3、将标本放入湿润的屏蔽盒中，调节各仪器的参数至屏幕上明显地显示出伪迹和双相动作电位的波形。

注意事项：

1、神经的两端不可碰在屏蔽盒壁上，也不要把神经两端折叠在电极上，以免影响动作电位的大小及波形。

2、刺激的强度要由弱到强，逐步增加至适宜强度，以免过强刺激伤害神经标本。

3、检查刺激电极与引导电极之间接地是否良好，并采用各种方法减少伪迹。

4、在操作过程中要防止神经标本因蒸发而干燥。

实验结果分析：

实验中，在一定范围内，神经干动作电位的幅度随刺激强度的改变而改变，这是否与单根神经纤维动作电位的“全或无”定律相矛盾？为什么？