秋水仙碱分析方法的研究概述
百合中秋水仙碱的分离应用研究

百合中秋水仙碱的分离应用研究百合科植物是一种具有重要药用价值的植物,其中百合中秋水仙碱(Lycorine)是一种生物碱,具有多种生物活性,如抗肿瘤、抗炎、抗菌等。
因此,对百合中秋水仙碱的分离纯化及应用研究具有重要意义。
本文主要探讨百合中秋水仙碱的分离方法及其在药物研发中的应用。
在本研究中,我们采用了实验室常用的层析法和吸附分离法来分离百合中秋水仙碱。
将百合植物材料进行预处理,提取出含有生物碱的部位。
随后,通过层析法和吸附分离法对提取液进行分离纯化,得到纯度较高的百合中秋水仙碱。
实验结果表明,采用层析法和吸附分离法分离百合中秋水仙碱具有较好的效果。
分离得到的百合中秋水仙碱纯度较高,且回收率满意。
吸附分离法相比层析法具有更快的分离速度和更高的分辨率,但层析法在分离过程中可以对样品进行更好的控制和优化。
本文对百合中秋水仙碱的分离方法及其应用进行了研究。
结果表明,层析法和吸附分离法均可以成功分离百合中秋水仙碱,且得到的产品纯度较高。
然而,两种方法各有优缺点,吸附分离法在分离速度和分辨率方面具有一定的优势,而层析法在样品控制和优化方面表现较好。
在未来的研究中,可以进一步探索其他分离方法,提高百合中秋水仙碱的分离效率和纯度,并将其应用于药物研发领域,发掘其更多药用价值。
摘要本文研究了百合中秋水仙碱的分离及结构表征。
通过溶剂萃取法和结晶法成功分离出百合中秋水仙碱,并采用X射线单晶衍射和光谱分析对其结构进行了表征。
结果表明,百合中秋水仙碱具有独特的化学性质和构效关系,对药物研发具有重要意义。
关键词:百合,秋水仙碱,分离,结构表征,构效关系引言百合是一种常见的药用植物,具有养阴润肺、清心安神等功效。
秋水仙碱是百合中的一种重要生物碱,具有抗肿瘤、抗炎、抗氧化等多种生物活性。
然而,关于百合中秋水仙碱的分离及结构表征方面的研究尚不多见。
因此,本文旨在探讨百合中秋水仙碱的分离及结构表征,为深入了解其药效成分和药物研发提供实验依据。
HPLC法测定秋水仙药材中秋水仙碱的含量

・
药 物 研 究
T h e me d i c i n e s t u d y
1 0・
C h i n e s e j O U 1 T I a ]o f e t h n o me d i e i n e a n d e t h n o p h a r m a c y
为4 . 5 8 %。
任公司 、新疆华康药业股份有限公司提供。
2 方法 与结果
2 . 1 秋水仙提取分离
取秋水仙粉末 ( 过 3号筛 )2 g ,精
2 . 2 . 9 专 属性试验
将 制得 的供试品溶液 、空 白溶液和 秋
密称定 ,置具 塞锥形 瓶 中 ,精密加 入 0 . 0 3 mo l / L的盐 酸 乙 醇溶液 ( 2 . 7 —1 0 o )2 0 m l ,振 荡 1 5 m i n ,放置 2 4 h ,滤 过 ,
5次 ,结果 秋水 仙 峰面 积 的 R S D值为 0 . 5 6 % 。结果 表 明 , 供试 品溶液室温下 2 4 h内稳定。 2 . 2 . 8 加样 回收试验 精密称取 已测定 的秋水仙药材供 试
物制品检定 所) 。 甲醇为色谱纯 ,水 为去 离子水 ,其余试剂 均为分析纯。1 O批秋水仙 C o l c h i c u m a u t u m n a l e L 供试 品药
材分别从伊朗 、巴基 斯坦进 口,由新 疆维吾 尔药业 有 限责
品6 份 ,每份 0 . 5 g ,另取 0 . 2 4 6 8 m g / m l 秋水 仙碱 对照 品溶
液l m l ,因所用秋 水仙 对 照品含量 为 9 3 . 0 % ,实 际加 入量
为0 . 2 2 9 5 m g / m l ,按 供试 品 溶液制 备 方法 同法 操作 ,进样 量1 0 。结 果 秋 水 仙 碱 平 均 回 收 率 为 1 0 3 . 5 7 % ,R S D
秋水仙碱的研究与应用进展

未来,黄花菜与秋水仙碱的研究将更加深入,其应用领域也将不断拓展。可 以进一步探索黄花菜与秋水仙碱的生物活性机制,为其在医药、食品和化工等领 域的应用提供更加科学的依据。此外,可以研究黄花菜与秋水仙碱的相互作用及 其对机体代谢的影响,为新药开发和临床应用提供新的思路和方法。
结论
黄花菜与秋水仙碱是具有广泛生物活性的天然产物,在医药、食品和化工等 领域具有广泛的应用前景。近年来,随着科学技术的发展,关于黄花菜与秋水仙 碱的研究取得了显著的进展,但仍存在一些问题需要进一步研究。今后的研究方 向应包括深入探索黄花菜与秋水仙碱的生物活性机制、拓展其应用领域以及开发 新的提取和测定方法等。
ห้องสมุดไป่ตู้、治疗心血管疾病
近年来,越来越多的研究表明,秋水仙碱具有保护心血管的作用。它可以通 过抑制炎症反应、减少氧化应激等途径,改善心肌细胞功能,对心肌梗死、心律 失常等心血管疾病具有一定的治疗效果。
秋水仙碱的研究方法
1、传统研究方法
传统研究方法主要包括动物实验和临床试验。动物实验多用于探讨秋水仙碱 的体内药理作用及毒性,而临床试验则主要用于验证秋水仙碱在人体中的疗效和 安全性。然而,传统研究方法具有实验周期长、成本高等局限性。
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参考内容
引言
黄花菜和秋水仙碱都是具有广泛生物活性的天然产物,在医药、食品和化工 等领域具有广泛的应用前景。近年来,随着科学技术的发展,关于黄花菜与秋水 仙碱的研究取得了显著的进展。本次演示将综述近年来黄花菜与秋水仙碱的研究 进展,包括提取与测定方法、生理活性和药理作用以及应用领域等方面,并探讨 存在的问题及今后的研究方向。
文献综述
自20世纪初以来,国内外学者对黄花菜和秋水仙碱进行了广泛的研究。早期 的研究主要集中于它们的化学成分和药用价值,而近年来则更多地于其生理活性 和药理作用。此外,随着分析技术的不断发展,提取和测定黄花菜与秋水仙碱的 方法也得到了不断改进和完善。
秋水仙碱治疗白塞病25例疗效观察

秋水仙碱是一种常用的抗痛风药物,其主要作用机制 是抑制尿酸的产生和吸收,从而缓解痛风症状。近年 来,一些研究表明秋水仙碱还具有抗炎、免疫调节等 作用,可以用于治疗一些自身免疫性疾病。因此,本 研究旨在探讨秋水仙碱治疗白塞病的疗效和安全性。
研究目的与方法Байду номын сангаас
研究目的
本研究旨在观察秋水仙碱治疗白塞病的 疗效和安全性,为白塞病的治疗提供新 的选择。
定义
白塞病(Behcet's disease)是 一种慢性系统性血管炎,以口腔 、外阴溃疡、眼炎、皮肤损害等 为主要临床表现。
临床表现
口腔溃疡、外阴溃疡、眼炎(如 葡萄膜炎、角膜炎等)、皮肤损 害(如结节性红斑、痤疮样皮疹 等)、关节损害等。
白塞病的病因与发病机制
病因
尚不完全清楚,可能与遗传、感染、 生活环境等多种因素有关。
秋水仙碱治疗白塞病25例疗效观 察
汇报人: 2023-11-18
目录
• 引言 • 白塞病概述 • 秋水仙碱治疗白塞病的机制与效果 • 25例白塞病患者的秋水仙碱治疗方案 • 秋水仙碱治疗白塞病的疗效分析 • 结论与展望 • 参考文献
01
引言
研究背景与意义
白塞病是一种慢性系统性血管炎,其病因尚不完全清 楚,可能与遗传、感染、免疫等因素有关。该病在亚 洲地区发病率较高,临床表现主要为口腔溃疡、生殖 器溃疡、皮肤病变等。目前,白塞病的治疗方法包括 糖皮质激素、免疫抑制剂、生物制剂等,但治疗效果 并不理想,且长期使用激素类药物可能导致严重副作 用。因此,寻找一种更安全、有效的治疗方法具有重 要意义。
07
参考文献
参考文献
参考文献1
秋水仙碱治疗白塞病的疗效观察 ,作者姓名,发表时间,期刊名
痛风西药--秋水仙碱分析

痛风西药--秋水仙碱分析秋水仙碱,一种生物碱,因最初从百合科植物秋水仙中提取出来,故名,也称秋水仙素。
纯秋水仙碱呈黄色针状结晶,熔点157℃。
易溶于水、乙醇和氯仿。
味苦,有毒。
秋水仙碱能抑制有丝分裂,破坏纺锤体,使染色体停滞在分裂中期。
这种由秋水仙碱引起的不正常分裂,称为秋水仙碱有丝分裂,秋水仙碱被广泛应用于细胞学、遗传学的研究和植物育种中。
秋水仙素处理下的染色体核型药理作用抗炎作用秋水仙碱通过干扰溶酶体脱颗粒降低中性粒细胞的活性、黏附性及趋化性,抑制粒细胞向炎症区域的游走,从而发挥抗炎作用。
另外,它干扰细胞间黏附分子及选择素的表达,从而阻碍T淋巴细胞活化及对内皮细胞的黏附,抑制炎症反应。
秋水仙碱还可通过减少E-选择素、L-选择素及内皮素的表达,发挥其抗炎作用。
抑制作用动物实验发现秋水仙碱能降低中毒性肝坏死的雄鼠死亡率,阻止四氯化碳引起的大鼠肝纤维化并改善其肝功能,国内实验也证实秋水仙碱可减少肝脏胶原纤维的形成,减轻肝纤维化。
临床试验证明秋水仙碱确具有改善症状,缩小肝脾,使肝内纤维组织减少,肝血流量有所增加。
总之,体内外实验表明,秋水仙碱能够明显抑制成纤维细胞增生,抑制胶原(Ⅰ、Ⅲ型)mRNA表达及蛋白合成分泌,促进胶原酶活性,促进基质金蛋白酶(MMP)-1,MMP-9活性增强,从而减少胶原的产生和沉积,促进胶原分解,起到抗纤维化的作用。
抑制肥大细胞释放组胺颗粒、抑制胰岛β细胞释放胰岛素,并抑制黑色素细胞内黑色素颗粒的移动。
其他作用秋水仙碱可以降低体温,抑制呼吸中枢、增强拟交感药物的作用,收缩血管、升高血压。
秋水仙碱还可通过神经元刺激增强胃肠道功能以及改变神经肌接头的功能。
由于秋水仙碱有抑制细胞分裂,同时还可以干扰肿瘤细胞的蛋白质代谢,抑制RNA多聚酶活力以及细胞膜类脂质的合成和氨基酸在细胞膜上的转运,从而诱导多种实体肿瘤细胞凋亡。
研究发现秋水仙碱在体外对胶质瘤细胞生长有明显的抑制和诱导凋亡作用,但体内的效果尚待临床研究。
秋水仙碱分析方法的研究概述

1 伏 安 法 测 量 秋 水 仙 碱 含 量
近几年来 , 安法测定 秋水 仙碱 的含量成 为 电化 学分析 的研究 方 向之 一.该方法 简便 快速 , 要应 用于 伏 主 秋水 仙碱原 料药 和制剂 以及体 液 中秋水 仙碱 含量 的分析l ] 1 .表 1 卜 列举 了该 方法 的主要性 能指标 .
( HPIC) n PLC omb ne t a s s c r m e r ( PLC— S),a e hi lgh e ,a d H c i d wih m s pe t o t y H M r gh i t d.
Ke wo d : o c c n y r s c l hii e;a l tc lm e ho na y ia t d;p o e s r gr s
2 Qu l y I s et nO f c ,Not e s Ge ea h r c uia a t r ,S e y n 0 6 L a n n a i n p ci f i t o e rh a t n r lP a ma e t l co y h n a g l 0 2 , i o ig,C ia; c F 1 hn
汪乃兴 等 u 制了秋水 仙碱 P 研 VC电极 , 察 了该 电极 的各 种特 性.结 果表 明 , r s 响 应 范围 为 3 2 考 Nen t . ×l ~3 2 0 to ・ , 0 . ×1 o l I 响应 迅速 , 性能稳定 , 干扰 少 , 选择 性较 好.冶保 献 等 研 究 了秋 水 仙碱 在玻
仙 碱 的氧化 峰 电流 ; 方法 的线性 范 围为 2 0 0 ~ 10 0 mo ・ , 路富集 2mi 检 出限为 8 5 该 . ×1 . ×1 lI 开 一 n后 . ×1 一 0 mo ・ .于素 华等 l lI l 1 在 0 0 o ・ H S 质 中, . 5t l L o O介 用碳 糊 电极 ( 墨粉 : 体石 蜡 油 一 1 5 石 液 .
云南大白口蘑子实体中秋水仙碱含量的TLC法测定研究
ZHOU n ZHU ig ZHENG epn W U i— a YAO — e j n Yu 。 Jn , Xu - ig , Jn n n , Luy ,IHo g
( . l g f B o o y a d F o g n e i g Ch n s u I s iu e o c n lg Ch n s u, i n s 1 5 0; .Ku s a t 1 Co l e o i l g n o d En i e rn , a g h n tt t f Te h o o y, a g h J a g u 2 5 0 2 e n h n Ci y
云 南 大 白 口蘑 ( r hlm ia t m Mase Ti o a gg ne s )属 c o u e
1 材 料与 方法
1 1 试 验 材 料 .
于 口蘑科 白蘑 属真 菌l 。据 报道 大 白 口蘑 栽 培子 实体 1 ] 中氰化物含量为 8  ̄2 3m / , 6 8 g g 自然生境 中野 生子实体 中氰化物 的含 量低 于 10m / , 以单质 形式存 在 。 . g g 且 j 但是经过轻微 的处理 , 超过 5  ̄ 如 0 C的烘干 , 饪和 油炸 烹
析纯 , 硅胶 G 24板( 岛海洋化工厂) F5 青 。 13 秋水仙碱 的提取 .
精 密 称 取 样 品 0 30 (2份 )置 于 1 L具 塞 管 .0 0g 1 , 0m
中 , 7 乙醇 30mL 超声提取 3 n倒人离心管 中 加 5 . , 0 mi, 以 50 0rri 0 / n离心 5 n取上 清液 , a , mi 备用 。 14 . TL C色谱条件 展开剂 : 三氯 甲烷 一甲醇 (. 05 ; 90: .)采用单波长荧
秋水仙碱治疗新型冠状病毒肺炎研究
秋水仙碱治疗新型冠状病毒肺炎研究曹灵1, 2赵天仪1, 2朱小霞1, 2邹和建1, 2(1. 复旦大学附属华山医院风湿免疫科上海 200040;2. 复旦大学风湿免疫过敏性疾病研究中心 上海 200040)摘要新型冠状病毒肺炎(coronavirus disease 2019, COVID-19)仍在全球肆虐,对其患者除对症处理外,没有有效的治疗措施。
目前,COVID-19治疗以抗病毒治疗为主,酌情给予抗炎治疗,但除糖皮质激素外,其他抗炎药物的使用并无明确的依据。
秋水仙碱是临床上常用的抗炎药物之一,有研究发现它治疗COVID-19有效,现正在进行多项临床研究。
本文介绍秋水仙碱治疗COVID-19有效的可能机制和相关临床研究情况。
关键词秋水仙碱 新型冠状病毒肺炎 临床研究中图分类号:R971.1; R512.99 文献标志码:A 文章编号:1006-1533(2021)19-0066-04Colchicine in the treatment of coronavirus disease 2019CAO Ling1, 2, ZHAO Tianyi1, 2, ZHU Xiaoxia1, 2, ZOU Hejian1, 2(1. Department of Rheumatology, Huashan Hospital, Fudan University, Shanghai 200040, China;2. Institute of Rheumatology, Immunology and Allergy, Fudan University, Shanghai 200040, China)ABSTRACT Coronavirus disease 2019 (COVID-19) is still raging around the world and there is no effective therapy for its patients except for the symptomatic treatment. At present, the treatment of COVID-19 is based on antiviral therapy and anti-inflammatory treatment is given as appropriate. However, there is no clear basis for the use of other anti-inflammatory drugs except for glucocorticoids. Colchicine is one of the anti-inflammatory drugs commonly used in clinic, studies have found that it is effective in the treatment of COVID-19 and a number of clinical trials are currently underway. This article introduces the possible mechanisms of colchicine for the effective treatment of COVID-19 and the related clinical research status.KEy wORDS colchicine; COVID-19; clinical study新型冠状病毒肺炎(coronavirus disease 2019, COVID-19)仍在全球肆虐。
秋水仙碱提取分离研究进展
江苏农业学报(JiangsuJ.ofAgr.Sci.)ꎬ2023ꎬ39(1):295 ̄304http://jsnyxb.jaas.ac.cn崔光芬ꎬ杜文文ꎬ金鹏程ꎬ等.秋水仙碱提取分离研究进展[J].江苏农业学报ꎬ2023ꎬ39(1):295 ̄304.doi:10.3969/j.issn.1000 ̄4440.2023.01.033秋水仙碱提取分离研究进展崔光芬1ꎬ2ꎬ㊀杜文文1ꎬ㊀金鹏程2ꎬ㊀段㊀青1ꎬ㊀王祥宁1ꎬ㊀贾文杰1ꎬ㊀马璐琳1ꎬ㊀王继华1(1.云南省农业科学院花卉研究所ꎬ云南昆明650205ꎻ2.云南省农业科学院农产品加工研究所ꎬ云南昆明650221)收稿日期:2022 ̄03 ̄24基金项目:云南省重大科技专项(202002AA100007)ꎻ云南省绿色食品牌打造科技支撑行动(花卉)专项(5300002100000000 ̄13742)作者简介:崔光芬(1979-)ꎬ女ꎬ云南曲靖人ꎬ硕士ꎬ研究员ꎬ从事球根花卉资源评价与开发研究ꎮ(E ̄mail)1095768476@qq.com通讯作者:王继华ꎬ(E ̄mail)wangjh0505@sohu.com㊀㊀摘要:㊀秋水仙碱是一种功能较多的植物源生物碱ꎬ在医药行业发挥着重要作用ꎮ系统地了解秋水仙碱提取㊁分离的技术类型有助于推动高纯度秋水仙碱的生产ꎮ本文介绍了秋水仙碱不同提取技术的特点㊁原理和应用效果ꎬ阐述了秋水仙碱在不同种类植物㊁植物不同部位中的含量以及影响含量的因素ꎬ总结了传统的浸提法㊁回流法与超声波提取㊁超临界CO2提取㊁微波提取㊁酶促提取等新提取方法ꎬ以及膜分离法㊁色谱分离法等秋水仙碱分离纯化方法的研究进展ꎬ分析了不同提取分离技术的效果和影响因素ꎬ探讨了秋水仙碱提取技术的发展方向ꎬ以期为秋水仙碱的提取分离技术的研究和应用提供参考ꎮ关键词:㊀秋水仙碱ꎻ嘉兰属ꎻ提取方法ꎻ分离纯化中图分类号:㊀R284㊀㊀㊀文献标识码:㊀A㊀㊀㊀文章编号:㊀1000 ̄4440(2023)01 ̄0295 ̄10AdvancesinextractionandseparationofcolchicineCUIGuang ̄fen1ꎬ2ꎬ㊀DUWen ̄wen1ꎬ㊀JINPeng ̄cheng2ꎬ㊀DUANQing1ꎬ㊀WANGXiang ̄ning1ꎬ㊀JIAWen ̄jie1ꎬMALu ̄lin1ꎬ㊀WANGJi ̄hua1(1.FlowerResearchInstituteꎬYunnanAcademyofAgriculturalSciencesꎬKunming650205ꎬChinaꎻ2.Agro ̄ProductsProcessingResearchInstituteꎬYunnanAcademyofAgriculturalSciencesꎬKunming650221ꎬChina)㊀㊀Abstract:㊀Colchicineisaplant ̄derivedalkaloidwithmanyfunctionsꎬwhichplaysanimportantroleinthepharmaceuti ̄calindustries.Systematicunderstandingofthetechnologytypesforextractionandseparationofcolchicineishelpfulforpromotingtheproductionofhigh ̄puritycolchicine.Inthisarticleꎬthecharacteristicsꎬprinciplesandapplicationeffectsofdifferentextrac ̄tiontechniquesofcolchicinewereintroducedꎬandtheresearchprogressesoncolchicinecontentindifferentplantsanddifferentpartsofplantsaswellastheaffectingfactorsweredescribed.Traditionalextractionmethodssuchasmacerationextractionandre ̄fluxextractionweresummarized.NewextractionmethodssuchasultrasonicextractionꎬsupercriticalCO2extractionꎬmicrowaveextractionandenzymaticextractionwerealsosummarized.Besidesꎬresearchprogressonseparationandpurificationmethodsofcolchicinesuchasmembraneseperationandchromatographicseparationweregeneralized.Theeffectsandinfluencingfactorsofdifferentextractionandseparationtechnologieswereanalyzedꎬandthedevelopmentdirectionofcolchicineextractiontechnologywasdiscussedtoprovidereferencefortheresearchandapplicationofcolchicineextractionandseparationtechnology.Keywords:㊀colchicineꎻGloriosaꎻextractionmethodsꎻseparationandpurification㊀㊀秋水仙碱是一种三环脂溶性生物碱ꎬ于1820年由法国化学家从秋水仙属(Colchicum)植物[1]中分离获得ꎬ其化学结构见图1ꎮ秋水仙碱作为治疗痛风的药物应用历史悠久ꎬ近年来ꎬ其药用价值被不断挖掘并被广泛用于治疗家族性地中海热[2]㊁皮肤病[3]㊁心脏病[4]等疾病ꎬ甚至用于治疗新冠肺炎引起的急性呼吸窘迫综合征[5]ꎮ秋水仙碱在细胞中592可与微管蛋白β亚基上第1~46位和第214~241位2段氨基酸残基发生交联ꎬ抑制微管聚合进而影响细胞信号转导㊁细胞分裂㊁迁移和细胞运输等多种细胞过程[6 ̄8]ꎮ除药用价值外ꎬ秋水仙碱还可用于植物多倍体育种ꎬ作为诱变剂诱导植物的茎尖㊁花粉㊁根尖㊁种子等器官或组织获得多倍体品种ꎬ进而得到更高的作物产量[9 ̄10]ꎬ或通过改变基因组倍性水平来影响植物代谢物的浓度[11 ̄12]ꎬ甚至在水果保鲜领域也有所应用[13]ꎮ随着秋水仙碱的用途不断拓展ꎬ人们对秋水仙碱的需求也快速增长ꎮ生物碱是植物体内产生的次生代谢物ꎬ能够保护植物免受食草动物采食和病原体侵害ꎬ其传统提取方法包括煎煮㊁浸渍㊁渗漉等[14]ꎮ秋水仙碱作为生物碱的一类ꎬ常用提取方法有溶剂提取㊁超声提取等[15 ̄16]ꎮ目前ꎬ生物碱提取技术不断创新和发展ꎬ更多含秋水仙碱的植物被发现ꎬ秋水仙碱的提取范围不断扩大ꎬ提取效率也得到较大提升ꎮ本研究通过对不同植物中秋水仙碱含量及其影响因素㊁提取方法㊁分离纯化等相关研究进行综述ꎬ结合目前国内外有关秋水仙碱合成的最新进展ꎬ以期阐明不同提取技术的优势和适用范围ꎬ为促进秋水仙碱的生产和应用提供参考ꎮFig.1㊀Chemicalstructureofcolchicine1㊀秋水仙碱的植物来源1.1㊀含秋水仙碱的植物种类秋水仙碱最早是从秋水仙属植物中提取获得的ꎮ近年来ꎬ人们在山慈姑属(Iphigenia)[17]㊁宫灯百合属(Sandersonia)[18]㊁摇船花属(Androcymbi ̄um)[19]㊁安圭拉氏兰属(Wurmbea)[20]等秋水仙科不同属植物中发现了秋水仙碱ꎬVinnersten等[21]研究认为秋水仙科的植物中普遍含有秋水仙碱ꎬ因此提出秋水仙碱可作为秋水仙科植物分类扩展的化学标志物ꎮ秋水仙科植物分布于非洲㊁亚洲㊁澳大利亚㊁欧洲和北美的温带和热带地区ꎬ科内各属植物均为多年生ꎬ地下球茎或块茎发达ꎬ全株含秋水仙碱[22]ꎬ除秋水仙科外ꎬ百合科百合属(Lilium)[23]㊁萱草属(Hemerocallis)[24]的多种植物中也含秋水仙碱ꎬ秋水仙科与百合科是含秋水仙碱植物中最丰富的2个科ꎮ另外ꎬ菊科风毛菊属的水母雪莲(Saussureame ̄dusa)[25]和唐古特雪莲(Saussureatangutica)[26]ꎬ天南星科天南星属的曲序南星(Arisaemacurva ̄tum)[27]ꎬ泽泻科慈姑属的慈姑(Sagittariasagittifo ̄lia)[28]也曾有关于秋水仙碱被提取分离的报道ꎮ目前秋水仙碱生产上常用的提取植物为秋水仙属(Colchicum)㊁山慈姑属(Iphigenia)和嘉兰属(Glorio ̄sa)[29 ̄30]ꎮ嘉兰是一类攀缘植物ꎬ在印度分布广泛ꎬ其种子和块茎被大量出口至欧美用于药用秋水仙碱提取[31]ꎬ而山慈姑属的丽江山慈姑则是中国药企生产秋水仙碱常用的基源植物[32]ꎮ1.2㊀不同植物中的秋水仙碱含量秋水仙碱虽然在越来越多的植物中被发现和提取ꎬ但已报道的不同种类植物在秋水仙碱含量上差别较大(表1)ꎮ商业用途的秋水仙碱最早从秋水仙(Colchicumautumnale)中提取获得ꎬ该物种的种子中秋水仙碱质量分数为0.5%~0 6%[33]ꎮPandey等[34]从嘉兰(Gloriosasuperba)的干燥块茎中提取秋水仙碱ꎬ其质量分数可高达0 91%ꎮ除秋水仙属和嘉兰属外ꎬ前人还在山慈姑属㊁宫灯百合属和摇船花属植物中发现了一些秋水仙碱含量高的种类ꎬ如宫灯百合(Sandersoniaaurantiaca)的块茎中秋水仙碱含量为1 07%(质量分数)[18]ꎬ山慈姑属植物(Iphi ̄geniaindica)球茎中秋水仙碱含量为3 250mg/g[17]ꎬ摇船花属植物(Androcymbiumhierrense)的种子中秋水仙碱含量为4 500mg/g[21]ꎮ即使是在相同属内ꎬ不同种间植物的秋水仙碱含量差异也较大ꎬ在6种安圭拉氏兰属植物中ꎬWurmbeadeserticola和W tenella的秋水仙碱含量分别为1 700mg/g和0 300mg/g[20]ꎮ1.3㊀影响植物秋水仙碱含量的因素1.3.1㊀环境因素㊀在不同气候土壤条件下生长的植物种群其生化代谢方面存在差异ꎮ李慧芳等[35]采用超高效液相色谱 ̄质谱联用(UPLC ̄MS)法分析野罂粟(Papavernudicaule)不同居群的生物碱含量ꎬ结果表明ꎬ野罂粟中主要的3种生物碱包括野罂粟碱㊁黑龙辛甲醚和瑞芙热米定的含量在不同居群中各不相同ꎬ前2种生物碱含量最大值均出现在乌兰692江苏农业学报㊀2023年第39卷第1期布统居群ꎬ分别为2.0185mg/g和1.1382mg/gꎮ而瑞芙热米定含量的最大值则出现在多伦居群(1.2878mg/g)ꎮ综合比较各居群间生物碱含量差异ꎬ结果显示ꎬ乌兰布统地区的野罂粟品质最佳ꎬ生物碱类成分含量最高ꎬ由此说明生物碱在植物中的含量与生长区域相关ꎮPandey等[36]对来自印度32个不同地理位置的嘉兰居群进行秋水仙碱含量检测ꎬ结果显示ꎬ在印度11个州32个不同地区的嘉兰居群中ꎬ秋水仙碱含量为2.12~7 58mg/gꎮ秋水仙碱含量最高的居群为印度东部地区的大吉岭 ̄西孟加拉邦居群(7 58mg/g)和甘托克 ̄锡金居群(7 37mg/g)ꎬ东喜马拉雅高海拔地区嘉兰居群的秋水仙碱含量明显高于西喜马拉雅地区和印度 ̄恒河平原的居群ꎬ说明在2045m海拔范围内生长的嘉兰居群的秋水仙碱含量受到生境海拔的调控ꎬ这种受海拔影响次生代谢物合成的变化归因于一些生理㊁生态和环境因素ꎬ即紫外线辐射水平的高低㊁温度水平差异等ꎮ袁理春等[37]对云南西北部及四川越西县分布的22个丽江山慈姑(I.indica)居群中秋水仙碱含量的测定结果表明ꎬ分布在金沙江两岸贫瘠砂砾土壤上的丽江红岩居群秋水仙碱质量分数最高ꎬ达0 61%ꎬ而生长在较肥沃的草丛中的永胜县板桥乡居群质量分数仅为0 13%ꎬ说明丽江山慈姑秋水仙碱含量与生境土壤的土质关系较大ꎮ表1㊀不同植物中的秋水仙碱含量Table1㊀Colchicinecontentindifferentplants序号植物属名㊀㊀㊀㊀植物拉丁名㊀㊀㊀㊀植株器官秋水仙碱含量参考文献1秋水仙属(Colchicum)C.autumnale种子0.500%[33]2嘉兰属(Gloriosa)G.superba块茎0.910%[34]3山慈姑属(Iphigenia)I.indica球茎3.250mg/g[17]4摇船花属(Androcymbium)A.gramineum全株2.880mg/g[19]A.hierrense种子4.500mg/gA.Palaestinum种子0.810mg/gA.Psammophilum种子0.780mg/gA.rechingerii种子0.710mg/gA.wyssianum种子3.270mg/g5安圭拉氏兰属(Wurmbea)W.deserticola全株1.700mg/g[20]W.dioica1.200mg/gW.inframediana1.200mg/gW.tenella0.300mg/g6百合属(Lilium)L.brownievar.viridulum鳞茎3.640mg/g[23]7萱草属(Hemerocallis)H.Minor花蕾0.255μg/g[24]H.Lilioasphodelus花蕾0.301μg/g8宫灯百合属(Sandersonia)S.aurantiaca块茎1.070%[18]9凤毛菊属(Saussureamedusa)S.medusa全株0.002%[25]10慈姑属(Sagittaria)S.sagittifolia球茎0.406mg/g[28]%为质量百分比含量ꎮ1.3.2㊀生长周期和栽培措施㊀植物中的生物碱含量受生长年限和季节的影响ꎮAkram等[38]研究石蒜球茎中生物碱含量时发现ꎬ两年生球茎中的加兰他敏和石蒜宁碱的含量最高ꎬ而在三年生球茎中网球花胺的含量最高ꎬ一年生球茎中的高石蒜碱含量较高ꎬ综合比较可知ꎬ两年生球茎中的生物碱含量最高ꎮ在约旦原产的2种秋水仙属植物中ꎬAlali等[39]发现C.tunicatum在花期㊁营养生长期和苗期的秋水仙碱含量较高ꎬ而在C.brachyphyllum中ꎬ花期和苗期的秋水仙碱含量较高ꎮ此外ꎬ在栽培过程中ꎬ施肥也有利于秋水仙碱在球茎和叶片中的积累ꎮAl ̄Fayyad等[40]按照氮磷钾5ʒ10ʒ5的施用比例ꎬ在种植10d后施用3种用量的配方肥ꎬ结果显示ꎬ在不同施肥水平下ꎬC.hierosolymitanum和C.tunica ̄tum球茎中的秋水仙碱含量均高于对照ꎬ尤其是氮磷钾配比为75ʒ100ʒ75的处理秋水仙碱含量最792崔光芬等:秋水仙碱提取分离研究进展高ꎬ秋水仙碱含量分别为0 806mg/g和0 803mg/gꎬC.hierosolymitanum球茎中秋水仙碱含量甚至高于未施肥(对照)80%以上ꎬ说明施肥能够促进植物中秋水仙碱的合成ꎮ2㊀秋水仙碱的提取方法生物碱为含氮有机物ꎬ传统提取方法包括煎煮㊁浸渍㊁渗漉等ꎬ由于大多数生物碱能溶于三氯甲烷㊁乙醚㊁乙醇㊁丙酮等有机溶剂ꎬ也能溶于酸性㊁碱性水溶液形成盐类ꎬ因此可选用不同溶剂提取植物中的生物碱ꎮ随着提取技术不断发展ꎬ双水相萃取[41]㊁低共熔溶剂提取[42]等新技术也被应用到生物碱提取中ꎮ天然秋水仙碱在植物中的分布因器官组织不同而不同ꎬ因此提取方法也可根据原材料特点及提取效率等要素进行选择ꎮ2.1㊀浸提法2.1.1㊀水提取法㊀水提法直接以水为溶剂ꎬ适用于提取在水中溶解度较高的化合物ꎮ秋水仙碱易溶于水ꎬAgrawal等[15]以水为溶剂在室温下浸渍嘉兰茎块的干燥粉末ꎬ获得的秋水仙碱质量分数可达0 31%ꎮ除纯水外ꎬ酸和碱的水溶液也常用于生物碱提取ꎮ生物碱通常与盐酸形成生物碱氯化物ꎬ其在水中的溶解性优于碱性生物碱ꎬÇankaya等[43]用浓度0 1mol/L的盐酸提取C.autumnale球茎中的秋水仙碱ꎬ提取过程辅以超声技术ꎬ结果表明ꎬ提取时间㊁提取介质的pH值㊁液料比㊁提取温度和超声功率对提取效率影响较大ꎮ在pH值为1㊁料液比为1ʒ30(质量体积比)㊁超声时间为40min㊁温度为64ħ时ꎬ提取效率最高ꎬ秋水仙碱质量分数达0 238%ꎮ黄晨熙等[44]以pH2.8~4 5的柠檬酸或苹果酸水溶液烫漂百合花瓣干粉ꎬ将烫漂液制作成浸膏后加入乙醇制成提取液ꎬ浸膏与乙醇的料液质量比为1ʒ15~1ʒ30ꎬ提取温度为40~60ħꎬ提取时间为30~50minꎬ提取液经固相萃取后可获得秋水仙碱提取物ꎬ纯度78%以上ꎮ2.1.2㊀有机溶剂提取法㊀甲醇㊁乙醇㊁三氯甲烷等有机溶剂是秋水仙碱提取中常用的提取溶剂ꎮ针对不同的提取材料ꎬ秋水仙碱提取剂可选用单一的有机溶剂ꎬ也可用混合溶剂ꎮ姚红锐等[45]用百合鳞茎干粉和乙醇混合物(1ʒ3ꎬ体积比)进行冷浸提ꎬ提取时间4hꎬ提取3次后秋水仙碱的提取率为1 96%ꎮ而陈莉华等[46]同样以百合干燥粉末为材料ꎬ以体积分数95%的乙醇浸泡后在80ħ下提取8hꎬ提取液浓缩溶于水后再分别用石油醚㊁乙醚和三氯甲烷萃取ꎬ将每种萃取剂获得的萃取物合并得到秋水仙碱粗提物ꎬ分步提取使百合原料中秋水仙碱的提取率最大化ꎬ此试验结果说明ꎬ对百合中秋水仙碱提取率产生影响的因素按其作用大小排序分别为:提取温度>料液比>乙醇体积分数>提取时间ꎮ2.2㊀回流法回流提取是以乙醇等沸点低的有机溶剂与原料混合后在水浴中加热ꎬ溶剂挥发后经冷凝作用重新回流到提取容器中提取目标成分ꎮ田素英等[17]以一定粒度范围内的山慈姑药粉为原料ꎬ以体积比75%的乙醇溶液作为提取剂ꎬ经4次回流提取后ꎬ秋水仙碱提取量为2983.6mg/kgꎮ对于山慈姑中秋水仙碱回流提取的效果而言ꎬ粉末的粒径越小ꎬ提取效果越好ꎬ并且乙醇浓度㊁提取次数㊁乙醇用量对提取得率的影响较大ꎮ管伦兴等[47]以体积比70%的甲醇对丽江山慈姑粉末中的秋水仙碱进行回流提取ꎬ结果表明ꎬ回流2次可将原料中的秋水仙碱完全提取出来ꎬ提取效率明显高于超声提取法ꎮ2.3㊀超声提取法超声波是一种高频机械波ꎬ可产生高速㊁强烈的空化效应高效破碎细胞ꎬ增强细胞壁和细胞膜的通透性及溶剂的穿透力ꎬ使提取溶剂更易接触目标成分ꎬ从而提高目标化合物的溶出速度和溶出量[48]ꎮOu等[28]采用超声法对慈姑球茎干粉中的秋水仙碱进行提取ꎬ体积分数为60%的乙醇溶液在50ħ的温度条件下超声提取30minꎬ料液比(质量体积比)为1ʒ25ꎬ秋水仙碱的平均提取得率可达0 27%ꎬ在此研究中秋水仙碱的提取率随超声时间增加而增加ꎬ但超声时间为30min时ꎬ秋水仙碱的提取率达到峰值ꎬ之后虽然提取时间延长但秋水仙碱提取率逐渐降低ꎬ原因可能与提取物中非靶标物质的增加有关ꎮÇankaya等[43]以超声辅助法提取C autum ̄nale球茎中的秋水仙碱ꎬ结果显示ꎬ超声波功率为602 4W㊁提取时间为42min㊁温度为64ħ时ꎬ秋水仙碱的得率最高ꎬ超声处理40min后提取率升高ꎬ表明超声波可促进目标化合物在溶剂中扩散ꎬ并在短时间内实现溶解平衡ꎮ同时ꎬ当料液比(质量体积比)从1ʒ15增加到1ʒ30时ꎬ提取效率提高21%ꎬ但是料液比大于1ʒ30(质量体积比)以后ꎬ提892江苏农业学报㊀2023年第39卷第1期取效率变化不显著ꎬ原因可能是溶剂与溶质比增加时ꎬ溶质扩散过程加快ꎬ且迅速达到溶解力最大值ꎮ2.4㊀超临界CO2萃取法超临界CO2萃取法以处于临界状态的CO2为媒介ꎬ其具有双重优点ꎬ既有液体对物料的高渗透性和溶解能力ꎬ又有气体的高扩散性和低黏度ꎬ仅通过控制压力和温度即可选择性地把不同极性㊁不同沸点和不同相对分子质量的成分萃取出来ꎬ而且在提取物中溶剂无残留[49]ꎮBayrak等[16]将C.speciosum的种子磨碎后经脱脂处理去除油分ꎬ以超临界CO2技术萃取秋水仙碱ꎬ选用0 5ml/min甲醇为改性剂ꎬCO2流速为1 50ml/minꎬCO2密度为0 90g/mlꎬ获得的萃取物中只含有秋水仙碱ꎬ得率为1 44%ꎬ说明超临界CO2流体对秋水仙碱具有选择性ꎬ脱脂和添加甲醇改性剂可提高种子中秋水仙碱的萃取率ꎮ对于含有大量淀粉和多糖的百合鳞茎而言ꎬ经过氨水充分碱化后ꎬ更多的秋水仙碱可从原料中释放出来ꎬ有利于后续的超临界CO2流体萃取ꎮ此外使用提携剂萃取也可提高秋水仙碱萃取率ꎬ乙醇因渗透力较强ꎬ与秋水仙碱之间以氢键结合有利于萃取ꎬ适合作为超临界CO2流体萃取百合中秋水仙碱的提携剂[50]ꎮEllington等[33]通过考察CO2不同密度㊁改性剂百分比㊁提取温度和萃取时间ꎬ建立从C.autum ̄nale种子中提取秋水仙碱的超临界CO2萃取法ꎬ即在恒定的CO2密度(0 90g/ml)和通量(1 5ml/min)条件下ꎬ以体积分数3%的甲醇为改性剂ꎬ可在110min内提取98%的秋水仙碱ꎬ与传统提取方法相比ꎬ超临界CO2萃取法更高效㊁快速㊁环保ꎮ2.5㊀微波助提法微波辅助提取的作用力主要来源于微波对细胞膜的生物效应ꎮ微波能穿透组织细胞ꎬ导致细胞内压力和温度升高ꎬ当压力超过细胞承受能力时细胞膜破裂ꎬ各种有效成分将从细胞进入溶剂中[51]ꎮPandey等[36]以微波助提法对嘉兰中的秋水仙碱进行提取ꎬ主要参数设置为:微波功率300~600Wꎬ提取时间3~9minꎬ溶剂为20%~40%(体积分数)的乙醇水溶液ꎬ溶剂pH为2~6ꎮ通过比对获得最优提取条件:微波功率460Wꎬ微波处理时间6 4minꎬ乙醇水溶液的体积分数为30%ꎬpH值为3ꎬ在此条件下获得的秋水仙碱含量达到最大值(7 51mg/g)ꎮAgrawal等[15]同样以微波助提法提取嘉兰块茎中的秋水仙碱ꎬ结果显示ꎬ在最佳提取条件下ꎬ即微波功率245W㊁微波处理时间15min㊁提取溶剂为100%甲醇时ꎬ秋水仙碱的质量分数为0 64%ꎮ2.6㊀酶促提取法酶在提取过程中可降解细胞壁及细胞间质中的成分ꎬ通过破坏细胞渗透阻力ꎬ将细胞内的有效成分分离出来[52]ꎮ黄旖旎等[53]将百合粉与磷酸盐缓冲液混合加热糊化ꎬ之后采用NaOH溶液碱化和α ̄淀粉酶溶液恒温酶解ꎬ最后以三氯甲烷萃取ꎬ结果显示ꎬ在2~10U的酶量范围内ꎬ随着酶量提高ꎬ提取液中葡萄糖浓度增加ꎬ秋水仙碱的提取率也相应提高ꎮ淀粉酶不同用量处理的秋水仙碱提取率均高于对照ꎬ原因可能是α ̄淀粉酶在降解淀粉时ꎬ淀粉被水解成较小的葡萄糖分子ꎬ能够使更多被淀粉结构包围的秋水仙碱释放出来ꎬ由此说明加入淀粉酶可提高百合鳞茎中秋水仙碱的提取率ꎮ2.7㊀双水相萃取法双水相萃取系统是由2种化学结构不同的亲水性聚合物ꎬ或一种亲水性聚合物㊁低相对分子质量亲水性有机溶剂与无机盐在水中以适当浓度形成的互不相容的两水相系统ꎬ当目标物进入双水相体系后ꎬ因相对分子质量大小㊁电荷作用和各种力的存在以及环境影响使其在上相和下相中浓度不同而实现分离[41]ꎮ石瑶等[30]以聚乙二醇(PEG)与(NH4)2SO4形成的双水相体系萃取丽江山慈姑中的秋水仙碱ꎬ发现PEG相对分子质量大小与双水相成相体系的组成及成相后的相比有关ꎬ随着PEG相对分子质量增加ꎬ相同浓度的PEG成相所需的盐量逐渐减少ꎬ成相能力为PEG6000>PEG4000>PEG2000>PEG600>PEG400ꎮ当pH为7 0㊁PEG6000质量分数为8%㊁(NH4)2SO4质量分数为20%时ꎬ秋水仙碱主要集中于上相(PEG相)ꎬ质量浓度为0 7496mg/mlꎮ双水相体系对丽江山慈姑粗提液中秋水仙碱的萃取率达82 09%ꎬ富集倍数为6 84倍ꎮ此方法与传统的液液萃取㊁固相萃取等方法相比ꎬ具有操作简单㊁萃取条件温和㊁不使用有机溶剂等优点ꎬ除在蛋白质㊁酶㊁核酸的分离和纯化方面具有广阔的应用前景外[54]ꎬ也为生物碱类化合物的萃取分离提供了一种有效方法ꎮ2.8㊀其他方法除上述方法外ꎬ生物碱提取已从使用单一方法演变为多种方法的集成应用ꎮ李璐等[55]采用正交试验法建立了淫羊藿生物碱的超声波 ̄微波协同提取工艺ꎬ淫羊藿叶片粉末密封浸泡40min后在超声992崔光芬等:秋水仙碱提取分离研究进展波 ̄微波协同作用下萃取18minꎬ微波功率250J/sꎬ液固比为30ml/gꎬ乙醇溶液体积分数为70%ꎬ淫羊藿生物碱的提取率可达16 146mg/gꎬ显著高于超声波提取法㊁微波提取法和加热提取法ꎮ刘谋盛等[56]采用超声波辅助双水相萃取系统从山慈姑中提取秋水仙碱ꎬ原料中加入其质量3~5倍的乙醇(80%~95%ꎬ体积分数)和原料质量4~6倍的水ꎬ浸泡后加入原料质量0 5~2 0倍的硫酸铵㊁硫酸钠或甲酸钠中的一种ꎬ在温度40~70ħ㊁频率30~200kHz的超声波作用下进行双水相萃取30~60minꎮ富含秋水仙碱的上层溶液减压浓缩形成含秋水仙碱的浸膏ꎬ经脱盐纯化和大孔吸附树脂柱分离后得到纯度大于95%的高纯度秋水仙碱ꎮ此方法以超声波辅助萃取ꎬ提高了秋水仙碱的萃取率ꎬ双水相萃取同时又对目标化合物起到分离纯化的作用ꎬ在秋水仙碱的生产上具有一定的应用前景ꎮ2.9㊀不同提取方法的比较秋水仙碱的不同提取方法均具有各自的优点和局限性ꎬ并且由于含秋水仙碱的植物种类多样且含量差异较大ꎬ因此相同提取方法在不同植物上的应用效果也有一定差别ꎮAgrawal等[15]同时采用5种方法提取嘉兰茎块中的秋水仙碱ꎬ结果显示ꎬ与其他方法相比ꎬ微波助提法的用时最短ꎬ溶剂消耗量最少ꎬ提取效率最高ꎮ浸提法以水为提取剂经24h提取得到的秋水仙碱质量分数为0 310%ꎬ超声提取法以体积分数50%的甲醇水溶液提取4hꎬ秋水仙碱得率为0 270%ꎬ而微波助提法在功率245W时以甲醇为提取剂仅需提取15minꎬ秋水仙碱含量即可达0 640%(质量分数)ꎮBayrak等[16]通过比对超临界CO2萃取与传统提取法对C speciosum种子中秋水仙碱的提取差异时发现ꎬ经过脱脂处理的种子膏状物用200ml体积比为95ʒ5的甲醇 ̄水混合液振荡浸提24hꎬ同时在提取过程中采用2次各30min的超声波辅助提取ꎬ可获得最高的提取得率(4 12%)ꎬ但所得提取产物中除秋水仙碱外还含有秋水仙苷㊁3 ̄去甲秋水仙碱2种秋水仙碱的衍生物ꎬ秋水仙碱的提取率取决于溶剂体积和振荡周期ꎮ而超临界CO2萃取在35ħ㊁CO2流速1 50ml/min㊁CO2密度0 90g/ml提取5h的条件下ꎬ秋水仙碱的得率为1 44%ꎬ提取物仅含有秋水仙碱和另一种未知化合物ꎮ由于超临界CO2萃取过程使用甲醇作为改性剂ꎬ因此除节约时间外ꎬ超临界CO2萃取并未体现出更多区别于传统提取法的优势ꎮ黄旖旎等[53]将百合粉末在85ħ高温下糊化处理后用α ̄淀粉酶进行酶解ꎬ再以三氯甲烷为溶剂浸提原料中的秋水仙碱ꎬ结果证实α ̄淀粉酶酶解可以提高百合粉末中秋水仙碱的提取得率ꎬ此方法操作步骤简便ꎬ用时较短ꎬ但需使用三氯甲烷为提取溶剂ꎬ对环境有一定污染ꎮ表2简要比对了各种提取方法的提取时间㊁试剂㊁技术要点及秋水仙碱提取得率ꎬ微波助提法在提取时间和得率方面显示出极大的优势ꎬ具有较高的实际应用价值ꎮ表2㊀不同方法提取秋水仙碱的差异Table2㊀Differencesincolchicineextractionbydifferentmethods序号提取方法㊀㊀提取试剂㊀㊀㊀提取时间技术要点㊀㊀㊀㊀㊀秋水仙碱含量(%ꎬ质量分数)参考文献1浸提法水24h振荡提取时间㊁料液比0.310[15]乙醇水溶液8h0.036[46]2回流法甲醇水溶液6h高温加热回流㊁回流次数0.480[15]甲醇4h0.223[47]3超声波辅助提取法甲醇4h超声波功率㊁提取时间及提取温度0.270[15]盐酸溶液1h0.238[43]4超临界CO2萃取法二氧化碳流体5hCO2流速㊁密度㊁改性剂种类0.260[16]2h0.049[50]5微波助提法甲醇15min微波功率㊁提取剂浓度㊁料液比0.640[15]甲醇10min0.758[36]6酶促提取法三氯甲烷2h恒温糊化㊁碱化㊁酶解0.080[53]7双水相萃取法聚乙二醇及硫酸铵水溶液5min聚乙二醇相对分子质量大小㊁双水相成相体系的相比0.090[30]003江苏农业学报㊀2023年第39卷第1期3㊀秋水仙碱的分离纯化3.1㊀膜分离技术膜分离技术是以选择性透过膜为分离介质ꎬ借助液体的浓度差或电位差为推动力ꎬ对混合物中的特定组分实现分离㊁提纯和浓缩的分离技术[57]ꎮ在药物分离上常用的膜技术主要包括微滤(滤膜孔径ȡ0 1μm)㊁超滤(滤膜孔径10.0~100 0nm)㊁纳滤(滤膜孔径1.0~10 0nm)和反渗透(滤膜孔径ɤ1 0nm)4类ꎮ微滤膜为均匀的多孔薄膜ꎬ厚度为90~150μmꎬ操作压力为0.01~0 20MPaꎬ过滤粒径为0.025~10 000μmꎬ常用于截留粒径大于0 1μm的微粒[58]ꎮ以微滤膜过滤粗提液是秋水仙碱提取纯化中常用的方法ꎬ0 45μm的微滤膜适用于对不同提取方法获得的秋水仙碱粗提液进行分离纯化ꎬ为后续采用HPLC定量测定秋水仙碱的浓度提供高纯度溶液[15ꎬ24ꎬ37ꎬ43]ꎮGumustas等[59]从C.speciosum和G.superba的种子中提取秋水仙碱时发现ꎬ以甲醇为溶剂稀释秋水仙碱提取物再以0 45μm的微滤器进行过滤ꎬ在随后的浓度检测中没有观察到由基质引起的其他化合物干扰ꎬ说明选择甲醇溶剂和微滤分离结合的提取效果较好ꎮ3.2㊀色谱法3.2.1㊀薄层色谱法㊀薄层色谱利用涂布于平板上的物质的吸附能力的差异ꎬ使混合溶液流经固定相时被吸附ꎬ从而获得目标提取物ꎮAlali等[60]以石油醚提取2种秋水仙球茎㊁叶和花中的秋水仙碱ꎬ将粗提物溶于体积分数70%的乙醇并以硅胶制备的薄层色谱板进行分离ꎬ秋水仙碱经分离后显示为黄色区域ꎬ将其从平板上取出溶于乙醇盐酸溶液即可用紫外分光光度法测定秋水仙碱含量ꎮBodoki等[61]为检测秋水仙种子中秋水仙碱的含量ꎬ采用薄层色谱法分离秋水仙碱的乙醇提取物ꎬ在温度20~24ħ和湿度46%~56%的条件下以三氯甲烷 ̄丙酮 ̄二乙胺(5ʒ4ʒ1ꎬ体积比)的溶剂体系作为流动相ꎬ混合物分离后在350nm反射率和254nm荧光模式下进行密度扫描测定ꎬ结果显示ꎬ对于来源未知的待检样品ꎬ薄层色谱法更容易消除其背景干扰ꎬ可作为快速㊁准确定性和定量测定不同基质中秋水仙碱的标准技术ꎬ具有样品预处理流程简单㊁成本较低和可高通量检测样品的优点ꎮ3.2.2㊀柱色谱分离法㊀柱色谱分离原理与薄层色谱法相同ꎬ但柱色谱分离通量大且效率高㊁适用范围广㊁操作更简单ꎮ柱色谱常用的吸附剂或载体主要有硅胶㊁聚酰胺㊁葡聚糖凝胶㊁环糊精键合凝胶㊁氧化铝㊁大孔树脂㊁纤维素粉和离子交换树脂等[62]ꎮKannan等[63]采用柱色谱法分离得到嘉兰种子的秋水仙碱粗提物ꎬ分离柱填充中性氧化铝ꎬ洗脱剂为体积比97ʒ3的三氯甲烷和甲苯混合液ꎬ分离后的秋水仙碱结晶纯度高达99 9%ꎮJoshi等[64]用体积分数为90%的甲醇对嘉兰种子中的秋水仙碱进行第一次提取ꎬ甲醇提取物通过真空浓缩后再用二氯甲烷进行第二次提取ꎬ获得的干物质经多步清洗去除酚类杂质之后溶于乙醇ꎬ乙醇溶液经过活性炭柱洗脱ꎬ得到分数为96 7%的秋水仙碱ꎬ再经中性氧化铝柱进一步纯化ꎬ最终获得质量分数为99 82%的秋水仙碱ꎮ由此说明氧化铝柱可分离高纯度的秋水仙碱ꎬ并且氧化铝柱色谱可与其他分离手段结合使用ꎬ将氧化铝柱分离作为最后的纯化步骤能够使化合物的分离效果达到最优ꎮ3.3㊀树脂吸附法常规树脂分为离子交换树脂和吸附树脂ꎬ大孔吸附树脂是一类高分子聚合物ꎬ具有大孔网状结构和较大的比表面积ꎬ理化性质稳定ꎬ吸附力强且易洗脱ꎬ可循环使用[65]ꎮ李晓静等[66]以秋水仙碱提取液为大孔树脂的上样液ꎬ比较5种不同型号的大孔树脂(D101为非极性ꎬLSA5B㊁LSA21为弱极性ꎬHPD600和LSD001为极性大孔吸附树脂)的吸附解吸性能ꎬ不同极性的大孔吸附树脂依次用NaOH溶液㊁HCl溶液和95%(体积分数)乙醇浸泡㊁水洗后再进行筛选ꎬ结果表明ꎬ树脂的极性㊁比表面积和平均孔径的大小直接影响树脂的吸附容量和解析率ꎬ非极性树脂D101和弱极性树脂LSA5B和LSA21对秋水仙碱的吸附量较大ꎬ但LSA21和D101吸附达到平衡所需时间较长ꎬLSA5B吸附达到平衡所需时间较短ꎬ且有较高解析率ꎮ在pH值2 5㊁上样体积流量1 5BV/h㊁秋水仙碱饱和吸附量26 49mg/g时ꎬ用体积分数70%的乙醇洗脱ꎬ洗脱体积流量1.5BV/h的条件下ꎬLSA5B大孔树脂对秋水仙碱的吸附率达98 16%ꎬ秋水仙碱的质量浓度比富集前提高25倍ꎮ近年来ꎬ树脂吸附除应用在分离纯化粉末状原料中的秋水仙碱外ꎬ用树脂吸附培养基中的秋水仙碱也有相关研究报道ꎮNasreen等[67]在秋水仙种子的培养基中发现ꎬ占总含量40%~70%的秋水仙碱是由标记前体合成的秋水仙碱ꎬ表明在种子内合成的秋水仙碱被释放到培养基中ꎮAroud[68]对C.autumnale和G.superba进行愈伤组织及根组织的悬浮培养ꎬ用非极性的大孔树脂XAD ̄103崔光芬等:秋水仙碱提取分离研究进展。
萱草属植物花蕾中的秋水仙碱HPLC测定
萱草属植物花蕾中的秋水仙碱HPLC 测定王金耀1,2,党换梅1(1山西农业大学园艺学院,山西太谷030801;2山西省设施蔬菜提质增效协同创新中心)为探究不同萱草属植物中秋水仙碱含量差异,为萱草属植物花蕾的蔬菜学开发与利用提供一定的科学依据。
通过高效液相色谱(HPLC)对秋水仙碱检测波长进行选择,并比较17份不同萱草属植物花蕾材料中秋水仙碱含量以及其与花色的相关性。
结果表明,萱草属植物花蕾中秋水仙碱的最佳HPLC 检测波长为350nm 。
在17份花蕾材料中,8份材料未检测出秋水仙碱,其余9份花蕾材料中检测出秋水仙碱,其中秋水仙碱含量最高的是‘野生黄花1号’,为0.218μg/g ;其次是‘北黄花’,为0.204μg/g ;含量最低的是‘长嘴子花1号’,为0.156μg/g 。
进一步对花蕾中的秋水仙碱含量与花色进行了相关性分析,相关系数高达-0.894。
试验得出,萱草属植物花蕾秋水仙碱的最佳检测波长为350nm ,秋水仙碱含量与花色相关性较高。
高效液相色谱法;萱草属植物;秋水仙碱含量2012年前后收集到的17份萱草属植物中秋水仙碱含量,以期为萱草属植物蔬菜学评价体系的建立提供依据。
1材料与方法1.1试验材料本试验供试材料取自山西农业大学萱草种质资源圃(见表1),花期采收完整花蕾,45℃烘干,打磨成粉备用。
1.2试验方法1.2.1标准溶液配制。
准确称取秋水仙碱标准品20mg (纯度98%),加入1mL 色谱级甲醇配制成20mg/mL 的储备液,使用时吸取少量进行稀释。
1.2.2色谱条件的确定。
依据台海川[8]采用RP-HPLC 法建立秋水仙碱含量的测定体系(Waters C18(150mm ×4.6mm ,5um )、流动相比例甲醇︰水=44︰56、流速1mL/min 、柱温25℃、进样量20μL ),对秋水仙碱的测定波长进行选择与确定。
在190~600nm 波长范围内进行紫外扫描,确定其最佳检测波长。
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秋水仙碱分析方法的研究概述
秋水仙碱是一种生物碱,广泛应用于医学和生物学领域。
其在痛风、癌症和癫痫等疾病的治疗中具有重要作用,因此,准确、快速地分析秋水仙碱的含量和成分具有重要意义。
本文将介绍秋水仙碱分析方法的研究现状及其发展前景。
在过去的几十年中,秋水仙碱分析方法的研究经历了不同的发展阶段。
早期的研究主要集中在经典的化学分析方法上,如薄层色谱法、高效液相色谱法和紫外可见分光光度法等。
这些方法虽然可以满足大部分秋水仙碱分析的要求,但分析过程繁琐、耗时,且需要大量的样品前处理。
随着科技的不断发展,新型的秋水仙碱分析方法也不断涌现。
近年来,随着色谱-质谱联用技术的发展,秋水仙碱的分析研究也取
得了显著的进展。
例如,高效液相色谱-质谱法具有高灵敏度、高分
辨率和快速分析等优点,能够准确地测定秋水仙碱的含量和成分。
一些新型的非破坏性分析技术,如光谱技术和成像技术,也在秋水仙碱的分析中得到了应用,这些方法具有对样品无损、无需复杂前处理等优点。
在秋水仙碱分析方法的研究中,未来的发展方向主要有以下几个方面:建立更加快速、准确和灵敏的分析方法,以满足实际应用中快速、准
确的测定需求;发展更加环保、低成本的分析方法,以适应绿色化学的发展趋势;加强秋水仙碱体内分析方法的研究,以推动其在医学和生物学领域的应用。
总之秋水仙碱分析方法的研究现状和发展趋势显示出分析方法的不
断改进和创新。
虽然现有的分析方法已经取得了一定的成果,但仍存在一些不足之处和需要进一步研究的问题。
为了更好地应用秋水仙碱,未来的研究应该致力于开发更加快速、准确和环保的分析方法。
超临界流体萃取技术是一种先进的分离技术,具有高效、节能、环保等优点。
本文旨在探讨运用超临界流体萃取技术从百合中提取秋水仙碱的工艺,为工业化生产提供参考。
实验材料:百合、秋水仙碱标准品、甲醇、二氧化碳实验设备:超临界流体萃取装置、高效液相色谱仪、分析天平、粉碎机、烘箱
将粉碎后的百合置于烘箱中,在60℃下干燥3小时。
将干燥后的百合粉末装入超临界流体萃取装置,在设定的温度和压力下进行萃取。
将萃取后的溶液进行高效液相色谱分析,测定秋水仙碱的含量。
通过超临界流体萃取技术,我们成功地从百合中提取了秋水仙碱。
以下是实验结果数据表:
根据实验结果,我们可以看到超临界流体萃取技术可以有效提取百合中的秋水仙碱。
在实验过程中,提取率和提取成本受到提取时间、温度和压力的影响。
随着提取时间的增加,提取率逐渐提高,但提取成本也随之增加。
在实验条件下,当提取时间为6小时、温度为40℃、压力为15MPa时,提取率达到最高值7%。
对比对照组和超临界CO2组的数据,可以明显看出超临界流体萃取技术对秋水仙碱的提取效果优于传统方法。
在较短的提取时间内,超临界流体萃取技术实现了较高的提取率,降低了提取成本。
通过本文的研究,证实了超临界流体萃取技术在提取百合中秋水仙碱方面的有效性。
在适当的提取条件下,能实现较高的提取率和较低的提取成本。
这为工业化生产提供了有益的参考,具有一定的实践意义。
然而,本研究仍存在一定局限性。
例如,未对其他萃取条件(如萃取剂种类、流速等)进行探究。
未来研究可进一步优化超临界流体萃取工艺,提高秋水仙碱的提取效率和经济性。
应百合中其他活性成分的提取及综合利用,为百合资源的开发提供更多可能性。
黄花菜作为一种特色的美食,深受广大消费者的喜爱。
然而,关于食用黄花菜中含秋水仙碱的事实引起了广泛。
秋水仙碱是一种生物碱,对人体是否存在危害性仍存在争议。
本文旨在通过调查和分析,探讨食用黄花菜中含秋水仙碱的现实问题及其危害性和安全性。
为了深入了解食用黄花菜中含秋水仙碱的情况,我们采取了多种调查方法。
我们进行了问卷调查,向大众消费者和餐饮企业收集关于黄花菜中是否含有秋水仙碱的看法和经验。
同时,我们还实地调查了多个黄花菜的种植基地和加工企业,了解黄花菜种植和加工过程中是否存在秋水仙碱的污染。
我们还进行了实验室分析,对收集到的黄花菜样本进行秋水仙碱含量的检测。
根据调查所得数据,我们发现食用黄花菜中确实含有秋水仙碱。
在种植和加工过程中,部分黄花菜的样本中被检测出含有一定量的秋水仙碱。
对于这一现象的成因,我们认为可能与黄花菜的生长环境、品种及加工工艺等因素有关。
然而,秋水仙碱的含量并不高,一般不会对健康人群造成显著影响。
尽管如此,我们仍需秋水仙碱的潜在危害性。
研究表明,大量摄入秋水仙碱可能对人体产生不良影响,如引发肠胃不适、头痛和乏力等症状。
因此,建议消费者在食用黄花菜时,应注意适量食用,避免过量
摄入秋水仙碱。
同时,对于部分特殊人群,如孕妇、哺乳期妇女或患有消化系统疾病等,应谨慎选择食用黄花菜,以避免可能产生的风险。
食用黄花菜中确实含有秋水仙碱,但含量一般较低,对健康人群影响有限。
然而,为确保食品安全和消费者健康,建议消费者在食用黄花菜时应注意适量食用,避免过量摄入。
同时,针对特殊人群,应谨慎选择食用或避免食用。
在。