实验室常用灭菌方法
实验室对培养基灭菌的常用方法
实验室对培养基灭菌的常用方法常用的灭菌方法主要是湿热灭菌和过滤除菌。
1、湿热灭菌：
蒸汽在冷凝时释放出大量潜能，并且蒸汽具有强大穿透力，蒸汽的湿热破坏菌体蛋白质和核酸的化学键，使酶失活，微生物因代谢障碍而死亡。
湿热灭菌的效果，取决于致死温度和致死时间。
致死温度是杀灭微生物的极限温度。
致死时间是在致死温度下杀灭全部微生物所需时间。
高压蒸汽灭菌适合于耐高温培养基、接种器械和蒸馏水的灭菌。
分装后应立即灭菌，应在当天内完成灭菌工作，不可过夜。
消毒时间不宜过长，也不能超过规定的压力范围，否则有机物质就会在高温下分解，失去营养作用，也会使培养基变质、变色，甚至难以凝固。
2、过滤除菌：
一些抗生素及有机物等，遇热容易分解，不能与培养基一起进行高温灭菌，而要使用细菌过滤器滤去其中的杂菌，例如含抗生素的沙氏葡萄糖琼脂培养基。
过滤后的溶液要立即加入培养基中，若为液体培养基，可在冷却至30℃时加入；若为固体培养基，必须在凝固之前(50-60℃)加入，振荡使溶液与其他成分混合均匀。
最齐全的食品实验室常用灭菌方法汇总
最齐全的食品实验室常用灭菌方法汇总消毒灭菌方法目前，常用的消毒灭菌方法多采用物理方法(如，干热灭菌法、湿热灭菌法、过滤除菌法、射线杀菌法等)和化学方法(消毒剂、抗生素)两大类。
1、干热灭菌法是利用恒温干燥箱内120℃-150℃的高热，并保持90-120分钟，杀死细菌和芽孢，达到灭菌目的的一种方法。
主要适用于不便在压力蒸汽灭菌器中进行灭菌，且不易被高温损坏的玻璃器皿、金属器械以及不能和蒸汽接触的物品的灭菌。
用此方法灭菌的物品干燥，易于贮存。
酒精灯火焰烧灼灭菌法也是属于干热灭菌的方法之一，在进行动物细胞体外培养工作时，常须利用工作台面上的酒精灯火焰对金属器具及玻璃器皿口缘进行补充灭菌。
2、湿热灭菌法压力蒸汽湿热灭菌法是目前最常用的一种灭菌方法。
它利用高压蒸汽以及在蒸汽环境中存在的潜热作用和良好的穿透力，使菌体蛋白质凝固变性而使微生物死亡。
适合于布类工作衣、各种器皿、金属器械、胶塞、蒸馏水、棉塞、纸和某些培养液的灭菌。
高压蒸汽灭菌器的蒸汽压力一般调整为1.0-1.1 kg/cm2，维持20-30min即可达到灭菌效果。
3、射线灭菌法利用紫外线灯进行照射灭菌的方法。
紫外线是一种低能量的电磁辐射，可以杀灭多种微生物。
紫外线的作用机制是通过对微生物的核酸及蛋白质等的破坏作用而使其灭活。
适合于实验室空气、地面、操作台面灭菌。
灭菌时间为30min。
用紫外线杀菌时应注意，不能边照射边进行实验操作，因为紫外线不仅对人体皮肤有伤害，而且对培养物及一些试剂等也会产生不良影响。
4、过滤除菌法是将液体或气体通过有微孔的滤膜过滤，使大于滤膜孔径的细菌等微生物颗粒阻留，从而达到除菌的方法。
过滤除菌法大多用于遇热易发生分解、变性而失效的试剂、酶液、血清、培养液等。
目前，常用微孔滤膜金属滤器或塑料滤器正压过滤除菌，或用玻璃细菌滤器、滤球负压过滤除菌。
滤膜孔径应在0.22-0.45μm范围内或用更小的细菌滤膜，溶液通过滤膜后，细菌和孢子等因大于滤膜孔径而被阻，并利用滤膜的吸附作用，阻制小于滤膜孔径的细菌透过。
微生物消杀方法
微生物消杀方法1、温度利用温度进行灭菌、消毒或防腐，是最常用而又方便有效的方法。
高温可使微生物细胞内的蛋白质和酶类发生变性而失活，从而起灭菌作用，低温通常起抑菌作用。
１）干热灭菌法:a.灼烧灭菌法：利用火焰直接把微生物烧死。
此法彻底可靠，灭菌迅速，但易焚毁物品，所以使用范围有限，只适合于接种针、环、试管口及不能用的污染物品或实验动物的尸体等的灭菌。
b.干热空气灭菌法：这是实验室中常用的一种方法，即把待灭菌的物品均匀地放入烘箱中，升温至160°C，恒温1小时即可。
此法适用于玻璃皿、金属用具等的灭菌。
２）湿热灭菌法:在同样的温度下，湿热灭菌的效果比干热灭菌好，这是因为一方面细胞内蛋白质含水量高，容易变性。
另一方面高温水蒸汽对蛋白质有高度的穿透力，从而加速蛋白质变性而迅速死亡。
a.巴氏消毒法：有些食物会因高温破坏营养成分或影响质量，如牛奶、酱油、啤酒等，所以只能用较低的温度来杀死其中的病原微生物，这样既保持食物的营养和风味，又进行了消毒，保证了食品卫生。
该法一般在62°C，30分钟既可达到消毒目的。
此法为法国微生物学家巴斯德首创，故名为巴氏消毒法。
b.煮沸消毒法：直接将要消毒的物品放入清水中，煮沸15分钟，即可杀死细菌的全部营养和部分芽孢。
若在清水中加入1%碳酸钠或2%的石炭酸，则效果更好。
此法适用于注射器、毛巾及解剖用具的消毒。
c.间歇灭菌法：上述两种方法在常压下，只能起到消毒作用，而很难做到完全无菌。
若采用间歇灭菌的方法，就能杀灭物品中所有的微生物。
具体做法是：将待灭菌的物品加热至100°C，15~30分钟，杀死其中的营养体。
然后冷却，放入37°C恒温箱中过夜，让残留的芽孢萌发成营养体。
第2天再重复上述步骤，三次左右，就可达到灭菌的目的。
此法不需加压灭菌锅，适于推广，但操作麻烦，所需时间长。
d. 加压蒸汽灭菌法：这是发酵工业、医疗保健、食品检测和微生物学实验室中最常用的一种灭菌方法。
实验室的灭菌方法
实验室的灭菌方法
实验室常用的灭菌方法主要有以下几种：
1. 热灭菌：使用高温蒸汽或高温烘箱进行灭菌，可有效消除常见的细菌、病毒和真菌。
热灭菌常用于灭菌培养皿、培养基、试剂和玻璃器皿等。
2. 化学灭菌：使用化学消毒剂进行灭菌，常见的消毒剂包括酒精、漂白粉、过氧化氢等。
化学灭菌适用于一些敏感材料，如塑料器皿、塑料管道、橡胶塞和一次性注射器等。
3. 紫外线灭菌：利用紫外线的辐射杀死细菌和病毒，常用于空气和表面的灭菌。
然而紫外线灭菌对于有障碍物遮挡或遮蔽的区域效果有限，且需要较长时间的照射。
4. 过滤灭菌：通过微孔滤膜将细菌和病毒过滤掉。
常用的滤膜材料有聚酯、聚碳酸酯、聚醚砜等。
过滤灭菌适用于渗透性好的溶液、生物液和气体。
5. 辐射灭菌：使用离子化辐射、γ射线或X射线进行灭菌。
辐射灭菌适用于灭菌一次性物品、一次性注射器和药品等。
需要根据实验需要和具体材料的特性选择合适的灭菌方法。
同时在进行灭菌操作时，要遵守操作规范和消毒程序，确保灭菌效果和安全性。
实验室常用灭菌方法完整版
实验室常用灭菌方法 HEN system office room 【HEN16H-HENS2AHENS8Q8-HENH1688】实验室常用灭菌方法1.高压蒸汽灭菌为湿热灭菌方法的一种。
是微生物培养中最重要的灭菌方法。
这种灭菌方法是基于水在煮沸时所形成的蒸汽不能扩散到外面去，而聚集在密封的容器中，在密闭的情况下，随着水的煮沸，蒸汽压力升高，温度也相应增高。
(PV=nRT)高压蒸汽是最有效的灭菌法，能迅速地达到完全彻底灭菌。
一般在15磅/英寸2压力下（℃），15～30分钟，所有微生物包括芽孢在内都可杀死。
它适用于对一般培养基和玻璃器皿的灭菌。
进行高压蒸汽灭菌的容器是高压蒸汽灭菌锅。
高压蒸汽灭菌锅是一个能耐压又可以密闭的金属锅，有立式与卧式两种。
可以用电热、煤气、蒸汽等。
锅上装有压力表，有的还装有温度计，能及时了解锅内压力及温度。
锅上还设有排气口，其作用是在密闭之前，利用蒸汽将锅内的冷空气排净，另外还装有安全活门，如果压力超过一定限度，活门即可自动打开，放出过多的蒸汽。
2.干热灭菌微生物培养中常用的干热灭菌是指热空气灭菌。
一般在电烘箱中进行。
干热灭菌所需温度较湿热灭菌高，时间也较湿热灭菌长。
这是因为蛋白质在干燥无水的情况下不容易凝固。
一般须在160℃左右保持恒温3～4小时，方能达到灭菌的目的。
干热灭菌适用于空玻璃器皿的灭菌，凡带有橡胶的物品和培养基，都不能进行干热灭菌。
3.间歇灭菌各种微生物的营养体在100℃温度下半小时即可被杀死。
而其芽孢和孢子在这种条件下却不会失去生活力。
间歇灭菌就是根据这一原理进行的。
间歇灭菌的方法是用100℃、30分钟杀死培养基内杂菌的营养体，然后将这种含有芽孢和孢子的培养基在温箱内或室温下放置24小时，使芽孢和孢子萌发成为营养体。
这时再以100℃处理半小时，再放置24小时。
如此连续灭菌3次，即可达到完全灭菌的目的。
间歇灭菌通常在流动蒸汽的灭菌锅中进行，也可用普通铝锅代替。
这种灭菌方法多用于明胶、牛乳等物质的灭菌，这类物质在100℃以上的温度下处理较长时间，会被破坏，而用间歇灭菌法就既起到了杀菌作用，又使被处理的物质免遭破坏。
实验室13种常用消毒灭菌的方法汇总
实验室13种常用消毒灭菌的方法汇总1、热力消毒灭菌高温能使微生物的蛋白质和酶变性或凝固（结构改变导致功能丧失），新陈代谢受到障碍而死亡，从而达到消毒与灭菌的目的。
在消毒中，热可分为湿热与干热两大类。
2、干热消毒灭菌干热是指相对湿度在20％以下的高热。
干热消毒灭菌是由空气导热，传热效果较慢。
一般繁殖体在干热80－100℃中经1小时可以杀死，芽胞需160－170℃经2小时方可杀死。
燃烧法：是一种简单、迅速、彻底的灭菌方法，因对物品的破坏性大，故应用范围有限。
烧灼法：一些耐高温的器械（金属、搪瓷类），在急用或无条件用其他方法消毒时可采用此法。
将器械放在火焰上烧灼1－2分钟。
若为搪瓷容器，可倒少量95％乙醇，慢慢转动容器，使乙醇分布均匀，点火燃烧至熄灭约1－2分钟。
采集作细菌培养的标本时，在留取标本前后（即启盖后，闭盖前）都应将试管（瓶）口和盖子置于火焰上烧灼，来回旋转2－3次。
燃烧时要注意安全，须远离易燃易爆物品，如氧气、汽油、乙醚等。
燃烧过程不得添加乙醇，以免引起火焰上窜而致灼伤或火灾。
锐利刀剪为保护刀锋，不宜用燃烧灭菌法。
焚烧某些特殊感染，如破伤风、气性坏疽、绿脓杆菌感染的敷料，以及其它已污染且无保留价值的物品，如污纸、垃圾等，应放入焚烧炉内焚烧，使之炭化。
3、电热培养箱利用培养箱的热空气消毒灭菌。
培养箱通电加热后的空气在一定空间不断对流，产生均一效应的热空气直接穿透物体。
一般繁殖体在干热80－100℃中经1小时可以杀死，芽胞、病毒需160－170℃经2小时方可杀死。
热空气消毒灭菌法适用于玻璃器皿、瓷器以及明胶海棉、液体石腊、各种粉剂等。
灭菌后待箱内温度降至50－40℃以下才能开启柜门，以防炸裂。
4、微波消毒微波是一种高频电磁波，其杀菌的作用原理，一为热效应，所及之处产生分子内部剧烈运动，使物体里外湿度迅速升高；一为综合效应，诸如化学效应、电磁共振效应和场致力效应。
目前已广泛应用于食品、药品的消毒，用微波灭菌手术器械包、微生物实验室用品等亦有报告。
灭菌方法
灭菌方法灭菌是一种常见的消毒方法，用于杀灭病菌、病毒和其他微生物，以保证环境的卫生和人体的健康。
在日常生活中，灭菌方法被广泛应用于医疗卫生、食品加工、实验室等领域。
下面将为大家介绍几种常用的灭菌方法。
一、物理灭菌物理灭菌是通过热力、辐射或过滤等物理手段杀灭病菌的方法。
其中，常用的物理灭菌方法包括高温灭菌、紫外线灭菌和过滤灭菌。
高温灭菌是最常见的物理灭菌方法之一，其原理是利用高温破坏病菌的细胞结构，进而杀死病菌。
常见的高温灭菌设备包括高压蒸汽灭菌器、干热灭菌箱等。
在医疗卫生领域，高压蒸汽灭菌器被广泛应用于灭菌手术器械和医疗用品。
紫外线灭菌利用紫外线的辐射杀灭病菌，其原理是紫外线破坏病菌的核酸和蛋白质结构。
紫外线灭菌常用于空气、水和表面的消毒，如医院手术室、实验室等空间的空气消毒。
过滤灭菌是通过过滤器将病菌截留下来，从而达到杀灭病菌的目的。
常见的过滤灭菌方法包括微孔过滤和纤维过滤。
微孔过滤主要适用于液体的灭菌，可以有效去除大部分细菌和病毒。
纤维过滤主要适用于空气的灭菌，可以将空气中的微生物截留下来。
二、化学灭菌化学灭菌是利用化学物质对病菌进行杀灭的方法。
化学灭菌常用于表面的消毒和器械的消毒。
常见的化学灭菌方法包括酒精消毒、氧化剂消毒和酶消毒。
酒精消毒是一种常见而简便的化学灭菌方法，常用的酒精消毒剂包括乙醇和异丙醇。
酒精消毒具有广谱杀菌作用，对大部分病菌具有良好的灭菌效果。
然而，酒精对芽孢和病毒的杀灭作用较差，因此不能替代高温灭菌。
氧化剂消毒利用氧化剂对病菌进行氧化还原反应，破坏病菌的细胞结构。
常用的氧化剂消毒剂包括过氧化氢、高锰酸钾等。
氧化剂消毒具有广谱杀菌作用，可以有效杀灭病菌。
酶消毒是一种较为温和的化学灭菌方法，其原理是利用酶对病菌的细胞壁进行降解。
酶消毒常用于器械和医疗用品的清洗和消毒，能够有效去除附着在表面的病菌。
三、生物灭菌生物灭菌是利用某些微生物对病菌进行杀灭的方法。
常见的生物灭菌方法包括发酵灭菌和放线菌灭菌。
灭菌方法及适用范围
灭菌方法及适用范围灭菌是指通过物理或化学手段杀死或去除微生物，以达到消除或降低微生物的数量和活性的目的。
灭菌方法可以分为物理灭菌和化学灭菌两大类。
物理灭菌方法是通过物理手段杀灭微生物，常见的物理灭菌方法有高压灭菌、高温灭菌、过滤灭菌、辐射灭菌等。
高压灭菌是指在一定温度下，将物体置于高压环境中进行灭菌的过程。
常用的高压灭菌方法有压力蒸汽灭菌和压力煮灭菌。
压力蒸汽灭菌多用于灭菌实验室器皿、制药设备等，适用范围广泛。
压力煮灭菌适用于一些高温不稳定的物品。
高温灭菌是指将物体在一定温度下暴露一段时间，以达到杀灭微生物的目的。
常见的高温灭菌方法有干热灭菌和湿热灭菌。
干热灭菌通常在160-180摄氏度下，使物品暴露一段时间进行灭菌，适用于一些烘烤不易破坏的物品。
湿热灭菌通常通过蒸汽灭菌器进行，适用于实验室器皿、医疗器械等。
过滤灭菌是将物体通过特定孔径的过滤器，将微生物过滤掉以达到灭菌目的。
过滤灭菌适用于一些热敏感的溶液、药液等。
辐射灭菌主要包括紫外线辐射灭菌和γ射线辐射灭菌。
紫外线辐射灭菌适用于空气和物体表面的灭菌，通常用于实验室的空气灭菌和工业生产中的水处理。
γ射线辐射灭菌适用于散装药物、一次性医疗器械的灭菌。
化学灭菌是通过化学药品的使用杀灭微生物。
常见的化学灭菌剂有酒精、过氧化氢、氯化物等。
化学灭菌适用范围广泛，可以用于消毒液、器械、表面等。
适用范围上，物理灭菌方法适用于一些高温稳定的物品，如实验器皿、制药设备等。
化学灭菌方法适用于一些热敏感的物品，如消毒液、医用器械等。
不同的灭菌方法在不同的场合下有其独特的优势和适用范围。
总之，灭菌是消除或降低微生物数量和活性的重要手段，物理灭菌和化学灭菌是常见的灭菌方法。
在实践中，我们根据需要选择合适的灭菌方法来保证物品的无菌状态，从而保护人们的健康。
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实验室常用灭菌方法
1.高压蒸汽灭菌
为湿热灭菌方法的一种。
是微生物培养中最重要的灭菌方法。
这种灭菌方法是基于水在煮沸时所形成的蒸汽不能扩散到外面去，而聚集在密封的容器中，在密闭的情况下，随着水的煮沸，蒸汽压力升高，温度也相应增高。
(PV=nRT)
高压蒸汽是最有效的灭菌法，能迅速地达到完全彻底灭菌。
一般在15磅/
英寸2压力下（121.6℃），15～30分钟，所有微生物包括芽孢在内都可杀死。
它适用于对一般培养基和玻璃器皿的灭菌。
进行高压蒸汽灭菌的容器是高压蒸汽灭菌锅。
高压蒸汽灭菌锅是一个能耐压又可以密闭的金属锅，有立式与卧式两种。
可以用电热、煤气、蒸汽等。
锅上装有压力表，有的还装有温度计，能及时了解锅内压力及温度。
锅上还设有排气口，其作用是在密闭之前，利用蒸汽将锅内的冷空气排净，另外还装有安全活门，如果压力超过一定限度，活门即可自动打开，放出过多的蒸汽。
2.干热灭菌
微生物培养中常用的干热灭菌是指热空气灭菌。
一般在电烘箱中进行。
干热灭菌所需温度较湿热灭菌高，时间也较湿热灭菌长。
这是因为蛋白质在干燥无水的情况下不容易凝固。
一般须在160℃左右保持恒温3～4小时，方能达到灭菌的目的。
干热灭菌适用于空玻璃器皿的灭菌，凡带有橡胶的物品和培养基，都不能进行干热灭菌。
3.间歇灭菌
各种微生物的营养体在100℃温度下半小时即可被杀死。
而其芽孢和孢子在这种条件下却不会失去生活力。
间歇灭菌就是根据这一原理进行的。
间歇灭菌的方法是用100℃、30分钟杀死培养基内杂菌的营养体，然后将这种含有芽孢和孢子的培养基在温箱内或室温下放置24小时，使芽孢和孢子萌发成为营养体。
这时再以100℃处理半小时，再放置24小时。
如此连续灭菌3次，即可达到完全灭菌的目的。
间歇灭菌通常在流动蒸汽的灭菌锅中进行，也可用普通铝锅代替。
这种灭菌方法多用于明胶、牛乳等物质的灭菌，这类物质在100℃以上的温度下处理较长时间，会被破坏，而用间歇灭菌法就既起到了杀菌作用，又使被处理的物质免遭破坏。
4.紫外线灭菌
紫外线杀菌力最强的是波长2650～2660Å(10-1nm)的部分。
无菌室缓冲间和接种箱常用紫外线灯作空气灭菌。
无菌室和缓冲间的照射时间为20～50分钟（视房间大小而定），接种箱照射10～15分钟即可。
为了加强紫外线灭菌的效果，在照射前，可在无菌室、缓冲间或接种箱内喷洒5%石炭酸，以使空气中附着有微生物的尘埃降落，同时也可以杀死一部分微生物。
无菌室的工作台的台面和椅子，可用2～3%的来苏儿擦洗。
然后再照射紫外线。
由于紫外线对人体有伤害作用，所以人不要直视正在照射的紫外线灯，也不要在照射情况下进行工作。
灭菌后，为了检验紫外线的灭菌效果，可以在无菌室、缓冲间或接种箱内放一套盛有培养基的培养皿，将皿盖打开5～10分钟，盖好后，放入温箱中培养。
如果只有一、二个菌落，可认为灭菌效果良好。
如杂菌丛生。
则需延长照射时间或同时加强其它灭菌措施。