氨在肝性脑病发生机理中的作用
氨中毒在肝性脑病发病中的作用
氨中毒在肝性脑病发病中的作用机能学实验报告氨中毒在肝性脑病发病中的作用摘要：【目的】对实验动物输入氯化氨，观察出现症状所需氯化铵用量及时间，以探讨氨在肝性脑病发病机制中的作用；了解降低肠道pH及注射谷氨酸是针对氨中毒的一项基本治疗措施。
【方法】将将家兔麻醉后实施腹部手术，结扎家兔肝脏的其中3叶，十二指肠注射氯化铵，观察家兔是否出现行为异常以及出现异常所需的时间。
对出现行为异常的家兔静脉注射复方谷氨酸钠进行救治。
【结果】家兔出现了有节律的抽搐，出现四肢伸直，头尾昂起，脊柱挺硬等角弓反张现象。
没有进行救治的家兔持续抽搐，死亡。
【结论】肝功能健全可使氨中毒的作用时间延长，即肝有对氨的解毒作用。
当肝功能受损时，肝脏将氨转化为尿素的能力减弱，可导致血氨升高，间尔影响脑的功能。
复方谷氨酸钠溶液有缓解氨中毒的作用。
关键词:氨中毒；肝性脑病；复方氯化氨；复方谷氨酸钠；醋酸引言：病理情况下，当肝功能受损时，或慢性肝硬化等疾病使肠壁吸收肠道内生成的氨过多，或经侧支循环进入体循环，均可导致血氨升高。
增高的血氨可经过血脑屏障进入脑组织，通过干扰脑组织的能量代谢，使脑内神经递质发生改变等作用，引起脑的功能障碍，从而出现相应的症状和体征。
1、实验材料1.1实验材料：1.1.1 实验动物：家兔1.1.2实验仪器：家兔手术器械。
1.1.3实验药品：氨基甲酸乙酯，复方氯化铵溶液，醋酸，生理盐水，复方谷氨酸钠溶液2、实验方法：1.2.1麻醉：家兔称重，按5ml/kg体重剂量耳缘静脉缓慢注射氨基甲酸乙酯，麻醉后背位固定于兔手术台上。
1.2.2急性肝功能不全动物模型复制：从胸骨剑突下沿腹正中线行长约8cm的切口，打开腹腔；暴露肝脏，轻轻向下压肝，剪断肝与横膈之间的镰状韧带，再将肝叶上翻，钝性分离肝胃韧带，使肝叶完全游离，辨明肝脏各叶。
用粗棉线绕肝左外叶、左中叶、右中叶根部一周并结扎，以阻断肝血流。
对照组动物不结扎肝脏。
1.2.3十二指肠插管：找出十二指肠，用线缝一圆圈，在圆圈中心切一小口，插入导管向下推进约4~5cm，切口荷包缝合固定导管，组织钳关闭腹壁切口。
氨在肝性脑病发病中的作用
The Role of Ammonia in the Mechanism of Hepatic Encephalopathy
【实验目的】
1.急性阻断肝脏血流造成急性肝功能损伤模型， 观察相关指标的变化。
2.对经不同处理的实验家兔灌入氯化铵或生理 盐水，观察出现相应症状的时间及所需的氯化铵 用量，测定各组动物实验后的血氨和尿素氮水平， 探讨氨在肝性脑病发病机制中的作用。
甲、乙兔灌复方氯化铵（ 3ml／kg／ 5min） 丙兔灌入生理盐水（3ml／kg ／ 5min ） 每次灌药前观察记录上述指标的变化。
四、血氨和血尿素氮（BUN）的测定 在甲兔第一次痉挛抽搐发作时，固定甲兔，心脏采血5ml，
测定血氨（ 1ml ）和血尿素氮。 其它组按甲兔出现痉挛抽搐的时间进行心脏取血，测定血氨
535.91
整理实验数据，填写上表，分析和讨论氨在肝性脑病发病 机制中的作用。
【思考题】 1、结扎肝门血管以及灌入氯化铵是否复制肝性脑
病的动物模型？为什么？ 2、为什么要设立甲、乙、丙组家兔，作用何在？ 3、灌入复方氯化铵溶液后，甲组家兔的呼吸如何
变化？为什么？ 4、血氨和血尿素氮的变化有何关系？道理何在？ 5、氯化铵在哪些方面对CNS起作用？
组别
症状
剂量 时间 血氨（mg/L） 血BUN（mg/L）
呼吸 肌无力 抽搐 ml/ Kg min 变化
实验前 实验后
实验前 实验后
甲 86 不明显 √ 16.8 23′30″
1948
236.8
乙 88 减弱
√ 25.2 39 ′ 1.23±0.47100
28.0±98 48.21
丙 78 不明显
31.52
氨在肝性脑病发病中的作用
氨在肝性脑病发病中的作用
实验目的：
1、采用肝大部分切除术，造成急性肝功能不全的动物模型；
2、用十二指肠灌注复方氯化铵溶液，观察血氨升高在肝性脑病发病机理中的作用。
实验设计思想：
因有胃肠道出血、肾功能不全和电解质紊乱、精神性药物的使用、便秘、过高蛋白质饮食、肝功能的急剧恶化等，对于没有明确诱因的自发性肝性脑病也要高度怀疑有无不正常的循环通路的存在；（3）降低肠道氮质负荷，包括灌肠、使用非吸收性双糖和抗生素；（4）长期治疗必要性和疗效的评估，肝硬化病人有发生肝性脑病的高风险，需要对病人的诱因控制情况、肝性脑病发作的可能性，以及是否需要肝移植等情况进行综合评估，以制定长期治疗方案。
结论
结扎肝脏后，注射氯化铵溶液，使血氨升高而引起肝性脑病；肝脏对氨具有清除作用，所以不结扎肝脏不会发生氨中毒。
机能学实验--氨在肝性脑病发生中的作用
观察项目
氨在肝性脑病发生中的作用观察
组 出现大抽搐所需 出现大抽搐
血氨浓度
别 NH4Cl用量(ml) 所需时间(min) 第1次 第2 次 呼吸
肌张力
甲兔 乙兔
20
注意事项
原则上选择体重相差不超过250g的家兔进行对照 专人测定血氨 肝叶结扎线置于肝叶根部，避免勒破肝脏 复方NH4Cl切勿漏入腹腔 乙兔与甲兔同时推注复方NH4Cl或晚于甲兔？？ 发生大抽搐时迅速放血
秤、扩散瓶2个
药品
1％利多卡因，1％肝素，2.5%复方氯化铵溶液， 0.5mol/L硫酸，纳氏试剂，饱和碳酸钾
12
实验方法
甲兔：结扎大部肝叶＋注射复方NH4Cl
乙兔：不结扎肝叶 ＋注射复方NH4Cl
13
称重、分组----甲兔和乙兔重量相同/相近
固定----------四肢伸展仰卧位？
剪毛、麻醉（各2ml）----颈部、上腹部局部麻醉？
22
观察项目
呼吸运动、肌张力、抽搐。
氨在肝性脑病发生中的作用观察
组 出现大抽搐所需 出现大抽搐
血氨浓度
别 NH4Cl用量(ml) 所需时间(min) 第1次 第2次
甲兔
乙兔
23
氨对脑代谢功能的影响
1、干扰脑细胞能量代谢 2、使脑内神经递质改变 3、氨对神经细胞膜的抑制作用
24
参考结论：
乙兔
与甲兔出现大抽搐时注射的复
方NH4Cl量和时间相同时，从颈总 动脉再次放血1ml测血氨。
小结 第一次取血时间 第二次取血时间、弃掉肝素 停止注射复方NH4CL 注射器的使用
继续推注复方NH4Cl直至乙兔出 现大抽搐，记录所用复方NH4Cl总 量和时间。
氨在肝性脑病发病机制中作用观察
氨在肝性脑病发病机制中作用观察1．实验目的：1.1复制家兔急性肝功能不全模型。
用十二指肠灌注复方氯化铵法，观察氨中毒对家兔脑功能影响。
1.2用耳缘静脉注射谷氨酸钠法治疗肝性脑病，探讨其治疗机制。
2．实验材料：家兔，200g/L氨基甲酸乙酯，25g/L复方氯化铵溶液，25g/L复方谷氨酸钠溶液，生理盐水，手术器械。
3．实验方法：3.1实验分组：1组（1、2组）——模型组2组（3、4组）——治疗组3组（5组）——假手术组4组（6组）——症状明显抢救组5组（7、8组）——预防组3.2实验步骤：3.2.1麻醉、固定：家兔称重，按5ml∕kg体重剂量自耳缘静脉注射200g∕L氨基甲酸乙酯，家兔麻醉后背位固定于兔台上。
3.2.2急性肝功能不全动物模型复制①肝脏大部结扎术：从胸骨剑突起作上腹正中切口，长约8cm，沿腹白线剪开腹壁肌层及腹膜。
暴露肝脏，剪断肝镰状韧带、肝胃韧带。
右手食中指夹持粗棉线沿肝左外叶、左中叶和方形叶根部绕一周，结扎以阻断血流。
②十二指肠插管：沿胃幽门向下找出十二指肠，用眼科剪在肠壁作一小切口，将胶管顺十二指肠向远端插入肠腔内约5cm，作荷包缝合固定，然后用止血钳夹住腹壁切口边缘，关闭腹腔。
向十二指肠插管中注入复方氯化铵溶液，每次10ml，间隔5min（2次，20ml）。
然后每次5ml，间隔5min。
观察家兔呼吸、肌紧张变化、出现抽搐及痉挛时停止灌注。
3.2.3肝性脑病治疗①治疗组：耳缘静脉注射复方谷氨酸钠溶液（30ml∕kg），直至症状缓解，并继续观察。
模型组：给予生理盐水。
②实验分组设计1组——模型组：不给药，给予生理盐水，观察出现明显肝性脑病症状。
2组——治疗组：仔细观察，出现抽动，立即给药，实施抢救。
3组——假手术组：手术全过程都做，只是不结扎肝脏，注入复方氯化铵溶液，观察是否出现肝性脑病症状。
4组——症状明显抢救组：多灌注几次，等症状明显时，给药抢救。
5组——预防组：造模、给药同时。
25氨在肝性脑病发病机制中的作用
长 沙医学院教案
课程名称
机能实验学
授课题目（章节或主题）
实验二十五氨在肝性脑病发病机制中的作用
授课教师
【实验器材与药品】
腹部手术器械一套，兔固定台，5ml、20ml注射器，十二指肠插管，丝线。复方氯化铵溶液（氯化铵25g，碳酸氢钠15g；溶于5％葡萄糖溶液1000ml中）3％戊巴比妥钠。
【实验对象】
家兔
【实验步骤和方法】
实验组家兔在做肝叶结扎术后，肠腔内注射复方氯化铵溶液。
1．取家兔一只，称重后，3％戊巴比妥钠全麻。仰卧固定于兔固定台上。
课后记（即通过收集教学督导专家、同行和学生的反馈信息，认真整理分析成功的经验和不足之处，在课程结束后填写）
2．从胸骨剑突起，沿腹白线作上腹正中切口打开腹腔，切口长约8cm。红褐色的肝脏位于右上腹。轻轻下压肝脏，用手剥离肝与横膈之间的镰状韧带。再将肝向上翻起，剥离肝脏和胃之间的肝胃韧带。
3．辨明肝脏分叶情况，进行模拟肝大部切除术：用粗丝线结扎左外侧叶、左中叶、右中叶和方形叶的根部，使此四肝叶的血流完全阻断。保留右外侧叶和尾状叶。
【实验结果】
实验结果记录表
TIME
肌张力
适应性反应
兴奋性反应
抽搐
角弓反张
存活时
1．分离镰状韧带时，谨防破坏横隔。游离肝脏时，动作宜轻柔，以免肝叶破裂出血。结扎线应扎于肝叶根部，避免拦腰勒破肝脏。
2.十二指肠插管结扎牢固，复方氯化铵溶液切勿漏入腹腔。
【结果分析】
氨在肝性脑病中的作用
试验目的肝性脑病是继发于严重肝脏疾病的一系列精神神经综合症。
有关肝性脑病的发病机制有多种学说 其中氨中毒学说受到重视。
正常情况下 血氨的来源与清除保持动态平衡 而氨在肝中合成尿素是维持此平衡的关键。
病理情况下当肝功能严重受损时 或慢性肝硬化等疾病使肠壁吸收肠道内生成的氨过多 或经侧支循环进入体循环 均可导致血氨升高。
增高的血氨可通过血脑屏障进入脑组织 通过干扰脑组织对能量代谢 使脑内神经递质发生改变等作用 引起脑的功能障碍从而出现相应的症状和体征。
谷氨酸可与血中过多的氨结合而成为无毒的谷氨酸钠 由尿排出 进而降低血氨。
谷氨酸还可参与脑细胞的代谢 改善中枢神经系统的功能肠道给予醋酸溶液可使肠道PH降低 减少氨的吸收。
步骤1、麻醉家兔称重 按5ml/kg体重剂量自耳缘静脉注射200g/L氨基甲酸乙酯。
待家兔麻醉后背位固定于兔手术台上。
2、急性肝功能不全动物模型复制从胸骨剑突下沿腹正中线行长8cm的切口 打开腹腔 暴露肝脏 向下压肝脏 剪断肝与横膈之间的镰状韧带 使肝叶游离辨明肝脏各叶 用粗棉线绕肝左外叶、左中叶、右中叶根部一周 不结扎肝脏。
找出十二指肠 找其上壁血管较少的一处做一荷包环形缝合 在环形中间剪一个小口 沿小肠方向插入导管并向下推进4~5cm 切口荷包缝合固定导管 用止血钳关闭腹腔切口。
2、实验观察①观察并记录兔的一般情况 呼吸 频率、幅度角膜反射 对刺激的反映等指标。
然后每隔5min向十二指肠导管中注入25g/L复方氯化铵溶液5ml 动态观察并记录各项指标的变化 直至出现全身性抽搐、角弓反张为止 记录所用的复方氯化铵溶液的总量 并计算每公斤体重的用量。
3、结果时间和用量讨论1、氯化铵经肠道水解为氢离子和氨，氨经肠道弥散入血，氨在肝脏可形成尿素，另外氨与谷氨酸钠结合为谷氨酰胺，由于肝脏被结扎，其解毒能力减弱，造成血氨升高，没有结扎肝脏的动物也造成死亡，说明肝脏的解毒能力有一定的限度！2、氯化铵(NH4Cl)进入肠道后分解成NH3即氨，当大量的氨经肠道吸收进入血，使血氨增高而产生肝性脑病；肝脏大部分结扎后，造成肝脏鸟氨酸循环障碍，肝脏对氨的清除能力下降，高浓度的氨通过血脑屏障进入脑组织，引起肝性脑病。
氨在肝性脑病发病机制中的作用
Which is the toxic to brain cell?
Difficulty to be absorbed,and go across into BBB
Have no toxic effect on brain cell
Easy to be absorbed, and pass through into
Brain NH3
结论
单击此处添加您的正文
丁
16/18 29.4 /26.8
25 52.9
注意事项
剪镰状韧带时勿伤及膈肌和血管 肝叶扎紧
12指肠插管的方向 各组液体滴速尽量保持一致(60滴/分)
NH4
+
OHH+
NH3
function Impaired
Portosystemic shunting
Liver
KrebsHeneseleit
BBB
3
乙组：肝叶不结 扎+滴注氯化铵
4
丙组：肝叶结扎 +滴注氯化钠
5 丁组：肝叶结扎 +耳缘推注谷氨 酸钠溶液 20ml/kg+滴注 氯化铵
结果
抽搐
死亡
时间 用量（ml/kg）
时间 用量（ml/kg）
甲
12 25.6
24 46.6
乙
22 35.7
35 40.7
丙
注意比较丙组与甲组；甲组与乙组；丁组与甲组
051Leabharlann 指肠荷包 缝合并插管06腹壁全层连 续缝合，关 腹腔
07
观察
08
输液（60滴 /分）
09
动物大抽搐 时，记录时 间用量
10
动物死亡时， 记录时间用 量
氨在肝性脑病发病中的作用中山大学基础医学实验教学中心
每公斤体重 给药量(ml)
开始实验
小结
肝脏的功能 氨中毒机理
中山大学中山医学院 病理生理学教研室 谭红梅
实验原理
NH4+ + OH-
NH3 + H2O
脑 血脑 血液
屏障
鸟氨酸循环
肝
尿素
实验对象：家兔
实验器材：兔手术台及器械、注射器、导尿管 定时钟、纱布、棉线、缝合针等
实验药品：1%普鲁卡因、2.5%氯化铵混合液、 1%醋酸、2.5%谷氨酸钠混合液
观察指标
一般情况、角膜反射、对刺激的反应 出现痉挛时间、给药量
每次 5 ml 每 5 min 源自次 直到出现痉挛抢救十二指肠插管 1%醋酸，5 ml/kg
NH4+ + OH- NH3 + H2O
耳沿静脉 2.5%谷氨酸钠，30 ml/kg
谷氨酸钠 + NH3 谷氨酰胺
实验结果
组别
1
实
2
验
3
组
4
平均
1
对
2
照
3
组
4
平均
出现痉挛时间 (min)
总给药量 (ml)
实验步骤
家兔称重、固定 上腹正中局麻
实验组
对照组
结扎切除肝脏
假结扎肝脏
十二指肠插管 关闭腹腔松绑 注射氯化铵液
抢救
肝脏结扎示意图
尾叶
注意：切断镰状韧带时勿损伤后方的下腔静脉 在肝蒂部结扎肝脏，结扎要牢固
十二指肠插管荷包缝合法
胃
6～8 cm
注意：插管朝下，打防滑结，防治插管脱出
氯化铵混合液注射
氨在肝性脑病发病中的作用
中山大学中山医学院 病理生理学教研室 谭红梅
氨在肝性脑病发病中的作用
氨在肝性脑病发病中的作用【实验原理与目的】肝性脑病是指继发于严重肝脏疾病的一种神经-精神综合征。
氨中毒学说是阐述肝性脑病发病机制的主要学说之一。
本实验目的是指导学生采用肝大部分切除术复制出急性肝功能不全模型，对经不同处理的实验动物输入氯化铵，观察出现相应症状所需氯化铵用量及时间，探讨氨在肝性脑病发病机制中的作用。
此外，加强学生对实验设计对照原则的理解。
【实验对象】家兔2只，成年，健康，性别相同，体重相近，实验前禁食过夜，自由饮水。
【实验器材与药品】1．器械哺乳类动物急性手术器械一套，兔固定台，方盘，动脉夹，5ml、10ml、50ml注射器及针头，婴儿秤。
2．药品1％普鲁卡因，复方氯化铵(NH4C1)溶液。
3．其他塑料导管、静脉输液装置、粗、细手术线。
【实验步骤与观察指标】取家兔2只，随机分为实验组和对照组进行实验。
(一)实验组(肝叶大部分切除+注射复方NH4C1溶液)1．将家兔称重后仰卧固定于兔台上，剪去上腹部正中被毛，用1％普鲁卡因作局部浸润麻醉。
2．从剑突下作长6～8 cm的上腹部正中切口，打开腹腔，暴露出肝脏，术者左手食指和中指在镰状韧带两侧将肝脏往下压，右手持剪剪断肝与横膈之间的镰状韧带(图3-6-3-1)。
辨明肝脏各叶，用粗棉线沿肝左外叶、左中叶、右中叶和方形叶之根部围绕一周并结扎(图3-6-3-2)，待上述肝叶变成暗褐色后用组织剪逐叶剪除。
保留右外叶及尾状叶(图3-6-3-3)。
3．沿胃幽门向下找出十二指肠，用小圆缝合针作荷包缝合(图3-6～3-4)。
从荷包中央剪小口，将细塑料管插入十二指肠腔内约5 cm，收缩荷包缝合并打结，然后再用缝线在塑料管上另打一个结固定，以防塑料管滑脱。
将肠管回纳腹腔，只留塑料管一端于腹外，用三角缝合针全层缝合腹壁，将动物松绑，放在实验台上观察和进一步实验。
4．每间隔5 min用注射器通过塑料管向肠腔内注入2．5％的复方NH4C1溶液5 ml，直至出现全身性抽搐。
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
肝性脑病的概念
发病机理不清，可能机制：氨中毒学说、
假神经、综合学说
肝性脑病 血氨
2NH3+CO2
尿素
血氨清除减少 血氨生成增多
鸟氨酸循环障碍 肠道产氨↑
肝
鸟氨酸循环
肾脏产氨↑
肌肉产氨↑（腺苷酸分解）
氨对脑组织的毒性作用：
1.干扰脑能量代谢
NH3
-酮戊二酸
称重、固定、局麻开腹 1%普鲁卡因5ml 结扎肝门区血管（尾叶除外） 十指肠插管、固定，缝合腹腔 灌胃：2.5%NH4Cl或生理盐水 4ml/kg，每5分钟一次 痉挛抽搐 出现明显症状后心脏取血5ml 抗凝注射器
测血氨
各组家兔症状及血氨的变化
组别
症状
灌液次数
呼吸深快 肌无力 抽搐
血氨
甲 乙 丙
[注意事项]
1.游离肝脏时，动作宜轻柔，以免损伤肝脏。结 扎线应扎于肝叶根部，避免拦腰勒破肝脏。
2.十二指肠插管不要插向胃的方向。 3.心脏采血点（前肢下缘与胸骨左缘交叉点）
谢谢聆听
NH3
谷氨酸
ATP NADH NAD＋
2.干扰脑内神经递质
兴奋性递质（谷氨酸、乙酰胆碱） ↓ 抑制性递质（谷氨酰胺、GABA) ↑
谷氨酰胺
3.干扰神经细胞膜离子转运 NH3抑制钠钾ATP酶，干扰K＋内流
本实验采取结扎大部肝组织、并灌入氯化铵溶液
实验步骤
肝结扎＋NH4Cl
不结扎＋NH4Cl
肝结扎＋NaCl