2018人教版高中生物选修一2.2《 土壤中分解尿素的细菌的分离与计数》课件1 (共19张PPT)
3过滤膜法
以测定饮用水中大肠杆菌的数目 为例。将已知体积的水过滤后， 将滤膜放在伊红美蓝培养液基上 培养。在该培养基上，大肠杆菌 的菌落呈现黑色。可以根据培养 基上黑色菌落的数目，计算出水 样中大肠杆菌的数量。
1.想一想，如何从平板上的菌落数推测出 每克样品中的菌落数？ 答：统计某一稀释度下平板上的菌落数， 最好能统计3个平板，计算出平板菌落数的平 均值，然后按课本旁栏的公式进行计算。
尿素
课题2 土壤中分解尿素的细菌的分离与计数
【研究思路】
（一）筛选菌株 原理： 有选择作用，
人为提供有利于目的菌株生长的 条件（包括营养、温度、PH等）， 同时抑制或阻止其他微生物生长。
回答：
1、在该配方中，为微生 物生长提供碳源和氮源的 是什么物质？葡萄糖、尿素 2、绝大多数的微生物都 能利用葡萄糖，但是，只 有能合成脲酶的微生物才 能分解尿素，请分析该培 养基是否对微生物有选择 作用？如果有，是如何进 行选择的？
操作
①设置重复组，目的是增强实验的说服力与准确性。将待测样 品经一系列10倍稀释，然后选择三个稀释度的菌液，分别取 0.1ml接种到已制备好的平板上，然后用无菌涂布器将菌液涂 布在整个平板表面，放在适宜的温度下培养计数菌落数。为是 结果接近真实值，可将同一稀释度菌液加到三个或三个以上的 平板上，经涂布培养，计算出菌落平均数 ②为了保证结果的准确，一般选择菌落数在30—300的平板 进行计数，若设置的重复组中结果相差太远，意味着操作有 误，需重新实验。
专题2 微Байду номын сангаас物的培养与应用
【课题目标】
研究培养基对微生物的选择作用，进行微 生物数量的测定。
【研究对象】
土壤中能分解尿素的细菌
【达到目的】
（1）从土壤中分离出能够分解尿素的细菌 （2）统计每克土壤样品中究竟含有多少这 样的细菌
课题背景
尿素是一种重要的农业氮肥。但是尿素并不 能直接被农作物吸收。只有当土壤中的细 菌将尿素分解成氮之后，才能被植物利用。 土壤中的细菌之所以能分解尿素，是因为 它们能合成脲酶。 尿素最初是从人的尿液中发现的。 1828年，德国化学家维勒成功地通过无机 物的化学反映合成了尿素，揭开了历史上 人工合成有机物的新篇章。
计算公式：
每克样品中的菌落数=（某一稀释度下平板上生长的平均菌落 数／涂布平板所用稀释液体积）×稀释倍数
2、显微镜直接计数法
（1）原理：此法利用特定细菌计数板或血细 胞计数板，在显微镜下计算一定容积的样品 中微生物数量。 （2）方法：用计数板计数。计数板是特制的 载玻片，其上有特定的面积为1mm2，高为 0.1mm的计数室，一个计数室又被分成25个 （或16个）中格，每个中格再被分成16个 （或25个）小格，每个计数室都由400个小格 组成。
（三）设置对照
A同学的结果与其他同学不同，可能 的解释有两种。 一是由于土样不同； 二是由于培养基污染或操作失误。 究竟是哪个原因，可以通过实验来证明。
实验方案有两种
一种方案： 可以由其他同学用与A同学一样的土样进 行实验，如果结果与A同学一致，则证明A无 误；如果结果不同，则证明A同学存在操作失 误或培养基的配制有问题。 另一种方案： 将A同学配制的培养基在不加土样的情况 下进行培养，作为空白对照，以证明培养基是 否受到污染。通过这个事例可以看出，实验结 果要有说服力，对照的设置是必不可少的。
选择培养基：在微生物学中，将允许
特定种类的微生物生长，同时抑制或阻止 其他种类微生物生长的培养基。
【统计菌落数目】 常用方法：稀释涂布平板法、显微镜 直接计数法， 还可以用过滤膜法
1、稀释涂布平板法（也叫活菌计数法）
原理：当样品的稀释度足够高时，培养基
表面生长的一个菌落，来源于样品稀释液 中的一个活菌，通过统计平板上的菌落数， 就能推测出样品中大约含有多少活菌。
• （3）操作：将稀释的样品滴在计数板上， 盖上盖玻片，然后在显微镜下计数4~5个中 格中的细菌数，并求出每个小格所含的细 菌数，再按计数公式求出每毫升样品中所 含的细菌数。 • （4）计算公式 • 每毫升原液所含细菌数=每小格平均细菌数 X400X10000X稀释倍数 • （5）缺点：不能区分死菌与活菌。
四、实验案例
土壤中某样品细菌的分离与计数
实验的具体操作步骤如下: 1.土壤取样 从肥沃、湿润的土壤中取样。先 铲去表层土3 cm左右，再取样，将 样品装入事先准备好的信封中。
2.设置重复组，目的是增强实验的说服力 与准确性。将待测样品经一系列10倍稀 释，然后选择三个稀释度的菌液，分别取 0.1ml接种到已制备好的平板上，然后用 无菌涂布器将菌液涂布在整个平板表面， 放在适宜的温度下培养计数菌落数。为是 结果接近真实值，可将同一稀释度菌液加 到三个或三个以上的平板上，经涂布培养， 计算出菌落平均数
3.为了保证结果的准确，一般选择菌落 数在30—300的平板进行计数，若设置 的重复组中结果相差太远，意味着操作 有误，需重新实验。
计算公式：
每克样品中的菌落数=（某一稀释度下平 板上生长的平均菌落数／涂布平板所用稀 释液体积）×稀释倍数
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土壤中分解尿素的细菌的分离与计数课件
课题2 土壤中分解尿素的细菌的分离与计数一、预习与质疑（课前完成）（一）预习内容课本P21-26（二）预习目标1．阐述选择培养基的应用原理；能根据各种微生物的代谢特征，配制选择培养基；2．阐述土壤中分解尿素的细菌的分离与计数过程，列举其中涉及的相关技术并会用这些技术解决生产生活中的相关问题。
3．学会运用无菌技术完成微生物的分离、培养和技术各个环节。
（三）预习检测一、理论基础1．筛选菌株(1)实验室中微生物筛选的原理：人为提供有利于生长的条件(包括营养、温度、pH等)，同时或其他微生物生长。
(2)选择培养基：在微生物学中，将允许种类的微生物生长，同时和其他种类微生物生长的培养基，称作选择培养基。
（3）配制选择培养基的依据根据选择培养的菌种的生理代谢特点加入某种物质以达到选择的目的。
例如，培养基中不加入有机物可以选择培养微生物；培养基中不加入氮元素，可以选择培养微生物.加入高浓度的食盐可选择培养金黄色葡萄球菌等。
2．统计菌落数目（1）测定微生物数量的常用方法有和。
（2）稀释涂布平板法统计样品中活菌的数目的原理当样品的足够高时，培养基表面生长的一个菌落，来源于样品稀释液中的一个。
通过统计平板上的菌落数，就能推测出样品中大约含有多少活菌。
为了保证结果准确，一般选择菌落数在的平板进行计数。
3．设置对照设置对照的主要目的是排除实验组中对实验结果的影响，提高实验结果的。
例如为了排除培养基是否被杂菌污染了，需以培养的培养基作为空白对照。
二、实验设计（结合课题1学过的知识）关于土壤中某样品细菌的分离与计数实验操作步骤如下：1．取样：从肥沃、湿润的土壤中取样。
应先 3 cm左右，再取样。
2．制备：准备牛肉膏蛋白胨培养基和选择培养基将菌液稀释相同的倍数，在牛肉膏蛋白胨培养基上生长的菌落数目应明显选择培养基上的数目，因此，牛肉膏蛋白胨培养基可以作为，用来判断选择培养基是否起到了选择作用。
3．微生物的与观察将10g土样加入盛有90 mL无菌水的锥形瓶中(体积为250 mL)，充分摇匀，吸取上清液，转移至盛有的无菌水大试管中，将土样以1、101、102……依次等比稀释至107稀释度，并按照由107～103稀释度的顺序分别吸取进行平板涂布操作。
高中生物课题2土壤中分解尿素的细菌的分离与记数养课件新人教版选修1
将涂布好的培养皿放在30℃温度下培养。随着培养时 间的延长，会有不同的菌落产生。比较牛肉膏培养基和选 择培养基中菌落的数量、形态等，并做好记录。
挑选选择培养基中不同形态的菌落接入含酚红培养基 的斜面中，观察能否产生如课本中图2-10的颜色反应。
（5）细菌的计数
选取菌落数在30～300的平板进行计数。在同一稀释度 下，至少对3个平板进行重复计数，然后求出平均值，并 根据平板所对应的稀释度计算出样品中细菌的数目。
②操作：a、设置重复组：增强实验的说服力和准确性。 将待测样品经过一系列的稀释，选择三个稀释度的菌 液均匀涂布在平板上，然后培养。
（注意）：为了结果接近真实值，可将同一稀释 度菌液涂布到3个或3个以上的平板上，经培养，计算 出菌落的平均数。
教材中用楷体字编排的实例是为了说明设置重复组的重 要性。第一位同学只涂布了一个平板，没有设置重复 组，因此结果不具有说服力。第二位同学考虑到设置 重复组的问题，涂布了3个平板，但是，其中1个平板 的计数结果与另2个相差太远，说明在操作过程中可 能出现了错误，因此，不能简单地将3个平板的计数 值用来求平均值。这个实例启示学生，在设计实验时， 一定要涂布至少3个平板，作为重复组，才能增强实 验的说服力与准确性。在分析实验结果时，一定要考 虑所设置的重复组的结果是否一致，结果不一致，意 味着操作有误，需要重新实验。
实验方案有两种：一种方案是可以由其他同学用与A同 学一样的土样进行实验，如果结果与A同学一致，则证 明A无误；如果结果不同，则证明A同学存在操作失误或 培养基的配制有问题。另一种方案是将A同学配制的培 养基在不加土样的情况下进行培养，作为空白对照，以 证明培养基是否受到污染。通过这个事例可以看出，实 验结果要有说服力，对照的设置是必不可少的。
挑选选择培养基中不同形态的菌落接入含酚红培养基 的斜面中，观察能否产生如课本中图2-10的颜色反应。
（5）细菌的计数
选取菌落数在30～300的平板进行计数。在同一稀释度 下，至少对3个平板进行重复计数，然后求出平均值，并 根据平板所对应的稀释度计算出样品中细菌的数目。
②操作：a、设置重复组：增强实验的说服力和准确性。 将待测样品经过一系列的稀释，选择三个稀释度的菌 液均匀涂布在平板上，然后培养。
（注意）：为了结果接近真实值，可将同一稀释 度菌液涂布到3个或3个以上的平板上，经培养，计算 出菌落的平均数。
教材中用楷体字编排的实例是为了说明设置重复组的重 要性。第一位同学只涂布了一个平板，没有设置重复 组，因此结果不具有说服力。第二位同学考虑到设置 重复组的问题，涂布了3个平板，但是，其中1个平板 的计数结果与另2个相差太远，说明在操作过程中可 能出现了错误，因此，不能简单地将3个平板的计数 值用来求平均值。这个实例启示学生，在设计实验时， 一定要涂布至少3个平板，作为重复组，才能增强实 验的说服力与准确性。在分析实验结果时，一定要考 虑所设置的重复组的结果是否一致，结果不一致，意 味着操作有误，需要重新实验。
实验方案有两种：一种方案是可以由其他同学用与A同 学一样的土样进行实验，如果结果与A同学一致，则证 明A无误；如果结果不同，则证明A同学存在操作失误或 培养基的配制有问题。另一种方案是将A同学配制的培 养基在不加土样的情况下进行培养，作为空白对照，以 证明培养基是否受到污染。通过这个事例可以看出，实 验结果要有说服力，对照的设置是必不可少的。
生物：2.2《土壤中分解尿素的细菌的分离与计数》课件(新人教版选修1)
原因：因为热泉温度70～800C，淘汰了绝大 多数微生物只有Taq细菌被筛选出来。
启示：寻找目的菌种时要根据它对生存环境的 要求，到相应的环境中去寻找。
2、实验室中微生物的筛选原理：
人为提供有利于目的菌株生长的条件(包括营 养、温度、pH等)，同时抑制或阻止其他微生 物生长。 要分离一种微生物，必须根据该微生物的特点， 包括营养、生理、生长条件等； 方法： ⑴抑制大多数微生物不能生长 ⑵造成有利于该菌生长的环境， 结果：培养一定时间后，该菌数量上升，再通过 平板稀释等方法对它进行纯化培养分离。
3、土壤中分解尿素的细菌的分离与计数所需培 养基：
KH2PO4 NaH2PO4 MgSO4`7H2O
葡萄糖
1.4g 2.1g 0.2g 10.0g
尿素
1.0g
琼脂
15.0g
①从物理性质看此培养基属于哪类？
固体培养基
②在此培养基中哪些作为碳源、氮源？
碳源：葡萄糖、尿素 氮源：尿素 5、培养基选择分解尿素的微生物的原理
结论：为获得不同类型的微生物，就需要按不
同的稀释度进行分离，同时还应当有针对性地 提供选择培养的条件。
㈣.取样涂布
◆实验时要 对培养皿作 好标记。注 明培养基类 型、培养时 间、稀释度、 培养物等。
◆如果得到了2个或2个以上菌落数目在30——300的平板， 则说明稀释操作比较成功，并能够进行菌落的计数，如 果同一稀释倍数的三个重复的菌落数相差较大，表明试 验不精确，需要重新实验。
TIP2：什么叫认知获取：知道一些概念、过程、信息、现象、方法，知道它们 大 概可以用来解决什么问题，而这些东西过去你都不知道；
TIP3：认知获取是学习的开始，而不是结束。
为啥总是听懂了， 但不会做，做不好？
启示：寻找目的菌种时要根据它对生存环境的 要求，到相应的环境中去寻找。
2、实验室中微生物的筛选原理：
人为提供有利于目的菌株生长的条件(包括营 养、温度、pH等)，同时抑制或阻止其他微生 物生长。 要分离一种微生物，必须根据该微生物的特点， 包括营养、生理、生长条件等； 方法： ⑴抑制大多数微生物不能生长 ⑵造成有利于该菌生长的环境， 结果：培养一定时间后，该菌数量上升，再通过 平板稀释等方法对它进行纯化培养分离。
3、土壤中分解尿素的细菌的分离与计数所需培 养基：
KH2PO4 NaH2PO4 MgSO4`7H2O
葡萄糖
1.4g 2.1g 0.2g 10.0g
尿素
1.0g
琼脂
15.0g
①从物理性质看此培养基属于哪类？
固体培养基
②在此培养基中哪些作为碳源、氮源？
碳源：葡萄糖、尿素 氮源：尿素 5、培养基选择分解尿素的微生物的原理
结论：为获得不同类型的微生物，就需要按不
同的稀释度进行分离，同时还应当有针对性地 提供选择培养的条件。
㈣.取样涂布
◆实验时要 对培养皿作 好标记。注 明培养基类 型、培养时 间、稀释度、 培养物等。
◆如果得到了2个或2个以上菌落数目在30——300的平板， 则说明稀释操作比较成功，并能够进行菌落的计数，如 果同一稀释倍数的三个重复的菌落数相差较大，表明试 验不精确，需要重新实验。
TIP2：什么叫认知获取：知道一些概念、过程、信息、现象、方法，知道它们 大 概可以用来解决什么问题，而这些东西过去你都不知道；
TIP3：认知获取是学习的开始，而不是结束。
为啥总是听懂了， 但不会做，做不好？
人教版高中生物选修一专题二课题2《土壤中分解尿素的细菌的分离与计数》 课件(共19张PPT)
47. 不是境况造就人，而是人造就境况。48. 你想成为幸福的人吗?但愿你首先学会吃得起苦。——屠格涅夫49. 成功的时候，都说是朋友。但只有母亲——她是失败时的伴侣。——郑振峄 50.在我们的一生中，没有人会为你等待，没有机遇会 为你停留，成功也需要速度 51.不论做什么事，都要相信你自己，别让别人的一句话将你击倒。人生没有对错，只有选择后的坚持，不后悔，走下去，走着走着，花就开了。52.吃别人吃不了的苦，忍别人受不了的气，付出比别人更 多的，才会享受的比别人更多。53.我们每个人的人生之舟都需要自己掌舵，自己掌控。懂得，是跌倒了依然会选择站起，失败了依然会选择重来，受伤了依然会选择坚强;懂得，是在黑暗中依然不迷失方向，在生死关头依然不乱了 方寸，在灾难包围中依然会微笑前行。54.思路清晰远比卖力苦干重要，心态正确远比现实表现重要，选对方向远比努力做事重要，做对的事情远比把事情做对重要。成长的痛苦远比后悔的痛苦好，胜利的喜悦远比失败的安慰好。 55.再大的事，到了明天就是小事，再深的痛，过去了就把它忘记，就算全世界都抛弃了你，——你依然也要坚定前行，因为，你就是自己最大的底气。56.人生路上常有风雨，需要一个好的心态。再难的路，只要不放弃，一直走下 去，总会走到终点;再重的担子，笑着是挑，哭着也是挑，又何必让自己难堪;再不顺的生活，撑一撑，也就过去了，笑容，最终会出现在脸上。57.最精美的宝石，受匠人琢磨的时间最长。最贵重的雕刻，受凿的打击最多。58.只有 对过去既往不咎，才能甩掉沉重的包袱；只有能够看轻自己，才能做到轻装上阵。只要不放弃，就没有什么能让自己退缩；只要够坚强，就没有什么能把自己打垮。59.学会驾驭自己的生活，即使困难重重，也要满怀信心的向前。 不自怜不自卑不哀怨，一日一日过，一步一步走，那份柳暗花明的喜乐和必然的抵达，在于我们自己的修持。真正想做成一件事，不取决于你有多少热情，而是看你能多久坚持。60.永远不要沉溺在安逸里得过且过，能给你遮风挡 雨的，同样能让你不见天日。只有让自己更加强大，才能真正的撑起一片天。61.人生中谁都有梦想，但要立足现实，在拼搏中靠近，在忍耐中坚持，别把它挂在嘴边，常立志者无志。62.人这一辈子，其实做不了几件事，所以想做
生物选修Ⅰ人教新课标2-2土壤中分解尿素的细菌的分离与计数课件(16张)
但A同学认为自己选用土壤样品不同导致结果不同，但是A同学没有设计 对照，拿不出让同学信服的证据。你能通过设置对照，帮助A同学排除上 述两个可能影响因素吗？
方案1：其他同学用与A同学一样的土样进行实验。如果结果与A同学 一致，则证明A无误；如果结果不同，则证明A同学存在操作失误或培 养基的配制有问题。
㈢设置对照
1.目的：排除实验组中非测试因素对实验结果的影响，提高实验结果 的可信度。
2.实例：在做分解尿素的细菌的筛选与统计菌落数目的实验时，A同学 从对应的106倍稀释的培养基中筛选出大约150个菌落，但是其他同学在 同样的稀释度下只选择出大约50个菌落。其他同学认为A同学结果有问 题，可能是A同学培养基被杂菌污染，或者培养基混入其他含氮物质， 导致其他杂菌生长。
3.选择培养基
本课题使用的培养基
KH2PO4
1.4g
NaHPO4
2.1g
问题1：该培养基的配方中，为微生物的生 长提供碳源和氮源的分别是什么物质？
碳源：葡萄糖、尿素 氮源：尿素
MgSO4 .7H2O 0.2g
葡萄糖
10.0g
尿素
1.0g
问题2：此配方能否筛选出产生脲酶的细菌？ 为什么？
能。只有产生脲酶的细菌才能利用尿素作 为氮源而生存。
计算公式： 每克样品中的菌落数＝(C÷V)×M C代表某一稀释度下平板上生长的平均菌落数，V代表涂布平板时所 用的稀释液的体积(mＬ)，M代表稀释倍数。
【例2】：两位同学用稀释涂布平板法测定同一土壤样品中的细 菌数。从对应稀释倍数为106的培养基中，得到以下两种统计结果。
1、甲同学在该浓度下涂布了一个平板，统计的菌落数为230。 2、乙同学在该浓度下涂布了A、B、C三个平板，统计的菌落 数分别为21、212、256，该同学以这三个平板上菌落数的平均值 163作为统计结果。你认为这两位同学的作法正确吗？如果有问题， 错在哪？
方案1：其他同学用与A同学一样的土样进行实验。如果结果与A同学 一致，则证明A无误；如果结果不同，则证明A同学存在操作失误或培 养基的配制有问题。
㈢设置对照
1.目的：排除实验组中非测试因素对实验结果的影响，提高实验结果 的可信度。
2.实例：在做分解尿素的细菌的筛选与统计菌落数目的实验时，A同学 从对应的106倍稀释的培养基中筛选出大约150个菌落，但是其他同学在 同样的稀释度下只选择出大约50个菌落。其他同学认为A同学结果有问 题，可能是A同学培养基被杂菌污染，或者培养基混入其他含氮物质， 导致其他杂菌生长。
3.选择培养基
本课题使用的培养基
KH2PO4
1.4g
NaHPO4
2.1g
问题1：该培养基的配方中，为微生物的生 长提供碳源和氮源的分别是什么物质？
碳源：葡萄糖、尿素 氮源：尿素
MgSO4 .7H2O 0.2g
葡萄糖
10.0g
尿素
1.0g
问题2：此配方能否筛选出产生脲酶的细菌？ 为什么？
能。只有产生脲酶的细菌才能利用尿素作 为氮源而生存。
计算公式： 每克样品中的菌落数＝(C÷V)×M C代表某一稀释度下平板上生长的平均菌落数，V代表涂布平板时所 用的稀释液的体积(mＬ)，M代表稀释倍数。
【例2】：两位同学用稀释涂布平板法测定同一土壤样品中的细 菌数。从对应稀释倍数为106的培养基中，得到以下两种统计结果。
1、甲同学在该浓度下涂布了一个平板，统计的菌落数为230。 2、乙同学在该浓度下涂布了A、B、C三个平板，统计的菌落 数分别为21、212、256，该同学以这三个平板上菌落数的平均值 163作为统计结果。你认为这两位同学的作法正确吗？如果有问题， 错在哪？
人教版高中生物选修1-2.2《土壤中分解尿素的细菌的分离与计数》精品课件
思考讨论
2、统计的菌落数往往比活菌的实际数目高还是 低，为什么？ 低。因为当两个或多个细胞连在一起时，平板上 观察到的只是一个菌落。因此，统计结果一般用 菌落数而不是活菌数来表示。
二、实验设计
（一）土壤取样
从肥沃、湿润的土壤中取样。先铲去表层 土3cm左右，再取样，将样品装入事先准备好 的信封中。
缺点：
1mm
不能区分死菌与活菌
（二）统计菌落数目 2、统计菌落数目——稀释涂布平板法
平板菌落数统计注意事项 1、几个菌落粘连一起，只要肉眼能区分，就算几个； 2、不管菌落大小，只要肉眼看得见，就应该计数；
思考讨论
1、为什么测平板上的菌落数可以推测样品中的活 菌的数目？ 当样品的稀释度足够高时，培养基表面生长的一 个菌落，来源于样品稀释液中的一个活菌。通过 统计平板上的菌落数，就能推测出样品中大约有 多少活菌。为了保证结果准确，一般选用菌落数 在30~300的平板进行计数。
三、操作提示
（一）无菌操作 1、取土用的小铁铲和盛土样的信封在使用前 都需要灭菌。 2、应在火焰旁称取土壤。在火焰附近将称好 的土样倒入锥形瓶中，塞好棉塞。
3、在稀释土壤溶液的过程中，每一步都要 在火焰旁操作。 （二）做好标记 注明培养基种类、培养日期、平板培养样品 的稀释度等。 （三）规划时间
取平均值233
3.用稀释涂布平板法测定同一土壤样品中的细菌数，
在对应稀释倍数为106的培养基中，得到以下几种统
计结果，正确的是( D )
A．涂布了一个平板，统计的菌落数是230
B．涂布了两个平板，统计的菌落数是215和260，取
平均值238
C．涂布了三个平板，统计菌落数是21、212和256，
取平均值163
人教版高中生物选修一2-2《土壤中分解尿素的细菌的分离与计数》ppt同步课件
验操作与评价
1．实验设计 (1)土壤取样 ①土壤微生物大约70%～90%是 细菌 。
②细菌适宜在酸碱度接近中性 的 潮湿 土壤中生长，绝大多
数分布在距地表 3～8 cm 的土壤层。
(2)样品处理
样品的 稀释程度 直接影响平板上生长的 菌落数目，选用一定稀释 范围的样品液进行培养，保证菌落数在30～300 之间，便于计数。 (3)微生物的培养与观察 将培养基平板放置于 30～37 ℃ 温室中培养1～2d，每隔 24h 统计
(5) 在进行分离分解尿素的细菌的实验时， A同学从培养基上筛选
出大约150个菌落，而其他同学只筛选出大约50个菌落。A同学的
实验结果产生的原因可能有______。(填序号) ①由于土样不同 ③由于操作失误 思维导图： ②由于培养基污染 ④没有设置对照
深度剖析
(1)培养基中加入尿素的目的是筛选尿素细菌。
( ①加尿素 糖 ②不加尿素 ③加琼脂 ④不加琼脂 )。 ⑤加葡萄
⑥不加葡萄糖
⑦加硝酸盐
⑧不加硝酸盐
A．①③⑤⑦ B．②④⑥⑧ C．①③⑤⑧ D．①④⑥⑦
解析
土壤中分解尿素的细菌能够合成脲酶，将尿素分解生
成氨，利用尿素中的氮合成自身有机物。培养基中只加尿素， 分解尿素的细菌能生长，其他微生物不能生长；分离微生物 要用固体培养基；土壤中分解尿素的细菌属于异养微生物， 需要加葡萄糖作为碳源。
实验中要注意单一变量原则和对照原则，操作中要严格进行无菌
操作。 答案 (1)苯酚 A 稀释涂布平板 (2)④的培养基没有加入苯酚 稀释涂布平板法或平
作为碳源，⑤的培养基加入苯酚作为碳源 板划线
以防止冷凝后形成的水珠滴落在培养基上污染培养基
(3)培养基灭菌，接种环境灭菌，接种过程无菌操作
人教版高中生物选修一2.2《土壤中分解尿素的细菌的分离与计数》ppt课件
操作提示
• 无菌操作
1. 取土样的小铁铲和盛土样的信封在使用前 都需要灭菌。 2. 应在火焰旁称取土壤。在火焰附近将称 好的土样倒入烧瓶中，塞好棉塞。 3. 在稀释土壤溶液的过程中，每一步都要 在火焰旁操作。
做好标记
• 本实验使用的平板和试管比较多。为 避免混淆，最好在使用前就做好标记。
例如：
在标记培养皿时，应注明培养基种类、 培养日期以及平板上培养样品的稀释 度。
实验室微生物的筛选原理
应用筛选 Taq 细菌的原理，人为提 供有利于目的菌株生长的条件（包 括营养、温度、pH等），同时抑制 或阻止其他微生物生长。
统计菌落数目
常用稀释涂布平板法统计样品中活菌的数 目。样品的稀释度足够高时，培养基表面 生长的一个菌落，来源于样品稀释液中的 一个活菌。通过统计平板上的菌落数，就 能推测出样品中大约含有多少活菌。为保 证结果准确，一般选择菌落数30—300的
■高中生物课件（人教课标版）
专题2 微生物的培养与应用
课题2 土壤中分解尿素的细菌的分离与计数
课题背景
尿素是一种重要的农业氮肥。但是尿素并 不能直接被农作物吸收。只有当土壤中的 细菌将尿素分解成氮之后，才能被植物利 用。土壤中的细菌之所以能分解尿素，是 因为它们能合成脲酶。
尿素最初是从人的尿液中ຫໍສະໝຸດ 现的。• 指示剂也可以帮助我们准确地鉴定该 种细菌能否分解尿素。
相关链接
• 活菌计数技术广泛应用于土壤含菌亮的测 定、食品卫生和水源污染度的检验等方面。 如果你赶兴趣，可以从下列项目中选做一 个。 空气中微生物总数的检测 水中细菌总数的检测 牛奶中细菌的分离与计数 土壤中真菌（或放线菌）的分离与计数
规划时间
• 对于耗时较长的生物实验，我们需要 实现规划时间，以便提高工作效率， 在操作时更加有条不紊。
212土壤中分解尿素的细菌的分离与计数课件人教版选修一.ppt
2021/3/24
2．统计菌落数目的方法 (1)____直__接______计数法 ①过程：利用特定细菌计数板或血细胞计数板，在_显__微__镜___ 下计算一定容积里样品中微生物的数量。 ②缺点：不能区分死菌和活菌。 (2)间接计数法(活菌计数法) 根据微生物在固体培养基上所形成的一个菌落是由一个 ___单__细__胞_____繁殖而成，按比例稀释样品后，将稀释液接种培 养，统计___菌__落___的数目。
2021/3/24
2．分解尿素的细菌的鉴别
(1)在培养基中加入酚红指示剂，则培养基会变红； (2)检测 pH 的变化来判断是否存在。
2021/3/24
3．分离分解尿素的细菌的实验设计原则 (1)设立重复组原则 统计某一稀释度下的平板上的菌落数时，要至少涂布 3 个 平板作重复组，来增强实验结果的说服力与准确性。
【答案】：C
2021/3/24
【配对练习 1】对表层土壤中自生固氮菌的分离采取的原 理(方法)是( )
A．依据自生固氮菌的生长繁殖不需要氮源 B．依据不同微生物生长繁殖所需 pH 不同 C．依据不同微生物生长繁殖所需温度条件不同 D．依据不同微生物代谢类型不同
2021/3/24
解析：本题考查培养基的选择性、微生物的生长发育特点、 影响微生物正常生长的因素。影响微生物生长的因素有多种， 除培养基的营养外还有温度、pH、氧等。在无氮培养基上只有 固氮菌能正常生长繁殖。
种处理，给对照组另一条件的处理，为条件对照。
答案：D
2021/3/24
2021/3/24
分离与计数土壤中分解尿素的细菌的实验 1．菌种筛选 (1)培养基：__选__择___培养基。 (2)特点：___尿__素___是唯一氮源。 2．统计菌落数目 (1)计算方法： ①直接计数法；②间接计数法。 (2)平板计数公式 每克样品中的菌株数＝______(C__/V__)×__M______
2．统计菌落数目的方法 (1)____直__接______计数法 ①过程：利用特定细菌计数板或血细胞计数板，在_显__微__镜___ 下计算一定容积里样品中微生物的数量。 ②缺点：不能区分死菌和活菌。 (2)间接计数法(活菌计数法) 根据微生物在固体培养基上所形成的一个菌落是由一个 ___单__细__胞_____繁殖而成，按比例稀释样品后，将稀释液接种培 养，统计___菌__落___的数目。
2021/3/24
2．分解尿素的细菌的鉴别
(1)在培养基中加入酚红指示剂，则培养基会变红； (2)检测 pH 的变化来判断是否存在。
2021/3/24
3．分离分解尿素的细菌的实验设计原则 (1)设立重复组原则 统计某一稀释度下的平板上的菌落数时，要至少涂布 3 个 平板作重复组，来增强实验结果的说服力与准确性。
【答案】：C
2021/3/24
【配对练习 1】对表层土壤中自生固氮菌的分离采取的原 理(方法)是( )
A．依据自生固氮菌的生长繁殖不需要氮源 B．依据不同微生物生长繁殖所需 pH 不同 C．依据不同微生物生长繁殖所需温度条件不同 D．依据不同微生物代谢类型不同
2021/3/24
解析：本题考查培养基的选择性、微生物的生长发育特点、 影响微生物正常生长的因素。影响微生物生长的因素有多种， 除培养基的营养外还有温度、pH、氧等。在无氮培养基上只有 固氮菌能正常生长繁殖。
种处理，给对照组另一条件的处理，为条件对照。
答案：D
2021/3/24
2021/3/24
分离与计数土壤中分解尿素的细菌的实验 1．菌种筛选 (1)培养基：__选__择___培养基。 (2)特点：___尿__素___是唯一氮源。 2．统计菌落数目 (1)计算方法： ①直接计数法；②间接计数法。 (2)平板计数公式 每克样品中的菌株数＝______(C__/V__)×__M______
高中生物专题二课题2土壤中分解尿素的细菌的分离与计数课件新人教版选修1
2．计数方法 利用_显__微__镜__
1．土壤取样
从富含有__机__质____、酸碱度接近中性的潮湿________土 壤中取样。取样时，一般要铲去表层土，在距3地～表8 的 ________ cm的土壤层取样。
2．样品的稀释
_____样__品___稀的，释选__度用__一__定__稀直释接范围影的响样平品液板菌进上落行数培生目养长，的
(3)想一想这种培养基对微生物是否具有选择作用？ 如果具有，又是如何进行选择的？ _______________________________________________ ____
接链目栏
解析：碳源是提供碳元素的物质，氮源是提供氮 元素的物质。所以碳源是葡萄糖，氮源是尿素。该培养 基的配方中含有凝固剂 ——琼脂，因此，配制的一定为 固体培养基。绝大多数生物都能利用葡萄糖，但是只有 能合成脲酶的微生物才能分解尿素，因此这种培养基对 微生物有选择作用。选择的原则是只有能够利用尿素的 微生物才能够生长。
答案： (1)葡萄糖 尿素 (2)固体 含有凝固剂 琼脂
(3)有选择作用。此配方中尿素是唯一氮源，因此，只有 能够利用尿素的微生物才能够生长
变式
训练
1．用来判断上述选择培养基是否起到了选择作 用需要设臵的对照是( )
A．未接种的选择培养基
接链目栏
B．未接种的牛肉膏蛋白胨培养基
C．接种了的牛肉膏蛋白胨培养基
O
葡萄 糖
尿 素
琼 脂
水
接链目栏
含 量
1.4 g
2.1 g
0.2 g
10.0 1.0 15.0 1 000 g g g mL
接链目栏
请分析后回答：
(1)在该培养基的配方中，为微生物的生长提供碳 源和氮源的分别是________和________。