粗脂肪的提取和定量测定
粗脂肪的提取和定量测定索氏提取法课件
利用溶剂回流和虹吸原理，使固体物 质连续不断地被纯溶剂萃取，直到有 效成分几乎全部被提取完。
使用比重瓶-重量法进行测定
比重瓶法
通过测量一定体积的样品在空气中和 水中的重量，计算出样品的比重，再 根据比重和密度之间的关系，推算出 样品的粗脂肪含量。
重量法
将样品中的粗脂肪与其他组分分离， 然后测量粗脂肪的质量，计算粗脂肪 的含量。
粗脂肪的重要性
粗脂肪是食品中重要的营养成分之一，对于食品的口感、风味和稳定性起着重 要作用。同时，粗脂肪含量的多少也直接影响着食品的质量和营养价值。
粗脂肪提取的方法
索氏提取法
索氏提取法是一种常用的粗脂肪提取方法，其原理是利用有机溶剂在回流和冷凝 的作用下重复萃取样品，将粗脂肪从样品中分离出来。
其他提取方法
药物代谢研究
通过索氏提取法，可以研 究药物在体内的代谢过程 ，了解药物的作用机制和 效果。
医学研究
在医学研究中，索氏提取 法用于提取和测定生物样 品中的粗脂肪，为医学研 究提供数据支持。
索氏提取法的改进和展望
自动化与智能化
未来索氏提取法的发展方向可能 是自动化和智能化，提高提取效
率，减少人为误差。
索氏提取法的特点
索氏提取法具有操作简便、准确度高、重现性好等优点，同 时对样品的处理量较大，适用于实验室和工业生产中大量样 品的处理。此外，索氏提取法还可以根据需要选择不同的溶 剂进行提取。
02
索氏提取法的操作流程
实验材料和仪器的准备
材料
样品（粗脂肪含量较高的物质） 、无水乙醚或石油醚（分析纯） 。
数据处理
数据处理是实验结果分析的重要环节，需要对实验数据进行清洗、整理和计算，以得出可靠的结论。
饲料粗脂肪的测定方法
饲料粗脂肪的测定方法饲料粗脂肪的测定方法可以采用经典的酶解-提取法和非酶解法两种方法。
一、酶解-提取法1. 样品准备：将饲料样品研磨成均匀细粉，尽量保持其原样水分含量。
2. 酶解：取一定量的饲料样品，加入适量有机溶剂（如正己烷、乙醚等）和酶解剂（如盐酸或硫酸），进行酶解。
酶解剂的浓度和酶解时间需要根据样品的特性来确定，一般在40-60分钟之间酶解。
3. 离心和分层：将酶解液进行离心，使有机相和水相分离。
将有机相收集到一个锥形瓶中，用氮气吹干以去除残留的有机溶剂。
4. 冷却和测定：将锥形瓶中的有机相浸入减压下的冷水浴中冷却，沉淀出的脂肪会形成一个明显分层。
然后，将上层的脂肪转移到一个干燥的烧杯中，并在55-60的热水浴中加热脱水。
最后，将烧杯放入一个烘箱中，在105下烘烤至恒定质量，称量质量差即为饲料样品中粗脂肪的含量。
二、非酶解法1. 样品准备：将饲料样品研磨成均匀细粉，尽量保持其原样水分含量。
2. 全脂提取：取一定量的饲料样品，加入适量有机溶剂（如正己烷、乙醚等），进行全脂提取。
提取时间和温度需要根据样品的特性来确定，一般在室温下搅拌提取6-8小时。
3. 过滤和洗涤：将提取液通过玻璃纤维滤纸过滤到一只干燥的烧杯中，将残渣用适量有机溶剂洗涤。
4. 烘干和测定：将烧杯放入一个烘箱中，在105下烘烤至恒定质量，称量质量差即为饲料样品中粗脂肪的含量。
三、常见误差和控制1. 水分的干燥：在测定过程中，水分的干燥程度会影响粗脂肪的测定结果。
因此，在样品准备和提取过程中，需要确保饲料样品中的水分含量没有显著变化。
2. 提取效率的控制：酶解-提取法中的酶解剂浓度和酶解时间，以及非酶解法中的提取剂用量和提取时间都会影响提取的效率。
需要进行试验确定最佳的条件，以确保提取的脂肪含量准确。
3. 溶剂残留的去除：在酶解-提取法中使用的有机溶剂需要彻底蒸发或用氮气吹干，以避免测定结果被样品中的有机溶剂影响。
总结：饲料粗脂肪的测定方法包括酶解-提取法和非酶解法两种。
饲料中粗脂肪的测定
饲料中粗脂肪的测定一、饲料中粗脂肪的定义和作用粗脂肪是指饲料中的脂肪总量，包括不溶于醇的脂肪和溶解于醇中的脂肪。
在饲料中，粗脂肪是能提供能量的重要成分之一，也是动物体内脂肪的来源之一。
粗脂肪的含量会直接影响到饲料的营养价值和动物的生长发育。
1. Soxhlet提取法Soxhlet提取法是目前应用较广泛的一种测定饲料中粗脂肪含量的方法。
该方法将饲料样品置于提取筒中，通过循环提取溶剂，将饲料中的脂肪提取出来。
然后，将提取得到的溶液蒸发至干燥，得到粗脂肪的质量。
这种方法操作简单、准确度高，被广泛应用于饲料行业。
2. 酸水解法酸水解法是利用酸对饲料中的脂肪进行水解，将水解得到的脂肪转化为游离脂肪酸，进而通过重量测定脂肪含量。
这种方法适用于粗脂肪含量较高的饲料，如油料等。
3. 催化水解法催化水解法是利用酶或催化剂对饲料中的脂肪进行水解，将水解得到的脂肪转化为游离脂肪酸。
然后，通过重量测定游离脂肪酸的含量，进而计算出粗脂肪的含量。
这种方法操作简便、快速，适用于不同类型的饲料。
三、粗脂肪测定的重要性1. 评估饲料的能量价值粗脂肪是饲料中的重要能量来源之一。
通过测定饲料中的粗脂肪含量，可以评估饲料的能量价值，为合理配制饲料提供依据。
同时，粗脂肪含量的高低还可以影响动物的采食量和生长发育。
2. 判断饲料质量粗脂肪含量是评估饲料质量的重要指标之一。
合格的饲料应当具有适宜的粗脂肪含量，过高或过低都会影响动物的营养摄入和消化吸收。
3. 为饲料配方提供依据根据各类动物的需要，合理配制饲料是提高养殖效益的重要环节。
粗脂肪的测定结果可以为饲料配方提供重要依据，确保饲料中的粗脂肪含量符合动物的营养需求。
四、结语饲料中粗脂肪的测定是饲料行业中非常重要的一项分析方法。
通过合适的测定方法，可以准确评估饲料的能量价值和质量，为合理配制饲料提供科学依据。
因此，提高粗脂肪测定的准确性和操作的简便性，对于饲料行业的发展和动物生产的提高具有重要意义。
实验三 粗脂肪的提取和定量测定—索氏提取法
实验三粗脂肪的提取和定量测定—索氏提取法一、实验目的1、掌握粗脂肪的提取方法，熟悉索氏提取法的操作。
2、学习如何测定样品的粗脂肪含量。
3、加深对生物大分子的认识，了解脂肪在生物体中的重要性。
二、实验原理1、粗脂肪提取脂肪具有亲油性，可以被有机溶剂提取。
索氏提取法是一种常用的粗脂肪提取方法。
在索氏提取法中，采用乙醚/醋酸乙酯（1：1）的溶液作为提取剂。
样品加入一定量提取剂中，经过适当的震荡、离心、蒸发浓缩和干燥等步骤，得到脂肪提取物。
将脂肪提取物加入硫酸中，经过酸解、加热、冷却和干燥等步骤后，得到脂肪酸甲酯。
通过气相色谱仪测定脂肪酸甲酯的含量，进而计算出样品中粗脂肪的含量。
三、实验操作（1）取适量已干燥样品，称重，记录质量。
（2）将样品放入索氏提取器的提取篮中，加入10mL乙醚/醋酸乙酯（1：1）溶液。
（3）起动提取器，以回流的方式进行提取，搅拌速度要适中，避免溅出溶液。
（4）提取30分钟后关闭提取器，将提取篮取出，用5mL提取液将其冲洗，并将提取篮放置于洗涤瓶上，使其流干。
（5）将提取篮置于已预热至100℃的蒸发皿内，用热风器将乙醚/醋酸乙酯挥发干燥。
（6）将蒸发皿置于70℃恒温箱中干燥至常重，取出，并记录质量。
（2）将粗脂肪提取物转移到20mL玻璃瓶中，加入2mL浓硫酸。
（3）在冷水浴上，加热约2小时，待样品变成棕色液体后取出，冷却。
（4）加入1mL冰醋酸冷却，混匀。
（5）加入0.2g氯化钠，混匀。
（6）转移待测样品到10mL移液管中。
（7）在10mL皮囊中，加入4mL正己烷，混匀。
（8）离心5分钟，取上层正己烷，并转移到气相色谱管中。
（9）气相色谱条件：柱：DB-23；FID检测器；柱温：120℃；检测器温：250℃。
（10）记录脂肪酸甲酯的含量，并计算出样品中粗脂肪的含量。
四、实验注意事项1、进行实验前，将索氏提取器和蒸发皿等器皿用乙醚或甲醇洗涤，并在烘箱中干燥。
2、在进行气相色谱柱装载前，必须将固定相和管柱内壁进行彻底清洗，以免污染样品。
实验5 粗脂肪的测定
五、注意事项
本法使用石油醚（沸程 30 ～ 60 ℃）故加 热时不能用明火。 注意抽提瓶底部要与水位接触，防止烧坏 电加热器。 提升冷凝管时，必须先打开箱盖，防止打 破冷凝管
六、思考题
本实验装置磨口处为什么不能涂抹凡士林 或真空脂？ 索氏提取法提取的为什么是粗脂肪 ? 做好本实验应注意哪些事项 ?
二、实验原理
本法为重量法，用脂肪溶剂将脂肪提出后 进行称量。该法适用于固体和液体样品。 本法不能提取出样品中结合状态的脂类， 故此法又称为游离脂类定量测定法。
三、材料、仪器与试剂 材料、
1、实验材料 芝麻，油菜籽等。 2、仪器设备 索氏提取器，烧杯，电热恒温箱，干燥器， 脱脂滤纸，镊子，分析天平，恒温水浴， 脱脂棉，实验用粉碎机，玻璃棒。 3、试剂 石油醚（化学纯，沸程 30 ～ 60 ℃）。
索 氏 脂 肪 提 取 器
1. 浸提管 2. 通气管 3. 虹吸管 4. 小烧瓶 5. 冷凝管
四、实验步骤
实验前准备 样品准备：种子洗净、晾干，放入80－ 样品准备：种子洗净、晾干，放入80－ 100℃ 烘箱中烘4 100℃ 烘箱中烘4小时，取出移入干燥缸中， 待冷却后备用。 提取器准备：洗净索氏提取器，在105℃ 提取器准备：洗净索氏提取器，在105℃烘 箱内烘干1 箱内烘干1小时。
四、实验步骤
1、样品包扎 准确称取2 准确称取2－4g 样品，置于研钵中磨细，将研 好的样品放在脱脂滤纸上，并用脱脂棉擦净研钵， 将其与样品一并用脱脂滤纸包住，用丝线扎好， 勿让样品漏出。 2、样品装入提取管 将滤纸包放入索氏提取器的提取管内，最后再 用石油醚洗净研钵后倒入提取管内。注意勿使纸 包内样品高于提取管实验目的
粗脂肪的提取和定量测定索氏提取法(精)课件
根据实验目的和要求，选择合适的单 位来表示粗脂肪含量。
CHAPTER 05
安全注意事项和实验规范
实验室安全规定和防护措施
01
02
03
04
实验操作人员必须经过专业培 训，熟悉实验操作流程和安全
规定。
实验室内应配备必要的安全设 施，如防护眼镜、实验服、化
学试剂柜、灭火器等。
实验操作过程中应避免直接接 触化学试剂，特别是腐蚀性、 有毒性和易燃易爆的试剂。
滴定分析法的原理和操作
原理
利用酸、碱滴定液滴定样品中的游离 脂肪酸和结合脂肪酸，以确定粗脂肪 的含量。
操作
将样品粉碎、溶解并用有机溶剂提取 粗脂肪，分离后用酸、碱滴定液滴定 游离和结合脂肪酸，计算粗脂肪的含 量。
分光光度分析法的原理和操作
原理
利用不同物质对光的吸取和散射程度不同，通过测定特定波长下的吸光度值来测定粗脂肪的含量。
提取液的收集和处理
用干燥的滤纸将溶剂中的粗脂肪过滤出来，并用无水乙醚冲 洗滤纸上的粗脂肪。
将收集到的粗脂肪放入干燥器中干燥，然后称重并计算粗脂 肪的含量。
CHAPTER 03
粗脂肪的定量测定
粗脂肪的测定方法
索氏提取法
利用有机溶剂在加热条件 下回流提取样品中的粗脂 肪，具有较高的提取效率 。
酸-碱抽提法
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实验记录和报告的撰写规范
实验操作过程中应认真记录实验数据 和现象，包括实验日期、实验材料、 操作步骤、试剂用量等。
实验报告的撰写应严谨、规范、准确 ，不得随便更改或遗漏实验数据和现 象。
实验报告应按照规定的格式撰写，包 括实验目的、实验原理、操作步骤、 数据分析和结论等部分。
粗脂肪的提取和定量测定的对比研究
粗脂肪的提取和定量测定的对比研究作者：毛一博吴怡昌来源：《新课程·下旬》2017年第10期摘要：脂肪组织中，测定脂肪所占比例的实验方法有很多种，结合现有实验条件，尝试使用三种沸点石油醚，采用索氏提取法对肥肉中的粗脂肪进行提取，从而分析出猪肉组织中粗脂肪的含量。
同时，将采用气相色谱分析法得到的数据与三种沸点石油醚得到的数据及提取速度做了比对，得出相应的结论，为类似的课题实验提供了具有一定参考价值的实验数据。
关键词：粗脂肪;提取;定量测定;对比研究据人民网等媒体报道，一项研究报告称，中国目前肥胖人口达3.25亿人，增幅超过美国、英国和澳大利亚。
这个数字在未来20年还可能增加一倍，并有加速提高的趋势。
肥胖症常常会伴发多种慢性疾病，是严重影响人们健康和生活质量的疾病之一，已成为世界各国面临的严重公共健康问题。
专家指出，肥胖症、艾滋病、吸毒和酗酒共同组成了新的四大社会医学难题。
开展与肥胖相关的课题研究是当前很多学者义不容辞的任务。
本文通过运用索氏提取法、气相色谱法来探究粗脂肪的提取和含量测定，从而为研究肥胖相关的课题提供参考。
一、实验过程（一）索氏提取法1.实验方法索氏提取法：以索氏提取器为提取仪器，一般采用低沸点有机溶剂（石油醚）回流抽提，除去样品中的粗脂肪，以样品与残渣重量之差，计算粗脂肪含量。
由于有机溶剂的抽提物中除脂肪外，还或多或少含有游离脂肪酸、甾醇、磷脂、蜡及色素等类脂肪物质，因而抽提法测定的结果只能是粗脂肪。
2.实验仪器和设备索氏抽提器、水浴锅、铁架台、分析天平、滤纸、研钵、培养皿、搅拌机、干燥箱、蒸馏仪器、试管、烧杯、玻璃棒、铁架台、50 ml烧杯、250 ml烧杯、500 ml烧杯、酒精灯、药匙、镊子、胶头滴管、10 ml量筒、小漏斗、架盘天平、表面皿、pH试纸、温度计。
3.材料和试剂新鲜猪肥肉末40 g、Na2SO4溶液、石油醚（沸点为30℃～60℃、60℃～90℃和90℃～120℃）等。
粗脂肪的提取和定量测定--索氏提取法[1]
![粗脂肪的提取和定量测定--索氏提取法[1]](https://img.taocdn.com/s3/m/19824a3f5a8102d276a22ff5.png)
四、实验器材
1、托盘天平
2.恒温水浴锅
3.101C-3型电热鼓风干燥箱
4.索氏提取仪
由冷凝管、抽提管和 平底烧瓶三个部件组 成，通过标准磨口相 对接。
提取瓶
提取管
冷凝器
搭建装置：用铁架台、２只十字夹、２只龙爪、 ２根乳胶管和１套索氏提取仪来搭建装置。注 意按照由下而上的顺序来搭建。固定点分别是 平底烧瓶的颈部和提取管的颈部，索氏提取仪 的高度以平底烧瓶的瓶颈略高于恒温水浴锅的 液面为宜。 注意：用龙爪夹玻璃仪器时，要先用手找好感 觉，不能太紧（否则会夹破）也不能太松（否 则会打滑而导致索氏提取仪的标准磨口接口漏 气）。
5.其它器材：
不锈钢镊子、药勺、 滤纸、铁架台、十字 夹、龙爪、手套、乳 胶管。
五、实验试剂
①.花生仁。 ②.石油醚：C.P.，沸程30～60℃。
六、实验操作流程图
①平底烧 瓶质量 ②花生颗 粒质量 称样 折滤纸斗 滤纸斗 高度低 于提取 管上弯 头部 从下至 上安装 搭索氏提取仪装置，并 置于80℃水浴锅中
平底烧 样品质 平底烧 粗脂质 虹吸时 提取 瓶质量 量（g） 瓶+粗 量（g） 间（min） 次数 （g） 脂质量
（ g）
样品中 粗脂的 含量
（%）
75.55
2.6
76.61
1.06Βιβλιοθήκη 91840.77
粗脂的质量 100 % 样品的质量 76 .61 - 75.55 1.06 W 100 % 100 % 40 .77% 2.6 2.6 样品粗脂的含量(%)
索氏抽提法测定脂肪最大的不足是耗时过长，如能将 样品先回流1～2次，然后浸泡在溶剂中过夜；次日再 继续抽提，则可明显提高提取率。
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粗脂肪的提取和定量测定
一、目的
1．学习和掌握用索氏（Soxhlet）提取器提取脂肪的原理和方法。
2．学习和掌握用重量分析法对粗脂肪进行定量测定。
二、原理
利用脂类物质溶于有机溶剂的特性。
在索氏提取器中用有机溶剂（本实验用石油醚，沸程为30～60℃）对样品中的脂类物质进行提取。
因提取的物质是脂类物质的混合物，故称其为粗脂肪。
索氏提取器是由提取瓶、提取管、冷凝器三部分组成的（图9-1），提取管两侧分别有虹吸管和连接管。
各部分连接处要严密不能漏气。
提取时，将待测样品包在脱脂滤纸包内，放入提取管内。
提取瓶内加入石油醚。
加热提取瓶，石油醚气化，由连接管上升进入冷凝器，凝成液体滴入提取管内，浸提样品中的脂类物质。
待提取管内石油醚液面达到一定高度，溶有粗脂肪的石油醚经虹吸管流入提取瓶。
流入提取瓶内的石油醚继续被加热气化、上升、冷凝，滴入提取管内，如此循环往复，直到抽提完全为止。
本法为重量法，将由样品抽提出的粗脂肪，蒸去溶剂，干燥，称重，按后面给的公式计算，求出样品中粗脂肪的百分含量。
三、器材
四、试剂和材料
1．样品芝麻种籽
将洗净、晾干的芝麻种籽放在80～100℃烘箱中烘4小时。
待冷却后，准确地称取2～4g，置于研钵中研磨细，将研碎的样品及擦净研钵的脱脂棉一并用脱脂滤纸包住用丝线扎好，勿让样品漏出。
或用特制的滤纸斗装样品后，斗口用脱脂棉塞好。
放入索氏提取器的提取管内，最后再用石油醚洗净研钵后倒入提取管内。
2．石油醚（化学纯，沸程30～60℃）。
五、操作
洗净索氏提取瓶，在105℃烘箱内烘干至恒重，记录重量。
将石油醚加到提取瓶内约为瓶容积的1/2～2/3。
将样品包放入提取管内。
把提取器各部分连接后，接口处不能漏气。
用70～ 80℃恒温水浴加热提取瓶，使抽提进行16小时左右，直至抽提管内的石油醚用滤纸检验无油迹为止。
此时表示提取完全。
提取完毕，取出滤纸包，再回馏一次，洗涤提取管。
再继续蒸馏，当提取管中的石油醚液面接近虹吸管口而未流入提取瓶时，倒出石油醚。
若提取瓶中仍有石油醚，继续蒸馏，直至提取瓶中石油醚完全蒸完。
取下提取瓶，洗净瓶的外壁，放入105℃烘箱中烘干、恒重，记录重量。
按下式计算样品中粗脂肪的百分含量。
思考题
1．索氏提取法提取的为什么是粗脂肪？
2．做好本实验应注意哪些事项？。