分光光度法测定油菜籽中硫代葡萄糖甙
硫代葡萄糖甙总量速测方法氯化钯法
断提高认识的基础上迅速开展起来了。全国各油 菜育种单位相继开展了低硫甙油菜新品种的选 育工作，以开发应用这一植物蛋白资源。因此，国 家制定了油菜籽中硫甙含量的标准，在此标准中 规定油菜籽（饼）中硫甙含量≤４５．００斗ｔｏｏｌ／ｇ。所 以掌握准确可靠的油菜籽（饼）中硫甙含量的分析 测试技术，在油菜育种、良种繁殖、区域试验、收 购及饼粕利用等工作中都成为非常重要的一个 组成部分。 １． 目前常用的方法
２０枷ｍｉｎ，中间搅动两次，取出静置冷却后，用水
稀释至１０ｍｌ摇匀。 ３．２经过滤后取０．５ＩＩｌｌ放人另一带塞的５ｍｌ或 １０ｍｌ试管中，并加入０．１％羧甲基纤维素钠溶液 ２ｍｌ，（硫甙钯络合物是胶状沉淀物，影响光度的测 定。加入分散剂羧甲基纤维素钠溶液，使比色液
社，２００６． ［２］李培武，扬湄，张文。陈洪，等．油菜硫甙检测技术研究 及进展［Ｊ）．油菜品质检测技术手册，２００３．８． ［３］吴谋成，黄荣汉．油菜籽中硫代葡萄糖甙总量的快速 测定［Ｊ］．华中农业学报，１９８３，（３）：ｉ－９． ［４３丁小霞，李培武．李光明。杨艳燕。等．傅里叶变换近红 外光谱技术测定完整油菜籽中芥酸和硫甙含量［Ｊ］．中国 油料作物学报，２００４，（９）：６－１１．
万方数据
前处理过程繁琐；使用试剂、药品成本高；分析时 间长，不适合于一般基层育种单位和收购单位大
（硫甙提取物与氯化钯反应生成有色产物依硫甙 的多少分别呈不同的颜色，颜色越深，表明硫甙
油菜硫代葡萄糖苷检测技术研究进展
油菜硫代葡萄糖苷检测技术研究进展
李培武;周海燕
【期刊名称】《中国油料作物学报》
【年(卷),期】2008(30)1
【摘要】硫代葡萄糖苷是发生在白花菜目植物的一类重要生物活性物质,其研究依赖于检测技术的发展,本文就硫代葡萄糖苷检测技术研究进展进行了综述.
【总页数】6页(P127-131,136)
【作者】李培武;周海燕
【作者单位】中国农业科学院油料作物研究所,湖北,武汉,430062;中国农业科学院油料作物研究所,湖北,武汉,430062
【正文语种】中文
【中图分类】Q946.83
【相关文献】
1.油菜硫代葡萄糖苷检测技术研究进展 [J], 刘念;蒙大庆;汤天泽;李芝凡;胥岚
2.我国2010年油菜品种硫代葡萄糖苷含量分析 [J], 何操
3.油菜薹和蕾中硫代葡萄糖苷组分及含量分析 [J], 彭君;胡阳;龚照;林处发;高长斌;汪爱华
4.芥菜型油菜硫代葡萄糖苷基因的研究进展 [J], 燕孟娇;宋培玲;皇甫海燕;郝丽芬;郭晨;皇甫九茹;贾晓清;吴晶;史志丹;李子钦;
5.外源5-氨基乙酰丙酸对油菜幼苗硫代葡萄糖苷生物合成的影响 [J], MAODZEKA Antony;卢凌志;赵鑫泽;徐颖;吴德志;蒋立希
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油菜硫代葡萄糖甙组成及含量测定—高效液相色谱法(HPLC)
油菜硫代葡萄糖甙组成及含量测定—高效液相色谱法(HPLC)吴新镛
【期刊名称】《中国油料作物学报》
【年(卷),期】1990(000)004
【摘要】应用高效液相色谱测定油菜及甘蓝、黑芥、新疆野生油菜等的硫代葡萄糖甙,其主要步骤为:硫甙提取,离子交换树脂(Sephadex A-25醋酸吡啶型)纯化,在微柱上芳基硫酸酯酶脱硫酸根,反相C_(18)柱乙腈梯度洗脱分离脱硫硫甙,采用烯丙基硫甙或邻硝基苯-β-半乳糖甙(ONPGAL)作内标,紫外吸收测定硫甙洗脱液(波长229nm)。
研究发现不同材料其硫甙组成及含量有差异。
【总页数】1页(P34)
【作者】吴新镛
【作者单位】不详;不详
【正文语种】中文
【中图分类】S565.401
【相关文献】
1.高效液相色谱法(HPLC)在依折麦布片含量测定中的应用分析 [J], 宋杏花;贾芙蓉;曾艳;葛慧
2.高效液相色谱法(HPLC)在依折麦布片含量测定中的应用分析 [J], 宋杏花;贾芙蓉;曾艳;葛慧;
3.日本冬油菜种子硫代葡萄糖甙含量及其组成的品种间变异 [J], 石田正彦;谢国禄
4.氮,硫对甘蓝型油菜硫代葡萄糖甙组成的影响 [J], Zhao.,F;廖星
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菜籽饼粕中硫代葡萄糖甙测定方法的探讨
分量 的相 对校 正 因子 在 各 实 验 室 进行 固定 ， 大 限 最 度地 减 少 实 验 误 差 ， 目 前 最 为 精 确 的 分 析 方 是 法 【 引， １ 但是 由于其 测 定 使 用 的 仪 器设 备 昂 贵 ， 所
以推 广性 比较 差 。 由于菜籽 粕 中硫甙 的检 测 对 于菜籽 蛋 白的综 合 利用 有至 关重 要 的作用 ， 立一 种重 复性 好 、 建 简便 易
Ｗａ ３ ｓ ０． ９％ ．
Ｋ ｙｗ ｒｓ ｔ ０ｌｃｓ ０ ｔ；ｌａｉ ｅ ｓ ｃ ｈ ｔ ｅ ｙ ｒ ｅｅｄ ｍ ａ ｅ ｏｄ ： ｉ ｕ０ｉ ｌ ｅ ｕ ｒｖ ｌ ｐ ｔ ｏ ｍ ｔ ； ｐｓｅ ｅ ｈｇ ｎａ ｔ ｏ ｔ ｅ ｍｐ ｏ ｒ ａ ｌ
０ 前 言
菜籽 是我 国主 要 油 料作 物 之 一 ， 菜籽 饼 粕 中含
ＨＡＮ ａ ． ｕ Ｍ ｏｈ ｉ
（ ｅ ａｔ ｅ ｔｏ ｏ ｄＳ ｉ ｃ ｎ ｎ ｉｅ ｒ ｇ Ａ ｈ ｉＢ ｎ ｂ ｏｌｇ ， ｎ ｕ ｅ ｇ ｕ ２ ３ ０ Ｄ ｐ ｒｍ ｎ ｆＦ ｏ ｃｅ ｅａ ｄ Ｅ ｇｎｅ ｎ ， ｎ ｕ ｅ ｇ ｕ Ｃ ｌ ｅ Ａ ｈ ｉＢ ｎ ｂ ３ ０ ０） ｎ ｉ ｅ
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粮油食品科 第１ 卷 ２ ７ 第３ 技 ５ ０ 年 ０ 期
质 量 控 制
菜籽饼 粕 中硫 代葡 萄糖 甙测 定 方法 的探 讨
菜籽饼中硫葡萄糖甙的研究
般说 来 ， Ｏ Ｔ的 毒性 ， 比鸡 敏 感 ， 比猪 对 Ｚ 鸭 鸡
敏感 。
皮壳 中有芥子酶 ， 在榨油时， 包裹着芥子酶的浓 缩 体破 裂 ， 而 释放 出 芥子 酶 来 ， 子甙 令 芥子 从 芥 酶接解 ， 而促使芥子甙降解 ， 从 生成有毒的异硫
氰 酸 酯 （Ｔ 、 唑 烷 硫 酮 （ Ｚ 、 氰 酸 酯 ＩＣ） 嗯 Ｏ Ｔ） 硫 （Ｃ ） Ｓ Ｎ 和腈 类 （ Ｃ 。 即 使 在 菜 籽 加 工 中 ， Ｒ Ｎ） 由 于高 温 处 理使 酶 失 活 ， 在 作 为饲 料 时 ， 可 受 但 仍 动物肠 道 中微 生 物 的作 用 或其 它 十字 花科 青 绿
ｂ：
ＣＨ２ ＣＨＣＨＣＨ２ ＝ 。
是最高的， 达到 １ ｇｋ ， 当于鱼粉的一半 ， ｍ ／ｇ 相 是 大 豆 的 ｌ 。菜籽 粕 中蛋 白质 的含量虽 然不 如 Ｏ倍 豆粕 ， 但菜籽粕 的蛋 白质的质量优于大豆粕…。
菜 籽饼 粕 中的蛋 白质 氨基 酸齐 全 ， 比例合 理 ， 营
菜籽 粕 中的抗 营养 因子 主要 有 ： 代葡 萄糖 甙及 硫 其分解 产物 ， 植酸 、芥 酸 、单 宁 、芥子 碱 、粗 纤 维等 ， 中影 响 最 大 的是 硫 代 葡萄 糖 苷 ， 其 也就 是 通常所 说 的“ 毒素 ” 。油菜 籽饼 粕 中含有 ３～ ％ ８
（ 中的硫代葡萄糖甙、 粕） 植酸、 宁、 单 芥子碱、 皂
的总硫甙（ 硫葡萄糖甙 、异硫氰酸酯 ， 唑烷硫酮 。 素等毒物和抗营养因子存在 ， 以及 由于制油加工 腈类 的总和 ） ２ 硫 代葡萄 糖甙 结构特 点 时不脱 除皮壳 ， 造成菜籽饼 （ ） 粕 中粗纤维含量 偏高 ， 口性差等 ， 适 使其利用受到很大限制。对 硫代葡萄糖甙（ ｌ ｏ ｎｌ ｅ，Ｓ 又称芥子 Ｇｕ ｓ ｏ ｔ Ｇ ） ｅ ｉ ａｓ 菜 籽饼 的副作 用 ， 、 猪 鸡尤 为敏感 。 因此 ， 利用菜 甙 ， 主要 分 布 于油菜 的柔软 组 织 中 ， 菜 籽饼 粕 是 籽饼 饲 喂畜 禽前 必 须 进行 脱 毒 处 理 。现 对 菜籽 的主要抗 营养 因子。实 际上它本 身并无 毒性 ， 只 经芥子 酶 的催 化才 分解成 一 饼中的主要抗营养因子硫葡 萄糖甙及相应处理 是在 有水 的情 况下 ，
硫代葡萄糖苷的检测
硫代葡萄糖苷的测定一、硫代葡萄糖苷的结构硫代萄糖苷是一种含硫的阴离子亲水性植物次生代谢产物。
1970年,Marsh和Waser 等对硫代葡萄糖苷晶体的X射线分析证明: 所有的硫代葡萄糖苷都有一个核心结构是β-D-葡萄糖连接一个磺酸盐醛肟基团和一个来源于氨基酸的侧链。
根据侧链R的氨基酸来源不同，可以将硫代葡萄糖苷分为脂肪族硫代葡萄糖苷（侧链来源于蛋氨酸、丙氨酸、缬氨酸、亮氨酸和异亮氨酸），芳香族硫代葡萄糖苷（侧链来源于酪氨酸和苯丙氨酸）及吲哚族硫代葡萄糖苷（侧链来源于色氨酸）。
不同的侧链决定了水解产物的不同,抗癌活性也存在差别。
硫代葡萄糖苷的分类主要依据侧链R的不同。
二、硫代葡萄糖苷的性质硫苷本身是一类稳定的化合物，但在芥子酶或胃肠道中的细菌酶的催化作用下会发生降解并生成多种降解产物。
硫苷与芥子酶隔离共存于植物体内。
当植物的器官受损或对植物加工时他们相接触导致硫苷降解。
硫苷和它的降解产物都具有活跃的生物化学特性。
（1）在食品中赋予产品特殊的风味，从而影响食物的适口性。
如芥末辣根的辛辣味，雪菜味等。
（2）硫苷的降解产物如OZT及硫氰酸盐等，这些降解产物能抑制甲状腺素的合成和吸收，从而引起甲状腺肿大。
三、硫代葡萄糖苷在植物中的分布在天然植物中已发现120多种不同的硫代葡萄糖苷，它们存在于11个不同种属的双子叶被子植物中，最重要的是十字花科，所有的十字花科植物都能够合成硫代葡萄糖苷。
硫代葡萄糖苷存在于这些植物的根、茎、叶和种子中，但主要存在于种子中。
另外，许多非十字花科的双子叶被子植物中也同样含有一种或两种硫代葡萄糖苷。
硫代葡萄苷在一些十字花科植物中的含量大约占干重的1%，在一些植物种子中的含量达到10%。
硫代葡萄糖苷在芸苔属蔬菜中的含量一般是500～2 000 μg/g,西兰花、花椰菜、甘兰分别含有5～6种以上的硫代葡萄糖苷，其中包括吲哚族硫代葡萄糖苷和芳香族的硫代葡萄糖苷。
四、硫代葡萄糖苷的测定（一）、分光光度法一、原理：GS在蔬菜中内源酶----芥子酶的作用下水解产生葡萄糖，用3,5—二硝基水杨酸法测定所产生的葡萄糖量，计算出GS的含量。
我国2010年油菜品种硫代葡萄糖苷含量分析
我国2010年油菜品种硫代葡萄糖苷含量分析转向双低（低芥酸、低硫苷）油菜的改革,芥酸含量由40%-50%降低到1%左右,使食用油的品质发生根本的改变,使油菜硫苷含量由传统油菜中的100μmol/g饼－150μmol/g饼降低到双低油菜的30μmol/g饼以下,甚至更低,使原来不宜直接用作饲料的菜籽饼粕成为了能被动物直接食用的优质饲料,大大提高了菜籽饼粕资源的利用率。
标签：油菜；硫苷；双低1 实验内容本实验的主要研究内容为：对我国2010年油菜品种硫代葡萄糖苷含量分析。
为了精确的了解我国2010年品种油菜籽硫苷含量状况,本实验采用HPLC法对全国各主要产区的油菜品种硫苷进行了测定。
①主要设备和仪器：Anginent-1100高效液相色谱仪,高速离心器,旋涡混合器,十万分之一天平,超声波发生器,移液枪,培养箱,超纯水。
②主要试剂：色谱甲醇,丙烯基内标,甲酸米唑,超纯水,pH4醋酸钠缓冲液,硫酸酯酶,20%色谱乙腈。
③试样的制备：油菜籽取样按GB5491执行,如果样品中的水分及挥发物含量超过10%,应在45℃左右的条件下通风干燥。
参照国家标准GB/T11762-2006筛选干燥的油菜籽样品,使样品干净、均一,在微型粉碎机中粉碎,过0.42mm筛。
④称样：分别称取200mg（精确到1mg）粉碎的样品至A、B两支离心管中。
⑤硫苷提取：将A、B两支离心管置于75℃水浴1min,加入2mL沸甲醇溶液后,立即加入200μL 5mmol/L内标溶液至A管中,200μL 20mmol/L内标溶液至B 管中。
在旋涡混合器上旋涡混合（约5s）,在50℃条件下超声波5min,取出离心管,旋涡混合器上旋涡混合（约5s）,在5000g的相对离心力下离心3min,分别转移上清液至另外两支A＇、B＇10mL刻度试管中。
再加2mL沸甲醇溶液至原A、B管中,旋涡混合器上旋涡混合（约5s）,在50℃条件下超声波5min,再在旋涡混合器上旋涡混匀后,在5000g的相对离心力下离心3min,分别转移上清液至原A＇、B＇管中。
硫代葡萄糖苷的检测
硫代葡萄糖苷的测定一、硫代葡萄糖苷的结构硫代萄糖苷是一种含硫的阴离子亲水性植物次生代谢产物。
1970年,Marsh和Waser等对硫代葡萄糖苷晶体的X射线分析证明: 所有的硫代葡萄糖苷都有一个核心结构是β-D-葡萄糖连接一个磺酸盐醛肟基团和一个来源于氨基酸的侧链。
根据侧链R的氨基酸来源不同，可以将硫代葡萄糖苷分为脂肪族硫代葡萄糖苷（侧链来源于蛋氨酸、丙氨酸、缬氨酸、亮氨酸和异亮氨酸），芳香族硫代葡萄糖苷（侧链来源于酪氨酸和苯丙氨酸）及吲哚族硫代葡萄糖苷（侧链来源于色氨酸）。
不同的侧链决定了水解产物的不同,抗癌活性也存在差别。
硫代葡萄糖苷的分类主要依据侧链R的不同。
二、硫代葡萄糖苷的性质硫苷本身是一类稳定的化合物，但在芥子酶或胃肠道中的细菌酶的催化作用下会发生降解并生成多种降解产物。
硫苷与芥子酶隔离共存于植物体内。
当植物的器官受损或对植物加工时他们相接触导致硫苷降解。
硫苷和它的降解产物都具有活跃的生物化学特性。
（1）在食品中赋予产品特殊的风味，从而影响食物的适口性。
如芥末辣根的辛辣味，雪菜味等。
（2）硫苷的降解产物如OZT及硫氰酸盐等，这些降解产物能抑制甲状腺素的合成和吸收，从而引起甲状腺肿大。
三、硫代葡萄糖苷在植物中的分布在天然植物中已发现120多种不同的硫代葡萄糖苷，它们存在于11个不同种属的双子叶被子植物中，最重要的是十字花科，所有的十字花科植物都能够合成硫代葡萄糖苷。
硫代葡萄糖苷存在于这些植物的根、茎、叶和种子中，但主要存在于种子中。
另外，许多非十字花科的双子叶被子植物中也同样含有一种或两种硫代葡萄糖苷。
硫代葡萄苷在一些十字花科植物中的含量大约占干重的1%，在一些植物种子中的含量达到10%。
硫代葡萄糖苷在芸苔属蔬菜中的含量一般是500～2 000 μg/g,西兰花、花椰菜、甘兰分别含有5～6种以上的硫代葡萄糖苷，其中包括吲哚族硫代葡萄糖苷和芳香族的硫代葡萄糖苷。
四、硫代葡萄糖苷的测定（一）、分光光度法一、原理：GS在蔬菜中内源酶----芥子酶的作用下水解产生葡萄糖，用3,5—二硝基水杨酸法测定所产生的葡萄糖量，计算出GS的含量。
葡萄糖试纸法初测油菜籽硫代葡萄糖甙的研究
而试纸的长短对测定结果没有影响， 因此掌握好试纸法应用的各个环节， 可提高准确性。
关键词 ： 油菜籽 ； 硫代 葡萄糖 甙 ； 分光 光度 法 ； 纸法 试 中图分类号 ：５５４ Ｓ６ ． 文献标识码 ： Ａ 文章 编号 ：０４９６ （０６ ｆ￣０８０ １０－９７ ２０ ｝２００－２
Ｓ ｕ ｙｏ ｈ ｉｓ ｅ ｓ ｒｎ ｉｇｕ ｏ ｉｅ ｏ Ｒａ ｅｂ ｕ ｏ ｅＴ ｓ ａ ｅ ｅｈ ｄ ｔ ｄ ｎ ｔ ｅＦ ｒ ｔ Ｍ ａ ｕ ｉｒＭ ｔ ｏ ｄ
油菜品质育种 中， 硫代葡萄糖甙（ 简称硫甙 ） 的含量是油菜品质 的重要指标之一 ， 在双低育 种
中初世代要获得大量 的低硫 甙单株 ， 必须依赖 于 分析手段 ， 葡萄糖试纸法是一种 简单 、 快速、 定性
和葡萄糖试纸法的测定 ， 固定 １ 人重复进行测定 ， 对两种分析方法的结果进行比较 。 葡萄糖试纸采用进 口的葡萄糖试纸 ， 每份样 品随机取 １ 粒左右种子放入指型试管 中， Ｏ 同时加 入对照 ， 对照为高硫甙定量样品。加入蒸馏水 ， 用 玻璃棒捣碎 ， 放置 ｌ＿ １ｒｎ 将葡 萄糖试纸剪成 ｏ＿５ ｌ ， Ｉ ｉ ０５ｚ ＿ ．ｃ ．ｃ ＿ １５ｍ长的条 ， ｎ 用镊 子夹住试纸末端放入 样品中浸湿抽出 ， ２ ｉ后与葡萄糖试纸盒上 的 待 ｍｎ 颜色对 比， 比较显色结果 ， 按规定记载显色标准。
ＡＮ Ｆ ｎ －ｕ － Ｊｎ－ ＡＮ Ｇ ｏｙｎ ｇ ｙ ｎ Ｕ ａ Ｔ Ｇ ｕ －ｏ ｇ ｏ
（ ｓｔｅ ｆ ｐ ｎ ａｅＱｎｈｉ ｃ ｅ ｙ ｆ ｇｃｌｒ ａｄ ｏ ｓｙＸｎ ｇ ｉ ｈ １ １－ｈ ａ） Ｉ ｔ ｔｏ ＳｒｇＲ ｐ－ｉ ａ Ａ ａ ｍ ｒｕｕ ｒ ｔ －ｉ ｎ ｎ ￣８０ ６Ｃ ｉ ｎ ｉ ｉ ｕ ｇ ｄ ｏ Ａ ｉ ｔｅ ｎ Ｆ ｅ ｒ ｉ Ｑｇ ０ ｎ
油菜籽和油菜饼粕中硫代葡萄糖甙的定量测定研究进展
６ ｉ， ５ｒ ｎ比色 皿 在 ４ ０ ｎ ０ｍ ｎ 用 ｌ ｌ ｌ ５ ｌ 长 下 测 定 吸光 光 度 值 。 ｎ波
在标准 曲线 上求 出异 硫 氰 酸盐 和 恶 唑烷 硫 酮含 量 之 和 。标
准 曲线 已由湖北 省 油 料 所 收 集 ３ ０余 种 油 菜 品种 ， 经 典 气 用 相色谱 一 外吸 收法 测定 后绘 制 出 ＿ 。 紫 ４ ｊ
１２ 硫 代 葡 萄 ຫໍສະໝຸດ 甙 总 量 的 测 定 ．因硫 代葡 萄糖 甙在 各 种 水解 条件 下 都 能 定 量 的 释 放 出 葡萄糖 和硫酸 根 ． 故测 定 降解 产物 葡萄糖 或 硫酸 根是 一 种 可
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粮食 与饲 料 工业／２０ 芷第 ８ ０２ 期
ＣＲＡ Ｅ Ｅ Ｌ＆Ｆ Ｅ Ｄ Ｓ Ｒ ２０ ， ｏ８ Ｅ Ｄ Ｉ Ｕ Ｔ Ｙ／ ０２ Ｎ ． Ｎ
油 菜 籽 和 油 菜 饼 粕 中 硫 代 葡 萄 糖 甙 的
定 量 测 定 研 究
４０２ ） ３０ ３
５ 油 菜籽 置于 葡萄 糖试 纸 上 ， 子 击 碎 ， 几 滴 蒸 馏 水 ， 颗 锤 滴
１ １ 半 定 量 速 测 方 法 ．
１ １１ 葡 萄 糖 试 纸 法 ．．
利 用油 菜籽 自身的酶 解 反应 释 放 出 葡 萄糖 的 原 理 ， ３ 将
～
另外 ， 重量 法 的 基 础 上 曾提 出 四 苯 硼 酸 钠 电位 滴 定 在 法 ． ： 氧 瓶 燃 烧 或 氧 弹 燃 烧 处 理 样 品 ， Ｎ Ｏ ～Ｈ ｏ 用 ｊ 以 ａＨ ｚ ２为 吸收 液 ， 硫代 葡萄 糖甙 分解 后 ， 使 全部 形 成 ｓ 一形式 。样 品 制备 液 在 ｐ —４ Ｃ０ 酸性 条件 下 ， 聚 乙二醇 （Ｅ ） 在 Ｈ ２ Ｈ １４ 在 ＰＧ存 下 ， 过量 醋酸 钡 ， 出 ＢＳ ４ 剩余 Ｂ２ 加 析 ａＯ ， ａ 与 Ｐ Ｇ和四苯 硼 酸 Ｅ 钠 （ ａＰ ） 成 ２ Ｐ － ａ ｎ Ｅ ＮＴ Ｂ 形 Ｔ Ｂ Ｂ ・Ｐ Ｇ离 子 综合 物 。以硫 化 银 晶 体 膜 电极 为指 示 电极 ， １ ２７型 甘 汞 为参 比 ， 四苯 硼 酸 钠滴 定 用
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法Ｌ ］如 葡萄 糖试 纸 法 、 酸钡 重 量法 、 子 吸 ２ ， 硫 原 收法， 由于受 菜 籽 粕 中葡 萄 糖 、 酸 根 的影 响 ， 硫
测 定 结果 有 一定 的误 差 。 国 内外认 为准确 度 较
硫 甙 含量 ｃ（ ｍ。／ ） １ｇ 一
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陕
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农
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科
学
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结 果 与分 析
３ １ 方 法 准确 度 ．
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分 光光度 法测定 油菜 籽 中硫代 葡萄糖 甙
刘 绚 霞 杨 ， 莉。
（． １ 西北农林科技 大学 农学院 ， 陕西 杨凌
提 要
７２ ０ ；． １ １
析。
纤 维 素钠 空 白溶 液 作参 比溶 液 ， 其 消光 度 。 测 ２ ３ 标 准 曲线 的制 作 ．
准 确 称 取 １０ ０ ｍｇ 硫 甙 含 量 分 别 为
１ ￣ ｌｇ ２ ￣ ｌｇ ３ ￣ ｌｇ ４ ￣ ｌｇ ０ ｍｏ／ 、 ０ ｍｏ／ ０ ｍｏ／ 、 ０ ｍｏ／ 、
５ ￣ ｌｇ左 右 的 标 准 油 菜 籽 （ 相 色 谱 法 测 ０ ｍｏ／ 液
出 冷 却 后 定 容 至 １ ｍｌ 过 滤 。取 滤 液 ２ ０ ， ｍｌ于
１ ｍｌ比 色 管 ， ４ ． ５ 的 羧 甲 基 纤 维 素 ０ 加 ｍｌ０ １
钠 ， 匀后 再 加 ２ ｍ ｍｏ／ 的 氯 化 钯 显 色溶 摇 ｍｌ ｌ１ ８
液， ２ ±３ 在 ２ ℃放 置 ２ ， 微 机 化 分 光 光 度 计 ｈ在 ５０ ４ ｍｍ 处 用 ｌｍ 比色皿 ， ｃ 以氯化 钯 —— 羧 甲基
高的 气相 色谱 和 液相 色谱 法 ， 器 昂贵 ， 易 推 仪 不 广， 目前 最 先 进 的近 红 外 测 定 法 ， 器 昂贵 ， 仪 样 品用量 较大 ， 在育 种单 位 不 易推 广 。 本项 研 究 而 采 用分 光光 度 计 的氯 化钯 比色 法快 速 、 准确 、 灵 敏 度 高 、 本 低 ， 合 大 量 育 种 低 世 代 材 料 分 成 适
我 国油 菜 常 年 种 植 面积 约 ７ ０万 ｈ ， ０ ｍ。 约
占我 国油料 作 物面 积 的 １ ３ 总 产约 １０ ０万 ｔ ／， ０ ，
２ １ 试 剂与 仪 器 ． ２ １１ 试 剂 ． ．
２ １２ 仪 器 ．． 恒 温水 浴 锅 。
８ ｍｍｏ／ 氯 化 钯 ； ． ５ 羧 甲 ｌＬ ０ １
微机 化分 光 光度 计 ， 四孔 或六 孔
油菜 种植 面 积 和总 产 均 居世 界 首 位 ［ 。是 我 国 １ ］ 的 主要 食 用油原 料 。硫 代 葡 萄糖 甙 （ 简称 硫 甙 ）
是 油 菜 饼 粕 中不 可 忽 视 的化 合 物 ， 菜 油 和饼 对
基 纤 维素 钠 溶液 。其 它试剂 均 为分 析 纯 。
粕 的 品质起 着极 为 重要 的 作 用 。 芥 酸 、 低 低硫 甙 油菜 的选 育 是 目前 品质 育 种 的 主攻 方 向 。硫 甙 含量 的测定 是育 种 、 传 、 品 收购 和加 工工 作 遗 商
者 所 面 临 的 研 究 课 题 。但 已往 报 道 的 测 定 方
２ ２ 测定 步 骤 ． 准确 称 取 经研 碎 的 油菜 籽 或 菜 饼 １ ０ ， ０ ｍｇ 移 入 １ ｍｌ 塞 刻 度 试 管 中 ， 水 浴 中 干 蒸 ０ 具 沸
方法 Ｂ
Ｙ２ Ｙ３
， ． ． ．
（ｍｏ／ ） ／ ｌｇ ￣
差数 的离差 ｄ －－ ｎ－ ｎ
一 一 一
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。。
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Ｐ＝ ０ ９ ． ５时 Ｆ（＿ 一 ９ ２ ， 明 两 种 方 法 无 显 ａ） ． ８ 表 ３
０
１ ２ ３ ４ ５ ０ ０ ０ ０ ０
图 １ 硫甙标准曲线
表 １
硫甙含 量
￣－ － ａ ． Ａ
ＸＩ Ｘ２ Ｘ３ ＹＩ
两种方法测 定硫甙结果
差数 ｄ ＝Ｘｎ ｎ ｎ —Ｙ
１ 方 法 原 理
加入 分 散 剂 羧 甲基 纤 维 素 钠 溶 液 ， 甙 与 硫 氯 化 钯反 应生 成有 色 硫 甙 钯溶 胶 清液 。硫 甙 含 量越高， 溶液 颜 色越 深 。 因此 硫 甙含 量 可通 过 比
色 定量 。
定 ） １ ｍｌ 塞 刻 度 试 管 中 ， 于 ０ 具 同样 品测 定 一 样
ｌ ３
性 差 异Ⅲ ， 而证 明本 方 法是 可 靠 的 。 从
蒿
Ｏ１／ ．
／／ ／
测定 ， 复 ３次 ， 两 个配 对样 本进 行 Ｆ值 测 验 重 对
（ １ ， １ １ ８ ， ２ ６ ７ ， ３ １ ３ ， 小 于 表 ）Ｆ — ． ５ Ｆ ： ． １ Ｆ ： ． ９ 均
进行 下 去 ， 以硫 甙含 量 为 横 座标 ， 消光 度 为 纵 座 标作 标 准 曲线 （ １ 。 图 ）
２４ 硫甙含量的计算 ． 据 硫 甙 标 准 曲线 ： Ａ＝ ０ ０ ９ ＋ ０ ０ ４ ８ ． ５ ６ ． ０ ２Ｃ
得：
２ 实验 与方 法
收 稿 日期 ：ｏ ２ ０ －０ ２ｏ— ３ ２
采用分 光光度 计的 氯化钯 比 色法测油 菜籽硫代 葡萄糖 甙消光度 ， 准曲 线 Ａ一 标
油 菜 籽 ； 化 钯 ； 代 葡 萄 糖 甙 ； 机 化 分 光 光 度 法 氯 硫 微
０ ０ ４ ８ ０ ０ ９ 。该 法 适 合 大量 育 种 低 世 代 材 料 分 析 。 ． ０ ２Ｃ＋ ． ５ ６ 关键词