苯甲酸钠的测定

1绪论

1.1苯甲酸钠的作用

苯甲酸钠是一种常见的防腐剂，在食品中具有防腐的作用。苯甲酸钠的化学式为C6H5COONa，它的相对分子质量为144.00，俗称“安息香酸钠”，并且英文名为Sodium Benzoate。苯甲酸钠的防腐作用在在酸性和碱性的条件下有很大不同。因为在碱性条件下苯甲酸钠没有杀菌抑菌的功效。相反在酸性条件下，苯甲酸钠是防腐剂的最佳选择，实践证明苯甲酸钠在PH是2.5-4.0时防腐效果最强。

苯甲酸钠和苯甲酸都是较好的防腐剂，二者也有密切的关系。苯甲酸钠在酸性条件下能转化成苯甲酸。虽然如此，它们也不完全相同，苯甲酸钠的溶解度比苯甲酸的溶解度强。例如，苯甲酸是在1870年，由H. Fleck在试验中尝试用一种酸来代替以熟知的水杨酸时，意外地发现了一个新物质的存在，那就是苯甲酸并且发现了它的具有防腐的特殊作用。苯甲酸虽然是一种酸，但在当时那个时代并不能大量生产，所以还不能替代水杨酸。因此，直到近代才开始投入使用。一经使用得到了众人的认可，从此，苯甲酸作为防腐剂在食品中的使用居于前几位。苯甲酸具有很多优点，其中它有一个最大的优势:价格便宜、效果好。

由于水果在自然条件下储存时间短，不易运输。人们为了延长时间，用苯甲酸钠来做水果的保鲜剂。因为苯甲酸钠有杀菌作用，对细菌，霉菌和发酵菌都有较好的抑制作用。除了水果，在一些果汁，果酱，牛奶，果冻中苯甲酸钠也常被使用。善于观察的人会发现化妆品和护理用品的保质期都在两年到三年之间，这都是防腐剂的神奇功效。

1.2测定苯甲酸钠的方法

1.2.1高效液相色谱法

方法: 标准曲线制备:分别取不同量苯甲酸钠、山梨酸钾、糖精钠标准贮备液制成混合标准系列,样品制备:样品制备:吸取1.0mL样品于10mL比色管中,加入甲

醇至刻度,超声2min,静置,上清液过硅胶G小柱净化后,再过0.45u滤膜,滤液备用,进样量10u。色谱条件:色谱柱,Shim Pack clc -ODS柱,5.0x160mm;流动相(甲

醇:0.03mol/L NH4Ac = 15: 85),速度:2.0mL/min;柱温:30;长:2.0nm,进样10ul;以RT值定性,以峰面积外标法定量。计算：样品（g/L）=A1 C V 1000/A2 m 1000式中:A1为样品峰面积;A2为标准峰面积;C为标准质量浓度(mg/mL);V为样品稀释体积;m为样品质量(mL)[1]。

表1-2-1 配制标准系列

管号 1 2 3 4 5 6

苯甲酸钠ug/mL 山梨酸钾ug/mL 糖精钠ug/mL 0

2.5

5.0

2.0

5.0

10.0

4.0

10.0

15.0

6.0

15.0

20.0

8.0

20.0

25.0

10.0

1.2.2液相色谱

彭城大学学报中王爱军采用高压液相色谱法研究了饮料中的苯甲酸钠,实验过程中选用uBondaPak C18柱,运用外标法,在波长入=225nm的条件下,用紫外可见分光光谱仪同时对果汁类饮料中的苯甲酸钠、山梨酸钾和糖精钠进行定量分析[2]。液相色谱法分析时间不超过20分钟。各方面都比薄层分析的方法具有优越性[3]。

1.2.3荧光光谱

NaAc一HAC缓冲溶液的配制：精确称取2.729g NaAc•3H2O晶体,蒸馏水溶解后转移至100mL的容量瓶中,用浓度为1md/L的盐酸配制成溶液的pH值为3,加蒸馏水稀释到刻度线,即得到pH值为3的NaAc一HAC缓冲溶液。

标准溶液的配制：为了配制0.2mol/L的苯甲酸钠溶液，先用分析天平准确称取0.030g的苯甲酸钠固体，放入到洁净的小烧杯中，加入蒸馏水用玻璃棒搅拌溶解，转移到100 mL的容量瓶中，稀释至刻度定容，摇匀。

苯甲酸钠的荧光光谱：用荧光光谱法测定苯甲酸钠的光谱:经查阅文献选用270nm为检测波长,检测区间为260-400nm中进行,窄缝距离为5nm。测定苯甲酸钠

的荧光光谱方法:第一步先调整波长范围210-400的区间内，第二步在实验设置固定发射波长为最大的波长，第三步，点击扫描，进行实验。

标准曲线的测定：用移液管准确移取0、1、2、3、4、5 mL的苯甲酸钠标准溶液，分别放人6个l00mL干净的容量瓶中,在分别加入加人缓冲溶液（pH值为2.72的NaAe一HAe）的溶液10 mL，加蒸馏水稀释至刻度,选用缓冲溶液为空白对照测荧光强度。

标准加人法测苯甲酸钠的浓度：用移液管准确移取0、1、1.5、2、2.5、4 mL 苯甲酸钠标准溶液，将它们放入到6个洁净的50mL的容量瓶中,各加体积为5 mL NaAc一HAc缓冲溶液和lmL果汁类饮料待测样,最后加蒸馏水稀释至刻度,以缓冲溶液为空白对照测分别测出不同溶液的荧光强度[4]。

1.2.4紫外分光光度法测定果蔬盐中苯甲酸钠的含量

实验方法：吸取 4.0 mL 苯甲酸钠标准溶液于50 mL 容量瓶中, 用水定容；放置20分钟左右，将溶液放入1 cm 比色皿，选用蒸馏水作为参比，实验中在设置224 nm 波长处测定吸光度。

检测波长的选择:因为柠檬酸的存在会影响到果蔬盐中苯甲酸钠测定的准确性,所以尽量选取的波长条件为;苯甲酸钠灵敏度高,而柠檬酸几乎不吸收的波长, 选波长224nm处为苯甲酸钠的最大吸收波长，同浓度下柠檬酸在紫外区没有吸收，此时对实验的干扰小，准确性较高。分别用移液管吸取 4.0 mL 苯甲酸钠标准溶液、4.0 mL 柠檬酸溶液置于50 mL 容量瓶中,用蒸馏水稀释至刻度，摇匀定容。分别在200－400 nm 波长范围内扫描，根据吸光度对波长绘制吸收曲线。

线性关系考察:先取八个25 mL干净的容量瓶，用移液管吸取0、0.4、0.8、0.12、0.16、0.2、0.24、0.28 mL苯甲酸钠标准溶液分别放入到容量瓶中,准确用蒸馏水稀释定容至刻度，摇匀,分别按实验方法操作。由检测波长的结果分析出波长为224 nm 处测其吸光度，绘制图象以吸光度(A)为纵坐标，浓度(C)为横坐标，得到标准曲线，得回方程：C=0.00821 A+0.000 1，相关系数r=0.9996。结果表明，检测浓度在0.0041－0.0292mg/mL 范围内苯甲酸钠的线性关系明显[5]。