生理盐水直接涂片法检测寄生虫卵
大便常见虫卵检查
大便常见虫卵检查【操作人员】经批准人授权的同志。
【部门主管】【质量控制员】【目的】保证测试结果的准确性。
【该SOP变动程序】该标准操作程序的更改，可由任一使用本程序的操作人员提出并报请专业主管及科主任签字后生效。
【应用范围】大便常见寄生虫卵检查的手工操作。
【标本采集】要取得准确的结果，粪便必须新鲜，送检时间一般不宜超过24小时。
如检查肠内原虫滋养体，最好立即检查。
盛粪便的容器要干净，并防止污染与干燥；粪便不可混杂尿液等，以免影响检查结果。
【项目检查】1. 蛔虫卵检查方法：粪便生理盐水直接涂片法。
方法简便，连续作3次涂片，可提高检出率。
操作步骤：（1）在洁净的载玻片中央，滴1滴生理盐水。
（2）用牙签取少许粪便，在生理盐水中涂抹均匀，制成薄涂片。
涂片的厚度以能透过涂片看清书上的字迹为宜。
（3）加盖片，先在低倍镜下有顺序地检查，找见虫卵后再转用高倍镜，仔细观察虫卵形态。
注意事项:（1）涂片要均匀，粪膜的厚薄适宜。
涂片的厚度以透过涂片略能辨认书上字迹为宜。
（2）加盖片时，先以盖片一边接触液面，慢慢倾斜盖下，以免出现气泡。
（3）应注意虫卵与粪便中异物的鉴别。
虫卵都具有一定形状和大小；卵壳表面光滑整齐，具固有色泽；卵内含卵细胞或幼虫。
（4）将用过的竹签、载玻片、盖片分别泡于消毒缸中（2%～3%煤酚皂），以便统一清洗、消毒、避免污染实验室。
危害：蛔虫是人体最常见的寄生虫之一，寄生于小肠，可引起蛔虫病。
幼虫经肠、肝、肺组织移行可引起损伤，局部和全身的变态反应。
肺部炎症，亦称Loeffler综合征。
成虫的危害：（1）掠夺营养影响吸收，致食欲不振、脐周疼痛、营养不良。
儿童可引起发育障碍。
（2）变应原作用，如荨庥疹、皮肤瘙痒、血管神经性水肿、结膜炎等。
（3）常见的并发症，引起胆道蛔虫症、胰腺炎、阑尾炎、肠梗阻、穿孔等。
2. 钩虫卵检查方法：饱和盐水浮聚法。
操作步骤：（1）加少量饱和盐水于浮聚杯（高3.5cm，直径约2cm的圆形直筒瓶）内，约达浮聚杯高的1/5～1/4。
25寄生虫基本检验方法操作规程
寄生虫基本检验方法操作规程第1版第1次修订实施日期：2011年5月1日1、目的依据《寄生虫病检测检验技术》-2005建立寄生虫基本检验技术检验方法操作规程，保证测定结果的准确性。
2、适用范围本法适用于常见寄生虫检验测定。
3、责任使操作者熟悉本规程，并在具体样品检验中，严格遵照操作，确保检测结果准确。
4、内容1一般检查法1．1粪便的检查粪便检查是确定肠道寄生虫病诊断的最主要的方法，也是属于临床化验室常规检查的方法之一。
1．1．1直接涂片法此法用于检查虫卵、滋养体和包囊。
为了避免遗漏，一般需连续检查三张涂片。
此法的优点是操作简便，迅速。
缺点是阳性率较低，视野中杂质较多，虫卵或原虫少时不易查到。
1．1．1．1生理盐水涂片法：操作方法（1）取洁净的载玻片一张，于中央滴1~2滴生理盐水。
（2）用便签挑取约火柴头大小的一块粪便（约0.1g），置盐水中涂抹均匀，成半透明的混悬液，其厚薄以透过书上的铅字为宜，如果太厚阻碍光线的透过，太薄则影响检查效果（必要时加盖玻片）。
（3）先用低倍镜观察，从边缘开始来回顺序推动移动器，仔细寻找虫卵。
（4）找到虫卵后，应将虫卵移至视野中央，辨认是何虫卵（必要时可换高倍镜进一步观察）。
注意事项：（1）检查痢疾阿米巴原虫时，要挑取带有脓血的粪便。
（2）检查原虫包囊时，所取的粪便应再少一些，粪膜涂的再薄一些，否则包囊不易找到。
（3）检查原虫滋养体时，要注意保温，避免化学药品和尿的污染，影响滋养体伪足的运动。
（4）防止涂片变干，可随时滴加生理盐水。
一般不用油镜观察。
（5）某些植物细胞很像虫卵，是要加以鉴别，植物细胞的内部结构不象虫卵那样规则，外形多扁平，用嘴轻吹时，植物细胞往往易翻动或变形。
（6）要注意虫卵与人类酵母菌的区别，很易与包囊混淆，酵母菌为无色圆形或卵圆形小体，大小不一，内含一个较大的透明体，其四周有狭窄的细胞浆，浆内含有少数折光形小体和核，有时透明体偏于一边。
如用蒸馏水稀释粪便涂片，酵母菌即被裂解消失，而原虫包囊仍存在。
64.2粪便显微镜检查教你读懂化验单
（六）结晶
• 病理性结晶有：
①夏科-雷登结晶
无色透明的菱形结晶，两端尖长，大小不等，
折光性强，多见于阿米巴痢疾、钩虫病及过敏性
肠炎的粪便中，同时可见到嗜酸性粒细胞
②血晶
棕黄色或红色斜方形结晶，
见于胃肠道出血后的粪便
③脂肪酸结晶
阻塞性黄疸的粪便
夏科-雷登结晶（染色标本）
谢 谢！
（一）细胞
4．上皮细胞
•生理情况下少量脱落的肠上皮 细胞大多被破坏，粪便中不易 见到。
•上皮细胞数量增多，见于结肠 炎症、伪膜性肠炎等。
上皮细胞（染色标本）
（二）寄生虫卵
• 粪便显微镜检验是诊断肠道寄生虫感染最直接和最 可靠的方法。
受精型蛔虫卵
未受精型蛔虫卵
鞭虫卵
（二）寄生虫卵
钩虫卵
肝吸虫卵
日本血吸虫卵
原虫等，再用高倍镜
仅看到一个某种细胞
偶见
观察细胞及其他病理 成分，发现虫卵报告
有时不见细胞，最多见到2～3个
0～3
“找到某某虫卵”， 细 最少可见5个细胞，最多10个
5 ～ 10
胞要观察10个以上的
高倍视野，以半定量
大多超过10个以上细胞
多数
的方式报告。
细胞均匀布满视野不能计数
满视野
参考区间
• 无红细胞 • 不见或偶见白细胞 • 无寄生虫卵 • 可见少量食物残渣
生理盐水涂片镜检法
• 于清洁载玻片上滴加1～ 2滴生理盐水，用竹签挑取 少许肉眼即见异常的粪便 或从成形便表面/深处多处 取材，与盐水混合均匀制 成薄片，加上盖玻片镜检。
一、制片和结果报告方式
• 镜检细胞报告方式
全片，检查有无虫卵、 10个以上高倍镜视野所见 报告方式(/Hp)
综合性实验
粪便检验
一般性状检查
1．量 2．颜色与性状 （1）稀糊状或水样便：见于各种感染性和非感染性腹泻
(diarrhea )。 （2）粘液便(mucous stool)。 （3）脓性及脓血便(pus and blood stool)：肠道下段病变。 （4）冻状便：肠易激综合征（IBS）性菌痢病人。
12
15
白细胞正常粪便中不见或偶见，多在带粘液的 标本中见到，主要是中性分叶核粒细胞。肠炎进一 般少于15个/HPF，分散存在。具体数量多少与炎症 轻重及部位有关。小肠淡症时白细胞数量不多，均 匀混于粪便内，且因细胞部分被消化而不易辨认。 结肠炎症如细菌性痢疾时，可见在量白细胞或成堆 出现的脓细胞，亦可见到吞有异物不小吞噬细胞。 在肠易激综合征、肠道寄生虫病(尤其是钩虫病胶阿 米巴痢疾)时，粪便涂片洌还可见较多的嗜酸性粒细 胞，可伴有夏拉莱登结晶。
2．注意事项： （1）可在直接涂片法标本上加碘液制作，也可以碘液 代替生理盐水然后按直接涂片制作； （2）及时观察，碘染才佳。
4
（三）饱和盐水浮聚法
1．操作方法：
用竹签取约花生米大小的粪便置漂浮管内（青霉素瓶 代替亦可），加入饱和盐水少许（约为容器1/3）以竹签 将粪便充分调匀,再加入饱和盐水接近管口，除去粗大的 粪渣（放在教师指定的位置），然后以吸管慢慢滴加饱和 盐水至液面略高于管口但不溢出为宜，静置20分钟后，在 管口盖一载玻片，使之与液面接触片刻，两手不离开玻片， 然后将载玻片向上提起并迅速翻转，加盖片，置中倍镜观 察后再转高倍镜观察。
操作方法：于载玻片中央滴加
1~2滴生理盐水（检查原虫的活动期 虫体须用生理盐水，如单纯检查蠕虫 卵可用自来水或其它清洁水滴，有时 检查某些原虫包囊须用碘液）用竹签 挑取粪便少许(约绿豆大)置水滴中涂 抹均匀,直径约2厘米,剔除大颗粒和纤 维，粪膜厚度以透过涂片约能辩认书 上的字迹为宜,置中倍镜观察后再转 高倍镜观察。
动物体内常见寄生虫卵的检查+
d)血吸虫(吸虫纲一多有腹背扁平,舌状 或叶状,有吸盘,雌雄异体,常见的有日本 血吸虫等。) 虫卵为椭圆形,淡黄色。大小约74106×55-80微米,卵壳较薄无盖,壳的一 侧有小棘,一般在镜下不易见到。成熟的 卵内含有一个毛蚴。
注意事项
1.高倍镜下观察必须加盖玻片；
2.采用直接涂片法时，不要涂得太多， 必须分散开，均匀； 3.观察寄生虫卵前，需在高倍镜下校对 目镜每格的长度，才能算出虫卵大小； 4.先在低倍镜下观察，发现后换为高倍 镜。
各种虫卵的区别形,大小约40-60微米(35-50×4576),卵壳的表面有一层凸凹不平的蛋白质膜,被胆汁 染成棕黄色,整个虫卵呈棕黄色。卵壳厚而透明。 卵内有一近圆形的卵细胞。 未受精卵多为长椭圆形,大小约40一60微米(3940×88-94),卵壳与蛋白质膜较薄,卵内充满大小不 等的屈光颗粒。 无论受精卵和未受精卵其蛋白质膜有时缺失,无 蛋白质膜的受精卵是无色透明,请注意与其它虫卵 的区别。
2)虫卵收集法 a. 沉淀集卵法:取粪便加适量清 水,混匀后过滤,重复数次至液体清亮为 止,静止沉淀十分钟后,取底部沉淀物作 镜检。此法适于检查血吸虫卵。 b.饱和盐水漂浮法:利用虫卵的比 重小于饱和盐水的原理,使线虫卵和几 种绦虫卵或包囊漂浮于液面上,提高检 查效果。
实验过程
1)自然感染蠕虫的调查 取猕猴粪便在盛有生理盐水的培养皿 中漂洗,直接查找寄生虫虫体和虫卵,根据虫 体和虫卵的形态,签别虫种。 2)直接涂片法或沉淀集卵法检查寄生虫卵 3)观察蛔虫、蛲虫、绦虫和血吸虫卵标本 装片 注意:观察各种虫卵的大小、形状、颜色、 卵膜结构等。
b)蛲虫(线虫纲：虫体细小,乳白色,似一白色 线头。)
虫卵为椭圆形,两侧不对称,一侧扁平,一侧 稍凸。大小约25-55微米(20-30×50-60),卵壳 较厚,无色透明,内含幼虫。
两种方法检测肝吸虫虫卵的效果比较
两种方法检测肝吸虫虫卵的效果比较发表时间：2019-12-04T11:39:50.167Z 来源：《中国医学人文》(学术版)2019年第11期作者：宋秋玲代娇段慧英通讯作者[导读] 生理盐水直接涂片法、改良加藤氏厚涂片法都能用于肝吸虫虫卵检测，但是改良加藤氏厚涂片法对应检出率更高。
曲靖医学高等专科学校云南曲靖 655000【摘要】目的：探究不同检查方法对肝吸虫虫卵的检出效果。
方法：研究时间：2019.1-6，选取100例粪便标本，并分别采取生理盐水直接涂片法、改良加藤氏厚涂片法实施检测，回顾分析检出结果。
结果：生理盐水直接涂片法对肝吸虫虫卵检出率小于改良加藤氏厚涂片法，P＜0.05，有统计学意义。
结论：生理盐水直接涂片法、改良加藤氏厚涂片法都能用于肝吸虫虫卵检测，但是改良加藤氏厚涂片法对应检出率更高。
【关键词】肝吸虫虫卵；生理盐水直接涂片法；改良加藤氏厚涂片法；检测价值肝吸虫病是由于华支睾吸虫寄生于人体的肝内胆管，从而引起一系列临床不适的一种慢性蠕虫性传染病，属于丙类传染病[1]。
肝吸虫病的早期检查诊断可用方法较多，比如采集胆汁找虫卵，免疫学检查方法中的皮内试验、对流免疫电泳等，通过对肝吸虫虫卵的检出可直接用于肝吸虫病的诊断[2]。
为明确不同方法在肝吸虫虫卵检测方面的应用效果，并根据研究结果指导肝吸虫虫卵的早期检出。
本文对不同方法检测肝吸虫虫卵资料回顾分析如下：1、资料与方法1.1一般资料研究时间：2019.1-6，选取100例粪便标本，包括男性患者48例，女性患者52例，年龄：10-78岁、平均年龄（37.92±6.26）岁。
所选研究对象近期均没有使用相关药物治疗。
不同人员均采集１份标本。
1.2方法日本Olympus光学显微镜、恒温水浴箱、透明液、透明液中浸泡24h以上的亲水性透明玻璃纸、80-100目/25.4mm尼龙纱网、塑料定量板、刮片等。
每例患者的粪便标本分成两份，分别进行生理盐水直接涂片法和改良加藤氏厚涂片法检验。
排泄物与分泌物等的寄生虫病原检查技术
排泄物与分泌物等的寄生虫病原检查技术一、痰液痰中可能查出卫氏并殖吸虫卵、溶组织内阿米巴滋养体、棘球蚴的原头蚴、蛔蚴、钩蚴、尘螨等。
（一）卫氏并殖吸虫卵检查可先用直接涂片法检查，如为阴性，改为浓集法检查，以提高检出率。
直接涂片法：在洁净载玻片上先加1~2滴生理盐水，挑取病人早晨醒来后用力咳出的气管深处的少许痰液，最好选带铁锈色的痰，涂成痰膜，加盖玻片镜检。
如未发现卫氏并殖吸虫卵，但见有夏科-莱登晶体，提示可能是卫氏并殖吸虫感染者，应做多次检查或改用浓集法。
消化沉淀法（浓集法）：收集患者24小时痰液，置烧杯中，加等量10%NaOH溶液，用玻棒搅匀后，放入37℃温箱中，数小时后放入离心管内，以1500r/min离心5~10分钟，取沉渣数滴涂片检查。
（二）溶组织内阿米巴滋养体检查取新鲜痰液做生理盐水涂片，天冷时应注意镜台上载玻片保温，在镜下观察有无做伪足运动的原虫。
（三）其他上述其他蠕虫幼虫及螨类等宜用浓集法检查。
二、十二指肠引流液十二指肠引流液通常是十二指肠液（D液）、胆总管液（A液）、胆囊液（B液）和肝胆管液（C液）的总称。
用十二指肠引流管抽取十二指肠液，由于标本来自不同部位，其色泽、性质也不相同，按抽取液体的先后依次装在四个容器中，其中对肝胆系统寄生虫病有诊断意义是来自胆囊的胆液（B液），色泽呈深黄绿色。
将各部分十二指肠引流液分别滴于载玻片上镜检。
也可离心浓缩后，取沉渣镜检，即将引流液加适量生理盐水稀释混匀后，，分装离心管内，以2000r/min离心5~10分钟，吸取沉渣涂片镜检。
十二指肠引流液主要适用于检查篮氏贾第鞭毛虫滋养体、华支睾吸虫卵、姜片虫卵、肝片吸虫卵等。
三、尿液取尿液3~5ml，离心（1500~2000r/min）3~5分钟后，取沉渣镜检。
乳糜尿则需先加等量乙醚，用力振荡，使脂肪溶于乙醚，吸去脂肪层后，再加水离心，取沉渣镜检。
可查见阴道毛滴虫、微丝蚴等。
四、鞘膜积液鞘膜积液主要检查班氏微丝蚴。
粪便显微镜检查概要
一、直接涂片法
【目的】 掌握粪便显微镜检查直接涂片法， 熟悉粪便中各种病理成分的形态特点。 【原理】 用生理盐水将粪便涂成薄片，在 显微镜下根据粪便中各种细胞、寄生虫卵、 食物残渣、结晶等病理成分的形态特征进 行观察，并计算数量报告。
【操作】 1．制备涂片 2．显微镜观察 3．报告方式
【操作】 1．制备粪便混悬液 2．加入饱和盐水 3．制片 4．镜检
【注意事项】 1．浮聚瓶要平整，瓶高约3～4cm，直径约 2cm的圆形直瓶。载玻片必须清洁，覆盖在 浮聚瓶上时不能产生气泡。 2．本法用以检查钩虫卵效果最好, 也可用 于检查其他线虫卵和微小膜壳绦虫卵。但 不适于检查吸虫卵和原虫包囊，因可致其 变形。
【注意事项】 1．由于钩虫卵和某些原虫包囊比重较小， 故效果较差，应注意选择应用。 2．试剂检查时取汞醛液2.35ml及5％卢戈 氏液0.15ml混合备用。混合液在8h后即变质， 不能再用，碘液亦不宜于1w后再用。
（二）饱和盐水浮聚法 【原理】 利用比重较大的液体，使原虫包 囊或蠕虫卵上浮，集中于液体表面，以载 玻片粘附虫卵进行检查。
【操作】 1． 打启电源 2．进入主操作界面 3．进入基本界面 4．进入镜检界面 5．准备标本 6．吸入粪便沉渣 7．显示图像 8．输入结果 9．打印报告单 10．查询报告单
二、虫卵及包囊浓聚法
（一）沉淀法 【原理】 原虫包囊和蠕虫卵的比密大，可 沉淀浓集于容器底部有助于提高检出率。
【操作】 1．离心沉淀法： （1）制备粪便混悬液 （2）过滤去渣 （3）离心混悬液 （4）制片镜检 2．汞碘醛离心沉淀法 （1）制备粪便混悬液 （2）过滤去渣 （3）离心混悬液 （4）制片镜检
三、粪便分析工作站检查法
【目的】 熟悉粪便分析工作站检查的方法，了解 粪便分析工作站检查法的工作原理。 【原理】 粪便分析工作站内置数码位相差显微镜， 利用光学原理提供位相差和平场光两种视场来观 察粪便有形成分的立体和平面结构，通过计算机 数据处理，在成像系统下进行文字、图像的传输、 再打印的粪便检查报告单（包含肠道寄生卵、幼 虫；原虫、细胞；食物残渣等图像结果）。 该系统还可通过微电脑控制台进行自动吸样、染 色、混匀、重悬浮、把粪浓缩液输送到标准的流 动计数室内观察、分析后自动冲洗。
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实验者：杨昆霖学号：90801106 班级：08级临床一班指导教师：程眉荪生理盐水直接涂片法检测寄生虫卵
一、实验目的：
1、学习寄生虫病粪便检查的各种方法。
2、操作并掌握其中的生理盐水直接涂片法。
二、实验原理：
粪便检查是消化道寄生虫病最常用、最重要的手段。
检查消化道寄生虫病的方法也有很多，对不同的寄生虫病宜采用相应的病原学检查方法。
其中，生理盐水直接涂片法是检查蠕虫虫卵和原虫滋养体的主要方法。
生理盐水直接涂片法是一种用新鲜粪便直接涂片、镜检的简便快速的诊断方法。
三、实验材料及器材：
1、新鲜的病人粪便，生理盐水。
2、载玻片，盖玻片，小木棒，平皿，培氏皿，镊子，烧杯，盆，塑料杯，塑料袋，胶帽吸管，离心管，试管，纱布，脱脂棉，粪筛，搪瓷缸，胶塞，光学显微镜等。
四、实验步骤：
1、取洁净载玻片一张，在玻片中央滴1~2滴生理盐水。
2、用小木棒挑取黄豆大小的粪便少许，在载玻片的生理盐水中涂匀成粪膜，加盖玻片、镜检。
加盖玻片时先将盖玻片的一端接触液面，然后轻轻放下，若盖玻片一端还有多余的液体，可在加盖一个盖玻片。
加盖片时注意避免空泡。
（直接涂片法示意图）
3、粪膜的厚度以透过粪膜可以看到载玻片下的教材上的字迹为准。
4、镜检前，先将光线调在合适的亮度，不宜过亮或过暗；一般来说，线虫卵色彩较淡，镜检时视野宜稍暗一些（聚光器下移）。
观察时，先在低倍镜下观察，每个视野都要详细搜寻。
为了避免遗漏，可以按一定的方向推进搜寻。
遇到疑似的虫卵结构再转换成高倍镜仔细辨认。
注意虫卵与粪便异物的区别。
虫卵都具有一定形状和大小，大部分卵壳表面光滑整齐，具固有的色泽；卵内含卵细胞或幼虫。
5、制备好的涂片不能干燥，否则不易观察虫卵。
6、镜下观察使注意不要污染显微镜的载物台和镜头。
7、检查完毕将涂片放到指定的收集盆里。
五、实验结果
镜下发现不同视野里有受精蛔虫卵若干，以及大量未消化的食物残渣，植物纤维等。
六、实验讨论
生理盐水直接涂片法是一种检查蠕虫虫卵和原虫滋养体的方法。
优点是简便、易行、快速、适合于虫卵量大的粪便检查；缺点是对虫卵含量低的粪便检出率低。
因此在实际工作中，为了提高镜检的检出率，需多检几片（一般相同的粪便标本连续做三张涂片）。
七、注意事项
1、检查的粪便要新鲜。
2、在挑取粪便时要适量，太少可能检查不出虫卵，太多则可能影响观察视野的光线也不易看出虫卵。
3、检查过程中注意不要污染实验台或是其他设施，检查完的涂片标本要放在指定的地方集中处理。