肿瘤免疫治疗的新方法CAR-T 细胞治疗
基因工程技术在免疫治疗中的临床应用
基因工程技术在免疫治疗中的临床应用引言：随着科技的不断发展，基因工程技术在医学领域的应用正在改变人们的生活。
免疫治疗作为一种创新的癌症治疗方法，通过调整患者的自身免疫系统来抗击肿瘤。
而基因工程技术为免疫治疗提供了新的方式和手段。
本文将着重讨论基因工程技术在免疫治疗中的临床应用。
一、CAR-T细胞治疗CAR-T细胞治疗是基因工程技术在免疫治疗中应用最广泛的一种方法。
该技术通过从患者提取的免疫细胞中提取T细胞，然后将其转基因，使其携带能够识别肿瘤细胞的Chimeric Antigen Receptor（CAR）基因。
经过增殖和培养后，这些经过改造的T细胞被重新注入患者的体内。
CAR-T细胞治疗的优势在于其能够靶向肿瘤细胞，并通过激活患者自身的免疫系统来杀灭肿瘤。
临床试验表明，CAR-T细胞治疗在治疗B细胞恶性肿瘤，如非霍奇金淋巴瘤和急性淋巴细胞白血病等方面取得了显著的成功。
这种治疗方法被认为是一种具有革命性意义的癌症治疗方法。
二、CRISPR基因编辑技术CRISPR基因编辑技术是基因工程技术的重要分支，其被广泛应用于免疫治疗中。
该技术利用CRISPR-Cas9系统，通过靶向编辑细胞的基因组DNA，实现对疾病相关基因的修饰或去除。
在免疫治疗中，CRISPR基因编辑技术被用于增强免疫细胞的功能或改变其特性，以提高其对肿瘤的攻击能力。
例如，利用CRISPR基因编辑技术可以设计和制造更加高效的CAR-T细胞。
通过删除或修饰抑制T细胞活性的基因，可以提高CAR-T细胞对肿瘤的识别和攻击能力。
此外，CRISPR还可以用于修改免疫细胞的表面受体，增强细胞对抗体药物的效应，进一步提高治疗效果。
三、基因疫苗基因疫苗是利用基因工程技术激活人体免疫系统对特定疾病产生免疫应答的一种疗法。
通过将携带特定抗原编码基因的DNA或RNA导入人体细胞，触发宿主免疫系统对抗原的免疫反应。
基因疫苗可以用于预防疾病，也可以作为免疫治疗的手段，增强患者免疫反应来对抗疾病。
car t免疫疗法原理
car t免疫疗法原理CAR-T免疫疗法是一种新型的免疫治疗技术，它利用改造的CAR（chimeric antigen receptor）T细胞来识别和攻击肿瘤细胞。
CAR-T细胞疗法的基本原理是将病人的自体T细胞提取出来，并通过基因工程技术改造，使其表达具有特异性的CAR。
CAR是由抗原识别结构域和信号传导结构域组成的融合受体，抗原识别结构域可以与肿瘤细胞特异性抗原结合，信号传导结构域可以激活T细胞杀伤功能。
首先，病人的T细胞会被提取出来，并通过特定的生物技术手段进行基因改造，使其携带CAR基因。
然后，经过一系列体外培养和扩增的步骤，大量改造后的CAR-T细胞会被重新注入到患者体内。
一旦重新注入到患者体内，CAR-T细胞会识别并结合到肿瘤细胞表面的特异性抗原上。
这一结合会激活CAR-T细胞内的信号传导通路，进而激发CAR-T细胞的杀伤功能。
CAR-T细胞会释放出细胞毒性物质，如穿孔素和细胞因子，进而导致肿瘤细胞的凋亡和死亡。
CAR-T免疫疗法的优势在于其特异性和高效性。
CAR-T细胞通过识别特异性抗原与肿瘤细胞发生特异性结合，因此可以避免对正常细胞的损伤。
此外，CAR-T细胞具有极高的杀伤能力，即使在低浓度下也能有效杀伤肿瘤细胞。
然而，CAR-T免疫疗法也存在一些挑战和风险。
一方面，由于CAR-T细胞具有强大的杀伤能力，可能会导致严重的不良反应，如细胞因子释放综合征和神经毒性反应。
另一方面，CAR-T疗法的制备过程需要耗费大量的时间和资源，并且成本较高。
尽管存在一些挑战，CAR-T免疫疗法仍然被认为是一种有前景的肿瘤治疗技术。
随着科学技术的不断进步和临床实践的深入，CAR-T免疫疗法有望在未来为患者带来更好的治疗效果。
car-t 基因改造 方法
car-t 基因改造方法
CAR-T细胞疗法是一种利用基因改造的方法来治疗癌症的新型
免疫疗法。
CAR-T细胞疗法的基本原理是利用患者自身的T细胞，
通过基因工程技术将其改造成具有靶向肿瘤细胞能力的CAR-T细胞，然后重新注入患者体内，使其能够识别并杀死癌细胞。
首先，CAR-T细胞疗法的基因改造方法涉及到从患者体内提取T
细胞，然后利用病毒载体或转座酶等工具将CAR基因导入T细胞中。
CAR基因是经过设计的嵌合抗原受体基因，包括了能够识别肿瘤特
异抗原的单链抗体结构域以及T细胞激活所需的信号传导域。
通过
基因改造，T细胞获得了识别和攻击肿瘤细胞的能力。
其次，CAR-T细胞疗法的基因改造方法需要在实验室中对T细
胞进行基因改造和扩增，确保足够数量和活性的CAR-T细胞可以重
新注入患者体内。
在这个过程中，需要严格控制基因改造的准确性
和CAR-T细胞的质量，以确保治疗的安全性和有效性。
另外，CAR-T细胞疗法的基因改造方法也需要考虑到不同肿瘤
类型和患者个体差异的因素，进行个性化的基因改造和治疗方案设计。
这包括了对肿瘤特异抗原的选择、CAR结构的优化以及对患者
免疫系统状态的评估等方面。
总的来说，CAR-T细胞疗法的基因改造方法是一个复杂而精细的过程，需要综合运用基因工程、细胞生物学、免疫学等多个学科的知识和技术。
通过精心设计和严格控制，CAR-T细胞疗法已经取得了在某些癌症治疗中的显著疗效，为癌症免疫治疗领域带来了新的希望。
CAR-T治疗
CAR-T治疗01、什么是CAR-T治疗？嵌合抗原受体（CAR）T细胞免疫疗法是通过整合后基因修饰的T细胞来抵抗肿瘤细胞的有效过继细胞治疗。
研究已证实其在B细胞急性淋巴细胞白血病 (B-ALL) 患者中的显著疗效，并被FDA认定为“突破性治疗”。
随后在CD 19-CAR-T治疗复发性/难治性B细胞非霍奇金淋巴瘤（B-NHL）的研究中也显示出了良好疗效。
目前全球有3款CAR-T产品获得FDA批准被用于血液瘤的治疗，已在多个国家开展实体瘤治疗临床研究。
02、它是怎样发挥作用的？CD19是一种在B细胞表面表达的B细胞受体相关蛋白。
由于其在恶性B细胞上均匀表达，且仅在B细胞谱系中表达，因此被认为是最佳的治疗靶点。
抗CD19CAR是一种重组分子，由三部分组成：源自抗CD19单克隆抗体的单链可变区（scFv)、跨膜区、T细胞受体（TCR）的信号转导区（CD3ζ）。
为了改善CAR-T细胞扩增能力，进一步增强杀伤力和精准度，CAR的结构也在逐渐完善中，目前进展到第四代CAR的探索阶段。
正常T细胞与抗原呈递细胞（APC）（如树突状细胞）相互作用，通过T细胞受体（TCR）和其他共刺激结构域被激活(a)。
TCR 介导的抗原识别依赖于主要组织相容性复合体(MHC)分子上的多肽。
然而，CAR-T可以通过抗原识别结构域识别靶抗原，并且不依赖于MHC(b)。
当CAR-T识别特异性抗原时，细胞通过细胞内信号转导结构域被激活，发挥靶细胞毒性。
(i) 通过白细胞单采采集患者的单核细胞(ii) T细胞被分离、激活和扩增(iii) 使用逆转录病毒或慢病毒载体将CAR基因转染至T细胞中(iv)细胞克隆扩增(v) 将新创的CAR-T细胞产品输注到已接受淋巴细胞耗竭化疗的患者体内03CAR-T治疗会带来哪些风险？一旦T细胞被激活，他们的细胞毒性可能会导致副作用：(i) 靶向肿瘤毒性：即使在CAR-T细胞通过其在肿瘤组织上表达的靶点特异性激活的最佳情况下也会导致毒性。
CAR_T细胞在肿瘤免疫治疗的研究进展和展望文献综述
CAR_T细胞在肿瘤免疫治疗的研究进展和展望文献综述CAR_T细胞（Chimeric Antigen Receptor T cells）是一种新型的免疫细胞治疗方法，其具有很高的疗效和广泛的适用性，已被广泛应用于肿瘤免疫治疗研究中。
本文将综述CAR_T细胞在肿瘤免疫治疗的研究进展和展望的相关文献。
首先，CAR_T细胞疗法的原理是通过基因工程将T细胞表面的抗原识别结构体（抗原受体）改造成具有高度亲和力的肿瘤特异性受体，以增强T细胞对肿瘤细胞的杀伤作用。
CAR_T细胞疗法的优势在于其能够针对特定抗原，避免了免疫耐受和免疫逃逸问题，并且具有可调节的体外扩增和持久性存活的特点。
近年来，已有多项研究报道了CAR_T细胞在肿瘤治疗中的成功应用。
例如，Yescarta是美国FDA批准上市的一种CD19靶向的CAR_T细胞疗法，已在治疗复发性或难治性B细胞淋巴瘤中显示出令人瞩目的疗效。
此外，针对其他肿瘤抗原的CAR_T细胞疗法也在临床试验中取得了初步的成功，如针对BCMA的CAR-T细胞治疗在多发性骨髓瘤中显示出显著的治疗效果。
然而，CAR_T细胞疗法目前还存在一些问题和挑战。
首先，由于CAR_T细胞的攻击不仅局限于肿瘤细胞，还包括正常细胞，因此可能会出现严重的副作用，如细胞因子释放综合征和神经毒性。
其次，CAR_T细胞治疗中一些病人可能会在短时间内复发，这可能与抗原丢失、免疫选择和肿瘤异质性等因素有关。
为了克服上述问题，研究者们正在努力寻找新的CAR设计和改进的治疗策略。
一方面，研究人员正在探索多个抗原的双重或多重靶向CAR-T细胞疗法，以增加治疗覆盖范围和避免抗原丢失的问题。
另一方面，通过引入自杀基因、抑制因子或合并放疗、化疗等传统治疗手段，可以增强CAR-T细胞的疗效和持久性。
综上所述，CAR_T细胞作为一种新型的肿瘤免疫治疗手段，已显示出令人瞩目的疗效和广阔的应用前景。
随着对CAR_T细胞疗法机制和治疗策略的深入研究，相信未来CAR_T细胞疗法将在临床应用中取得更大的突破，并为肿瘤患者带来更好的治疗效果。
癌症免疫疗法的研究进展与前景
癌症免疫疗法的研究进展与前景引言：癌症是一种威胁全球健康的重大疾病，而传统的放化疗方法在某些情况下存在效果不佳和副作用大的问题。
而近年来，免疫疗法作为一种新的治疗手段逐渐受到关注，并取得了显著的进展。
本文将从CAR-T细胞治疗、免疫检查点抑制剂以及肿瘤疫苗三个方面探讨癌症免疫疗法的最新进展与前景。
一、CAR-T细胞治疗CAR-T细胞免疫治疗是目前备受关注的一种新型癌症治疗方法，其通过改造患者自身T细胞，使其具备特异性识别并攻击肿瘤细胞的能力。
通过体外扩增患者自身T细胞，并对其进行基因改造，使其表达特定的抗原受体（CAR），可以增强抓住肿瘤细胞效果，进而杀死肿分素除去耐药态癌细胞。
CAR-T细胞治疗的优势在于可以识别和攻击癌细胞中诸如抗原CD19等特定的分子标志物，具有很强的选择性。
而在临床应用方面，已经取得了令人鼓舞的成果。
例如，在B细胞恶性肿瘤的治疗中，CAR-T细胞治疗可达到高达80%以上的完全缓解率，极大地提高了患者的生存期。
然而，目前CAR-T细胞疗法也存在一些问题。
例如，治疗费用昂贵、生产周期长、部分患者可能出现严重不良反应等。
此外，它仅适用于存在明确抗原标志物表达的肿瘤类型。
因此，在未来还需要进一步改进技术，提高治愈率，并寻找更广泛适用于各种肿瘤类型的免疫靶向。
二、免疫检查点抑制剂免疫检查点抑制剂是另一种备受关注并正在迅速发展的免疫治疗方法。
通过阻断T细胞上PD-1/PD-L1信号通路或CTLA-4信号通路中的关键分子，可阻止癌细胞通过抑制免疫应答逃避被免疫系统攻击。
这种治疗方法在多种恶性肿瘤治疗中已经获得了显著的突破，如黑色素瘤、非小细胞肺癌和尿路上皮癌等。
例如，抗PD-1抗体药物已成功用于晚期非小细胞肺癌患者的治疗，并获得了较长时间的生存期。
然而，免疫检查点抑制剂也存在一些限制和挑战。
首先，不同个体对该类药物的反应存在差异性。
其次，临床效果可能受到肿瘤自身免疫耐受性所限制。
还有一些患者可能会出现严重的免疫相关副作用。
car-t工作原理
car-t工作原理Car-T（嵌合抗原受体T细胞疗法）是一种新兴的癌症免疫治疗方法，通过改造患者的T细胞，使其能够识别和消灭肿瘤细胞。
它的工作原理可以总结为以下几个步骤：采集T细胞、设计和构建嵌合抗原受体、扩增和激活改造的T细胞、注入到患者体内。
首先，需要采集患者的T细胞。
这通常通过外周血或者肿瘤组织等途径完成。
采集到的T细胞会被送往实验室进行后续处理。
在实验室中，科研人员将设计和构建嵌合抗原受体（CAR）。
CAR 是一种蛋白质分子，由多个部分组装而成，包括外部的抗原结合区域和内部的信号传导区域。
抗原结合区域能够识别特定的肿瘤抗原，而信号传导区域能够激活和增强T细胞的抗肿瘤活性。
当CAR的设计和构建完成后，下一步是将其导入到T细胞内。
为了实现这一点，通常使用病毒载体。
这些病毒载体被改造成可携带CAR 的形式，并且具有足够的感染能力。
当T细胞与携带CAR的病毒载体接触时，病毒会将CAR的遗传信息导入到T细胞内。
这样，T细胞就被改造成拥有特定抗原识别能力的CAR-T细胞。
改造完成后，CAR-T细胞需要经过扩增和激活。
在实验室中，科研人员会提供适当的培养环境和刺激物，使CAR-T细胞能够大量增殖和活化。
这样可以获得大量数量和高度活性的CAR-T细胞。
最后一步是将改造后的CAR-T细胞注入到患者体内。
在注射之前，通常需要对患者进行一些预处理，如化疗或放疗，以减少肿瘤负荷和提高CAR-T细胞的生存率。
一旦注射完成，CAR-T细胞会在体内寻找和识别肿瘤细胞。
通过CAR与肿瘤抗原的结合，CAR-T细胞会释放细胞毒性物质并释放促凋亡信号，从而引发肿瘤细胞的死亡。
除了直接杀伤肿瘤细胞外，CAR-T细胞还具有其他作用。
它可以激活免疫系统中的其他免疫细胞，如自然杀伤细胞和巨噬细胞，以协同作用来清除肿瘤细胞。
此外，CAR-T细胞还具有一定的记忆效应，能够识别和杀伤肿瘤细胞的再现。
总的来说，CAR-T疗法通过改造患者的T细胞，使其能够识别和消灭肿瘤细胞。
CAR-T治疗的安全性
CAR-T治疗的安全性
CAR-T（嵌合抗原受体T细胞）是一种新型的免疫治疗方式，
被广泛应用于肿瘤治疗领域。
然而，CAR-T治疗在提供疗效的同时，也存在一定的安全性问题。
1. 急性毒性反应
CAR-T治疗可能引发急性毒性反应，包括发热、寒战、低血压、呼吸急促等症状。
这些反应往往发生在CAR-T细胞输注后的数小
时内，可能严重影响患者的生命体征和器官功能。
2. 慢性毒性反应
除了急性反应外，CAR-T治疗还可能导致慢性毒性反应。
长期使用CAR-T细胞可能对正常细胞和组织造成损害，引发各种慢性
毒性反应，如免疫不耐受、细胞凋亡等。
3. 细胞增殖与转移
CAR-T细胞治疗过程中，CAR-T细胞的不受控制增殖可能导致治疗效果上的波动，甚至引发白血病等恶性疾病。
此外，CAR-T 细胞的转移也是安全性问题之一，转移到其他部位可能导致非预期的副作用。
4. 免疫系统副作用
CAR-T治疗采用自身免疫细胞改造而成的CAR-T细胞，对免疫系统产生一定程度的影响。
免疫系统副作用可能包括免疫过度激活、自身免疫反应、感染等，需要特别注意。
综上所述，CAR-T治疗虽然具有突破性的疗效，但安全性问题不可忽视。
在进行CAR-T治疗时，应该充分评估患者的安全性，并采取适当的措施来监测和减轻治疗过程中可能出现的副作用和安全隐患。
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肿瘤免疫治疗得新方法CAR-T 细胞治疗
秦皇岛市第四医院病理科康文喜康瑶满迪
随着肿瘤免疫学理论与技术得发展,肿瘤免疫治疗近年来取得了长足得进步。
以嵌合抗原受体( chimeric antigen receptor,CAR) 修饰 T 细胞为代表得肿瘤靶向免疫治疗得成就受到世界瞩目,在体外与临床试验中表现出良好得靶向性、杀伤性与持久性,给人类抗击肿瘤带来了新得曙光。
嵌合抗原受体(chimeric antigen receptor, CAR) 在体外进行基因重组, 生成重组质粒, 再在体外通过转染技术转染到患者得T细胞胞膜上, 使患者T细胞表达肿瘤抗原受体,转染后经过纯化与大规模扩增后得T细胞, 称之为嵌合抗原受体T细胞(Chimeric Antigen Receptor T-Cell , CAR-T)。
1989年Grooss等首次提出ＣＡＲ-Ｔ细胞这一概念,多年来科学家
经过不断得深入研究, ＣＡＲ-Ｔ细胞技术已经研制出三代。
第一代CAR 由识别肿瘤表面抗原得单链抗体与免疫受体酪氨酸活化基序(ITAM)组成。
然而,ITAM 发出得激活信号只能引起 T 细胞短暂得分裂与较低水平得细胞因子分泌,不能提供长时间得多克隆扩增与持续得体内抗肿瘤效应。
给患者输注第一代 CAR-T细胞2天后, CAR-T细胞在体内可大量繁殖, 但1个月后迅速下降至难以检测得水平, 也没有观察到对肿瘤得免疫应答反应。
虽然对第一代CAR-T细胞得研究较多, 但就是大多数试验在细胞扩增、体内存活时间、细胞因子分泌等方面还存在很多问题, 没有达到预期得临床效果。
研究表明, T细胞得完全活化有赖于双信号与细胞因子得作用。
其中第一信号为特异性信号, 由 TCR识别抗原递呈细胞表面得抗原肽-MHC 复合物所启动;第二信号为协同刺激信号, 通过CD28/B7等重要得共刺激分子, 促进IL-2合成, 并使T细胞充分活化及免于凋亡。
对于初始型T细胞(未与抗原接触得T细胞), 如果只有信号1而没有信号2, T 细胞就不能发挥正常作用;即使T细胞与抗原接触, 若没有协同刺激信号, 细胞也不能发挥正常功能。
一种仅含有CD3ζ序列得嵌合抗原受体, 如果没有协同刺激信号2, 也就是无法激活CAR-T细胞。
因此,依照 T 细胞活化得双信号学说,T 细胞得激活与增殖需要共刺激信号,因此第二代与第三代 CAR 引入了共刺激分子信号,提高了 T 细胞得细胞毒性、增殖活性、存活时间、细胞因子释放等功能。
科学家们用电穿孔、转座子系统、逆转录病毒、慢病毒等基因转导方法修饰T 细胞,使 T 细胞得抗肿瘤作用现出了令人满意得效果。
Porter等与Kalos等研究用第二代CAR-T细胞靶向治疗3例慢性淋巴细胞白血病, 接受治疗得3例患者回输CAR-T细胞总数为1、4×107 ~1、1×109 , CAR-T细胞不仅在体内扩增1 000倍以上, 而且在血液与骨髓中存活得时间也超过6个月, 分泌得细胞因子如干扰素-γ、CXCL9等较治疗前显著增高。
接受治疗得3例患者中, 2例达到完全缓解, 1
例部分缓解, 疗效得到肯定。
2013年, Brentjens等用CD19-CAR-T细胞治疗5例急性B细胞性白血病患者,通过治疗, 5例肿瘤迅速减小,其中1例患者治疗8天之后就很快得到完全缓解, 3例患者缓解期长达5-24个月。
该临床试验结果表明,CAR-T细胞治疗成人急性B细胞性白血病就是有效得。
虽然患者对该疗法能够耐受, 但就是也出现了细胞因子相关得毒性反应, 并且与肿
瘤负荷成正相关。
Morgan等对一例结肠癌合并肝与肺转移得患者给予第三代CAR-T细胞治疗。
患者输入CAR-T细胞4小时后,血液就检测出高水平得IFN-γ、
GM-CSF、TNF-α与IL-6等细胞因子。
但患者发生“细胞因子风暴”,于5后天死亡。
这也就是迄今为止公布得最为严重得1例CAR-T细胞相关得不良反应。
由于目前第三代CAR-T细胞临床应用还比较少, 故其安全性与有效性就是否就一定优于第二代CAR-T细胞, 以及选择怎样得共刺激分子组合, 还需进一步观察。
随着细胞免疫治疗肿瘤得进展, 嵌合抗原受体修饰得T细胞在临床应用中得作用越来越受到人们得重视。
通过探索完美得CAR信号组合, 调节适宜得CAR亲与性, 增加人工基因调控开关, 产生合理得细胞因子分泌, 诱导T细胞特异性归巢等, 相信第四代甚至第五代CAR-T细胞也将很快应用于临床。
除此之外, 嵌合抗原受体也不仅仅只就是修饰T 细胞, 它还可以修饰CIK细胞、NK细胞以及γδT细胞等。
例如, 德国波恩大学得研究人员从结直肠癌患者外周血中采集与培养CIK细胞, 并利用 CEA+ 抗体特异性得CAR对CIK细胞进行改造, 使 CIK细胞获得CAR得特性。
将CAR-CIK细胞与 CEA+ 肿瘤细胞共培养后, 发现其分泌得IFN-γ, 要高于与CEA-肿瘤细胞共培养情况; 而用未改造得CIK 细胞与CEA+ /CEA–分别共培养, 却未观察到IFN-γ分泌增加, 且CAR-CIK细胞得细胞毒效应也比未改造得CIK细胞要高。
当前构建得嵌合抗原受体存在固定得抗原特异性, 这意味着它们每次只能靶向一种类型得肿瘤抗原。
将来可以设计构建一种更加通用性得嵌合抗原受体框, 最终可用于同时或依次靶向多种肿瘤抗原, 这样将更大程度解决肿瘤免疫逃逸引起得复发与转移等问题, 成为疗效更确切得过继性免疫细胞治疗方法, 给肿瘤治疗带来新得希望。
CA-T 细胞治疗得副作用:
1、CAR 修饰 T 细胞得脱靶效应: CAR 修饰 T 细胞临床应用得一个重要问题就是脱靶效应。
作为分子靶点得肿瘤抗原中,真正得肿瘤特异性抗原很少,大多数为肿瘤相关抗原。
如果这些抗原在重要脏器上也有表达,势必造成免疫损伤。
当然一些组织可能通过天然得屏障免于受到 CAR 修饰 T 细胞得攻击,如睾丸,但就是体内大多数组织不具备这些屏障。
例如,用特异性识别碳酸酐酶-IX(CA-IX) CAR 修饰 T 细胞治疗转移性肾细胞癌可能会造成肝细胞毒性,因为正常肝脏细胞上低水平表达 CA-IX。
Rosenberg 等报道 1 例接受 CD19-CAR 修饰 T 细胞治疗淋巴瘤患者,外周血 CD19 + 淋巴瘤细胞消除得同时,其 B 细胞也消失长达 39 周,表明脱靶效应对健康成熟 B 细胞存在潜在威胁。
2、细胞因子风暴: CAR-T 细胞与肿瘤抗原结合会导致T 细胞活化,这一结果可能导致大量得炎症细胞因子释放到循环中,如 IFN-γ 与TNF-α 等,即所谓“细胞因子风暴”,大量得炎症细胞因子会引起急性呼吸窘迫综合征与多器官功能衰竭,有时甚至危及患者生命,因此密切监测重要器官得功能就是必需得。
3、CAR-T细胞引起得移植物抗宿主病(GVHD) 样损伤: CAR-T细胞应用得另一个问题就是发生类似于异基因造血干细胞移植中出现得GVHD。
移植物抗肿瘤作用常常伴随着免疫效应细胞对正常组织得攻击,尤其就是当肿瘤相关抗原在健康组织也有表达得时候,其抗癌效能与其毒性程度相关联。
例如靶向 MART-1 得 CAR + T 细胞治疗黑素瘤得临床试验中,一些患者出现了皮疹、葡萄膜炎或听力减退,严重者出现多器官功能衰竭而死亡。
如何保证发挥 CAR-T 细胞生物有效性得同时,减少其潜在危险性,就是实现基因及细胞治疗恶性肿瘤需要解决得问
题。
预防措施:1、人工调控: CAR 表达人工调控基因表达就是实现基因治疗得安全策略之一。
当 CAR-T 细胞输入患者体内出现明显免疫损伤时,利用人工基因调控手段( 如启动自杀基因) 清除 CAR-T 细胞,可以防止严重不良事件得发生。
为此,一些自杀基因系统引入了 CAR-T 细胞,以增加治疗得安全性。
2、T 细胞亚群/型选择:有证据表明效应记忆 T 细胞(TEM )在体外毒性方面优于中枢记忆 T 细胞(TCM ) ,但在体内 TCM具有较强得抗肿瘤效应与建立免疫记忆潜能。
CAR 修饰得初始 T 细胞亚群/型也影响它们得体外扩增与体内治疗作用。
CAR 修饰得 T 细胞体外扩增时,CD4 + T 细胞与 CD8 + T 细胞共同培养对细胞毒效应 T 细胞得大量制备有帮助;树突状细胞与 T 细胞共培养对幼稚 T 细胞到效应/记忆 T 细胞转化、细胞因子分泌( Th1 / Th2) 有重要作用。
精确地分离与检测潜在最有效得 T 细胞亚群/型,用少量得细胞达到最佳得治疗效果,将会提高临床应用得安全性。
3、共刺激分子得选择:因 CAR 细胞内信号区不同,共刺激分子激活 T 细胞产生得抗肿瘤效应也不同,有研究表明,CD137 能提高 T 细胞存活与抵抗激活诱导性细胞凋亡(AICD) 。
因此,选择最佳得共刺激分子达到良好得抗肿瘤作用,又避免引起不必要得免疫损伤也就是提高安全性得策略之一。
CAR-T 细胞肿瘤免疫治疗具有诱人得应用前景,国外正在进行Ⅰ/Ⅱ期临床研究。
目前各国科学家正在寻找肿瘤特异性抗原作为分子靶点与开发适合 CAR 得单链抗体;同时进一步优化 CAR 得结构,筛选良好治疗潜质得 T 细胞亚群/型, 以提高其有效性与安全性。
随着研究
得不断深入,相信不久得将来 CAR-T 细胞会给肿瘤治疗带来新得希望。