巴比妥类药物分析

2
R1 R2
R1 R2 R1 R2
CO NH CO CO NH
+ Co2+ + 4 (CH3)2CHNH2
CO NH CO NHCH(CH 3)2 CO N Co CO N NHCH(CH 3)2 CO CO NH
+
+ (CH ) CHN H3 2 3 2
(4)与Hg2+的反应
O R1 R2 H N O -HNO3 O + Hg(NO3)2 R1 NH R2 H N N O OH + NH3 + H2O N HgNO3 O O R1 R2 N N O O NH4 + HNO3 HgOH
可溶性一银盐
AgNO3
Ag R1 R2 C CO CO N N C O
Ag
不溶性二银盐
白色↓
(2)与Cu2+的反应
巴比妥类 + 铜吡啶试液 硫喷妥钠 + 铜吡啶试液
吡啶 吡啶
紫色或紫堇色↓
绿色
R1 R2
CO NH C CO NH C O
水 —吡 啶
R1 R2
CO C
N C OH
CO NH
部 分 离 子 化
5ml 3min 方法： 供试品 1.0g 乙醇 加热回流 溶液应澄清
（3）中性或碱性物质
中性或碱性物质是由中间体（Ⅰ）形成的酰 胺、酰脲或分解产物等杂质，不溶于氢氧化钠试 液但溶于乙醚；而苯巴比妥具有酸性，溶于氢氧 化钠试液，故采用提取重量法测定其含量。
10ml 25ml 2O 5ml 供试品 1.0g NaOH H 乙醚 振摇 1min
（二）溴量法
1.原理： 司可巴比妥钠含不饱和键，与溴定量地发生加成反应
NaO N
O H N O
CH2 CH3
NaO + Br 2 N
H N
O Br Br
CH2
O
CH3（定量过量）
CH3
CH3
（剩余）
Br2 + 2KI
2KBr + I2
I2 + 2Na2S2O3 → 2NaI + Na2S4O6 近终点时，加淀粉指示液，继续滴定至蓝色消失将滴 定的结果用空白试验校正
3.硫元素的反应
硫喷妥钠 可将其硫元素转变为无机硫离子，而显硫化物的反应。 如硫喷妥钠在氢氧化钠试液中与铅离子反应生成白色 沉淀；加热后，沉淀转变成黑色的硫化铅。
三、特殊杂质检查
特殊杂质： 在特定药物的生产和贮存过程中引入的杂质。
药物中特殊杂质的检查主要是根据药物和杂
质在物理、化学性质上的差异来进行的。
R1 C R2
CO
N C O
+ H+
CO NH
2+ N 2 N + CuSO4 N
2+ N + N Cu
Cu
+ SO2 4
2
R1 R2
CO C
N C O
-
CO NH
R1 R2 R1 R2
CO C
N C O N Cu C O N
CO NH CO C CO NH N
(3)与Co2+的反应
这一反应的现象与铜盐反应的现象相似，均生 成紫堇色配位化合物。本反应要求在无水的条件下 进行，所用试剂均应不含水分，以使反应灵敏，而 且形成的有色产物也比较稳定，常用无水乙醇或甲 醇；钴盐为醋酸钴、硝酸钴或氧化钴；碱以有机碱 为好，一般采用异丙胺。
1. 苯巴比妥的特殊杂质检查
[ 酯化 ] [ 水解] ， CH2CONH 2 C2H5OH,H 2SO4 COOC 2H5 -C=C-ONa COOC 2H5 (I) [ 乙酰化 ] C2H5Br H N N O -CH 2COOC 2H5
[ 缩合 ] OC2H5 O=C , C 2H5ONa OC2H5 COOC 2H5 -CH ( ) O [ 环合 ]
R1 CO R2 N
C OH + 5NaOH CO NH
R1 R2
COONa +2NH3 + 2Na2CO3
(2)巴比妥类药物钠盐的水解
本类药物钠盐的水溶性比较大，在吸湿的情况 下也能水解。水解的速度与温度和pH值有关。室温和 pH10以下时水解较慢，pH11以上随着碱度的增加水解 速度也随之加快。
3次5ml/次 ℃干燥 1h 醚层水洗 过滤105 残渣 3mg
（杂质）
四、含量测定
银量法 溴量法 酸碱滴定法 紫外分光光度法 HPLC法、GC法
巴比妥类药物的含 量测定方法
（一）银量法
1.原理： 巴比妥类
Na2CO3 AgNO3 AgNO3
一银盐
二银盐↓
O R1 R2 O H N N ONa
H2 O
R1 R2
C
COONa CONHCONH 2
H2 O
R1 R2
CHCOONa + 2NH 3
3.与重金属反应（丙二酰脲基团）
(1)与Ag+的反应
R1 R2 CO C CO NH N C ONa + AgNO3 + Na2CO3
R1 R2 CO C CO N Ag N C ONa + NaHCO3 + NaNO3
第五章 巴比妥类药物的分析
Analysis of Barbiturate
药理作用简介：巴比妥类药物是一类作用于中枢神经系统的镇 静剂，属于巴比妥酸的衍生物，其应用范围可以从轻度镇静到 完全麻醉，还可以用作抗焦虑药、安眠药、抗痉挛药。长期使 用则会导致成瘾性。巴比妥类药物目前在临床上已很大程度上 被苯二氮䓬类药物所替代。不过，在全身麻醉或癫痫的治疗中 仍会使用巴比妥类药物。
基本内容
鉴别试验 基本要求
结构剖析
理化特征
杂质检查 练习与思考 含量测定
基本要求
一、掌握巴比妥类药物的结构、性质 和含量测定的基本原理与方法。 二、熟悉本类药物鉴别试验的基本原 理与方法。 三、了解本类药物的体内分析方法。
一、 结构特征与典型药物
（一）结构通式
临床常用： 5，5－取代物 1，5，5－取代物 C2位硫取代物
巴比妥：长方形
苯巴比妥：球形→ 花瓣状
（2）反应产物的晶形 巴比妥 硫酸铜-吡啶试液 十字形紫色结晶
苯巴比妥
浅紫色细小不规 则的或类似菱形 的结晶
二、鉴别试验
硫元素反应 不饱和烃反应 苯环反应
(一) 丙二酰脲鉴别反应
这一鉴别试验已经收载在中国药典附录中的“一般 鉴别试验”项下。包括银盐反应和铜盐反应，分别生成 沉淀和呈色反应。
-
O HgNO3
O N
O R1 R2
N N O
OH HgNO3
白色
+
O R1 R2
4. 与香草醛的反应
丙二酰脲基团中氢比较活泼，可与香草醛在 浓硫酸存在下发生缩合反应，生成棕红色产物。
O H5C2
H N
O NH +
CHO H2O OCH3 OH
O H5C2
H N N
OO N CH
H N
O C2H5 CH(CH2)2CH3 CH3
240nm 255nm
240nm 240nm
6. 色谱行为特征（主要用于鉴别）
（1）TLC
一般采用对照品比较法，要求供试品主斑点 应与对照品斑点一致。
（2）HPLC
与对照品比较保留行为，主要是比较保留时 间和相对保留时间。
7. 显微结晶
（1）药物本身的晶形 巴比妥类药物的酸性水溶液可析 出相应巴比妥类药物的特殊结晶。
巴比妥类药物的紫外吸收光谱
A. H2SO4溶液（0.05mol/L）
B. pH9.9缓冲液
C. NaOH溶液（0.1mol/L）
硫喷妥的紫外吸收光谱 HCl 溶液 NaOH 溶液 (0.1mol/L) －－－－ (0.1mol/L)
巴比妥类药物在不同pH溶液中的λmax
pH 1(原形) 10(一级电离) 13(二级电离) 5,5-取代物 无 1, 5,5-取代物 无 C2硫代 287nm（大） 238nm（小） 304nm（大） 255nm（小） 304nm
(二）测定熔点
巴比妥类的钠盐＋酸 → 游离巴比妥类药物↓ → 过
滤 → 洗涤 → 干燥 →测熔点
（三）利用特殊取代基或元素的鉴别试验
1.利用不饱和取代基的鉴别试验 司可巴比妥钠 原理：含丙烯基，可发生加成 或 氧化反应 （碘、溴）（高锰酸钾） ①与碘试液反应
NaO N
O H N O
NaO CH2 + I 2 N
CH3(CH2)2CH O CH3
CH3(CH2)2CH O CH3
O OCH3
OH
O N OH HO N O OCH3 N
棕红色
O C2H5 CH(CH2)2CH3 CH3
加乙醇后， 其反应产物可转变为
H5C2 N CH3(CH2)2CH CH O CH3 OH
蓝色
5. 紫外吸收光谱特征
主要特点：随着电离级数的不同，巴比妥类 药物的紫外光谱会发生显著的变化。也就是说， 溶液pH值的不同以及取代基的不同会对紫外光谱 产生影响。
C
O H C N
C ONa
O C2 H5 CH3 CH2 CH2 CH CH3
SNa
异戊巴比妥
H5C2 (H3C)2HCH2CH2C C CO CO NH NH C O
硫喷妥钠
结构决定性质
结构: 苯环、丙烯基 性质： 各有特性 应用：鉴别、含量测定
丙二酰脲
1,3-二酰亚胺
丙二酰脲类反应 鉴别、含量测定
H N
OI