紫外可见分光光度计测定食品中苯甲酸钠的含量
分析化学综合实验 紫外-可见分光光度计
紫外-可见分光光度法测定饮料中的苯甲酸钠含量一、实验目的（1）掌握紫外-可见分光光度法的分析原理。
（2）熟悉紫外-可见分光光度法的结构、特点，掌握及使用方法。
（3）了解紫外-可见分光光度法技术定量测定物质含量的方法。
二、实验原理苯甲酸，俗称安息香酸，是食品卫生标准允许使用的主要防腐剂之一。
在我国，苯甲酸及其钠盐常用于酱菜类、罐头类和一些饮料类等食品中。
苯甲酸及其钠盐的过量摄入会对人体产生很大危害，所以监测食品中苯甲酸及其钠盐的含量，对保障人们身体健康有着重要意义。
由于苯甲酸钠在200~350 nm有吸收，因此可利用紫外-可见分光光度法测定饮料中的苯甲酸钠含量。
三、仪器与试剂1、仪器UV-1800/V紫外-可见分光光度计；10 mL石英比色皿2个；1000 mL容量瓶1个；1.0 mL和5.0 mL移液管各1个；50 mL容量瓶8个。
2、试剂0.1 mol/L NaOH溶液；6.0×10-3mol/L标准苯甲酸钠溶液；去离子水；市售可乐或雪碧等。
四、实验步骤（1）移取6.0×10-3mol/L标准苯甲酸钠溶液1.0 mL于50 mL容量瓶中，加入0.6 mL 0.1 mol/L NaOH溶液，用去离子水定容，摇匀，以试剂空白为参比，在210~350 nm范围内绘制吸收曲线，确定最大吸收波长λmax。
（2）分别移取0.0 mL、0.5 mL、1.0 mL、1.5 mL、2.0 mL、2.5 mL、3.0 mL 苯甲酸钠标准溶液于7个50 mL容量瓶中，各加入0.6 mL 0.1 mol/L NaOH 溶液，用去离子水定容至刻度。
在定量测定模式下，以试剂空白为参比，在λmax处测定各溶液的吸光度。
（3）分别移取5 mL可乐或雪碧于50 mL容量瓶中，用超声波脱气5min 以驱赶CO2，加入0.6 mL 0.1 mol/L NaOH溶液，用去离子水定容至刻度。
以试剂空白为参比，在λmax处测定各溶液的吸光度。
实验四、紫外-可见分光光度法测苯甲酸含量精选全文
可编辑修改精选全文完整版实验四、紫外-可见分光光度法测苯甲酸含量一、实验目的1．学会使用紫外-可见分光光度计，掌握标准对比法。
2．掌握标准对照法曲线的绘制和含量的计算。
二、实验原理在碱性条件下，苯甲酸形成苯甲酸盐，对紫外光有选择性吸收，其吸收光谱的最大吸收波长在225nm。
可采用紫外分光光度计测定物质在紫外光区的吸收光谱并进行定量分析。
三、实验器材试药：0.01mol/L、0.1mol/L氢氧化钠、苯甲酸仪器：量瓶、烧杯、紫外-可见分光光度计四、实验步骤1、苯甲酸标准储备液的制备精确称取苯甲酸100mg，用0.1mol/L氢氧化钠溶液100ml溶解后，再用蒸馏水稀释1000ml。
此溶液1ml含0.1mg苯甲酸。
2、苯甲酸吸收曲线的测量吸取苯甲酸贮备液4.00ml，放入50ml容量瓶中，用0.1mol/L氢氧化钠溶液定容，摇匀。
此溶液1ml含8μg苯甲酸。
测量条件光源：氢灯；参比液：0.01mol/L氢氧化钠；测量波长范围：210～240nm。
3、标准曲线的制备取标准储备液适量，置于50mL容量瓶中，加0.01mol/L氢氧化钠稀释，分别得到浓度为4、8、12、16、20、24μg.L-1的溶液，取各溶液于“2项”曲线中的最大吸收波长处测吸收度A，得回归方程和相关系数R2。
4、标准对比法测定样品液苯甲酸的含量取10.00ml样品液，放入50ml容量瓶中，用0.01mol/L氢氧化钠定容，摇匀。
在上述曲线中找出最大吸收波长，以此作定量分析的入射光。
以0.01mol/L 氢氧化钠溶液为参比。
在完全相同的条件下测出标准苯甲酸溶液和稀释好的样品液的吸光度值。
5、按“3项”所得回归方程计算样品液中苯甲酸的浓度。
五、数据处理1）样品液中苯甲酸含量试样溶液的吸光度为,从标准曲线上可查得c= mg/ml。
六、思考题1、如果试液测得的吸光度不在标准曲线范围之内怎么办？2、从实验测出的吸光度求苯甲酸含量的根据是什么？如何求得？。
【论文】紫外分光光度法测定食品添加剂苯甲酸的研究
摘 要苯甲酸是目前食品中较为理想的防腐剂。
少量食用，并无生命危险。
但如果大量食用，会导致中毒，甚至危及生命。
所以，确定食品中苯甲酸的含量并严格控制食用量是十分必要的。
本文采用紫外分光光度法对食品中苯甲酸含量进行了研究。
苯甲酸的特征峰在224nm处。
为选择最佳的UV-VIS分析条件，对饱和氯化钠溶液加入量、1:1HCl加入量、振荡和静置时间进行了研究。
正交实验结果表明，最佳的分析条件为，用10ml饱和氯化钠溶液、8ml:1HCl萃取含有苯甲酸的溶液，振荡3min 后静置2min，测其吸光度。
分别配制不同浓度的苯甲酸标准溶液，在224nm处测吸光度绘制A-C标准曲线。
同时测定回收率为93.8%-109.5%、RSD为0.6%、最小检出限为0.005mg/ml。
最后对样品中苯甲酸含量进行了测定。
结果表明，此方法灵敏、快速、准确。
关键词：苯甲酸，测定，紫外分光光度法AbstractBenzoic acid is the ideal food preservative. A small amount of it in food has no danger, but a large amount of it in food will lead poisoning and even life threatening . Therefore, determining the content of benzoic acid in food consumption and a strict control is necessary. A Ultraviolet Spectrophotometric determination of the food additive of benzoic acid has been studied. The maximum absorption of benzoic acid is 224nm. The best conditions for UV-VIS analysis :the quantity of saturated NaCl solution is 10ml, 1:1HCl is 8ml,shaking and standing time are 3min and 2min, and then measure the absorbance. We prepare with different concentrations of benzoic acid standard solution and measure absorbance for drawing A-C standard curve. The result shows that the recovery is 93.8%-109.5%,RSD is0.6%, the detection limit is 0.005 mg/ml. This method for determination of benzoic acid in sample is sensitive, rapid and accurate.Key words: benzoic acid, determine, Ultraviolet Spectrophotometric目 录第一章 前言 (1)1.1 苯甲酸含量的研究意义 (1)1.2 选题背景 (1)1.3 文献综述 (2)1.4 研究的基本内容，拟解决的主要问题 (8)第二章 实验材料与方法 (9)2.1 实验药品及仪器 (9)2.2 实验方法 (11)第三章 实验结果与讨论 (15)3.1 λmax选择 (15)3.2 饱和NaCl溶液加入量 (15)3.31:1HCl加入量 (16)3.4 振荡时间 (18)3.5 静置时间 (19)3.6 最佳实验条件选择（正交实验） (20)3.7 工作曲线绘制 (20)3.8 回收率测定 (22)3.9RSD测定 (22)3.10 共存离子干扰实验 (23)3.11 样品测定 (28)3.12 讨论 (29)第四章 结论与展望 (30)4.1 结论 (30)4.2 对进一步研究的展望 (30)参考文献 (31)致 谢 (33)声 明 (34)第一章 前 言1.1 苯甲酸含量的研究意义社会的发展，人们生活节奏的加快，促使食品工业特别是方便食品、半成品迅速发展。
教案：紫外可见分光光度计 法测定食品中苯甲酸钠的含量
紫外可见分光光度计法测定食品中苯甲酸钠的含量一、实验目的1、了解和熟悉紫外-分光光度计的原理、结构和操作方法；2、掌握紫外分光光度法测定苯甲酸的吸收光谱图；3、掌握标准曲线法测定样品中苯甲酸钠的含量。
二、实验原理为了防止食品在储存、运输过程中发生腐蚀、变质，常在食品中添加少量防腐剂。
防腐剂使用的品种和用量在食品卫生标准中都有严格的规定，苯甲酸及其钠盐、钾盐是食品卫生标准允许使用的主要防腐剂之一，其使用量一般在0.1%左右。
苯甲酸及苯甲酸钠具有芳香结构在近紫外光区具有较强的吸收。
通过实验证实，苯甲酸在230nm处具有最大吸收。
另一方面，它在水中具有适当的溶解度，所以，可将标样和样品处理成水溶液，采用紫外分光光度计，通过标准曲线法而实现酸性食品中苯甲酸（钠）含量的测定。
由于食品中苯甲酸用量很少，同时食品中其它成分也可能产生干扰，因此一般需要预先将苯甲酸与其它成分分离。
从食品中分离防腐剂常用的方法有蒸馏法和溶剂萃取法等。
本实验测定雪碧、可口可乐、醒目等饮料中苯甲酸（钠），样品不用处理，在230nm波长处测定标准溶液及样品溶液的吸光度，绘制标准曲线法，可求出样品中苯甲酸的含量。
3、仪器和试剂仪器：紫外可见分光光度计 TU-1810（北京普析通用仪器有限公司），1.0cm石英比色皿，50ml容量瓶11个，吸量管5mL一支、1mL两支。
试剂：苯甲酸钠标准贮备液（1.000g/L）：准确称量经过干燥的苯甲酸钠1.000g（105℃干燥处理2h）于1000mL容量瓶中，用适量的蒸馏水溶解后定容。
该贮备液可置于冰箱保存一段时间；0.1mol/L NaOH溶液；市售饮料。
四、实验步骤1、标准曲线的制作苯甲酸钠标准溶液（100.0mg/L）：准确移取苯甲酸储备液5.00mL 于50mL容量瓶中，加入蒸馏水稀释定容。
苯甲酸钠系列标准溶液的配制：分别准确移取苯甲酸钠标准溶液0.00mL、1.00mL、2.00mL、3.00mL、4.00mL和5.00mL于6个50mL容量瓶中，各加入0.1mol/LNaOH溶液1.00mL蒸馏水稀释定容，摇匀。
紫外可见分光光度法测碳酸饮料中苯甲酸钠的含量
化学工业科技创新导报 Science and Technology Innovation Herald112食品添加剂对于改善食品色、香、味,延长食品保质期具有重要作用。
苯甲酸及它们的盐在饮料中使用较为广泛,但都有一定的毒性[1],其中苯甲酸还是防腐剂中使用量最大者[2]。
监测它们在饮料中的使用量, 对于保障人们身体健康具有重要的现实意义。
目前主要有气相色谱法、液相色谱法、AOAC 法(氧化法)[3]等。
其中以气相色谱法经常使用,但仪器要求高,不便于基层实验室使用。
该文提出把苯甲酸钠用磷酸酸化后蒸馏出苯甲酸直接于紫外分光光度计上分别在两组分的最大吸收波长处测定,根据吸光度加和性的原理再分别进行定量。
1 实验部分1.1 仪器与试剂北京瑞利U V-1801紫外可见分光光度计1 c m 石英比色皿2只磷酸、氢氧化钠、苯甲酸、重铬酸钾、硫酸均为分析纯试剂苯甲酸标准储备液：称取1.000 ｇ苯甲酸，用0.01 m ol/ＬN a O H 稀释至1000 ｍＬ容量瓶中。
此溶液1 ｍＬ含有1 ｍg的苯甲酸。
苯甲酸标准操作液：移取10.00 ｍＬ苯甲酸标准储备液用0.01 m o l /ＬN a O H稀释至100 ｍＬ此溶液此溶液1ｍＬ含有0.1 ｍg的苯甲酸。
1.2 样品处理取雪碧样品溶液10.00 ｍＬ至于250 m L的蒸馏瓶中，加1 m L磷酸，70 m l 水蒸馏，用预先加有5 m L 0.1 m o l /ＬN a O H 100 m L 容量瓶接收流出液，约收集45 m L时停止蒸馏，用少量的水洗涤冷凝器，最后将容量瓶内蒸馏液稀释至刻度。
吸取20.00 m L 蒸馏液置于另一个250 m L 蒸馏瓶中，加入33 m ol/L重铬酸钾25 m L、2 m o l /Ｌ硫酸溶液6.5 m L ，加热回流10 m i n ，冷却，再加1 m L 磷酸，40 m L 水，蒸馏，收集流出液于100 m L容量瓶，用0.01 mol/ＬNaOH稀释至刻度，摇匀。
紫外分光光度法测定碳酸饮料中苯甲酸钠的含量
紫外分光光度法测定碳酸饮料中苯甲酸钠的含量作者：杨森徐莲杨留勇吕瑜环来源：《数码设计》2017年第05期摘要：针对目前防腐剂苯甲酸钠的测定方法较多，本方法采用紫外分光光度法测定碳酸饮料中苯甲酸钠的含量，具有灵敏度高、加标回收率高、操作简单、分析速度快和结果准确等优点。
该方法能为碳酸饮料的生产企业提供一种实用、便捷和低成本的分析技术，可作为饮料企业对防腐剂苯甲酸钠含量监控的有效方法提供重要依据。
关键字：碳酸饮料；紫外分光光度法；苯甲酸钠；测定中图分类号：O657.32 文献标识码：A 文章编号：1672-9129（2017）05-0076-02Abstract：In view of the current preservative， the method for the determination of sodium benzoate is more，In this method， the content of sodium benzoate in carbonated drinks was determined by UV Spectrophotometry，The utility model has the advantages of high sensitivity，high recovery rate， simple operation， fast analysis speed and accurate result，This method can provide a practical， convenient and low cost analytical technique for carbonated beverage enterprises，It can serve as an important basis for the effective methods of monitoring the content of preservatives and sodium benzoate in the beverage enterprises.Key words：carbonated drinks；ultraviolet spectrophotometry；sodiumbenzoate Determination引言苯甲酸钠，又名安息香酸钠，是目前我国在食品工业上最常用的防腐剂之一。
HPLC法检测食品中苯甲酸的含量,紫外分光光度法测定饮料中的防腐剂
2、标准曲线的制作
取苯甲酸标准溶液2.00、4.00、6.00、8.00、10.00mL，分别置于50mL容量瓶中，用0.01mol﹒L-1NaOH溶液稀释至刻度。以0.01mol﹒L-1NaOH溶液为对照液，测定其中5号标准溶液的紫外可见吸收光谱（测定波长范围为200~350nm），找出λmax，然后在λmax处测定五个标准溶液的吸光度Ai，绘制标准曲线。
湖南生物机电职业技术学院学生课堂内实验报告
姓名__陈艳龙__学号___11_____专业班级___生技09311_____
课程名称
仪器分析
实验名称
紫外分光光度法测定饮料中的防腐剂
实验目的及要求：
1．掌握蒸馏操作；
2．掌握紫外可见分光光度法测定苯甲酸的方法和原理。
实验原理：
由于食品中苯甲酸用量很少，同时食品中其它成分也可能产生干扰，因此一般需要预先将苯甲酸与其它成分分离。从食品中分离防腐剂常用的方法有蒸馏法和溶剂萃取法等。本实验采用蒸馏法对鲜橙多中的苯甲酸进行了测定，苯甲酸（钠）在225nm处有最大吸收，可在225nm波长处测定标准溶液及样品溶液的吸光度，绘制标准曲线法，可求出样品中苯甲酸的含量。
w=
式中m —样品的质量（mg）；
V —样品测定时所取的第二次蒸馏液体积（mL）；
cx—从标准曲线上查得样品溶液中苯甲酸钠的质量浓度（mg · mL－1）。
成绩：
指导教师签名：
年月日
吸取上述蒸馏液25mL，置于另一个250mL蒸馏瓶中，加入25mL 0.033mol﹒L-1K2Cr2O7溶液,6.5mL 2mol﹒L-1H2SO4溶液，连接冷凝装置，水浴上加热10min，冷却，取下蒸馏瓶，加入1mL H3PO4、20g无水Na2SO4、40mL水和三颗玻璃珠，进行第二次蒸馏，用预先加有的5mL 0.1mol﹒L-1NaOH的50mL容量瓶接收蒸馏液，当蒸馏瓶收集到45mL左右时，停止蒸馏，用少量洗涤冷凝器，最后用水稀释至刻度。
紫外分光光度法测定苯甲酸含量
紫外分光光度法测定苯甲酸含量
仪器分析实验
1
实验目的
1. 了解756CRT型紫外可见分光光度计的结构。 2. 了解紫外分光光度法定性的原理和方法。 3. 掌握利用756CRT型紫外可见分光光度计测
定苯甲酸含量的原理方和法。
2
实验原理
紫外分光光度法(Ultraviolet Spectrophtometry)， 主要产生于分子价电子在电子能级间的跃迁，是 研究物质电子光谱的分析方法。
通过吸收曲线对求知样品进行定性分析。 根据朗伯－比耳定律：A=εbc，只要绘出标准曲
线，测出试液的吸光度，就可以得到未知样的含 量。
3
仪器与试剂
1．756CRT型紫外可见分光光度计（上海精仪公司） 2．容量瓶（25mL） 3．吸量管（5mL） 4．苯甲酸（AR）储备液：0.05000g •L-1
项目
标样编号
1
2
3
4
5
V（mL）
10
(2) 工作曲线的绘制
进入定量分析界面，按顺序进行标样设定， 以所确定的苯甲酸最大吸收波长为测定波长，以 蒸馏水为参比，分别测定这五个标准溶液吸光度 值，绘制标准曲线，记下工作曲线方程和相关系 数。
11
5．样品测定 用2mL 吸量管吸取未知液2m吸收池在220nm装蒸馏水，以一个吸收池为 参比，调节T为100%，测定另一吸收池的透射比， 其偏差应小于0.5%，可配成一套使用，记录第二 比色皿的吸光度值作为校正值。
7
3．吸收曲线绘制
(1)确定波长扫描参数： 狭缝宽度：2 nm ；扫描速度：较快；采样间隔：
1nm ；测量方式：吸光度 ；绘图方式：重叠； 重复次数：1 波长范围：200～350 nm ； 纵坐标：
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紫外可见分光光度计法测定食品中苯甲酸钠的含量
一、实验目的
1.进一步了解和熟悉紫外-分光光度计的原理和结构，学习UV2550的操作。
2.掌握紫外分光光度法测定苯甲酸钠的吸收光谱图。
3.掌握标准曲线法测定样品中苯甲酸钠的含量。
二、实验原理
为了防止食品在储存、运输过程中发生腐蚀、变质，常在食品中添加少量防腐剂。
防腐剂使用的品种和用量在食品卫生标准中都有严格的规定，苯甲酸及其钠盐、钾盐是食品卫生标准允许使用的主要防腐剂之一，其使用量一般在0.1%左右。
苯甲酸具有芳香结构，在波长225nm和272nm处有K吸收带和B吸收带。
根据苯甲酸（钠）在225nm处有最大吸收，测得其吸光度即可用标准曲线法求出样品中苯甲酸的含量。
三、仪器和试剂
1.紫外可见分光光度计UV2550（日本岛津），1.0cm石英比色皿，50ml容量瓶。
2.NaOH溶液（0.1mol/L）
3.苯甲酸钠标准溶液的配制
(1)苯甲酸钠标准贮备液（1.000g/L）：准确称量经过干燥的苯甲酸钠1.000g（105℃干燥处
理2h）于1000mL容量瓶中，用适量的蒸馏水溶解后定容。
该贮备液可置于冰箱保存一段时间。
(2)苯甲酸钠标准溶液（100.0mg/L）：准确移取苯甲酸钠储备液10.00mL于100mL容量瓶中，
加入蒸馏水稀释定容。
(3)系列标准溶液的配制：分别准确移取苯甲酸钠标准溶液1.00mL、2.00mL、3.00mL、4.00mL
和5.00mL于6个50mL容量瓶中，各加入0.1mol/LNaOH溶液1.00mL后，用蒸馏水稀释定容。
得到浓度分别为2.0 mg/L、4.0mg/L、6.0mg/L、8.0mg/L和10.0mg/L的苯甲酸钠系列标准溶液。
4.市售饮料的配制
准确移取市售饮料0.5ml于50mL容量瓶中，用超声脱气5min驱赶二氧化碳后，加入0.1mol/LNaOH溶液1.00mL，用蒸馏水稀释定容。
5.蒸馏水
四、实验步骤
1.开机
(1)打开计算机，打印机。
(2)打开主机开关，双击软件图标UVProbe，点击“Connect”与仪器联机，仪器开始自检，
通过后按“OK”。
2.吸收光谱的测定
(1)选择“Window”→“Spectrum”，打开光谱模块。
(2)选择“Edit”→“Method”，设定波长范围（从大到小），扫描速度（Fast），采样间隔
（1.0），扫描方式（Single），Instrument Parameters（Absorbence）。
(3)样品池和空白池均放上2.5mL缓冲溶液，点击光度计按键条中的“Baseline”，启动基
线校正，点击确定。
注：在开始基线校正之前，确认样品或参比光束无任何障碍物，且样品室中没有样品。
(4) 参比池中加入缓冲溶液，样品池中加入苯甲酸钠标准液，点击按键条中的“Start”，测定紫外可见吸收光谱。
（5）扫描完成后，在弹出的新数据采集对话框中输入样品名，点击确定。
（6）图谱保存：选择“File”→“Save as”，在对话框顶部的保存位置中选择适当的路径，输入文件名，保存类型中选择Spc，点击“保存”。
（7）最大吸收峰：选择“Operations”→“Peak Pick”，找到最大吸收峰对应的波长。
3.标准曲线法测定待测样品的浓度
(1)选择“Window”→“Photometric”，打开测量光度模块。
(2)选择“Edit”→“Method”，设置合适的波长（“Wavelength”），如225nm，点击“Add”，
点击选定的Wavelength，根据提示，点击next，next，方法，设定保存路径，点击“保存”。
(3)样品池和空白池均放上2.5mL缓冲溶液，点击光度计按键条中的“Cell blank”，进行
背景校正。
(4)标准曲线：在Standard table框里输入Sample ID（从1开始），标准溶液的浓度
“Concentration”，输入完毕，将光标移到WL225下。
在样品池中由稀到浓，依次放入系列标准溶液，点击按键条中的“Read std”，依次读出标准系列溶液的吸光度值。
（浓度为0 的空白液可先按“自动归零”后再读数）
(5)点击“Graph”→“Standard Curve Statistics”→“Equation”，“Correlation
Coefficient”，得到标准曲线的方程和相关系数。
(6)同样，样品池中分别放入酷儿、芬达、水蜜桃、机能水等饮料的样本，在Sample table
框里框里输入Sample ID，点击按键条中的“Read std”，读出待测溶液的浓度和对应的吸光度值。
4. 关机
点击菜单中“Instrument”→“configure”→“maintenance”，进入界面后点击“D2”、“W1”，关闭氘灯和钨灯，再点击按键条中“Disconnect”，然后关仪器软件，最后关电脑和仪器电源。
五、数据处理
图1 苯甲酸钠紫外-可见吸收光谱图
由图知最大吸收峰波长222nm.
图2 苯甲酸钠标准曲线
由曲线知，曲线的方程y=0.0596x+0.0244 R2=0.9871
六、注意事项
1.试样和标准工作曲线的实验条件应完全一致。
2.不同牌号的饮料中苯甲酸钠含量不同，移取时样品量可酌情增减。
七、思考题
1.紫外可见分光光度计由哪些部件构成？各有什么作用？
答：紫外可见分光光度计由光源室、单色器、试样室、检测器及信号显示系统五个部分组成。
光源室能提供仪器使用波段的连续光谱，单色器是用以产生高纯度单色光束的装置，试样室供盛放试液进行吸光度测量之用，检测器用于检测辐射信号，信号显示系统将图谱、数据和操作条件都显示出来
2.本实验为什么要用石英比色皿？为什么不能用玻璃比色皿？
答: 因为玻璃吸收紫外光，影响测试液对紫外光吸光度的准确性。
而石英不吸收紫外光。
因此，可见光区域内测试时需要用玻璃比色池，紫外区域内测试时用石英比色池。
3.苯甲酸的紫外光谱中有哪些吸收峰？各自对应哪些吸收带？由哪些跃迁引起？
答：苯甲酸具有环状共轭结构，在波长228nm 和272nm 处有E吸收带和B 吸收带,由π→π*跃迁引起。