流式细胞仪中文手册
流式细胞仪上机培训手册

流式细胞仪上机操作培训手册一、样本处理以PBMC表面抗原的流式检测步骤为例1)取样。
取新鲜提取或冻存后复苏的PBMC;2)编号。
根据实验设计,标记好流式管,如每份PBMC设两管:a)1号管:相应同型对照;b)2号管:CD3,CD4,CD8,CD56四标管;3)加样。
用移液器取100ul细胞/管(约1×106个细胞/管),分别加到已经标记好的流式管底部;4)洗涤。
加入1ml PBS/管,涡旋1600rpm/min,离心6min;5)染色。
弃上清,加入100 μl PBS/管涡旋混匀细胞,并根据实验设计,向各流式管中加入相应的荧光素标记抗体,混匀,室温避光孵育30min(操作尽量保持在避光条件下进行。
)6)洗涤。
加入1ml PBS/管,涡旋1600rpm/min,离心6min;7)重悬。
弃上清,加入0.5ml PBS/管,混匀,上机检测(可选择BD FACSCantoII或BD Accuri C6)。
(注:若不能及时上机,应加入4%多聚甲醛固定,并于4℃避光保存。
)8)试验结果分析。
(注:实验过程中如果进行多色标记,需要调节荧光补偿)。
参考值:二、上机检测BD FACSCanto II简要操作流程启动流式细胞仪1 打开流式细胞仪电源2 启动计算机,打开软件登录3 确保软件连接到流式细胞仪必要时,点击Cytometer > connect检查液体水平1 启动流式细胞仪后,检查液体水平低液面水平或者废液桶满都用红色指示。
2 如果液流车未自动开启,选择Cytometer > Fluidics Startup。
3 当液流启动完成后,点击OK关闭对话框。
检查气泡1 在检查完液体水平后,开启流动室门,检查流动室中是否有气泡。
2 如果没有看到气泡,进行第5步。
如果看到气泡,点击Cytometer > CleaningModes >De-gas Flow Cell.3 当完成信息出现后,点击OK。
流式细胞仪培训手册(完成版)_图文

流式细胞仪培训手册序论学习仪器的最好方法是操作仪器,然而在理解原理的基础上进行仪器操作无疑会起到事半功倍的作用。
本书介绍了流式细胞仪的基本知识,并从不同角度详尽阐述了各种台式机(FACScanTM , FACSortTM , FACSCaliburTM ,和 BD LSR与大型机(FACS VantageTM, FACSVantageTM SE, 和 FACStarPLUSTM 之间的不同。
阅读本书有助于增强读者操作仪器的动手能力和经验。
目录第 1章综述…………………………………………………………………… 4 第 2章液流系统………………………………………………………………第 3章散射光信号及荧光信号………………………………………………3.1 散射光信号………………………………………………………3.2 荧光信号…………………………………………………………3.3 荧光补偿第 4章光电系统………………………………………………………………4.1 光平台……………………………………………………………4.2 光学滤片………………………………………………………4.3 信号探测器……………………………………………………4.4 阈值………………………………………………………………第 5章数据分析………………………………………………………………5.1 数据采集及显示…………………………………………………5.2 设门………………………………………………………………5.3 细胞亚群的数据分析…………………………………………5.4 流式细胞仪其它应用的数据分析………………………………5.5 CellQuest软件使用……………………………………………5.6 MutiSet 软件使用………………………………………………5.7 Simultest 软件使用……………………………………………5.8 B27软件使用…………………………………………………5.9 WinMDI软件使用…………………………………………5.10 FACSPress软件使用…………………………………………5.11 System II软件使用…………………………………………5.12 MultiCycle软件使用…………………………………………5.13 Modfit使件使用……………………………………………第 6章流式基本检测项目6.1淋巴细胞亚群检测 (双色、三色、四色,三种软件分析6.2 B27的检测………………………………………………………6.3 血小板抗体检测………………………………………………6.4 网织血小板及红细胞分析……………………………………6.5 干细胞检测……………………………………………………6.6 DNA倍体分析……………………………………………………6.7 凋亡检测…………………………………………………………第 7章分选6.1 分选………………………………………………………………第 8章激光器及光路校正……………………………………………………7.1 激光器的工作原理………………………………………………7.2 光路校正…………………………………………………………第 9章答案………………………………………………………………第一章综述流式细胞术是一项快速检测分析单个粒子多物理特性的高技术,通常指细胞通过激光束时在液流中的特性,即粒子的大小,密度或是内部结构,以及相对的荧光强度。
Invitrogen Attune NxT 流式细胞仪应用手册说明书

Invitrogen Attune NxT流式细胞仪应用手册成就稀有细胞超灵敏高通量分析梦想实现全血样本无需裂解无需洗涤夙愿21人全血样本免洗免裂解白细胞分析(三种方法)...............................................................................................2人全血6色T 细胞无需补偿且免洗免裂解检测................................................................................................6人全血10色免疫表型分析.....................................................................................................................10人全血13色免疫表型分析.....................................................................................................................13人全血吞噬细胞检测...........................................................................................................................17小鼠脾细胞10色免疫表型分析...............................................................................................................22小鼠调节性T 细胞检测........................................................................................................................25藻类存活率分析...........................................................................................................................28使用Attune NxT 流式细胞仪进行荧光蛋白检测...........................................................................................30hPSC 来源的心肌细胞分化过程中转录因子表达的流式细胞分析......................................................................37利用Attune NxT 流式细胞仪检测全血中的血小板............................................................................................42利用Attune NxT 流式细胞仪设计T 细胞基础配色方案......................................................................51利用Attune NxT 流式细胞仪快速准确地进行植物细胞核DNA 含量分析................................................................59使用 ModFit LT 软件分析 Attune NxT FCS 数据文件的操作指南 . (66)利用Invitrogen Attune NxT 流式细胞仪对单细胞生物中的中性脂进行检测 (74)利用Attune NxT 流式细胞仪进行精确浓度测定的推荐方法 (78)Attune NxT 自动进样器实现流式高通量自动化检测:在所有板孔和微孔板之间保持结果的一致性 (80)使用FlowJo 软件分析Invitrogen Attune NxT FCS 数据文件的操作指南 (88)使用FCS Express 6软件分析Attune NxT FCS 数据文件 (96)目录2人全血免洗免裂解白细胞分析(三种方法)无需洗涤/裂解检测人全血中的白细胞简介从人的全血中分离并检测白细胞的传统方法十分耗时,且通常需要大量处理和富集方可进行分析。
AriaII操作手册-分选

FACSAri aⅡ流式细胞仪一、开机准备(一)准备液路1.将流式细胞仪的上盖打开;2.开启计算机,等待所有程序载入。
3.开主机电源Mainpower(右图),从电脑桌面上双击打开FACSDiva软件,输入密码BDIS。
打开激光开关laser power(根据实验需要进行选择);开启实验所需激光器电源。
4.确认液流车中各种液体的液面水平(鞘液、废液、去离子水、漂白剂、乙醇),倒空废液或加满其他液体(下图)。
5.从软件的Cytometer菜单上选择Fluidic Startup(射流启动),点击OK确认。
将出现如下窗口:6.将液路和气路管道从酒精桶断开,连接到鞘液桶;完成后点Done;7.将Closed-loop 喷嘴(闭环喷嘴)插入流动室;完成后点Done;会出现右侧窗口,提示液流开启进行中;8.达到100%,移去Closed-loop喷嘴,完成后点Done;9.按照实验要求,插入直径合适的喷嘴(喷嘴直径应该是分选颗粒直径的3-6倍);10.然后点OK,完成整个过程;11.从菜单上选择Sort(分类)sort setup,确认setup模式与喷嘴大小匹配。
(二)开液流1.打开液流窗口的液流;♦点击软件界面上(如下图)的按钮打开分选液流窗口(如下图)♦点击分选液流窗口的按钮(stream 的前面按钮),开启液流2.打开分选仓前的门,检查液流。
液流应为一条细线落入废液槽正中(可通过调整红色标志的键);(如果液流不稳,检查流动室中是否有气泡,将液流关闭,10秒钟后再开,排除气泡。
)3.关上分选仓前的门。
(三)设定液流断点1.调整液流震幅(Ampl),使断滴位于窗口上方1/3处。
(Ampl不要超过70,如果超过,检查流动室是否有气泡;确认鞘液压力和震动频率是否合适);2.确认卫星液滴与大液滴融合,应该在断滴的6滴之内融合(红色箭头数起,左图的左侧合格,右侧不合格),如果没有融合,重新安装喷嘴。
二、建立实验模板1.在软件界面左侧Browser面板下,依次点击New Folder、Experiment、Specimen (均可重命名),单击Specimen左侧“+”符号,显示下方的Tube,点击左侧灰色指示箭头,使之变成绿色(当前指示)。
FACSCalibur流式细胞仪中文操作手册

5. 上樣區: 上樣區是樣本管的上樣位置。它包括三個部 分,一個是進樣針 Sample Injection Tube,將 樣本輸入流動室,還有就是支撐架 Tube Support Arm、和液滴存留系統 Droplet Containment System。 進樣針:是一根不鏽鋼管,將細胞從樣本針中吸入流動室。進樣管外有一套管, 是液滴保留系統的一部分。 支撐架:用於支撐樣本管、並負責啟動液滴存留系統。支撐架有三個位置:位於 樣本管之下的中位,樣本管左側或右側。 液滴存留系統:系統由支撐架、真空幫浦和外套 管組成。當支撐架位於左側或右側位置時,真空 幫浦就會啟動,將液體從外管吸入廢液桶內。上 樣時,須注意將支撐架位於中位,以避免過多樣 品被抽吸到廢液筒內(當支撐架位於中位,真空 幫浦停止工作)。更換樣品時,讓儀器保持 RUN 的模式,使得進樣針可以反沖;切換到 STANDBY 模式前,確保液路已沖洗徹底以免碎片沈積到流 動室中。
FACS101 Handbook Pro
-7–
4. 從 Acquire 功能表中選擇 Connect to Cytometer,建立儀器和電腦之間通訊。此時 會出現 Browser 方框。將之移至適當位置。
5. 從工具板中點擊散點圖圖示。在實驗文件的空白區點擊,拖曳對角線至適當大小, 然後放開滑鼠。此時應可以在右方看到 Inspector:Dot Plot 對話框。
FACS101 Handbook Pro
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6. 從螢幕上方 Edit 功能表中選擇 Duplicate 功能,可複製一個同樣大小的散點圖,完 成後可將重製圖移至原圖右方。
7. 從螢幕上方 Edit 功能表中選擇 Select All 功能,文件中所有圖譜的四角會出現黑色 方塊,表示被選取。可在出現之 Inspector:2 Objects 方框中將 Plot Type 改成 Acquisition。 8. 因應實驗需求來修改所有圖譜中顯示之參數。第一圖 X 和 Y 軸參數分別設為 FSC-H 1024、SSC-H 1024;第二圖 X 和 Y 軸參數分別設為 FL1-H 1024、FL2-H 1024。 修改動作為輕擊圖譜,並在出現之 Inspector 方框依需要選擇。 FSC:細胞大小 SSC:細胞顆粒性 FL1:FITC 綠色螢光 FL2:PE 橙色螢光 FL3:PerCP 紅色螢光 儀器設定 注意:實驗數據品質,取決於最適化儀器設定。儀器設定文件不能在數據收取後再更 改,研究人員必須在第一次就使用正確的儀器設定。 儀器設定(Instrument settings),含偵測器電壓(Detector/ Amps),閾值 (Threshold),螢光補償(Compensation)等儀器條件的組合。一般而言,儀器設 定的順序為 Detector/Amps -- Threshold -- Compensation。
流式细胞仪中文手册

仪器操作手册本手册根据标准配置的CyFlow® Space编写而成,具体内容根据实际配置可能有所偏差,手册内容应以实际配置为准。
CyFlow Space 仪器操作手册内容CyFlow Space介绍 (4)典型分析步骤 (5)基本操作 (6)启动CyFlow Space (6)多激光测量 (7)开始检测 (8)关闭CyFlow (9)液量绝对计数(定量)----概述 (10)如何执行液量绝对计数 (12)光路几何示意图 (13)光路图标准设置----参数 (14)仪器设置 (15)参数设置对话框:脉冲信号高度、面积和宽度 (16)触发 (17)光电倍增管(PMT)电压,增益和对数放大 (18)样本进样速度 (19)阈值:L-L(低值)和U-L(高值) (20)附录 (21)安装要求 (21)仪器安装--概要 (22)仪器安装--顺序 (23)流动室精细校准 (24)流动室 (25)维护和服务 (26)运输和储存 (26)污染物处理 (26)安全使用激光器的说明 (27)CyFlow Space技术规格表 (28)Partec推荐使用体外诊断试剂IVDPartec CyFlow Space型流式细胞仪符合欧洲98/97/EC标准,已经取得欧洲CE认证。
○C2007 Partec GmbHOtto-Hahn-Str.32D-48161GermanyCyFlow® Space介绍Partec CyFlow® Space是什么?CyFlow®Space有哪些用途?本手册涉及内容?其他要用到的说明书?操作CyFlow®Space前应该具备哪些知识?Partec CyFlow®Space是一台配臵全面的桌面式/便携式流式细胞仪(FCM)。
它的特色即设计理念是可以配备3个激光光源,和1至9个光学通道(参数),通过简单地更换光学滤片或镜片可以满足任何实验的需求。
BeamCyte流式细胞仪快速操作指南

BeamCyte 流式细胞仪快速操作指南流程开机首先打开电脑,电脑正常开机后打开仪器后面板电源键启动仪器,在配套电脑上打开Cytosys 软件,待仪器初始化完成,软件状态栏将显示“就绪”,即可进行下一步操作。
QC 测试1 制备BeamCyte QC微球悬液。
2 点击主菜单“系统维护”→“QC测试”,根据软件提示完成QC测试。
3 QC测试所有项目结果均为 Pass 时,可进行下一步操作。
新建实验1 点击主菜单“文件”→“新建”→“新建实验”,建立新的实验文件。
2 用以下多种方式新建实验样本或标本:在“实验管理”面板,右键点击“实验文件名”,在本实验文件下新建标本。
右键点击“标本”,在选中的标本下新建样本。
如果已有模板文件,点击主菜单“文件”→“新建”→“从模板新建”,将新建有相同模板的标本或样本。
3 点击主菜单“文件”→“保存”,保存选中的实验文件或其他文件。
注:如果已导出fcs文件,文件名会变色。
荧光补偿1.自动荧光补偿准备各个荧光参数的单染样本和未染色对照样本。
点击菜单“开始”→“自动补偿”,弹出“新建自动补偿”对话框,进行自动补偿条件设置。
选择需要使用的样本,并点击“确定”。
软件将自动新建“补偿标本”。
逐管采集单染样本,软件自动计算荧光补偿。
将自动计算的荧光补偿右键导出保存。
2.手动荧光补偿两种方式手动调节荧光补偿:需要补偿的参数两两做密度图,点击快速补偿按钮,拖动快速补偿滚动条,使某一荧光单阳性细胞与阴性细胞在另一荧光通道的荧光强度相等。
逐个调节直到所有参数之间的补偿完成。
补偿前补偿后补偿调节的过程也可以通过点击菜单“开始”→“当前补偿”调出当前样本的补偿矩阵,不断调整溢出矩阵中相应单元格的补偿系数来实现。
采集样本1 在“实验管理”面板,双击试管,使之成为当前试管(蓝色箭头指示)。
2 设置采集条件:设置采集使用的“参数”,,包括选择采集通道并定义别名和电压,初次实验的电压需用调试模式调整。
BD-FACSCalibur流式细胞仪操作手册

BD FACSCalibur流式细胞仪一、BD FACSCalibur基本结构1.1仪器本体:1. 电源开关:在BD FACSCalibur仪器右侧下方,先启动仪器本体,再打开计算机。
2. 光学系统:BD FACSCalibur 基本配有一支波长488 nm 的氩离子雷射以BD FACSCalibur 基本型为例➢FSC Diode 只收488 nm波长散射光➢SSC PMT 只收488 nm波长散射光➢FL1 PMT 荧光光谱峰值落在绿色范围(波长515-545 nm)➢FL2 PMT 荧光光谱峰值落在橙红色范围(波长564-606 nm)➢FL3 PMT 荧光光谱峰值落在深红色范围(波长 >650 nm)3. 仪器面板:仪器前方面板的右下方有三个流速控制键、及三个功能控制键。
流速控制:LO:样品流速:12 l /minMED:样品流速:35 l /minHI: 样品流速:60 l /min功能控制:•RUN:此时上样管加压,使细胞悬液从进样针进入流动室。
(正常显示绿色;黄色时表示仪器不正常,请检查是否失压。
)•STANDBY:无样品或暖机时之正常位置,此时鞘液停止流动,雷射功率自动降低。
•PRIME:去除流动室中的气泡,流动室施以反向压力,将液流从流动室冲入样品管,持续一定时间后,以鞘液回注满流动室。
PRIME 结束,仪器恢复STANDBY状态。
4. 储液箱抽屉:在主机左下方之储液箱抽屉。
可向前拉开,内含鞘流液筒、废液筒、鞘液过滤器Sheath Filter,及空气滤网 Air filter。
请注意气路减压阀VENT TOGGLE之位置。
•鞘液筒:位于抽屉左侧,容积4升。
装八分满鞘液筒,仪器可以运行大约 3小时。
筒上装有液面感应器,鞘液用完时,仪器软件上会有显示。
鞘液筒盖上有金属环扣,保证鞘液筒密闭。
•废液筒:位于抽屉右侧,容积4升。
筒上装有液面感应器,废液盛满时,仪器软件上会有显示。
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性,平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
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- 3、如文档侵犯您的权益,请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间:9:00-18:30)。
在软件上列的菜单中选择“获取”,根据需要点 击“第二激光器开关”或“第三激光器开关”, “√”表示激光器被打开,第二激光器开关控制 红色激光器(如果存在),第三激光器开关控制 UV 或紫色或其它激光器(如果存在)。
激光器的开关状态将被自动保存在仪器设定值 文件中(请参考 FloMax®-获取和仪器控制手 册)。
Partec 推荐使用体外诊断试剂 IVD Partec CyFlow Space 型流式细胞仪符合欧洲 98/97/EC 标准,已经取得欧 洲 CE 认证。
○C 2007 Partec GmbH Otto-Hahn-Str.32 D-48161 Germany
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CyFlow® Space 仪器操作手册 CyFlow® Space 介绍
怎样在 Windows®下工作,请 参考手册《微软 Windows 介 绍》或相关书籍。
1. 检查鞘液和废液瓶 确认鞘液瓶已充满不超过 1600ml 清洁鞘液。该 鞘液已过滤,并且与鞘液瓶相连的管路内无气泡 存在。最后将鞘液瓶密封。 确认废液瓶已经排空。 2. 开机 CyFlow® Space 可在 100~240V 交流电下操作。 打开仪器左侧的主电源开关,并随后打开 488nm 激光器开关,488nm 激光器开关在主电源开关旁 边。 其它激光器开关均由软件控制(细节请参考下一 页)。
CyFlow® Space 免费配套软件,提供常规的自动 化操作,并能灵活应用在任何流式细胞术的各种 研究过程中。 这些用途包括: 免疫分型的常规和科研应用 血细胞分析、HIV 监测 白细胞计数、比例分析 微生物分析 发酵控制 浓度分析+绝对计数定量分析 细胞大小和荧光分布分析
CyFlow® Space 仪器操作说明书包括 CyFlow ®Space 仪器的基本操作和维护。但不包含与软 件相关的细节,不同仪器的配套软件的使用方法 也不同。
FlowMax® –数据获取和仪器控制,涉及仪器控 制和多参数数据获取。
FlowMax® –数据分析,涉及在线和离线数据分 析的各个方面。
附录…………………………………………………………………………………………………………21 安装要求……………………………………………………………………………………………………21 仪器安装--概要……………………………………………………………………………………………22 仪器安装--顺序……………………………………………………………………………………………23 流动室精细校准……………………………………………………………………………………………24 流动室………………………………………………………………………………………………………25 维护和服务…………………………………………………………………………………………………26 运输和储存…………………………………………………………………………………………………26 污染物处理…………………………………………………………………………………………………26 安全使用激光器的说明……………………………………………………………………………………27 CyFlow Space 技术规格表…………………………………………………………………………………28
仪器操作手册
本手册根据标准配置的 CyFlow® Space 编写而成,具体内容根据实际配置 可能有所偏差,手册内容应以实际配置为准。
CyFlow Space 仪器操作手册
内容
CyFlow Space 介绍…………………………………………………………………………………………4 典型分析步骤………………………………………………………………………………………………5 基本操作……………………………………………………………………………………………………6 启动 CyFlow Space………………………………………………………………………………………6 多激光测量………………………………………………………………………………………………7 开始检测……………………………………………………………………………………………………8 关闭 CyFlow…………………………………………………………………………………………………9 液量绝对计数(定量)----概述…………………………………………………………………………10 如何执行液量绝对计数……………………………………………………………………………………12 光路几何示意图……………………………………………………………………………………………13 光路图标准设置----参数…………………………………………………………………………………14 仪器设置……………………………………………………………………………………………………15 参数设置对话框:脉冲信号高度、面积和宽度…………………………………………………………16 触发…………………………………………………………………………………………………………17 光电倍增管(PMT)电压,增益和对数放大………………………………………………………………18 样本进样速度………………………………………………………………………………………………19 阈值:L-L(低值)和 U-L(高值)………………………………………………………………………20
多激光测量
注意 激光器的调整必须由 partec 工程师或您所 在地经销商完成。
CyFlow® Space 根据用户的需求可以最多安装 3 个激光光源。因此,您目前使用的设备可能与其 它同型号设备的配臵不同。如需了解详细情况请 与 partec 或您所在地的经销商联系。
为了将不同光源间的补偿减少到最小程度,从不 同激光发出的光束与流动室相交与不同的位臵。 CyFlow® Space 支持任意两个激光光束间的补偿 (当使用 FloMax® 2.4 或 2.5 版本时)或 3 激光 之间的补偿(当使用 FloMax® 3.0 版本时)。 488nm 是补偿的主激光光源,总是被默认为第 1 点。附加的其它激光光源被定位于第 2 点和第 3 点。
3. 调整 488nm 激光器的输出功率(仅限于 200mw 激光器)。 200mw 激光器的功率调节范围在 50~200mw 之 间,如需调整功率,请双击如左侧显示的图标 (488-200) 改变功率请输入:
P=功率数值,然后按确认键 查询当前功率值请输入:
?P,然后按确认键
4. 打开附属装臵 打开打印机。 5. 打开计算机 最后打开计算机电源开关。大约几十秒钟后,出 现 Windows®桌面。 6. 启动仪器操作软件 移动鼠标按钮至 FloMax®, 或其他仪器控制图 标。鼠标左键双击图标。几秒钟后,显示―Flomax® Welcome Window (FloMax®欢迎窗口)‖。此时, CyFlow® Space 开始进行初始化,并自动读取上 次使用的仪器设臵。 点确定,显示空直方图。 7. 清洗 将运行速度调到 4。运行 1.6ml partec 原厂绿色 清洗液(Cleaning Slolution),再运行 1.6ml 蒸 馏水,最后依次点击 4 次―清洗(Clean)‖按钮。
在标准的配臵中,所有颗粒将首先通过 488nm 激光器-引导激光束,然后依次通过第二和第三 激光光束(如果存在)。
因此,所有参数的获取除第一激光外均需要延迟 时间,详细内容请参照参数设臵对话框(图 5, 第 16 页)。
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CyFlow® Space 仪器操作手册 开始测量
注意: 如何更改仪器设臵请查看 FloMax® 获取和仪器控制手 册。
2. 激光器发出来的光照到细胞表面,细胞被照 射后散射出荧光和散射光。
2. 流式细胞仪分析 细胞逐一经过流动室时,单独接受激光的照射。 由于激发效应,荧光分子发出有独特波长的荧光 (发射波长谱)。通过滤光片,该荧光束分解成 不同波长范围范围。针对细胞个体分析其波长范 围的强度。
除荧光外,还同时测量每个细胞的物理光强度。 散 射 光 在 光 源前 向 角 ( FSC ) 和 侧向 角 测量 (SSC)。散射光强度代表细胞的大小和形态。 散射光用于荧光分析前确认细胞,但细胞也可于 散射光特性分析前由荧光确认。
现在 CyFlow® Space 已完成标本运行的准备。
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CyFlow® Space 仪器操作手册
危险 警告:生物安全性 废液是携带污染的,对人体是有害的,请每次排空废液后在废液桶内注入 25ml Partec 原厂清洁液 (Hypochlorite Solution),如果废液桶内液体溅到您的皮肤上,请立即用肥皂或其它人体清洗液清洗。
3. 实时数据处理和结果 每一参数的光强度,以及伴随的目标颗粒数可在 1~216 或 65536 个通道中被收集,当细胞经过流 动室时,其信息将被软件实时收集。单参数直方 图将显示光通道内的细胞数。双参数点图将显示 两种细胞特性间的关联程度。
3. 荧光信号显示在直方图和散点图中,并在每 个图中进行分析。
当样本管从样本槽中被取下 后,仪器的生物安全系统自动 启动,目的:1.为了避免液体从 样品管中滴出。2.为了避免样 本间的交叉污染。
1. 确认流式细胞仪已完成分析准备,操作软件 已完成标本运行准备。
2. 依照应用注解或操作规程准备标本,为了开 展绝对计数,请在样本管中加入最少 830ul、最 多 2.8ml 样本,如果样本少于 830ul,请用 PBS 或鞘液进行稀释,并记下稀释倍数。
基本操作——启动 CyFlow® Space
注意: 关于鞘液,您可以使用 Patec 生产的原装鞘液,也可以使用 自己制备的鞘液。 制备鞘液,将蒸馏水注入玻璃 瓶或三角瓶,同时用小孔径 (<0.2μm)滤网过滤,然后 用真空泵(如水泵)抽去水中 气体。将瓶中液体摇匀约 15 分钟。 记住:您分析的颗粒越小,越 要求严格清洁鞘液。 注意:要至少每周或每次使用 前更换一次鞘液。