植物生理实验讲义.
植物生物学实验（植物生理）教案
植物生物学实验（植物生理）教案实验一多酚氧化酶活性测定（3学时）一、实验目的：掌握测定多酚氧化酶活性的方法；了解多酚氧化酶的特性二、实验原理：多酚氧化酶是一种含铜的氧化酶，能使一元酚和二元酚氧化生成醌。
醌有颜色，在525nm下有最大光吸收，通过分光光度法测定反应体系颜色变化可测定酶活性。
三、器材与试剂低温离心机、s22pc分光光度计、儿茶酚、pH 7.2磷酸缓冲液四、实验内容：1．称取马铃薯0.5克，加入2.5mL pH 7.2磷酸缓冲液，少许PVP，研磨匀浆，转移到离心管，再用2.5mL pH 7.2磷酸缓冲液冲洗研钵，合并提取液。
4℃ 4000rpm离心15分钟，上清液即为粗酶液。
2．在试管中，加入2.5mL pH 7.2磷酸缓冲液，1.5mL 儿茶酚以及1mL 粗酶液，空白调零以1mL磷酸缓冲液代替粗酶液。
3．A值测定：加入粗酶液后迅速混匀，立刻于525nm下测定反应体系的A值，每隔30秒记录一次，共记录5次。
4．计算酶活力。
按下式计算PPO活性＝U/min gFWA值增加0.001定义为一个酶活力单位。
五、实验报告：计算所测材料的PPO活性。
选择A值变化均匀的三组数值求平均值。
实验二植物耐盐生理指标测定（9学时）一、实验目的：1、了解盐胁迫的机理以及植物的耐盐机制2、了解植物盐处理的方法3、掌握植物体内脯氨酸含量测定的原理和方法4、掌握过氧化物酶活性的测定原理和方法5、掌握丙二醛含量的测定方法6、掌握基本的数据统计方法二、实验原理植物在盐胁迫下,植物可通过积累一定量的脯氨酸降低水势, 维持植物体内的水分平衡, 保证植物的正常生长。
脯氨酸本身是一种水溶性最大的氨基酸，它可以防止原生质体的水分散失，在植物细胞生理干旱时，它的增加有助于细胞或组织保持水分。
用磺基水杨酸提取植物样品时，脯氨酸便游离于磺基水杨酸的溶液中，然后用酸性茚三酮加热处理后，溶液即成红色，色素的深浅即表示脯氨酸含量的高低。
在520nm波长下比色，从标准曲线上查出脯氨酸的含量。
植物生理学实验课件9植物组织中可溶性蛋白的测定
可溶性蛋白质含量的计算
可溶性蛋白含量 (μg/g.FW)=标准曲线上查得的 蛋白质量（ μg ） × 提取液体积5/0.1
示意如下：
0.35
Y=-0.00381+0.032029*X 0.30 r=0.9992
0.25
Absorbance
0.20
植物组织中可溶性蛋白的测定
植物叶片衰老过程中，叶绿素含量下降，叶 色变黄，蛋白质含量减少（可溶性蛋白）
课上笔记
三个指标
– 蛋白质含量
考马斯亮蓝
– 新叶2份 – 老叶2份，一次次加 – 转移到1.5毫升 – 显色反应做2次，合计4次（调零磷酸+考马斯亮蓝
– MDA含量
沉重，磨好， 反求诸己
实验原理
in darkness at 30
No 3: 10ppm ABA 20 ml 提取
称叶龄差异明显的叶片各1.00g ，加入5ml 磷酸缓冲液（50mmol， pH值为7.8）及少量石英砂，于冰浴中研磨提取，匀浆液以10 000g 离心力作用下（4度）离心10min，其上清液即为蛋白提取液。
显色反应
可溶性蛋白测定：缓冲液提取后可溶性蛋白溶于 上清液中，蛋白质提取液与考马斯亮蓝G-250反 应呈蓝色。在595nm处有最大吸收峰。
实验步骤
制备匀浆
48小时前预处理:称取叶片三份,每份1g（最好打圆孔），30度恒 温箱放置。
No 1: water 20ml (control);
No 2: 10ppm BA 20 ml; ℃ 2d.
0.15
0.10
0.05
0.00 0
2 4 6 8 10
植物生理学植物的生长生理详解演示文稿
种子寿命的种子寿命的长短主要是由 遗传基因决定的，但也受环境因素和贮藏
条件的影响。一般种子贮藏在低温、干 燥、乏氧条件下，降低种子的呼吸速率，
延长种子寿命。
郑光华先生提出“超干种子保存 法”。
第7页，共158页。
根据植物种子贮藏条件的特点，将种子分 为正常性种子和顽拗性种子。
生产上常采用比萌发最适温度稍低的温度，可
使幼苗生长快而又健壮，这一温度称为协调最适 温度。
另外，为了提早播种，可利用薄膜、温室、大棚、 温床、阳畦、风障等设施育苗。
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3 氧气
一般种子正常萌发要求空气含氧量在 10%以上。不同作物种子萌发时的需氧量不 同，含脂肪较多的种子比淀粉种子萌发时的 需氧量高 。 4光
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二、种子的寿命和活力
1 种子的寿命
种子的寿命(longevity)：指种子从完全成熟到丧 失生活力（或死亡）所经历的时间。 根据种子寿命的长短分为以下几类：
短命种子：几小时～几周。如：杨(几周)、柳
（12h）。 中命种子：几年～几十年。多数栽培作物。 长命种子：百年～千年，莲花。
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发芽指数的计算方法：
假设第1天到第7天发芽种子数： 2 ，8 ，22 ，25 ，26 ，26 ，26 发芽指数=∑Gt/Dt
=∑当天的发芽种子数/发芽日数 =2/1+8/2+22/3+25/4+26/5+26/6+26/7 =32.83
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种子生活力常用标准条件下测得的种 子发芽用发芽百分率表示，快速检查种子生 活力的方法主要有三类：
成新的蛋白质。
植物生理学全课程讲义(修正版)
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植物生理学绪论一植物生理学的定义和内容研究植物生命活动规律和机理及其与环境相互关系的科学.植物生命活动：从种子开始到形成种子的过程中所进行的一切生理活动。
植物生命活动形式:代谢过程、生长发育过程、植物对环境的反应植物生命活动的实质：物质转化、能量转化、信息转化、形态建成、类型变异1 物质转化体外无机物[H2O、CO2、矿质（根叶）]→体内有机物［蛋白质核酸脂肪、碳水化合物］→体外无机物［CO2 H2O]→植物再利用2 能量转化光能（光子）→电能(高能电子)→不稳定化学能（ATP,NADPH）→稳定化学能（有机物)→热能、渗透能、机械能、电能3 信息转化[1]物理信息:环境因子光、温、水、气［2]化学信息:内源激素、某些特异蛋白（钙调蛋白、光敏色素、膜结合酶）[3］遗传信息:核酸4 形态建成种子→ 营养体（根茎叶) → 开花→ 结果→种子5 类型变异植物对复杂生态条件和特殊环境变化的综合反应植物生命活动的“三性”v植物的整体性v植物和环境的统一性v植物的变化发展性Ø植物生命活动的特殊性1 有无限生长的特性2 生活的自养性3 植物细胞的全能性和植株的再生能力强4 具有较强的抗性和适应性5 植物对无机物的固定能力强6植物具有发达的维管束植物生理学的内容1、植物细胞结构及功能生理﹕2、代谢生理：水分代谢、矿质营养、光合作用、呼吸作用等3、生长发育生理：种子萌发、营养生长生理、生殖生理、成熟衰老4、环境生理（抗性生理）以上的基本关系光合、呼吸作用→ 生长、分化水分、矿物质运输发育、成熟（功能代谢生理） (发育生理）↖ ↗环境因子(抗性生理)(温、光、水、气）二植物生理学的产生与发展(一）萌芽阶段（16以前世纪）＊甲骨文:作物、水分与太阳的关系*战国时期：多粪肥田*西汉：施肥方式*西周：土壤分三等九级*齐民要术：植物对矿物质及水分的要求轮作法、“七九闷麦法”（1）科学植物生理学阶段1.科学植物生理学的开端（17～18世纪）1627年，荷兰 Van Helmont ，水与植物的关系1699年，英国Wood Ward，营养来自土壤和水18世纪，Hales，植物从大气获得营养1771年，英国Priestley发现植物绿色部分可放氧2年，瑞士 De Saussure，灰分与生长的关系2.植物生理学的奠基与成长阶段（19世纪）Ø1840年,德国Liebig建立矿质营养说。
本科课件-植物生理学实验(完整)
放蓝色液流时，不可震动小瓶。
12
根系活力的测定(TTC法)
植物生理生化教研室 曾汉来 2012.03.12
一、实验目的 • 理解植物根系活力的内涵 • 掌握TTC法测根系活力的原理与方法
提供合成所需能量; 合成氨基酸和植物激素 （ABA、CTK、GA等）
H2O 无机盐
硫酸，其他 操作相同。
加入1mol/L硫酸2ml
取出根吸 干水分
与3～4ml乙酸乙酯在研钵 内磨碎
查标准曲线， TTC还原量(mg)
空白试验作参比测 红色提取液移入试管且 485nm下吸光度 用乙酸乙酯定容到10ml
五、实验结果
TTC还原能力 （mg/g(根鲜重)/h）
＝
四氮唑还原量（mg） [根重（g）×时间(h)]
(5)手持测糖仪4 分别测定蔗糖原液浓度（C ）
四、结果计算 自由水的含量(%)=
植物组织中束缚水的含量(%) = 组织总含水量 － 组织中自由水含量
5
注意事项： 1. 清洗植物组织后应注意用
吸水纸擦干其表面的游离水分。 2. 植物组织与外部溶液之间
达到充分平衡。
6
实验01-2 植物组织水势的测定 （小液流法）
根的生长情况和活力水平直接影响地上部的生长 测定根系活力，为植物生长状况、营养供应研究提供依据。
二、验原理
氯化三苯基四氮唑（TTC）的标准氧化电位为80mV的氧化还 原物质，获得H的能力强。溶于水为无色溶液，还原后即生成 红色而不溶于水的三苯基甲腙 （TTF）。
—
生成的TTF比较稳定，不会被空气中的氧自动氧化，可用 分光光度法定量测定。
实验01-1 植物组织中自由水和束缚水 含量的测定
植物生理实验讲解内容
植物生理实验讲解内容实验一植物组织水势的测定（小液流法）1、原理（1）水分移动的总原则：从高水势到低水势。
当把植物组织分别放在一系列浓度递增的溶液中，水势越大，越易失水；水势越小，越易得水；因此，会出现三种情况：植物组织的水势＜外液的水势，组织吸水，外液（a）浓度变大植物组织的水势＞外液的水势，组织失水，外液（b）浓度变小植物组织的水势＝外液的水势，组织既吸水又失水，外液（c）水分保持动态平衡（2）据比重大小判断小液流的移动方向：为判断以上三种情况，把侵有组织的溶液进行着色，当把着色的a、b、c三种外液用针管以小液流法放回对应的原溶液中，也出现三种情况：当浓度变大的外液（a）放入原溶液中↓，说明植物组织的水势＜外液的水势当浓度变小的外液（b）放入原溶液中↑，说明植物组织的水势＞外液的水势当水分保持动态平衡的外液（c）放入原溶液中≈（不动），说明植物组织的水势＝外液的水势2、材料：毛果含笑叶；梧桐树叶；丁香花或牵牛花4、方法（选用CaCl2溶液为外液）思考题1、试述小液流法测定植物组织水势的原理。
测定中应注意什么？（1）遵照两个原理：①水分移动的总原则—从高水势到低水势。
②根据比重大小判断小液流的移动方向。
（2）测定中应注意：①取材时尽量避开叶脉和伤口、部位要一致、要迅速（以免失水），材料要混匀；②母液要均匀，不能颠倒顺序；③放小液流时不能用力过大；④观察液流方向要细心等]。
2、某组实验出现了小液流法↓↑↑↓↑的情况，请分析出现错误的可能原因。
最有可能出错的应是第四支试管。
出错的原因有以下可能：(1)在配制甲组试管溶液时，试管没有充分的摇匀；(2)在配制甲组浓度梯度溶液时，第四支试管溶液不准确，浓度过低；(3)用注射器在甲组试管中挤出小液滴时，用力过猛。
3、测定水势的方法有：小液流法；电导仪法；折射仪法。
实验二植物组织中游离氨基酸总量的测定——茚三酮显色法1.原理氨基酸(蛋白质)的游离-NH3可与水合茚三酮反应，生成蓝紫色的化合物；在一定范围内，颜色的深浅与游离氨基的含量成正比，因此，可用分光光度法测定其含量。
植物生理学实验指导张志良
植物生理学实验指导引言植物生理学是研究植物内部生物化学和物理活动的科学。
通过实验的方法研究植物的生理过程和生理功能，能够帮助我们更好地了解植物的生长发育、代谢、适应环境等方面的机制。
本实验指导将介绍几个常见的植物生理学实验，并详细说明实验的步骤和注意事项。
实验一：光合作用的测定实验目的通过测定植物光合作用的速率，了解光合作用的基本原理和影响因素。
实验材料和设备•高度光合作用活跃的绿叶片•蒸馏水•滤纸•光合色素提取液•盐酸•詹氏液•光合作用速率测定仪实验步骤1.准备一片新鲜的绿叶片，并使用滤纸将其表面的水分吸干。
2.将绿叶片放入提取瓶中，加入适量的蒸馏水，盖好瓶盖，放置在强光下静置30分钟。
3.将提取瓶中的绿叶片取出，并将其压碎，制成绿叶片提取液。
4.在一次容器中加入10ml绿叶片提取液，同时加入1ml盐酸，用詹氏液调节为酸性条件。
5.将调节好酸性的绿叶片提取液瞬时注入光合作用速率测定仪中。
6.根据测定仪的说明书进行操作，记录每个时间点下的光合作用速率值。
注意事项•实验中所使用的绿叶片应当是光合作用活跃的绿叶片，新鲜度较高。
•测定的过程中应注意光照的稳定性，以免影响光合作用速率的准确性。
•实验过程中应注意安全操作，避免盐酸和其他化学试剂的直接接触。
实验二：渗透压的测定实验目的通过测定植物细胞内外溶液的渗透压差，了解渗透压的基本原理和影响因素。
实验材料和设备•草莓或马铃薯等含有较多汁液的植物组织•单质水•盐水•倒置显微镜•毛细管实验步骤1.取一片新鲜的含有较多汁液的植物组织，如草莓或马铃薯。
2.用刀将该组织剪碎，并将碎片放入一个玻璃杯中。
3.加入适量的单质水，使植物组织完全浸泡其中，静置12小时。
4.取一根毛细管，在一端封闭后，用吸管吸取约5cm 长的盐水，并保持液柱不断。
5.将封闭端的毛细管插入玻璃杯中，并用胶带固定在较深的位置。
6.进行倒置显微镜观察，记录质点的运动情况。
7.根据质点的运动情况，判断渗透压差的大小。
(精)植物生理学实验讲义
植物生理学实验讲义目录目录 (I)实验一植物材料的无土培养及缺素症状观察（3学时） (1)实验二植物组织水势的测定（小液流法）（3学时） (2)实验三缺磷、缺铁对植物叶片中叶绿素含量影响（叶绿体色素的提取、分离及定量测定）及光合速率的测定（3学时） (3)实验四：缺素培养对叶片质膜透性及过氧化物酶活性的影响（电导率的测定&愈创木酚法测定POD酶活性）（3学时） (5)Part Ⅰ缺素培养对叶片过氧化物酶活性的影响 (5)Part Ⅱ缺素培养对叶片质膜透性的影响 (6)实验五：设计性实验：逆境胁迫下植物的适应机制研究（6学时） (7)PartⅠ蒽酮法测定可溶性糖 (7)Part Ⅱ植物体内可溶性蛋白质含量的测定（考马斯亮蓝法） (9)Part Ⅲ植物组织中丙二醛含量的测定 (11)实验一植物材料的无土培养及缺素症状观察（3学时）【实验原理】只要满足植物正常生长发育的要求(光、温、水、气、必需元素)，植物可以在水中或砂中生长。
把必需矿质元素配制成培养液培养植物称溶液培养，而把培养液加于洁净的石英砂中培养植物则称砂基培养。
由于培养液中元素的种类和数量可以人为控制，因此当要了解某种元素是否为植物必需时，只要有意识地配制缺乏该种元素的培养液，根据植物在该培养液中所表现出来的症状，便可了解该元素的作用以及对植物生长发育的必要性。
【器材与试剂】器材:，贮液塑料桶（10个)，量筒，移液管，石英砂或蛭石适量，水培设备4个移液器，酸度计，电子天平，数码相机。
试剂：硝酸钙，硝酸钾，硫酸镁，磷酸二氢钾，硝酸钠，氯化镁，硫酸钠，磷酸二氢钠，氯化钙，氯化钾，EDTA-Na2，FeSO4，CuSO4，HBO3，KI，MnCl2，ZnCl2，Na2MoO4。
HCl，NaOH，Na2ClO4或CaClO4以上试剂均需分析纯。
【方法与步骤】1.准备工作1）幼苗准备:实验用种子用漂白粉溶液灭菌半小时，用灭菌水洗几次，然后放在干净的湿石英砂中发芽，加以蒸馏水培养长至一定高度(5cm左右)。
植物生理学实验ppt课件
将植物组织分别放在一系列浓度递增的溶液中， ①植物组织的水势﹤溶液的浸透势，组织吸水而使溶液浓度
变大； ②植物组织的水势﹥溶液的浸透势，组织水分外流而使溶液
浓度变小； ③植物组织的水势=溶液的浸透势，外部溶液浓度不变。
当找到某一浓度的溶液与植物组织之间水分坚持动态平 衡时，那么可以为此植物组织的水势等于该溶液的浸透势。
液滴移动方 向
错误结果
5. 结果分析
ψw＝ψπ＝－iCRT ×1.013×0.1 〔单位：兆帕，MPa〕
i为解离系数〔蔗糖=1〕 C为等渗浓度〔mol/kg) R为气体常数0.008314 L·MPa /
两〔种m叶o片l ·的K结〕果比较分析 T为绝对温度〔273+摄氏温度〕
1.计算新颖和萎焉叶片的含水量,并进展比较分析. 2.记录不同浓度溶液中的液流方向
实验步骤
1. 取铝盒4个，依次编号〔写于铝盒底部〕并称取质量，
2. 选取生长一致的待测资料叶片数枚，用打孔器打叶圆片 120〔避开叶脉位置，新颖60枚，萎蔫叶60枚〕，立刻 装到上述铝盒内，盖上盒盖称重，
3. 将4个铝盒〔已放入30叶圆片，翻开盖子〕放在搪瓷盘 上置于105ºC烘箱中烘1-2hr至恒重，称重时需置于枯燥 器中，待冷却后称重，
4. 假设Wn ＝铝盒重， FWn ＝铝盒＋叶圆片 ，
5.
DWn ＝烘干后的铝盒＋叶圆片；
6. 5. 植物组织含水量为： 〔FWn -DWn〕/〔FWn - Wn〕 x100
二) 植物组织水势的测定
1. 实验目的
1)学习小液流法间接测定植物组织水势的方法； 2)测定不同生0.05 0.1 0.2 0.3 0.4 0.5 (mol ·L-1)
植物生理学实验(考研复试专用)
植物生理学实验讲义吴恩岐内蒙古师范大学生命科学与技术学院2007.4实验1 植物组织水势的测定（小液流法）一、目的学会用小液流法测定植物组织的水势二、材料用具及仪器药品花生叶片、试管、移液管（10ml, 0.1ml）、吸球、镊子、小方块、钻孔器、牙签、玻棒、蔗糖、次甲基蓝三、原理当把植物组织或细胞放在溶液中时，两者便会发生水分交换。
如果植物组织（或细胞）的水势低于溶液的水势，组织（或细胞）则吸水，使外溶液浓度增大，比重也增大；若植物组织（或细胞）的水势高于溶液的水势时，组织（或细胞）则失水，使溶液的浓度变小，比重也变小；如果植物组织（或细胞）的水势与溶液的水势相等时，外溶液的浓度不变，其比重也不变，若把浸过组织的溶液慢慢滴回同一浓度而未浸过组织或细胞的溶液中。
比重小的液流便往上浮，比重大的则往下沉。
如果小液流停止不动，则说明溶液的浓度未有发生改变。
此溶液的渗透势（水势）即等于所测组织（或细胞）的水势。
根据溶液的浓度，可以用公式（ψs=-CiRT）, 计算出溶液的渗透势（ψw so1=ψs so1）ψs表示渗透势。
R表示气体常数：0.0083 MPa·l/mol·K。
T表示绝对温度，即273+实验时(℃)i表示解离系数。
四、方法步骤1．将1mol/L蔗糖溶液的母液分别配成0.1、0.2、0.3、 0 4、0.5、0.6mol/L的蔗糖溶液各10ml，分别注入6支大试管中，摇匀。
2．从上述的大试管中各取2ml溶液，分别放到另6支小试管中，各试管塞上软木塞。
3．用钻孔器钻取叶圆片（花生叶、菠菜均可），依次分别在小试管的蔗糖溶液中各放入叶圆片40片（钻孔器的直径为6mm），叶圆片要全部浸在溶液中，塞上塞子，每隔5分钟摇动一次。
4．30分钟后，用牙签取次甲基蓝结晶少许，分别投入小试管中，摇匀。
5．用0.1ml的移液管从小试管中吸取溶液约0.1ml，然后将之插之相对应浓度的大试管中的中部，慢慢放出蓝色液，并观察记录小液流的流向，从中找出小液流停止不动的该溶液的浓度（每一浓度配备0.1ml移液管一支）。
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植物生理学实验讲义
福建农林大学林学院
2011年09月
实验一植物组织水势的测定(小液流法)
一实验目的意义及要求
植物细胞之间、组织之间以及植物与外界环境的水分移动均由水势大小决定。
因此，测定水势是研究水分关系的重要手段。
可利用水势为指标来确定作物的灌溉、施肥的适宜时期。
本实验要求掌握水势的测定方法，以及不同植物及组织之间水分的变动状况二原理
当植物组织放于溶液中时，细胞与溶液之间会发生水分交换，如果细胞的水势小于溶液渗透势，则细胞吸水，而溶液水分减少变换。
反之，则因细胞内水分外流使溶液变稀：当组织的水势与溶液渗透势相等时，则二者保持水分平衡，此时溶液的渗透势即等于植物组织水势。
利用溶液的浓度与比重成正比的原理，把经过水分变换后的溶液用毛细管移入原来相应浓度的溶液中，则因比重的改变，“小液流”就会出现上升或下沉，静止不动者，可为其渗透势等于细胞的水势。
三材料、设备与试剂
树木叶子、蔗糖、甲烯兰、刻度试管、天平。
四实验方法：
1、用1M的蔗糖溶液配制0.1、0.
2、0.
3、0.
4、0.5M的溶液各10ml,，分置于两个
5ml刻度试管中。
2、选择代表性的植物叶片，剪成0.8cm的方块，往每个试管中放入10块，使叶片完
全浸入溶液中，期间振动数次，20分钟后，往每个试管中加入甲烯兰一滴。
五结果计算。
找出等渗浓度，由下式计算组织的水势
Ψ＝－CIRT
式中：C为等渗浓度
I为等渗系数
R为气体常数＝0.0083
T为绝对温度
实验二叶绿素含量的测定(分光光度法)
一实验目的、要求
学习分光光度计的使用方法及叶绿素含量的测定方法。
二实验原理
在一定溶液中的一定溶质具有特定吸收光谱，无论溶液的浓度如何变化，其吸收光谱中最高吸光波的波长总是恒定的，对于混合液，其中各个溶质的吸收光谱的最大值位置常是互不相同，所以在各个特有吸收最大值处进行各个溶质的定量分析，不致引起互相干扰。
因此，应用分光光度法进行物质的定量分析，不但精确、灵敏，而且可以在同一混合液中分析各溶质的含量。
叶绿素a、b在长波处的吸收峰分别位于663mu和645mu，在该波长时叶绿素a、b的比吸收系数为已知，即可列出浓度C与光密度D之间的关系式。
C a=12.7D663-2.69D645
C b=22.9D645-4.68D663
C＝C a＋C b
三实验仪器设备
721分光光度计、天平、研砵、漏斗、带塞刻度试管
四方法、步骤
1 叶绿素提取
称取新鲜叶片0.02克，剪碎，在研砵中加入少量95%酒精和少许碳酸钙粉末，充分研磨。
将上清液沿玻璃棒倒入漏斗过滤入10ml带塞刻度试管中，并用酒精浸提直至残渣成白色，此时再用少量酒精洗滤纸（使叶绿素尽可能被全部收集），量后定容至刻度。
2 叶绿素的测定
将叶绿素提取液倒入比色杯中，在波长645、663mu处测量并记录OD值，以95%酒
精为空白对照。
重复二次，取平均值。
叶绿素a含量（mg/g鲜重）＝C a V/1000W
叶绿素b含量（mg/g鲜重）＝C b V/1000W
叶绿素总量（mg/g鲜重）＝（C a+C b）V/1000W
式中：V为提取液定容体积（ml）
W为提取叶片的鲜重（g）
实验三用电导仪测定逆境对植物细胞透性的影响
一实验原理
活细胞的原生质具的半透性，当细胞受逆境（低温、干旱、高温）影响后，细胞膜系统被破坏，细胞内的物质向外渗出，如果将植物材料放入水中，水的电导度便随着溶质的渗出而增加，在一定时间内溶质的渗出量的多少可以作为判断植物抵抗逆境的能力，因此，通过电导率的变化，便能比较不同树种的抗逆性。
二实验仪器、材料
电导仪、温箱、冰箱、真空干燥器、恒温水浴锅
植物叶片或枝条
三实验步骤
1 选取植物上相同部位的叶片，用纱布擦干净，分别进行以下处理。
①放入冰箱中冷冻30分钟（低温处理）
②放入800C水浴中10分钟（高温处理）
③在室内萎蔫1－2小时（干旱处理）
④将枝条插入水中，不经任何处理，作为对照。
⑤ SO2熏蒸（浓度:0.4ppm）1小时。
2 用镊子取出年理材料，用蒸馏水冲洗二次，再用干净吸水纸吸去表面的水，再用打孔器打下圆叶片15片，放入试管中。
加入重蒸馏水5ml.
3 将各试管放入真空干燥器内，抽气（约8－10分钟），再向真空干燥器中慢慢放入空气，使水分渗入叶片内。
4 取出试管，待叶片浸半小时后分别测定电导度。
四结果处理
实验四过氧化物酶活性的测定
过氧化物酶是植物体内普遍存在的、活性较高的一种酶，它与呼吸作用、光合作用及生长素的氧化等都有密切关系，在植物生长发育过程中，它的活性不断发生变化，因此测量这种酶，可以反映某一时期植物体内代谢的变化。
通过本实验了解过氧化物酶的作用，掌握常用的测定过氧化物酶的方法——愈创木酚法。
一、原理
在过氧化物酶（peroxidase）催化下，H2O2将愈创木酚氧化成茶褐色产物。
此产物在470nm处有最大光吸收故可通过测470nm下的吸光度变化测定过氧化物酶的活性。
二、材料、仪器设备及试剂
（一）材料
树木叶子
（二）仪器设备
722型分光光度计，离心机，研钵，容量瓶，量筒，试管，吸管。
（三）试剂
（1）0.05mol/LPH5.5的磷酸缓冲液。
（2）0.05mol/L愈创木酚溶液。
（3）2%H2O2
三、实验步骤
（一）酶液的制备
取0.5g干净树木叶子剪碎，放入研钵中，加适量的磷酸缓冲液研磨成匀浆。
将匀浆液全部转入离心管中，于4000g离心10min，上清液转入（或匀浆过滤）10mL容量瓶中，定容至刻度，低温下保存备用。
（二）在过氧化物酶活性测定
酶活性测定的反应体系包括：2.9mL0.05mol/L磷酸缓冲液；1.0mL2%H2O2；
1.0mL0.05mol/L愈创木酚和0.1mL酶液，于471nm波长下比色，每隔1min记录依次吸波度，共记录5次，然后以每分钟内A470变化0.01为1个酶活性单位（u）。