中国药典级重组胰蛋白酶简介
《中国药典》2020版—重组胰蛋白酶检测要求公示稿
1 通则重组胰蛋白酶检测要求公示稿
2 本品为生物制品生产过程中使用的原材料，系由高效表达胰蛋白酶基因的重组菌，经发
3 酵、分离和纯化后获得的重组猪胰蛋白酶，含适宜稳定剂，不含防腐剂。
可为浓缩的酶溶液
4 和冻干粉两种。
5 性状溶液为无色至淡黄色澄清液体。
冻干粉为白色或类白色结晶性粉末。
6 鉴别，7
8
9 以
10
11 则0401
12
13
14 式中
15 1.36
16 E1% A
17 吸收值为
18 A
19
20
21
22 式中
23 纯度照高效液相色谱法（通则0512）测定，面积归一化法计算重组胰蛋白酶纯度，β
24 胰蛋白酶不低于70%，α胰蛋白酶不高于20%。
25 色谱条件与系统适用性试验：用十八烷基硅烷键合多孔硅胶填充色谱柱（ODS 柱），柱
26 直径4.6mm，长25cm；粒度3μm，孔径200Å，柱温：40℃。
以1ml 磷酸（85%）用水定容
27 到1000ml 为流动相A 液，以1ml 磷酸（85%）用乙腈定容到1000ml 为流动相B 液，梯度洗。
胰蛋白酶
胰蛋白酶简介一、介绍胰蛋白酶（C6H15O12P3）为蛋白酶的一种。
在脊椎动物中，作为消化酶而起作用。
在胰脏是作为酶的前体胰蛋白酶原而被合成的。
作为胰液的成分而分泌，受肠激酶，或胰蛋白酶的限制分解成为活化胰蛋白酶，是肽链内切酶，它能把多肽链中赖氨酸和精氨酸残基中的羧基侧切断。
它不仅起消化酶的作用，而且还能限制分解糜蛋白酶原、羧肽酶原、磷脂酶原等其它酶的前体，起活化作用。
是特异性最强的蛋白酶，在决定蛋白质的氨基酸排列中，它成为不可缺少的工具。
牛的胰蛋白酶氨基酸残基223个，分子量23800，活性部位的丝氨酸残基是不可缺少的丝氨酸蛋白酶。
除存在于脊椎动物外，还存在于蚕、海盘车、蝲姑、放线菌等范围广泛的生物体中。
另外与高等动物的血液凝固和炎症等有关的凝血酶、纤溶酶、舒血管素等蛋白酶在化学结构和特异性等方面与胰蛋白酶具有密切的关系，可以认为这些酶是从共同的祖先酶在进化过程中分化而来的。
胰糜蛋白酶与弹性蛋白酶在结构和催化机制方面也具有密切关系，但其特异性则完全不同。
胰蛋白酶系自牛、羊或猪胰中提取的一种蛋白水解酶。
中国药品标准规定按干燥品计算，每1mg 的效价不得少于2500单位。
由牛、羊、猪胰脏提取而得的一种肽链内切酶，只断裂赖氨酸或精氨酸的羧基参与形成的肽键。
白色或米黄色结晶性粉末。
溶于水，不溶于乙醇、甘油、氯仿和乙醚。
分子量24 000，pI 10.5，最适pH值7.8～8.5左右。
pH>9.0不可逆失活。
Ca2+对酶活性有稳定作用；重金属离子、有机磷化合物、DFP、天然胰蛋白酶抑制剂对其活性有强烈抑制。
临床用于抗炎消肿，工业上用于皮革制造、生丝处理、食品加工等。
胰蛋白酶的分子量与其酶原接近（23300），其等电点约为pH10.8，最适pH7.6～8.0，在pH=3时最稳定，低于此pH时，胰蛋白酶易变性，在pH>5时易自溶。
Ca2+离子对胰蛋白酶有稳定作用。
重金属离子，有机磷化合物和反应物都能抑制胰蛋白酶的活性，胰脏、卵清和豆类植物的种子中都存在着蛋白酶抑制剂。
2005年版《中国药典》(二部)试药(二)
2005年版《中国药典》（二部）试药（二）玻璃酸钾 Potassium Hyaluronate 本品为白色疏松絮状或片状物。
在水中易溶。
[检查] 干燥失重取本品，置五氧化二磷干燥器中，减压干燥至恒重，减失重量不得过10％（附录Ⅷ L）。
总氮量按干燥品计算，含总氮量应为3～4％（附录Ⅶ D第一法）。
炽灼残渣遗留残渣按干燥品计算为14～18％（附录Ⅷ N）。
粘度 0.15％水溶液的运动粘度（附录Ⅵ G第一法）为5～6mm2/s。
pH值 0.15％水溶液的pH值（附录Ⅵ H）应为6.0～7.0。
枸橼酸 Citric Acid [C6H8O7·H2O＝210.14] 本品为白色结晶或颗粒，易风化，有引湿性。
在水或乙醇中易溶。
枸橼酸钠 Sodium Citrate [C6H5Na3O7·2H2O＝294.10] 本品为白色结晶或粉末。
在水中易溶，在乙醇中不溶。
枸橼酸铵 Ammonium Citrate，Tribasic [C6H17N3O7=243.22] 本品为白色粉末；易潮解。
在水中易溶，在乙醇、丙酮或乙醚中不溶。
咪唑 Imidazole [C3H4N2＝68.08] 本品为白色半透明结晶。
在水、乙醇、乙醚或吡啶中易溶，在苯中微溶，在石油醚中极微溶解。
钙黄绿素 Calcein [C30H24N2Na2O13＝666.51] 本品为鲜黄色粉末。
在水中溶解，在无水乙醇或乙醚中不溶。
钙紫红素 Calcon [C20H13N2NaO5S＝416.39] 本品为棕色或棕黑色粉末。
在水或乙醇中溶解。
钙-羧酸 Calcon Carboxylic Acid 本品为棕色到黑色结晶或褐色粉末。
易溶于碱液和氨水，微溶于水。
钠石灰 Soda Lime 本品为氢氧化钠与氧化钙的混合物，经用特殊指示剂着色后制成的粉红色小粒，吸收二氧化碳后颜色逐渐变淡。
钨酸钠 Sodium Wolframate [Na2WO4·2H2O＝329.86] 本品为白色结晶性粉末；易风化。
《中国药典》2020版—重组人胰岛素国家药品标准公示稿
重组人胰岛素
Chongzu Ren Yidaosu
Recombinant Human Insulin
本品系由含有可高效表达人胰岛素基因的工程化细胞，经发酵、分离、高度纯化、结晶和干燥制成。
重组人胰岛素为51 个氨基酸残基组成的蛋白质。
按干燥品计算，含重组人胰岛素（包括A21 脱氨人胰岛素）应为95.0%～105.0%。
每 1 单位重组人胰岛素相当于0.0347mg。
1基本要求
生产和检定用设施、原材料及辅料、水、器具等应符合“凡例”的有关要求。
2制造
2.1工程菌
本品为重组DNA技术生产的由51个氨基酸残基组成的蛋白质，工程菌菌种名称、来源及种子批检定应符合批准的要求。
2.2原料
2.2.1种子液制备
将检定合格的工作种子批细胞接种于适宜的培养基（可含适量抗生素）中培养。
2.2.2发酵用培养基
采用适宜的不含抗生素的培养基
1。
提取与重组胰蛋白酶的不同
胰蛋白酶与重组胰蛋白酶药典标准比较胰蛋白酶药典标准历史2014年之前，只有从猪或牛胰腺提取的胰蛋白酶的标准，活性标准为2500USP units/mg，目前临床已不应用。
在2011年左右，通过了胰蛋白酶:糜蛋白酶（6:1）配方，用于消化道疾病的治疗。
在2013年12月出版了修订稿的“用于生物医药制造过程的辅助材料”，重组胰蛋白酶作为一个例子，给出标准。
2017年2月，FDA正式颁布胰蛋白酶的药典标准。
2010版中国药典第二部规定:药品的安全性保障得到进一步加强。
凡例中规定所有来源于人或动物的供注射用的原料药均增订“制法要求”。
在总则十四规定：（1）来源于动物组织提取的药品，其所用动物种属要明确，所用脏器均应来自经检疫的健康动物，涉及牛源的应取自无牛海绵状脑病地区的健康牛群；来源于人尿的药品，均应取自健康人群。
上述药品均应有明确的病毒灭活工艺要求以及质量管理要求。
（2）直接用于生产的菌种、毒种、来自人和动物的细胞、DNA重组工程菌及工程细胞，来源途径应经国务院药品监督管理部门批准并应符合国家有关的管理规范。
2010版中国药典第三部规定:2010版药典对安全性问题更加重视。
增修订细菌内毒素检查的品种达112种；药典三部增订了逆转录酶活性检查法等。
培养细胞用牛血清应来源于无牛海绵状脑病地区的健康牛群，其质量应符合本药典的有关规定；在生物制品生产检定用动物细胞基质制备及检定规程中，应提供细胞培养液的详细成分，如使用人或动物源成分，如血清、胰蛋白酶、乳蛋白水解物胰蛋白酶重组胰蛋白酶外观形状白色或类白色溶解性可溶溶解性可溶生物载量NMT100CFU/ml 微生物限量-比活力(USP units/mg pro.)NLT3800金黄色葡萄球菌阴性纯度（HPLC）NLT70%β-trysin,NMT20%α-trypsin绿脓假单胞菌阴性沙门氏菌阴性干燥失重不高于5.0%灼烧残渣不高于2.5%糜蛋白酶限量不高于5.0%活性不低于2,500USP units/mg美国药典中，两种胰蛋白酶的标准的主要不同点:项目胰蛋白酶2014美国药典来源动物来源：从猪或牛的胰腺提取重组（无动物源性）：DNA来源产品纯度检测方法无HPLC活性2,500USP units/mg比活性：3800USP units/mg pro.美国药典中最重要的不同点:①无动物源性，由于辅料的质量，包括酶，应用在生物医药制造，会对治疗用产品有影响，因此无动物源性重组胰蛋白酶的使用是对于人畜共患病的病毒感染的必要预防措施。
胰蛋白酶 药典标准
胰蛋白酶药典标准胰蛋白酶是一种消化酶，被广泛应用于临床医学中治疗消化系统疾病，如胰腺炎、胰腺癌、胃肠手术后等。
药典标准是评定药品质量的重要参考，下面将详细介绍胰蛋白酶的药典标准。
胰蛋白酶的药典标准主要包括国际药典（比如美国药典、欧洲药典）和中国药典两个方面。
这些药典标准规定了胰蛋白酶的质量要求、生产工艺以及检测方法等方面。
以下是对其中几个重要药典标准的介绍：1.国际药典：美国药典和欧洲药典规定了胰蛋白酶的质量要求。
例如，美国药典规定了胰蛋白酶的单位活性应满足特定标准，比如1 USP单位相当于3.6微克胰蛋白酶，并规定了对其它微生物污染的限制。
2.中国药典：中国药典对胰蛋白酶的质量要求与国际药典接近，但有些细节的要求有所不同。
例如，中国药典规定了胰蛋白酶的酶活力不得低于10,000 USP单位/g，并规定了胰蛋白酶的酶活性测定方法。
药典标准还要求生产工艺和质量控制方面的要求。
生产工艺包括胰蛋白酶的提取、纯化、浓缩和干燥等，要求按照良好的制造规范进行操作。
质量控制方面要求对原辅材料进行严格检测，确保其质量符合标准，并要求对成品进行全面检测，确保其有效成分含量符合规定。
胰蛋白酶的标准化是确保其质量和疗效的关键。
通过遵循药典标准，可以保证不同厂家生产的胰蛋白酶具有相同的活性，并且可以使医生和患者更容易比较不同品牌或批次的胰蛋白酶的治疗效果。
总结起来，胰蛋白酶作为一种重要的消化酶，其药典标准规定了胰蛋白酶的质量要求、生产工艺和检测方法等方面。
通过遵循这些标准，可以确保胰蛋白酶在临床应用中的质量和疗效，促进患者的康复。
医生和患者可以放心使用符合药典标准的胰蛋白酶，获得更好的治疗效果。
四国药典胰酶标准浅析
DOI：10. 3969/j. issn. 1005-1678. 2016. 10. 002四国药典胰酶标准浅析黄素娟12,刘莉莎\范慧红1A(1.中国食品药品检定研究院，北京100050;2.中国药科大学，江苏南京211100)[摘要]本文阐述了中国药典、美国药典、英国药典、日本药局方中胰酶标准的历史沿革，并对现行版四国药典胰酶标准进行比 较和讨论，发现各国药典胰酶标准各有异同，其中活力限度要求差异较大，应予以重视，就效价测定方法而言，美国药典、英国药典的 方法更为合理。
[关键词]胰酶；中国药典;美国药典;英国药典；日本药局方；效价测定[中图分类号]R921 [文献标识码]AAnalysis on the pancreatin standards of four countries5pharmacopoeiaHUANG Su-juan1’2，LIU Li-sha1，FAN Hui-hong1A(1. National Institutes for Food and Drug Control, Beijing 100050；2. China Pharmaceutical University,Nanjing 211100,China)[Abstract ] The history about pancreatin standards in different pharmacopeia, i. e. the Chinese Pharmacopoeia ( C hP) , the United States Pharmacopoeia (USP) , the British Pharmacopoeia (B P)，and the Japanese Pharmacopoeia ( JP) were clarified in this paper. As well as the latest edition of pancreatin standards in different pharmacopeia were compared and discussed. There are many similarities and differences of the pancreatin standards between ChP and the three other pharmacopoeias. We should attach importance to the significant difference of the potency limitation in four countries, pharmacopoeia. Otherwise, the potency test method of pancreatin in USP and BP is more reasonable.[Keywords ] pancreatin；Chinese Pharmacopoeia；the United States Pharmacopoeia；British Pharmacopoeia；Japanese Pharmacopoeia；potency determination胰酶是从猪、羊或牛胰中提取的多种酶混合物，主要为胰 蛋白酶、胰淀粉酶和胰脂肪酶。
2020版中国药典重组胰蛋白酶质量标准
2020版中国药典重组胰蛋白酶质量标准标题：解读2020版中国药典重组胰蛋白酶质量标准——打开消化酶曙光导语：2020版中国药典的发布对于医药行业来说是一次重要的里程碑。
其中，重组胰蛋白酶质量标准的更新更是备受关注。
作为一种重要的消化酶剂，胰蛋白酶的质量标准的提升将对医药领域产生广泛影响。
本文将深入剖析2020版中国药典重组胰蛋白酶质量标准，从简单到复杂，从表面到内涵，带您全面了解并解读该标准的意义与价值。
正文：一、胰蛋白酶简介与来源胰蛋白酶是一种广泛存在于动物体内的消化酶，主要参与蛋白质的消化与分解过程。
而重组胰蛋白酶则是利用基因工程技术将人类胰蛋白酶基因导入真核生物表达系统中进行大规模生产的产物。
重组胰蛋白酶由于其来源纯正、生物活性高等优势，在医药领域中得到广泛应用。
二、2020版中国药典重组胰蛋白酶的主要更新内容对于重组胰蛋白酶的质量标准的更新，2020版中国药典做出了一系列重要修订。
主要更新内容包括但不限于以下几个方面：1. 液体剂型的质量标准2. 粉剂剂型的质量标准3. 酶活测定的方法与标准4. 纯度与杂质限度的要求三、重组胰蛋白酶质量标准更新的意义与价值重组胰蛋白酶质量标准的更新，不仅仅是对该药物本身质量的保证，更关系到患者的安全与疗效。
在2019年中国的重组生物制品市场，重组胰蛋白酶以其广泛的应用和巨大的市场需求，逐渐成为医药领域的焦点。
2020版中国药典重组胰蛋白酶的更新将进一步规范和提高该药物的质量标准，为患者提供更安全、高效的治疗选择。
四、个人观点与理解作为一名从业多年的医药领域专业人士，我对于2020版中国药典重组胰蛋白酶质量标准的更新持积极态度。
我认为通过规范化的质量标准，可以有效提升药品的疗效和安全性，最终造福于患者。
胰蛋白酶的质量标准的提升也将推动我国生物制品行业的发展，为我国的医药行业注入新的动力。
总结回顾：通过全面解读2020版中国药典重组胰蛋白酶质量标准，我们可以深入了解该药物的原理、来源和应用。
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重组胰蛋白酶(液体)—药典级
Cat.No.：RPT0204
CAS：9002-07-7
EC：3.4.21.4
来源：重组猪胰蛋白酶，基因工程生产，与猪胰腺来源的胰蛋白酶氨基酸序列一致。
1.产品简介
胰蛋白酶可特异切割赖氨酸及精氨酸C末端肽键，可降解细胞间结合蛋白。
雅心生物生产的重组猪胰蛋白酶的氨基酸序列与猪胰腺来源的胰蛋白酶一致，由重组大肠杆菌表达生产。
可替代传统提取胰酶用于疫苗、干细胞、免疫细胞治疗、药物筛选、抗体等领域细胞消化过程。
抑肽酶、大豆胰蛋白酶抑制剂等可抑制酶
活力单位：25℃，pH7.6，反应体系3.2ml(1cm光路)，每分钟酶解BAEE使253nm下的吸收值增加0.003定义为一个胰蛋白酶单位（USP）。
4.使用说明
1.溶液配制：重组胰蛋白酶室温下融化，根据COA中的蛋白含量，取适量胰蛋白酶，加入HBSS平衡液（或其他适宜细胞消化的缓冲液，如需要加入EDTA其终浓度推荐0-1mM，最好不超过2mM），推荐一般使用的胰蛋白酶浓度约为0.1-0.3mg/ml（浓度根据不同细胞进行调整），轻柔混匀；该步骤可在室温环境操作；
2.使用0.22μm滤膜对上述胰蛋白酶溶液过滤并转移至无菌容器中；该步骤可在室温环境操作；
3.过滤后的胰蛋白酶溶液应在当天按照要求直接使用（例如加入1ml至T25瓶，37℃消化细胞），该液体可在2-8℃条件下保存1-2周。
4.长期保存:配好的重组胰蛋白酶细胞消化液，若需长期保存，-20℃保存，可稳定保存12个月；
5.稳定性
储存稳定性：重组胰蛋白酶溶液保存在-20℃以下，12个月稳定；
运输稳定性：干冰保温运输，运输过程不融化，活性稳定。
6.产品用途
细胞培养方面：
1.组织块消化，原代细胞获取；
2.贴壁细胞的传代消化；
3.微载体方法培养的细胞消化；
4.干细胞温和消化；
5.免疫细胞治疗等。
重组蛋白方面：
1.重组胰岛素生产；
2.蛋白测序、肽谱图；
3.蛋白组学研究等特异性蛋白酶解过程。
7.相关产品
重组羧肽酶B；
序列分析纯胰蛋白酶；
重组人胰蛋白酶；
重组肠激酶。