干细胞移植治疗脑损伤的基础及临床研究
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神经干细胞移植治疗大鼠创伤性脑外伤的实验研究
３２０ ２ 四 川大 学华 西 医院神 经外科 １００ ）
【 要 】 目的 将 神 经 干 细 胞 （ Ｃ ） 植 于 大 鼠创 伤性 脑损 伤 部 位 ， 察 ＮＳ ｓ对创 伤 性 脑 损 伤 的 治 疗 作 用 。方 法 首 先进 摘 ＮＳ ｓ 移 观 Ｃ
行 ＮＳ ｓ的体外培养 ， Ｃ 同时采用 ５２溴脱氧尿嘧啶（ ｒＵ） —一 Ｂ ｄ 标记 ， 脑外伤模 型采用 自由落体撞击 大鼠左侧 大脑 皮质运动感 觉区来制
ｉ ｃ ｎ ｅ （ ］ Ａｍ Ｐ ｔ ｏ ， ９ ５ １ ７ ９ １ ｎ ａ ｃｒ Ｊ， Ｊ ａ ｈ ｌ１ ９ ， ４ ｝ ～ ４
ｅ ０ Ｅｎ ｌ７ ｄｅ Ｎ，Ｃｈ ｎ Ｒ，Ｅｎ ｒｉ Ｄ． ｍ ａ ｍｂｌ ａ ｏ ｄ ｂ ｏ ｄ ｅ ｄｅ Ｈａ ｒｓ Ｈｕ ｎ ｕ ｉｃ ｌｃ ｒ ｌｏ ｉ
［ ］ Ａｂ Ｔｈ ｒｐ ｕ ｉ ｐ ｔｎ ｉｌｏ ｅ ｒｔｏｐ ｉ ａｔ ｒ ｎ ｅ ｒｌ １ ３ ｅＫ． ｅ ａ ｅ ｔ ｏｅ ｔａ ｆｎ ｕ ｏｒ ｈｃｆｃｏ ｓａ ｄ ｎ ｕ ａ ｃ
一 一
图 １ 免 疫 荧 光 双 标 显示 Ｂ ｄ 阳 性 ＭＳ ｓ 移 至 缺 血 ｒＵ Ｃ迁 周边区（ ． 表达 Ｂ Ａ） 并 ＤＮＦ Ｂ （ ０ ） （ ） Ｘ４ ０
组 ＮＳ 、 Ｆ Ｅ Ｇ ＡＰ和 Ｇａ ｌ ｅ染色阳性细胞数要 多于对照组 ．ｅｔ ｎｓｉ ｎ染色在第 １周 时表 达最高， 而后逐 渐下降 。Ｂ ｄ 阳性 细胞在损 伤灶 ｒＵ 中心区最 多， 在损伤灶 的远 隔部位也有少许发 现， Ｔ 而 ｕＮＥ Ｉ染色则对照组 明显 比 Ｎ Ｃ 组 高． Ｓｓ 有统计 学意义（ ＜Ｏ ０ ） Ｐ ． ５ 。结论 脑 外伤移植 ＮＳ ｓ Ｃ 可以在损伤 区存活 、 殖及分化 ． 增 并在损伤 的远 隔部位有 少许 Ｎ Ｃ 迁移、 Ｓｓ 分化 。Ｎ Ｃ 移植 有利于大鼠脑 自由落体 Ｓｓ
干细胞移植治疗脑出血的研究进展
２ １ ２月第 ２卷第 １ ０２年 期
Ｃ ｉ Ｊ ｒ ｎＤｓＲ ｈｂｌ Ｅ ｅｔ ｎ ｄｔ ｎ ，ｅｒａ １ ， ｏ ， ｏ １ ｈ Ｂ ａ ｉ ｅａ ｉ （ ｌ ｒ ｉ Ｅ ｉｏ ）Ｆ ｂｕｒ ２ ２ Ｖ １ Ｎ ． ｎ ｉ ｃｏ ｃ ｉ ｙ０ ２
・ ５・ ６
・
综 述
・
恢复 。
的神经前 体 ， 移植 后 的第 １ ， Ｓ ｓ ２周 Ｅ Ｃ 能分 化成 免疫成 熟 的
胶质 细胞 和神 经元 的多 种神 经递 质亚 型。Ｉｅ ａ等 发 现 ｋｄ 用维 甲酸处理的短尾猴的 Ｅ Ｃ 衍生的神经细胞成 功的改善 Ｓｓ 了实验性 脑 损 伤 偏 瘫 小 鼠 的运 动 功 能 ， 对 照 组 仍 保 持 而
干 细胞 移 植 治 疗脑 出血 的研 究进 展
薛彦 忠 李 秀 秀 郝培 来
Ｚａｇ ｈｎ 等 将 Ｂｄ ｒＵ标记 的 Ｂ Ｃ 分别通 过侧脑 室 、 动脉 ＭＳ ｓ 颈 和颈静脉途径 移植 人脑 出血 大 鼠脑 内 ， 察到 Ｂ Ｃ 在 海 观 ＭＳ ｓ 马分化成神经元 ， 在出血区周围分化成神经元 和星形胶质 细 胞， 在同侧皮质分化成 神经元 、 星形 胶质 细胞 和少 突胶质 细 胞， 颈动 脉 组 和侧 脑 室 移 植 组 运 动 功 能 显 著 改 善 。Ｄ ｎ ｅｇ 等” 发 现 ， 使用能提高细胞 内环磷 酸腺苷浓 度 的诱 导剂 ， 如 异丁 甲基黄嘌 呤、 双丁酰环磷腺苷等处理 Ｂ Ｃ ， ｄ后经 免 ＭＳ ｓ６ 疫组织化 学染 色分析发 现 ， ２ ％ 的 Ｂ Ｃ 分化 为具有 典 约 ５ ＭＳ ｓ 型神经细胞形态 的细胞 ， 且神经细胞标记 阳性 率和 阳性 强 并
３ Ｕ Ｂ Ｃ ： 脐 带 血 细 胞 中 富 含 间 质 前 体 细 胞 和 上 皮 ． Ｃ Ｓ ｓ人
Ｃ ｉ Ｊ ｒ ｎＤｓＲ ｈｂｌ Ｅ ｅｔ ｎ ｄｔ ｎ ，ｅｒａ １ ， ｏ ， ｏ １ ｈ Ｂ ａ ｉ ｅａ ｉ （ ｌ ｒ ｉ Ｅ ｉｏ ）Ｆ ｂｕｒ ２ ２ Ｖ １ Ｎ ． ｎ ｉ ｃｏ ｃ ｉ ｙ０ ２
・ ５・ ６
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综 述
・
恢复 。
的神经前 体 ， 移植 后 的第 １ ， Ｓ ｓ ２周 Ｅ Ｃ 能分 化成 免疫成 熟 的
胶质 细胞 和神 经元 的多 种神 经递 质亚 型。Ｉｅ ａ等 发 现 ｋｄ 用维 甲酸处理的短尾猴的 Ｅ Ｃ 衍生的神经细胞成 功的改善 Ｓｓ 了实验性 脑 损 伤 偏 瘫 小 鼠 的运 动 功 能 ， 对 照 组 仍 保 持 而
干 细胞 移 植 治 疗脑 出血 的研 究进 展
薛彦 忠 李 秀 秀 郝培 来
Ｚａｇ ｈｎ 等 将 Ｂｄ ｒＵ标记 的 Ｂ Ｃ 分别通 过侧脑 室 、 动脉 ＭＳ ｓ 颈 和颈静脉途径 移植 人脑 出血 大 鼠脑 内 ， 察到 Ｂ Ｃ 在 海 观 ＭＳ ｓ 马分化成神经元 ， 在出血区周围分化成神经元 和星形胶质 细 胞， 在同侧皮质分化成 神经元 、 星形 胶质 细胞 和少 突胶质 细 胞， 颈动 脉 组 和侧 脑 室 移 植 组 运 动 功 能 显 著 改 善 。Ｄ ｎ ｅｇ 等” 发 现 ， 使用能提高细胞 内环磷 酸腺苷浓 度 的诱 导剂 ， 如 异丁 甲基黄嘌 呤、 双丁酰环磷腺苷等处理 Ｂ Ｃ ， ｄ后经 免 ＭＳ ｓ６ 疫组织化 学染 色分析发 现 ， ２ ％ 的 Ｂ Ｃ 分化 为具有 典 约 ５ ＭＳ ｓ 型神经细胞形态 的细胞 ， 且神经细胞标记 阳性 率和 阳性 强 并
３ Ｕ Ｂ Ｃ ： 脐 带 血 细 胞 中 富 含 间 质 前 体 细 胞 和 上 皮 ． Ｃ Ｓ ｓ人
干细胞的基础研究与临床应用
干细胞的基础研究与临床应用细胞是构成生命体的基本单位，而干细胞则是一种具有自我更新和多向分化潜能的细胞。
干细胞研究在过去几十年中取得了巨大的进展，不仅对生命科学的发展做出了重要贡献，也为医学领域的进步提供了无限的可能性。
本文将探讨干细胞的基础研究和临床应用，并展望其未来发展的前景。
干细胞的基础研究是了解其特性和功能的关键。
干细胞可分为胚胎干细胞和成体干细胞两种类型。
胚胎干细胞来源于早期胚胎，具有广泛的分化潜能，可以分化为各种体细胞类型。
成体干细胞则存在于成体组织中，包括骨髓、脂肪组织和神经系统等。
这些成体干细胞具有较低的分化潜能，主要参与组织修复和再生。
基于这些特性，研究人员在干细胞的来源、分化机制和调控因素等方面进行了大量的实验室研究。
在基础研究的基础上，干细胞的临床应用逐渐成为现实。
干细胞移植是目前广泛应用的一种治疗方法。
例如，造血干细胞移植已经成为治疗血液系统疾病的重要手段。
通过从骨髓或外周血中采集干细胞，经过体外分离和处理后，再移植到患者体内，以替代受损或异常的造血系统。
此外，干细胞还被用于治疗神经系统疾病、心血管疾病和肝病等多种疾病。
目前，干细胞的临床应用仍处于初级阶段，但已经展示了广阔的前景。
然而，干细胞的应用也面临着许多挑战和争议。
例如，胚胎干细胞的研究和使用一直备受争议，因为它涉及到胚胎的毁灭。
这引发了伦理和道德方面的讨论。
因此，科研机构和政府需要建立一套严格的伦理规范和监管制度，以确保干细胞的研究和应用符合伦理和法律的要求。
此外，干细胞的临床应用也面临技术难题和安全风险。
干细胞的扩增和分化是一项复杂的技术。
有效的培养和控制干细胞的分化方向对于临床应用至关重要。
此外，干细胞的长期安全性和效果需要更多的研究和验证。
只有通过科学的研究和实验，我们才能确保干细胞的应用是可行和安全的。
未来，干细胞的研究和应用将进一步深化。
在基础研究方面，科学家将继续探索干细胞的来源、分化机制和调控因素，以更好地理解其功能和特性。
丹红注射液改善神经干细胞移植治疗脑缺血损伤效果的机制研究
N+D+M 组
治疗作用
ห้องสมุดไป่ตู้
NSC 组 N+D 组
治疗作用
神经功能评分 氧化应激相关指标
大鼠脑缺血模型
丹红注射液 PBS
DH 组 PBS 组
无治疗作用
NSC 存活情况
【摘要】 目的 探讨丹红注射液能否通过调控核因子 E2 相关因子 2（Nrf2）信号通路增强神经干细胞（NSC） 移植修复脑缺血损伤的治疗效果。方法 40 只雄性 SD 大鼠随机分为 NSC 移植治疗组（NSC 组）、丹红注射 液组（DH 组）、NSC+ 丹红注射液组（N+D 组）、NSC+ 丹红注射液组 +ML385 组（N+D+M 组）和 PBS 对照 组（PBS 组），每组 8 只。所有大鼠均采用大脑中动脉栓塞法建立脑缺血模型，栓塞 1.5 h 后进行再灌注。再灌 注后 3 d 对各组大鼠进行相应处理。在 NSC 移植术前和术后 1、2、4 周进行神经功能评分。术后 4 周后处死大 鼠，检测氧化应激相关指标，并用免疫荧光染色检测神经元特异核蛋白（NeuN）和血管性血友病因子（vWF） 的表达情况。结果 在 NSC 移植术前，各组大鼠的神经功能评分比较，差异无统计学意义（P>0.05）。术后 1、2、4 周时，NSC 组、DH 组和 N+D 组大鼠的神经功能评分较 PBS 组和 N+D+M 组均降低（均为 P<0.05）。
丹红注射液是一种广泛用于脑梗死、冠状动脉粥 样硬化性心脏病、肺源性心脏病、糖尿病周围神经病 变治疗的中药制剂 [12-16]，具有改善血液循环、保护血 管内皮、抗炎、抗氧化应激损伤、抗神经元凋亡、保 护神经、促进神经元突触重塑、降低血清同型半胱氨 酸水平等作用。为了确定丹红注射液是否能通过调控 Nrf2 信号通路改变移植微环境，增强干细胞移植治疗 脑缺血损伤的效果，本研究建立大鼠脑缺血模型，探 讨丹红注射液协同干细胞移植治疗在脑缺血损伤中的 治疗作用。
缺血性脑损伤的骨髓间质干细胞移植治疗研究
植 入 脑 缺 血 大 鼠 体 内 。 术 后 每 天 采 用 神 经 功 能 缺 损 评 分 检 测 大 鼠神 经 系统 功 能 ， 鼠脑 缺 血 再灌 注 后 ｌＷ 大 、 ２Ｗ、 ４Ｗ分 别 取受 损 伤 脑 组 织 ， Ｅ 染 色 。 在 不 同 时 间 点 行 体 感 诱 发 电 位 与 组 织 病 理 学 检 测 。 结 果 ： ３Ｗ、 Ｈ 并 ＭＳ ｓ 植 治 疗 组 在 移 植 后 各 时 间 点 神 经 功 能 缺 损 评 分 （ Ｗ ：． ７±２５ ；Ｗ ： ． １±１８ ； Ｗ ：．７± Ｃ移 １ ９７ ．４２ ７３ ．８ ３ ６ ９ ２４ ４ ：．９±１ １ ） 明 显 低 于 Ｐ Ｓ对 照 组 （ ｗ ：５７ ±２６ ；Ｗ ：４ ４ ．６；Ｗ ４ ８ ．４ 均 Ｂ １ ｌ． ８ ．５ ２ １．２±３２ ；Ｗ ：１４ ．３ ３ ｌ． ２±３ ３ ；Ｗ ： ．０４
制 作 成 年雄 性 ＳｒｇｅＤ ｗｅｅ 鼠脑 缺 血 再灌 注模 型 ４ ｐａｕ －ａ ｌｙ 大 ０例 ， 随机 分 成 磷 酸 盐 缓 冲 液 （ Ｂ ） 照 组 和 ＭＳ ｓ ＰＳ 对 Ｃ 移 植治疗组。在 ｌ Ｗ后 分 别 经 颈 外 动 脉 将 标 记 ５溴 脱 氧 尿 嘧 啶 （ ｒｕ 的 ２ｘ１‘ Ｃ 悬 液 和 等 体 积 Ｐ Ｓ液 － Ｂｄ ） ０ ＭＳ ｓ Ｂ
ＢＵ ｎ ・ ａ Ｘｉ ｇ ｙ ｏ，ＺＨＡＮＧ ｎｇ，ＺＨＡＮＧ ｈｅ ｇ ＸＵ，ＬＩＺｈ ・ ｉ ｇ， Ｌ Ｕ ｅ Ｆｅ Ｓ ｎ・ ｉｙ ｎ Ｉ Ｍ ｎｇ
（ ｅａ ｔ ｅ ｔ Ｎｅｒｓ ｒｅ ，Ｈ ｎ ｎＰ ｏｉｃ ｌ ｅ ｌ’ ， ｈ ｎ ｄ ｏ ５ ０ ３ ｈｎ ） Ｄ ｐｒ ｎ ｍ ｕｏｕｇ ｒ ｙ ｅ ａ ｒｖ ｉ ｏ ｅ ｓ Ｚ ｅｇ ｔｕ４ ０ ０ ，Ｃ ｉａ ｎａＰ ｐ
制 作 成 年雄 性 ＳｒｇｅＤ ｗｅｅ 鼠脑 缺 血 再灌 注模 型 ４ ｐａｕ －ａ ｌｙ 大 ０例 ， 随机 分 成 磷 酸 盐 缓 冲 液 （ Ｂ ） 照 组 和 ＭＳ ｓ ＰＳ 对 Ｃ 移 植治疗组。在 ｌ Ｗ后 分 别 经 颈 外 动 脉 将 标 记 ５溴 脱 氧 尿 嘧 啶 （ ｒｕ 的 ２ｘ１‘ Ｃ 悬 液 和 等 体 积 Ｐ Ｓ液 － Ｂｄ ） ０ ＭＳ ｓ Ｂ
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最新干细胞的基础研究与临床应用PPT课件
（1）在体外标准培养条件下贴壁生长； （2）CD105+、CD73+ 、CD90+，CD34-、CD45-、CD11a-、CD19-、HLA-DR- ； （3）在体外可诱导分化为成骨细胞、脂肪细胞和软骨细胞。
4、用于移植治疗的可能机制：
A、可分化为功能细胞，促进缺损组织更新； B、可分泌多种细胞因子和营养因子，通过旁分泌作用改善受体微环境； C、能通过细胞与细胞的直接接触及分泌可溶性因子的方式抑制免疫反
干细胞应用前景：
★现有的基础研究和临床应用结果证明，干细胞在治疗中确实 发挥了作用，应用前景非常乐观。
★国内外知名干细胞研究机构有：
国外
国内
加州再生医学研究所
科技部国家干细胞工程技术研究中心
哈佛干细胞研究所
细胞产品国家工程研究中心
京都大学iPS细胞研究与应用中心 人类胚胎干细胞国家工程研究中心
澳大利亚干细胞中心
神经干细胞（neural stem cells, NSCs）：
1、定义：NSCs是来源于中枢神经系统的多能干细胞，具有自我更新和多向 分化潜能，可以分化成中枢神经系统的各类细胞，包括神经元、星形胶 质细胞和少突胶质细胞（1992）。
2、鉴定标志物：表达Nestin（Neuroepithdial stem protein）。
截至2010年4月，全球被批准进行利用MSCs治疗的临床试验已有80项。 且MSCs已被FDA批准用于治疗GvHD。
脐带来源MSCs的优势：
1、来源更容易，废物利用，不涉及伦理道德问题； 2、采集方便，易于保存和运输； 3、供者无痛苦，对母婴均无损害； 4、脐带中MSCs较骨髓中含量更为丰富； 5、细胞更原始，分化潜能更大，扩增效应更强； 6、组织相容性抗原表达低或不表达，更适宜于异体间的
4、用于移植治疗的可能机制：
A、可分化为功能细胞，促进缺损组织更新； B、可分泌多种细胞因子和营养因子，通过旁分泌作用改善受体微环境； C、能通过细胞与细胞的直接接触及分泌可溶性因子的方式抑制免疫反
干细胞应用前景：
★现有的基础研究和临床应用结果证明，干细胞在治疗中确实 发挥了作用，应用前景非常乐观。
★国内外知名干细胞研究机构有：
国外
国内
加州再生医学研究所
科技部国家干细胞工程技术研究中心
哈佛干细胞研究所
细胞产品国家工程研究中心
京都大学iPS细胞研究与应用中心 人类胚胎干细胞国家工程研究中心
澳大利亚干细胞中心
神经干细胞（neural stem cells, NSCs）：
1、定义：NSCs是来源于中枢神经系统的多能干细胞，具有自我更新和多向 分化潜能，可以分化成中枢神经系统的各类细胞，包括神经元、星形胶 质细胞和少突胶质细胞（1992）。
2、鉴定标志物：表达Nestin（Neuroepithdial stem protein）。
截至2010年4月，全球被批准进行利用MSCs治疗的临床试验已有80项。 且MSCs已被FDA批准用于治疗GvHD。
脐带来源MSCs的优势：
1、来源更容易，废物利用，不涉及伦理道德问题； 2、采集方便，易于保存和运输； 3、供者无痛苦，对母婴均无损害； 4、脐带中MSCs较骨髓中含量更为丰富； 5、细胞更原始，分化潜能更大，扩增效应更强； 6、组织相容性抗原表达低或不表达，更适宜于异体间的
神经营养因子3联合神经干细胞移植治疗缺氧缺血性脑损伤的实验研究
Ｗｉａ 大鼠按 随机数 字表 法分 为正常组、 纯脑 瘫组、 经干细胞移 植组、 Ｔ一 ｓｒ ｔ 单 神 Ｎ ３联合 Ｎ Ｃ 移 植组 。 Ｓｓ
取新生 ２ ４ｈ的 Ｗｉｎ 大鼠脑皮质 Ｎ Ｃ 进行培 养、 ｓｒ ｔ Ｓｓ 鉴定 。选 出生 ７ｄ的 Ｗｉａ 大鼠制备 Ｈ Ｂ ｓｒ ｔ ＩＤ动物模型 。３ｄ后行损 伤 侧侧脑 室移植 。移植 ３周后进行神 经 电生理检 测 ， 取 脑组 织进行 Ｈ 后 Ｅ染 色。结 果 新 生大 鼠脑皮 层可 成功培 养 出 ＮＣ， Ｓ ｓ并表达 Ｎ Ｃ 的标 志物神 经巢蛋 白（ ｅｔ ） Ｎ Ｃ Ｓｓ Ｎ ｓｎ ， Ｓ ｓ可分化 为神 经元及 星形胶 质细胞 。神 经 电生理 ： ｉ 复合 肌 肉动 作 电位波幅脑瘫组 ３ ８４±１２ ７ｍ 移植组 ５ ２ ８４１９ ６ｍ Ｎ ３联合 Ｎ Ｃ组 ７ ５２４ ．５ Ｖ， ．４ ． １ Ｖ， ．１ ．７ Ｖ，Ｔ一 － Ｓ ． １ ２ １２ｍ 差异有统计学意义 －
ｍｅｔ ｆ ｅｅ ｒ ａｓ ｅ ｏｎｒｔ． ｔｏ ｓ Ｎ ｕａ ｓ ｍ ｃｌ Ｎ Ｃ）ｗ ｒ ｂａ ｅ ｏ ｒｙｔｓｅｏ ｒ ｎｏ ｔ ｂｍ ｉ ｉ ４ｈ ａｄ ｉ ｃ ｒ ｏ ｒｂａ ｐｌｙｉ ｎｗｂ ｒ ｓＭｅ ｄ ｅ ｒ ｔ ｅｌ Ｓ ｌ ｎ ａ ｈ ｌ ｅ ｓ（ ｅ ｏ ｔｎ ｄｆ ｍ ｇａ ｓ ｆ ａ ｆａ ｏ ｗｔ ｎ２ ， ｎ ｅ ｉ ｒ ｉｕ ｂｉ ｒｓ ｈ
ｙ ， Ｈ Ｎ ｅ ＣＥ
．１Ｍｅｉ ｌ ｏｌ ｅ Ｓ ｉ ｚ Ｕ ｉ ｒｔ， ｈｈｚ， ｉ ｉｎ ３０ ２ ｈｎ ２Ｄ ｐｒ ｅ ｄ ａ ｌｇ ｈｈ ｉ ｎｖ ｓｙ Ｓ ｉｅｉ Ｘ ｎａ ｇ８２ ０ ，Ｃ ｉ ｃ Ｃ ｅ ｏ ｆ ｅ ｅｉ ｊ ａ； ｅａｔ ｔｏ ｍ ｆＮ—ｅｒｓｒｅ ， 洳 Ｕｇ ｒ ｕｏｕｇｒ ｙ ｙ ｕ
自体骨髓干细胞移植治疗脑卒中20例临床研究
复 Ｊ重建损 伤 的神 经环 路。此 外 ， ， 神经
干 细 胞 还 具 有 低 免 疫 原 型 和 良 好 的 组 织 相 容 性 等 特 点 ～ 。神 经 干 细 胞 的 以上 特 性 为 移 植 治 疗 脑 卒 中 后 遗 症 提 供 了可
能。
状 态 变 化 比较 ： 疗 后 患 者 神 经 功 能缺 损 治
白 、 维 生 素 、 消 化 的饮 食 ， 辛 辣 刺 激 高 易 忌 性 食 物 。 保 证 充 足 的 水 分 ， 期 检 查 电解 定
质 的 变 化 ， 时 予 以纠 正 ， 防 发 生 电 解 及 以
大 鼠 神 经 功 能 较 对 照 组 明 显 改 善。
Ｂ ｎ Ｉ］ 把 ３ ａｇ１ 等 ２ ０例 大 脑 中 动 脉 栓 塞 合 并 严 重神经功能缺陷的患者随机分为两 组 ， 神 经 干 细 胞 移 植 组 患 者 在 移 植 后 ６～ｌ ２
向分 化 为 靶 细 胞 后 再 回输 给 患者 本 人 ， 安
植 方 式将 分 离后 的 自体 骨 髓 干 细 胞 ［ 细
胞计数 为 （ ． ２ ８～１２ ． ）×１ Ｌ］ 植 脑 ０／ 移
内。 结 果 ： 过 对 自体 骨 髓 干 细 胞 移 植 治 通
骨髓 干 细 胞 的 体 外 分 离 及 纯 化 ， 到 细 胞 得 计 数 为 （ ． ～１２ ２ ８ ． ）×１ ／ ， 过 腰 穿 蛛 ０ Ｌ通
涩 、 晕耳 鸣 、 头 面红 目赤 、 膝 酸 软 均 有 不 腰
同程 度 的 改 善 。结 论 ： 通过 腰 穿蛛 网膜 下 腔 移 植 方 式 移 植 自体 骨 髓 干 细 胞 治 疗 脑 卒 中安 全 、 方便 、 易为 患者 接 受 ， 利 于颅 并
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Vertical motion
9.89±0.18
5.25±0.18 2.21±0.19 21.80±0.18 263.25＃ 1938.69＃
Tiltboard time
9.29±0.15
6.02±0.15 2.44±0.16 25.37±0.15 356.03＃ 4328.71＃
Beam-walking
0 Week 1
Week 2
Week 3
Week 4
Ipsilateral hippocampus
NeuN(Ipsilateral hippocampus )
GFAP(Ipsilateral cerebral cortex)
Horizontal motion
Vertical motion
Tiltboard time
19.81±0.14 24.64±0.13 25.07±0.14 3.67±0.14 435.33＃ 5232.33＃
Horizontal motion Vertical motion Tiltboard time Beam-walking
ห้องสมุดไป่ตู้
A vs. B <0.001 <0.001 <0.001 <0.001
干细胞移植治疗脑损伤的 基础及临床研究
The cilinical and basic research of traumatic brain injury by stem cells transplantation
大骨瓣减压术 脱水剂 激素 冬眠疗法 高压氧 自由基清除剂 钙离子拮抗剂 神经营养药物
促进修复再生 促进神经元的功能恢复
建立创伤性脑外伤模型
采用改良的Feeney氏自由落体撞击来制作创伤性脑外伤模型
左侧顶骨咬除5.0mm×5.0mm ,显露硬脑 膜 40g重的铁质圆柱体自25cm高处自由落体撞击
脑 室 内 注 射
结果
4A：对照组 (DAB染色，×100)
4B：对照组 (DAB染色，×400 )
C vs. D <0.001 <0.001 <0.001 <0.001
A：BMSCs+NGF B：BMSCs C：Injury control D：Blank Control
约10%轻度损伤患者和
疗 效？ 66-100%中、重度损伤
患者遗留有永久的神 经功能障碍
中枢神经系统不可再生？
神经干细胞（Neural stem cells，NSCs）
BDNF、 NT-3
自我更新
多向分化
bFGF 、EGF
可塑性 迁移性
全新的治疗思路！
干细胞治疗中枢神经系统损伤
➢替代治疗：移植外源性干细胞 ➢补充治疗：激活内源性干细胞
存在问题
1
干细胞来源
2
致瘤性
3
伦理问题
二、 内源性性干细胞的 实验研究
内源性神经干细胞具有以下优势
一
二
三
四
来源 可靠 稳定
无伦
理问 题
无免 疫排 斥反 应
无致 瘤性
碱性成纤维细胞生长因子(basic Fibroblast Growth Factor, bFGF)
促进血管形成
生物活性较 强的促分裂 原
Comparison between groups(P)
A vs. C <0.001 <0.001 <0.001 <0.001
A vs. D <0.001 <0.001 <0.001 <0.001
B vs. C <0.001 <0.001 <0.001 <0.001
B vs. D <0.001 <0.001 <0.001 <0.001
一、外源性性干细胞的 实验研究
课题研究
胚胎干细胞 (ESC)
神经干细胞 (NSC)
神经元 (Neuron)
ESC的实验研究
ESC分离培养
ESC诱导分化
NSC的实验研究
NSC 分离培养
NSC 诱导分化
Nestin
GABA
干细胞微环境变化 ➢葡萄糖对神经干细胞增殖分化的影响 ➢离子浓度变化对神经干细胞凋亡的影响
Neun/β-actin Neun/β-actin
0.6 BMSCs
0.5
BMSCs+NGF
0.4
0.3
0.2
0.1
0 Week 1
Week 2
Week 3
Week 4
Ipsilateral cerebral cortex
0.8
0.7
BMSCs
BMSCs+NGF 0.6
0.5
0.4
0.3
0.2
0.1
BrdU(Ipsilateral cerebral cortex, Week 3, ×100)
BrdU(Ipsilateral cerebral cortex，Week 2 , ×100)
BrdU(Ipsilateral cerebral cortex，Week 4 , ×100)
BrdU(Ipsilateral hippocampus Week 2, ×100)
Beam-walking
Behavior Scales
Horizontal motion
BMSCs+NGF group
39.51±0.47
BMSCS group
Injury control
Blank control
Time factor
Inter-class factor
F
F
18.45±0.47 8.55±0.49 103.63±0.47 1798.67＃ 8039.39＃
4C：治疗组 (DAB染色，×100)
4D：治疗组 (DAB染色，×400)
损伤侧海马组织中BrdU阳性细胞 BrdU-positive cells at the DG of the hippocampus on the damage side
✓侧脑室室管膜下区(SVZ) ✓海马齿状回颗粒细胞下层（DG/SGZ）
BrdU(Ipsilateral hippocampus Week 2, ×400)
BrdU(Ipsilateral hippocampus Week 3, ×400)
BrdU(Ipsilateral hippocampus Week 4, ×400)
BrdU
NeuN
Merge
BrdU
GFAP
Merge
间充质干细胞
无伦理学限制 无免疫排斥
无损害
生物特性好
取材方便
纯度高
骨髓间充质 干细胞(BMSC)
脐带间充质 干细胞(UMSC)
Endogenous Factors
Exogenous Factors
体外研究
BMSC
NSC
neurons
CD105
Nestin
NSE
动物实验
+
BrdU(Ipsilateral cerebral cortex, Week 1, ×100)