具有谷胱甘肽过氧化物酶活性的含硒模拟酶试剂的研究进展

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谷胱甘肽过氧化物酶和硒的关系(二)

谷胱甘肽过氧化物酶和硒的关系(二)

谷胱甘肽过氧化物酶和硒的关系(二)
谷胱甘肽过氧化物酶和硒的关系
1. 谷胱甘肽过氧化物酶(glutathione peroxidase)
•谷胱甘肽过氧化物酶是一种重要的抗氧化酶
•它能帮助降解有害的过氧化物并保护细胞免受氧化损伤的影响2. 硒的作用
•硒是谷胱甘肽过氧化物酶的重要辅酶
•它能激活谷胱甘肽过氧化物酶,增强其抗氧化功能
•硒还能够参与其他抗氧化系统的运作,提高细胞的抗氧化能力3. 谷胱甘肽过氧化物酶和硒的关系
•谷胱甘肽过氧化物酶的活性和功能都依赖于适量的硒
•硒能够促使谷胱甘肽过氧化物酶转化为活性形式,从而发挥抗氧化作用
•如果身体内缺乏硒,谷胱甘肽过氧化物酶的活性将会降低,导致细胞更容易受到氧化损伤
4. 其他影响因素
•谷胱甘肽过氧化物酶的活性还可能受到其他因素的影响,如供体谷胱甘肽的浓度、其他辅酶的存在等
•因此,除了确保适量的硒摄入外,维持细胞内谷胱甘肽过氧化物酶和其他抗氧化物质的平衡,也是保持身体健康的关键
5. 总结
•谷胱甘肽过氧化物酶和硒之间存在着密切的关系,硒是谷胱甘肽过氧化物酶活性的重要辅酶
•适量的硒摄入可以增强谷胱甘肽过氧化物酶的抗氧化功能,保护细胞免受氧化损伤
•除了硒外,还要注意维持细胞内抗氧化物质的平衡,以维持身体健康。

谷胱甘肽过氧化物酶和硒的关系

谷胱甘肽过氧化物酶和硒的关系

谷胱甘肽过氧化物酶(GPx)和硒的关系引言谷胱甘肽过氧化物酶(Glutathione Peroxidase,简称GPx)是一种重要的抗氧化酶,它通过催化谷胱甘肽(Glutathione,简称GSH)和过氧化氢(Hydrogen Peroxide,简称H2O2)等底物之间的反应,将有害的过氧化物转化为无害的水。

而硒则是GPx活性中必不可少的微量元素。

本文将深入探讨GPx和硒之间的关系。

GPx的结构与功能GPx属于蛋白质家族中的一员,其结构主要由四个亚单位组成。

每个亚单位都含有一个由硒原子构成的活性位点。

这个活性位点是GPx发挥抗氧化功能所必需的。

GPx主要存在于细胞质、线粒体和内质网等细胞内部分。

它具有多种生理功能,包括清除自由基、保护细胞膜免受脂质过氧化损伤、参与DNA修复以及调节细胞凋亡等。

GPx的催化机制GPx的催化过程主要包括两个步骤:底物还原和GPx再生。

1.底物还原:GPx通过接受电子从谷胱甘肽(GSH)转移到底物上,使底物被还原。

这个过程中,硒原子在活性位点上发挥重要作用,它能接受来自GSH 的电子,并将其转移给底物。

2.GPx再生:在第一步完成后,GPx处于被氧化状态。

此时,它需要再生为活性形式以继续催化反应。

硒酸盐(Selenate)是GPx再生的重要辅助因子,在存在硒酸盐的情况下,谷胱甘肽还原酶(Glutathione Reductase)能够将被氧化的GPx还原为活性形式。

硒与GPx的关系硒是构成GPx活性位点的重要组成部分。

在GPx中,硒以硒离子(Se4+)或者硒氨基酸(Selenocysteine)的形式存在。

硒离子通过与蛋白质中半胱氨酸残基形成硒蛋白质进行结合。

而硒氨基酸则是一种特殊的氨基酸,它在翻译过程中由UGA密码子编码,并且需要特定的转移RNA参与。

硒的含量不足会导致GPx活性下降,使细胞对氧化应激的抵抗能力降低。

长期缺乏硒可能导致多种疾病,如肝脏病变、肌肉萎缩、免疫功能下降等。

具有谷胱甘肽过氧化物酶(GPx)活力的含硒四肽(SecRGD)

具有谷胱甘肽过氧化物酶(GPx)活力的含硒四肽(SecRGD)

活性 氧 ( eci xgnsei , O ) 新 陈代 谢 的不可 逆产 物 , R ateoye ce R S 是 v p s 主要 包括 超氧 阴离子 ( ; ) 0 。 、羟
自由基( H‘ 和氢过氧化物等 J 机体抗 氧化系统( O ) . 非酶抗氧化剂和抗氧化酶 ) 对维持体内 R S O 的
邹险峰 ,吕绍武
( .吉林大学分子酶学工程教育部重点实验室 , 1 长春 10 1 ; 30 2 2 .长春大学农 产品深加工吉林省高校重点实验室 , 长春 10 2 ) 30 2
摘要 以精氨酸一 甘氨酸一 氨酸 ( G ) 天冬 R D 序列为基础 , N 端引入硒代半胱氨酸 ( e ) 在 - Sc 设计 了 Sc G eR D序 列
氧化损伤的优点 , 具有作为抗氧化药物 的应用前景. 关键词 谷胱甘肽过氧化物酶 ; 硒肽 ; 氧化活性 抗
中 图分 类 号 0 2 . 676 文献标识码 A D I 1 .99 ji n0 5 -7 0 2 1 .50 1 O : 0 3 6 /. s.2 109 .0 20 .2 s
收稿 日期 : 0 1 62 . 2 1- - 0 4
基 金项 目 :国 家 自 然 科 学 基 金 ( 准 号 :2 02 4 、超 分 子 结 构 与 材 料 国 家 重 点 实 验 室 ( 林 大 学 )开 放 基 金 ( 准 号 批 10 0 0) 吉 批
S L S 2 10 ) K S M 0 16 和吉林大学科学前沿与交叉学科创新项 目( 批准号 : 0 9 39 、 00 E 0 ) 2 0 0 03 2 1 M O 5 资助. 联系人简介 : 吕绍武 , , 男 博士 , 副教授 , 主要从事模拟酶研究.Em i l w l.d .n — a :v @j eu c l s u

具有谷胱甘肽过氧化物酶活性的含硒人源单链抗体的制备

具有谷胱甘肽过氧化物酶活性的含硒人源单链抗体的制备
霍 锐 , 毅 魏景艳 , 石 , 徐俊 杰 ,吕绍武 - 飞 ,I - I ,苏家明 ,
段 玉晶 , 王诗 雯 丛登立 李 唯 闫 岗林 罗贵 民 , , , ,
(. 1 吉林大学药学 院 , .分子酶学工程教育部重点实验 室 , . 2 3 生命科学学 院,长春 10 2 ) 30 1 摘要 以谷胱甘肽 ( S 为靶抗原 , 噬菌体 展示人 源单链 抗体 库 中筛 选人 源单链抗 体 (c v .经 3轮筛 G H) 从 sF )
G X的人源 抗体 酶 以治疗 氧化 损伤 引起 的疾病 是 更 重 要 的.本 研 究 的主 要 目的是 获 得抗 G H 的人 源 P S
单链抗体并使之具有 G X的活力. P
1 材 料 与 方 法
1 1 抗体 库 、菌种 、载体 与试 剂 .
噬菌体展示人源单链抗体库( u a yt t H+ Ls v i a ) 辅助噬菌体 M 3 0 H m ns h i V n ec V c b r , F lry 1K 7和大肠
选后 , E IA方法检测出 5个 ( l ,1 , 4 3 可 以和 G H结 合的克隆.P R产物的 电泳 和测序结 果 用 LS 2, 1 6 2 , 2) S C 表明, 只有 3个克隆 ( 1 6 2 ) 1 ,1 , 4 具有完整 的 sF cv编码基 因.选取 和 G H结 合力 高的克隆 1 的 sF S 1 c v编码基
因 组 装 到 表 达 载 体 p E B上 ,在 大 肠 杆 菌 R st PL oet a中进 行 可 溶 性 表 达 , N 螯 合 亲 和 层 析 纯 化 sF ・1 用 i c v1 ,
免疫点 印迹结果证实该抗体 能与 G H特异结合. 过 化 学 突 变 将 sF・1的 丝 氨 酸 转 变 成 硒 代 半 胱 氨 S 通 cv1

硒对人心肌谷胱甘肽过氧化物酶基因表达影响的研究

硒对人心肌谷胱甘肽过氧化物酶基因表达影响的研究

硒对人心肌谷胱甘肽过氧化物酶基因表达影响的研究刘丹晶 刘舒 刘燕霞 黄益民 张兆山 韩玲 摘要 目的:从基因表达水平研究临床心肌缺血/再灌注期间微量元素硒(Se )对人心肌谷胱甘肽过氧化物酶(GPX )基因表达的影响,探讨硒拮抗自由基损伤的机制。

方法:将心脏手术病人分为对照组和服硒组。

利用生化、RT -PCR 、基因测序等方法,分别对两组病人心肌缺血前和再灌注后30分钟的心肌GPX 活性及心肌、血浆和血细胞Se 浓度、GPX mRNA 水平及其cDNA 序列进行测定和组间比较。

结果:口服7天Se 未引起服硒组病人血浆和血细胞Se 含量明显改变,但服硒组在心肌再灌注后的心肌GPX 活性增加幅度、Se 含量,以及缺血前和再灌注后GPX 表达阳性率(73.9%对82.6%)都高于对照组(39.1%对60.9%),同时cDNA 序列正常。

结论:补充微量元素硒可提高再灌注30分钟时心肌的Se 含量和GPX 表达水平,并有效拮抗此过程产生的自由基对心肌细胞的脂质过氧化损伤。

关键词 硒 心肌缺血/再灌注 谷胱甘肽过氧化物酶 基因表达E ffect of selenium on human myocardial glutathione peroxidase gene expression LIU Danjing ,LIU Shu ,HUANG Yimin ,et al.Beijing Institute o f Heart L ung &Blood Vessel Disease ,Beijing 100029Abstract Aim :This research elucidates clinically the effect of selenium (Se )to human myocardial flutathione peroxidase gene expression ,and Se inhibiting effect to free radical damage.Methods :46patients with ASD or VSD were divided into two groups ,the control group (n =23)and the Se supplementation group (n =23).The Se supplementation group received Se 400μg/day for 7days before operation.Biochemical tech 2niques ,atomic absorption ,RT 2PCR and cDNA sequence testing methods were used to evaluate and compare the changes during ischemia/reper 2fusion period (I/P )in myocardial MDA level ,GPX activity and gene expression level ,GPX cDNA nucleotide sequence ,Se and Ca and Mg con 2centration.Results :(1)Before ischemia ,selenium concentration in either plasma or blood cell did not show significantly change in both control and Se groups.The mean level of GPX activity in Se group was slightly lower than control group ,the MDA level was equal ,and (2)After 30min of reperfussion ,Se level in plasma and blood cell kept consistent ,while myocardial Se concentration and GPX gene expression rating in Se group increased significantly ,and the MDA level reduced 4.2%compared to a 8.2%rise in control group ,but the mean level of GPX activity in Se group was slightly lower than that in control group.Either pre 2or post 2myocardial reperfusion ,Se group had a higher rate of myocardial GPX gene expression ,and the nucleotide sequence was normal.Conclusion :Se supplementation could increase myocardial Se content and improve GPX gene expression during I/R ,and in this way to against free radical peroxidizing damage on myocardium.K ey words Selenium Myocardial ischemia Reperfusion GPX G ene expression本课题受国家自然科学基金(39270199)和北京自然科学基金(7942013)联合资助作者单位:100029 北京心肺血管疾病研究所(刘丹晶、刘舒、刘燕霞、黄益民、韩玲);军事医学科学院全军分子遗传学重点实验室(张兆山) 微量元素硒(Se )以Se 2半胱氨酸的形式存在于谷胱甘肽过氧化物酶(GPX )中并作为其活性中心,此酶作为一种重要的抗氧化酶,对机体细胞内过氧化氢和脂质过氧化物起清除作用〔1〕。

硒依赖型谷胱甘肽过氧化物酶研究

硒依赖型谷胱甘肽过氧化物酶研究

分 类 号Q 533 单 位 代 码: 10183 密 级内部学号: 9712001硕士学位论文 题 目:硒依赖型谷胱甘肽过氧化物酶模拟物的研究作者姓名: 吴一卉专业:生物化学与分子生物学导师姓名 刘兰英 教授(吉林大学) 及职称: 赵大庆 研究员 (长春应化所)吉林大学二OOO年六月第一章前言§1.1 硒依赖型谷胱甘肽过氧化物酶(Se-GPX)硒作为生物体必需的元素之一,主要以含硒蛋白的形式存在于体内。

自从1973年Rotruck发现牛红细胞谷胱甘肽过氧化物酶(EC 1.11.1.9,cGPX)是含硒酶以来[1],人们对硒酶的研究产生了浓厚的兴趣。

谷胱甘肽过氧化物酶系作为体内抗氧化应激酶系的重要成员[2],具有清除过氧化氢和多种有机氢过氧化物的功能,对于维持生物体内自由基的平衡起着重要作用[3],因此倍受关注。

到目前为止,至少有四种Se-GPX已被发现:细胞谷胱甘肽过氧化物酶(Cellular Glutathione Peroxidase ,cGPX)[1,4],血浆谷胱甘肽过氧化物酶(Plasma Glutathione Peroxidase ,GPX-P)[5],胃肠谷胱甘肽过氧化物酶(Gastro-intestinal Glutathione Peroxidase,GPX-GI)[6]及磷脂氢过氧化物谷胱甘肽过氧化物酶(Phospholipiol Hydroperoxide Glutathione Peroxidase ,PHGPX)[7]。

其中,由于细胞谷胱甘肽过氧化物酶发现最早,人们对它的了解也最为透彻。

本节主要对cGPX做一评述,对酶分子的模拟也是以它为基础的。

1.1.1 GPX的分子结构GPX广泛存在于哺乳动物的所有组织中,并因种系及组织器官的不同存在一定差异,但仍有许多同源性。

它一般由四个相同或相似的亚基组成,分子量在76kD-100kD之间,每个亚基含有一个硒原子, 且以硒代半胱氨酸(SeCys)的形式存在[8]。

植物谷胱甘肽过氧化物酶研究进展

植物谷胱甘肽过氧化物酶研究进展

植物学通报 2005, 22 (3): 350 ̄356①国家重点基础发展规划项目(2003CB114305)和国家自然科学基金项目(30370765)资助。

②通讯作者。

Author for correspondence. E-mail: songcp@ 收稿日期: 2004-08-26 接受日期: 2005-03-02 责任编辑: 白羽红植物谷胱甘肽过氧化物酶研究进展①1,2苗雨晨 1白 玲 1苗 琛 2陈 珈 1宋纯鹏②1(河南大学生命科学学院 开封 475001)2(中国农业大学植物生理生化国家重点实验室 北京 100094)摘要 氧化胁迫可诱导植物多种防御酶的产生, 其中包括超氧化物歧化酶(SOD, EC1.15.1.1)、抗坏血酸过氧化物酶(APX, EC1.11.1.11)、过氧化氢酶(CAT, E.C.1.11.1.6 )和谷胱甘肽过氧化物酶(GPXs,EC1.11.1.9)。

它们在清除活性氧过程中起着不同的作用。

GPXs 是动物体内清除氧自由基的主要酶类,但它在植物中的功能报道甚少。

最近几年研究表明, 植物体内也存在类似于哺乳动物的GPXs 家族, 并对其功能研究已初见端倪。

本文综述了有关GPXs 的结构以及植物GPXs 功能的研究进展。

关键词 氧化胁迫, 谷胱甘肽过氧化物酶, 磷脂氢过氧化物谷胱甘肽过氧化物酶Progress in Plant Glutathione Peroxidase1,2MIAO Yu-Chen 1BAI Ling 1MIAO Chen 2CHEN Jia 1SONG Chun-Peng ②1(College of Life Sciences, Henan University , Kaifeng 475001)2(State Key Laboratory for Plant Physiology and Biochemistry , China Agricultural University ,Beijing 100094)Abstract Oxidative stress in plants induces several antioxidant enzymes, including superox-ide dismutase (SOD, EC 1.15.1.1), ascorbate peroxidase (APX, EC 1.11.1.11), catalase (CAT, E.C.1.11.1.6) and glutathione peroxidase (GPX, EC1.11.1.9), which have specific roles in scav-enging reactive oxygen species. Glutathione peroxidases are a family of key enzymes involved in scavenging oxyradicals in animals. Only recently has evidence for the existence of this enzyme in plants been reported. However, the information about the function of plant GPXs is limited, according to our current knowledge. The paper reviews the structure of GPXs and the progress of plant GPXs.Key wordsOxidative stress, Glutathione peroxidase, Phospholipid hydroperoxide glutathione peroxidase (PHGPX)植物是一个需氧代谢的有机体。

具有谷胱甘肽过氧化物酶活性的含硒模拟酶试剂的研究进展(二)

具有谷胱甘肽过氧化物酶活性的含硒模拟酶试剂的研究进展(二)

具有谷胱甘肽过氧化物酶活性的含硒模拟酶试剂的研究进展(二)【摘要】谷胱甘肽过氧化物酶活性的含硒模拟酶试剂(2-secd)是一种新型的生物模拟酶,它可以消除机体内的过氧化氢及脂质过氧化物,阻断活性氧自由基对机体的进一步损伤,是生物体内重要的活性氧自由基清除剂。

它可防止细胞膜和其它生物组织免受过氧化损伤,并且具有一定的抗炎作用。

【关键词】谷胱甘肽;过氧化物酶活性;含硒模拟酶试剂(2-secd);自由基【中图分类号】r-3 【文献标识码】a 【文章编号】1004-4949(2013)06-303-02自由基对人体的危害:一是使细胞膜被破坏,自由基对人体的攻击首先是从细胞膜开始的。

细胞膜极富弹性和柔韧性,这是由它松散的化学结构决定的,正因为如此,它的电子很容易丢失,因此细胞膜极易遭受自由基的攻击。

更为严重的是自由基对基因的攻击,可以使基因的分子结构被破坏,导致基因突变,从而引起整个生命发生系统性的混乱;二是使血清抗蛋白酶失去活性,大量资料已经证明,炎症、肿瘤、衰老、血液病以及心、肝、肺、皮肤等各方面疑难疾病的发生机理与体内自由基产生过多或清除自由基能力下降有着密切的关系。

自由基是人类健康最隐蔽,最具攻击力的敌人。

三是损伤基因导致细胞变异的出现和蓄积。

最新研究表明,吸烟中自由基的危害要远远大于烟碱(尼古丁)。

吸烟产生的自由基,有的是可以被过滤嘴清除的,但还有很多种自由基不能被传统的过滤方法清除掉,必须采取更科学的手段来对其进行清除和降低。

自由基的存活时间仅仅为10秒,但吸人人体后,就会直接或间接损伤细胞膜或直接与基因结合导致细胞膜转化等,从而引起肺气肿、肺癌、肺间质纤维化等一系列与吸烟有关的疾病。

氧自由基对蛋白质的氧化损伤是自由基生物学及自由基医学的前沿研究领域。

在这一领域深入研究不仅有助于认识许多疾病的发生发展过程,同时,对于抗氧化研究具有理论指导意义。

生物体内的氧化代谢会产生少量的自由基,体内的抗氧化系统能及时清除以维持自由基的代谢平衡。

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具有谷胱甘肽过氧化物酶活性的含硒模拟酶试剂的研究进展【摘要】谷胱甘肽过氧化物酶活性的含硒模拟酶试剂(2-secd)是一种新型的生物模拟酶,它可以消除机体内的过氧化氢及脂质过氧化物,阻断活性氧自由基对机体的进一步损伤,是生物体内重要的活性氧自由基清除剂。

它可防止细胞膜和其它生物组织免受过氧化损伤,并且具有一定的抗炎作用。

【关键词】谷胱甘肽;过氧化物酶活性;含硒模拟酶试剂
(2-secd);自由基
【中图分类号】r-3 【文献标识码】a 【文章编号】1004-4949(2013)06-301-02
自由基对人体的危害:一是使细胞膜被破坏,自由基对人体的攻击首先是从细胞膜开始的。

细胞膜极富弹性和柔韧性,这是由它松散的化学结构决定的,正因为如此,它的电子很容易丢失,因此细胞膜极易遭受自由基的攻击。

更为严重的是自由基对基因的攻击,可以使基因的分子结构被破坏,导致基因突变,从而引起整个生命发生系统性的混乱;二是使血清抗蛋白酶失去活性,大量资料已经证明,炎症、肿瘤、衰老、血液病以及心、肝、肺、皮肤等各方面疑难疾病的发生机理与体内自由基产生过多或清除自由基能力下
降有着密切的关系。

自由基是人类健康最隐蔽,最具攻击力的敌人。

三是损伤基因导致细胞变异的出现和蓄积。

最新研究表明,吸烟中自由基的危害要远远大于烟碱(尼古丁)。

吸烟产生的自由基,有的是可以被过滤嘴清除的,但还有很多种自由基不能被传统的过滤
方法清除掉,必须采取更科学的手段来对其进行清除和降低。

自由基的存活时间仅仅为10秒,但吸人人体后,就会直接或间接损伤细胞膜或直接与基因结合导致细胞膜转化等,从而引起肺气肿、肺癌、肺间质纤维化等一系列与吸烟有关的疾病。

氧自由基对蛋白质的氧化损伤是自由基生物学及自由基医学的前沿研究领域。

在这一领域深入研究不仅有助于认识许多疾病的发生发展过程,同时,对于抗氧化研究具有理论指导意义。

生物体内的氧化代谢会产生少量的自由基,体内的抗氧化系统能及时清除以维持自由基的代谢平衡。

但是在一些损伤因素的作用下可诱导体内大量自由基的堆积,细胞中抗氧化保护机制不足时,使活性氧产生堆积并对细胞产生毒性,从而产生氧化和抗氧化的不平衡状态,这种状态称为氧化应激。

谷胱甘肽过氧化物酶(gpx)是生物机体内重要的抗氧化酶之一,它可以消除机体内的过氧化氢及脂质过氧化物,阻断活性氧自由基对机体的进一步损伤,是生物体内重要的活性氧自由基清除剂。

谷胱甘肽过氧化物酶(gpx)是生物机体内重要的抗氧化酶之一,它可以消除机体内的过氧化氢及脂质过氧化物,阻断活性氧自由基对机体的进一步损伤,是生物体内重要的活性氧自由基清除剂,它以硒代半胱氨酸(sec)的形式发挥作用,以谷胱甘肽(gsh)为还原剂分解体内的脂质过氧化物,因而可防止细胞膜和其它生物组织免受过氧化损伤。

它与体内的超氧化物歧化酶(sod)和过氧化氢酶(cat)一起构成了机体的抗氧化防御体系。

谷胱甘肽过氧化物酶(gpx,ec 1. 11. 1. 9)是机体抗氧化酶系的重要成员,是由 mills发现的哺乳动物体内首个含硒酶,它可以清除脂类氢过氧化物(rooh),并且 gpx 与脑出血、肿瘤、白内障、克山病和衰老等多种疾病的发生、发展密切相关.因此,gpx 作为抗氧化药物有广阔的应用前景.但由于天然的 gpx 来源有限、难于用基因工程表达、稳定性差、分子量大等缺点严重限制了其药用价值,因此人们主要研究对 gpx 的人工模拟。

2-secd具有以下的优点:1)分子量2400da;2)酶活力是世界上著名pz51模拟物的8倍多;3)属于有机硒化合物;4)在120℃灭菌条件下,酶活力能够保持在90%以上;5)1克2-secd可完全溶于3毫升水;6)β-cd与硒是化学共价键结合;7)1克2-secd 含硒量高达33毫克;8)经过大量研究,最终选定无毒β-环糊精来模拟谷胱甘肽过氧化物酶;动物实验表明:急毒ld50为8克/公斤动物,常毒ld50为6克/公斤动物;对心肌细胞产生细胞毒性的浓度为0.8mm,而pz51为0.1mm;9)分子结构清楚,作用机理明确。

参考文献
[1]doroshow j h.glutathione peroxidase and oxidative stress [j].toxicol lett,1995,82/83:395-398.
[2]arai m,imai h,koumura t,et al.mitochondrial phospholipid hydroperoxide glutathione peroxidase plays a major role in pre-venting oxidative injury to cells [j].j biol
chem,1999,274(8):4924-4933.
[3] sies h, masumoto h.ebselen as a glutathione peroxidase mimic and as a scavenger of peroxynitrite [j].adv pharmacol,1997,38:229-246.
[4]ren x j,gao s j,you d l,et al.cloning and expression of a single-chain catalytic antibody that acts as a glutathione perox-idase mimic with high catalytic efficiency [j].biochem j,2001,359:369-374.
[5]turner d j,ritter m a,george a j.importance of the linker in expression of single-chain fv antibody fragments:optimisation of peptide sequence using phage display technology [j].j immunol methods,1997,205(1):43-54.。

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